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Avaliação in vitro da atividade anti-Toxoplasma gondii do extrato etanólico e óleo essencial extraídos da Siparuna guianensis e do alfa bisabolol isolado / In vitro evaluation of the anti-Toxoplasma gondii activity of ethanolic extract and essential oil extracted from Siparuna guianensis and alpha bisabolol isolatedSouza, Laura Vilela 26 June 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-06-26 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Toxoplasmosis, a result of the obligate intracellular protozoan Toxoplasma gondii, is a cosmopolitan
disease that affects the character of the world population. Typically T. gondii infection is
asymptomatic in immunocompetent examples, however, several manifestations could be more
severe, immunocompromised and infected congenitally, leading to fatal consequences, the major
public health problem. The treatment of toxoplasmosis is the treatment of toxoplasmosis, the
effects of toxoplasmosis, such as stuff based on the density lipids, making essential profile for
security. This study evaluates in vitro the anti-toxoplasmic potential of the ethanolic extract, ethyl
acetate and aquatic fractions, essential oil and bisabolol isolated from Siparuna guianensis. Cell
viability tests using NIH/3T3 murine fibroblasts were performed by the MTT colorimetric method.
Anti-toxoplasmatics were evaluated using the β-galactosidase assay in two experimental conditions
using T. gondii strain RH-2F1. Samples were tested in different variables of 15 to 500 μg/mL, while
the testosterone assayed in the test ranged from 15 to 500 μg/mL. It was verified that ethanolic
extract and a fraction of euphyl acetate of cytometic activity against the fibroblasts in the highest
concentrations analyzed (250 and 500 μg/mL) and the essential oil in the concentration of 500
μg/mL. For the other calories, some have a significant cytotoxic effect, suggesting that the plant is
well tolerated by the body. In the intracellular proliferation of the parasite when the treatment was
carried out after the cellular activation, the control of the progesterone control and the parasitism
was observed, being that only a fraction of standard of acetate demonstrated capacity of relevant
toxoplasmosis, presenting IC 50 value of 77,21 μg/ml. In contrast, the aqueous fraction and theessential effect, the thermal effect against the parasite, are not a therapeutic alternative. It was
verified that the inhibitory effect of the parasitism was more significant in the pre-treatment of the
parasites before the cellular infection, evidencing a direct effect on the parasite. According to
protocol specifications, in order to allow the use of data, according to their implications, in vivo
parasitic infection models and identification of the major plant components are required. / A toxoplasmose, causada pelo protozoário intracelular obrigatório Toxoplasma gondii, é uma
doença cosmopolita que atinge um terço da população mundial. Tipicamente a infecção pelo T.
gondii é assintomática em indivíduos imunocompetentes, no entanto, várias manifestações clínicas
podem acometer, sobretudo indivíduos imunocomprometidos e infectados congenitamente,
levando a consequências fatais, o que torna essa doença um importante problema de saúde pública.
Embora existam medicamentos para o tratamento da toxoplasmose, estes apresentam eficácia
limitada e graves efeitos colaterais, tornando essencial a busca de novas terapias, com melhor perfil
de segurança. Neste contexto, o objetivo do estudo foi avaliar in vitro o potencial anti-toxoplásmico
do extrato etanólico, frações acetato de etila e aquosa, óleo essencial e do α-bisabolol isolado de
Siparuna guianensis. Foi realizado teste de viabilidade celular utilizando fibroblastos murinos
NIH/3T3, pelo método colorimétrico de MTT. A atividade anti-toxoplásmica foi avaliada por meio do
ensaio da β-galactosidase em duas condições experimentais diferentes, utilizando parasitos da cepa
RH-2F1 de T. gondii. As amostras foram testadas em diferentes concentrações variando de 15 a 500
μg/mL, sendo utilizado como controle negativo meio RPMI e como controle positivo a enrofloxacina.
