A acne vulgaris é uma patologia cutânea crônica que acomete a unidade pilossebácea resultando em hiperqueratinização, aumento da produção de sebo, inflamação e proliferação bacteriana nos folículos pilosos. Diversos fármacos estão disponíveis para o tratamento da acne, entretanto a combinação de tratamentos tópicos, com diferentes mecanismos de ação, apresentam uma melhor eficácia. Desse modo, o presente trabalho visa o desenvolvimento de um sistema nanocarreador contendo adapaleno e dapsona no intuito de promover melhor seletividade, aumentando a eficiência do tratamento e minimizando efeitos adversos. Neste contexto, desenvolveu-se e caracterizou-se físico-quimicamente uma formulação de nanocápsulas de núcleo lipídico contendo adapaleno e dapsona. A suspensão contendo 0,025 % de adapaleno e 0,07 % de dapsona apresentou diâmetro médio de 194,9 ± 0,42 nm, índice de polidispersão de 0,12 ± 0,02, potencial zeta -15 ± 1,2 mV, pH 5,1 ± 0,1 e eficiência de encapsulação próximos a 100 %. A avaliação da morfologia por microscopia eletrônica de transmissão demonstrou partículas esféricas, homogêneas de dimensões nanométricas. Através da análise de retroespalhamento de luz dinâmico (Turbiscan®) não se detectou fenômenos de instabilidade na formulação. Uma nanoemulsão, similarmente preparada, mas sem o uso do polímero, foi desenvolvida para comparação a fim de estabelecer o mecanismo de encapsulação dos fármacos. As suspensões foram incorporadas em veículos semissólidos, hidrogéis de Carpobol® 940, e os seguintes estudos foram realizados: comportamento reológico, pH, perfil de liberação, potencial de irritação (HET-CAM) e permeação cutânea in vitro. A determinação quantitativa dos ativos foi realizada por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), e os métodos analíticos foram desenvolvidos e validados de acordo com os códigos oficiais vigentes. As formulações apresentaram perfil não-Newtoniano pseudoplástico. No estudo de liberação in vitro, não houve diferença significativa entre as formulações contendo dapsona (p>0,05). Já para o adapaleno, não foi possível estabelecer o perfil de liberação in vitro por membrana de diálise. As formulações foram avaliadas como não irritantes pela técnica de HET-CAM. Através dos estudos de permeação cutânea foi possível quantificar os fármacos na epiderme e na derme, e quantidade não-significativa foi detectada no fluído receptor (p>0,05). Comparando as formulações de nanocápsula de núcleo lipídico e nanoemulsão, as quantidades de adapaleno e dapsona em cada camada da pele foi significativamente diferente (p<0,05). Em conclusão, os resultados obtidos até o presente momento demonstram que as nanocápsulas de núcleo lipídico são um sistema promissor para aplicação cutânea de adapaleno e dapsona. Contudo, estudos clínicos fazem-se necessários a fim de avaliar a efetividade da formulação no tratamento da acne. / Acne vulgaris is a chronic skin condition that affects the pilosebaceous unit resulting in hyperkeratinization, increased sebum production, inflammation and bacterial proliferation in hair follicles. Several drugs are available for treating acne, however the combination of topical treatments with different mechanisms of action presents greater effectiveness. Therefore, this study aims to develop a nanocarrier system containing adapalene and dapsone in order to promote better selectivity, increasing efficiency of treatment and minimizing adverse side effects. In this study, a suspension of lipid-core nanocapsules containing adapalene and dapsone was prepared by interfacial deposition of preformed polymer and characterized physicochemically. The suspension containing 0.025 % of adapalene and 0.07 % of dapsone showed an average diameter of 194.9 ± 0.42 nm, a polydispersity index of 0.12 ± 0.02, zeta potential -15 mV ± 1.2, pH 5.1 ± 0.1 and encapsulation efficiency approaching 100 %. The assessment of morphology by transmission electron microscopy showed spherical particles of homogeneous nanometric dimensions. No detectable instability phenomena in the formulation was observed by dynamic light scattering analysis (Turbiscan®). A nanoemulsion, similarly prepared but omitting the polymer, was developed to establish the mechanism of drug encapsulation. The suspensions were incorporated into semisolid vehicles, hydrogels of Carpobol® 940, and the following studies were performed: rheological behavior, pH, release profile, irritation potential (HET-CAM) and skin permeation in vitro. Drug quantification was carried out by high-performance liquid chromatography (HPLC) and analytical methods were developed and validated according to current official guidelines. The formulations exhibited non-Newtonian pseudoplastic profile. In the in vitro release study, no significant difference was found between the formulations containing dapsone (p>0.05). However, for adapalene, it was not possible to establish the in vitro release profile by dialysis membrane. The formulations were evaluated as non-irritant by HET-CAM technique. Through the skin permeation studies, it was possible to quantify the drug in epidermis and dermis, and non-significant quantity was detected in the receptor fluid (p>0.05). Comparing the lipid-core nanocapsules and nanoemulsion formulations, the amount of adapalene and dapsone in each skin layer was significantly different (p<0.05). In conclusion, the results obtained show that the lipid-core nanocapsules are a promising system for cutaneous application of adapalene and dapsone. However, clinical studies are required in order to evaluate the effectiveness of the formulation in the treatment of acne.

