Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2015. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-01-26T10:51:46Z No. of bitstreams: 1 2015_LarissaCamposAquino.pdf: 2726967 bytes, checksum: 51abca4084a9b1d6981087858e63bda6 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-01-27T20:57:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_LarissaCamposAquino.pdf: 2726967 bytes, checksum: 51abca4084a9b1d6981087858e63bda6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-27T20:57:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_LarissaCamposAquino.pdf: 2726967 bytes, checksum: 51abca4084a9b1d6981087858e63bda6 (MD5) / Hemoplasmas são micoplasmas hemotrópicos que não possuem parede celular e crescem na superfície de eritrócitos podendo causar anemia infecciosa em diferentes espécies de mamíferos. Gatos são infectados por três espécies principais: Mycoplasma haemofelis (Mhf), ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’ (CMhm) e ‘Candidatus Mycoplasma turicensis’ (CMt) e em cães as espécies Mycoplasma haemocanis (Mhc) e ‘Candidatus Mycoplasma haematoparvum’ (CMhp) são as mais prevalentes. O presente estudo teve como objetivos determinar a ocorrência e a filogenia das espécies de hemoplasmas em gatos da capital do Brasil e cidades satélites e de cães da Nigéria, África, e verificar se há correlação com alterações hematológicas. Amostras de sangue foram coletadas de 451 gatos de diferentes origens de Brasília, DF e de 246 cães de Jos, Plateau State, Nigeria e submetidas a avaliação eritrocitária e extração de DNA para PCRs e sequenciamento. No estudo em gatos, hemoplasmas foram encontrados em 13.8% dos animais. CMhm foi a espécie mais prevalente (13.8% dos gatos), seguida pelo Mhf (11.1%) e CMt (4.4%). Mais de 80% dos gatos infectados por hemoplasmas estavam infectados por duas ou mais espécies: 7.1% estavam co-infectados com Mhf/CMhm, 0,4% com CMhm/CMt e 3,9% com Mhf/CMhm/CMt. O gênero masculino estava significativamente associado com infecção por hemoplasmas. Nenhuma associação entre o resultado da qPCR para hemoplasmas e parâmetros hematológicos foi encontrada, porém o número relativo de cópias de CMhm apresentou correlação com o número de eritrócitos e hematócrito. As sequencias do gene 16S rRNA (>1Kb) das espécies de hemoplasmas provenientes de gatos com co-infecções foram obtidos usando oligonucleotídeos espécie específicos, o que permitiu a obtenção de sequencias do gene 16S rRNA apesar do alto nível de co-infecções, que impossibilita o uso de oligonucleotídeos universais para o gene 16S rRNA. Dentro de cada espécie as sequencias de Mhf, CMhm e CMt apresentaram identidade de >99.8%, >98.5% e >98.8%,respectivamente. As sequencias de Mhf, CMhm e CMt apresentaram >99.2%, >98.4% e >97.8% de identidade, respectivamente, com sequencias do GenBank. A análise filogenética demonstrou todas as sequencias do Mhf em um único grupo, enquanto as sequencias de CMhm e CMt se agruparam em 3 subgrupos distintos. Estes achados filogenéticos sugerem a existência de diferentes cepas de CMhm e CMt. No estudo em cães, a qPCR espécie específica detectou infecção por Mhc em 18 dos 245 cães (7,3%) e CMhp em apenas um cão (0,4%). A qPCR de gênero de hemoplasmas foi positiva em 44 dos 245 (17,9%) dos cães. Vinte e cinco cães tiveram resultados discordantes nas qPCRs, nos quais foram positivos na qPCR de gênero de hemoplasmas, mas negativos na qPCR espécie específica. A avaliação desses cães discordantes por meio do sequenciamento do gene 16S rRNA gerou resultados limitados, mas em 5 cães confirmou-se a infecção por espécies diferentes de hemoplasmas: 2 Anaplasma phagocytophilum, 1 Anaplasma ovis, 1 Serratia marcescens e 1 Aerococcus spp. O sequenciamento do gene 16S rRNA dos Mhc mostrou >99,8% de identidade entre elas e >99,6% de identidade com sequencias disponíveis no GenBank e permaneceram no mesmo grupo de outras sequencias de Mhc e Mycoplasma haemofelis, indicando baixa variabilidade genética do gene 16S rRNA entre Mhc de diferentes origens. / Haemoplasmas are wall less haemotropic mycoplasmas that attach and grown in the surface of erythrocytes and cause anaemia in different mammals species. Cats are infected with three main species: Mycoplasma haemofelis (Mhf), ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’ (CMhm) and ‘Candidatus Mycoplasma turicensis’ (CMt), while in dogs the species Mycoplasma haemocanis (Mhc) and ‘Candidatus Mycoplasma haematoparvum’ (CMhp) are the most prevalent. The aims of the present study were to determine the occurrence and the phylogeny of haemoplasma species from cats in Brasilia and surrounding cities and from dogs in Nigeria, Africa; and assess weather any correlation existed between haemoplasma infection and haematological abnormalities. Blood samples were collected from 451 cats in different origins of Brasília, DF and from 246 dogs from Jos, Plateau State, Nigeria; submitted to erythrocyte evaluation and DNA extraction for PCR analysis and sequencing. In the cats study, haemoplasmas were found in 13.8% of 432 cats. CMhm was the most prevalent species (in 13.8% of cats), followed by Mhf (11.1%) and CMt (4.4%). Over 80% of haemoplasma-infected cats harboured two or more feline haemoplasma species: 7.1% of cats were co-infected with Mhf/CMhm, 0.4% with CMhm/CMt and 3.9% with Mhf/CMhm/CMt. Male gender was significantly associated with haemoplasma infections. No association was found between qPCR haemoplasma status and haematological variables, however CMhm relative copy numbers