Thesis (Ph.D.)--Murdoch University, 2004. / Thesis submitted to the Division of Health Sciences. Bibliography: leaves 214-249.

Thesis (M.P.H.)--University of Michigan, 1947.

Thesis (M.P.H.)--University of Michigan, 1947.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1984Bitstream added on 2014-06-13T19:12:33Z : No. of bitstreams: 1 barraviera_b_me_botfm.pdf: 3231026 bytes, checksum: b87b77290330969de4b3219f300b44e1 (MD5) / Com o objetivo de contribuir para o esclarecimento de alguns pontos ainda obscuros nas relações existentes entre o metabolismo da via das pentoses e a ação de drogas em doentes com malária causada pelo Plasmodium falciparum , foi proposta a padronização do método para pesquisa da atividade da via das pentoses, menos lesivo para os eritrócitos, menos dispendioso e que fosse tão eficiente quanto o do BREWER et alii. Estudou-se “in vitro”, com o método padronizado, a ação da clindamicina em hemácias humanas normais. Procedeu-se, ainda, a inquérito com a finalidade de avaliar a prevalência da eficiência de G6PD em habitantes de área endêmica de malária... / Not available.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-03-09Bitstream added on 2014-06-13T19:35:17Z : No. of bitstreams: 1 santana_vs_me_sjrp.pdf: 385683 bytes, checksum: ccbda8f1740d544806e6c55fd2801145 (MD5) Bitstreams deleted on 2014-12-01T14:49:48Z: santana_vs_me_sjrp.pdf,Bitstream added on 2014-12-01T14:50:25Z : No. of bitstreams: 1 000610662.pdf: 4780545 bytes, checksum: 6398f15b690bb94e2d25e5daa3b06e45 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A região Amazônica apresenta extensas áreas de floresta e ecossistemas naturais, provendo condições favoráveis para a existência de muitos arbovírus. Mais de 200 arbovírus foram isolados na região Amazônica, e aproximadamente 40 estão associados a doenças humanas. Quatro dos 40 são considerados ser de importância para a saúde pública no Brasil: vírus da Dengue (sorotipos 1 a 4), Oropouche, Mayaro e Febre Amarela. Juntamente com os arbovírus, a malária é uma doença endêmica, e aproximadamente 98% dos casos estão restritos á região da Amazônia Legal. Este trabalho teve como objetivo analisar 111 amostras clínicas de soro de pacientes que residiam em Novo Repartimento (Pará), Porto Velho (Rondônia), Plácido de Castro (Acre) e Oiapoque (Amapá) previamente confirmados para malária. Para tal finalidade, foi utilizada a técnica de Multiplex-Nested-PCR e RT-Nested-PCR para a detecção e identificação dos principais arbovírus brasileiros, pertencentes aos gêneros Flavivirus, Alphavirus e Orthobunyavirus. Duas amostras de pacientes de Novo Repartimento foram positivas para Dengue sorotipo 2, e também, ambos tinham infecção por Plasmodium vivax . Apesar de dados escassos, infecções duplas por dengue e malária deveriam ser comuns em áreas onde ambas as doenças são co-endêmicas em muitas partes do mundo. Na região Amazônica Brasileira, esta situação provavelmente ocorre mais frequentemente que a detectada. Apesar de ambas as doenças causarem sintomas similares, e infecções simultâneas com dois agentes etiológicos podem resultar em uma doença com sintomas sobrepostos, e possivelmente, tanto o espectro clínico da doença e/ou o tratamento pode ser afetado. Neste contexto uma coinfecção por malaria e dengue não poderia ser descartada, e o diagnóstico deveria ser realizado concomitantemente para dengue e malária... / The Amazon region has extensive forested areas and natural ecosystems, providing suitable conditions to the existence of several aboviruses. Over 200 arboviruses were isolated in the Amazon region, and about 40 are associated to human diseases. Four out of 40 are considered to be of public health importance in Brazil: dengue virus (serotypes 1-4), Oropouche, Mayaro and Yellow Fever. Along with aboviruses, malaria is an endemic disease caused by protozoans Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax and Plasmodium malariae in Brazil, and about 98% of the cases are restricted to the Legal Amazon region. The aim of this study was to test 99 serum clinical samples from patients living in Novo Repartimento (Pará), Porto Velho (Rondônia), Plácido de Castro (Acre) and 12 plasma samples from patients living in Oiapoque (Amapá), previously confirmed for malaria. For this purpose, we used Multiplex-Nested-PCR and RT-Nested-PCR assays for detection and identification of the major Brazilian arboviruses, belonging to the genus Flavivirus, Alphavirus and Orthobunyavirus. We detected Dengue virus serotype 2 in two serum samples from