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Viabilidade de estudos de expressa-o genica a partir de material obtido por punção aspirativa por agulha fina em linfomas não-Hodgkin / The feasibility of gene expression studies generated in fine needle aspiration specimens from patients with non-Hodgkin's

Corbi, Fernanda Cristina [UNIFESP] January 2008 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T23:47:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Recentemente, a punção aspirativa por agulha fina (PAAF) vem sendo utilizada como método para a obtenção de material para estudos de expressão gênica em alguns tipos de linfoma, na tentativa de substituir o banco de tumores a partir de tecido fresco congelado. Objetivos: Avaliar a quantidade e a qualidade do RNA obtido a partir de punção aspirativa de linfonodos por PAAF em linfomas nãoHodgkin e desenvolver estratégias para suprir eventuais falhas do método proposto, melhorando a qualidade e/ou a quantidade do material obtido por PAAF. Material e Métodos: A casuística foi constituída pelos pacientes com diagnóstico de LNH admitidos no Hospital São Paulo entre março de 2006 e dezembro de 2007, e que apresentaram linfonodomegalia periférica passível de punção. O grupo controle foi constituído por amígdalas (tecido linfóide reacional) de crianças submetidas à amigdalectomia no Hospital São Paulo. As punções foram realizadas com citoaspirador (amostra A) e seringa e agulha (amostra B). O RNA foi transcrito com o kit Superscript (Invitrogen) e a qualidade foi verificada a partir da amplificação de fragmentos de 155pb do gene β-ACTINA e de 311 pb do gene NOTCH-2. Resultados: Foram analisados 26 casos de LNH (52 amostras) e 10 amígdalas (20 amostras). A quantidade de RNA nas amostras de amígdalas obtidas com citoaspirador (A) variou de <1,0 a 6,2 µg. Nas amostras obtidas com seringa e agulha (B), a quantidade de RNA variou de <1,0 a 4,7µg. A quantidade de RNA nas amostras de LNH obtidas com citoaspirador (A) variou de <1,0 a 6,5 µg. Nas amostras obtidas com seringa e agulha (B) a quantidade de RNA variou de <1,0 a 5,5 µg. Em 19 (95%) das amostras de amígdalas conseguimos amplificar o fragmento do gene NOTCH-2. Na única amostra de controle em que não foi possível amplificar o gene NOTCH-2, houve amplificação do fragmento do gene β- ACTINA (155 pb). Nas amostras de LNH, conseguimos amplificar o fragmento do gene NOTCH-2 em apenas em 24 (46%) espécimens, mas conseguimos amplificar o fragmento do gene β-ACTINA em 51 (98%) delas. Na tentativa de aumentar a quantidade de RNA disponível em cada amostra, padronizamos a técnica de poliA PCR, que consiste na amplificação global de cDNAs poliadenilados. Conseguimos evidenciar aumento de 10 vezes na quantidade de cDNA na maioria dos casos e controles. A eficiência da reação foi verificada através da amplificação do fragmento do gene β-ACTINA, onde 100% dos controles e dos casos foram amplificados, e também do fragmento de 298 pb do gene PGK, onde 100% dos controles e 77% dos casos foram amplificados. Quando utilizamos o produto da reação de poliA PCR comparados com amostras de cDNA (cDNA versus cDNA poliA) através da técnica de Real Time PCR, conseguimos demonstrar equivalência nas amplificações em 100% das 15 amostras avaliadas, utilizando dois genes alvo e um gene constitutivo. Conclusão: Nossos resultados demonstram que a PAAF, tanto com o citoaspirador quanto com seringa e agulha, é uma boa fonte de pequena quantidade de RNA, mas suficiente para amplificar fragmentos de genes de aproximadamente 150 pb em mais de 95% das amostras. Através da técnica de poliA PCR conseguimos aumentar significativamente a quantidade de material genômico, obtendo resultados equivalentes ao uso de cDNA não amplificado, para futuros estudos de expressão gênica. / Recently, fine needle aspiration (FNA) becomes an alternative method to obtain genomic material for studies of gene expression in some types of lymphoma, in the attempt to substitute fresh frozen tissue tumor banks. Objectives: To evaluate the amount and the quality of the RNA obtained from lymph nodes of non-Hodgkin lymphomas (NHL) patients using FNAs and to develop strategies to overcome eventual drawbacks of the method. Material and Methods: Twenty-six patients with NHL diagnosis, admitted in São Paulo Hospital, Brazil, between March 2006 and December 2007, presenting peripheral lymphonodemegaly suitable for aspiration were included in this study. The control group includes 10 tonsils from children submitted to tonsillectomy in the same period. The aspirates were performed using both citoaspirator (sample A) and syringe and needle (sample B). The RNA was extracted using Trizol reagent and transcribed with the Superscript kit (Invitrogen). The quality of RNA was verified through the amplification of 155pb fragment from β-ACTIN and 311pb from NOTCH-2. Results: 52 NHL samples and 20 tonsil samples were analyzed. The amount of RNA in tonsil samples varied from <1.0 a 6.2 µg with citoaspirator (A) and varied from <1.0 a 4.7µg with syringe and needle (B). The amount of RNA obtained from NHL varied from <1.0 a 6.5 µg with citoaspirator (A) and <1.0 a 5.5 µg with syringe and needle. In 19 (95%) of the tonsil samples we could amplify NOTCH-2 fragment. In the only sample of control where NOTCH-2 amplification was negative, we could easily obtain β-ACTIN (155pb) amplification. In NHL samples, NOTCH-2 was amplified in only 24 (46%) specimens, but we obtained β-ACTIN amplification in 51 (98%) of them. In an attempt to increase the availability of larger amounts of RNA in each sample, we standardize the polyA PCR technique that consists of the global amplification of polyadenylated cDNA. This technique increased in 10 times the amount of cDNA in both cases and controls. The efficiency of the reaction was verified through the amplification of β-ACTIN, where 100% of the controls and the cases were amplified, as well through the amplification