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Alterações hepáticas por exposição a baixas doses de metilmercúrio em macacos prego, Cebus apella (Linnaeus 1758)

SILVA, Márcia Cristina Freitas da 16 September 2011 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2012-09-20T20:04:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AlteracoesHepaticasExposicao.pdf: 2234597 bytes, checksum: 5e5b1e0600a9fb53f88f0a4080ed1ad7 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2012-09-28T12:30:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AlteracoesHepaticasExposicao.pdf: 2234597 bytes, checksum: 5e5b1e0600a9fb53f88f0a4080ed1ad7 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-28T12:30:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AlteracoesHepaticasExposicao.pdf: 2234597 bytes, checksum: 5e5b1e0600a9fb53f88f0a4080ed1ad7 (MD5) Previous issue date: 2011 / Cebus apella foram expostos a 1,5 ppm de metilmércurio (metilHg) na dieta por 120 dias. Foi investigado a hepatotoxicidade do metilHg, as concentrações no sangue total foram monitoradas a cada 30 dias usando espectrofotômetro de absorção atômica a vapor frio Hg201, as transaminases (ALT e AST) e bilirrubina total (BT) foram dosadas no decorrer da exposição. O fígado foi fixado com formaldeido 10%, e preparado por protocolos da histopatologia. Foi observada diferença significativa entre os grupos exposto e controle, quanto aos níveis de Hgtotal, nos períodos de 60, 90 (P < 0,05) e 120 dias (P < 0,01). A histopatologia revelou esteatose moderada e degeneração hidrópica, um achado comum em exposição ao metilmercúrio em muitas outras espécies. Não foi observada diferença significativa entre os níveis de AST (p= 0.38), ALT (p= 0.83) e BT (p= 0.07) do grupo controle e exposto. A correlação de Pearson com Hgtotal demonstrou correlação negativa ( AST r= -0,7; ALT r=0,07; BT r= -0,3 e p > 0,05), o que sugere a necessidade de novos estudos para esclarecer o nível de alerta da concentração de mercúrio e das dosagens hepáticas. / Cebus apella were exposed to 1,5 ppm methylmercury (methylHg) in the diet for 120 days. Hepatotoxicity was investigated, concentrations of mercury in total blood were monitored each 30 days using atomic absorption spectrometry with cold vapor Hg201, aspartate transaminase (AST), alanine transaminase (ALT) and total bilirubin (BT) were determined. Liver was fixed by formaldehyde 10% and prepared by histopathology protocols. Significant difference was observed in groups exposed and control about total mercury (Hgtotal) in the periods of 60, 90 (P < 0,05) and 120 days (P < 0,01). The histopathology revealed moderate steatosis and hydropic degeneration, common in methylHg exposed in other species. No Significant difference between the levels of AST (p= 0.38), ALT (p= 0.83) and BT (p= 0.07) in groups exposed and control. The Pearson correlation with Hgtotal was negative (AST r= -0,7; ALT r=0,07; BT r= -0,3 e p > 0,05), suggests another studies to clarify the alert levels of mercury concentrations and liver dosages.
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Avaliação dos marcadores de injúria miocárdica induzida pela exposição ao metilmercúrio em modelos experimentais de primatas do novo mundo (Cebus Apella)

MAGNO, Ismaelino Mauro Nunes 10 July 2009 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2013-03-14T20:10:45Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Tese_AvaliacaoMarcadoresInjuria.pdf: 8154334 bytes, checksum: 3dc986140877c9a843badfb9d76d7b96 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2013-03-18T17:10:28Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Tese_AvaliacaoMarcadoresInjuria.pdf: 8154334 bytes, checksum: 3dc986140877c9a843badfb9d76d7b96 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-18T17:10:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Tese_AvaliacaoMarcadoresInjuria.pdf: 8154334 bytes, checksum: 3dc986140877c9a843badfb9d76d7b96 (MD5) Previous issue date: 2009 / FAPESPA - Fundação Amazônia de Amparo a Estudos e Pesquisas / Este estudo teve como objetivo analisar os efeitos dos mecanismos de injúria celular que produzem lesão no coração do macaco Cebus apella expostos durante 120 dias consecutivos com doses diárias de 1,5 mg de metilHg, através de alterações detectadas no marcador bioquímico de lesão miocárdica CK-MB, nos achados histopatológicos assim como pela técnica de imuno-marcação de células apoptóticas. Para tanto foram relacionados os perfis séricos da CK-MB, CK total, AST, ALT, uréia, creatinina e bilirrubina total com os achados histopatológicos e imunohistoquímicos no processo de acometimento do músculo cardíaco durante a exposição ao metilHg, comparando com o grupo controle. O método utilizado para dosagem e análise das substâncias bioquímicas séricas e para a dosagem de mercúrio no sangue foi o cinético ultravioleta e espectrometria de absorção atômica, respectivamente; para análise histopatológica utilizou-se a técnica de Hematoxilina