Submitted by Neusa Fagundes (neusa.fagundes@unioeste.br) on 2018-03-06T17:51:44Z No. of bitstreams: 2 Ana_Paris2015.pdf: 1120007 bytes, checksum: fce1909bbad92341d65a1c30c6cd062f (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-06T17:51:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Ana_Paris2015.pdf: 1120007 bytes, checksum: fce1909bbad92341d65a1c30c6cd062f (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-12-07 / Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Estado do Paraná (FA) / The significant increase in the incidence and prevalence of pathogenic microorganism resistance to antimicrobials has become a major public health problem, making it important to search for new therapeutic compounds against this threat. Micocyns produced by some yeasts, like Wickerhamomyces anomalus, have activity against other microorganisms, action which possibly occurs after the binding of micocyn to specific receptors on cell wall and plasma membrane of sensitive microorganisms and thus, presenting a promising antimicrobial activity. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial action of micocyns present in the culture supernatant and in the strain cell walls of W. anomalus (WA40, WA45 and WA92) opposite the yeast and bacteria. The three strains of W. anomalus were isolated from the soil. The micocyns of W. anomalus WA40, WA45 and WA92 were tested against the bacteria Escherichia coli, Acinetobacter baumanii and Staphylococcus aureus and the yeast Candida albicans, Candida glabrata, Candida guilliermondii, Candida tropicalis and Cryptococcus neoformans. The mycocins of the three strains of W. anomalus showed inhibitory effect on the tested microorganisms and micocinas showed a little toxicity in haemolysis test on human erythrocytes. The micocyns of W. anomalus WA40, WA45 and WA92 presented a broad spectrum of action which may be promising in the development of antimicrobial drugs. / O expressivo aumento da incidência e prevalência de resistência de micro-organismos patogênicos aos antimicrobianos tem se tornado um grande problema de saúde pública, tornando-se importante a pesquisa de novos compostos terapêuticos contra essa ameaça. Micocinas produzidas por algumas leveduras, como Wickerhamomyces anomalus, possuem atividade contra outros micro-organismos, ação que possivelmente ocorre após a ligação da micocina a receptores específicos na parede celular e na membrana plasmática dos micro-organismos sensíveis e assim, apresentando uma promissora atividade antimicrobiana. O objetivo deste trabalho é avaliar a ação antimicrobiana de micocinas presentes no sobrenadante de cultura e na parede celular de cepas de W. anomalus (WA40, WA45 e WA92) frente às leveduras e bactérias patogênicas. As três cepas de W. anomalus foram isoladas do solo. As micocinas de W. anomalus WA40, WA45 e WA92 foram testadas frente às bactérias Escherichia coli, Acinetobacter baumanii e Sthaphylococcus aureus e às leveduras Candida albicans, Candida glabrata, Candida guilliermondii, Candida tropicalis e Cryptococcus neoformans. As micocinas do sobrenadante de cultura e da parede celular das três cepas de W. anomalus apresentaram efeito inibitório nos micro-organismos testados e mostraram pouca toxicidade em teste de hemólise em eritrócitos humanos. As micocinas de W. anomalus WA40, WA45 e WA92 apresentaram um amplo espectro de ação podendo ser promissores no desenvolvimento de medicamentos antimicrobianos.