patients living in Novo Repartimento, and both had active Plasmodium vivax infections. Despite scant data, dual dengue and malaria dual infections should be common in areas where both diseases are co-endemic in many places of the world. In the Amazon region, this situation is likely to occur more frequently than detected. In spite of having similar clinical findings, and simultaneous infections with two etiological agents can result in a disease with overlapped symptoms, possibly either clinical spectrum of the disease or treatment can be affected. In this context, concurrent dengue and malaria could not be ruled out, and diagnosis should be made concomitantly in febrile patients living or returning from areas where both diseases are co-endemic... (Complete abstract click electronic access below)

abstract: Malaria is a vector-borne parasitic disease affecting tropical and subtropical regions. Regardless control efforts, malaria incidence is still incredible high with 219 million clinical cases and an estimated 660,000 related deaths (WHO, 2012). In this project, different population genetic approaches were explored to characterize parasite populations. The goal was to create a framework that considered temporal and spatial changes of Plasmodium populations in malaria surveillance. This is critical in a vector borne disease in areas of low transmission where there is not accurate information of when and where a patient was infected. In this study, fragment analysis data and single nucleotide polymorphism (SNPs) from South American samples were used to characterize Plasmodium population structure, patterns of migration and gene flow, and discuss approaches to differentiate reinfection vs. recrudescence cases in clinical trials. A Bayesian approach was also applied to analyze the Plasmodium population history by inferring genealogies using microsatellites data. Specifically, fluctuations in the parasite population and the age of different parasite lineages were evaluated through time in order to relate them with the malaria control plan in force. These studies are important to understand the turnover or persistence of "clones" circulating in a specific area through time and consider them in drug efficacy studies. Moreover, this methodology is useful for assessing changes in malaria transmission and for more efficiently manage resources to deploy control measures in locations that act as parasite "sources" for other regions. Overall, these results stress the importance of monitoring malaria demographic changes when assessing the success of elimination programs in areas of low transmission. / Dissertation/Thesis / Ph.D. Microbiology 2014

Orientador: : Liana Maria Cardoso Verinaud / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-18T07:17:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Francelin_Carolina_M.pdf: 13380043 bytes, checksum: 2e65773bab75b0bdc836c19740bd7d3e (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: O timo é um órgão linfóide primário, responsável pela diferenciação, maturação e desenvolvimento dos linfócitos T (ou timócitos, enquanto no timo). Este órgão apresenta complexa arquitetura tímica composta por elementos celulares e solúveis responsáveis pela migração dos precursores de linfócito T do espaço perivascular para a região cortical e subseqüente migração para a região medular. A trajetória do timócitos pelos microambientes tímicos permite que estas células recebam estímulos que os tornam linfócitos maduros, simples positivos TCD4+ ou TCD8+, prontos para migrar para os órgãos linfóides secundários. Durante a maturação, timócitos que são auto-reativos ou anérgicos são eliminados pelo processo de morte celular programada. Entretanto, a desregulação da apoptose nos linfócitos pode acarretar no desenvolvimento de doenças auto-imunes, tumores e imunodeficiências. Estudos em modelos murinos de atrofia tímica relatam que em diversas infecções parasitárias, virais, helmínticas, bacterianas e fúngicas e até mesmo em distúrbio metabólico como a diabetes experimental o timo é um órgão alvo. Nestes modelos, foi observado intenso acometimento tímico com involução do órgão acompanha por desarranjo da arquitetura tímica e depleção de todas as subpopulações de timócitos. Em estudos anteriores, observamos profundas alterações no timo durante a infecção experimental com Plasmodium berghei que incluíam severa atrofia no décimo quarto dia após inoculação do parasita, alterações histológicas, perda da delimitação cortico-medular, redução de todas