Thesis (Ph. D.)--University of Rhode Island, 2003. / Typescript. Includes bibliographical references (leaves 172-184).

Thesis (M.S.)--University of Wisconsin--Madison, 1949. / Typescript. eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references (leaves 30-33).

Thesis (doctoral)--University of Göteborg, 1994. / Includes bibliographical references.

Universiẗat, Diss., 2005--Würzburg.

Thesis (Ph. D.)--University of Washington, 2005. / Vita. Includes bibliographical references (leaves 122-143).

Universiẗat, Diss., 2003--Frankfurt (Main).

Universiẗat, Diss., 2003--Konstanz.

MONTEIRO, Sandra Maria Nunes. Eficácia da suplementação com glutamina, peptideos, vitaminas A e E, na doença diarréica induzida por metotrexato e pela toxina do Vibrio cholerae : restabelecimento da barreira morfofuncional intestinal. 2004. 167 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, 2004. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-10-17T13:34:59Z No. of bitstreams: 1 2004_tese_smnmonteiro.pdf: 1305742 bytes, checksum: 36e5ca209ccb56d647a5ffddbcb9d2d9 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2012-10-18T12:04:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2004_tese_smnmonteiro.pdf: 1305742 bytes, checksum: 36e5ca209ccb56d647a5ffddbcb9d2d9 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-10-18T12:04:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2004_tese_smnmonteiro.pdf: 1305742 bytes, checksum: 36e5ca209ccb56d647a5ffddbcb9d2d9 (MD5) Previous issue date: 2004 / A desnutrição, desidratação e agentes antineoplásicos, tais como o metotrexato (MTX), são imediatos causadores das doenças diarréicas. Objetivando investigar a mucosite intestinal (MI) induzida por MTX, a eficácia das soluções de reidratação oral (SRO) acrescidas com glutamina (Gln), alanilglutamina (Ala-Gln), Hyprol 4107 (HYP) e hyfoama (HYFO) utilizou-se a perfusão intestinal. E para a suplementação com vitaminas A (VITA) e E (VITE), Gln e peptídeos, utilizou-se as avaliações morfométricas, metabólicas e a de permeabilidade intestinal [(teste lactulose/manitol (L/M)], em camundongos (n=344) e em coelhos (n=72). A mucosite intestinal por MTX (2,75 mg/kg/24h s.c., durante 3 dias) foi validada em camundongos, através da constatação do quadro diarréico e do prejuízo no estado nutricional (-1.89±0,52 g) estabelecido após o 3o dia de tratamento. A análise morfométrica demonstrou achatamento de vilos (364,8±19.9 mm) e hiperplasia de criptas (251±19.2 mm) intestinais com aumento do número de apoptoses (7.48±1, 23/cripta), no duodeno e no jejuno. A taxa L/M no grupo MTX foi maior c que no controle (0,35). A perfusão intestinal com toxina da cólera aumentou a secreção de Na+ (-12,8±1.4 mEq/g/min), Cl- (-12,9±4,6 mEq/g/min) e de água (-0,02 ±0,04 ml/g/min). As SRO acrescidas de Gln e peptídeos, restauram este efeito secretório. A suplementação de Gln e peptídeos, VITA e VITE, melhoram o ganho ponderal, a ingestão de ração, as alterações morfológicas e a apoptose, no modelo de mucosite intestinal. Nenhuma alteração foi observada no padrão de mitoses nas criptas intestinais, após o 3o dia de tratamento com MTX. A suplementação nutricional reduziu na mucosite, a elevação das taxas de L/M (0,35 para 0,73) nas vias paracelular e transcelular. Nossos resultados sugerem que, o restabelecimento da barreira morfofuncional, induzido pela suplementação, foi obtido através de um aumento do transporte de cátions (Na+ e K+) na mucosa, do fornecimento de substrato energético para o enterócito, inibição da apoptose (0,25±0,05), de células indiferenciadas incremento no potencial redox e redução da peroxidação lipídica das células intestinais diferenciadas. Então sugerimos que o uso de SRO acrescidas de Gln e peptídeos podem prevenir a desnutrição e reduzir as doenças diarréicas, e a suplementação com VITE e VITA melhorar a morfo fisiologia da barreira intestinal. / A desnutrição, desidratação e agentes antineoplásicos, tais como o metotrexato (MTX), são imediatos causadores das doenças diarréicas. Objetivando investigar a mucosite intestinal (MI) induzida por MTX, a eficácia das soluções de reidratação oral (SRO) acrescidas com glutamina (Gln), alanilglutamina (Ala-Gln), Hyprol 4107 (HYP) e hyfoama (HYFO) utilizou-se a perfusão intestinal. E para a suplementação com vitaminas A (VITA) e E (VITE), Gln e peptídeos, utilizou-se as avaliações morfométricas, metabólicas e a de permeabilidade intestinal [(teste lactulose/manitol (L/M)], em camundongos (n=344) e em coelhos (n=72). A mucosite intestinal por MTX (2,75 mg/kg/24h s.c., durante 3 dias) foi validada em camundongos, através