CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / No presente estudo avaliou-se os efeitos da inoculaÃÃo do carcinosarcoma 256 de Walker, bem como o curso de seu desenvolvimento, sobre a reaÃÃo inflamatÃria sistÃmica. Ratos Wistar machos, pesando entre 180 a 220g, foram inoculados, por via intramuscular, com 106 cÃlulas tumorais na coxa direita. Os experimentos foram realizados apÃs o 4Â, 7Â e 10Â dias (4D, 7D e 10D) da inoculaÃÃo do carcinossarcoma 256 de Walker. O grupo controle nÃo foi inoculado as cÃlulas tumorais. Os ratos foram divididos em grupos experimentais com n = 6, nos quais foram avaliados os seguintes parÃmetros: edema de pata por carragenina (Cg; 300μg/pata direita) ou dextrana (Dxt; 500μg/pata direita), atividade da enzima mieloperoxidase (MPO), migraÃÃo de neutrÃfilos para cavidade peritoneal induzidas por carragenina (Cg; 300μg/pata direita), permeabilidade vascular cutÃnea induzidas por bradicinina (2μg/sÃtio), histamina (30μg/sÃtio), serotonina (1μg/sÃtio), substÃncia P (250ng/sÃtio), capsaicina (50μg/sÃtio) ou composto 48/80 (1μg/sÃtio) e degranulaÃÃo mastocitÃria induzida por composto 48/80. A intensidade do edema foi avaliada na pata contralateral ao tumor 1, 2, 3 e 4 hs (Cg) e 30â ,1 2, 3, ,4 hs (Dxt) por pletismometria. A migraÃÃo de neutrÃfilos foi induzida pela administraÃÃo de Cg (300μg/pata) na pata contralateral ao tumor ou na cavidade peritoneal. ApÃs 4 horas, os ratos foram sacrificados e as peles das patas foram retiradas para medir indiretamente a infiltraÃÃo de neutrÃfilos, pela tÃcnica da dosagem da atividade da MPO, e a migraÃÃo de neutrÃfilos para cavidade peritoneal foi avaliada atravÃs da contagem total e diferencial de leucÃcitos. Em relaÃÃo a permeabilidade vascular cutÃnea, imediatamente apÃs as injeÃÃes intradÃrmicas dos estÃmulos (bradicinina, histamina, serotonina, substÃncia P, capsaicina ou composto 48/80), foi administrado azul de Evans (0,1mL/100g do animal), na veia do plexo peniano. ApÃs 30 min, os ratos foram sacrificados e a pele do dorso retirada, para avaliar o extravasamento do azul de Evans por espectrometria. A degranulaÃÃo de mastÃcitos do mesentÃrio foi avaliada apÃs coloraÃÃo com azul de toluidina, sendo contados os mastÃcitos degranulados num total de 100 cÃlulas. Os animais com tumor apresentaram uma inibiÃÃo significativa do edema de pata, com efeito mÃximo observado nos 7 Â e 10 Â dias, tanto com a Cg, quanto com Dxt, quando comparados com o controle sem tumor. Em nenhum dos dias estudados, foram observadas diferenÃas na atividade da MPO na pata e nem na avaliaÃÃo da migraÃÃo de neutrÃfilos para a cavidade pÃritoneal induzidas por Cg. ApÃs 4 e 7 dias da inoculaÃÃo do tumor, o animais apresentaram uma significativa diminuiÃÃo na permeabilidade vascular cutÃnea induzida por bradicinina, serotonina, e composto 48/80. No entanto, o aumento da permeabilidade vascular induzida por histamina, substÃncia P e capsaicina nÃo foi alterada nesses dois dias. No 10 Â dia, observou-se uma diminuiÃÃo da permeabilidade vascular induzida por todos os estÃmulos quando comparado com o grupo sem tumor. A degranulaÃÃo mastÃcitÃria foi inibida em animais com tumor nos 4Â, 7Â e 10Â dias em comparaÃÃo com o grupo controle. Tais dados sugerem que o microambiente do tumor de Walker diminui o curso da resposta inflamatÃria atravÃs da inibiÃÃo da degranulaÃÃo dos mastocitos / Our objective was to evaluate the effect of the 256 Walker carcinossarcoma inoculation, as well as the time course of tumoral development, upon the acute inflammatory response in rats. Wistar rats, 180-220g, received intramuscular 106 tumor cells injections. At the end of 4, 7 or 10 days, wistar rats were separated into 4 groups, with 6 animals per group. The control group, were not inoculated with tumoral cells. Several parameters were evaluated: paw edema induced by carrageenan (Cg; 300μg/hind) or dextran (Dxt, 500μg/hind paw), myeloperoxidase activity (MPO), neutrophil migration to peritoneal cavity induced by carrageenan, cutaneous vascular permeability induced by bradykinin (2μg/site), serotonin (1μg/site), histamine (30μg/site), substance P (250ng/site), capsaicin (50μg/site) or 48/80 compound (1 μg/site) and mast cell degranulation induced by 48/80 compound. Paw edema was evaluated in the contra lateral hind paw of the tumor and measured at 0, 1, 2, 3 and 4h for Cg, and 0, 30â, 1, 2, 3 and 4h.for Dxt by plethysmometry. Neutrophil migration was induced by Cg injection in the contralateral hind paw or in the peritoneal cavity. After 4h, rats were sacrificed and the skin of the hind paw was harvested to measure neutrophil infiltration by MPO assay. Neutrophil migration induced by Cg was also evaluated in the peritoneal cavity, with the total e differential leucocytes counted. In order to measure cutaneous vascular