Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-13T11:25:34Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 230299 bytes, checksum: 2afcd2119bda8b2ce2dbbfa2a7c12397 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-13T11:25:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 230299 bytes, checksum: 2afcd2119bda8b2ce2dbbfa2a7c12397 (MD5) Previous issue date: 2002-08-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Analisou-se o efeito do tempo de sanitização para a redução do número de mesófilos aeróbios e dos sanitizantes clorado orgânico, ácido peracético, peróxido de hidrogênio, prata coloidal e extrato hidroalcóolico de Salvia officinalis para a redução do número da microbiota contaminante e de Listeria monocytogenes em couve minimamente processada. Após 10 minutos de sanitização da couve com clorado orgânico adicionado ou não de 1% de ácido láctico, o número de mesófilos aeróbios contaminantes foi reduzido em, no máximo, 2 ciclos logarítmicos. O aumento do tempo de tratamento para 20 ou 30 minutos não resultou em diferença significativa (P>0,05) na redução do número de contaminantes. A sanitização da couve por 10 minutos, em soluções com ácido peracético e peróxido de hidrogênio reduziu, significativamente (P<0,05), o número de mesófilos aeróbios em torno de 1,9 e 1,5 ciclos logarítmicos, respectivamente,. A redução da população de L. monocytogenes, inoculada na proporção de 10 6 UFC por grama de couve, não foi significativamente diferente quando clorado orgânico, ácido peracético, peróxido de hidrogênio e extrato hidroalcóolico de S. officinalis foram usados. A avaliação do potencial inibidor de bactérias lácticas sobre L. monocytogenes “in vitro”, mostrou que o isolado da couve denominado CCA3, foi capaz de crescer melhor em caldo MRS a 5, 10 e 15oC e apresentar maior halo de inibição do crescimento desse patógeno em ágar a 10 e 15 o C. Esse isolado foi selecionado para ser avaliado quanto ao potencial como bioconservante em couve minimamente processada, para controlar o crescimento de L. monocytogenes inoculada no produto. L. monocytogenes foi capaz de crescer em couve minimamente processada acondicionada em embalagens de poliolefina multicamada, com a modificação passiva da atmosfera e armazenada a 5, 10 e 15 o C. A inoculação de, aproximadamente, 10 8 UFCg -1 do isolado CCA3 no produto não promoveu a inibição do crescimento de L. monocytogenes a 5 e 10 o C, uma vez que a população desse patógeno aumentou em torno de 2,8 ciclos logarítmicos. No entanto, a 15 o C, em condições de abuso de temperatura, a velocidade específica de crescimento (μ) de L. monocytogenes foi significativamente menor na presença do isolado CCA3. A população de bactérias produtoras de ácido manteve-se até o vigésimo dia, em torno de 10 7 a 10 8 UFCg -1 nos tratamentos onde a couve foi inoculada com o isolado CCA3. Nas amostras não inoculadas, o aumento observado foi em torno de 1,8 a 4,5 ciclos logarítmicos. A população de psicrotróficos aeróbios aumentou na couve minimamente processada armazenada a 5oC de 3,4 a 4,6 ciclos logarítmicos e a 10 o C, de 4,5 a 5,3 ciclos logarítmicos após 20 dias. Nos produtos armazenados a 15 o C por oito dias, o aumento dessa população foi de 3,4 a 5,7 ciclos logarítmicos. A inoculação da couve minimamente processada com um número elevado de células de CCA3 não alterou a acidez titulável nem as características visuais do produto no período de vida útil. / The effect of the sanitization period on the decrease of number of aerobic mesophiles and of sanitizers organic chlorine, peracetic acid, hydrogen peroxide, colloidal silver and Salvia officinalis hydroalcocholic extract to decrease the number of Listeria monocytogenes and of the microbial contamination of minimally processed kale was examined. After 10 min of organic chlorine sanitization with or without lactic acid 1%, the number of contaminant aerobic mesophiles was reduced to, at most, 2 logarithmic cycles. The increase of the treatment periods to 20 or 30 minutes did not lead to a significant difference (P>0.05) in the reduction of the contaminants. Kale sanitization in peracetic acid and hydrogen peroxide solutions for 10 min, resulted in significant reductions (P<0.05) around from 1.9 and 1.5 logarithmic cycles, respectively, in the number of aerobic mesophiles. The decrease in L. monocytogenes population, inoculated at 10 6 CFU per kale gram, was not significantly different whether organic chlorine, peracetic acid, hydrogen peroxide or S. officinalis hydroalcocholic extract were used. Evaluation of the inhibition potential of lactic bacteria isolate on L. monocytogenes showed that CCA3 isolate were able to grow in the MRS medium at 5, 10 and 15 o C and it also exhibited the largest growth xinhibition halo of this pathogen in agar at 10 and 15 o C. This isolate was chosen to be evaluated as a potential bioconservative for minimally processed kale, aiming the growth control of L. monocytogenes inoculated in the product. L. monocytogenes showed the ability to grow in minimally processed kale packed with multilayer polyolefin bags, with passive modification of the atmosphere and stored at 5, 10 and 15 o C. Inoculation of about 10 8 CFUg -1 of CCA3 isolate in the product did not lead to growth inhibition of L. monocytogenes and, either at 5 or 10 o C, the pathogen population increased about 2.8 logarithmic cycles. At 15 o C, however, under temperature abusive conditions, the growth specific speed (μ) of L. monocytogenes was significantly smaller in the presence of CCA3 isolate. The acid producer bacteria population was kept at about 10 7 to 10 8 CFUg -1 in the treatments in which kale was inoculated with CCA3 isolate and, in non-inoculated samples, an increase around of 1.8 to 4.2 logarithmic cycles was observed. The aerobic psychrotrophic population increased in the minimally processed kale and stored at 5 o C from 3.4 to 4.6 logarithmic cycles and at 10 o C, from 4.5 to 5.3 logarithmic cycles, after 20 days. In the products stored at 15 o C for eight days, the population increase was of 3.4 to 5.7 logarithmic cycles. The inoculation of minimally processed kale with an elevated number of CCA3 cells did not altered titratable acidity or the product sensorial characteristics in the shelf life period.