sub-populações de timócitos e a presença intra-tímica do parasita. No presente trabalho avaliamos se a grande perda de timócitos observada no timo de animais infectados pelo Plasmodium berghei NK65 é devido a um aumento da ocorrência de apoptose, e/ou necrose, ou se é devida à saída prematura destas células para a periferia.A avaliação de morte celular na população de timócitos total revelou aumento no número de células Anexina-V+/PI- em animais infectados quando comparados aos controles.Ainda, a análise da apoptose em timos atróficos, no pico da parasitemia, revelou aumento de núcleos apoptóticos nas regiões cortical e medular tímica bem como aumento no número de linfócitos (CD4+, DP e DN) Anexina-V positivos. Alteração na expressão de genes pró-apoptóticos no timo de animais infectados quando comparado ao controle, sugerindo a participação de vias de ativação extrínsecas especificas da apoptose, também foram observadas. Embora 90% dos timócitos de animais infectados sejam Anexina-V positivos, as alterações na expressão dos elementos de matriz extracelular, relatadas anteriormente pelo nosso grupo, sugere também a exportação precoce destas células para a periferia do sistema imune. Nossos resultados apontam para um aumento de linfócitos imaturos (DP e DN) nos linfonodos mesentéricos de animais infectados, um indicativo de que parte dos timócitos imaturos sai do timo antes de completarem seu amadurecimento. Em conjunto, nossos dados mostram que as alterações estruturais e de componentes solúveis do timo durante a infecção com Plasmodium berghei NK65 podem favorecer tanto a deleção, por apoptose, de timócitos corticais como também a migração precoce de células imaturas para a periferia do sistema imune. O acometimento tímico na atrofia tímica induzida pelo Plasmodium berghei NK65 revela que durante uma infecção o timo sofre influências de diversos fatores que provocam profundas alterações nas subpopulações linfocitárias. Também, é possível que as alterações observadas em nosso modelo prejudique a resposta imune periférica contra o parasita contribuindo para o agravamento da doença e que a presença de timócitos prematuros nos linfonodos favoreça o desenvolvimento de doenças auto-imunes / Abstract: The thymus is the primary lymphoid organ responsible for the differentiation, maturation and development of T lymphocytes (or thymocytes, as in the thymus).This organ presents a complex architecture composed by soluble and cellular elements that support the migration of lymphocyte precursors from space perivascular to the cortical region, and then their migration toward the medullar area. The trajectory of thymocytes by thymic microenvironments allows these cells to receive stimuli that make them mature into CD4+ or CD8+ T cells, which leave the thymus to populate peripheral lymphoid organs. Studies using murine models of thymic atrophy have reported that thymus is a target organ in several parasitic, viral, helminthic, bacterial and fungal infections. In these models, one can observe intense thymic involution accompanying by disruption of thymic architecture and depletion of all thymocyte subpopulations. In a previous study, our laboratory has demonstrated profound changes in the thymus during experimental infection with Plasmodium berghei, the causative agent of Malaria. Such alterations comprised severe atrophy, histopathological changes with loss of cortical-medullary delimitation, and reduction of all thymocytes sub-populations. In addition, the presence of parasites inside the thymus was detected for the first time. In another study using the same experimental model, we have demonstrated that Plasmodium-infected animals present changes in the expression of extracellular matrix elements and chemokine protein families, which are important molecules for the dynamic thymocyte migration within the thymus. In this study we evaluate whether the acute thymic atrophy observed in Plasmodium berghei-infected animals is correlated with increased apoptotic levels of thymocytes, or with their premature emigration to the periphery. Our data showed profound histological alterations, which included a very large number of cells showing nuclear condensation and karyorrhectic changes surrounded by histiocytes suggesting increased levels of apoptosis. This was confirmed by immunohistochemistry and flow cytometry techniques. Also, increased expression of proapoptotic genes was observed in the thymus of infected animals when compared with controls, suggesting the involvement of the extrinsic, or