Verificou-se que o extrato etanólico e a fração acetato de etila apresentaram atividade citotóxica
frente aos fibroblastos nas maiores concentrações analisadas (250 e 500 μg/mL) e o óleo essencial
na concentração de 500 μg/mL. Para as demais concentrações, nenhuma apresentou efeito
citotóxico significativo, sugerindo que a planta seja bem tolerada pelo organismo. Na avaliação da
proliferação intracelular do parasito quando o tratamento foi realizado após a infecção celular,
observou-se que os compostos da S. guianensis controlaram parcialmente o parasitismo, sendo que
apenas a fração acetato de etila demonstrou capacidade toxoplasmicida relevante, apresentando
valor de IC 50 de 77,21 μg/mL. Em contraste, a fração aquosa e o óleo essencial, apresentaram
nenhum efeito tóxico contra o parasito, indicando que estes não são uma boa alternativa
terapêutica. Verificou-se que o efeito inibitório do parasitismo foi mais significativo no pré-
tratamento dos parasitos antes da infecção celular, evidenciando um efeito direto sobre o parasito.
Em conclusão, os resultados indicam utilização favorável da S. guianensis, especialmente da fração
acetato de etila como terapia alternativa da toxoplasmose, devido a sua baixa citotoxidade, sua ação
direta contra o parasito, além do seu efeito concentração-dependente, porém estudos futuros
utilizando modelos de infecção parasitária in vivo e identificação dos princípios ativos da planta são
necessários.
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Potencial farmacolÃgico do extrato seco de matricaria recutita (Chamomilla) e do Alfa-Bisabolol / GASTROPROTECTIVE AND ANTIMICROBIAL ACTIVITIES OF MATRICARIA RECUTITA (CAMOMILA) FLOWER EXTRACT AND ALPHA-BISABOLOL: POSSIBLE MECHANISMS OF ACTIONSuzana Barbosa Bezerra 20 August 2009 (has links)
FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / Matricaria recutita, conhecida popularmente como camomila, à uma espÃcie vegetal utilizada na medicina devido Ãs suas propriedades sedativa, antiinflamatÃria e cicatrizante, entre outros. O alfa-bisabolol, um sesquiterpeno presente em seu Ãleo essencial, tambÃm possui vÃrias atividades farmacolÃgicas reconhecidas. Neste trabalho foram avaliadas as atividades gastroprotetora, antioxidante, antimicrobiana e citotÃxica do extrato seco das flores de camomila (ESFC) e do alfa-bisabolol (BISA). Na atividade gastroprotetora, o ESFC nas doses 100, 200 e 400 mg/Kg, via oral, reduziu significativamente em 78, 68 e 89 %, respectivamente (p<0,001) as lesÃes gÃstricas induzidas por etanol (1,0 mL/animal) em ratos. BISA tambÃm inibiu a formaÃÃo de Ãlceras induzidas por etanol, mas somente nas doses 50 e 100 mg/Kg (87% e 96%, respectivamente). O mecanismo de gastroproteÃÃo do BISA nas lesÃes gÃstrica induzidas por etanol em ratos foi avaliado na dose de 100 mg/Kg. O prÃ-tratamento com o antagonista do Ãxido nÃtrico (L-NAME) e com um inibidor das prostaglandinas (indometacina) nÃo bloqueou efetivamente o efeito gastroprotetor do BISA, mas o prÃ-tratamento com glibenclamida, um inibidor dos canais K +ATP, reduziu significativamente (p<0,05) o efeito gastroprotetor de BISA. Esses resultados mostram que BISA pode reduzir os danos da mucosa gÃstrica induzidos por etanol atravÃs do mecanismo de ativaÃÃo dos canais K+ATP. Na avaliaÃÃo do potencial antioxidante mensurado atravÃs do teste do DPPH, tanto ESFC quanto BISA nÃo apresentaram atividade seqÃestradora de radicais livres. O mÃtodo de difusÃo em Ãgar foi usado para determinar o potencial antimicrobiano do ESFC e do BISA sobre cepas microbianas originÃrias da ATCC e de origem hospitalar. O ESFC nÃo foi capaz de inibir o crescimento de nenhuma das cepas de bactÃrias testadas e determinou apenas uma pequena inibiÃÃo para a levedura C. albicans na concentraÃÃo de 5mg/mL. BISA inibiu o crescimento de S. aureus ATCC 6538, C. albicans ATCC 10231, Klebsiella pneumoniae e Acinetobacter balmanii atà nas concentraÃÃes de 0,0625, 0,0625, 4 e 4 mg/mL, respectivamente. A maior atividade antimicrobiana de BISA foi demonstrada sobre a bactÃria Gram-positiva