of PGK (298pb), positive in 100% of controls and 77% of the cases. When polyA PCR cDNA and non-amplified cDNA samples where paired to be evaluated by Real Time PCR using GAPDH as constitutive gene and NFκB and IκB as target genes, we could demonstrate equivalence in the amplifications of 100% of the 15 evaluated samples. Conclusion: Our results demonstrate that FNA, whatever citoaspirator or syringe and needle was used, it is a good source of small amounts of RNA, and could amplify fragments of approximately 150pb in more than 95% of the samples. PolyA PCR technique increased significantly of the amount of genomic material and is suitable as a cDNA source for future gene expression studies. / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Punção aspirativa por agulha fina em lesão nodular da tireóide : estudo da precisão da análise citopatológica no Hospital Universitário Walter Cantídio / Aspiratory Punção for fine needle in injury to nodular of the tireóide: study of the precision of the ctopatológica analysis in the University Hospital Walter Cantídio

Beserra, Carlos Felipe Saraiva January 1998 (has links)
BESERRA, Carlos Felipe Saraiva. Punção aspirativa por agulha fina em lesão nodular da tireóide : estudo da precisão da análise citopatológica no Hospital Universitário Walter Cantídio. 1998. 136 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 1998. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-02-18T11:58:55Z No. of bitstreams: 1 1998_dis_cfsbeserra.pdf: 3094619 bytes, checksum: 34656567bd58835f735ed9e4b952b6b1 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-02-18T11:59:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 1998_dis_cfsbeserra.pdf: 3094619 bytes, checksum: 34656567bd58835f735ed9e4b952b6b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-18T11:59:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1998_dis_cfsbeserra.pdf: 3094619 bytes, checksum: 34656567bd58835f735ed9e4b952b6b1 (MD5) Previous issue date: 1998 / Fine needle aspiration in thyroid disease: study on the accuracy of cytology at Hospital Universitário Walter Cantídio (HUWC-UFC). This study analised the accuracy of fine-needle aspiration technique (FNA) in patients referred to the Departamento de Cirurgia of the Universidade Federal do Ceará (UFC). These patients presented of thyroid nodular disease. The intention of the study was also to establish the routine use of the FNA in these patients. It was also part of the study to analyse risk factors to malignant thyroid disease and the importance of complementary exam in the patients studied. All patients had their clinical history taken and underwent physical examination, pré operative de routine exam and measurement of thyroid hormones. The aspirative form FNA was subjected to cytologic and histologic studies. Thyroid scan, ultrasonography and serological test to detect antithyroid antibodies were not performed in all patients. Endemiological risk factors such as age and sex were analised regarding their association with malignant thyroid disease. Sixty-six (66) patients were studied. They presented with clinically palpable thyroid lumps and were subjected to surgical treatment, which indications obeyed clinical and cytologic criteria. 63 patients were female and 3 male. Age average was 41,5 years, varying from 12 to 72 years. Risk factors were identified as patients with: 08 lumps with fast growth (12,1%), 9 lumps with hard texture at physical examination (13,6%). (08) Eight patients presented at physical examination palpable lymphnods (12,1%) and one (1) patient had hoarseness (1,5%). Results from cytologic were grouped as: benign – 30 (45,5), follicular neoplásica – 16 (24,2%), suspicious of being malignant – 5 (7,6%), malignant – 12 (18,2%), and inadequate – 3 (4,5%). Histology showed 22 malignant neoplasias and 44 benign nodules. Statistical analysis regarding sex, age, presence of hard lumps and palpable neck lymphnods homolateral to the lump showed an increased association with malignant disease (Fisher; p<0,05). However, there was no increase association with malignant age, patients who presented hoarseness, with lumps, with fast growth, and varied number to lumps and with different sizes. Combining cytology and histology enable to obtain the following indicators: sensitivity – 78,6% specificity – 94,5%, value of prediction – 90,5%, predictive positive value – 91,6%, false-positive – 8,4%, predictive negative value – 90,0%, and falsenegative – 10,0%. When included cytological results classified as indetermined (suspicious of malignancy and follicular neoplásica) as positive for malignant disease the indicators in the same sequence above were: 85%, 62,8%, 69,0%, 53,3%, 46,7%, 89,3% and 10,0%. Thyroid scan was performed in 23 patients and revealed 20 hypocaptent lumps (87%) – 6 of which were malignant (33,0%). No malignancy was found in two (2) normocaptent lumps and one (1) following results: 36 patients presented single lumps, 14 patients – multiple lumps and 2 patients had normal ultrasonography exam. There was a higher of malignancy in patients with single lumps turned to be malignant. When evaluating hormonal function there was a higher percentage of malignancy inpatients with normal hormonal disease (37,9%) – 22 out of 58 patients. When hypothyroidism was fund 25% this patients (1 out of 4) presented malignancy of nodular thyroid diseases and creditate the method as safe at the HUWC/UFC. / Punção Aspirativa por Agulha em lesão Nodular da Tireóide: Estudo da Precisão da Análise Citopatológica no Hospital Universitário Walter Cantídio. Curso de Pós-Graduação (Mestrado) em Base da Técnica Cirúrgica e Cirurgia Experimental, do Departamento de Cirurgia do Centro de Ciências da Saúde da UFC. Autor: Carlos Felipe Saraiva Beserra. No presente trabalho, objetivou-se analisar a precisão da punção aspirativa por agulha fina (PAAF), nos pacientes avaliados no Departamento de Cirurgia do Centro de