Eosina e para detecção dos perfis apoptóticos o método APOPTAG. Foram obtidas consideráveis informações que permitem correlacionar as alterações bioquímicas, histopatológicas e os perfis apoptóticos ao mecanismo do acometimento cardíaco nos três animais expostos ao metilHg comparando-os com o grupo controle. Verificou-se que de todas as substâncias bioquímicas analisadas, houve apenas acentuado aumento sérico da enzima CK-MB, enquanto que na histopatologia observou-se lesão celular reversível por acúmulo de água nos três órgãos analisados (coração, fígado e rim). Destaca-se também a observação de uma nítida marcação células apoptóticas no tecido cardíaco, hepático e renal dos animais expostos, evidenciando-se maior número de células positivas nas células dos túbulos renais, ressaltando que não se observou infiltrado inflamatório em torno destes elementos descritos em nenhum dos tecidos analisados e ausência das referidas lesões nos tecidos dos três animais controle. Concluiu-se que a enzima CK-MB, a degeneração hidrópica e o mecanismo de apoptose podem ser indicadores de lesão miocárdica na exposição aguda ao metilHg, cuja etiopatogenia pode estar relacionada a descompensação mitocondrial pelo comprometimento maciço na bomba de Na+ / K+ e Ca++. Fazendo-se necessário um maior aporte de estudos experimentais que venham esclarecer com precisão a etiopatogenia, o mecanismo de agressão e injúria celular em indivíduos expostos a doses tóxicas de metilHg. / This study aimed to examine effects of the mechanisms of injury producing cellular damage in the heart of the monkey Cebus apella exposed for 120 consecutive days, with daily dose of 1.5 methyl Hg, by changes detected in biochemical markers of myocardial injury CK - MB, the histopathological findings as well as the technique of immunolabeling of apoptotic cells. For that, we related to the serum profiles of CK-MB, total CK, AST, ALT, urea, creatinine and total bilirubin with the histopathological and immunohistochemical findings in the involvement of the heart muscle during exposure to methyl Hg, and compared with a control group. The method used for determination and analysis of the serum and the determination of mercury in blood was the kinetic ultraviolet; atomic absorption spectroscopy, respectively; for histopathological analysis used the technique of Hematoxylin and Eosin; and for detection of apoptotic profiles the method APOPTAG. Was obtained information that correlate the biochemical changes, histopathologic profiles and apoptotic mechanism of cardiac involvement in three animals exposed to methyl Hg, when compared with control group. Among all substances of biochemical analysis were found that there was only marked increase of serum CK-MB enzyme, whereas, the histopathologic analysis showed reversible cell damage by accumulation of water in the three organs examined (heart, liver and kidney). It is also the observation of a clear labeling of apoptotic cells in heart, liver and kidney tissues of exposed animals, showing a higher number of positive cells in cells of renal tubules. Emphasizing that there was no inflammatory infiltrate around these tissues described and analyzed, and was there absence of such lesions in tissues of three control animals. It was concluded that the enzyme CK-MB, the hydropic degeneration and the mechanism of apoptosis may be indicators of myocardial injury in acute exposure to methyl Hg whose pathogenesis could be related to mitochondrial decompensation because massive commitment of the Na + / K + and Ca + + pumps. Requiring a greater intake of experimental studies that can clarify the exact pathogenesis, the mechanism of cellular injury and aggression in individuals exposed to toxic doses of methyl Hg.
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Memória espacial e morfometria tridimensional da micróglia de CA1 e do giro denteado do Cebus apella

SANTOS FILHO, Carlos 25 October 2013 (has links)
Submitted by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2013-11-27T13:44:10Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Tese_MemoriaEspacialMorfometria.pdf: 6106221 bytes, checksum: ecfc4fdd9e9bfffc384f47f2e43a9ffc (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2013-12-03T17:23:29Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Tese_MemoriaEspacialMorfometria.pdf: 6106221 bytes, checksum: ecfc4fdd9e9bfffc384f47f2e43a9ffc (MD5) / Made available in DSpace on 2013-12-03T17:23:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Tese_MemoriaEspacialMorfometria.pdf: 6106221 bytes, checksum: ecfc4fdd9e9bfffc384f47f2e43a9ffc (MD5) Previous issue date: 2013 / O presente trabalho tem o intuito de Investigar possíveis correlações entre a morfologia da micróglia do hipocampo e giro denteado e o desempenho cognitivo individual em teste de memória espacial no Cebus apella. Devido ao bom desempenho do Cebus apella em tarefas cognitivas hipocampo-dependentes, utilizou-se testes selecionados da