A acne vulgaris é uma patologia cutânea crônica que acomete a unidade pilossebácea resultando em hiperqueratinização, aumento da produção de sebo, inflamação e proliferação bacteriana nos folículos pilosos. Diversos fármacos estão disponíveis para o tratamento da acne, entretanto a combinação de tratamentos tópicos, com diferentes mecanismos de ação, apresentam uma melhor eficácia. Desse modo, o presente trabalho visa o desenvolvimento de um sistema nanocarreador contendo adapaleno e dapsona no intuito de promover melhor seletividade, aumentando a eficiência do tratamento e minimizando efeitos adversos. Neste contexto, desenvolveu-se e caracterizou-se físico-quimicamente uma formulação de nanocápsulas de núcleo lipídico contendo adapaleno e dapsona. A suspensão contendo 0,025 % de adapaleno e 0,07 % de dapsona apresentou diâmetro médio de 194,9 ± 0,42 nm, índice de polidispersão de 0,12 ± 0,02, potencial zeta -15 ± 1,2 mV, pH 5,1 ± 0,1 e eficiência de encapsulação próximos a 100 %. A avaliação da morfologia por microscopia eletrônica de transmissão demonstrou partículas esféricas, homogêneas de dimensões nanométricas. Através da análise de retroespalhamento de luz dinâmico (Turbiscan®) não se detectou fenômenos de instabilidade na formulação. Uma nanoemulsão, similarmente preparada, mas sem o uso do polímero, foi desenvolvida para comparação a fim de estabelecer o mecanismo de encapsulação dos fármacos. As suspensões foram incorporadas em veículos semissólidos, hidrogéis de Carpobol® 940, e os seguintes estudos foram realizados: comportamento reológico, pH, perfil de liberação, potencial de irritação (HET-CAM) e permeação cutânea in vitro. A determinação quantitativa dos ativos foi realizada por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), e os métodos analíticos foram desenvolvidos e validados de acordo com os códigos oficiais vigentes. As formulações apresentaram perfil não-Newtoniano pseudoplástico. No estudo de liberação in vitro, não houve diferença significativa entre as formulações contendo dapsona (p>0,05). Já para o adapaleno, não foi possível estabelecer o perfil de liberação in vitro por membrana de diálise. As formulações foram avaliadas como não irritantes pela técnica de HET-CAM. Através dos estudos de permeação cutânea foi possível quantificar os fármacos na epiderme e na derme, e quantidade não-significativa foi detectada no fluído receptor (p>0,05). Comparando as formulações de nanocápsula de núcleo lipídico e nanoemulsão, as quantidades de adapaleno e dapsona em cada camada da pele foi significativamente diferente (p<0,05). Em conclusão, os resultados obtidos até o presente momento demonstram que as nanocápsulas de núcleo lipídico são um sistema promissor para aplicação cutânea de adapaleno e dapsona. Contudo, estudos clínicos fazem-se necessários a fim de avaliar a efetividade da formulação no tratamento da acne. / Acne vulgaris is a chronic skin condition that affects the pilosebaceous unit resulting in hyperkeratinization, increased sebum production, inflammation and bacterial proliferation in hair follicles. Several drugs are available for treating acne, however the combination of topical treatments with different mechanisms of action presents greater effectiveness. Therefore, this study aims to develop a nanocarrier system containing adapalene and dapsone in order to promote better selectivity, increasing efficiency of treatment and minimizing adverse side effects. In this study, a suspension of lipid-core nanocapsules containing adapalene and dapsone was prepared by interfacial deposition of preformed polymer and characterized physicochemically. The suspension containing 0.025 % of adapalene and 0.07 % of dapsone showed an average diameter of 194.9 ± 0.42 nm, a polydispersity index of 0.12 ± 0.02, zeta potential -15 mV ± 1.2, pH 5.1 ± 0.1 and encapsulation efficiency approaching 100 %. The assessment of morphology by transmission electron microscopy showed spherical particles of homogeneous nanometric dimensions. No detectable instability phenomena in the formulation was observed by dynamic light scattering analysis (Turbiscan®). A nanoemulsion, similarly prepared but omitting the polymer, was developed to establish the mechanism of drug encapsulation. The suspensions were incorporated into semisolid vehicles, hydrogels of Carpobol® 940, and the following studies were performed: rheological behavior, pH, release profile, irritation potential (HET-CAM) and skin permeation in vitro. Drug quantification was carried out by high-performance liquid chromatography (HPLC) and analytical methods were developed and validated according to current official guidelines. The formulations exhibited non-Newtonian pseudoplastic profile. In the in vitro release study, no significant difference was found between the formulations containing dapsone (p>0.05). However, for adapalene, it was not possible to establish the in vitro release profile by dialysis membrane. The formulations were evaluated as non-irritant by HET-CAM technique. Through the skin permeation studies, it was possible to quantify the drug in epidermis and dermis, and non-significant quantity was detected in the receptor fluid (p>0.05). Comparing the lipid-core nanocapsules and nanoemulsion formulations, the amount of adapalene and dapsone in each skin layer was significantly different (p<0.05). In conclusion, the results obtained show that the lipid-core nanocapsules are a promising system for cutaneous application of adapalene and dapsone. However, clinical studies are required in order to evaluate the effectiveness of the formulation in the treatment of acne.