receptor-iniciated, pathway of apoptosis. Although the rate of apoptosis in the thymus from infected animals is much higher than the controls, the hypothesis that a premature emigration of thymic cells to the peripheral lymphoid organs may also account for the severe atrophy observed during Plasmodium infection could not be ruled out. In fact, we have found a consistent fraction of immature cells, mainly double-negative and double-positive thymocytes, in mesenteric lymph nodes of infected animals. Although this result serves as an evidence of premature emigration of non-mature thymocytes, the precise mechanism by which this process occurs is not clear until now. No significant differences were found in the spleen. Taken together, our data show that thymic alterations observed during Plasmodium berghei infection can favour both the deletion of thymocyte subpopulation by apoptosis and the early emigration of immature cells to the periphery of the system immune. As a consequence, an altered peripheral immune response to the parasite can be expected. Our findings provide relevant information concerning the immune involvement in malaria infection. Moreover, the murine model described here could be useful for mechanist studies of acute thymic atrophy / Mestrado / Imunologia / Mestre em Genética e Biologia Molecular

Orientador: Ana Maria Aparecida Guaraldo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-15T00:19:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Machado_DanielaRodriguezdeAssis_M.pdf: 3566658 bytes, checksum: 69880a3922a0bd457f50c7ba71207380 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A malária é uma parasitose que mata mais de um milhão de pessoas por ano. No Brasil, 99% dos casos ocorrem na Amazônia Legal. O Plasmodium chabaudi chabaudi CR, não letal, representa a malária experimental de autocontrole. A hipoglicemia é uma característica comum da malária causada pelo P. falciparum e também está presente na malária murina. O diabetes tipo 1 é uma doença auto-imune órgão-específica que tem como conseqüência a destruição das células ß produtoras de insulina, nas ilhotas de Langerhans. Alguns trabalhos observaram que a infecção de camundongos com o estágio sangüíneo de P. chabaudi induziu uma hipoglicemia em camundongos normais e normalizou a hiperglicemia em camundongos moderadamente diabéticos por indução pela streptozotocina (STZ). No camundongo NOD ("non-obese diabetic"), o diabetes é determinado geneticamente e simula o desenvolvimento do diabetes tipo 1. O presente trabalho se propõe avaliar a influência do diabetes mellitus tipo 1 na infecção experimental por Plasmodium chabaudi chabaudi, linhagem CR, em camundongos fêmeos NOD/Uni, com diferentes graus de diabetes (diabetes moderada e diabetes severa). Camundongos fêmeos livres de patógenos específicos (SPF) da linhagem NOD/Uni com oito a 42 semanas de idade foram infectados via intraperitoneal com 1x107 eritrócitos parasitados pelo Plasmodium chabaudi chabaudi CR. A glicemia foi determinada pela deposição de sangue coletado diretamente da cauda do animal em fita reativa do aparelho Roche Accu-Chek Active® em dias alternados. A parasitemia foi expressa em percentagem de hemácias parasitadas mediante observação de esfregaço sangüíneo corado com May-Grünwald e Giemsa. Os camundongos NOD/Uni foram classificados segundo o grau de diabetes em moderada (300 a 500 mg/dL) e severa (>500 mg/dL). Foi observada redução da glicemia a partir do quinto dia de infecção nos camundongos NOD/Uni, em geral no pico da infecção. Esta redução não ocorreu nos camundongos NOD/Uni sem infecção e nos camundongos da linhagem BALB/c/Uni infectados pelo Plasmodium chabaudi chabaudi CR. As principais lesões renais observadas foram edema, necrose e infiltração glomerular, descamação e dilatação dos túbulos contorcidos e espessamento da membrana basal glomerular. Os camundongos da linhagem NOD/Uni infectados pelo Plasmodium chabaudi chabaudi CR apresentaram maior sobrevida em relação aos camundongos sem infecção. A redução da glicemia parece estar relacionada a diversos fatores dentre eles, a influência das proteínas de membrana GPIs (glycosylphosphatidylinositols) e o equilíbrio entre a resposta dos linfócitos Th1/Th2. / Abstract: Plasmodium chabaudi chabaudi CR in Non-Obese Diabetic (NOD) mice Malaria is a parasitic disease that kills more than one million people worldwide each year. In Brazil, the 99% of the cases occur in the northern States that encompass the Amazon Basin. Plasmodium chabaudi chabaudi is an important