Bateria Cambridge de Testes Neuropsicológicos (CANTAB) utilizada previamente com sucesso tanto em primatas do Velho Mundo quanto em humanos. Empregou-se o teste motor de adaptação a tela para checar a adaptação dos indivíduos à tela sensível ao toque e o teste de aprendizado pareado (TAP) para avaliar aprendizado e memória espacial. Para o estudo da correlação entre o desempenho individual no TAP da bateria CANTAB e a morfologia da micróglia, foi necessário reconstruir e analisar parâmetros morfométricos selecionados a partir de micróglias reconstruídas dos terços médio e externo da camada molecular do giro denteado e do lacunosum molecular de CA1, empregando microscopia tridimensional. A definição dos limites da formação hipocampal foi feita empregando-se critérios arquitetônicos previamente definidos. Para imunomarcação seletiva de micróglias foi utilizado o anticorpo policlonal (anti-Iba1) dirigido contra a proteína adaptadora ligante de cálcio ionizado Iba-1. A partir de procedimentos de estatística multivariada identificou-se a ocorrência de agrupamentos microgliais baseados em parâmetros morfométricos que permitiram a distinção de pelo menos dois grandes grupos microgliais em todos os indivíduos. Os resultados comportamentais expressos em taxa de aprendizado e alguns dos parâmetros morfométricos da micróglia dos terços externo e médio da camada molecular do giro denteado revelaram significativas correlações, lineares e não lineares. Em contraste, nenhuma correlação dessa natureza foi encontrada no lacunosum molecular de CA1. Nós sugerimos baseado no presente e em trabalhos anteriores que a correlação entre desempenho cognitivo e a complexidade estrutural da glia não é um atributo exclusivo dos astrócitos e que a morfologia da micróglia da camada molecular do giro denteado pode estar associada ainda que de forma indireta ao desempenho individual em testes de memória espacial. / This study aims to investigate possible correlations between the morphology of microglia in the hippocampus and dentate gyrus and cognitive performances in individual tests of learning and spatial memory in Cebus apella. Due to the good performance of Cebus apella in hippocampal-dependent cognitive tasks, we used selected tests of Cantab battery successfully used in Old World non-human primates and man. To adapt individuals to the touch screen and to assess spatial learning and memory, Motor Screening Test (MOT) and Paired Associated Learning Test (PAL) were used respectively. To detect possible correlations between microglial morphology and individual performances in the spatal learning and memory tasks, it was necessary to reconstruct and analyze microglial morphological details from the middle and outer one-thirds of the dentate gyrus molecular layer and from the lacunosum molecular layer of CA1, employing three dimensional microscopy. The definition of the boundaries and layers of CA1 and dentate gyrus employed architectural criteria previously defined. For selective microglia immunostaining, it was used polyclonal antibody against the adapter binding ionized calcium Iba -1 protein (anti- Iba1). The occurrence of clusters after multivariate statistical analysis based on microglial morphometric parameters allowed the distinction of at least two major morphological groups of microglia in all individuals. The spatial learning rate and some of the morphometric parameters of microglia from dentate gyrus revealed significant linear and non-linear correlations. In contrast, CA1 did not show any correlation between microglial morphology and behavior. Based on the present and previous studies we suggest that the correlation between cognitive performances and complexity of morphological glial features is not an exclusive attribute of astrocytes and that microglial morphology of the molecular layer of dentate gyrus may be indirectly associated to the performance of individual tests of spatial memory.
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Expressão gênica e viabilidade de folículos pré-antrais inclusos em fragmentos de córtex ovarianos cultivados in vitro de macaco-prego (Sapajus apella)

BRITO, Adriel Behn de January 2011 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2014-01-27T17:38:58Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Dissertacao_ExpressaoGenicaViabilidade.pdf: 1020011 bytes, checksum: 6d7d985ee1bbd74238e1030e0549c524 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2014-01-29T14:04:09Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Dissertacao_ExpressaoGenicaViabilidade.pdf: 1020011 bytes, checksum: 6d7d985ee1bbd74238e1030e0549c524 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-01-29T14:04:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Dissertacao_ExpressaoGenicaViabilidade.pdf: 1020011 bytes, checksum: 6d7d985ee1bbd74238e1030e0549c524 (MD5) Previous issue date: 2011 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O objetivo desse trabalho foi analisar a ativação