permeability, immediately after intradermic stimulus injections (bradykinin, histamine, serotonin, substance P, capsaicin or 48/80 compound) Evans Blue dye was administrated (0,1mL/100g of per animal) by endovenous route. After 30 min rats were sacrificed and the skin was harvested to evaluate Evans Blue extravasations by spectrofotometry. Mast cells degranulation was evaluated in the in mesentery incubated with 48/80 compound and colored with toluidine blue. Our results shows that, in animals inoculated with the carcinossarcoma, there was a significant inhibition in the Cg and Dxt- induced paw edema, with maximal effect at the 7th and 10th days. There were no differences in MPO activity and neither in the peritoneal neutrophil infiltration induced by Cg in rats inoculated with the carcinossarcoma when compares to normal animals. After 4 and 7 days of the tumor inoculation, we observed a significant inhibition of the vascular permeability induced only by bradikinin, serotonin and 48/80 compound.. In the 10th day after the carcinossarcoma inoculation, there was a significant inhibition of the vascular permeability induced by all inflammatory stimulus tested, when we compared animals not inoculated. Mast cell degranulation was decreased in the 4th, 7th and 10th days after carcinossarcoma inoculation. These results suggested that the tumor microenvironment decreased the acute inflammatory response probably due to a inhibition of the mast cell degranulation.

A TFD é considerada uma nova terapia minimamente invasiva destinada ao tratamento e destruição seletiva de diversos tipos de cânceres. Objetivo foi avaliar se os efeitos do azul de metileno fotoativado podem desencadear processos inflamatórios interferindo no desenvolvimento e na progressão tumoral. Os resultados demonstraram que o grupo tratado com 0.1% de azul de metileno+1J provocou um aumento estatísticamente significativo quando comparado em relação aos diferentes grupos tratados nos níveis e na expressão gênica dos diferentes marcadores inflamatórios, na geração EROS e MPO. Análise histológica complementou com os resultados anteriores, indicando que neste grupo há alterações morfológicas representadas por áreas de necrose na massa tumoral sólida com presença neutrofílica. Concluímos que há indícios que o tratamento 0.1% azul de metileno+ 1J foi capaz de gerar efeitos citotóxicos que por consequência aumentou a expressão dos mediadores inflamatórios promovendo inflamação e finalmente induzindo morte celular. / PDT is considered a new minimally invasive therapy for the treatment and selective destruction of various types of cancers. The objective was to evaluate the effects of methylene blue light activated may trigger inflammatory processes interfering with the development and tumor progression. The results showed that the group treated with 0.1 % methylene blue +1 J caused a statistically significant increase levels and gene expression of different inflammatory markers in ROS generation and MPO when compared at the different treat groups. Histological analysis complemented with previous results, indicating that there are morphological changes represented by areas of necrosis in the solid tumor mass with neutrophil presence in this group. We conclude that there is evidence that treatment 0.1 % methylene blue + 1J was able to generate cytotoxic effects therefore increased expression of inflammatory mediators, promoting inflammation and finally inducing cell death.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / Os mÃtodos tradicionais de tratamento do cÃncer, como a quimioterapia e a radioterapia, embora sejam eficazes em vÃrios tipos de tumores, encontram freqÃentemente populaÃÃes de cÃlulas neoplÃsicas resistentes, alÃm de apresentarem uma baixa margem de seguranÃa para os pacientes. A utilizaÃÃo da hipertermia associada à quimioterapia e/ou radioterapia jà se encontra fartamente relatada como vantajosa na literatura especializada, principalmente em pacientes portadores de cÃncer em estÃdio avanÃado, submetidos previamente aos mÃtodos clÃssicos de tratamento. A aplicaÃÃo de calor nos tecidos atravÃs de ultrassom contÃnuo torna mais Ãgil Ãste procedimento e com eficÃcia comprovada. O uso dos antiangiogÃnicos tambÃm vem sendo relatado como eficaz na literatura especializada e atualmente, a lista destas substÃncias vem aumentando consideravelmente. O estudo da aÃÃo da hipertermia associada a alguns agentes antiangiogÃnicos tem sido sugerida uma vez que os vasos tumorais ao encontrarem-se dilatados, nÃo promoverÃo a diminuiÃÃo da temperatura no tecido tumoral e, consequentemente, os efeitos desta associaÃÃo serÃo mais intensos do que no tecido normal devendo contribuir para a morte celular. Objetiva-se neste trabalho, avaliar o efeito antitumoral e antiangiogÃnico da hipertermia induzida por US