Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-28Bitstream added on 2014-06-13T18:39:02Z : No. of bitstreams: 1 rola_ld_me_jabo.pdf: 1100112 bytes, checksum: e5705e1710fde07da43891e94919e554 (MD5) / Assim como outras espécies brasileiras de vida livre, os cervídeos têm sofrido pressões sobre seu habitat, o que provoca segregação entre populações, diminuição de troca gênica e de diversidade genética, aumento da endogamia, e um maior risco de extinção. A produção in vitro de embriões (PIVE) tem ganhado destaque como uma ferramenta a ser utilizada nos programas de conservação de espécies selvagens in situ e ex situ. Entre as etapas da PIVE, a maturação in vitro (MIV) assume grande importância, pois o seu sucesso pode garantir a melhora nas taxas de produção de embriões. Assim, os objetivos do presente trabalho foram: avaliar viabilidade do protocolo de estimulação ovariana para a aspiração folicular, a eficiência da laparoscopia para a aspiração folicular, e a maturação nuclear e a distribuição mitocondrial em oócitos maturados in vitro para a espécie M. gouazoubira. Para isso, foram utilizadas cinco fêmeas, submetidas a repetidas estimulações ovarianas com intervalos de 30 dias. Os oócitos aspirados foram classificados morfologicamente de acordo com a qualidade, submetidos à maturação in vitro por 24 horas e, posteriormente, corados para a avaliação da distribuição mitocondrial (Mitotracker Red CMXRos); e do estágio de maturação nuclear (Hoescht 33342). Foram realizados 14 procedimentos cirúrgicos para a colheita de 94 oócitos de fêmeas superestimuladas. A média de folículos visualizados, folículos aspirados e oócitos colhidos por cirurgia foi, respectivamente, de 17,07±9,12, 13,54±6,64 e 7,15±3,72. Dos oócitos maturados in vitro, 64,52% alcançaram a MII e a classificação da distribuição mitocondrial não foi conclusiva. Houve ativação espontânea por partenogênese em 16,13% dos oócitos. Ainda, foi realizada avaliação de... / The cervids, as well as other free-living brazilian species, have suffered pressures on their habitat, causing segregation between populations and reduced genetic exchange, which may decrease the genetic diversity and generate increased inbreeding and extinction risk. In vitro embryo production (IVEP) has been highlighted as a tool to be used in wild species conservation programs in in situ and ex situ. The maturation process has a great importance among the steps of IVEP, and its success can ensure an improvement in the rate of production of embryos. The objectives of this study were to assess feasibility of the protocol of ovarian stimulation for ovum pick, the efficiency of laparoscopy for oocyte retrieval, and the nuclear maturation and mitochondrial distribution in oocytes matured in vitro for the species M. gouazoubira. Thus, we used five females, submitted to repeated stimulation with intervals of 30 days. After the visualization of the ovaries, the visible follicles were counted and punctured by laparoscopy on day eight (D8). The aspirated oocytes were classified morphologically according the quality, subjected to in vitro maturation for 24 hours and then stained for the evaluation of mitochondrial distribution (Mitotracker Red CMXRos) and nuclear maturation stage (Hoescht 33342). Fourteen surgical procedures were performed on overstimulated females and 94 oocytes were collected in total. The average number of visualized follicles, aspirated follicles, and harvested oocytes was equal to 17.07±9.12, 13.54±6.64 e 7.15±3.72, respectively. Of the in vitro matured oocytes, 64.52% reached the MII stage and 67.74% were classified with homogeneous mitochondrial distribution. There was spontaneous activation by parthenogenesis in 16.13% of the oocyte. Furthermore, 21 non-matured oocytes were evaluated and of these, 81%... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: José Maurício Barbanti Duarte / Coorientador: Eveline dos Santos Zanetti / Banca: Rosana Nogueira de Morais / Banca: Lawrence Charles Smith / Resumo: Assim como outras espécies brasileiras de vida livre, os cervídeos têm sofrido pressões sobre seu habitat, o que provoca segregação entre populações, diminuição de troca gênica e de diversidade genética, aumento da endogamia, e um maior risco de extinção. A produção in vitro de embriões (PIVE) tem ganhado destaque como uma ferramenta a ser utilizada nos programas de conservação de espécies selvagens in situ e ex situ. Entre as etapas da PIVE, a maturação in vitro (MIV) assume grande importância, pois o seu sucesso pode garantir a melhora nas taxas de produção de embriões. Assim, os objetivos do presente trabalho foram: avaliar viabilidade do protocolo de estimulação ovariana para a aspiração folicular, a eficiência da laparoscopia para a aspiração folicular, e a maturação nuclear e a distribuição mitocondrial em oócitos maturados in vitro para a espécie M. gouazoubira. Para isso, foram utilizadas cinco fêmeas, submetidas a repetidas estimulações ovarianas com intervalos de 30 dias. Os oócitos aspirados foram classificados morfologicamente de acordo com a qualidade, submetidos à maturação in vitro por 24 horas e, posteriormente, corados para a avaliação da distribuição mitocondrial (Mitotracker Red CMXRos); e do estágio de maturação nuclear (Hoescht 33342). Foram realizados 14 procedimentos cirúrgicos para a colheita de 94 oócitos de fêmeas superestimuladas. A média de folículos visualizados, folículos aspirados e oócitos colhidos por cirurgia foi, respectivamente, de 17,07±9,12, 13,54±6,64 e 7,15±3,72. Dos oócitos maturados in vitro, 64,52% alcançaram a MII e a classificação da distribuição mitocondrial não foi conclusiva. Houve ativação espontânea por partenogênese em 16,13% dos oócitos. Ainda, foi realizada avaliação de... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The cervids, as well as other free-living brazilian species, have suffered pressures on their habitat, causing segregation between populations and reduced genetic exchange, which may decrease the genetic diversity and generate increased inbreeding and extinction risk. In vitro embryo production (IVEP) has been highlighted as a tool to be used in wild species conservation programs in in situ and ex situ. The maturation process has a great importance among the steps of IVEP, and its success can ensure an improvement in the rate of production of embryos. The objectives of this study were to assess feasibility of the protocol of ovarian stimulation for ovum pick, the efficiency of laparoscopy for oocyte retrieval, and the nuclear maturation and mitochondrial distribution in oocytes matured in vitro for the species M. gouazoubira. Thus, we used five females, submitted to repeated stimulation with intervals of 30 days. After the visualization of the ovaries, the visible follicles were counted and punctured by laparoscopy on day eight (D8). The aspirated oocytes were classified morphologically according the quality, subjected to in vitro maturation for 24 hours and then stained for the evaluation of mitochondrial distribution (Mitotracker Red CMXRos) and nuclear maturation stage (Hoescht 33342). Fourteen surgical procedures were performed on overstimulated females and 94 oocytes were collected in total. The average number of visualized follicles, aspirated follicles, and harvested oocytes was equal to 17.07±9.12, 13.54±6.64 e 7.15±3.72, respectively. Of the in vitro matured oocytes, 64.52% reached the MII stage and 67.74% were classified with homogeneous mitochondrial distribution. There was spontaneous activation by parthenogenesis in 16.13% of the oocyte. Furthermore, 21 non-matured oocytes were evaluated and of these, 81%... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: José Maurício Barbanti Duarte / Coorientador: Eveline dos Santos Zanetti / Banca: Maria Emilia Franco Oliveira / Banca: Gisele Zoccal Mingoti / Banca: Maria Denise Lopes / Resumo: A região neotropical passa por um período crítico em termos de perda de biodiversidade. Dentro deste contexto, há um crescente aumento do número de espécies de cervídeos neotropicais sofrendo redução em seu tamanho populacional, podendo ocasionar ausência de fluxo gênico e consequente diminuição da variabilidade genética e à endogamia, afetando o desempenho reprodutivo e aumentando o risco de extinção. Neste contexto, o uso das biotécnicas da reprodução nos animais silvestres será útil para programas de conservação das mais diversas espécies. Assim, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a viabilidade da técnica de