da constatação do quadro diarréico e do prejuízo no estado nutricional (-1.89± 0,52 g) estabelecido após o 3o dia de tratamento. A análise morfométrica demonstrou achatamento de vilos (364,8± 19.9 µm) e hiperplasia de criptas (251± 19.2 µm) intestinais com aumento do número de apoptoses (7.48± 1, 23/cripta), no duodeno e no jejuno. A taxa L/M no grupo MTX foi maior c que no controle (0,35). A perfusão intestinal com toxina da cólera aumentou a secreção de Na+ (-12,8± 1.4 µEq/g/min), Cl- (-12,9± 4,6 µEq/g/min) e de água (-0,02 ± 0,04 ml/g/min). As SRO acrescidas de Gln e peptídeos, restauram este efeito secretório. A suplementação de Gln e peptídeos, VITA e VITE, melhoram o ganho ponderal, a ingestão de ração, as alterações morfológicas e a apoptose, no modelo de mucosite intestinal. Nenhuma alteração foi observada no padrão de mitoses nas criptas intestinais, após o 3o dia de tratamento com MTX. A suplementação nutricional reduziu na mucosite, a elevação das taxas de L/M (0,35 para 0,73) nas vias paracelular e transcelular. Nossos resultados sugerem que, o restabelecimento da barreira morfofuncional, induzido pela suplementação, foi obtido através de um aumento do transporte de cátions (Na+ e K+) na mucosa, do fornecimento de substrato energético para o enterócito, inibição da apoptose (0,25± 0,05), de células indiferenciadas incremento no potencial redox e redução da peroxidação lipídica das células intestinais diferenciadas. Então sugerimos que o uso de SRO acrescidas de Gln e peptídeos podem prevenir a desnutrição e reduzir as doenças diarréicas, e a suplementação com VITE e VITA melhorar a morfo fisiologia da barreira intestinal.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / The aim of this study was to evaluate the survival of Vibrio parahaemolitycus inoculated in meat homogenate of shrimp Litopenaeus vannamei at different temperatures of refrigeration (refrigerator, freezer and isothermic box with ice) during ten days and on the 15th, 20th and 25th days. The experiment was repeated six times during October 2005 to March 2006. Shrimps were obtained on fish market located at Praia do Mucuripe, Fortaleza, CearÃ. In the laboratory, the shrimps were washed with distilled water and from immersed in boiling water for five minutes in order to eliminate any other Vibrio the sample. The sample inoculation happened with the contact between the shrimps and the V. parahaemolyticus culture during five minutes. Then, the sample was divided in 40 portions with 25 g each. One of the portions was used as zero time. The other 39 portions were separated in 3 batches and mantained on freezer (- 21ÂC), refrigerator (11ÂC) and isothermic box with ice (-1ÂC to 13ÂC). The number of V. parahaemolyticus was monitored for 10 days and on 15th, 20th and 25th days by the plate count method on TCBS and PCA media. All temperatures were efficient to control the viable cells of V. parahaemolyticus. The action of cold produced by ice, refrigerator and freezer inhibit the bacterial growth on shrimps. The freezer was the most efficient treatment to reduce the V. parahaemolyticus on shrimp samples. / O presente trabalho teve como objetivo recuperar Vibrio parahaemolyticus, inoculado em homogenato de camarÃo marinho, Litopenaeus vannamei livre de vÃbrios, submetido a diferentes temperaturas de refrigeraÃÃo (caixa isotÃrmica com gelo, geladeira e freezer) por dez dias, e nos 15o, 20o e 25o dias. Foram realizadas seis repetiÃÃes do experimento, no perÃodo de outubro de 2005 a marÃo de 2006. O camarÃo foi adquirido na feira de pescado da Praia do Mucuripe, Fortaleza-CearÃ. Em laboratÃrio, 1.500 g de camarÃo eram lavados com Ãgua destilada e imersos em Ãgua fervente por cinco minutos para eliminar qualquer Vibrio presente na amostra. A contaminaÃÃo do camarÃo era feita mediante o contacto dos animais com a cultura de V. parahaemolyticus, por cinco minutos. A amostra era dividida em 40 fraÃÃes de 25 g sendo uma delas usada para contagem no tempo zero e as restantes divididas em trÃs lotes sendo estocadas em trÃs temperaturas: caixa isotÃrmica com gelo (-1 a 13ÂC), geladeira (11ÂC) e freezer (-21ÂC). Por dez dias seguidos, e nos 15o, 20o e 25o dias, V. parahaemolyticus eram quantificados nos camarÃes atravÃs do MÃtodo de Contagem PadrÃo em Placas, em meios de TCBS e PCA. Todas as trÃs temperaturas foram eficientes no controle da viabilidade de V. parahaemolyticus. A aÃÃo do frio gerado por gelo, geladeira e freezer inibe o crescimento dessa bactÃria em camarÃes, sendo a temperatura do freezer, a mais eficiente na reduÃÃo dessa espÃcie bacteriana em camarÃes.