e o crescimento de folículos préantrais de Sapajus apella, submetidos a um sistema de cultivo in vitro em curto-prazo. Nesse sentido, dois experimentos foram realizados neste trabalho. Experimento I: exposição à fresco e à crioprotetores de biopsias de fragmentos do córtex ovariano. Ambos os fragmentos ovarianos foram submetidos à extração total de RNA e síntese de cDNA. Após a amplificação do cDNA por PCR em tempo-real (RT-PCR), os software GeNorm, bestkeeper e Normfinder foram usados para avaliar a estabilidade dos genes GAPDH (glyceraldehyde-2-phosphate dehydrogenase), HPRT1 (hypoxanthine phosphoribosyltransferase 1) e TBP (TATA-binding protein). Experimento II: o tecido do córtex ovariano de quatro fêmeas foi oletado e dividido em nove pedaços de 1 mm³. Um fragmento ovariano (grupo controle) foi imediatamente dividido em dois pedaços, os quais foram destinados para análise da viabilidade ou por RT-PCR. Os 8 fragmentos restantes foram individualmente cultivados in vitro em um meio constituído de TCM suplementado com 100 ng/mL EGF (T1), com adição de 10 μM de BME (T2), 100 ng/mL de BMP4 (T3), 25 IU de PMSG (T4), 10 μM de BME e 100 ng/mL de BMP4 (T5), 10 μM de BME, 25 IU de PMSG (T6), 100 ng/mL de BMP4, 25 IU de PMSG (T7) ou 10 μM de BME, 100 ng/mL de BMP4, 25 IU de PMSG (T8). Os resultados demonstraram que no tecido do córtex ovariano de S. apella, os genes HPRT1 e TBP foram os mais apropriados como genes de referência, podendo ser usados como parâmetro para normalizar dados em estudos futuros. Ao contrário, o GAPDH se apresentou como menos estável dos genes de referencia testados. Após o cultivo in vitro, todos os tratamentos alcançaram percentuais similares da viabilidade de folículos pré-antrais. O tecido ovariano cultivado na presença de GF+BME/BMP4/PMSG resultou no aumento da taxa de ativação e crescimento folicular, assim como no aumento da expressão de AMH, BMP15 e GDF9, genes conhecidos como indicadores específicos de desenvolvimento folicular. Dessa forma, o HPRT1 e TBP são os genes de referência mais estáveis, na exposição à crioprotetores, a fresco e no o cultivo de tecidos de córtex ovariano de S. apella. Os folículos pré-antrais são capazes de desenvolverem-se in vitro quando cultivados em meio suplementado com PMSG, BME e BMP4. A viabilidade folicular, entretanto, permaneceu independentemente do meio de cultivo in vitro e o uso de fatores de crescimento, como marcadores de desenvolvimento folicular, foi crucial para identificar o melhor meio de cultivo in vitro. / The aim of the present study was to investigate the stability of three reference genes in the ovarian tissue of capuchin monkeys (Sapajus apella) and to develop a short-term in vitro culture system for the activation and growth of preantral follicles from capuchin monkeys. To this end two experiment were conducted as follow. Experiment I: Fresh and cryoprotectant exposed ovarian biopsies were used. Both fresh and exposed ovarian tissues were subjected to total RNA extraction and synthesis of cDNA. After amplification of cDNA by real-time PCR, the GeNorm, Bestkeeper and Normfinder software were used to evaluate the stability of glyceraldehyde-2-phosphate dehydrogenase (GAPDH), hypoxanthine phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1) and TATA-binding protein (TBP). Experiment II: Ovarian tissue from four healthy mature females were collected and divided into nine ovarian cortical pieces of 1 mm³. One ovarian fragment (control) was immediately divided in two pieces, which were subjected to viability analysis or qRT-PCR. The remaining 8 fragments were individually cultured in vitro in a medium consisting of TCM supplemented with 100 ng/mL EGF (T1), either or not added with 10 μM BME (T2), 100 ng/mL BMP4 (T3), 25 IU PMSG (T4), 10 μM BME and 100 ng/mL BMP4 (T5), 10 μM BME, 25 IU PMSG (T6), 100 ng/mL BMP4, 25 IU PMSG (T7) or 10 μM BME, 100 ng/mL BMP4, 25 IU PMSG (T8). Results demonstrated that, in the ovarian tissue from capuchin monkeys, HPRT1 and TBP were the most suitable reference genes and thus could be used as parameters to normalize data in future studies. In contrast, GAPDH appeared as the least stable gene among the tested reference genes. After in vitro culture, all treatments resulted in similar percentages of viable preantral follicles. Ovarian tissue cultured in the presence of EGF + BME/BMP4/PMSG resulted in an increased rate of follicular activation and growth, as well as in the up regulation of AMH, BMP15 and GDF9, specific markers of follicular development. In conclusion, HPRT1 and TBP are the most stable reference genes in fresh and cryoprotectant exposed ovarian tissue from capuchin monkeys. Preantral follicles are able to develop in vitro when cultured in a medium supplemented with PMSG, BME and BMP4. Follicular viability, however, was maintained independently on the culture medium. The use of growth factors as markers of follicular development was crucial to identify the best culture medium.