S. aureus ATCC 6538, com uma CIM de 1mg/mL e CLM maior que 1mg/mL. Para as demais cepas testadas, as CIM e CLM de ESFC e de BISA foram maiores que 1mg/mL. A partir dos resultados obtidos, foi realizada a avaliaÃÃo da citotoxicidade do ESFC e do BISA. NeutrÃfilos humano foram isolados e receberam ESFC e BISA (1,5,10,50 e 100 Âg/mL), onde ESFC se mostrou citotÃxico em todas as doses testadas, enquanto que o BISA sà nÃo apresentou atividade citotÃxica na dose de 5 Âg/mL.Os resultados obtidos nesse trabalho sugerem que ESFC e BISA possuem atividade gastroprotetora em lesÃes gÃstricas induzidas por etanol, onde o mecanismo de aÃÃo do BISA parece estar relacionado com a ativaÃÃo dos canais K+ATP. Entretanto, nÃo foi possÃvel determinar a atividade antioxidante das duas drogas teste atravÃs do teste do DPPH. O melhor resultado para a atividade antimicrobiana do BISA foi demonstrada para a bactÃria S. aureus ATCC 6538, com CIM de 1mg/mL, tambÃm sendo demonstrada atividade citotÃxica para essa mesma substÃncia. / Matricaria recutita, commonly known as chamomile, is a plant species used in medicine due to its sedative properties, anti-inflammatory and healing, among others. Alpha-bisabolol, a sesquiterpene present in essential oil, also has several pharmacological activities recognized. This work evaluated the gastroprotective activity, antioxidant, antimicrobial and cytotoxic activities from chamomile dried flowers extract (CDFE) and alpha-bisabolol (BISA). Gastroprotective activity for ESFC at doses 100, 200 and 400 mg / kg, orally, significantly reduced in 78, 68 and 89% respectively (p <0.001) gastric lesions induced by ethanol (1.0 mL / animal). BISA also inhibited the formation of ulcers induced by ethanol, but only at doses 50 and 100 mg / kg (87% and 96%, respectively). The mechanism of gastroprotective the BISA in gastric lesions induced by ethanol in rats was evaluated at a dose of 100 mg / kg. The pre-treatment with the antagonist of nitric oxide (L-NAME) or antagonist of prostaglandins (indomethacin) did not blocked effectively of BISA, but the pretreatment with glibenclamide, an inhibitor of K+ATP channels, reduced significantly (p <0.05) the gastroprotective effect of BISA. These results indicate that BISA can reduce the damage of gastric mucosa induced by ethanol through the mechanism of activation of K+ATP channels. To evaluate the antioxidant potential measured by the DPPH test, both as ESFC and BISA showed no scavenging activity of free radicals. The method of agar diffusion was used to determine the antimicrobial potential of ESFC and BISA on microbial strains originating from ATCC and hospital origin. The ESFC was not able to inhibit the growth of any of the bacterial strains tested and required only a small inhibition for the yeast C. albicans at a concentration of 5 mg / mL. BISA inhibited the growth of S. aureus ATCC 6538, C. albicans ATCC 10231, Klebsiella pneumoniae and Acinetobacter balmanii at concentrations of 0,0625, 0.0625, 4 and 4 mg / mL, respectively. The highest antimicrobial activity of BISA was demonstrated against Gram-positive S. aureus ATCC 6538, with an MIC of 1mg/mL and MLC greater than 1mg/mL. For the other strains tested, the MIC and the CLM ESFC and BISA were greater than 1mg per mL. From the results obtained was performed to evaluate the cytotoxicity of ESFC and BISA. Human neutrophils were isolated and were ESFC and BISA (1,5,10,50 and 100 mg / mL), where ESFC proved cytotoxic at all doses tested, while the BISA not only showed cytotoxic activity at dose of 5 mg / mL. The results of this study suggest that ESFC and BISA have gastroprotective activity in gastric lesions induced by ethanol, where the mechanism of action of BISA seems to be related to activation of K+ATP channels. However, it was not possible to determine the antioxidant activity of two drugs test by the DPPH test. The best result for the antimicrobial activity of BISA was demonstrated for the bacteria S. aureus ATCC 6538, with MIC 1mg/mL also being demonstrated cytotoxic activity for that substance.
