Orientador: Jürgen Andreaus. / Dissertação (mestrado) - Universidade Regional Blumenau, Centro de Ciências Exatas e Naturais, Programa de Pós-Graduação em Química.

Orientador: Yong Kun Park / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:45:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pastore_GlauciaMaria_D.pdf: 6939609 bytes, checksum: 5181e81e4135269cf5a0a32dc101d012 (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: Um mil duzentas e oitenta e cinco linhagens de microrganismos foram isoladas de amostras de solo, frutas, resíduos industriais e testados quanto a capacidade de hidrolisar glicerídeos. Oito linhagens de Fungos foram relacionadas preliminarmente como produtoras de enzimas lipolíticas. Entre estas, uma linhagem identificada como Trichoderma sp apresentou alta produção de lipase. A enzima lipolítica de Trichoderma sp hidrolizou as ligações éster de monoleína, dioleína e do substrato paranitrofenillaurato. A enzima pode ser classificada como uma lipase (glicerol-mono éster hidrolase E.C. 3.1.1.23). Estudou-se a produção de lipase extracelular pela linhagem selecionada de Trichoderma sp e a enzima foi purificada através de fracionamento com sulfato de amônio, cromatografia em coluna de DEAE-celulose e CM-celulose. A enzima purificada foi caracterizada e apresentou atividade ótima em pH 5.6 a 40 - 45°C. A atividade enzimática foi severamente afetada pela presença de MgSO4, MnSO4, FeSO4, na concentração de 1 mM de sal em relação ao volume final da mistura de reação, enquanto que KCl, CaCl2, NiSO4, inibiram moderamente a atividade de lipase.O reagente cisteína na concentração de 1 mM em relação ao volume final da mistura de reação inibiu significativamente a atividade enzimática. Verificou-se que a lipase de Trichoderma sp hidrolisa eficientemente monoleína e paranitrofenillaurato. A enzima não tem afinidade por trioleína. A hidrólise de óleo de oliva por via enzimática foi estudada utilizando-se lipases combinadas. Foi verificado que o sistema composto de lipase de Cândida rugosa e lipase de Penicillium sp hidrolisou 95,9% do óleo com o tempo de reação de 20 horas. A esterificação enzimática de ácido graxo e glicerol por lipase de Penicillium sp foi examinada e verificou-se que a enzima esterificou cerca de 71% de monoglicerídeo após 40 horas de reação / Abstract: The screening of lipase producing microorganisms was performed using 1,283 strains of microorganism which were isolated from samples of soil, fruits, and industrial residues. It was found that eight strains of fungi produced high activity of extracellular lipase and one of them produced exceptionally high lipase activity. This strains was identified as Trichederma sp, and he lipase from the strain hydrolised only monoolein, diolein and p-nitrephenyl laurate. For this reason, the lipase was classified as monoglyecride lipase (monoacylglycerol lipase E.C. 3.1.1.23). The lipase from Tric:hederma sp, was produced by solid state fermentation and submerse fermentation. The enzyme extracts were purified by fractionation with ammonium sulfate, DEAE-cellulose and CM-cellulose column chromatography. The purified enzyme was e:haracteri2ed and found that optimum pH and temperature were 5.6 and 40-45°C. MgSO4, MnSO4 and FeSO4, 1 mM, markably inhibited enzyme activity and KCl, CaCl2 and NiS04, 1 mM, slightly inhibited, Cysteine 1 mM significantly inhibited the enzyme activity. The enzyme also efficiently hydrolised monoolein and p-nitrophenyl laurate but not triolein. It was studied a combined enzyme system, which was a mixture of triacylglycerol lipase (from Candida ruqosa) and monoacylglycerol lipase (from Penicillium sp.), for hydrolyses of olive oil. It was found that the combined enzyme system was able to hydrolyse 95.9% the oil, when the reaction time was 20 hours. Enzymatic esterification using glycerol and fatty acid by lipase from Penicillium sp was also examined. It was found that the reaction system esterified 71% monoglyceride after 40 hours of reaction time / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Orientador: Young Kun Park / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-15T02:54:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pastore_GlauciaMaria_M.pdf: 2198397 bytes, checksum: de83c06bdf70a89eb255cf5f255e2f5e (MD5) Previous issue date: 1981 / Um mil e sessenta e sete linhagens de fungos foram isoladas do solo e.testadas quanto à capacidade de produzir ß-galactosidase. Foi encontrada uma linhagem, classificada como Scopulariopsis sp, que produz alta atividade de ß ¿galactosidase. Estudou-se a produção e a purificação de ß -galactosidase de Scopulariopsis sp e determinou-se as características da enzima purificada. A enzima foi produzida por fermentação semi-sólida, usando-se farelo de trigo para cultura do microorganismo. A enzima bruta suficientemente hidrolisa lactose em soro de leite. A enzima bruta foi purificada fracionamento, com sulfato de amônia e cromatografia em coluna por de DEAE-celulose e CM-celulose. A enzima purificada foi caracterizada verificando-se sua homogeneidade eletroforeticamente e seu peso molecular estimado ser 95 000, através do método de eletroforese em gel SDS poliacrilamida. O pH ótimo para atividade enzimática foi entre 3,6 a 5,0, usando-se ONPG (Orto-Nitrofenil ß -D-Galactoperanosideo) como substrato e com lactose como substrato o pH ótimo foi 4,5. A temperatura ótima para atividade enzimática foi 65 °C para ONPG e 55 °C para lactose. A atividade enzimática não sofre efeito pela adição de íons metálicos como CaC12, MgC12, KCl e outros reagentes como MnS04, NiS04, CuS04, porém foi verificado que AgN03 tem algum efeito inibitório sobre a atividade enzimática. Galactose inibe a ação da enzima, enquanto glicose não inibe. Dietilditiocarbamato de sódio (10mM). p-hidroximercuribenzoato (10 mM). mercaptoetanol (10 mM). não inibem a atividade enzimática Por isto, grupos sulfidrilas da molécula da enzima não estão envolvidos na atividade catalítica. A ß -galactosidase de, Scopulariopsis sp hidrolisou quase completamente (95 %) a lactose contida em soro ácido de leite (pH 4,5), após 50 horas de incubação a 55 °C, quando a atividade enzimática era 250 unidades por 100ml de soro de leite / Abstract: One thousand and sixty seven strain of fungi were isolated from soil and examined for their capacity for production of ß-galactosidase. It was found that one strain wich is classified a Scopulariopsissp has produced the highest activity of ß-galactosidase. Production and purification of ß-galactosidase from Scopulariopsis sp were attempted and characterization of the purified enzyme was performed. The enzyme was produced by semisolid fermentation using wheat bran culture of the microrganismo The crude enzyme suffici ently hydrolyzeq lactose in acid whey. The crude enzyme was purified by fractionation with ammonium sulfate, a DEAE-cellulose and CM-cellulose column graphies. The purified enzyme was characterized and found that chromato¬ was electrophoretically homogeneous and its molecular weight was estimated to be 95 000 by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The optimum pH of the enzyme activity was between 3,6 and 5,0 when ONPG was used as substrate, and with lactose as substrate the optimum pH was 4,5. The optimum temperature was 65 °C to ONPG and 55 °C to Lactose. The activity did not suffer any effect by the addition of metals ions as CaC12, MgCI2, KCI and others reagents such as MnS04, NiS04, CuS04 but AgN03 has some innhibitery effect on the enzyme activity. Galactose inhibits enzyme activity where as glucose did not. Sodium diethildithio carbomate (10 mM), p-hydroxymercuribenzoate (10 mM), mercaptoethanol (10 mM) did not inhibit enzyme activity. Thus sulfydryl groups molecule are not involved in the catalytic activity. The ß-galactosidase from Scopulariopsis sp, hidrolyzed quite completely (95 %) the lactose content present in acid whey (pH 4,5) after 50 hr of incubation at 55 °C, when the enzyme activity was 250 units per100 ml of acid whey / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientador : Renato Bonatelli Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T02:03:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Masiero_Marcia_M.pdf: 2086534 bytes, checksum: 30c71369e749ebcfa4a30315f456456e (MD5) Previous issue date: 1988 / Resumo: Este trabalho teve por objetivos a obtenção de mutantes auxotróficos e de resistência à drogas em Aspergillus Niger, para serem utilizados na análise genética via ciclo parassexual e estabelecimento de novos grupos de ligação numa linhagem Industrial utilizada neste laboratório. Além disso, os parentais diplóldese alguns segregantes destes cruzamentos foram analisados para produção da enzima amiloglicosidase. As mutações de resistência ao Verde Malaquita e ao Brometo de Etídio se mostraram recessiva e semi-dominante respectivamente, e as auxotróficas arg, lvs, met, mys e tio se mostraram recessivas. O gene nic3 parece ser alelo do gene nic sendo portanto denominados nicA3 e nic A1. Através de análise mitótica foi verificado que as marcas estudadas estão distribuídas em 4 grupos de ligações cenomàçiamda me que a ordem dos genes nos grupos I e IV não foi determinada. , I nic A 1, fwn,1 olv 3, mgr2, ebr5, tio1, mys1 II pab1 III lys2 IV arg1, met1 Nenhum dos diplóides ou demais linhagens ensaiadas apresentaram produção significativamente maior que a linhagem parental pabfwn. Os mutantes arg1, lys1, ebr5, tio1 e puc1, apresentaram redução na produção de amiloglicosidase, e os mutantes mgr2, met e mys, tiveram produção / Abstract: This work had been done aiming the isolation and genetical analysis or auxotrophic and resistant mutants In order to enhance the number of identified linkage groups in a industrial strain. It was also assayed the glucoamylase production or mutants, diploids and parental strains. The mutations to Ethidium Bromide and Malaquite Green resistance showed to be recessive e semi-dominant respectively, the auxotrophlc ones, arg1, met1, lys1, tio1, and mys, showed to be recessive. The gene nic3 seemed to be allele of nic1, and were denominated nic A3 and nic A1. It was possible to Identify four linkage groups in this work. The gene order in linkage groups I and IV was not determined. I nic A 1, fwn,1 olv 3, mgr2, ebr5, tio1, mys1 II pab1 III lys2 IV arg1, met1 None of the diploids or any other strain tested showed significant eleveted levels of glucoamylase-production compared to the parental strain pab1, fwn1. Mutants arg1, lys1, ebr5, tio1 and pur1, had their glucoamylase production reduced and mgr2, met1 and mys1 did not have their yields altered significantly compared to the parental / Mestrado / Genetica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Samir Tufic Arbex / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-20T10:23:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_LurdesCatarinada_M.pdf: 1166757 bytes, checksum: 249a8d277676388a24f33b7cb92b15d3 (MD5) Previous issue date: 1984 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Odontologia

Orientado: Samir Tufic Arbex / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-16T13:38:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Busato_MaraSilviaSaldini_M.pdf: 1388590 bytes, checksum: 749c054286b5fb42a673d377b55c9919 (MD5) Previous issue date: 1985 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed. / Mestrado / Bases Farmacologicas para a Terapeutica Medicamentosa / Mestre em Odontologia

Tese (livre docencia) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos e Agricola / Made available in DSpace on 2018-07-18T01:44:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Park_YongKun_LD.pdf: 2198176 bytes, checksum: cd37f3df570cfe47bfdce1ec1cb2b911 (MD5) Previous issue date: 1976 / Resumo: Isolou-se da terra, 650 cepas de microrganismos e examinou-se a atividade que cada uma possuía de isomerizar d-glicose. Encontrou-se uma linhagem de Streptomyces sp, com alta atividade de produção da enzima quando incubada em meio de cultura contendo xilose como indutor. Verificou-se que esta enzima é intracelular, e a