A acne vulgaris é uma patologia cutânea crônica que acomete a unidade pilossebácea resultando em hiperqueratinização, aumento da produção de sebo, inflamação e proliferação bacteriana nos folículos pilosos. Diversos fármacos estão disponíveis para o tratamento da acne, entretanto a combinação de tratamentos tópicos, com diferentes mecanismos de ação, apresentam uma melhor eficácia. Desse modo, o presente trabalho visa o desenvolvimento de um sistema nanocarreador contendo adapaleno e dapsona no intuito de promover melhor seletividade, aumentando a eficiência do tratamento e minimizando efeitos adversos. Neste contexto, desenvolveu-se e caracterizou-se físico-quimicamente uma formulação de nanocápsulas de núcleo lipídico contendo adapaleno e dapsona. A suspensão contendo 0,025 % de adapaleno e 0,07 % de dapsona apresentou diâmetro médio de 194,9 ± 0,42 nm, índice de polidispersão de 0,12 ± 0,02, potencial zeta -15 ± 1,2 mV, pH 5,1 ± 0,1 e eficiência de encapsulação próximos a 100 %. A avaliação da morfologia por microscopia eletrônica de transmissão demonstrou partículas esféricas, homogêneas de dimensões nanométricas. Através da análise de retroespalhamento de luz dinâmico (Turbiscan®) não se detectou fenômenos de instabilidade na formulação. Uma nanoemulsão, similarmente preparada, mas sem o uso do polímero, foi desenvolvida para comparação a fim de estabelecer o mecanismo de encapsulação dos fármacos. As suspensões foram incorporadas em veículos semissólidos, hidrogéis de Carpobol® 940, e os seguintes estudos foram realizados: comportamento reológico, pH, perfil de liberação, potencial de irritação (HET-CAM) e permeação cutânea in vitro. A determinação quantitativa dos ativos foi realizada por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), e os métodos analíticos foram desenvolvidos e validados de acordo com os códigos oficiais vigentes. As formulações apresentaram perfil não-Newtoniano pseudoplástico. No estudo de liberação in vitro, não houve diferença significativa entre as formulações contendo dapsona (p>0,05). Já para o adapaleno, não foi possível estabelecer o perfil de liberação in vitro por membrana de diálise. As formulações foram avaliadas como não irritantes pela técnica de HET-CAM. Através dos estudos de permeação cutânea foi possível quantificar os fármacos na epiderme e na derme, e quantidade não-significativa foi detectada no fluído receptor (p>0,05). Comparando as formulações de nanocápsula de núcleo lipídico e nanoemulsão, as quantidades de adapaleno e dapsona em cada camada da pele foi significativamente diferente (p<0,05). Em conclusão, os resultados obtidos até o presente momento demonstram que as nanocápsulas de núcleo lipídico são um sistema promissor para aplicação cutânea de adapaleno e dapsona. Contudo, estudos clínicos fazem-se necessários a fim de avaliar a efetividade da formulação no tratamento da acne. / Acne vulgaris is a chronic skin condition that affects the pilosebaceous unit resulting in hyperkeratinization, increased sebum production, inflammation and bacterial proliferation in hair follicles. Several drugs are available for treating acne, however the combination of topical treatments with different mechanisms of action presents greater effectiveness. Therefore, this study aims to develop a nanocarrier system containing adapalene and dapsone in order to promote better selectivity, increasing efficiency of treatment and minimizing adverse side effects. In this study, a suspension of lipid-core nanocapsules containing adapalene and dapsone was prepared by interfacial deposition of preformed polymer and characterized physicochemically. The suspension containing 0.025 % of adapalene and 0.07 % of dapsone showed an average diameter of 194.9 ± 0.42 nm, a polydispersity index of 0.12 ± 0.02, zeta potential -15 mV ± 1.2, pH 5.1 ± 0.1 and encapsulation efficiency approaching 100 %. The assessment of morphology by transmission electron microscopy showed spherical particles of homogeneous nanometric dimensions. No detectable instability phenomena in the formulation was observed by dynamic light scattering analysis (Turbiscan®). A nanoemulsion, similarly prepared but omitting the polymer, was developed to establish the mechanism of drug encapsulation. The suspensions were incorporated into semisolid vehicles, hydrogels of Carpobol® 940, and the following studies were performed: rheological behavior, pH, release profile, irritation potential (HET-CAM) and skin permeation in vitro. Drug quantification was carried out by high-performance liquid chromatography (HPLC) and analytical methods were developed and validated according to current official guidelines. The formulations exhibited non-Newtonian pseudoplastic profile. In the in vitro release study, no significant difference was found between the formulations containing dapsone (p>0.05). However, for adapalene, it was not possible to establish the in vitro release profile by dialysis membrane. The formulations were evaluated as non-irritant by HET-CAM technique. Through the skin permeation studies, it was possible to quantify the drug in epidermis and dermis, and non-significant quantity was detected in the receptor fluid (p>0.05). Comparing the lipid-core nanocapsules and nanoemulsion formulations, the amount of adapalene and dapsone in each skin layer was significantly different (p<0.05). In conclusion, the results obtained show that the lipid-core nanocapsules are a promising system for cutaneous application of adapalene and dapsone. However, clinical studies are required in order to evaluate the effectiveness of the formulation in the treatment of acne.