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Estudo da extração do óleo de pitanga (Eugenia uniflora L.) vermelha e roxa empregando os solventes CO2 e n - propano em altas pressões / Study on red and purple Surinam cherry (Eugenia uniflora L.) oil extraction by utilizing CO2 and n propane solvents at high pressuresSilva, Simone Braga da 15 February 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-02-15 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / From Surinam cherry s leaves (Eugenia uniflora L.) it is possible to extract oil that has been utilized industrially, especially by cosmetics and pharmaceuticals sectors. The extraction of this oil by using conventional methods often causes the thermal degradation of its components, and an interesting alternative has been the use of supercritical extraction technology with organic solvents. In order to better evaluate the advantages of oil extracting from red and purple Surinam cherry s leaves in high pressure, the present paper aims to study this supercritical extraction by using the supercritical carbon dioxide and pressured n-propane as solvents. After drying and milling of red and purple Surinam cherry s leaves, they were underwent to oil extraction with CO2 supercritical fluids under different temperatures (50 and 60ºC) and the pressure (150 and 250 bar) and also n-propane in different temperature (30, 45 and 60ºC) and pressure conditions (40, 60 e 80 bar). The coupling of a fractionation column in supercritical fluid extraction was used to separate components of the extract. Three distinct stationeries phases were evaluated: silica, alumina and Amberlit®. The extracted oil underwent to a gas chromatography coupled to the mass spectrometry (CG-EM) for a quantitative analysis, showing the alpha-bisabolol as composed of greater interest in its industrial application. The extraction kinetics of both solvents were obtained in an experimentally way. The experimental data were adjusted appropriately to the mathematical Sovavá model. / Das folhas de pitanga (Eugenia uniflora L.) é possível extrair um óleo que tem sido bastante utilizado industrialmente, principalmente nos segmentos cosméticos e farmacêuticos. As extrações deste óleo utilizando os métodos convencionais geralmente causam a degradação térmica de seus componentes, e uma alternativa interessante tem sido a utilização da tecnologia de extração supercrítica com solventes orgânicos. Para avaliar melhor as vantagens da extração em pressões elevadas do óleo das folhas de pitanga de frutos vermelha e roxa, o presente trabalho teve como objetivo estudar este tipo de extração supercrítica utilizando como solventes o dióxido de carbono supercrítico e o n- propano pressurizado. Após secagem e moagem das folhas de pitanga vermelha e roxa, as mesmas foram submetidas à extração do óleo com os solventes CO2 supercrítico sob diferentes condições de temperatura (50 e 60°C) e de pressão (150 e 250 bar) e também n-propano em diferentes condições de temperatura (30, 45 e 60°C) e de pressão (40, 60 e 80 bar). O acoplamento de uma coluna de fracionamento na extração supercrítica foi usado para separar os componentes do extrato. Foram avaliadas 3 fases estacionárias distintas: sílica, alumina e Amberlit®. O óleo extraído foi submetido à cromatografia gasosa acoplado a espectrometria de massa (CG-EM) para análise qualitativa, apresentado o alfa-bisabolol como composto de maior interesse pela sua aplicação industrial. A cinética da extração de ambos os solventes foram obtidas de forma experimental. Os dados experimentais ajustaram-se adequadamente ao modelo matemático de Sovová.
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