inseminação artificial intrauterina por videolaparoscopia (IAUL), com sêmen congelado, na espécie M. gouazoubira. Foram utilizadas cinco fêmeas adultas e dois machos adultos inteiros, da espécie M. gouazoubira, sendo que, quatro fêmeas foram submetidas a dois procedimentos de IAUL com intervalo aproximado de 5 meses e uma fêmea passou por um procedimento, totalizando nove inseminações. As fêmeas receberam um dispositivo intravaginal contendo 0,33g de progesterona, cuja permanência foi de oito dias. No momento da retirada do dispositivo, foi administrado 265μg (1mL) de cloprostenol sódico. Oito horas após a retirada do dispositivo as fêmeas passaram a ser monitoradas (com rufiões) quanto a manifestação do estro comportamental a cada seis horas. Os procedimentos de IAUL foram realizados 12-14 horas após início do estro e os animais receberam uma aplicação de 2,5mg (2mL) de hormônio luteinizante (LH). As inseminações foram realizadas com sêmen descongelado, na concentração de 50 x 106 espermatozoides/dose, envasados em palhetas de 0,25mL, com motilidade e vigor mínimos de 30% e 2, respectivamente, pós descongelação. A avaliação da presença do corpo lúteo (CL) funcional foi feita com a dosagem hormonal de metabólitos fecais ... / Abstract: The neotropical region undergoes a critical period in terms of biodiversity loss. Within this context there is a rising increasing of neotropical deer species suffering a shrinking in its population. The population decreasing as well the gene flow absence can lead to the genetic variability reduction and endogamy, affecting the reproductive performance and increasing the extinction risk. In this context, the wild animal reproduction biotechnique knowledge might be useful to further conservation programs to several species. Thus, this work aim was evaluate the videolaparoscopic intrauterine artificial insemination technique (LAI), using frozen semen of M. gouazoubira. To the procedure, five adult females and two stags of M. gouazoubira were used. Four females were submitted two LAI procedures in a five months interval and one female suffered one procedure, totalizing nine inseminations. The females received an intravaginal device containing 0.33g of progesterone foreight days. At the device removal time, 265μg (1mL) of sodium cloprostenol was i.m. administred. Eight hours later the females started being monitored (with teasers ) regarding to the behaviorial estrus every six hours. The LAI procedures were done 12-24 hours after the estrus beginning, when the animals received 2.5mg (2mL) of luteinizing hormone (LH). Inseminations were done using 0.25mL straws (50x106 espermatozoons/mL) of thawed semen, with minimal motility and vigor of 30% and 2, respectively, in the post thaw. The corpus luteum (CL) presence evaluation was done by progesterone fecal metabolites hormonal dosage. The gestation diagnostic was done from 45 to 55 days after LAI by transabdominal ultrasonography. Only eight LAI procedures were able to be evaluated regarding the gestation percentage due the death of one female just after the second insemination procedure, resulting in 50% (4/8) of gestation. The average time from ... / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-05Bitstream added on 2014-06-13T20:19:13Z : No. of bitstreams: 1 000735376.pdf: 1660982 bytes, checksum: f699d8220bf1b7df5f2e9012026d973c (MD5) / A região neotropical passa por um período crítico em termos de perda de biodiversidade. Dentro deste contexto, há um crescente aumento do número de espécies de cervídeos neotropicais sofrendo redução em seu tamanho populacional, podendo ocasionar ausência de fluxo gênico e consequente diminuição da variabilidade genética e à endogamia, afetando o desempenho reprodutivo e aumentando o risco de extinção. Neste contexto, o uso das biotécnicas da reprodução nos animais silvestres será útil para programas de conservação das mais diversas espécies. Assim, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a viabilidade da técnica de inseminação artificial intrauterina por videolaparoscopia (IAUL), com sêmen congelado, na espécie M. gouazoubira. Foram utilizadas cinco fêmeas adultas e dois machos adultos inteiros, da espécie M. gouazoubira, sendo que, quatro fêmeas foram submetidas a dois