experimental model for several aspects of malaria research, including parasite biology and immunology. It is recognized as a developmental analog to human infection by Plasmodium falciparum. The non-lethal Plasmodium chabaudi chabaudi CR strain represents the experimental autocontrol disease. Hypoglycemia is a common symptom of P. falciparum malaria and also occurs in murine malaria. The Type 1 diabetes is an organ-specific autoimmune disease that destroys the insulin-producing ß cells of the Islets of Langerhans. In non-obese diabetic (NOD) mice, diabetes is genetically determined and also develops type 1 diabetes. The present work evaluated type 1 diabetes mellitus during experimental infection by Plasmodium chabaudi chabaudi CR strain in female NOD mice with moderate and severe diabetes. Eight to 42 week-old female specific pathogens free (SPF) NOD/Uni mice were inoculated with red blood cells parasitized sample containing the total of 1x107 Plasmodium chabaudi chabaudi CR by intraperitoneal injection. Routine measurement of blood glucose in NOD/Uni mice was performed every other day for 11 days post-infection. Glycemia was quantified using Roche Accu-Chek Active kits with blood collected from the tail of each animal. The parasitemia was expressed as percent of infected erythrocytes counted by microscopy analysis of tail blood films stained with Giemsa. The animals were classified according to their degree of diabetes into two groups: moderate diabetes (300 to 500 mg/dL) and severe diabetes (>500 mg/dL). The control group was composed of animals of the BALB/c/Uni strain. The natural death of NOD/Uni mice was recorded for both infected and healthy animals. Glycemia decreased at the height of parasitemia around the fifth day of infection. The diabetic infected animals presented higher survival after the onset of diabetes when compared with non-infected control. The main renal lesions found were glomerular edema, glomerular necrosis, cell infiltration, tubular atrophy and expansion of the glomerular basement membrane. The decrease of blood glycemia remains incompletely understood and it seems to be related to GPIs (glycosylphosphatidylinositols) proteins and the balance between Th1/Th2 responses. / Mestrado / Parasitologia / Mestre em Parasitologia

Orientador: Liana Maria Cardoso Verinaud / Texto em português e inglês / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-25T08:26:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Thome_Rodolfo_D.pdf: 18503134 bytes, checksum: f4906f6cd7d52ca62d211efbbca1732a (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: A malária permanece como a maior doença infecciosa do mundo, sendo que metade da população mundial se encontra em risco de ser infectada. A destruição do agente causador, protozoários do gênero Plasmodium, é essencial para a resolução da moléstia e é mediada pela atuação coordenada entre linfócitos T e B. Foi noticiado a presença de auto-anticorpos em pacientes portadores de malária, e em alguns casos o agravamento de doenças autoimunes como o lúpus e, possivelmente, a esclerose múltipla. Estudos conduzidos em nosso laboratório demonstraram que a infecção por P. berghei NK65 em camundongos promoveu atrofia do timo e subsequente migração de células T CD4+CD8+ (DP) para órgãos linfoides secundários. Tendo em vista que o timo é o órgão linfoide primário responsável pela maturação e desenvolvimento de linfócitos T, desempenhando um papel primordial em gerar a tolerância central, o presente estudo teve por objetivo investigar o efeito da infecção por P. berghei sobre a evolução clínica da Encefalomielite Autoimune Experimental (EAE) e também sobre o perfil de ativação de células dendríticas. Os resultados obtidos mostraram que camundongos curados da malária apresentaram quadro clínico exacerbado de EAE quando comparados com animais que não entraram em contato com o plasmódio. A piora no quadro clínico de EAE se associou com a migração precoce de células T-DP para o Sistema Nervoso Central (SNC) e pela produção de citocinas inflamatórias por tais células. Camundongos resistentes a EAE desenvolveram a doença após a infecção por plasmódio, indicando que a atrofia tímica induzida pela infecção é capaz de alterar a susceptibilidade ao desenvolvimento de doenças autoimunes. Por outro lado, o tratamento de células dendríticas (DCs) com extratos derivados do plasmódio modificou seu estado de maturação/ativação para um perfil tolerogênico. A transferência adotiva de células dendríticas moduladas com extratos de plasmódio