Made available in DSpace on 2018-06-27T18:56:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-04-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Acne vulgaris is a genetic hormone disease, located in the hair follicle. Adapalene a third-generation retinoid, and it is a topical alternative for acne treatment, but may have some adverse effects, irritation and dryness of the skin are the most common. Due to this, and knowing the nanocarriers potential, the object of this study was determine the physicochemical stability of semisolid formulations containing adapalene-loaded nanocapsules (NC) incorporated in Aristoflex AVL®, evaluate the release profiles in semisolid formulations containing nanocapsules containing adapalene incorporated in Carbopol 940® and verify the safety of the formulation in vivo by noninvasive biophysical analysis. For the determination of the stability, samples were subjected to freeze-thaw cycle, completing a cycle of 21 days. The in vitro release studies were performed comparing the drug-loaded NC (GCNCA) with the gel containing adapalene in its free form (GCA). For the skin bioengineer techniques, twenty healthy volunteers were selected. Each week were performed biometric skin tests including stratum corneum water content (hydration), pH, color, erythema and transepidermal water loss for 63 days. In stability studies, we observed that the average particle size, polydispersity and zeta potential of cream gel containing NC without adapalene (CGNC) and cream gel containing adapaleneloaded NC (CGNCA) showed no change after being subjected to the freeze-thaw cycle. Semisolid formulations showed non-Newtonian flow and pseudoplastic behavior during the study period. The initial adapalene content in CGNCA did not change compared with the result obtained at the end of the experiment. However, for the cream gel containing free adapalene (CGA), there was a reduction in the drug concentration, whereas the initial content decreased to below 90% after 21 days of analysis. According to release studies, we can observe that the GCNCA showed total concentration and release rate less than the GCA, which demonstrates the ability of nanoparticles to control the drug release. According to the results observed for the non-invasive method in relation to the determination of melanin content, there was a decrease in this parameter during the experiment for both formulations. The GCNCA did not cause erythema, configuring security in the use of the formulation. However, the GCA increased the index of erythema of the skin of volunteers. We observed an increase in transepidermal water loss to the GCA while in GCNCA there is a reduction of this parameter. The results obtained for skin hydration, there was a more pronounced reduction of the values of the stratum corneum water content in the treated areas with GCA. Thus, it was evident that the polymeric nanocapsules are able to decrease transepidermal water loss, favoring the skin hydration degree and keeping the stratum corneum integrity. / A acne vulgar é uma doença genética hormonal, de localização pilo-sebácea. O adapaleno, retinóide de terceira geração, é uma alternativa tópica para o tratamento da acne, podendo apresentar alguns efeitos indesejáveis, sendo a irritação e o ressecamento da pele os mais comuns. Em vista disso, e conhecendo as potencialidades dos nanocarreadores, o presente trabalho tem como objetivo determinar a estabilidade físico-química de formulações semissólidas contendo adapaleno nanoestruturado incorporado em Aristoflex AVL®, avaliar os perfis de liberação em formulações semissólidas contendo nanocápsulas (NC) de adapaleno incorporadas em Carbopol 940® e verificar a segurança do fármaco nanoencapsulado in vivo, através de análises biofísicas não invasivas. Para a determinação da estabilidade as amostras foram submetidas ao ciclo gelo-degelo, completando-se um ciclo de 21 dias. Os estudos de liberação in vitro foram realizados comparando-se as formulações contendo nanocápsulas de adapaleno (GCNCA) com o gel contendo o fármaco na forma livre (GCA). Para o ensaio utilizando biometria cutânea, foram selecionados vinte voluntários saudáveis. A cada semana foram realizados testes de bioengenharia cutânea, incluindo avaliação do conteúdo aquoso do estrato córneo (hidratação), pH, coloração, eritema e perda transepidérmica de água durante 63 dias. Nos estudos de estabilidade, observou-se que o diâmetro médio das partículas, índice de polidispersão e potencial zeta do creme gel contendo NC sem adapaleno (CGNC) e do creme gel contendo NC de adapaleno (CGNCA) não apresentaram alterações após serem submetidos ao ciclo gelodegelo. As formulações semissólidas independente da forma de dispersão do fármaco apresentaram fluxo não-newtoniano e comportamento pseudoplástico durante todo o período de análise. O teor inicial de adapaleno no CGNCA não sofreu alteração, quando comparado com o teor obtido no término do experimento. Entretanto, para o creme gel contendo adapaleno livre (CGA) houve uma redução na concentração de adapaleno, visto que o teor inicial decaiu para valores abaixo de 90% após 21 dias de análise. Com relação aos estudos de liberação, pode-se observar que o GCNCA apresentou concentração total e taxa de liberação menor do que o GCA, o que demonstra a capacidade das nanopartículas em controlar a liberação do fármaco. De acordo com os resultados observados para o ensaio de bioengenharia cutânea, com relação à determinação do conteúdo de melanina, verificouse uma redução deste parâmetro no decorrer do experimento para ambas as formulações. O GCNCA não causou eritema, configurando a segurança na utilização da formulação. Entretanto, o GCA aumentou, de maneira estatisticamente significativa, o índice de eritema da pele dos voluntários. Foi observado um aumento na perda transepidérmica de água para o GCA enquanto no GCNCA observa-se uma redução deste parâmetro. Nos resultados obtidos para hidratação cutânea, observou-se uma redução mais pronunciada dos valores do conteúdo aquoso do estrato córneo nas regiões tratadas com GCA. Desta forma, evidenciou-se que as nanocápsulas poliméricas são capazes de diminuir a perda transepidérmica de água, favorecendo o grau de hidratação cutânea e mantendo a integridade do estrato córneo.