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Expressão gênica e viabilidade de folículos ovarianos pré-antrais de Sapajus apella congelados e cultivados in vitro

BRITO, Danielle Cristina Calado de 05 March 2012 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2014-01-29T20:29:36Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ExpressaoGenicaViabilidade.pdf: 1672759 bytes, checksum: f731371d76d549439735b8deb95e258f (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2014-02-03T16:27:20Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ExpressaoGenicaViabilidade.pdf: 1672759 bytes, checksum: f731371d76d549439735b8deb95e258f (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-03T16:27:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ExpressaoGenicaViabilidade.pdf: 1672759 bytes, checksum: f731371d76d549439735b8deb95e258f (MD5) Previous issue date: 2012 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O objetivo do presente estudo foi desenvolver um protocolo de congelação para a preservação de folículos pré-antrais de Sapajus apella (macaco-prego). Para este fim, fragmentos ovarianos foram expostos à diferentes soluções crioprotetoras, adicionadas ou não por antioxidantes (selênio e trolox), congelados e cultivados in vitro por 24/horas. Análises morfológicas, ultraestruturais, de viabilidade e estresse oxidativo foram desenvolvidas. A coleta do material foi realizada no Centro Nacional de primatas (CENP) e nove macacos-prego maduras e saudáveis foram usadas. Biopsias ovarianas de 1 mm³ foram coletadas por laparoscopia exploratória. Os folículos coletados foram classificados de acordo com sua fase de desenvolvimento em primordial, primário ou secundário. A viabilidade folicular foi observada através da utilização de marcadores fluorescentes (Iodeto de propídeo e Hoechst) qRT-PCR foi usado para avaliar a expressão de hormônios e fatores de crescimento. O TEAC foi usado para mensurar o estresse oxidativo no tecido. Os resultados mostraram que a solução congelação contendo trolox não afetou a morfologia folicular e expressão gênica. A criopreservação resultou em elevadas taxas de viabilidade folicular quando o trolox estava presente na solução, porém a expressão de genes codificando BMP4 e KL foi negativamente afetada. Nossos achados mostraram um efeito favorável da adição do trolox à solução de congelação. Entretanto, a viabilidade folicular e expressão gênica foram afetados após cultivo in vitro. / The aim of the present study was to develop a freezing protocol for the preservation of preantral follicles from Sapajus apella (capuchin monkeys). To this end, ovarian fragments were exposed to different cryoprotectant solutions, added or not by antioxidants (selenium or trolox), frozen and in vitro cultived by 24 hours. Morphology, ultrastructure, viability, oxidative stress and mocelular analyses were performed. The collection site was in the Primates Nacional Center (CENP) and nine healthy mature female capuchin monkeys were used. Ovarian biopsies of 1 mm3 were collected by laparoscopy. The follicles were classified accordingly to their developmental phase in primordial, primary or secondary. Follicular viability scored using fluorescent markers (propidium iodide and Hoechst). qRT-PCR was used to evaluate the expression of hormones and growth factors. TEAC was used to measure oxidative stress in the tissue. In cryoprotectant solution containing trolox did not affected follicular morphology and gene expression. Cryopreservation resulted in higher rates of follicular viability when trolox was present in the solution, but expression of genes encoding BMP4 and KL was negatively affected. Our findings show a favorable effect of adding trolox to a cryopreservation solution. However, follicular viability and gene expression was affected after in vitro culture.
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Procedimentos de treino e teste de relações entre estímulos em Cebus apella / Training and testing procedures of stimulus relations in Cebus apella

BRINO, Ana Leda de Faria 08 April 2007 (has links)
Made available in DSpace on 2011-03-23T21:19:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Item created via OAI harvest from source: http://www.bdtd.ufpa.br/tde_oai/oai2.php on 2011-03-23T21:19:27Z (GMT). Item's OAI Record identifier: oai:bdtd.ufpa.br:201 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Complex learning encompasses the control by abstract relations after some relations have been directly trained. In these work, a sequence of experiments investigated stimulus relations learning in two capuchin-monkeys (Cebus apella) involving direct training of identity relations, successive tests of generalized identity, direct training of arbitrary relations, and test for symmetric relations as indication of equivalence class formation. Three theoretical foundations were followed: 1) Equivalence class formation is a basic stimulus function; 2) Stimulus control topography coherence theory; and 3) A version of the personalized system of instruction as an alternative to establish relational repertoires in non-verbal organisms. The subjects presented high levels of performance in identity and arbitrary conditional discriminations. The subjects given generalized identity tests demonstrated that abstract relation; the subject given arbitrary training presented negative results in the test for symmetric performances. Stimulus relations learning problems found here with nonhuman subjects seem to be similar to that presented by human individuals with retarded development. Teaching procedures for retarded individuals were sufficient to solve most repertoire deficiencies of non-humans, which are usually attributed to species limitations. / A aprendizagem complexa abrange o controle por relações abstratas após a exposição a relações diretamente treinadas. Neste trabalho, uma seqüência de experimentos investigou a aprendizagem de relações entre estímulos em dois macacos prego (Cebus apella) envolvendo o treino direto de relações de identidade, testes sucessivos de identidade generalizada, o treino direto de relações arbitrárias e teste de relações simétricas como indicação da formação de classes de equivalência. Três bases teóricas foram seguidas: 1) A formação de classes de equivalência é uma função básica de estímulo 2) A teoria da coerência de topografia de controle de estímulos, e 3) Uma versão do sistema personalizado de instrução como uma alternativa para estabelecer repertórios relacionais em organismos não-verbais. Os sujeitos apresentaram altos níveis de desempenho em discriminações condicionais de identidade e arbitrárias. Os sujeitos expostos a testes de identidade generalizada demonstraram essa relação abstrata; o sujeito exposto ao treino arbitrário apresentou resultados negativos no teste de desempenhos simétricos. A maioria dos problemas de aprendizagem de relações entre estímulos encontrados aqui com não-humanos parece similar aos problemas apresentados por indivíduos com desenvolvimento retardado. Os procedimentos de ensino para indivíduos com retardo foram suficientes para solucionar grande parte das deficiências de repertório de não-humanos, as quais geralmente são atribuídas a limitações da espécie.