Ciências da Saúde do HUWC-UFC, portadores de lesões nodulares de tireóide, bem como instituir como prática rotineira o uso da punção na avaliação destes pacientes. De forma secundária foram avaliados os fatores de risco para presença de neoplasia maligna nas lesões nodulares de tireóide e a importância dos exames complementares, nestes casos. Todos os pacientes foram avaliados com história clínica, exame físico, exames pré-operatórios de rotina, dosagem dos hormônios triodotironina, e tireotropina, estudo citológico e histológico. A cintilografia, ultrassom e a sorologia para anticorpos antitireoideanos não foram realizados em todos os pacientes. Os fatores de risco presentes, assim como a idade e o sexo, foram analisados em relação à sua associação com a presença de neoplasias malignas. Foram avaliados 66 pacientes portadores de nódulos de tireóide clinicamente palpáveis, submetidos a tratamento cirúrgico, cuja indicação obedeceu a critérios clínicos e citológicos. Desse total, 63 pacientes eram do sexo feminino. A média de idade foi de 41, anos, variando de 12 a 72 anos. Os fatores de risco, 09 com consistência dura no exame físico (13,6%), 09 pacientes apresentaram linfonodos clinicamente suspeitos (13,6%), e 01 apresentou rouquidão (1,5%). Os resultados da análise citológica foram agrupados como: benigno – 30 (45,5%), neoplasia folicular – 16 (24,2%), suspeito – 5 (7,6%), maligno – 12 (18,2%) e insatisfatório – 3 (4,5%). No estudo histológico, foi verificada a presença de 22 neoplasias malignas e 44 lesões benignas. A avaliação estatística em relação ao sexo masculino, presença de nódulos duros e de linfonodos cervicais palpáveis homolaterais ao nódulo mostrou maior associação com presença de câncer, estatisticamente significativa (Teste exato de Fisher; p<0,05). A análise quanto à idade, à presença de crescimento rápido, ao número ou o tamanho dos nódulos e à presença de rouquidão não apresentou associação com presença de neoplasia maligna, estatisticamente significante. No estudo da associação entre citologia e histologia foram observados os seguintes índices: sensibilidade de 78,6%, especificidade de 96,4%, valor de predição de 90,5%, valor preditivo positivo de 91,6%, falso-positivo de 8,4%, valor preditivo negativo de 90,0% e falso-negativo de 10,0%. Quando foram incluídos os resultados indeterminados (suspeito e neoplasia folicular) como positivo para presença de neoplasia maligna, na mesma seqüência anterior, os resultados foram: 85,0%, 62,8%, 69,0%, 53,3%, 46,7%, 89,3% e 10,6%. A cintilografia foi realizada em 23 pacientes e revelou 20 nódulos hipocaptantes (87%), dos quais 6 eram malignos (33%); não foram registrados cânceres nos 2 nódulos normocaptantes e em nódulo hipercaptante. O ultrassom foi realizado em 52 pacientes, dos quais, 36 apresentavam nódulos únicos, 14 nódulos múltiplos e em 2 casos a tireóide, segundo o laudo do ultrassonografista, era normal. Verificou-se um maior percentual de câncer nos pacientes com nódulo único, 36,1% versus 21,4%, contudo, a análise estatística não mostrou significância. Na presença de hipoecogenicidade do nódulo, 71% eram neoplasias malignas. A avaliação da função hormonal mostrou um maior percentual de câncer em pacientes com dosagens normais, 22 em 58 (37,9%), enquanto nos hipotireoideanos foi de 1 em 4 (25%), e nenhum nos 4 pacientes com hipertireoidismo. Os resultados aqui apresentados, portanto, confirmam a precisão da PAAF na abordagem da patologia nodular tireóideana e credenciam o método como seguro, no HUW-UFC.
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Acuracia da cultura de biopsia e aspirado hepaticos no diagnostico da colonizacao bacteriana da bile

Guimaraes, Jose Ricardo January 1994 (has links)
As principais causas de morbidade e mortalidade em cirurgia biliar relacionam-se a complicações sépticas. Estas associam-se à presença de bife colonizada por bactérias. Pacientes portadores de patologias biliares apresentam colonização bacteriana da bile em uma prevalência que varia de 11 a 1 00°/o. A maior parte dos estudos identifica uma prevalência de colonização da bile em torno de 1/3 dos casos. As espécies bacterianas mais freqüentemente isoladas são as da flora entérica, destacando-se a Escherichia co/i, Klebsiella sp e Streptococcus faeca/is. As bactérias anaeróbicas são encontradas em zero a 40°/o dos pacientes, sendo as mais prevalentes dos gêneros Bacteroides e Clostridium. No presente estudo, foram coletadas biópsias hepáticas intra-operatórlas com agulha de Vinn Silvermann e material denominado de aspirado hepático, constituído do sangue aspirado pela agulha após a retirada do fragmento da biópsia. O estudo visa identificar a acurácia da cultura bacteriana destes materiais no diagnóstico da colonização bacteriana da bile. A cultura da bile do colédoco, coletada por cateterização transcística da via biliar, foi escolhida como padrão-ouro. Alem destas, foram realizadas culturas de bile da vesícula biliar e sangue periférico. Foram, também, coletados dados de idade, sexo, diagnóstico pré-operatório, fatores de risco para colonização biliar e uso de antibióticos profiláticos. A população amestrada foi de pacientes submetidos a cirurgia biliar no Hospital de Clínicas de Porto Alegre. Foram excluídos pacientes em uso de antibióticos em regime terapêutico, uso de corticóides ou imunossupressores, presença de patologias parenquimatosas hepáticas e patologias infecciosas abdominais fora das vias biliares. As culturas aeróbicas foram feitas usando meio de agar-tripnase .. soja enriquecido com sangue humano desfibrinado e agar-MacConkey, incubados por 24 horas. As cultura anaeróbicas foram semeadas em caldo de tioglicolato enriquecido com vitamina K-hemina 1 o/o, agar-Brucella e agar-fenil-etanol enriquecidos com sangue de carneiro desfibrinado e vitamina K-hemina. o tempo de incubação foi de 48 horas. Entraram no estudo 57 pacientes, sete foram excluídos, permanecendo 50. A média de idade foi