cepa em questão foi identificada como Streptomyces bikiniensis (Johnson e Waksman, 1947). Descobriu-se que a glicose isomerase de Streptomyces bikinien sis é efetivamente induzida por xilose, enquanto que xilana induz a enzima de maneira mais branda. Da mesma forma, d-Aratiino se, L-Rhamnose, d frutose, d-manose e d-ribose, produzem baixa indução da glicose isomerase. Purificou-se a glicose isomerase de Streptomyces bikiniensis por fracionamento com sulfato de amónio, DEAE-celulose e filtração com Sephadex G-200. Através de eletroforese de gel poliacrilamida, encontrou se que a enzima glicose isomerase purificada era homogênea. As propriedades cinéticas da glicose isomerase foram estudadas e os resultados obtidos, foram comparados com a glicose isomerase produzida nos outros microrganismos. Verificou-se também, que os substratos adequados para a enzima, são: d-xilose, d-ribose e d-glicose, com os respectivos valores de Km: 0,07, 0,11 e 0,26 M. Esta enzima, mostrou possuir maior afinidade para xiiose do que para ribose ou glicose. O peso molecular da enzima foi calculado por eletroforese de gel de SDS-poliacrilamida e encontrou-se ser 52.000, A influência do pH sobre a atividade enzimática, foi verificada usando-se tampão fosfato e tampão tris, Encontrou-se que o pH ótimo para esta enzima se encontra entre S e 9, Verificando-se a atividade enzimática em diferentes temperaturas, - descobriu-se que sua temperatura ótima é de 80°C. Esta enzima é altamente termoestável. 0 estudo sobre o efeito de íons metálicos sobre a atividade da isomerase de Streptomyces bikiniensis, mostrou que a isomerizaçao de glicose foi altamente ativada por Mg2+ e Co2+ , e que sofreu baixa ativação com Mn2+ e Ni2+. Cobalto, manganes e magnésio, ativaram efetivamente a isomerização de xilose e de ribose.Observou-se também, que cobalto e Mg2+, inibiram a desnaturação térmica da enzima. Descobriu-se ainda, que glicose isomerase também isomeriza eficaznente d-xilose e d-ribose, e, em menor extensão, L-ranno se e d-arabinose para suas respectivas cetoses. A glicose isomerase de Streptomyces bikiniensis foi testada - para a isomerização de glicose a frutose, incubando-se uma mistura da enzima e varias concentrações de glicose em tampão fosfato 0,05 M, pH 2, contendo 5 mg MgSO4 e 0,05 mM CoCl2, a várias temperaturas. Verificou-se que a isomerização máxima de glicose a frutose ($0%), deu-se incubando-se a 70°C por T) horas, em concentração de enzima e substrato adequados / Abstract: Six hundred fifty strains of microorganisms were isolated from soil and screened for d-glucose isomerizing activity. It was found that a strain of Streptomyces sn. produced high activity of glucose isomerizing enzyme in culture medium containing xylose as inducer. The glucose isomerizing enzyme was in tracellular enzyme. This strain was identified as Streptomyces bikiniensis (Johnstone and Waksman, 1947). It was found that xylose effectively induced glucose isomers, se of S. bikiniensis and to a lesser extent, xylan. d-Arabinose. L-Rhannose, d-frutose, d-Mannose and d-ribose also induced slightly the enzyme. The glucose isomerase of S. bikiniensis was purified by fractionation with ammonium sulfate, DEAE cellulose column - chromatography and gel filtration on Sephadex G-200. The purified glucose isomerase was found to be homogeneous by poly_ acrylamide gel electrophoresis. Kinetic properties of purified glucose isomerase were studied and the results were compared with glucose isomerase from other strains of microrganism. D-Xylose, d-Ribose and d-glucose served as effective substrates for the enzyme with respective Km values of 0,07, 0,11 and 0,26 M. This enzyme exhibits greater affinity for xylose than for ribose or glucose. Molecular weight for the enzyme was measured by SDS-polyacryl amide gel eletrophoresis and found to be 52.000. The effect of pH on enzyme activity was examined in posphate buffer and tris buffer and the optimum pH was between 8 and 9. The enzyme activity at various temperatures was examined and- the optimum