were correlated with red blood cell (RBC) numbers and packed cell volume (PCV). Haemoplasma 16S rRNA gene sequences (>1Kb) were derived from co-infected cats using novel haemoplasma species-specific oligonucleotides. This allowed 16S rRNA gene sequences to be obtained despite the high level of co-infection, which precluded the use of universal 16S rRNA gene oligonucleotides. Within each species, the Mhf, CMhm and CMt sequences showed >99.8%, >98.5% and >98.8% identity, respectively. The Mhf, CMhm and CMt sequences showed >99.2%, >98.4% and >97.8% identity, respectively, with GenBank sequences. Phylogenetic analysis showed all Mhf sequences to reside in a single clade, whereas the CMhm and CMt sequences each grouped into three distinct subclades. These phylogeny findings suggest the existence of different CMhm and CMt strains. In the dogs study, species-specific qPCR assays found Mhc infection in 18 of 245 dogs (7.3%), and CMhp infection in only one dog (0.4%). The generic haemoplasma qPCR assays were positive in 44 of 245 (17.9%) dogs. Twenty-five dogs had discordant qPCR results in that they were generic haemoplasma qPCR positive but species-specific qPCR negative. Further evaluation of these dogs by 16S rDNA sequencing gave limited results but 5 were confirmed to be infected with non-haemoplasma species: The 16S rRNA gene sequences from Mhc species showed >99.8% identity with each other and >99.6% identity with GenBank sequences, and resided in a single clade with other global Mhc and Mycoplasma haemofelis sequences, indicating low 16S rRNA genetic variability amongst this canine haemoplasma species.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2011. / Submitted by Shayane Marques Zica (marquacizh@uol.com.br) on 2011-06-22T17:46:37Z No. of bitstreams: 1 2011_AnahiSouzaSilva.pdf: 1209674 bytes, checksum: bdbbebe4d6f07fb3127f679724f56d13 (MD5) / Approved for entry into archive by Guilherme Lourenço Machado(gui.admin@gmail.com) on 2011-06-28T15:56:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_AnahiSouzaSilva.pdf: 1209674 bytes, checksum: bdbbebe4d6f07fb3127f679724f56d13 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-28T15:56:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_AnahiSouzaSilva.pdf: 1209674 bytes, checksum: bdbbebe4d6f07fb3127f679724f56d13 (MD5) / A alta prevalência entre os cães com idade superior a dois anos, independente do gênero ou raça, faz a doença periodontal se tornar um tópico interessante de pesquisas. Além dos sintomas como dor, halitose e desconforto, a constante migração de micoorganismos oriundos da boca afetam o organismo como um todo. Estudos sobre o assunto, principalmente em seres humanos demonstram que a doença periodontal apresenta grande potencial como agente indutor e agravante de doenças sistêmicas. Porém ainda são poucos os trabalhos que debatem a correlação da doença e seus aspectos clínicos com as mudanças na tecidos e órgãos vitais. A associação entre mais informações sobre a fisiopatologia da doença periodontal e diagnóstico precoce pode evitar danos de saúde dos animais, por essa razão, a fim de melhorar a compreensão sobre a extensão da lesão tecidual e contribuir com o estabelecimento de medidas mais eficazes de tratamento terapêutico e profilático este trabalho descreve as principais alterações clinicohistopatológicas que foram encontradas na cavidade oral de 89 cães do Distrito Federal e Entorno. A prevalência da doença foi de mais de 90%, sendo a grande maioria dos cães portadores de doença periodontal leve. Os cães de pequeno porte apresentaram maiores índices da doença em estágio grave do que os cães maiores. A vascularização foi maior na forma severa. A comparação entre o diagnóstico clínica e a avaliação microscópica da gengiva não foi significantiva estatísticamente e a porcentagem de acerto entre as duas avaliações foi reduzido, principalmente no estágio leve da doença ou na ausência de sinais clínicos. Os resultados indicam que a avaliação clínica ainda está aquém da reais alterações que ocorrem no tecido no estagio inicial da doença periodontal. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The main purpose of this work is to present the results of a study about histopathological changes caused by periodontal disease on canine gums of animals from Distrito Federal and surroundings contributing with the establishment of more effective therapeutic and pathological treatment measures. The periodontal disease resulted from a natural process has become an interesting research topic presenting rates like 80% of prevalence in canine animals aged more than two years old, gender or race independent. Animals with periodontal disease can present symptoms like discomfort, pain and in advanced stages even microorganisms migration through their whole system. Several human medicine studies can be found about Periodontal Disease but there is a lack of studies in veterinary area therefore some efforts started to appear in order to identify correlations among clinical aspects and changes found in animals tissues and vital organs. More knowledge about periodontal disease physiopathology associated with earlier diagnosis can help to prevent damages on animals heath. This work describe the main histological and pathological changes that were found on canine gums of animals from Distrito Federal and surroundings, aiming more tissue lesion extension understanding in order to contribute with the establishment of more effective therapeutic and prophylactic treatment measures. More than 90% of animals in the bunch presented the earlier stages of periodontal disease but the most of severe cases was found in small animals. Higher vascularization was found in advanced forms of disease the correlation among clinical aspects and microscopic evaluation of the gum presented no relevant results with reduced match especially in cases with clinical signs absence or in the earlier stages of the disease.