de 45,1 anos (:!:_15,3). Quarenta e oito pacientes tinham o diagnóstico pré-operatório de colecistite crônica, sendo 13 deles associada à coledocolitíase. Havia um caso de colecistite aguda e um de estenose pós-cirúrgica de via biliar. O fator de risco para colonização da bile de maior prevalência foi a coledocolitíase, com 13 pacientes. Vinte e nove pacientes não apresentavam nenhum fator de risco. Foram isoladas bactérias na bile do colédoco de nove pacientes. As espécies encontradas foram: Klebsiella pneumoniae, Escherichia co/i, Streptococcus faecalis, Enterobacter c/oacae, Klebsiella oxytoca, Streptococcus a-haemolitico. Na bile da vesícula biliar, foram isoladas bactérias em 7 pacientes: Klebsiella pneumoniae, Escherichia co/i, Streptococcus faeca/is, Enterobacter cloacae. Houve concordância entre os resultados da bile do colédoco e da vesícula biliar em 97,7% dos casos. A cultura da biópsia hepática foi positiva em dois casos. Em um, foi isolado Staphilococcus epidermidis, onde provavelmente houve contaminação externa. No outro, foi isolada Klebsiella pneumoniae que também havia sido encontrada na bile do colédoco do mesmo paciente. Neste paciente foi isolada Klebsiella no aspirado hepático. Foi o único caso de cultura positiva no aspirado hepático. Foi o único caso de cultura positiva no aspirado hepático. A cultura da biópsia hepática teve uma sensibilidade de 0,11, especificidade de 0,98, valor preditivo positivo de 0,50 e valor preditivo negativo de 0,83. A cultura do aspirado hepático apresentou uma sensibilidade de O, 11, especificidade de 1 ,O , valor preditivo positivo de 1 ,O e valor preditivo negativo de 0,84. Conclui-se que a cultura da biópsia e aspirado hepáticos com a técnica bacteriólogica empregada no estudo demonstrou uma acurácia diagnóstica baixa. A sua utilidade clínica na identificação de pacientes portadores de bactérias na bile é limitada. / The main causes of morbidity and mortality in biliary tract surgery are related to septic complications. Those relate to the presence of bile colonized by bacteria. Patients with biliary pathology show bacteria colonization of bile in a prevalence which varies from 11 to 100°/o. The majority of the studies identify a prevalence of colonization of bile about 1/3 of the cases. lhe bacterial species most frequently isolated are those of enteric flora, distinguishing the Escherichia co/i, Klebsiella sp and Streptococcus faecallis. The anaerobic bacteria are found in zero to 40o/o of the cases, being the most prevailing of the species Bactoides and Clostridium. In the present study there were collected hepatic intra-surgical biopsies with a needle of Vinn Silvermann and material named hepatical aspirated, made of aspirated blood through the needle after the removal of the pieces of the biopsy. lhe study aims to identify the accuracy of the bacterial culture from those substances in the diagnostic of the bacterial colonization of the bile. The culture of the bife from the common duct, collected by cystic duct probing, was chosen as the gold-standard. Besides those, there were made cultures o f bile o f the gallbladder and peripheral blood. lt was also collected data of age, sex, prcoperativo diagnosis, risk factors to biliary tract colonization and the use of prophylactic antibiotics. The sampled population was of patients undergoing on biliary tact surgery at the "Hospital de Clínicas de Porto Alegre". Patients in therapeutical use of antibiotics, using corticoesteroids or immunossupressive drugs, with hepato-cellular pathologies and abdominal infectious pathologies out · of the biliary tract were excluded. The aerobic cultures were made by the use of agar-tripnase-soy improved by desfibrinated human blood and agar-McConkey, incubated for 24 hours. The anaerobic cultures were sowed in a broth of tioglicolatus improved by vitamins K-hemine 1o/o, agar-Brucella and agar-fenil-ethanol improved with desfibrinated sheep blood and vitamin K-hemine. The time of incubation was of 48 hours. From 57 patients that begun the study, 7 were excluded, remaining 50. The age average was of 45,7 years old (± 15,3). Forty-eight patients had the preoperative diagnosis of chronic cholecystitis, 13 of them being related to choledocholithiasis. There was a case of acute cholecystitis and one of postoperative biliary tract stenosis. The risk factor to bile colonization of major prevalence was the choledocholithiasis (13 patients). Twenty-nine patients did not show any risk factor. They were isolated bacteria in the common duct bile of nine patients. The species found were Klebsiella penumoniae, Eschericha coli, Streptococcus faecalis, Enterobacter cloacae, Klebsiella oxytoca, Streptococcus a-haemolitico. In the gallbladder bile bacteria were isolated in 7 patients: Klebsie/la pneumoniae, Escherichia co/i, Streptococcus faecalis, Enterobacter cloacae. There was agreement between the results of the common duct and gallbladder bile in 97,7% o f the cases. The culture o f the hepatic biopsy was positiva in two cases. In one, it was isolated Staphi/ococcus epidermidis , were probably there was externai contamination. In the other one, it was isolated Klebsiella penumoniae, which had also been found in the common duct bile of the same patient. In that patient it was isolated Klebsiella in the hepatic aspirated. lt was the only case of positive culture in the hepatic aspirated. The hepatic biopsy culture had a sensibility of O, 11, a specificity of 0,98, a predictive positiva value of 0,50 and a predictive negative value of 0,83. The hepatic aspirated culture showed a sensibility of O, 11, a specificity of 1 ,O, a predictive positive value of 1 ,O and a predictive negative value of 0,84. We concluded that the culture of the biopsy and hepatic aspirated, with the bacteriological technique used in the study, showed a low diagnostic accuracy. lt has a low clinicai use in the identification of patients with biliary tract colonization.