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-13T11:48:23Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 179843 bytes, checksum: 3db2311873e200a06702cfed6db58952 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-13T11:48:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 179843 bytes, checksum: 3db2311873e200a06702cfed6db58952 (MD5) Previous issue date: 2002-10-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Foram isoladas 20 leveduras de fezes de leitões recém-nascidos com o objetivo de selecionar espécies com atividade killer e potencial probiótico para serem utilizadas como suplemento na alimentação de suínos. Dentre as leveduras analisadas quanto à atividade killer, incluiu-se 234 leveduras da micoteca do Laboratório de Fisiologia de Microrganismos do BIOAGRO, isoladas de vários laticínios na região da Zona da Mata. Dos 254 isolados, 9 apresentaram atividade killer positiva contra Criptococcus laurentii. Esses isolados killer foram selecionados quanto a resistência a 0,3% de sais biliares e ao ácido clorídrico em pH 2,0 e crescimento à temperatura próxima da retal de suínos (39oC). Três isolados (7, P2 e P3) apresentaram melhor desempenho quanto ao teste de resistência a esses obstáculos fisiológicos e seriam os mais indicados para utilização em probióticos para suínos. O soro de queijo ultrafiltrado fermentado por Kluyveromyces lactis apresentou potencial prebiótico no crescimento dos isolados em concentrações de 6% (v/v). Os isolados killer P2 e P3 associados a 6% (v/v) de soro ultrafiltrado fermentado por Kluyveromyces lactis constituem uma possível estratégia dietética para aumento do desempenho de leitões recém-nascidos. / Yeasts were isolated from three days old piglets faeces in order to select species with killer activity and with probiotic potential for their use as supplement in the swine feeding. Amongst the analyzed yeasts as the killer activity, there were yeasts of the Yeast Collection of the Laboratory of Physiology of Microorganisms of BIOAGRO, isolated from several industries of dairy products. Killer activity against Criptococcus laurentii was screened in 254 yeasts isolate, and nine were selected. Those killer yeasts were then selected by their capacity growth at 0,3% of bile salts, hydrochloric acid (pH 2,0) and at swine rectal temperature. The killer yeast 7, P2 and P3 can be considered as the best among the different strains tested which might be able to tolerate the adverse conditions of the gastrointestinal tract of the pigs and serve as a good agent for use as a microbial feed supplement for swine. The ultra filtered whey fermented by Kluyveromyces lactis presented prebiotic potential in the growth of the killer yeast in concentrations of 6% (v/v). The killer yeasts P2 and P3 associated to 6% (v/v) of whey ultra filtered fermented by Kluyveromyces lactis constitute a possible dietary strategy for increasing the performance of young pigs.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-13T11:57:28Z No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 13320 bytes, checksum: 1edb4e9bce2bdf6b0150e4021e10fe37 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-13T11:57:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 13320 bytes, checksum: 1edb4e9bce2bdf6b0150e4021e10fe37 (MD5) Previous issue date: 2002-11-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A diversidade genética de vinte e sete isolados de leveduras coletadas em laticínios, utilizando como referências dos gêneros Kluyveromyces e Debaryomyces, foi averiguada por meio de RAPD (Randomly Amplified Polymorphic DNA). A amplificação resultou em um total de oitenta e oito fragmentos polimórfico de DNA, utilizando treze oligonucleotídeos decâmeros aleatórios. As distâncias genéticas variaram de 6,5 a 71%, gerando na análise gráfica, cinco grupos geneticamente divergentes. Nas avaliações da região ITS do rDNA foi observado um polimorfismo de tamanho que variou de 380 a 710 pb. A análise de agrupamento utilizando valores da distância genética resultou na formação de oito grupos, sugerindo a existência de pelo menos oito espécies de leveduras. Na análise por PCR-RFLP da região ITS do rDNA, os produtos das amplificações foram hidrolisados com diferentes endonucleases de restrição evidenciando o padrão polimórfico, e os valores das distâncias genéticas foram utilizados para o agrupamento, resultando na formação de quinze grupos. Os agrupamentos obtidos com os marcadores moleculares possibilitaram a diferenciação genética dos isolados. Os resultados sugerem que quatro dos vinte e sete isolados pertencem à espécie Kluyveromyces lactis. / The genetic diversity of twenty-seven yeasts collected at dairies, was evaluated by RAPD using Kluyveromyces and Debaryomyces reference genera. Amplification using thirteen random oligonucleotides resulted in eighty-eight DNA polymorphic fragments. The Genetic distances varied from 6,5 to 71%, and generated a Dendrogram with five different genetic groups. The amplification of the ITS 18SrDNA region from the yeast resulted in DNA fragments with length polymorphism (380 and 710 bp). The clustering analysis using the genetic distance value produced eight groups, reflecting at least eight yeasts species. The amplification products of the rDNA ITS region using PCR-RFLP analyses were cleaved with different restriction endonucleases showing polymorphic patterns. The values of the genetic distances were used for the clustering resulted in fifteen groups. The clusters obtained using the molecular markers showed genetic difference between you isolates. The results suggest that four of the twenty-seven isolates can be identified as the yeast Kluyveromyces lactis.