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Topografia de controle de estímulos coerente em testes repetidos de pareamento ao modelo por identidade / Stimulus control topography coherence in repeated identity matching-to-sample tests

BRINO, Ana Leda de Faria 02 January 2003 (has links)
Made available in DSpace on 2011-03-23T21:19:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Item created via OAI harvest from source: http://www.bdtd.ufpa.br/tde_oai/oai2.php on 2011-03-23T21:19:41Z (GMT). Item's OAI Record identifier: oai:bdtd.ufpa.br:317 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / In the context of matching-to-sample procedures with human subjects, after teaching some conditional relations, emergent performances, that are reflexive, symmetric, and transitive to directly taught relations, are often verified, fact that is not easily observed with nonhumans. These negative outcomes may be attributed to testing in extinction and consequent performance disruption. The objective of this study was to create testing conditions in extinction in order to overcome these problems. The subject was a capuchin monkey, which, as a result of his experimental history, could perform identity matchingto- sample (IDMTS) tests with reinforcement successfully. A zero delay IDMTS was used. Repeated tests of IDMTS and generalized IDMTS were arranged in a way that the test trials were interspersed with baseline ones. Tests with reinforcement were alternated with tests in extinction. These conditions were sufficient to maintain performance well above chance for the great most tests (20 out of 21). Capuchin monkey showed capacity to perform, succesfully, IDMTS with new stimuli with or without reinforcement. / No contexto de procedimentos de pareamento ao modelo com sujeitos humanos, após o ensino de algumas relações condicionais, desempenhos emergentes, que são reflexivos, simétricos e transitivos às relações diretamente ensinadas são geralmente verificados, fato que não é facilmente observado com não humanos. Esses resultados negativos podem ser atribuídos a testes em extinção e conseqüente deterioração de desempenho. O objetivo deste estudo foi criar condições de teste em extinção a fim de superar esses problemas. O sujeito foi um macaco-prego, o qual, como resultado de sua história experimental, era capaz de realizar com sucesso testes de pareamento ao modelo por identidade (IDMTS)com reforçamento. Foi usado um procedimento IDMTS com atraso zero. Testes repetidos de IDMTS e IDMTS generalizado foram arranjados de forma que as tentativas de teste foram inseridas entre tentativas de linha de base. Testes com reforçamento foram alternados com testes em extinção. Estas condições foram suficientes para manter o desempenho bem acima do acaso na grande maioria dos testes (20 de um total de 21). O macaco-prego mostrou capacidade de desempenhar IDMTS com sucesso, com novos estímulos, com ou sem reforçamento.
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Procedimentos para determinação e identificação de relações de controle em tarefas de IDMTS em Cebus apella / Procedures to produce and identify stimulus control relations in identity matching-to-sample tasks with Cebus apella

BEZERRA, Débora da Silva January 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2011-03-23T21:19:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Item created via OAI harvest from source: http://www.bdtd.ufpa.br/tde_oai/oai2.php on 2011-03-23T21:19:41Z (GMT). Item's OAI Record identifier: oai:bdtd.ufpa.br:320 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Obtaining Type S and Type R control relations in Identity MTS (IDMTS) tasks may make possible the development of an accurate observing repertoire towards all the stimuli (S+ and S-). In this work, a sequence of procedures was used to generate or identify possible stimulus control relations present in IDMTS training and tests. The purposes of the present work were: a) verify the viability of the use of the mask procedure (blank comparison procedure) to identify or determine stimulus control relations in IDMTS tasks with capuchin monkeys, and b) evaluate the efficacy of this procedure to test for stimulus control relations. Two male capuchin monkeys (Cebus apella) with previous experimental history participated. An experimental chamber equipped with a PC and touch screen monitor was used for stimulus presentation and response recording. In Experiment I, the subjects were given two-choice IDMTS training, mask procedure training, and biasing procedure training with the purpose of generating Type S and/or Type R stimulus control relations. Then, tests for stimulus control relations with mask procedure and new stimulus procedure were carried out. In Experiment II, we trained four-choice IDMTS tasks and tested for stimulus control relations via mask procedure. The results from Experiments I and II suggest that mask procedure was not effective to produce Type S and Type R stimulus control simultaneously, as well as the biasing procedure was partly effective to generate the expected Type S stimulus control. Forthcoming research, including better preparation for the blank comparisons effectively function as masks, has to be carried out. Research on this topic may bring up procedural variables that occasionally may be implied in the difficulty to obtain, for example, equivalence class formation in non-human subjects. / A obtenção de relações de controle Tipo S e Tipo R em tarefas de emparelhamento ao modelo por identidade (IDMTS) podem viabilizar o desenvolvimento de um repertório preciso de observação em