isolada e combinada com etoricoxibe e pegaptanibe,no carcinossarcoma de Walker 256 implantado na tela subcutÃnea do dorso de ratos por meio de utilizaÃÃo do modelo experimental de hipertermoterapia por US assim como o estudo dos efeitos da hipertermia por US isolada e em combinaÃÃo com etoricoxibe e pegaptanibe,na angiogÃnese tumoral.O mÃtodo utilizado para o estudo teve inÃcio com o implante de cÃlulas de tumor de Walker 256 no dorso de ratos Wistar machos. Os animais foram tratados com hipertermia aplicada atravÃs de aparelho de ultrassom, mantida a nÃvel de 45o C durante cinco minutos no terceiro dia apÃs a inoculaÃÃo e tambÃm tratados com etoricoxibe e pegaptanibe por via oral e intraperitoneal respectivamente a partir do dia da inoculaÃÃo. Cada grupo de animais foi submetido a medidas do crescimento tumoral durante o perÃodo de 30 dias, assim como tambÃm à avaliaÃÃo da microdensidade vascular atravÃs de estudo mesoscÃpico fotogrÃfico, validado pelo estudo microscÃpico. A aplicaÃÃo do calor atravÃs de aparelho de ultrasom demonstrou eficiÃncia e agilidade A hipertermia, o etoricoxibe e o pegaptanibe, apresentaram capacidade antiangiogÃnica, expressada tanto pela curva de sobrevida, como pela avaliaÃÃo da microdensidade vascular. Particularmente, a hipertermia isoladamente apresentou um efeito antiangiogÃnico significativo tanto na curva de crescimento tumoral como na diminuiÃÃo da densidade microvascular. A associaÃÃo da hipertermia com o pegaptanibe, demonstrou uma eficiÃncia na diminuiÃÃo da densidade microvascular significativamente maior do que os demais grupos. O modelo de aplicaÃÃo de hipertermia gerada por um aparelho de ultrassom na modalidade contÃnua foi satisfatÃria, demonstrando ter sido efetiva tanto na diminuiÃÃo do crescimento tumoral, como na diminuiÃÃo da densidade microvascular. / The traditional methods of cancer treatment, like the chemotherapy and radiotherapy, even though they are effective in many types of tumours, they find frequently resistant neoplasic cellsâ population, beyond presenting a low security margin to the patients. The hyperthermia use associated to the chemotherapy and radiotherapy are plenty mentioned as profitable in the specialist literature, especially in patients with cancer in advanced stage, submitted previously to the classic methods of the treatment. The tissuesâ heat insertion through the continuous ultrasound becomes the procedure faster and with proved efficacy. The antiangiogenic use also is being related like effective in the specialist literature and, at this moment, the substancesâ list has grown vastly. The study of the hyperthermia action associated to antiangiogenic agents has been suggested, once the tumour vessels are dilated, would not promote the temperature reduction in the tumour vessels and, therefore, the effects of this association would be more intense than in the normal tissue, what might contribute to the death cell. The study objective is to evaluate the antitumor and antiangiogenic effect of the hyperthermia induced by isolated ultrasound and combined with etoricoxibe and pegaptanibe in the 256 Walker carcinossarcoma implanted in the subcutaneous back screen of mouse by using the hyperthermia experimental model by ultrasound, like the hyperthermia effects study by isolated ultrasound and linked with etoricoxibe and pegaptanibe, in the tumour angiogenesis. The method used describes the insertion of 256 Walker Tumour cells in the back of male Wistar mouse. The animals were treated with hyperthermia applied through the ultrasound equipment, kept to a 45 C level during five minutes in the third day after the inoculation and also treated with etoricoxibe and pegaptanibe by oral and intraperitoneal respectively since the inoculation day. Each animal group was submitted to a tumour growth measurement during a period of 30 days, as well as also a vascular microdensity evaluation through a photographic mesoscopic study, validated by the microscopic study. The heat application through the ultrasound equipment demonstrated efficiency and agility. The hyperthermia, the etoricoxibe and the pegaptanibe showed antiangiogenic capacity, expressed by the over life curve, and also by the vascular microdensity evaluation. Particularly, the isolated hyperthermia showed a significative antiangiogenic effect in the tumour growth curve and also in the decreasing of the micro vascular density. The association between the hyperthermia and the pegaptanibe demonstrated a greater efficiency in the reducing of the micro vascular density than the other groups. The hyperthermia application model generated by the ultrasound equipment in the continuous modality was satisfactory, demonstrating by being effective as much in the reducing of the tumour growth as in the decreasing of the micro vascular density.