M.Sc. (Biochemistry) / Cholera, the highly epidemic diarrhoeal disease caused by Vibrio cholerae (V. cholerae) infection, continues to devastate many developing countries. Therefore, a rapid and sensitive method to identify pathogenic V. cholerae biotypes is imperative. Literature highlighted the sensitivity of matrix-assisted laser desorption ionisation time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) and high resolution melt curve analysis (HRM) for this purpose. It is necessary to develop these methods based on the virulence proteins/genes themselves in order to be future diagnostic tools capable of detecting distinct strains of V. cholerae and to determine their pathogenicity. Such virulence proteins/genes would require significant sequence variation among different strains of V. cholerae. The toxin-coregulated pilus protein A (TcpA) is a key player in V. cholerae infection and displays significant sequence variation at both the genetic and protein level. The hypothesis of this study is that the variation in the TcpA/tcpA protein and gene, respectively, can be used to differentiate between V. cholerae biotypes by using MALDI-TOF MS and/or HRM methods. The objectives were first to investigate established methods for the rapid isolation of surface proteins that would yield a high enough concentration of whole pili or TcpA subunits for future MS biotyping techniques. Two methods were evaluated: a) pili isolation by mechanical shearing b) crude extraction of the outer membrane proteins and associated surface proteins. Secondly, HRM-compatible oligonucleotides were designed for specific amplification of the variable regions within the tcpA gene in V. cholerae. The efficacy of these oligonucleotides was tested on V. cholerae reference strains and environmental isolates. Lastly, a current standard procedure for V. cholerae typing was evaluated. Pili were successfully isolated from bacterial cell colonies, but large quantities of starting material were required and much of the cell content was isolated with the pili. Alternative isolation and enrichment methods have been proposed and may prove promising for future MALDI-TOF MS biotyping. The current standard procedure for V. cholerae typing with multiplex PCR revealed some discrepancies between the multiplex PCR steps. Therefore, the current multiplex PCR procedure may result in inaccuracies during typing. The designed HRM-compatible oligonucleotide set designated Contig 1 successfully amplified a 101 bp region within the tcpA gene in Vibrios. This Contig 1 oligonucleotide set could possibly be used in future studies to differentiate between Vibrio species with HRM. Further studies would be needed for the development of MALDI-TOF/MS or HRM as future rapid and specific environmental monitoring systems based on the TcpA/tcpA protein or gene, respectively.