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-13T14:05:28Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 401937 bytes, checksum: 8d28b0501a79861fa928c8e53ef135a5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-13T14:05:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 401937 bytes, checksum: 8d28b0501a79861fa928c8e53ef135a5 (MD5) Previous issue date: 2003-08-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O acúmulo de resíduos agroindustriais constitui-se em problema ambiental devido à dificuldade de reciclagem. No Brasil são gerados vários tipos de resíduos, cujo volume demanda a sua liberação no ambiente. A casca de semente de algodão é problema para a indústria algodoeira e existe o interesse pelo desenvolvimento de tecnologias para o aproveitamento deste resíduo.Neste trabalho, avaliou-se o potencial do hidrolisado da casca de semente microbiológica de de algodão (HCA) xilitol. Foram como substrato utilizadas cinco para a produção leveduras (1.55, Debaryomyces hansenii UFV-170, 1.71, 2.64, 2.80) isoladas por SAMPAI O (2001) e caracterizadas como boas produtoras de xilitol em meio sintético. As leveduras foram cultivadas em hidrolisado hemicelulósico obtido de casca de semente de algodão antes e após moagem, acrescido de meio mineral e extrato de levedura, com agitação de 200 rpm, a 30 oC. A produção de xilitol foi cerca de 4 a 34% maior no hidrolisado de casca de semente de algodão moída (HCAM) do que no hidrolisado de casca de semente de algodão sem moer (HCASM). Das cinco leveduras testadas, apenas a levedura 2.80 não apresentou valores significativos de produção de xilitol nas condições utilizadas neste trabalho. As demais leveduras produziram xilitol no HCA e a produtividade volumétrica (Q p ), produtividade específica (q p ) e rendimento (Y p/s ) de xilitol entre os isolados foram semelhantes. A levedura Debaryomyces hansenii UFV-170 cresceu no HCA concentrado cinco vezes, mas não produziu xilitol. No HCA não concentrado, os melhores resultados de produção de xilitol foram obtidos após 24 h de cultivo. Os maiores valores de produtividade volumétrica (0,38 g L -1 h -1 ) e rendimento (0,56 g g -1 ) foram obtidos com o hidrolisado concentrado três vezes, na agitação de 100 rpm e após 72 h de cultivo. Os resultados indicam que o hidrolisado de casca de semente de algodão pode ser utilizado para a produção microbiológica de xilitol. Entretanto, a influência de outros fatores no processo de bioconversão precis / Previous studies indicated that five yeasts isolated from dairy environments could produce high levels of xylitol in synthetic media. When these isolates were cultivated in cotton husk hydrolysate added with yeast extract and mineral media, xylitol production was detected in the cell-free supernatants of only four isolates. Three isolates did not show significant differences in xylitol production, and the average volumetric productivity was a function of D-xylose concentration. I f the isolate that presented the highest xylitol production in synthetic media (yeast Debaryomyces hansenii UFV-170) was incubated in media containing cotton husk hydrolysate, maximal xylitol production occurred after 24 h under agitation of 100 rpm. When the hydrolysate was concentrated 3-fold, xylitol production increased, but only if the fermentation period was approximately 72 h. Xylitol production did not occur if the hydrolysate was concentrated 5-fold. Because substrate concentration alone could not explain the effect on xylitol production, it appears that toxic substances in the hydrolysate caused the inhibitory effect.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-13T14:33:59Z No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 18903 bytes, checksum: 54fcdb88877bc035ef66ceb254f308c8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-13T14:33:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 18903 bytes, checksum: 54fcdb88877bc035ef66ceb254f308c8 (MD5) Previous issue date: 2003-06-13 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A adequação das etapas de processamento mínimo e as alterações nas características químicas e na microbiota contaminante de cogumelos shiitake minimamente processados e estocados a 7, 10 e 15oC, em embalagem de poliestireno expandido foram avaliadas. Verificou-se que a centrifugação de porções de 250 g do cogumelo por períodos superiores a 2 minutos resultou em danos físicos e murchamento no chapéu do shiitake. A sanitização dos cogumelos em solução contendo 200 ppm de cloro livre, por 10 minutos, à temperatura ambiente, reduziu, significativamente, 1,93 ciclos logaritmo na população de aeróbios mesófilos. A sanitização com 1% de ácido acético e 1% de ácido lático reduziu 1,3 ciclos logaritmos desta microbiota. O ácido acético foi