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Uso combinado da citologia e biópsia endoscópicas no diagnóstico das lesões do intestino grosso

Maguilnik, Ismael January 1977 (has links)
Resumo não disponível
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Biópsia hepática transjugular : experiência inicial com 39 pacientes

Maciel, Antonio Carlos January 1996 (has links)
Resumo não disponível
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Acuracia da cultura de biopsia e aspirado hepaticos no diagnostico da colonizacao bacteriana da bile

Guimaraes, Jose Ricardo January 1994 (has links)
As principais causas de morbidade e mortalidade em cirurgia biliar relacionam-se a complicações sépticas. Estas associam-se à presença de bife colonizada por bactérias. Pacientes portadores de patologias biliares apresentam colonização bacteriana da bile em uma prevalência que varia de 11 a 1 00°/o. A maior parte dos estudos identifica uma prevalência de colonização da bile em torno de 1/3 dos casos. As espécies bacterianas mais freqüentemente isoladas são as da flora entérica, destacando-se a Escherichia co/i, Klebsiella sp e Streptococcus faeca/is. As bactérias anaeróbicas são encontradas em zero a 40°/o dos pacientes, sendo as mais prevalentes dos gêneros Bacteroides e Clostridium. No presente estudo, foram coletadas biópsias hepáticas intra-operatórlas com agulha de Vinn Silvermann e material denominado de aspirado hepático, constituído do sangue aspirado pela agulha após a retirada do fragmento da biópsia. O estudo visa identificar a acurácia da cultura bacteriana destes materiais no diagnóstico da colonização bacteriana da bile. A cultura da bile do colédoco, coletada por cateterização transcística da via biliar, foi escolhida como padrão-ouro. Alem destas, foram realizadas culturas de bile da vesícula biliar e sangue periférico. Foram, também, coletados dados de idade, sexo, diagnóstico pré-operatório, fatores de risco para colonização biliar e uso de antibióticos profiláticos. A população amestrada foi de pacientes submetidos a cirurgia biliar no Hospital de Clínicas de Porto Alegre. Foram excluídos pacientes em uso de antibióticos em regime terapêutico, uso de corticóides ou imunossupressores, presença de patologias parenquimatosas hepáticas e patologias infecciosas abdominais fora das vias biliares. As culturas aeróbicas foram feitas usando meio de agar-tripnase .. soja enriquecido com sangue humano desfibrinado e agar-MacConkey, incubados por 24 horas. As cultura anaeróbicas foram semeadas em caldo de tioglicolato enriquecido com vitamina K-hemina 1 o/o, agar-Brucella e agar-fenil-etanol enriquecidos com sangue de carneiro desfibrinado e vitamina K-hemina. o tempo de incubação foi de 48 horas. Entraram no estudo 57 pacientes, sete foram excluídos, permanecendo 50. A média de idade foi de 45,1 anos (:!:_15,3). Quarenta e oito pacientes tinham o diagnóstico pré-operatório de colecistite crônica, sendo 13 deles associada à coledocolitíase. Havia um caso de colecistite aguda e um de estenose pós-cirúrgica de via biliar. O fator de risco para colonização da bile de maior prevalência foi a coledocolitíase, com 13 pacientes. Vinte e nove pacientes não apresentavam nenhum fator de risco. Foram isoladas bactérias na bile do colédoco de nove pacientes. As espécies encontradas foram: Klebsiella pneumoniae, Escherichia co/i, Streptococcus faecalis, Enterobacter c/oacae, Klebsiella oxytoca, Streptococcus a-haemolitico. Na bile da vesícula biliar, foram isoladas bactérias em 7 pacientes: Klebsiella pneumoniae, Escherichia co/i, Streptococcus faeca/is, Enterobacter cloacae. Houve concordância entre os resultados da bile do colédoco e da vesícula biliar em 97,7% dos casos. A cultura da biópsia hepática foi positiva em dois casos. Em um, foi isolado Staphilococcus epidermidis, onde provavelmente houve contaminação externa. No outro, foi isolada Klebsiella pneumoniae que também havia sido encontrada na bile do colédoco do mesmo paciente. Neste paciente foi isolada Klebsiella no aspirado hepático. Foi o único caso de cultura positiva no aspirado hepático. Foi o único caso de cultura positiva no aspirado hepático. A cultura da biópsia hepática teve uma sensibilidade de 0,11, especificidade de 0,98, valor preditivo positivo de 0,50 e valor preditivo negativo de 0,83. A cultura do aspirado hepático apresentou uma sensibilidade de O, 11, especificidade de 1 ,O , valor preditivo positivo de 1 ,O e valor preditivo negativo de 0,84. Conclui-se que a cultura da biópsia e aspirado hepáticos com a técnica bacteriólogica empregada no estudo demonstrou uma acurácia diagnóstica baixa. A sua utilidade clínica na identificação de pacientes portadores de bactérias na bile é limitada. / The main causes of morbidity and mortality in biliary tract surgery are related to septic complications. Those relate to the presence of bile colonized by bacteria. Patients with biliary pathology show bacteria colonization of bile in a prevalence which varies from 11 to 100°/o. The majority of the studies identify a prevalence of colonization of bile about 1/3 of the cases. lhe bacterial species most frequently isolated are those of enteric flora, distinguishing the Escherichia co/i, Klebsiella sp and Streptococcus faecallis. The anaerobic bacteria are found in zero to 40o/o of the cases, being the most prevailing of the species Bactoides and Clostridium. In the present study there were collected hepatic intra-surgical biopsies with a needle of Vinn Silvermann and material named hepatical aspirated, made of aspirated blood through the needle after the removal of the pieces of the biopsy. lhe study aims to identify the accuracy of the bacterial culture from those substances in the diagnostic of the bacterial colonization of the bile. The culture of the bife from the common duct, collected by cystic duct probing, was chosen as the gold-standard. Besides those, there were made cultures o f bile o f the gallbladder and peripheral blood. lt was also collected data of age, sex, prcoperativo diagnosis, risk factors to biliary tract colonization and the use of prophylactic antibiotics. The sampled population was of patients undergoing on biliary tact surgery at the "Hospital de Clínicas de Porto Alegre". Patients in therapeutical use of antibiotics, using corticoesteroids or immunossupressive drugs, with hepato-cellular pathologies and abdominal infectious pathologies out · of the biliary tract were excluded. The aerobic cultures were made by the use of agar-tripnase-soy improved by desfibrinated human blood and agar-McConkey, incubated for 24 hours. The anaerobic cultures were sowed in a broth of tioglicolatus improved by vitamins K-hemine 1o/o, agar-Brucella and agar-fenil-ethanol improved with desfibrinated sheep blood and vitamin K-hemine. The time of incubation was of 48 hours. From 57 patients that begun the study, 7 were excluded, remaining 50. The age average was of 45,7 years old (± 15,3). Forty-eight patients had the preoperative diagnosis of chronic cholecystitis, 13 of them being related to choledocholithiasis. There was a case of acute cholecystitis and one of postoperative biliary tract stenosis. The risk factor to bile colonization of major prevalence was the choledocholithiasis (13 patients). Twenty-nine patients did not show any risk factor. They were isolated bacteria in the common duct bile of nine patients. The species found were Klebsiella penumoniae, Eschericha coli, Streptococcus faecalis, Enterobacter cloacae, Klebsiella oxytoca, Streptococcus a-haemolitico. In the gallbladder bile bacteria were isolated in 7 patients: Klebsie/la pneumoniae, Escherichia co/i, Streptococcus faecalis, Enterobacter cloacae. There was agreement between the results of the common duct and gallbladder bile in 97,7% o f the cases. The culture o f the hepatic biopsy was positiva in two cases. In one, it was isolated Staphi/ococcus epidermidis , were probably there was externai contamination. In the other one, it was isolated Klebsiella penumoniae, which had also been found in the common duct bile of the same patient. In that patient it was isolated Klebsiella in the hepatic aspirated. lt was the only case of positive culture in the hepatic aspirated. The hepatic biopsy culture had a sensibility of O, 11, a specificity of 0,98, a predictive positiva value of 0,50 and a predictive negative value of 0,83. The hepatic aspirated culture showed a sensibility of O, 11, a specificity of 1 ,O, a predictive positive value of 1 ,O and a predictive negative value of 0,84. We concluded that the culture of the biopsy and hepatic aspirated, with the bacteriological technique used in the study, showed a low diagnostic accuracy. lt has a low clinicai use in the identification of patients with biliary tract colonization.