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-16T13:49:23Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_GabrielaD'AvilaFarias.pdf: 1690913 bytes, checksum: 045532806a12d78ce1324029cd8aedaf (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-16T13:49:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_GabrielaD'AvilaFarias.pdf: 1690913 bytes, checksum: 045532806a12d78ce1324029cd8aedaf (MD5) Previous issue date: 2011-04-19 / Acne vulgaris is a genetic hormone disease, located in the hair follicle. Adapalene a third-generation retinoid, and it is a topical alternative for acne treatment, but may have some adverse effects, irritation and dryness of the skin are the most common. Due to this, and knowing the nanocarriers potential, the object of this study was determine the physicochemical stability of semisolid formulations containing adapalene-loaded nanocapsules (NC) incorporated in Aristoflex AVL®, evaluate the release profiles in semisolid formulations containing nanocapsules containing adapalene incorporated in Carbopol 940® and verify the safety of the formulation in vivo by noninvasive biophysical analysis. For the determination of the stability, samples were subjected to freeze-thaw cycle, completing a cycle of 21 days. The in vitro release studies were performed comparing the drug-loaded NC (GCNCA) with the gel containing adapalene in its free form (GCA). For the skin bioengineer techniques, twenty healthy volunteers were selected. Each week were performed biometric skin tests including stratum corneum water content (hydration), pH, color, erythema and transepidermal water loss for 63 days. In stability studies, we observed that the average particle size, polydispersity and zeta potential of cream gel containing NC without adapalene (CGNC) and cream gel containing adapaleneloaded NC (CGNCA) showed no change after being subjected to the freeze-thaw cycle. Semisolid formulations showed non-Newtonian flow and pseudoplastic behavior during the study period. The initial adapalene content in CGNCA did not change compared with the result obtained at the end of the experiment. However, for the cream gel containing free adapalene (CGA), there was a reduction in the drug concentration, whereas the initial content decreased to below 90% after 21 days of analysis. According to release studies, we can observe that the GCNCA showed total concentration and release rate less than the GCA, which demonstrates the ability of nanoparticles to control the drug release. According to the results observed for the non-invasive method in relation to the determination of melanin content, there was a decrease in this parameter during the experiment for both formulations. The GCNCA did not cause erythema, configuring security in the use of the formulation. However, the GCA increased the index of erythema of the skin of volunteers. We observed an increase in transepidermal water loss to the GCA while in GCNCA there is a reduction of this parameter. The results obtained for skin hydration, there was a more pronounced reduction of the values of the stratum corneum water content in the treated areas with GCA. Thus, it was evident that the polymeric nanocapsules are able to decrease transepidermal water loss, favoring the skin hydration degree and keeping the stratum corneum integrity. / A acne vulgar é uma doença genética hormonal, de localização pilo-sebácea. O adapaleno, retinóide de terceira geração, é uma alternativa tópica para o tratamento da acne, podendo apresentar alguns efeitos indesejáveis, sendo a irritação e o ressecamento da pele os mais comuns. Em vista disso, e conhecendo as potencialidades dos nanocarreadores, o presente trabalho tem como objetivo determinar a estabilidade físico-química de formulações semissólidas contendo adapaleno nanoestruturado incorporado em Aristoflex AVL®, avaliar os perfis de liberação em formulações semissólidas contendo nanocápsulas (NC) de adapaleno incorporadas em Carbopol 940® e verificar a segurança do fármaco nanoencapsulado in vivo, através de análises biofísicas não invasivas. Para a determinação da estabilidade as amostras foram submetidas ao ciclo gelo-degelo, completando-se um ciclo de 21 dias. Os estudos de liberação in vitro foram realizados comparando-se as formulações contendo nanocápsulas de adapaleno (GCNCA) com o gel contendo o fármaco na forma livre (GCA). Para o ensaio utilizando biometria cutânea, foram selecionados vinte voluntários saudáveis. A cada semana foram realizados testes de bioengenharia cutânea, incluindo avaliação do conteúdo aquoso do estrato córneo (hidratação), pH, coloração, eritema e perda transepidérmica de água durante 63 dias. Nos estudos de estabilidade, observou-se que o diâmetro médio das partículas, índice de polidispersão e potencial zeta do creme gel contendo NC sem adapaleno (CGNC) e do creme gel contendo NC de adapaleno (CGNCA) não apresentaram alterações após serem submetidos ao ciclo gelodegelo. As formulações semissólidas independente da forma de dispersão do fármaco apresentaram fluxo não-newtoniano e comportamento pseudoplástico durante todo o período de análise. O teor inicial de adapaleno no CGNCA não sofreu alteração, quando comparado com o teor obtido no término do experimento. Entretanto, para o creme gel contendo adapaleno livre (CGA) houve uma redução na concentração de adapaleno, visto que o teor inicial decaiu para valores abaixo de 90% após 21 dias de análise. Com relação aos estudos de liberação, pode-se observar que o GCNCA apresentou concentração total e taxa de liberação menor do que o GCA, o que demonstra a capacidade das nanopartículas em controlar a liberação do fármaco. De acordo com os resultados observados para o ensaio de bioengenharia cutânea, com relação à determinação do conteúdo de melanina, verificouse uma redução deste parâmetro no decorrer do experimento para ambas as formulações. O GCNCA não causou eritema, configurando a segurança na utilização da formulação. Entretanto, o GCA aumentou, de maneira estatisticamente significativa, o índice de eritema da pele dos voluntários. Foi observado um aumento na perda transepidérmica de água para o GCA enquanto no GCNCA observa-se uma redução deste parâmetro. Nos resultados obtidos para hidratação cutânea, observou-se uma redução mais pronunciada dos valores do conteúdo aquoso do estrato córneo nas regiões tratadas com GCA. Desta forma, evidenciou-se que as nanocápsulas poliméricas são capazes de diminuir a perda transepidérmica de água, favorecendo o grau de hidratação cutânea e mantendo a integridade do estrato córneo.

Acne is a multifactorial skin disease affecting about 80 % of people aged 11 to 30. Several systemic and topical treatments are used to treat existing lesions, prevent scarring and suppress the development of new lesions. Topical therapy is often used as first line treatment for acne, due to the location of the target organ, the pilosebaceous unit, in the skin. Retinoids are widely used as oral or topical treatment for this disease, with tretinoin and adapalene being two of the most used topical retinoids. The transdermal route offers several challenges to drug delivery, e.g. the excellent resistance of the stratum corneum to diffusion, as well as variable skin properties such as site, age, race and disease. Some additional difficulties are associated with the dermatological delivery of tretinoin and adapalene, which include suboptimal water solubility of the retinoids, isomerisation of tretinoin in the skin, mild to severe skin irritation, as well as oxidation and photo–isomerisation of tretinoin, even before crossing the stratum corneum. Researchers constantly strive to improve dermatological retinoid formulations in order to combat low dermal flux, skin irritation and instability. The release kinetics of tretinoin varies greatly according to the way in which it is incorporated into the formulation and according to the type of formulation used. Little research has been conducted regarding improved formulations for adapalene. Pheroid technology is a patented delivery system employed in this study in order to improve the dermal delivery of retinoids. Tretinoin and adapalene were separately incorporated into castor oil, vitamin F and Pheroid creams. The creams were evaluated in terms of their in vitro retinoid release, in vitro transdermal diffusion and stability. Castor oil and Pheroid creams were superior in terms of release and dermal delivery of adapalene. Tretinoin was best released and delivered to the dermis by castor oil cream. The castor oil creams were the most stable formulations, whereas the Pheroid creams were the most unstable. In terms of release, dermal diffusion and stability, castor oil cream proved to be the most suitable cream for both tretinoin and adapalene. / Thesis (M.Sc. (Pharmaceutics))--North-West University, Potchefstroom Campus, 2011.