efetivo para reduzir 3,73 ciclos logaritmos na população de Pseudomonas, enquanto os outros sanitizantes não apresentaram redução significativa em relação ao controle, onde se usou apenas água. A imersão das amostras de cogumelos nas soluções de clorado orgânico, ácido acético e lático não promoveu redução significativa na população de psicrotróficos aeróbios e de bolores e leveduras. Constatou-se que a sanificação com ácidos orgânicos promoveu o escurecimento pronunciado dos cogumelos que apresentaram valores mínimos de L* de 27, enquanto aqueles não sanitizados ou sanitizados com clorado orgânico os valores mínimos de L* variaram em torno de 32, no 15 o dia de estocagem. Constatou-se uma redução acentuada na concentração de oxigênio dentro das embalagens de cogumelos shiitake minimamente processados, no início do tempo de estocagem a 7, 10 e 15oC. Essa concentração de O 2 manteve-se baixa durante 15 dias de estocagem e não diferiu, significativamente, nas diferentes temperaturas avaliadas. O valor inicial do pH shiitake minimamente processado foi de aproximadamente 5,6 e decresceu nos cinco primeiros dias de estocagem. Os cogumelos shiitake minimamente processados escureceram ao longo da estocagem e, esse escurecimento foi mais acentuado quanto maior a temperatura de armazenamento. A população de mesófilos, psicrotróficos aeróbios e fungos predominaram em relação aos psicrotróficos anaeróbios, Pseudomonas e coliformes em todas as amostras analisadas e aumentou, o equivalente a 3 e 5,7 ciclos logaritmos, ao longo da estocagem a 7, 10 e 15oC. A caracterização morfo- tintorial de isolados psicrotróficos evidenciou a presença de bastonetes, Gram- negativos e a identificação bioquímica revelou tratar-se de espécies do gênero Pseudomonas. Os resultados do teste de aceitação permitiram estimar que os cogumelos shiitake minimamente processados mantiveram aparência aceitável, no 10o dia a 7oC, por um período inferior a 5 dias a 10oC e, aproximadamente, 3 dias a 15oC. A atividade de polifenol oxidase nos cogumelos processados foi, em geral, maior nos produtos resfriados a 15oC, em relação àqueles armazenados a 7 e 10oC. O uso de antioxidantes, como ácido cítrico e ácido ascórbico reduziu a atividade de PPO dos cogumelos shiitake minimamente processado, resultando em menor escurecimento da superfície do chapéu. Os cogumelos tratados com ácido cítrico apresentaram menor atividade de PPO e maiores valores de L*, ou sejam, tornaram-se menos escuros em razão da uma menor atividade da enzima. / The adaptation of minimal processing stages and alterations in the chemical characteristics and contaminating microbiota of minimally processed shiitake mushrooms, stored at 7, 10 and 15 o C in expanded polyethylene trays were evaluated. It was verified that centrifugation of 250 g portions of mushroom for periods over 2 min caused physical damage and wilting to the shiitake cap. Sanitation of the mushrooms in solution containing 200 ppm of chlorine at room temperature, for 10 min, significantly reduced 1.93 logarithm cycles in the population of mesophyll aerobic. Using 1% acetic acid and 1% lactic acid reduced 1.3 logarithm cycles of this microbiota. Acetic acid was effective in reducing 3.73 logarithm cycles in the Pseudomonas population, while the other sanitation solutions did not present a significant reduction compared to the control using only water. The immersion of the mushroom in organic chloride, acetic and lactic acid did not promote a significant reduction in the population of psychotropic aerobic and fungi. Sanitation using organic acids promoted a marked darkening of the mushrooms, which presented minimal L* values of 27, while non-sanitized ones or those sanitized with organic chloride solution had minimal L* values ranging around 32, on the 15 th storage day. There was a marked reduction in oxygen concentration inside the containers of minimally processed shiitake mushrooms, at the beginning of the storage time at 7, 10, and 15 o C. This O 2 concentration ixremained low during 15 storage days and did not differ significantly under the different temperatures evaluated. The initial pH value of the minimally processed shiitake was approximately 5.6, decreasing in the first five days of storage. The minimally processed shiitake mushrooms became dark along storage with this darkening becoming more accentuated as the storage temperature increased. The mesophilic, psychrotrophic aerobic and fungi populations predominated compared to the anaerobic psychrotrophic, Pseudomonas, and coliforms in all the samples analyzed, increasing on an average 3, 4 and 5.7 logarithm cycles throughout storage at 7, 10 and 15 o C. The morpho-tinctorial characterization of psychrotrophic isolates indicated the presence of Gram-negative bacillus and the biochemical identification showed they belonged to the Pseudomonas genus. The results of the acceptance tests allowed estimating that minimally processed shiitake mushrooms kept an acceptable appearance on the 10 th day at 7 o C for a period shorter than 5 days at 10 o C, and approximately, 3 days at 15 o C. The polyphenol oxidase (PPO) activity in the processed mushrooms was in general, higher than in the products cooled at 15 o C, compared to those stored at 7 and 10 o C. The use of antioxidants, such as citric acid and ascorbic acid, reduced the PPO activity in the minimally processed shiitake mushrooms, resulting in less darkening of the mushroom surface cap. The citric acid-treated mushrooms presented lower PPO activity and higher L* values, i .e., they became less dark due to a lower enzyme activity.