A TFD é considerada uma nova terapia minimamente invasiva destinada ao tratamento e destruição seletiva de diversos tipos de cânceres. Objetivo foi avaliar se os efeitos do azul de metileno fotoativado podem desencadear processos inflamatórios interferindo no desenvolvimento e na progressão tumoral. Os resultados demonstraram que o grupo tratado com 0.1% de azul de metileno+1J provocou um aumento estatísticamente significativo quando comparado em relação aos diferentes grupos tratados nos níveis e na expressão gênica dos diferentes marcadores inflamatórios, na geração EROS e MPO. Análise histológica complementou com os resultados anteriores, indicando que neste grupo há alterações morfológicas representadas por áreas de necrose na massa tumoral sólida com presença neutrofílica. Concluímos que há indícios que o tratamento 0.1% azul de metileno+ 1J foi capaz de gerar efeitos citotóxicos que por consequência aumentou a expressão dos mediadores inflamatórios promovendo inflamação e finalmente induzindo morte celular. / PDT is considered a new minimally invasive therapy for the treatment and selective destruction of various types of cancers. The objective was to evaluate the effects of methylene blue light activated may trigger inflammatory processes interfering with the development and tumor progression. The results showed that the group treated with 0.1 % methylene blue +1 J caused a statistically significant increase levels and gene expression of different inflammatory markers in ROS generation and MPO when compared at the different treat groups. Histological analysis complemented with previous results, indicating that there are morphological changes represented by areas of necrosis in the solid tumor mass with neutrophil presence in this group. We conclude that there is evidence that treatment 0.1 % methylene blue + 1J was able to generate cytotoxic effects therefore increased expression of inflammatory mediators, promoting inflammation and finally inducing cell death.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / IntroduÃÃo: As drogas quimioterÃpicas convencionais nÃo tÃm obtido sucesso no tratamento do cÃncer gÃstrico. O paclitaxel (TaxolÂ) mostrou ser efetivo no tratamento dos cÃnceres de ovÃrio, mama e pulmÃo. O 5-fluorouracil (5-FU) tem apresentado resultados promissores no tratamento do cÃncer de cÃlon. O Ãcido folÃnico (LeucovorinÂ) potencializa a citotoxicidade do 5-fluorouracil. Estudos desen-volvidos no JapÃo, Estados Unidos e Europa vÃm sugerindo o uso de quimioterapia associada à hiper-termia no controle da doenÃa localmente avanÃada. Objetivos: Avaliar a influÃncia do paclitaxel, 5-fluorouracil e 5-fluorouracil mais Ãcido folÃnico, isolados e associados à hipertermia, na sobrevida de ratos com tumor de Walker 256 implantados no estÃmago, e observar o comportamento do tumor de Walker 256 original implantado em estÃmagos de rato sem tratamento e submetidos aos tratamentos quimioterÃpicos propostos, associados à hipertermia. MÃtodos: Implantou-se o tumor de Walker 256 na mucosa gÃstrica de rato no 3o, 7o, e 10o dias de inoculaÃÃo do tumor. Os animais foram tratados com paclitaxel, 5-fluorouracil e 5-fluorouracil mais Ãcido folÃnico, isolados e associados à hipertermia. Foram administrados paclitaxel na dose de 25 mg/m2, 5-fluorouracil na dose de 130 mg/m2 e Ãcido folÃnico na dose de 7 mg/m2. A Hipertermia de Corpo Inteiro foi iniciada 2 horas apÃs a administraÃÃo dos quimioterÃpicos, tendo duraÃÃo de 1 hora. Resultados: Os animais inoculados com tumor apresentaram uma sobrevida de 13,25  0,53. Os animais tratados com Paclitaxel isolado apresentaram sobrevida de 28,61  0,82; 20,92  1,77 e 20,07  0,60 no 3o, 7o e 10o