Acne is a multifactorial skin disease affecting about 80 % of people aged 11 to 30. Several systemic and topical treatments are used to treat existing lesions, prevent scarring and suppress the development of new lesions. Topical therapy is often used as first line treatment for acne, due to the location of the target organ, the pilosebaceous unit, in the skin. Retinoids are widely used as oral or topical treatment for this disease, with tretinoin and adapalene being two of the most used topical retinoids. The transdermal route offers several challenges to drug delivery, e.g. the excellent resistance of the stratum corneum to diffusion, as well as variable skin properties such as site, age, race and disease. Some additional difficulties are associated with the dermatological delivery of tretinoin and adapalene, which include suboptimal water solubility of the retinoids, isomerisation of tretinoin in the skin, mild to severe skin irritation, as well as oxidation and photo–isomerisation of tretinoin, even before crossing the stratum corneum. Researchers constantly strive to improve dermatological retinoid formulations in order to combat low dermal flux, skin irritation and instability. The release kinetics of tretinoin varies greatly according to the way in which it is incorporated into the formulation and according to the type of formulation used. Little research has been conducted regarding improved formulations for adapalene. Pheroid technology is a patented delivery system employed in this study in order to improve the dermal delivery of retinoids. Tretinoin and adapalene were separately incorporated into castor oil, vitamin F and Pheroid creams. The creams were evaluated in terms of their in vitro retinoid release, in vitro transdermal diffusion and stability. Castor oil and Pheroid creams were superior in terms of release and dermal delivery of adapalene. Tretinoin was best released and delivered to the dermis by castor oil cream. The castor oil creams were the most stable formulations, whereas the Pheroid creams were the most unstable. In terms of release, dermal diffusion and stability, castor oil cream proved to be the most suitable cream for both tretinoin and adapalene. / Thesis (M.Sc. (Pharmaceutics))--North-West University, Potchefstroom Campus, 2011.

Made available in DSpace on 2018-06-27T18:56:17Z (GMT). No. of bitstreams: 3 Marcia Bruschi.pdf: 1447481 bytes, checksum: 9167778faf308c7c784cba022bf22e92 (MD5) Marcia Bruschi.pdf.txt: 164415 bytes, checksum: 05463637576c35d9cd4085d38b088783 (MD5) Marcia Bruschi.pdf.jpg: 3373 bytes, checksum: b0a58d14b52a24617b54a774ddbef2fc (MD5) Previous issue date: 2010-08-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Acne is a chronic disease with an inflammatory disorder of the pilosebaceous follicle, characterized by open and closed comedones, papules, pustules and nodules. One of the drugs used to treat it is adapalene, which has fewer side effects compared to other retinoids, exerting an appropriate anti-inflammatory and comedolytic activity. Even with these advantages over other retinoids it is relevant the use in the exact site of action, the keratinocytes, focusing an increase of the drug activity and a reduction of side effects. As a result, nanocarrier systems have been extensively studied to improve the selectivity and efficiency of the formulations. This study presents as objective developing, characterize and evaluate the physical and chemical stability as well as the release and skin permeation of a semisolid topical formulation with base of Carbopol 940® containing adapalene-loaded nanocapsules. For this, they were needed physics, chemical, mathematics and pharmacy knowledgements, once Nanoscience presents a multidisciplinary character. All studies were performed comparing adapalene-loaded nanocapsules with the free form. The samples were stored at room temperature (25 ± 2 ° C), refrigerator (-4 ± 2 ° C) and oven (40 ± 2 ° C and 75 ± 5% RH) for 90 days and analyzed at 0, 7, 14, 30, 60 and 90 days in relation to physical-chemical characteristics organoleptic, rheological and drug contents. The average particle size was (201.1 ± 32.8 nm) and was maintained at refrigerator temperature and remained stable during the ninety days of analysis. The values of zeta potential (-23.4 ± 0.2 mV) and pH (5.94 ± 0.16) remained stable for all formulations regardless of storage temperature. The semisolid formulations, independent of the dispersion of the drug, exhibited a non-Newtonian behavior presenting pseudoplastic characteristics and determination of their values (85 a 98 %) remained unchanged during the 90 days of experiment. For release assays and skin permeation it was observed that most of the drug was retained on the surface and stratum corneum of the skin, but the adapalene-loaded nanocapsules obtained a higher permeation into the dermis and epidermis when compared with the free form. Through the results, we can conclude that the incorporation of nanocapsules of adapalene in a semisolid formulation in Carbopol® gels showed satisfactory physical-chemical stability, representing technological feasibility. / A acne é uma doença crônica com desordem inflamatória do folículo pilossebáceo, caracterizada por comedões, pápulas, pústulas e nódulos. Um dos fármacos utilizados para o tratamento é o adapaleno, uma molécula sintética que apresenta menos efeitos colaterais quando comparado a outros retinóides, exercendo uma atividade comedolítica e antiinflamatória apropriada. Mesmo com essas vantagens sobre os demais