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-13T16:51:24Z No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 16597 bytes, checksum: c188d7e42b6952425efca3c5a93ee706 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-13T16:51:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 16597 bytes, checksum: c188d7e42b6952425efca3c5a93ee706 (MD5) Previous issue date: 2003-08-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Leveduras presentes na microbiota do ambiente da indústria de queijo possuem propriedades potenciais de interesses biotecnológicos. O banco de leveduras do Laboratório de Fisiologia de Microrganismos (Bioagro – UFV) contém centenas de leveduras obtidas de cinco diferentes laticínios da Zona da Mata de Minas Gerais, das quais 94 foram testadas neste trabalho, sendo a levedura com maior atividade proteolítica extracelular selecionada. Determinaram-se as condições fisiológicas de cultivo dessa levedura que propiciaram atividade proteolítica máxima, bem como caracterizaram-se propriedades química e cinética das proteases extracelulares. Um total de 74 leveduras foram positivas para proteases extracelulares em ágar caseinato de sódio. As leveduras codificadas como 5-BV-ed 4 e 5-BXII- 1 foram isoladas da superfície de queijo tipo Edam e da mesa de manipulação, respectivamente. A levedura 5-BXII- 1 , a qual obteve a maior atividade proteolítica, foi submetida a cultivo em diferentes fontes de nitrogênio, sob diferentes concentrações. Em sulfato de amônio, a constante de afinidade (K S ) foi de 0,012 g.L -1 e a velocidade máxima de crescimento (μ max ), de 0,36 h -1 . Em casaminoácidos, K S foi de 0,20 g.L -1 e μ max , de 0,39 h -1 . Já, em caseína, K S foi de 0,34 g.L -1 e μ max , de 0,54 h -1 . Baixas concentrações de sulfato de amônio induziram maior atividade proteolítica por massa de células em culturas conduzidas sob regime de batelada. Maior atividade proteolítica esteve associada ao crescimento exponencial de leveduras cultivadas em batelada, tendo casaminoácidos como fonte de nitrogênio. Em cultura contínua sob condições limitantes de casaminoácidos, observaram-se resultados antagônicos, isto é, altas vazões específicas de alimentação (correspondentes a altas velocidades específicas de crescimento) resultaram em menor atividade proteolítica, enquanto baixas vazões específicas de alimentação (correspondentes a menores velocidades de crescimento) estiveram associadas às atividades proteolíticas máximas. Atividade proteolítica máxima foi observada na faixa de pH de 7,0 a 8,5 e temperatura de 35 °C. Embora 50% da atividade máxima tenha sido detectada de 45 a 70 °C, a atividade proteolítica em função da concentração do substrato azocaseína seguiu o modelo cinético de Michaelis e Menten. A atividade proteolítica no extrato enzimático foi inibida por EDTA, PMSF e pepstatina e pelos íons metálicos divalentes Co +2 , Mg +2 e Zn +2 e ativada pelo Mn +2 . Esses resultados indicam a presença de proteases da classe das aspartil proteases, metaloproteases e serino proteases no extrato enzimático extracelular da levedura 5-BXII- 1 . / Yeast growing in cheese manufacturing environments possess properties of potential biotechnological interest. The yeast collection at the Microbial Physiology Laboratory (Bioagro-UFV) includes hundreds of yeast collected at five different dairies in the Zona da Mata of Minas Gerais State, ninety-four of which were tested to select that with the highest extracellular proteolytic activity. Growth conditions were optimized for maximum proteolytic activity by the selected yeast and the chemical and kinetic properties of its extracellular proteases were characterized. A total of 74 yeast tested positive for extracellular proteases in sodium caseinate agar. Yeasts 5-BV-ed4 and 5-BXII- 1 were isolated from the surface of Edam cheese and a cheese dairy countertop, respectively. Yeast 5-BXII- 1 presented the highest proteolytic activity and was thus grown on varying concentrations of different nitrogen sources. Nitrogen source half- saturation constants (K s ) and the maximum specific growth rates (μ max ) were xv0.012g.L -1 and 0.36 h -1 for ammonium sulfate, 0.20 g.L -1 and 0.39h -1 for casaminoacids and 0.34 g.L -1 and 0.54 h -1 for casein. Lower ammonium sulfate concentrations induced higher specific proteolytic activity in batch cultures. Higher proteolytic activity was found during exponential growth of batch cultures when casaminoacids were the nitrogen source. Antagonistic results were observed for continuous cultures under casoaminoacid limiting conditions. Higher specific substrate flowrates (corresponding to high specific growth rates) resulted in lower proteolytic activity while low specific substrate flowrates (corresponding to lower growth rates) were associated with maximum proteolytic activities. Maximum proteolytic activity was observed in a pH range of 7,0 to 8.5 and at a temperature of 35 o C, although 50% of the maximum activity was detected at 45 and 70 o C. Proteolytic activity followed Michaelis-Menten kinetics when azocasein was used as substrate. Enzyme extract proteolytic activity was inhibited by EDTA, PMSF, pepstatin and the divalent metal ions Co 2+ , Mg 2+ and Zn 2+ , while it was activated by Mn 2+ . These results indicate the presence of aspartyl, serine and metalo proteases in the extracellular enzyme extract of yeast 5-BXII- 1 .