dias, respectivamente, e aqueles trata-dos com Paclitaxel + hipertermia apresentaram sobrevida de 19,17  1,20; 22,54  1,47 e 17,92  1,06 nos mesmos perÃodos. Os animais tratados com 5-fluorouracil isolado apresentaram sobrevida de 16,16  0,52; 15,57  0,57 e 17,94  0,46 no 3o, 7o e 10o dias, respectivamente, e aqueles tratados com 5-fluorouracil + hipertermia apresentaram sobrevida de 14,45  0,36; 16,36  0,81 e 18,37  1,86 nos mesmos perÃodos. Os animais tratados com 5-fluorouracil + Ãcido folÃnico apresentaram sobrevida de 14,89  0,71; 16,56  0,91 e 16,11  0,67 no 3o, 7o e 10o dias, respectivamente, e aqueles tratados com 5-fluorouracil + Ãcido folÃnico + hipertermia apresentaram sobrevida de 17,60  1,22; Â15,42  0,31 e 15,45  0,39 nos mesmos perÃodos. ConclusÃes: O tumor experimental de Walker 256 à um tumor de pequenas cÃlulas. A hipertermia associada à quimioterapia, com paclitaxel, 5-fluorouracil, 5-fluorouracil mais Ãcido folÃnico como tratamento do tumor de Walker experimental implantado nos estÃmagos de rato Wistar, nÃo melhorou a sobrevida. / Introduction: The conventional chemotherapy drugs have not obtained success on the treatment of gastric cancer. The paclitaxel (TaxolÂ) showed to be effective on treating lung, breast and ovarian cancer. The 5-fluorouracil (5-FU) has shown promising results on the treatment of colon cancer. The folinic acid (LeucovorinÂ) reinforces the 5-FU cytotoxicity. Studies developed in Japan, United States and Europe suggest the use of chemotherapy associated with hyperthermia on the control of locally advanced disease. Objectives: Evaluate the influence of paclitaxel, 5-fluorouracil and 5-fluorouracil plus folinic acid, isolated and associated with hyperthermia, on the survival of rats with Walker 256 tumor implanted on their stomach, and observe the behavior of the original Walker 256 tumor implanted in the stomach of rats with no treatment and with the proposed chemotherapy treatments associated with hyperthermia. Methods: The Walker 256 tu-mor was implanted on the mucous layer of the rat stomach on the 3rd, 7th and 10th day after inoculation. The animals were treated with paclitaxel, 5-fluorouracil and 5-fluorourcil plus folinic acid isolated and associated with hyperthermia. Paclitaxel 25 mg/m2, 5-fluorouracil 130 mg/m2 and folinic acid 7 mg/m2 were used. The Whole-Body Hyperthermia was initiated 2 hours after the administration of the chemotherapic drugs, with 1 hour of duration. Results: The animals in-oculated with tumor showed a survival of 13.25  0.53. The animals treated with Paclitaxel isolated showed a survival of 28.61  0.82; 20.92  1.77 and 20.07  0.60 in the 3rd, 7th and 10th days, respectively, and those treated with Paclitaxel + hyperthermia showed a survival of 19.17  1.20; 22.54  1.47 and 17.92  1.06 in the same periods. The animals treated with 5-fluorouracil isolated showed a survival of 16.16  0.52; 15.57  0.57 and 17.94  0.46 in the 3rd, 7th and 10th days, respectively, and those treated with 5-fluorouracil + hyperthermia showed a survival of 14.45  0.36; 16.36  0.81 and 18.37  1.86 in the same periods. The animals treated with 5-fluorouracil + folinic acid showed a survival of 14.89  0.71; 16.56  0.91 and 16.11  0.67 in the 3rd, 7th and 10th days, respectively, and those treated with 5-fluorouracil + folinic acid + hyperthermia showed a survival of 17.60  1.22; 15.42  0.31 and 15.45  0.39 in the same periods. Conclusions: The Walker 256 is a small cell tumor. The hyperthermia associated with chemotherapy using pacli-taxel, 5-fluorouracil and 5-fluorouracil plus folinic acid as treatment of Walker experimental tu-mor implanted in Wistar rat stomachs do not improved the survival.