retinóides, ainda tornase relevante a administração mais direcionada no sítio de ação, os queratinócitos, objetivando um aumento da atividade do fármaco e uma redução dos efeitos colaterais. Em vista disso, sistemas nanocarreadores têm sido bastante estudados com objetivo de melhorar a seletividade e a eficiência das formulações. Este trabalho teve como objetivo desenvolver, caracterizar e avaliar a estabilidade físico-química, bem como a permeação cutânea de uma formulação semissólida com base de Carbopol 940® contendo adapaleno na forma nanoencapsulada. Para isso, foi necessário um conhecimento em física, química, matemática e farmácia, uma vez que a Nanociência apresenta um caráter interdisciplinar. Todos os estudos foram realizados comparando o adapaleno na forma nanoencapsulada com a forma livre. As amostras foram armazenadas à temperatura ambiente (25 ± 2 °C), geladeira (-4 ± 2 °C) e em estufa (40 ± 2 °C e 75 ± 5% UR) durante 90 dias e analisadas em 0, 7, 14, 30, 60 e 90 dias com relação às características físico-químicas, organolépticas, reológicas e teor do fármaco. O tamanho médio das partículas (201,1±32,8 nm) armazenadas em temperatura ambiente e geladeira mantiveram-se estáveis durante os noventa dias de análises. Os valores de potencial zeta (-23,4±0,2 mV) e pH (5,94±0,16) permaneceram estáveis para todas as formulações independente da temperatura de armazenamento. As formulações semissólidas independente da forma de dispersão do fármaco apresentaram fluxo não-newtoniano, comportamento pseudoplástico e mantiveram seus valores de doseamento (85 a 98 %) sem alterações durante os 90 dias de experimento. Para os testes de permeação cutânea, foi observado que a maior parte do fármaco ficou retida na superfície e estrato córneo da pele, porém para o fármaco nanoencapsulado (1,23 &#956;g/cm²) obteve-se uma maior permeação até a derme e epiderme quando comparada com a forma livre (0,84 &#956;g/cm²). Através dos resultados, pode-se concluir que a incorporação das suspensões contendo nanocápsulas de adapaleno em uma formulação semissólida utilizando como veículo o Carbopol 940® apresentou características físico-químicas e estabilidade adequada, representando viabilidade tecnológica.

En l’absence de structures tridimensionnelles expérimentales des cytochromes P450 CYP26A1, CYP26B1 et CYP26C1, la caractérisation de leur substrats et ligands s’est basée sur l’analyse des modèles structuraux obtenus par modélisation par homologie avec la structure expérimentale du cytochrome P450 CYP120. La justesse des modèles a été validée par l’amarrage de l’acide rétinoïque all-trans dans des configurations compatibles avec les métabolites attendus. L’amarrage d’agonistes et d’antagonistes des récepteurs nucléaires RARs prédirent l’acide tazaroténique (TA) et l’adapalène comme des substrats potentiels. Les expériences in vitro confirmèrent la métabolisation de ces 2 médicaments par les CYP26s. L’analyse de la cinétique de sulfoxidation du TA par CYP26A1 and CYP26B1 a permis d’établir le TA comme la référence contrôle de l’activité de ces enzymes. Puis, la comparaison des modèles des CYP26s avec la structure cristalline de CYP2C8 a permis d’identifier des similarités structurales de leurs inhibiteurs. Une corrélation entre l’inhibition de CYP26A1 et de CYP2C8 par des inhibiteurs connus de CYP2C8 a été démontrée après détermination de leurs IC50 pour CYP26A1 et CYP26B1 en utilisant le TA comme substrat de référence. La mesure de l’inhibition in vitro fut ensuite utilisée pour évaluer la possibilité que les CYP26s soient impliquées dans des interactions médicamenteuses observées pour certaines molécules. Cette thèse caractérise et appuie le rôle encore mal connu des CYP26s dans la métabolisation in vivo de certains xénobiotiques ainsi que l’effet potentiel de leur inhibition qui favoriserait la survenue d'effets indésirables. / Without crystal structures to study the CYP26 family of drug metabolizing enzymes, homology models were used to characterize CYP26A1, CYP26B1 and CYP26C1 and to identify substrates and inhibitors of the enzymes. Computational models of each isoform based on structural homology to CYP120 were validated by docking all-trans retinoic acid, an endogenous ligand of CYP26. Docking of retinoic acid receptor agonists and antagonists suggested that tazarotenic acid (TA) and adapalene may be metabolic substrates for CYP26, data which was confirmed using in vitro metabolite identification assays. Phenotyping experiments determined that CYP26s played a major role in the metabolism of these compounds in vitro. The kinetics of TA sulfoxidation by CYP26A1 and CYP26B1 were characterized and the compound was proposed as an in vitro probe of CYP26 activity in single enzyme expression systems. Structural characterization efforts identified similarities between the CYP26 homology models and the known crystal structure of CYP2C8, in agreement with previously published reports. Using TA as a probe, the IC50’s of known CYP2C8 inhibitors was measured against CYP26A1 and CYP26B1, with a statistically significant correlation observed between CYP26A1 and CYP2C8. Additional in vitro and computational experiments were used to characterize the inhibition mechanism for the most potent inhibitors. The observed in vitro inhibition was then used to predict the likelihood of CYP26 inhibition being involved in clinically relevant drug interactions. As a whole, the results presented support the role of the CYP26s in the metabolism of xenobiotic compounds as well as in potential in vivo drug interactions.