procedimentos de IAUL com intervalo aproximado de 5 meses e uma fêmea passou por um procedimento, totalizando nove inseminações. As fêmeas receberam um dispositivo intravaginal contendo 0,33g de progesterona, cuja permanência foi de oito dias. No momento da retirada do dispositivo, foi administrado 265μg (1mL) de cloprostenol sódico. Oito horas após a retirada do dispositivo as fêmeas passaram a ser monitoradas (com rufiões) quanto a manifestação do estro comportamental a cada seis horas. Os procedimentos de IAUL foram realizados 12-14 horas após início do estro e os animais receberam uma aplicação de 2,5mg (2mL) de hormônio luteinizante (LH). As inseminações foram realizadas com sêmen descongelado, na concentração de 50 x 106 espermatozoides/dose, envasados em palhetas de 0,25mL, com motilidade e vigor mínimos de 30% e 2, respectivamente, pós descongelação. A avaliação da presença do corpo lúteo (CL) funcional foi feita com a dosagem hormonal de metabólitos fecais... / The neotropical region undergoes a critical period in terms of biodiversity loss. Within this context there is a rising increasing of neotropical deer species suffering a shrinking in its population. The population decreasing as well the gene flow absence can lead to the genetic variability reduction and endogamy, affecting the reproductive performance and increasing the extinction risk. In this context, the wild animal reproduction biotechnique knowledge might be useful to further conservation programs to several species. Thus, this work aim was evaluate the videolaparoscopic intrauterine artificial insemination technique (LAI), using frozen semen of M. gouazoubira. To the procedure, five adult females and two stags of M. gouazoubira were used. Four females were submitted two LAI procedures in a five months interval and one female suffered one procedure, totalizing nine inseminations. The females received an intravaginal device containing 0.33g of progesterone foreight days. At the device removal time, 265μg (1mL) of sodium cloprostenol was i.m. administred. Eight hours later the females started being monitored (with teasers ) regarding to the behaviorial estrus every six hours. The LAI procedures were done 12-24 hours after the estrus beginning, when the animals received 2.5mg (2mL) of luteinizing hormone (LH). Inseminations were done using 0.25mL straws (50x106 espermatozoons/mL) of thawed semen, with minimal motility and vigor of 30% and 2, respectively, in the post thaw. The corpus luteum (CL) presence evaluation was done by progesterone fecal metabolites hormonal dosage. The gestation diagnostic was done from 45 to 55 days after LAI by transabdominal ultrasonography. Only eight LAI procedures were able to be evaluated regarding the gestation percentage due the death of one female just after the second insemination procedure, resulting in 50% (4/8) of gestation. The average time from ...

Resumo: A constante ameaça às populações de veado-campeiro (Ozotoceros bezoarticus) faz deste cervídeo uma espécie ameaçada de extinção, trazendo à tona uma necessidade eminente de mais estudos, principalmente relacionado à biologia e fisiologia reprodutiva. Sendo assim, os objetivos deste trabalho foram: definir o padrão de excreção de progestágenos fecais durante a gestação do veado-campeiro e validar possível método não-invasivo para diagnóstico de gestação da espécie, com uso de análises endócrinas. Para isso, onze fêmeas da espécie foram capturadas, marcadas e receberam colares radiotransmissores no Pantanal, região da Nhecolândia. Elas foram acompanhadas mensalmente e tiveram sua fezes colhidas para caracterização hormonal da gestação, entre o período de agosto de 2008 a novembro de 2009. Foi observada a ocorrência de parto em apenas sete fêmeas, as quais foram utilizadas na caracterização endócrina da gestação. As dosagens das progestinas fecais foram feitas por ensaio imunoenzimático. Os nascimentos observados ocorreram entre agosto e outubro, com pico entre agosto e setembro. Os níveis das progestinas fecais durante o início da gestação foram semelhantes aos períodos não-gestantes, com aumento progressivo a partir do segundo terço da gestação até o momento do parto, decaindo após esse período aos níveis não-gestantes. Os níveis de