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Acuracia da cultura de biopsia e aspirado hepaticos no diagnostico da colonizacao bacteriana da bile

Guimaraes, Jose Ricardo January 1994 (has links)
As principais causas de morbidade e mortalidade em cirurgia biliar relacionam-se a complicações sépticas. Estas associam-se à presença de bife colonizada por bactérias. Pacientes portadores de patologias biliares apresentam colonização bacteriana da bile em uma prevalência que varia de 11 a 1 00°/o. A maior parte dos estudos identifica uma prevalência de colonização da bile em torno de 1/3 dos casos. As espécies bacterianas mais freqüentemente isoladas são as da flora entérica, destacando-se a Escherichia co/i, Klebsiella sp e Streptococcus faeca/is. As bactérias anaeróbicas são encontradas em zero a 40°/o dos pacientes, sendo as mais prevalentes dos gêneros Bacteroides e Clostridium. No presente estudo, foram coletadas biópsias hepáticas intra-operatórlas com agulha de Vinn Silvermann e material denominado de aspirado hepático, constituído do sangue aspirado pela agulha após a retirada do fragmento da biópsia. O estudo visa identificar a acurácia da cultura bacteriana destes materiais no diagnóstico da colonização bacteriana da bile. A cultura da bile do colédoco, coletada por cateterização transcística da via biliar, foi escolhida como padrão-ouro. Alem destas, foram realizadas culturas de bile da vesícula biliar e sangue periférico. Foram, também, coletados dados de idade, sexo, diagnóstico pré-operatório, fatores de risco para colonização biliar e uso de antibióticos profiláticos. A população amestrada foi de pacientes submetidos a cirurgia biliar no Hospital de Clínicas de Porto Alegre. Foram excluídos pacientes em uso de antibióticos em regime terapêutico, uso de corticóides ou imunossupressores, presença de patologias parenquimatosas hepáticas e patologias infecciosas abdominais fora das vias biliares. As culturas aeróbicas foram feitas usando meio de agar-tripnase .. soja enriquecido com sangue humano desfibrinado e agar-MacConkey, incubados por 24 horas. As cultura anaeróbicas foram semeadas em caldo de tioglicolato enriquecido com vitamina K-hemina 1 o/o, agar-Brucella e agar-fenil-etanol enriquecidos com sangue de carneiro desfibrinado e vitamina K-hemina. o tempo de incubação foi de 48 horas. Entraram no estudo 57 pacientes, sete foram excluídos, permanecendo 50. A média de idade foi de 45,1 anos (:!:_15,3). Quarenta e oito pacientes tinham o diagnóstico pré-operatório de colecistite crônica, sendo 13 deles associada à coledocolitíase. Havia um caso de colecistite aguda e um de estenose pós-cirúrgica de via biliar. O fator de risco para colonização da bile de maior prevalência foi a coledocolitíase, com 13 pacientes. Vinte e nove pacientes não apresentavam nenhum fator de risco. Foram isoladas bactérias na bile do colédoco de nove pacientes. As espécies encontradas foram: Klebsiella pneumoniae, Escherichia co/i, Streptococcus faecalis, Enterobacter c/oacae, Klebsiella oxytoca, Streptococcus a-haemolitico. Na bile da vesícula biliar, foram isoladas bactérias em 7 pacientes: Klebsiella pneumoniae, Escherichia co/i, Streptococcus faeca/is, Enterobacter cloacae. Houve concordância entre os resultados da bile do colédoco e da vesícula biliar em 97,7% dos casos. A cultura da biópsia hepática foi positiva em dois casos. Em um, foi isolado Staphilococcus epidermidis, onde provavelmente houve contaminação externa. No outro, foi isolada Klebsiella pneumoniae que também havia sido encontrada na bile do colédoco do mesmo paciente. Neste paciente foi isolada Klebsiella no aspirado hepático. Foi o único caso de cultura positiva no aspirado hepático. Foi o único caso de cultura positiva no aspirado hepático. A cultura da biópsia hepática teve uma sensibilidade de 0,11, especificidade de 0,98, valor preditivo positivo de 0,50 e valor preditivo negativo de 0,83. A cultura do aspirado hepático apresentou uma sensibilidade de O, 11, especificidade de 1 ,O , valor preditivo positivo de 1 ,O e valor preditivo negativo de 0,84. Conclui-se que a cultura da biópsia e aspirado hepáticos com a técnica bacteriólogica empregada no estudo demonstrou uma acurácia diagnóstica baixa. A sua utilidade clínica na identificação de pacientes portadores de bactérias na bile é limitada. / The main causes of morbidity and mortality in biliary tract surgery are related to septic complications. Those relate to the presence of bile colonized by bacteria. Patients with biliary pathology show bacteria colonization of bile in a prevalence which varies from 11 to 100°/o. The majority of the studies identify a prevalence of colonization of bile about 1/3 of the cases. lhe bacterial species most frequently isolated are those of enteric flora, distinguishing the Escherichia co/i, Klebsiella sp and Streptococcus faecallis. The anaerobic bacteria are found in zero to 40o/o of the cases, being the most prevailing of the species Bactoides and Clostridium. In the present study there were collected hepatic intra-surgical biopsies with a needle of Vinn Silvermann and material named hepatical aspirated, made of aspirated blood through the needle after the removal of the pieces of the biopsy. lhe study aims to identify the accuracy of the bacterial culture from those substances in the diagnostic of the bacterial colonization of the bile. The culture of the bife from the common duct, collected by cystic duct probing, was chosen as the gold-standard. Besides those, there were made cultures o f bile o f the gallbladder and peripheral blood. lt was also collected data of age, sex, prcoperativo diagnosis, risk factors to biliary tract colonization and the use of prophylactic antibiotics. The sampled population was of patients undergoing on biliary tact surgery at the "Hospital de Clínicas de Porto Alegre". Patients in therapeutical use of antibiotics, using corticoesteroids or immunossupressive drugs, with hepato-cellular pathologies and abdominal infectious pathologies out · of the biliary tract were excluded. The aerobic cultures were made by the use of agar-tripnase-soy improved by desfibrinated human blood and agar-McConkey, incubated for 24 hours. The anaerobic cultures were sowed in a broth of tioglicolatus improved by vitamins K-hemine 1o/o, agar-Brucella and agar-fenil-ethanol improved with desfibrinated sheep blood and vitamin K-hemine. The time of incubation was of 48 hours. From 57 patients that begun the study, 7 were excluded, remaining 50. The age average