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2006. / Submitted by Luana Patrícia de Oliveira Porto (luana_porto_23@hotmail.com) on 2009-09-29T23:06:25Z No. of bitstreams: 1 2006_HelenaKochGuimarães.pdf: 461324 bytes, checksum: 365ed0f4f4b242ea86645dbf8279c259 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2010-02-04T23:57:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_HelenaKochGuimarães.pdf: 461324 bytes, checksum: 365ed0f4f4b242ea86645dbf8279c259 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-02-04T23:57:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_HelenaKochGuimarães.pdf: 461324 bytes, checksum: 365ed0f4f4b242ea86645dbf8279c259 (MD5) Previous issue date: 2006-05-19 / A distribuição mundial das Salmonellas já é conhecida, tanto em populações animais, como em grupos humanos, convertendo-se em sérios problemas de saúde pública, e juntamente com o gênero Campylobacter, é responsável por cerca de 90% das toxinfecções alimentares registradas. As populações de aves de produção encontram-se entre as principais espécies animais fornecedoras de proteína para os humanos, e acrescentando a fácil contaminação a nível de campo, as tornam um dos principais grupos de transmissores das Salmonellas, devido ao alto consumo de aves inteiras ou de partes ou subprodutos das mesmas. O presente trabalho teve como objetivo pesquisar a prevalência de salmonelas em 300 aves Gallus gallus adultos criados em propriedades não tecnificadas do Distrito Federal, bem como tipificá-las posteriormente na Fundação Oswaldo Cruz do Rio de Janeiro/RJ e realizar antibiograma para ver a sensibilidade das salmonelas encontradas a diferentes antibióticos. De cada ave foi coletado um suabe cloacal que era incubado no Rappaport-Vassiliadis por 48 horas a 37o C, posteriormente foi repicado em ágar MacConkey a 37o C por 24 horas e as colônias típicas de Salmonella eram repassadas no TSI a 37o C por 24 horas, de onde os resultados típicos eram repassados para diversos testes bioquímicos. Nas aves analisadas não foi encontrada nenhuma Salmonella. ___________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Salmonellas are world-wide spread and besides being cause of disease for poultry, they still constitute a problem in what concerns public health, since Salmonella combined with Campylobacter sp. are estimated to be responsible for over 90% of the cases in the world related to food bacterial toxic infection; in case of Salmonellas, products derived from aviculture (poultry production), are the principal responsible. The present work aimed at developing a research on the predominance of Salmonellas, involving 300 Gallus Gallus poultry raised in farms with no technical means, in Distrito Federal, as well as typifying them later in the Foundation Oswaldo Cruz- Rio de Janeiro/RJ and also carrying out antibiograms to verify the Salmonellas‘susceptibility to different antibiotics. It was collected- from each poultry- a swab cloacal which was incubated in the Rappaport-Vassiliads for 48 hours at 37º degrees centigrade; later on, it was transplanted to a MacConkey agar at 37º degrees centigrade per hour and the typical Salmonella colonies it was *re-passed to the TSI at 37º centigrade for a period of 24 hours, from where the typical results it was* re-passed for several biochemical tests. No Salmonelas were found in the poultry analyzed.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2008. / Submitted by Raquel Viana (tempestade_b@hotmail.com) on 2010-03-10T20:02:28Z No. of bitstreams: 1 2008_MarianadeFatimaGoisCesar.pdf: 617191 bytes, checksum: 81a17571c8c24614108fad35869d4245 (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2010-03-11T01:10:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_MarianadeFatimaGoisCesar.pdf: 617191 bytes, checksum: 81a17571c8c24614108fad35869d4245 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-03-11T01:10:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_MarianadeFatimaGoisCesar.pdf: 617191 bytes, checksum: 81a17571c8c24614108fad35869d4245 (MD5) Previous issue date: 2008-12 / Ehrlichia canis é o agente etiológico da erliquiose monocítica canina (EMC). A doença, transmitida pelo carrapato marrom do cão Rhipicephalus sanguineus, é endêmica em diversas regiões do Brasil. O presente estudo teve como objetivo investigar a presença de E. canis em cães sintomáticos e avaliar suas correlações com os achados hematológicos de anemia e trombocitopenia. Além disso, foram analisadas seis diferentes regiões genômicas de repetição para a identificação de variabilidade genética em linhagens de E. canis. A amostra incluiu cães admitidos no Hospital Veterinário da Universidade de Brasília (n = 86). A reação de polimerização em cadeia (PCR), tendo como alvo específico seqüências da região 16S rRNA de E. canis, foi utilizada na identificação do microrganismo em amostras de sangue. Em seguida, um grupo de 31 amostras aleatórias, foram examinadas para avaliar a ocorrência de trombocitopenia e anemia. Vinte e quatro animais (27,9%) foram positivos para E. canis. A presença de E. canis foi