relação a todos os estímulos (S+ e S-). Neste trabalho, uma seqüência de procedimentos foi utilizada com vistas a gerar ou identificar possíveis relações de controle presentes em treinos e testes de IDMTS. Este trabalho objetivou: a) verificar a viabilidade do uso do procedimento de máscara (comparação vazio) para identificação ou determinação de relações de controle em tarefas de IDMTS com macacos-prego e b) avaliar a eficácia desse procedimento em testes de relação de controle. Participaram deste estudo dois macacos-prego (Cebus apella) machos, com história experimental. Utilizou-se uma câmara experimental com um microcomputador equipado com tela sensível ao toque para apresentação dos estímulos e registro das respostas. No Experimento I, os sujeitos foram submetidos a treino de IDMTS com dupla escolha, treino com utilização do procedimento de máscara e enviezamento os quais visavam gerar controle Tipo S e R. Então, testes de relação de controle com máscara e estímulos novos foram efetuados. No Experimento II, foram realizados treinos de IDMTS com quatro estímulos e quatro escolhas simultâneas e testes de relações de controle via procedimento de máscara. Os resultados dos Experimentos I e II sugerem que o procedimento de máscara não foi efetivo para produzir controle Tipo S e Tipo R simultaneamente, assim como o procedimento de enviezamento foi parcialmente efetivo para gerar o controle por seleção esperado. O procedimento com quatro escolhas foi mais eficaz que os demais para produzir o controle Tipo S. Pesquisa posterior incluindo maior preparação para o funcionamento das comparações vazias efetivamente como máscaras deve ser conduzida. Pesquisas nesta linha de investigação poderão elucidar variáveis de procedimento que eventualmente possam estar envolvidas nas dificuldades de obtenção, por exemplo, de formação de classes de equivalência em sujeitos não-humanos.
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Cognição animal: identidade generalizada e simetria em macaco-prego (Cebus apella) / Animal cognition: generalized identity and symmetry in capuchin monkey (Cebus apella)

SANTOS, José Ricardo dos 2003 February 1914 (has links)
Made available in DSpace on 2011-03-23T21:19:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Item created via OAI harvest from source: http://www.bdtd.ufpa.br/tde_oai/oai2.php on 2011-03-23T21:19:42Z (GMT). Item's OAI Record identifier: oai:bdtd.ufpa.br:328 / Complex behavioral repertories, such as generalized identity matching and equivalence classes, have been easily found in normal humans, children, and youngsters with learning deficits. However, it is not easy to find such a positive results with non-human subjects. Symmetry is one of the most difficultly found defining properties of equivalence in nonhumans. It might happen because symmetry involves sample-comparison function reversals as well as modification in the sequence and position of stimuli presentation. The negative results in obtaining generalized identity matching and equivalence class formation in non-humans subjects may be related to incoherence between the SCT (Stimulus Control Topography) planned by the experimenter and the SCT presented by the subjects. So it suggests the necessity of a more specific methodological development. The present study proposed to apply the training and testing experimental procedures to obtain generalized identity matching and to verify the possibility of emergence of symmetry after arbitrary matching to sample training, through sample stimulus control shaping procedure and in the absence of correlation between the function and the positions of the stimuli. One capuchin monkey (Cebus apella) served as subject. He was young-adult and naive. Two experiments were executed. In the Experiment I, we carried out simple discrimination reversals training, conditional discrimination training, with an identity matching to sample procedure, and generalized identity test in extinction. The results showed that the procedure used to train simple discrimination (and reversals) was efficient as well as the procedure to train identity matching. All generalized identity tests reached positive results. In the Experiment II, we carried out arbitrary matching to sample training, with a sample stimulus shaping procedure in 8 steps, and one BA symmetry test. This study aimed to verify if elements positively related in conditional discriminations (AB training, for example) might be recombined by the subject without additional training. The performance of the subject in the BA symmetry test reached 100% of correct choices, showing that it is possible to obtain the property of symmetry in arbitrary conditional discriminations with non-humans subjects. The data also suggest that additional research has to be carried out in order to contribute to specifying the necessary conditions to obtaining complex repertory such as equivalence class formation in non-human subjects. / Repertórios comportamentais complexos, tais como identidade generalizada e classes de equivalência, têm sido encontrados com relativa facilidade em sujeitos humanos ditos normais, assim como em crianças e adolescentes com déficit de aprendizagem, porém, com extrema dificuldade em sujeitos não-humanos. Uma das propriedades definidoras de equivalência mais difíceis de obter com não humanos é a simetria, provavelmente por envolver, além das reversões das funções de modelo e comparação dos estímulos, também mudanças na seqüência e na posição de apresentação dos estímulos. O insucesso na obtenção de identidade generalizada e formação de classes de equivalência