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-06-13T16:59:09Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 819791 bytes, checksum: cb03aa7b2159a45745634e2ef7e54bc9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-13T16:59:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 819791 bytes, checksum: cb03aa7b2159a45745634e2ef7e54bc9 (MD5) Previous issue date: 2005-12-13 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Retardantes de crescimento são comumente utilizados em culturas ornamentais para manipulação da arquitetura das plantas. Os objetivos deste trabalho foram avaliar as doses e formas de aplicação dos retardantes clormequat, daminozide e paclobutrazol nas características fitotécnicas de plantas de gerânio zonal (Pelargonium x hortorum L.H.Bailey). Plantas de gerânio de três cultivares foram submetidas à aplicação de daminozide ou da mistura contendo daminozide + clormequat via pulverizações foliares e de clormequat ou paclobutrazol via pulverizações ou aplicação da solução diretamente no substrato. Os experimentos foram conduzidos no Setor de Floricultura da UFV, em blocos casualizados com 3 repetições em esquema fatorial. Pelos resultados experimentais obtidos, concluiu-se que os retardantes não proporcionaram aumento no ciclo das plantas. As concentrações de 1000 ou 1500 mg i.a./l de clormequat ou 20 mg i.a./l de paclobutrazol, aplicadas via pulverizações foliares por 3 vezes, resultaram em plantas com as dimensões adequadas, entretanto o aparecimento de sintomas de fitotoxidez limita o uso do clormequat próximo ao final do ciclo da cultura. A aplicação do clormequat diretamente no substrato proporcionou resultados semelhantes aos encontrados nas plantas submetidas às pulverizações foliares, porém com custos mais elevados. Soluções contendo paclobutrazol nas doses 0,018; 0,036 e 0,072 mg i.a./planta aplicadas via solo proporcionaram controle excessivo do alongamento das hastes. Elevadas concentrações de daminozide necessárias para obtenção de plantas com as dimensões desejadas podem restringir o uso desse retardante na cultura do gerânio. O uso da mistura de retardantes clormequat + daminozide resultou em plantas com características adequadas, porém manejo mais trabalhoso quando comparado aos outros retardantes. / Growth retardants are commonly used at ornamentals to manipulate plant’s architecture. The objectives of this study were to evaluate the growth retardants chlormequat, daminozide and paclobutrazol applied as drenches or foliar sprays at different rates over zonal geranium (Pelargonium x hortorum L.H.Bailey) characteristics. The experiments were conducted at Floriculture Section of UFV and arranged in a randomized block design with 3 single plant replications. There were no significant differences in time to flower. Plants treated with foliar sprays at 1000 or 1500 ppm of chlormequat or 20 ppm of paclobutrazol had the desired shape, but phytotoxic symptoms limits chlormequat ́s use close to the end of culture ́s cycle. Chlormequat drenches provided similar results as foliar sprays, but with higher costs. Paclobutrazol drenches at 0,018; 0,036 and 0,072 mg a.i./plant caused excessive retardation of vegetative growth and total plant height. High rates of daminozide needed to attain plants with desired shape may restrict the use of this retardant on geranium plants. Tank mix of chlormequat + daminozide results in plants with suitable characteristics, but requires more labour than the other retardants.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-13T19:26:42Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 744359 bytes, checksum: 87ca72fc10ae980db171625c92bdef8d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-13T19:26:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 744359 bytes, checksum: 87ca72fc10ae980db171625c92bdef8d (MD5) Previous issue date: 2003-04-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Avaliou-se a produção de ocratoxina A por fungos filamentosos isolados de grãos de café e por fungos produtores de pectinases. Cinqüenta e seis fungos filamentosos foram isolados dos grãos de café, compreendendo grande variedade de gêneros, dentre os quais o Penicillium foi predominante. Dentre os isolados obtidos, apenas um, identificado como Aspergillus ochraceus, foi capaz de produzir ocratoxina A. Aspergillus ochraceus foi, então, cultivado nos meios de cultura Czapek Dox modificado, extrato de levedura e meio de coco, a 25oC, por 120 horas, com agitação e sem agitação. Constatou-se que a produção de ocratoxina A ocorreu quando o isolado A. ochraceus foi cultivado em caldo Czapek Dox modificado e em caldo extrato de levedura, sem agitação. A ocratoxina A não foi detectada nos cultivos sob agitação. A toxina foi identificada por cromatografia de camada delgada e confirmada pela cromatografia líquida de alta eficiência. A ocratoxina A não foi detectada nos sobrenadantes das culturas dos fungos pectinolíticos Aspergillus niger, Penicillium cultivados expansum, nos meios Penicillium minerais griseoroseum tamponados e Penicillium e italicum, não-tamponados, suplementados com pectina cítrica como única fonte de carbono, a 25oC, por 120 horas, com agitação. As atividades das enzimas pectinolíticas foram determinadas nessas condições de cultivo e variaram de 25,51 a 61,31μmol mL -1 min -1 , para poligalacturonase e 9,79 a 34,5 nmol mL -1 min -1 , para pectina liase. / In this work, the production of ochratoxin A by filamentous fungi isolated from coffee beans and by pectinolytic fungi was evaluated. Fifty-six isolates were obtained from coffee beans, representing a wide variety of fungal genera within which Penicillium was the predominant one. Among all isolates, only one, identified as Aspergillus