positivamente relacionada com a trombocitopenia (66,7% versus 16,6%, P <0,05, teste exato de Fisher) e anemia (56,2% versus 13,3%, P <0,05, teste exato de Fisher). A segunda fase deste trabalho investigou a variabilidade genética microbiana. A divergência genética de 11 cepas controle de E. canis foi analisada em alelos de seis diferentes regiões contendo repetições em tandem, ecaj_0017, ecaj_0062, ecaj_0109, ecaj_0221, ecaj_0472, e ecaj_0530. Três dos seis lócus selecionados mostraram polimorfismo genético: ecaj_0017, ecaj_0109, e ecaj_0221. A maior variação ocorreu em ecaj_0109, com alelos apresentando 0, 5, 6, ou 18 repetições. O gene ecaj_0109 (GP36) também apresentou alta variabilidade entre 34 amostras de sangue de cães positivos para E. canis de Brasília; as linhagens exibiram alelos com 5, 6, 9, 10, 14, 15, 16, 17, 18 e 21 unidades repetitivas. Concluindo, os resultados revelaram infecção por E. canis em cães da cidade de Brasília. A região deve ser considerada área endêmica. A prevalência de E. canis foi maior nos cães trombocitopênicos e anêmicos. A variabilidade encontrada em três regiões genômicas de repetição discriminou diferentes linhagens genéticas entre os isolados brasileiros de E. canis. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Ehrlichia canis is the causative agent of canine monocytic ehrlichiosis (CME). This cosmopolitan disease is transmitted by the brown dog tick, Rhipicephalus sanguineus, and occurs endemically in various regions of Brazil. The present study was aimed to investigate the presence of E. canis DNA in symptomatic dogs and its relationships with anemia and thrombocytopenia. In addition, we analysed six different tandem repeats genomic regions for genetic variability among E. canis lineages. The sample included dogs admitted to the Veterinary Hospital at the University of Brasília (n=86). We used a polymerase chain reaction (PCR) targeted to E. canis specific 16S rRNA sequences to identify the microorganism in dog blood samples. After that, a subset of 31 aleatory blood samples were examined for the occurrence of thrombocytopenia and anemia. A total of 24 animals (27.9%) were positive for E. canis. The presence of E. canis DNA was positively related to trombocytopenia (66.7% versus 16.6%, P<0.05, Fisher’s exact test) and anemia (56.2% versus 13.3%, P<0.05, Fisher’s exact test). The second phase of this work focused on the microbial genetic variability. We analyzed 11 control strains for allelic variability in six different genomic VNTRs named ecaj_0017, ecaj_0062, ecaj_0109, ecaj_0221, ecaj_0472, and ecaj_0530. Three of the six loci showed genetic polymorphism: ecaj_0017, ecaj_0109, and ecaj_0221. The higher variability occurred in ecaj_0109 which showed alleles with 0, 5, 6, or 18 repeats. Ecaj_0109 (GP36 gene) also presented high variability among 34 E. canis positive dog blood samples from Brasília; the lineages displayed alleles with 5, 6, 9, 10, 14, 15, 16, 17, 18, and 21 repeat units. In conclusion, our data showed E. canis infection in dogs from the city of Brasília, Central-West Brazil; the region should be considered an endemic area. The prevalence of E. canis was higher in thrombocytopenic and anemic dogs. The variability found in three different repeat genomic loci discriminated divergent genetic lineages among Brazilian E. canis isolates.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2010. / Submitted by Shayane Marques Zica (marquacizh@uol.com.br) on 2011-03-17T19:32:38Z No. of bitstreams: 1 2010_MarthadeSouzaTeixeiradaRocha.pdf: 2949468 bytes, checksum: 88d5bae32f31cab05aeb1760125b3462 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2011-03-21T12:50:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_MarthadeSouzaTeixeiradaRocha.pdf: 2949468 bytes, checksum: 88d5bae32f31cab05aeb1760125b3462 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-03-21T12:50:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_MarthadeSouzaTeixeiradaRocha.pdf: 2949468 bytes, checksum: 88d5bae32f31cab05aeb1760125b3462 (MD5) / O câncer de mama representa o neoplasma maligno mais comum nas cadelas e o tratamento atualmente consiste na sua excisão, associado ou não à quimioterapia adjuvante que pode ser eficaz ou não. Conseqüentemente é crescente a busca por alternativas terapêuticas que cessem ou retardem o crescimento tumoral. Uma terapia promissora, difundida para o tratamento de alguns tipos de é a terapia fotodinâmica que se baseia na combinação de um fármaco fotossensibilizante que quando ativado provoca morte celular. O objetivo do trabalho foi avaliar a aplicação e citotoxicidade da Terapia Fotofinâmica mediada pelo Alumínio-Cloro-Ftalocianina em formulação liposomal (TFD-AlClFt) em um sistema de tratamento experimental in vitro de amostras tumorais extraídas de carcinoma mamário de cadela submetida ao tratamento cirúrgico tradicional. Para isso foram formados 04 grupos experimentais: grupo controle, LED, fármaco fotossensibilizador AlClFt 2,5μM e TFD. O grupo O controle (1) foi aquele em que as células não foram submetidas a nenhum tratamento; O grupo LED (2) recebeu iluminação com a fonte de luz LED na intensidade 10 J/cm2 e comprimento de onda 660nm. O grupo AlClFt (3) apenas administração do fármaco AlClFt e grupo TFD (4), que consistiu na terapia fotodinâmica. Foram analisados viabilidade celular, citotoxicidade, via de morte celular e possíveis alterações morfológicas através dos ensaios ciitotóxicos; azul tripan, dupla coloração de alaranjado de acridina e brometo de etídio, MTT e avaliações morfológicas que evidenciaram efetividade da TFD nas condições experimentais deste trabalho. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Breast cancer is the most common malignant neoplasm in dogs and treatment currently consists of surgical excision, with or without adjuvant chemotherapy. However, the search for alternative therapies to stop completely or to slow down tumor growth is increasing. Photodynamic therapy (PDT) is based on the combination of a photosensitizing agent that once activated causes cell death. The objective of this study was to evaluate PDT mediated by Aluminum-Chlorine-Phtalocyanine (AlClPc) in an experimental in vitro treatment system of tumor samples taken from mammary carcinoma of dogs subjected to surgical excision . The primary cell culture was divided into four experimental groups: control, LED, photosensitizer AlClPc 2.5 μM and PDT. The control group (1) represented the cells which had not undergone any treatment, the LED group (2) was exposed to a LED light source of 10 J/cm2 intensity and wavelength of 660nm. The AlClPc group (3) was treated with only the photosensitizer agent and the PDT group (4), was the one that undergone the photodynamic therapy. Cell viability, cytotoxicity and cell death pathways were evaluated through the cytotoxicity assays: trypan blue, double staining of acridine orange and ethidium bromide and MTT. Cultures were also subjected to morphological evaluation by optic microscopy. It can be observed from the results that the amount of cell death was significantly higher (P <0.05) in the PDT group when compared to the other groups by all tests, and the cell death was due to necrosis. It can be concluded that the PDT is an effective treatment in cell culture of canine mammary carcinoma.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2011. / Submitted by Rafael Barcelos Santos (rafabarcelosdf@hotmail.com) on 2011-06-21T17:43:17Z No. of bitstreams: 1 2011_Tatiana Guerrero Marçola.pdf: 1850074 bytes, checksum: a07c4642414da6b648e397f1269c820a (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(tempestade_b@hotmail.com) on 2011-07-03T13:21:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_Tatiana Guerrero Marçola.pdf: 1850074 bytes, checksum: a07c4642414da6b648e397f1269c820a (MD5) / Made available in DSpace on 2011-07-03T13:21:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_Tatiana Guerrero Marçola.pdf: 1850074 bytes, checksum: a07c4642414da6b648e397f1269c820a (MD5) / O vírus da imunodeficiência felina (FIV) é um Retrovírus de distribuição mundial que acomete os felinos domésticos e selvagens. Estima-se que aproximadamente 10% de toda a população mundial de gatos domésticos esteja infectada. Marcadas diferenças existem entre as prevalências mundiais, com índices de 2,5 até 44%. No Brasil há relatos de ocorrência apor meio de diagnósticos moleculares de 14%. A patogenia se apresenta como na AIDS, onde há grande depleção de linfócitos e longo período assintomático, é descrito que muitas doenças oportunistas se aproveitem desta imunossupressão, sendo por essa razão o gato utilizado como modelo animal. As alterações hematológicas são conflitantes, sendo observadas: Anemias, linfopenias, neutrofilias, bem com aumento das proteínas. Hemoplasmas, Toxoplasma gondii e o Vírus da Leucemia Felina (FelV) estão entre as principais co-infecções associadas. Foram realizadas análises moleculares por PCR através de DNA extraídos de sangue de 200 gatos domésticos (Felis catus), de três regiões do Distrito Federal. A ocorrência encontrada foi de 2% para a infecção por FIV, com co-infecção de 100% por hemoplasma, 75% para FelV e 0% para Toxoplasmose. Análises hematológicas demonstraram significância (p<0,05) entre o grupo infectado e não infectado para: Contagem de leucócitos, diferencial absoluto de neutrófilos, proteínas plasmáticas totais e volume corpuscular médio. A análise filogenética evidenciou subtipo B para três dos quatro animais positivos. O estudo demonstrou que a taxa de ocorrência para o vírus no Distrito Federal é bem menor que outros estados do Brasil, que são poucas as alterações hematológicas encontras, sendo que estas não podem ser diferenciadas do vírus ou do hemoplasma e sugere-se que há outro subtipo viral além do B encontrado no Brasil. _____________________________________________________________________________ ABSTRACT / Feline Immunodeficiency Virus (FIV) is a Retrovirus of worldwide distribution that affects domestic and wild cats. It is estimated that approximately 10% of the entire world population of domestic cats are infected. Wide differences exist between the prevalence worldwide, with rates of 2.5 to 44%. In Brazil there are reports of occurrence through molecular diagnostics 14%. The pathogenesis is similar as in AIDS, where there are large lymphocyte depletion and long asymptomatic period, it is reported that many opportunistic infections availed of this immunosuppression, and due this fact the cat used as an animal model. Hematological changes are controversial, being observed: Anemia, lymphopenia, neutrophilia, and an increase of the proteins. Hemoplasmas, Toxoplasma gondii and the Feline Leukemia Virus (FeLV) are among the leading co-associated infections. We performed molecular analysis by PCR using DNA extracted from blood of 200 domestic cats (Felis catus), in three regions of the Federal District. The occurrence was 2% for FIV infection, with co-infection by haemoplasma 100%, 75% for FeLV and 0% for toxoplasmosis. Haematological analysis showed significance (p <0.05) between infected and uninfected group to: Leukocyte count, count absolute neutrophil, serum total protein and mean corpuscular volume. The phylogenetic analysis revealed subtype B for three of four positive animals. The study showed that the rate of occurrence for the virus in the Federal District is far less than other states in Brazil, there are few hematological find, and these cannot be differentiated from the virus or haemoplasma and suggests that there are other viral subtype B found in Brazil.