Submitted by Rosangela Silva (rosangela.silva3@unioeste.br) on 2017-08-31T11:48:36Z No. of bitstreams: 2 cristiane Persel.pdf: 966698 bytes, checksum: 3cd3bbc33fd85ffcfae5c88b9acbec25 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-31T11:48:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 cristiane Persel.pdf: 966698 bytes, checksum: 3cd3bbc33fd85ffcfae5c88b9acbec25 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Wickerhamomyces anomalus is mycocin-producing yeast, these substances are glycoproteins secreted by some yeasts and have antimicrobial action with broad spectrum of activity. Escherichia coli is the predominant bacterium of the coliform group, its presence in the water indicates fecal contamination, being used as indicator in microbiological analyzes of water. Although belonging to the human and animal microbiota can be pathogenic, causing various types of infections. The immobilization of cells and substances shows great potential of biotechnological application in several areas. In this way, this work aimed to evaluate the activity of free and immobilized mycocins, obtained from W. anomalus, against strains of E. coli and fecal coliforms. The broth microdilution method was used to evaluate the action of the free mycocins, in different dilutions, against 45 multiresistant strains of E. coli isolated from clinical samples. Mycocins were immobilized at different concentrations of sodium alginate and calcium chloride and tested for antimicrobial activity against E. coli strain ATCC25922 and fecal coliforms present in fecal contaminated water samples. The free mycocins were able to inhibit all the strains used in the broth microdilution, with 100% of the strains being inhibited by the pure used mycocins and, even when diluted, the mycocins showed an inhibitory action, the dilution of 1:2 inhibited 78.2% of the multiresistant strains of E. coli. The concentration of sodium alginate influenced the shape of the granules obtained in immobilization, a result not observed when the calcium chloride concentration varied. The mycocins immobilized with 2% sodium alginate and 0.2 mol/L CaCl2 showed better antimicrobial activity against E. coli strain ATCC25922. Fecal coliforms were inhibited by immobilized mycocins after 48h of incubation. In summary, in this study, mycocins were able to inhibit E. coli and coliforms present in samples of water contaminated with feces. Considering the problem of multiresistant strains of antibiotics and the need for new alternatives to improve water quality and sewage effluents, these results demonstrate a possible application as an alternative to antimicrobial agents. / Wickerhamomyces anomalus é uma levedura produtora de micocinas, estas substâncias são glicoproteínas secretadas por algumas leveduras e possuem ação antimicrobiana com amplo espectro de atividade. Escherichia coli é a bactéria predominante do grupo de coliformes, sua presença na água indica contaminação fecal, sendo utilizada como indicador em análises microbiológicas de água. Apesar de pertencer à microbiota humana e animal pode ser patogênica, causando diversos tipos de infecções. A imobilização de células e substâncias demonstra grande potencial de aplicação biotecnológica em diversas áreas. Desta maneira, este trabalho objetivou avaliar a atividade de micocinas livres e imobilizadas, obtidas de W. anomalus, frente às cepas de E. coli e coliformes fecais. Utilizou-se o método de microdiluição em caldo para avaliar a ação das micocinas livres, em diferentes diluições, frente a 45 cepas multirresistentes de E. coli isoladas de amostras clínicas. As micocinas foram imobilizadas em diferentes concentrações de alginato de sódio e cloreto de cálcio, e testadas para verificar a atividade antimicrobiana frente à cepa de E. coli ATCC25922 e coliformes fecais presentes em amostras de água contaminadas com fezes. As micocinas foram capazes de inibir todas as cepas utilizadas na microdiluição em caldo, sendo que 100% das cepas foram inibidas pelas micocinas utilizadas puras e, mesmo diluídas, as micocinas apresentaram ação inibitória, a diluição de 1:2 inibiu 78,2% das cepas de E. coli multirresistentes. A concentração de alginato de sódio influenciou no formato dos grânulos obtidos na imobilização, resultado não observado ao variar a concentração de cloreto de cálcio. As micocinas imobilizadas com alginato de sódio a 2% e CaCl2 0,2 mol/L apresentaram melhor atividade antimicrobiana frente à cepa de E. coli ATCC25922. Os coliformes fecais foram inibidos pelas micocinas imobilizadas após 48h de incubação. Em síntese, neste estudo, as micocinas foram hábeis em inibir E. coli e coliformes presentes em amostras de água contaminada com fezes. Considerando a problemática de cepas multirresistentes a antibióticos e a necessidade de novas alternativas para melhorar a qualidade da água e efluentes de esgoto, tais resultados demonstram uma possível aplicação como alternativa para agente antimicrobiano.