was of 45,7 years old (± 15,3). Forty-eight patients had the preoperative diagnosis of chronic cholecystitis, 13 of them being related to choledocholithiasis. There was a case of acute cholecystitis and one of postoperative biliary tract stenosis. The risk factor to bile colonization of major prevalence was the choledocholithiasis (13 patients). Twenty-nine patients did not show any risk factor. They were isolated bacteria in the common duct bile of nine patients. The species found were Klebsiella penumoniae, Eschericha coli, Streptococcus faecalis, Enterobacter cloacae, Klebsiella oxytoca, Streptococcus a-haemolitico. In the gallbladder bile bacteria were isolated in 7 patients: Klebsie/la pneumoniae, Escherichia co/i, Streptococcus faecalis, Enterobacter cloacae. There was agreement between the results of the common duct and gallbladder bile in 97,7% o f the cases. The culture o f the hepatic biopsy was positiva in two cases. In one, it was isolated Staphi/ococcus epidermidis , were probably there was externai contamination. In the other one, it was isolated Klebsiella penumoniae, which had also been found in the common duct bile of the same patient. In that patient it was isolated Klebsiella in the hepatic aspirated. lt was the only case of positive culture in the hepatic aspirated. The hepatic biopsy culture had a sensibility of O, 11, a specificity of 0,98, a predictive positiva value of 0,50 and a predictive negative value of 0,83. The hepatic aspirated culture showed a sensibility of O, 11, a specificity of 1 ,O, a predictive positive value of 1 ,O and a predictive negative value of 0,84. We concluded that the culture of the biopsy and hepatic aspirated, with the bacteriological technique used in the study, showed a low diagnostic accuracy. lt has a low clinicai use in the identification of patients with biliary tract colonization.
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Avaliação dos métodos histológico e citológico no diagnóstico dos tumores musculoesqueléticos

Moura de Andrade Lima, Pablo 31 January 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T23:00:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3396_1.pdf: 1520156 bytes, checksum: 070f318671a3024adcd19aea5791b4cf (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Objetivo: comparar o índice de acerto dos métodos citológico e histológico no diagnóstico das neoplasias músculoesqueléticas, além de suas capacidades de distinguir lesões benignas de malignas. Método: foram levantados 63 casos que foram analisados simultaneamente através da citologia e histologiano período de janeiro a dezembro de 2010. Foram excluídos cinco por erro na punção, sendo estudados 58 casos. Os resultados das biópsias estudadas por cito e histologia foram comparados com o histopatológico da peça operatória ou imunohistoquímica (nos casos que não necessitaram de ressecção). O percentual de acertos foi comparado por análise estatística. Foram, ainda, determinados a sensibilidade, especificidade, valores preditivos positivos e negativos e a acurácia de cada método. Resultados: houve 12% de biópsias inconclusivas pela citologia. O percentual de acerto no diagnóstico foi de 70,7% e 81% (p = 0,179), a capacidade de diferenciar uma lesão benigna de uma maligna foi de 84,5% e 93,1% (p = 0,160), respectivamente para os métodos citológico e histológico. A citologia obteve sensibilidade de 87,8%, especificidade de 76,5%, valor preditivo positivo de 90%, valor preditivo negativo de 72% e acurácia de 84,5%. A histologia obteve sensibilidade de 90,2%, especificidade de 100%, valor preditivo positivo de 100%, valor preditivo negativo de 81% e acurácia de 93,1%. Conclusão: apesar de promissora na avaliação dos tumores músculoesqueléticos, a citologia obtida por punção por agulha fina é menos precisa e confiável do que a avaliação histológica na avaliação dessas lesões
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Impacto do uso de conectores sem agulha para sistema fechado de infusão na ocorrência de infecção de corrente sanguínea relacionada ao cateter venoso central: evidências de uma revisão sistemática / Impact of needleless connectors in closed infusion systems on the occurrence of bloodstream infection related to the use of central venous catheters: evidence from a systematic review

Mendonça, Silvia Helena Frota 29 April 2008 (has links)
Os conectores sem agulhas foram introduzidos para redução de incidência de acidentes pérfuro-cortantes nos profissionais da área da saúde e a literatura apresenta evidências irrefutáveis sobre este aspecto. No entanto, não há evidências conclusivas sobre as vantagens do conector sem agulha para o paciente, no que se referem aos índices de infecção de corrente sanguínea relacionada ao cateter venoso central. Este estudo tem como objetivo evidenciar o impacto do uso de conectores sem agulhas para sistema fechado de infusão na ocorrência de infecção de corrente sanguínea relacionada ao cateter venoso central por meio de revisão sistemática, desenvolvida conforme as recomendações propostas pela Colaboração Cochrane. A estratégia de busca nas bases de dados eletrônicas utilizou os componentes do PICO: População (estudos com pacientes em uso de cateter venoso central, independente de idade, sexo, etnia e serviço de saúde vinculado); Intervenção (uso de conectores de sistema fechado sem agulhas, não-valvulados, valvulados, com pressão positiva ou não); Comparação (uso de oclusores, conectores de sistema fechado com ou sem agulhas, não-valvulados, valvulados, com pressão positiva ou não); Outcome-desfecho (infecção de corrente sanguínea, contaminação do canhão, contaminação microbiana, infecção de corrente sanguínea relacionada ao cateter). As bases eletrônicas investigadas foram: PubMEDLINE, OVID, EMBASE, LILACS, CINAHL. Também foram avaliadas as referências bibliográficas dos estudos incluídos. Os resultados estão apresentados em três etapas: caracterização do processo de seleção dos estudos encontrados na busca; caracterização dos estudos incluídos para a revisão sistemática (RS); avaliação de qualidade e força da evidência dos estudos incluídos segundo a Escala de Jadad e a Escala de avaliação de qualidade dos estudos na área de Controle e Prevenção de Infecção de Corrente Sanguínea Relacionada ao cateter Venoso Central. A amostra desta revisão sistemática constitui-se de 14 estudos, e quatro investigaram somente conectores sem agulhas. Foram encontrados 6 ensaios clínicos controlados randomizados, 4 coortes, 3 caso-controle e 