ochraceus, was able to produce ochratoxin A. This fungus was then cultivated in modified Czapek Dox, yeast extract broth, and grated coconut medium, at 25°C for 120 hours, with or without shaking. When grown in modified Czapek medium and yeast extract broth, without shaking, A. ochraceus produced ochratoxin A in detectable levels by thin layer chromatography and confirmed by high performance liquid chromatography. Ochratoxin A was not detected in the supernatant of the cultures of the pectinolytic fungi Aspergillus niger, Penicillium expansum, Penicillium griseoroseum, and Penicillium itallicum cultivated in buffered and unbuffered mineral media, supplemented with citric pectin as the sole carbon source, at 25°C for 120 hours. The activities of pectinolytic enzymes were determined under these cultivation conditions and varied from 9.79 to 34.5 nmol mL -1 min -1 , for pectin lyase, and from 25.51 to 61.31 μmol mL -1 min -1 , for polygalacturonase.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-13T19:39:49Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1166776 bytes, checksum: 11dd9b16e2d384140dca5dd1a52031b2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-13T19:39:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1166776 bytes, checksum: 11dd9b16e2d384140dca5dd1a52031b2 (MD5) Previous issue date: 2003-08-01 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O presente estudo objetivou otimizar a produção de biossurfactantes por diferentes culturas bacterianas, em diferentes meios de cultura e com diferentes fontes de carbono, para aplicação no tratamento da borra oleosa sedimentada nos tanques de armazenamento de óleo combustível da RECAP (SP), pertencentes à Petróleo Brasileiro S/A (). Trinta e seis isolados, sendo 15 pertencentes ao Laboratório de Biodiversidade e Biotecnologia para o Meio Ambiente (BBMA) e 21 isolados da amostra de borra, foram avaliados quanto à produção de biossurfactantes. Dentre os 15 isolados com essa característica, foram selecionados cinco para a realização dos ensaios de otimização da produção de biossurfactantes. Os isolados foram identificados pela análise de ésteres metílicos de ácidos graxos (FAME) utilizando o sistema Sherlock da Microbial Identification System (MIDI, Newark, DE, EUA) como Pseudomonas aeruginosa (88A), Bacillus subtilis (155) e Arthrobacter sp. (201). Os isolados 111A e 191 não foram reconhecidos pelo sistema Sherlock. A concentração micelar crítica (CMC) dos biossurfactantes nos meios de cultura, após a remoção das células, foi estimada por quantificação da tensão superficial pelo método de du Nouy. A diluição micelar crítica ficou entre 0,01% e 1% do meio, indicando que as concentrações dos biossurfactantes nos meios estavam de 100 a 10.000 vezes acima de suas CMCs. A estabilidade das emulsões água- querosene, na presença dos biossurfactantes, variou de 30 a 70% após 42 horas, enquanto a estabilidade da emulsão formada pela mistura do surfactante sintético SDS e querosene foi de 45%. A produção de biossurfactantes variou significativamente com a composição do meio de cultura. A borra oleosa foi um indutor efetivo da produção de biossurfactantes. Os biossurfactantes produzidos na fase anterior foram utilizados para tratar a borra oleosa, visando a separação do óleo e do material inerte. O processo mostrou-se altamente eficiente em recuperar o óleo retido, chegando-se a 95% de redução do volume da borra. Os resultados mostraram que a utilização de biossurfactantes para o tratamento de borras oleosas pode ser uma tecnologia econômica e ambientalmente viável, considerando o pequeno volume de cultura microbiana requerido para o tratamento. / This work aimed at optimizing the production of biosurfactants by bacterial cultures for the treatment of oily sludge from fuel oil storage tanks at Capuava Refinery (RECAP-SP), Petróleo Brasileiro S.A. (PETROBRAS). Fifteen strains of the belonging to the collection of Laboratório de Biodiversidade e Biotecnologia para o Meio Ambiente (BBMA) and 21 strains isolated from oily sludge samples were evaluated for biosurfactant production. Among the biosurfactant producing isolates, five were chosen for the optimization of biosurfactant production. The isolates were identified as Pseudomonas aeruginosa (88A), Bacillus subtilis (155), and Arthrobacter sp. (201). The isolates 111A and 191 could not be identified. The critical micelar concentration (CMC) of biosurfactants in the culture media after cell removal was estimated by measuring surface tension of diluted samples by the du Nouy method. The critical micelar dilution ranged from 0.01% to 1%, indicating that the biosurfactant concentration in the medium was 100 to 10.000 times higher than its CMC. The stability of water-querosene emulsions in the presence of biosurfactants ranged from 30% to 70% after 42 hours, while the stability of the mixture of the synthetic surfactant SDS with kerosene was 45%. The xcomposition of the culture medium significantly affected the production of biosurfactants. The oily sludge was an effective inducer of biosurfactant production. The biosurfactants produced by the five isolates were used for oily sludge treatment, aiming at the separation of oil from inert materials. The process was highly efficient, resulting in 95% reduction of the oily sludge volume. The results showed that the use of biosurfactants for oily sludge cleanup operations can be an economically and environmentally attractive technology.