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-15T13:27:18Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_JerusaGoiBarrios.pdf: 2507299 bytes, checksum: b0357f55d1ddf8dd63d987592cf16a6e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-15T13:27:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_JerusaGoiBarrios.pdf: 2507299 bytes, checksum: b0357f55d1ddf8dd63d987592cf16a6e (MD5) Previous issue date: 2010-06-30 / Acne is one of the most common inflammatory conditions affecting the skin. There are several drugs to treat it, but despite the benefits of these treatments in their free form, there are common side effects to them, especially when applied topically. Among these drugs is the adapalene with comedolitic action and effects on the abnormal process of keratinization and epidermal differentiation, phenomena present in acne vulgaris. This study aimed to prepare polymer nanocapsules of adapalene through the method of interfacial deposition of preformed polymer using different oil cores (tea tree oil and Miglyol®). The suspensions were characterized by determining the pH, particle diameter, polidispersion rate, zeta potential, association rate and dosage of the drug. The stability was determined at different temperatures and under light UVA. In vitro release studies and analysis of mathematical modeling of kinetic release profiles were carried out by comparing suspensions containing adapalene polymer nanocapsules and nanodispersions and without the presence of the polymer. The formulations were stored at room temperature (25 ° C), refrigerator (-4 ° C) and oven (40 ° C) for 3 months and analyzed at 0, 7, 15, 30, 60 and 90 days after preparation. Both suspensions containing Miglyol® polymer nanocapsules (NC-AD-Miglyol®) as the tea tree oil polymer nanocapsules (NC-AD-tea tree oil) showed acidic pH, particle diameter below 300 nm and zeta potential negative. The rate of association of adapalene in the NC-AD-tea tree oil was 95.4% while the NC-AD-Miglyol® was 84.1%. The dosage of the drug showed that the NCAD- tea tree oil exerts a greater stabilizing effect than the other formulations. The shelf life estimated for the NC-AD-tea tree oil was higher when compared to nanodispersion (ND) and NC-AD-Miglyol®. Mathematical modeling showed that the ND and NC-AD-Miglyol® followed a kinetic profile, according to the mono-exponential model with half-lives of 3.53 and 8.43 hours. On the other hand, NC-AD-tea tree oil suspension followed a bi-exponential, model with half-lives of 4.07 hours for the fast phase and 230.6 hours for the sustained phase. Therefore, we can say that the adapalene formulation NC-AD-Miglyol® locates largely more externally in the polymer nanocapsule, while in the NC-AD-tea tree oil, it is dissolved in the oil core of the polymer nanocapsule, suggesting a sustained release. We evaluated the photostability of adapalene nanocoated with Miglyol® oil and tea tree oil under UVA irradiation, and concluded that the nanoencapsulation with tea tree oil increases the stability of the active, offering increased protection it from degradation. In analysis by multiple scattering of light, the suspensions showed a tendency of sedimentation, but the NC-ADMiglyol ® proved to be more likely to destabilization. The validation of the method was satisfactory for all parameters analyzed. Though the results obtained, it can be concluded that the suspension containing NC-AD-tea tree oil showed better physical and chemical characteristics and stability, representing best technological feasibility fot the pharmaceutical area. / A acne é uma das condições inflamatórias mais comuns que afetam a pele. Existem diversos fármacos para o tratamento da acne, porém apesar dos benefícios desses tratamentos na sua forma livre, existem efeitos adversos comuns a eles, principalmente quando aplicados topicamente. Dentre estes fármacos, destaca-se o adapaleno com ação comedolítica e efeitos sobre o processo anormal de queratinização e diferenciação epidérmica, fenômenos presentes na acne vulgar. O presente trabalho teve como objetivo, preparar nanocápsulas poliméricas (NC) de adapaleno através do método de deposição interfacial do polímero pré-formado utilizando diferentes núcleos oleosos (Miglyol® e óleo de melaleuca). As suspensões foram caracterizadas através da determinação do pH, diâmetro de partícula, índice de polidispersão, potencial zeta, taxa de associação e doseamento do fármaco. A estabilidade foi determinada em diferentes temperaturas e frente à luz UVA; estudos de liberação in vitro e análises de modelagem matemática dos perfis cinéticos de liberação foram realizados comparando-se suspensões contendo NC de adapaleno e nanodispersões, sem a presença do polímero. As formulações foram armazenadas em temperatura ambiente (25 °C), geladeira (-4 °C) e estufa (40 °C) durante 3 meses e analisadas nos tempos 0, 7, 15, 30, 60 e 90 dias após preparação. Tanto as suspensões contendo NC com Miglyol® (NC-AD-Miglyol®) como as NC com óleo de melaleuca (NC-AD-Melaleuca) apresentaram pH ácido, diâmetro de partícula inferior a 300 nm e potencial zeta negativo. A taxa de associação do adapaleno na NC-AD-Melaleuca foi de 95,4% enquanto na NC-AD-Miglyol® foi 84,1%. Através do doseamento do ativo, concluiu-se que as NC-AD-Melaleuca exercem efeito estabilizante maior que as demais formulações. O prazo de validade estimado para a NC-AD-Melaleuca foi superior quando comparado à nanodispersão (ND) e a NC-AD-Miglyol®. A modelagem matemática demonstrou que a ND e a NC-AD-Miglyol® seguiram um perfil cinético segundo o modelo monoexponencial com tempo de meia-vida de 3,53 e 8,43 horas, respectivamente. Já a suspensão NC-AD-Melaleuca seguiu modelo biexponencial com tempo de meia-vida para a fase rápida de 4,07 horas e 230,6 horas para a fase sustentada. Pode-se concluir que o adapaleno na formulação NC-AD-Miglyol® encontra-se em grande parte mais externamente nas NC enquanto na NC-AD-Melaleuca, o fármaco encontra-se dissolvido no núcleo oleoso das NC, sugerindo dessa forma, uma liberação sustentada. Avaliou-se a fotoestabilidade do adapaleno nanoencapsulado com Miglyol® e óleo de melaleuca frente à irradiação por UVA e concluiu-se que a nanoencapsulação com óleo de melaleuca aumenta a estabilidade do ativo, protegendo-o da degradação. Em análises por espalhamento múltiplo de luz, as suspensões apresentaram tendência à sedimentação, porém a NC-AD-Miglyol® demonstrou mais probabilidade à desestabilização. A validação da metodologia apresentou resultados satisfatórios para todos os parâmetros analisados. Através dos resultados obtidos, pode-se concluir que a suspensão contendo NC-AD-Melaleuca apresentou melhores características físico-químicas e de estabilidade, representando melhor viabilidade tecnológica para a área farmacêutica.