em sujeitos não-humanos pode estar ligado à incoerência entre a Topografia de Controle de Estímulos planejada pelo experimentador e a desenvolvida pelos sujeitos, sugerindo a necessidade de desenvolvimento metodológico mais específico. O presente estudo buscou aplicar procedimentos experimentais de treino e teste para a obtenção de identidade generalizada e verificar a possibilidade de emergência de simetria após treino de pareamento arbitrário ao modelo, via procedimento de modelagem do estímulo modelo e na ausência de correlação entre as funções modelo e comparação dos estímulos e suas posições. Foi utilizado um macaco-prego (Cebus apella) sub-adulto, experimentalmente ingênuo. Foram realizados dois experimentos. No Experimento I, foram efetuados treinos de reversões de discriminações simples, treinos de relações condicionais em um procedimento de pareamento ao modelo por identidade e teste de identidade generalizada em extinção. Os resultados indicam que o procedimento foi eficiente para o treino de discriminações simples e reversões, assim como para a aquisição de relações condicionais de escolha por identidade ao modelo. O procedimento foi eficaz na seleção do comportamento de escolha de acordo com o modelo por identidade generalizada, uma vez que todos os resultados dos testes de identidade generalizada foram positivos. No Experimento II, foram efetuados treinos de pareamento ao modelo arbitrário AB, utilizando procedimento de modelagem do estímulo modelo em 8 passos, e um teste de simetria BA. Este experimento visou verificar se os elementos positivamente relacionados em discriminações condicionais (num treino AB, por exemplo) poderiam ser recombinados pelo sujeito sem treino adicional. A performance do sujeito no teste de simetria BA atingiu a precisão de 100% de acertos, mostrando que é possível obter, com sujeitos não humanos, a propriedade de simetria em relações condicionais arbitrárias. Os dados justificam que novos estudos sejam realizados a fim de contribuir para a especificação das condições necessárias para a obtenção de repertório complexo como a formação de classes de equivalência em sujeitos não humanos.
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Reforçamento específico em treino de discriminações condicionais e teste de simetria com um macaco-prego (Cebus apella) / Specific reinforcement in conditional discrimination training and symmetry test with a capuchin monkey (Cebus apella)

KATAOKA, Katarina Bonfim 02 April 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2011-03-23T21:19:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Item created via OAI harvest from source: http://www.bdtd.ufpa.br/tde_oai/oai2.php on 2011-03-23T21:19:42Z (GMT). Item's OAI Record identifier: oai:bdtd.ufpa.br:329 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / It is possible that organisms have a basic relational capacity. Therefore, equivalence relations would be generated by the reinforcing contingencies. Inconsistent outcomes obtained in test of equivalence class formation would be due to experimental procedures of training and testing that are not capable to generate the performance planned. Building on the assumption that not only the discriminative stimuli, but also the response and reinforcers, if specific to each class, become members of the class, this study aimed to evaluate the performance of a capuchin-monkey (Cebus apella) with pre-experimental history in condicional discriminations and use of the blank comparison (mask), in tests of symmetry BA after training with specific reinforcement, pellets of food of the diferent flavors for each discrimination. During training, blank comparisons substituting S+ and Swere used, to assure controlling relations consistent with planned. After training, it was tested the symmetric relations, also with specific reinforcing, the outcome was inconsistent with the formation of classes. It is possible that more training sessions with specific. Reinforcement would be necessary, and/or the similarities between reinforcers of each class have allowed generalization between them. / É possível que organismos apresentem uma capacidade relacional básica. Sendo assim, relações de equivalência seriam geradas por contingências de reforçamento. Resultados inconsistentes obtidos em testes de formação de classes de equivalência seriam devido ao desenvolvimento de procedimentos experimentais insuficientes no sentido de gerar o desempenho planejado. Tomando como base a hipótese de que não apenas os estímulos antecedentes, mas também as respostas e estímulos reforçadores, se específicos para cada classe, tornam-se membros das mesmas, o presente trabalho avaliou o desempenho de um macaco-prego (Cebus apella), com história pré-experimental de discriminações condicionais de identidade e arbitrárias e uso de comparações vazias (máscaras), em testes de simetria BA após treino de discriminações condicionais com reforçamento específico, pelotas de alimento de sabor diferente para cada discriminação. Durante o treino foi usado o procedimento de máscara para garantir relações de controle coerentes com as planejadas. Após o treino, foi realizado o teste de simetria com reforçamento específico, cujos resultados foram inconsistentes com a formação de classes. É possível que o sujeito necessitasse de mais sessões de treino com reforçadores específicos e/ou que as similaridades entre os estímulos reforçadores de cada classe tenha gerado uma generalização entre eles, o que os tornaria não reforçadores específicos, mas sim, reforçadores comuns.

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