progestinas fecais acima de 6000 ng/g de fezes são sugestivos de gestação. / Abstract: The constant risk of pampas deer populations (Ozotoceros bezoarticus) makes these threatened specie, bringing an eminent necessity of more studies, mainly related to biology and reproductive physiology. Being thus, the objectives of this work were: obtain the profile of fecal progestins excretion during the pampas deer gestation and to validate a possible noninvasive diagnosis method of gestation for the species, using endocrine analysis. For this, eleven females had been captured, marked and received necklaces radiotransmitters in Pantanal, region of Nhecolândia. They had been followed and their excrements were collected monthly for hormonal characterization between August, 2008 - November, 2009. Was observed the occurrence of birth in only seven females, which had been used in the endocrine characterization of gestation. The levels of fecal progestins during the beginning of gestation had been similar to those at nogestational periods, with gradual increase from the second part of gestation until the moment of birth, decaying after this period to no-gestation levels. The levels of fecal progestins above 6000 ng/g of excrements are suggestive of gestation. / Orientador: José Maurício Barbanti Duarte / Coorientador: Ubiratan Piovezan / Banca: Paulo Henrique Franceschini / Banca: Rosana Nogueira de Morais / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-26Bitstream added on 2014-06-13T19:59:06Z : No. of bitstreams: 1 christofoletti_md_me_jabo.pdf: 728449 bytes, checksum: c3e0031c932c62484c010871b451c29b (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A constante ameaça às populações de veado-campeiro (Ozotoceros bezoarticus) faz deste cervídeo uma espécie ameaçada de extinção, trazendo à tona uma necessidade eminente de mais estudos, principalmente relacionado à biologia e fisiologia reprodutiva. Sendo assim, os objetivos deste trabalho foram: definir o padrão de excreção de progestágenos fecais durante a gestação do veado-campeiro e validar possível método não-invasivo para diagnóstico de gestação da espécie, com uso de análises endócrinas. Para isso, onze fêmeas da espécie foram capturadas, marcadas e receberam colares radiotransmissores no Pantanal, região da Nhecolândia. Elas foram acompanhadas mensalmente e tiveram sua fezes colhidas para caracterização hormonal da gestação, entre o período de agosto de 2008 a novembro de 2009. Foi observada a ocorrência de parto em apenas sete fêmeas, as quais foram utilizadas na caracterização endócrina da gestação. As dosagens das progestinas fecais foram feitas por ensaio imunoenzimático. Os nascimentos observados ocorreram entre agosto e outubro, com pico entre agosto e setembro. Os níveis das progestinas fecais durante o início da gestação foram semelhantes aos períodos não-gestantes, com aumento progressivo a partir do segundo terço da gestação até o momento do parto, decaindo após esse período aos níveis não-gestantes. Os níveis de progestinas fecais acima de 6000 ng/g de fezes são sugestivos de gestação. / The constant risk of pampas deer populations (Ozotoceros bezoarticus) makes these threatened specie, bringing an eminent necessity of more studies, mainly related to biology and reproductive physiology. Being thus, the objectives of this work were: obtain the profile of fecal progestins excretion during the pampas deer gestation and to validate a possible noninvasive diagnosis method of gestation for the species, using endocrine analysis. For this, eleven females had been captured, marked and received necklaces radiotransmitters in Pantanal, region of Nhecolândia. They had been followed and their excrements were collected monthly for hormonal characterization between August, 2008 - November, 2009. Was observed the occurrence of birth in only seven females, which had been used in the endocrine characterization of gestation. The levels of fecal progestins during the beginning of gestation had been similar to those at nogestational periods, with gradual increase from the second part of gestation until the moment of birth, decaying after this period to no-gestation levels. The levels of fecal progestins above 6000 ng/g of excrements are suggestive of gestation.