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2011. / Submitted by Shayane Marques Zica (marquacizh@uol.com.br) on 2011-09-05T18:25:51Z No. of bitstreams: 1 2011_StellaAlvesdaFonseca.pdf: 1459900 bytes, checksum: 8e551b86d0680e69d061e73ab6c7dc88 (MD5) / Approved for entry into archive by Repositorio Gerência(repositorio@bce.unb.br) on 2011-10-25T20:41:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_StellaAlvesdaFonseca.pdf: 1459900 bytes, checksum: 8e551b86d0680e69d061e73ab6c7dc88 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-10-25T20:41:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_StellaAlvesdaFonseca.pdf: 1459900 bytes, checksum: 8e551b86d0680e69d061e73ab6c7dc88 (MD5) / Foi realizado estudo retrospectivo de 159 cães com ceratoconjuntivite seca (CCS) atendidos no Hospital Veterinário da Universidade de Brasília, a fim de estabelecer os padrões da doença no Distrito Federal. O estudo demonstrou predisposição da raça cocker spaniel (P<0,0001), sinais clínicos mais evidentes em animais com valores do Teste da Lágrima de Schirmer realizado sem colírio anestésico (TLS-1) < 5mm/minuto (P<0,0001) e maior incidência da CCS em cães com idade superior a seis anos. Exceção foi observada em cães da raça Yorkshire terrier, acometidos mais precocemente. Os sinais clínicos observados com maior frequência foram hiperemia conjuntival, secreção mucosa, neovascularização e pigmentação de corneanas. A ciclosporina A foi o principal medicamento prescrito. A fim de investigar o potencial da terapia com células-tronco, foi criado um protocolo aplicado ao tratamento da CCS, de colheita de medula óssea (MO), separação de fração de células mononucleares (FCM) e administração autóloga por via subconjuntival palpebral sobre a glândula da terceira pálpebra de coelhos e cães. Foram utilizados dez coelhos e 20 cães, que, após passarem por exames clínicos e laboratoriais e ambientação, foram divididos em grupo controle e grupo tratado. Para obtenção da FCM, foi realizada colheita, centrifugação e isolamento da medula óssea. O material, ressuspenso em solução salina, foi administrado no grupo tratado, enquanto o grupo controle recebeu apenas solução salina. Os animais passaram por avaliações clínicas e TLS-1 até 60 dias da aplicação, e avaliação histológica da glândula da terceira pálpebra, que demonstraram não haver alterações que contraindicassem o tratamento. Tanto a administração de solução salina quanto a de solução salina + FCM aumentaram significativamente os valores do TLS, mas o aumento foi mais pronunciado nos cães que receberam células mononucleares. Aos 60 dias da aplicação da FCM, os cães tratados apresentaram aumento de 3,4mm;min ao TLS-1. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / A retrospective study of 157 dogs with keratoconjunctivitis sicca (KCS) examined at the Veterinary Hospital at the University of Brasilia was undertaken in order to establish the patterns of disease in Distrito Federal. The study demonstrated predisposition of cocker spaniels (P <0.0001), more clinical signs in patients with Schirmer Tear Test (STT) values less than 5 mm/minutes (P <0.0001) and higher incidence of KCS on dogs over six years (except on Yorkshire terriers, which were stricken younger). Clinical signs more frequently observed were conjunctival hyperaemia, mucus discharge, neovascularization and pigmentation. Cyclosporin A was the main drug prescribed, regardless of the amount of clinical signs and values of the STT presented by each animal. In order to investigate the potential of stem cell therapy, an experimental model of harvest of bone marrow (BM), separation of mononuclear cell fraction (MCF) and administration by subconjunctival autologous eyelid on the third eyelid gland in rabbits and dogs was created and applied to the treatment of KCS. Ten rabbits and 20 dogs were were divided into control and treated group, after undergoing clinical and laboratorial exams and quarantine. To obtain MCF, BM was harvested, centrifuged and isolated. Treated group was submitted to the autotransplant of MCF + saline , while the control group received only saline. The animals underwent clinical and histological evaluation and STT, which showed no contraindicative changes. Both the administration of saline as that of saline + FCM significantly increased the values of the TLS, but the increase was more pronounced in dogs that were inoculated mononuclear cells.