temperature was found to be 80°C. The enzyme was highly thermostable. The effect of metal ions on S. hikiniensis isomerase activity shows that isomerization of glucose was activated most effectively by Mg2+and Co2+, and slightly by Mn2+ and Ni2+. Isomerization of ribose was also activated effectively by Mg2+ 'Mn2+ and Co2+. Cobalt and Mg2+ also inhibited thermal denaturation of the enzyme. It was found that the glucose isomerase also effectively iso- merizes d-xylose and d-ribose, and to a lesser extent L-rham- nose and d-arabinose to their respective ketoses. The glucose isomerase from S. bikiniensis was examined for isomerization of glucose to fructose in batch system by incubating a mixture o£ the enzyme and various concentrations of glucose in 0,05 .M phosphate buffer, pH 7,2 containing 5 mM MgSO4 and 0,5 mM CoCl2 at various temperatures. It was found-that maximum isomerization of glucose to fructose (50%) was reached when optimum concentration of enzyme and substrate was incubated at 70°C for 70 hours / Tese (livre docencia) - Univer / Livre Docente em Engenharia de Alimentos

Orientador: Glaucia Maria Pastore / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-02T09:38:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maciel_HermelindaPenhaFreire_D.pdf: 24290756 bytes, checksum: 2fba3bc59cedd41dca9373a8b0b5822c (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O objetivo desta pesquisa foi realizar uma revisão bibliográfica sobre a importância e aplicação de peroxidase de plantas. As peroxidases são relatadas como enzimas muito estáveis ao calor, presentes em muitas frutas e em várias partes dos vegetais. Estas enzimas são encontradas na forma de complexos de isoenzimas e causam alterações na coloração natural dos alimentos e sabor desagradável. As peroxidases apresentam inúmeras aplicações em análises de alimentos, análises clínicas e biológicas, e em conjunto com outras enzimas na conservação de certos alimentos. Ainda existe um grande universo de frutas tropicais, folhas e outras partes da planta, fontes de peroxidase, que podem ser investigadas visando a aplicação industrial. As peroxidases podem catalisar a oxidação de grande variedade de fenóis e aminas aromáticas, que ocorrem naturalmente em tecidos de plantas. Esta capacidade é largamente usada na indústria de alimentos como agente esterilizante e pode conduzir à determinação dos valores de perda nutricional e deteccão do surgimento de compostos tóxicos como hidroperóxidos, epóxidos e aldeídos. A peroxidase pode ainda indicar a presença de hidrogênios e peróxidos orgânicos liberados no meio ambiente, originados de procedimentos industriais, que podem contaminar água potável e a natureza. Métodos convencionaispara determinaçãode peróxido de hidrogênio estão sendo atualmente adaptados para avaliação com a enzima peroxidase como sensor (biossensor). / Abstract: The aim of this research was to review the importance and application of the plant peroxidases. The peroxidases are reported to be one of the most heat stable group of enzymes present in many fruits and vegetables. These enzymes are a complex family of severaI isoenzymes, whose action results in discoloration and off-flavours in foods, but are also used in food, biological and clinical analyses, as well as in food conservation, combined with the action of other enzymes. A lot of tropical fruits and vegetables have to be biochemically characterized with respect to their peroxidases. These enzymes can catalyse the oxidation of a large number of phenols and a aromatic amines which occur naturally in plant tissues. It is widely used in food industry as a sterilizing agent and when present in the final products can indicate the loss of nutritional value and appearance of toxic compounds such as hydroperoxides, epoxides and aldehydes hydrogen. The peroxidase can also indicates the presence of organic peroxides released in the environment from industrial processes and during the ozonation of drinking water. Conventional methods for the determination of