1 resultado terapêutico. A infecção de corrente sanguínea relacionada ao cateter venoso central foi o desfecho de 9 estudos. Seis apresentaram diferenças a favor do conector valvulado; 04 a favor do conector puncionável com cânula; 01 a favor do conector puncionável com agulha; 01 a favor do conector valvulado com pressão positiva e 02 a favor do dispositivo usado antes da troca. A heterogeneidade dos estudos quanto aos desenhos de pesquisa, as características das populações e os fatores de riscos controlados e os resultados, não permitem a realização de meta-análise, contudo, é possível afirmar, com base nos quatro melhores estudos encontrados, que a implantação de conectores sem agulhas, quer valvulados ou com injetor pré-furado, com manutenção de sistema fechado de infusão, apresentam impacto positivo relacionado à menor contaminação do canhão do cateter ou na ocorrência de infecção de corrente sanguínea relacionada ao cateter venoso central / Needleless connectors were introduced to reduce the incidence of needlestick injuries in health professionals and according to the literature their effectiveness is irrefutable. However, there is no conclusive evidence on the advantages of needleless connectors for patients with regard to bloodstream infection rates from the use of central venous catheters. The objective of this study was to determine the impact of the use of needleless connectors in closed infusion systems on the occurrence of bloodstream infections related to the use of central venous catheters by conducting a Cochrane systematic review. The strategy for searching electronic databases employed the components of the PICO model: Population (studies of patients using central venous catheters, regardless of age, sex, race and associated health service); Intervention (use of closed needleless connector systems, with and without valves, with and without positive pressure); Comparison (use of plugs, closed system connectors with and without needles, with and without valves, with and without positive pressure); Outcome (bloodstream infection, cannula contamination, microbial contamination, bloodstream infection related to catheter). The electronic databases investigated were: PubMEDLINE, OVID, EMBASE, LILACS and CINAHL. Bibliographical references of the studies included were also evaluated. The results are presented in three stages: characterization of selection process for studies found in the search; characterization of studies included in the systematic revision; evaluation of quality and strength of evidence for studies included according to the Jadad Scale and the scale of quality of studies in the control and prevention of bloodstream infections related to central venous catheters. The sample of this systematic review was made up of 14 studies of which 4 investigated only needleless connectors. We found 6 randomized control clinical trials, 4 cohort, 3 case-control and 1 therapeutic result. Bloodstream infection related to central venous catheters was the outcome for 9 studies. Six presented differences regarding the valved connector; 04 in favor of the puncturable connector with cannula; 01 in favor of the puncturable connector with needle; 01 in favor of the valved connector with positive pressure and 02 in favor of the device used before the change. The heterogeneous nature of the studies with regard to design, population characteristics and controlled risk factors and results prevented a meta-analysis. However, it is possible to state, based on the four best studies found, that the introduction of needleless connectors, whether valved or puncturable with cannula, coupled with a closed infusion system, presented a positive impact on lowering contamination of catheter cannulae and on the occurrence of bloodstream infection related to central venous catheters
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Análise comparativa da punção aspirativa por agulha fina (PAAF) em relação a biópsia em cavidade oral e região de cabeça e pescoço / Comparative analysis of Fine Needle Aspiration Biopsy (FNAB) versus biopsy in oral cavity and head and neck region

Santos, Ana Paula Candido dos 22 October 2010 (has links)
O presente estudo teve como objetivos avaliar a sensibilidade, a especificidade e a acurácia da Punção Aspirativa por Agulha Fina (PAAF) em nódulos submucosos da cavidade bucal e da região de cabeça e pescoço como ferramenta auxiliar de diagnóstico. Foram selecionados 50 pacientes consecutivamente que procuraram a Clínica da Disciplina de Estomatologia Clínica da FOUSP, portadores de lesões em boca e em região de cabeça e pescoço. O material obtido pela PAAF foi enviado a um mesmo patologista apenas com o diagnóstico clínico e após a emissão do laudo da PAAF o laudo do anátomo patológico era emitido servindo como padrão ouro. Após os cálculos, o resultado da sensibilidade foi de 75%, a especificidade foi de 96%, a acurácia foi de 58,8%, o valor preditivo positivo foi de 86% e o valor preditivo negativo foi de 93%. A significância foi estabelecida para 5% e o teste usado foi o teste de Kappa com valor de P<0,001 e um teste qui-quadrado, com valor de P=0,788. Pela análise dos resultados a PAAF teve uma alta sensibilidade para identificar lesões malignas, uma alta especificidade para identificar lesões benignas e uma baixa acurácia para se obter um diagnóstico definitivo. / The objectives of this present study are to evaluate the sensitivity, specificity and accuracy of Fine Needle Aspiration Biopsy (FNAB) in submucous nodules of oral cavity and nodules of head and neck region as an auxiliary tool of diagnoses. 50 patients that looked for the Clinic of the Discipline of Oral Stomatology of FOUSP were consecutively selected, carrying lesions in the oral cavity and the head and neck region. The material obtained by FNA was sent to only one pathologist with the clinical diagnosis and after the emission of FNAB report the biopsy report was emitted serving as the gold standard. After the calculation, the results of sensibility was 75%, the specificity was 96%, the accuracy was 58,8%, the positive predict value was 86% and the negative predict value was 93%. The significance was established for 5% and the tests used was Kappa with P<0,001 and a Chi-square with a P value of 0,778.With the results analysis the FNAB had a high sensibility to identify malignant lesions, a high specificity to identify benign lesions and a low accuracy to obtain final diagnoses.

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