foi capaz de reduzir a EAE, bem como a neuro-inflamação do SNC pela supressão da resposta imune celular a neuro-antígenos. Tomados em conjunto, os resultados obtidos neste estudo mostram que a infecção por Plasmodium berghei NK65 promove alterações significativas no sistema imune que auxiliam na exacerbação da neuro-inflamação autoimune. Por outro lado, a utilização de extratos do plasmódio pode se tornar uma alternativa inovadora na modulação da inflamação por meio da transferência adotiva de células dendríticas tornadas tolerogênicas com tais extratos / Abstract: Malaria remains as the most frequent infectious disease in the world, where half of the world population is at risk. Destruction of the causative agent, protozoan of the Plasmodium gender, is essential for the resolution of the disease and this is mediated by the coordinated action of both T and B lymphocytes. It has been demonstrated that malaria-bearing patients possess auto-antibodies, e in some cases, the worsening of autoimmune diseases such as lupus and multiple sclerosis. Studies, conducted by our group, have shown that P. berghei NK65 infection promoted thymic atrophy and the subsequent migration of CD4+CD8+ (DP) T cells towards the peripheral immune system. Since the thymus is the primary lymphoid organ responsible for the generation and maturation of T cells, playing a major role in the shaping of T cells repertoire, the present study aimed to investigate the influence of P. berghei infection in the clinical course of Experimental Autoimmune Encephalomyelitis (EAE), the mouse model for multiple sclerosis, and also over the maturation/activation status of dendritic cells. Results showed that malaria-cured mice developed a more severe EAE clinical course compared with control mice. The worsening in EAE score was related to the migration of DP-T cells towards the Central Nervous System (CNS), where these cells produced high amounts of inflammatory cytokines. Interestingly, EAE-resistant BALB/c mice developed the disease after plasmodia infection, indicating that the thymic atrophy induced by the infection is able to alter the susceptibility to autoimmune diseases. On the other hand, treatment of dendritic cells (DCs) with P.berghei extracts (PbX) modified their activation/maturation status towards a tolerogenic profile. The adoptive transfer of DC-PbX was able to suppress the development of EAE, as well as neuro-inflammation, through the reduction in cellular immune responses towards neuro-antigens. Taken together, the results collected in this study show that Plasmodium berghei NK65 infection promotes significant alterations in the immune system that aid the development of autoimmune neuro-inflammation. On the other hand, the use of plasmodia extracts may become an interesting approach to modulate inflammation through the adoptive transfer of tolerogenic dendritic cells / Doutorado / Imunologia / Doutor em Genetica e Biologia Molecular

Rodent malaria parasites (RMPs) serve as tractable models for experimental genetics, and as valuable tools to study malaria parasite biology and host-parasitevector interactions. Plasmodium vinckei, one of four RMPs adapted to laboratory mice, is the most geographically widespread species and displays considerable phenotypic and genotypic diversity amongst its subspecies and strains. The phenotypes and genotypes of P. vinckei isolates have been relatively less characterized compared to other RMPs, hampering its use as an experimental model for malaria. Here, we have studied the phenotypes and sequenced the genomes and transcriptomes of ten P. vinckei isolates including representatives of all five subspecies, all of which were collected from wild thicket rats (Thamnomys rutilans) in sub-Saharan Central Africa between the late 1940s and mid 1960s. We have generated a comprehensive resource for P. vinckei comprising of five high-quality reference genomes, growth profiles and genotypes of P. vinckei isolates, and expression profiles of genes across the intra-erythrocytic developmental stages of the parasite. We observe significant phenotypic and genotypic diversity among P. vinckei isolates, making them particularly suitable for classical genetics and genomics-driven studies on malaria parasite biology. As part of a proof of concept study, we have shown that experimental genetic crosses can be performed between P. vinckei parasites to potentially identify genotype-phenotype relationships. We have also shown that they are amenable to genetic manipulation in the laboratory.