hydrogen peroxide have been investigated with a peroxidase enzyme sensor (biosensor). / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Orientador : Yong Kun Park / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:29:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Benedet_HonorioDomingos_M.pdf: 2373078 bytes, checksum: 4e69ab4e795b7da8160087e01884d976 (MD5) Previous issue date: 1980 / Resumo: As enzimas coagulantes do Mucor miehei, Endothia parasitica e renina foram estudadas para determinarmos se havia ou não diferenças de ação sobre a caseína ácida e suas frações a, ß e K. Através da diferenciação de enzimas coagulantes em meio gel de agar-caseína, as três apresentaram zonas de difusão bastante diferentes, mostrando, portanto, que suas características físicas são diferentes. Após incubação das mesmas com o substrato, observamos visualmente que a caseína ácida e suas frações a e 3, aparentemente não sofreram alterações, enquanto que a fração K apresentou - floculação bastante intensa com todas as enzimas, deduzindo-se que, aparentemente, tenham as mesmas características. A caseína ácida e suas frações a, ß e K, após o tratamento referido no parágrafo anterior, foram liofilizadas e submetidas a eletroforese em gel de poliacrilamida em presença de íons dodecil sulfato de sódio (SDS) e mercaptoetanol, mostrando-nos que as bandas de proteína da fração K, de peso molecular entre 17.000 e 30.000, foram hidrolisadas pelas três enzimas em bandas de peso molecular 8.000 e 14.000. No caso da fração a , a banda de proteína de peso molecular 34.000 foi hidrolisada por todas as enzimas em bandas de peso molecular 29.000. A enzima da Endothia parasitica hidrolisou também as bandas de proteína de peso molecular 16.000, 22.000 e as situadas entre 34.000 e 91.000, inclusive. Quanto à fração ß, nenhuma das enzimas a hidrolisou. A fração K, após tratamento a diversas temperaturas, incubada com a enzima coagulante do Mucor miehei, foi submetida a eletroforese como citado anteriormente, apresentando diferenças em relação à fração K não aquecida, ou seja, observamos que a não aquecida foi hidrolisada, enquanto que a aquecida, praticamente nada sofreu, concluindo-se que a mesma tenha sido desnaturada. / Abstract: Calf rennin and coagulating enzymes from Mucor miehei, Endothia parasitica were used in tests to compare their actions upon acid casein and its fractions a, ß and K. The three coagulating enzymes showed distinct diffusion bands in casein-agar gel which indicated that they have different physical properties. Incubation of whole acid casein and its fractions a, ß and K with the three different coagulating enzymes showed that only with the K fraction was there an intense floculation and this occurs similary with all three enzymes. After the incubation the treated protein preparations were lyophilized and submitted to gel electrophoresis in poliacrylamide in the presence of sodium dodecyl sulfate and mercaptoethanol. The results indicated that the K fraction of molecular weight from 17,000 to 30,000 was hydrolyzed by the three coagulating enzymes giving rise to bands of molecular weight of 8,000 and 14,000. In the case of the a fraction, all the three enzymes hydrolyzed the 34,000 molecular weight bands to 29,000 molecular weight bands. Furthermore, the enzyme from Endothia parasítica also hydrolyzed the bands of molecular weight of 16,000 and 22,000 and the ones from 34,000 to 91,000. None of the coagulating enzymes hydrolyzed the ß fraction. In the experiment to check the effect of heating upon the K fraction before being treated by the coagulating enzyme from Mucor miehei , it was found that, after heating, the hydrolysis did not occur, suggesting that denaturation of the K fraction protein inhibited the enzyme action. / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Lorena Benathar Ballod Tavares. / Co-orientador: Cristiane Vieira Helm. / Dissertação (Mestrado em Engenharia Ambiental) - Programa de Pós-Graduação em Engenharia Ambiental, Centro de Ciências Tecnológicas.