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-09-26T15:37:59Z No. of bitstreams: 1 2013_RomuloVitelliRochaPeixoto.pdf: 2229695 bytes, checksum: b9d0c709c69121a3e5d2a1eaff4d1400 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-10-03T13:13:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_RomuloVitelliRochaPeixoto.pdf: 2229695 bytes, checksum: b9d0c709c69121a3e5d2a1eaff4d1400 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-03T13:13:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_RomuloVitelliRochaPeixoto.pdf: 2229695 bytes, checksum: b9d0c709c69121a3e5d2a1eaff4d1400 (MD5) / A ceratoconjuntivite seca em cães é uma afecção frequente na rotina clínica. Embora se verifiquem resultados satisfatórios no emprego de imunomoduladores, alguns pacientes não respondem positivamente ao uso desses fármacos, e a terapia celular pode se tornar uma alternativa ao tratamento convencional. Objetivou-se avaliar os efeitos da aplicação de fração autógena de células mononucleares (FCM) da medula óssea na região periglandular da terceira pálpebra, sobre a superfície ocular de cães com CCS. Foram selecionados 15 pacientes (25 olhos acometidos) provenientes do Serviço de Oftalmologia Veterinária da FAV/UnB, sendo nove machos e seis fêmeas, de dez raças distintas. Para inclusão neste estudo, os indivíduos apresentaram valores inferiores à 10mm/min ao teste lacrimal de Schirmer (TLS). Eles foram submetidos ao TLS, à tonometria de aplanação, à biomicroscopia com lâmpada em fenda, ao tempo de ruptura do filme lacrimal (TRFL), ao teste da lissamina verde e ao teste da fluoresceína, semanalmente, durante 16 semanas consecutivas. Realizou-se, neste mesmo período, avaliação quanto à hiperemia e à secreção ocular, à quemose e à transparência corneal. A medula óssea foi coletada mediante punção pelo esterno, a FCM foi isolada por centrifugação e o pellet contendo a FCM foi aplicado na região periglandular da terceira pálpebra no dia inicial do estudo. Realizou-se biopsia da conjuntiva bulbar temporal superior para avaliação do grau de inflamação e quantificação das células caliciformes no dia da aplicação da FCM e 16 semanas após a mesma. Os resultados obtidos foram avaliados empregando-se teste t-Student e descritos em um gráfico de pontos acompanhado de regressão linear. Verificou-se aumento dos valores do TLS até a sexta semana após o tratamento, seguindo-se diminuição do TLS, mas nos dois momentos não ocorreu diferença estatisticamente significativa dos valores iniciais. Quadro semelhante foi observado com a avaliação dos parâmetros clínicos. Entretanto, o TRFL aumentou ao término das avaliações, bem como a impregnação por lissamina verde foi menor do que a verificada previamente ao tratamento. A inflamação conjuntival foi classificada como inferior, estável e superior aos valores iniciais em 30%, 40% e 30% dos olhos, respectivamente. A média no número de células caliciformes aumentou de 78,3 células/campo para 161 células/campo, verificando-se melhora em 50% dos olhos avaliados, estabilidade em 20% e piora em 30%. Diante das condições experimentais descritas, conclui-se que o uso da fração de células mononucleares da medula óssea aumentou a quantidade de células caliciformes conjuntivais, além de melhorar parâmetros de avaliação da superfície ocular. Desta forma tornando-se uma opção promissora para o tratamento da CCS canina, conferindo melhora à superfície ocular dos pacientes acometidos pela ceratoconjuntivite seca. O efeito de plasticidade celular e a ação anti-inflamatória da FCM sobre a glândula da terceira pálpebra merecem maiores investigações. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The keratoconjunctivitis sicca in dogs is a common condition in clinical practice. While there are satisfactory results in the use of immunomodulators, some patients do not respond positively to these drugs, and cell therapy may become an alternative to conventional treatment. This study aimed to evaluate the effects of the application of autologous mononuclear cell fraction (MCF) bone marrow periglandular in the region of the third eyelid, on the ocular surface of dogs with CCS. We selected 15 patients (25 affected eyes) from the Department of Veterinary Ophthalmology FAV/UNB, nine males and six females, ten distinct breed. For inclusion in this study, subjects had values below the 10mm/min the Schirmer tear test (STT). They were submitted to TLS, the applanation tonometry, slit lamp examination with the slit lamp, the breakup time of the tear film (BUT), the test of lissamine green and fluorescein test weekly for 16 consecutive weeks. Took place in the same period, evaluation as to hyperemia and ocular discharge, the chemosis and corneal transparency. Bone marrow was collected by puncture of the sternum, MCF was isolated by centrifugation and the pellet containing the MCF was applied in the region of the third eyelid periglandular the initial day of the study. Held biopsy superior temporal bulbar conjunctiva for assessing the degree of inflammation and quantification of goblet cells on the day of application of MCF and 16 weeks thereafter. The results were analyzed employing Student's t test and described in a scatterplot accompanied by linear regression. An increase in the values of the TLS until six weeks after treatment, followed by reduction of the TLS, but the two moments not statistically significant difference from baseline. A similar picture was observed with assessment of clinical parameters. However, BUT increased at the end of the evaluations, as well as lissamine green impregnation was lower than that determined prior to treatment. The conjunctival inflammation was ranked lower, stable and superior to the initial values by 30%, 40% and 30% of eyes, respectively. The mean number of goblet cells increased from 78.3 cells / field to 161 cells / field, verifying an improvement in 50% of eyes evaluated, stability in 20% and worsened in 30%. Given the experimental conditions described, it is concluded that the use of the fraction of bone marrow mononuclear cells increased the amount of conjunctival goblet cells, and improve evaluation parameters of the ocular surface. Thus making it a promising option for the treatment of canine CCS, giving improves the ocular surface of patients suffering from keratoconjunctivitis sicca. The effect of cellular plasticity and anti-inflammatory action of MCF on the gland of the third eyelid deserve further investigation.