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-14T11:45:46Z No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 19963 bytes, checksum: 68d3bb9673edf02216aeab480a461b78 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-14T11:45:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 19963 bytes, checksum: 68d3bb9673edf02216aeab480a461b78 (MD5) Previous issue date: 2004-07-15 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente trabalho teve como objetivo estudar a germinação in vitro de basidiósporos de Pisolithus sp. visando a elucidação dos fatores que atuam no processo. Neste estudo foram avaliadas a influência do número de esporos, a presença de plantas hospedeiras e não-hospedeiras e a adição de ácidos orgânicos e compostos flavonóides ao meio de cultura sobre a germinação in vitro dos basidiósporos. Pesquisou-se, também, a influência do extrato do basidiocarpo fresco de Pisolithus sp. sobre a germinação de esporos e sobre o crescimento vegetativo de algumas espécies fúngicas. Não foram observadas relações entre a densidade de basidiósporos espalhados na superfície do meio de cultura e as percentagens de germinação obtidas, indicando a inexistência de compostos inibitórios difusíveis nos esporos. O extrato de basidiocarpo adicionado ao meio de cultura inibiu a germinação dos basidiósporos de Pisolithus sp. e, também, dos esporos dos fungos Penicillium griseoroseum e Colletotricum lindemuthianum, os quais não necessitam da presença da planta como indutora da germinação. Por outro lado, a adição do extrato do basidiocarpo ao meio de cultura aumentou significativamente a produção de massa seca micelial de Pisolithus sp. e de P. griseoroseum, sugerindo que os compostos inibitórios presentes no corpo de frutificação atuam especificamente no processo de germinação de esporos. As percentagens de germinação obtidas na presença das espécies hospedeiras foram baixas, variando de 0 a viii0,0024%. A germinação dos basidiósporos foi estimulada pela presença das raízes da espécies hospedeiras no meio, especialmente a E. citriodora. As plantas leguminosas não-hospedeiras testadas estimularam a germinação, indicando que os fatores que favorecem o processo não são específicos das plantas hospedeiras. A adição dos ácidos fumárico, succínico, lático ou cítrico estimulou significativamente a germinação dos basidiósporos em comparação ao tratamento controle, sem a adição desses compostos. O estímulo variou de acordo com o ácido adicionado, resultando em percentagens de germinação de 0 a 0,0025%. A adição do flavonóide quercetina ao meio de cultura promoveu a germinação dos basidiósporos de Pisolithus sp. Já a rutina, um flavonol estimulador do crescimento micelial de Pisolithus tinctorius, não estimulou o processo germinativo. A germinação dos esporos de fungos ectomicorrízicos provavelmente envolve a participação de vários compostos químicos, com papéis diferentes ou sobrepostos, que iniciam e sustentam o processo. O estímulo à germinação promovido pela quercetina e pelas plantas leguminosas não-hospedeiras indica que os eventos iniciais de interação planta- microrganismo nas simbioses mutualistas devem envolver processos conservados de comunicação química. / The objective of this work was to study the in vitro germination of Pisolithus sp. basidiospores aiming at elucidating the factors that govern the process. The influence of spore numbers, the presence of host and non-host plants and the addition of organic acids and flavonoids to the culture medium on the in vitro germination of the spores were tested. The influence of an extract produced from a fresh basidiocarp of Pisolithus sp. on spore germination and vegetative growth of some fungal species was also evaluated. No relationship between spore density and germination percentages was observed, suggesting that Pisolithus sp. basidiospores do not contain readily diffusible inhibitory compounds. The basidiocarp extract inhibited the germination of Pisolithus sp. spores as well as that of Penicillium sp. and Colletotrichum lindemuthianum, two species that do not require the presence of the host plant in the culture medium for germination to occur. On the other hand, the addition of the extract to the culture medium significantly increased mycelial dry matter production by Pisolithus sp. and P. griseoroseum, suggesting that the inhibitory compounds present in the fungal fruit body act specifically on the process of spore germination. The germination percentages obtained in the presence of the host plants were low, varying from 0 to 0.0024%. Basidiospore germination was stimulated by the presence of the roots of host plants in the medium, especially those of E. citriodora. The non-host leguminous plants tested stimulated xgermination, indicating that the factors that favor the process are not specific of the host plants. The addition of fumaric, succinic, lactic, and citric acid significantly stimulated basidiospore germination. The stimulus varied from one organic acid to the next, resulting in germination percentages of 0 to 0.0025%. The addition of the flavonoid quercetin to the culture medium promoted the germination of the Pisolithus sp. basidiospores, while rutin, a flavonol that promotes mycelial growth of Pisolithus tinctorius, did not. The germination of spores of ectomycorrhizal fungi probably involves the participation of several chemical compounds with different or overlapping roles that initiate and sustain the process. The stimulus to germination promoted by quercetin and the non- host leguminous plants indicates that the initial events in the interaction between plants and symbiotic microbes must involve conserved processes of chemical communication.