Resumo: A leishmaniose visceral é uma enfermidade de grande impacto na saúde pública e de importância mundial que acomete o homem, animais silvestres e domésticos, como cães e gatos. A transmissão ocorre pela picada de flebotomídeos do gênero Lutzomya. Objetivou-se pesquisar a ocorrência de Leishmania (L.) chagasi em gatos provenientes de área endêmica para leishmaniose canina e humana pela utilização dos métodos diagnósticos: Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), hemocultura e Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) para Leishmania (L.) chagasi, comparar os resultados desses métodos quanto à especificidade e sensibilidade e realizar inquérito epidemiológico por meio de entrevista aos proprietários dos gatos avaliados. Foram colhidas amostras de sangue de 109 gatos provenientes de Birigui (SP), região endêmica para leishmaniose visceral canina e humana. Das 109 amostras de sangue, 52 (47,7%) foram positivas na hemocultura, três (2,7%) pela RIFI e 17 (15,6%) pela PCR. De acordo com os resultados encontrados, pode-se concluir que os gatos provenientes de áreas endêmicas para leishmaniose canina e humana são frequentemente expostos ao agente, podem se infectar, provavelmente desenvolver sintomatologia clínica e parasitemia. Faz-se também necessária a associação das técnicas sorológicas e moleculares para elevar a acuidade diagnóstica e, consequentemente, elucidar o verdadeiro papel do gato no ciclo epidemiológico da leishmaniose visceral / Abstract: The visceral leishmaniasis is a disease of great impact in the public health and of world significance. It affects man, wild and domestic animals, such as dogs and cats. The transmission occurs by the sting of phlebotomine vectors of the Lutzomyia gender. This work was aimed to study the occurrence of Leishmania (L.) chagasi in cats from an endemic area for canine and man leishmaniasis using Indirect Immunofluorescence Reaction (IFA), hemoculture and Polymerase Chain Reaction (PCR) for Leishmania (L.) chagasi diagnostic methods, compare the results of these methods as for the specificity and sensibility, and make an epidemiologic search through a questionnaire answered by the owners of the cats assessed. Blood samples were collected from 109 cats from Birigui (SP), an endemic region for canine and man visceral leishmaniasis. From 109 blood samples, 52 (47,7%) were positive in hemocultures, three (2,7%) in the IFA and 17 (15,6%) in the PCR. According to the results found one can conclude that cats from endemic areas for canine and man leishmaniasis are frequently exposed to de agent, they can infect themselves, develop a clinical simptomatology and parasithemia. It is also required an association of serological and molecular techniques to increase the diagnostic accuracy and, consequently, elucidate the true role of a cat in the epidemiological cycle of the visceral leishmaniasis / Orientador: Hélio Langoni / Coorientador: Simone Baldini Lucheis / Banca: Kátia Denise Saraiva Bresciani / Banca: Cassiano Victória / Mestre

Orientador: Noeme Sousa Rocha / Coorientador: Adriana C. Ferrari / Banca: Júlio Lopes Sequeira / Banca: Celmira Calderon / Resumo: O osteossarcoma (OSA) do cão ou sarcoma osteogênico é um tumor primário de comportamento biológico agressivo, prevalente em raças de médio e grande porte com idade entre sete a nove anos. O objetivo do trabalho foi aplicar um modelo experimental in vitro do osteossarcoma canino, para servir de suporte ao estudo do gene FOXE1, gene supressor tumoral pouco investigado, entretanto de extrema importância na pesquisa do câncer pelo fato de estar envolvido com a via de sinalização HH/GLI2, que regula positivamente o crescimento celular. Foram utilizadas cinco culturas de osteossarcoma, que serviram como subsídio para análise de metilação, imunoexpressão e expressão gênica. Os resultados permitiram validar a cultura celular do osteossarcoma canino, identificar dos padrões de metilação do gene FOXE1. Assim, observou-se a aplicabilidade da determinação do padrão de metilação da região promotora de FOXE1 e a não extrapolação do primer FOXE1 humano para quantificar a expressão gênica do cão / Abstract: Osteosarcoma (OSA) of the dog or osteogenic sarcoma primary tumor is an aggressive biological behavior, prevalent in breeds of medium and large aged seven to nine years. The objective of this study was to apply an experimental model in vitro canine osteosarcoma, to underpin the study of gene FOXE1, tumor suppressor gene has been little research, though extremely important in cancer research by being involved in the signaling pathway HH / GLI2, which positively regulates cell growth. We used five cultures of osteosarcoma, which served as input for methylation analysis, immunostaining and gene expression. The results validate the canine osteosarcoma cell culture to identify patterns of gene methylation FOXE1. Thus, there was determination of the applicability of the methylation pattern of the promoter region of FOXE1 and no extrapolation of human FOXE1 primer to quantify gene expression of the dog / Mestre