A oleorresina de copaíba é amplamente utilizada em diferentes regiões do país, especialmente na região amazônica. Sua atividade cicatrizante e antiinflamatória são as mais difundidas na medicina popular. Entretanto, são raras na literatura científica as descrições destas atividades, bem como a indicação da composição responsável pela atividade. Os objetivos deste estudo foram a otimização da obtenção da fração volátil da oleoressina de copaíba, por extração com arraste à vapor, sua microencapsulação em goma arábica por atomização e secagem em spray-dryer, avaliação química, morfológica e farmacológica (atividade antiinflamatória in vivo). A fração volátil representou 14,5% da oleorresina, sendo o beta-cariofileno (70%) e o alfa- humuleno (8,7%) seus constituintes majoritários. A eficiência do processo de microencapsulação da fração volátil em goma arábica foi em média de 95%. Os estudos de estabilidade da fração volátil livre e microcapsulada, nas temperaturas de 25oC e 40oC em ambiente de umidade relativa de 50%, mostraram que o beta- cariofileno sofreu oxidação, gerando principalmente óxido de cariofileno, e em menor extensão outros compostos oxigenados. A microencapsulação da fração volátil minimizou, porém não impediu a oxidação e a perda de massa. Os ensaios da atividade farmacológica in vivo mostraram que a fração volátil inibiu expressivamente o processo inflamatório agudo, induzido por carragenina ou zimosan, com ED50 de 32mg/Kg. A fração microencapsulada inibiu a resposta inflamatória na mesma magnitude que a fração volátil livre, mostrando que o processo de microencapsulação não alterou a atividade, possibilitando seu uso como forma farmacêutica ou intermediária na preparação de outras. O beta-cariofileno inibiu a resposta inflamatória na dose de 32 mg/Kg, na mesma magnitude que a fração volátil, o que nos permite atribuir a este, a atividade antiinflamatória observada. / The oilresin of copaiba is extensively used in different regions of Brazil, especially in the Amazon region. Its healing and anti-inflammatory activities are widely known in folk medicine. However, descriptions of these activities and the indication of the compound responsible for these activities are rare in the literature. The objective of the present study was to optimize the derivation of the volatile fraction of the oilresin of copaiba by vapor extraction, its microencapsulation in Arabic gum by atomization and drying with a spray-dryer, and chemical, morphological and pharmacological evaluation (anti-inflammatory activity in vivo). The volatile fraction represented 4.5% of the oilresin, with beta-caryophyllene (70%) and alfa-humulene (8.7%) being its major constituents. The efficiency of the microencapsulation process of the volatile fraction in Arabic gum was on average 95%. The study of stability of the free and microencapsulated volatile fraction at the temperature of 25oC and 40oC in the presence of 50% humidity showed that beta-caryophyllene underwent oxidation, mainly generating caryophyllene oxide and, to a lesser extent, other oxygenated compounds. Microencapsulation of the volatile fraction minimized but did not prevent oxidation and loss of mass. The in vivo assays of pharmacological activity showed that the volatile fraction significantly inhibited the acute inflammatory process induced by carrageenan or zymosan, with an ED50 of 32 mg/kg. The microencapsulated fraction inhibited the inflammatory response to the same extent as did the free volatile fraction, showing that the microencapsulation process did not alter the activity, a fact that permits its use as a pharmaceutical or intermediate form in the preparation of other formulations. beta-Caryophyllene at the dose of 32 mg/kg inhibited the inflammatory response to the same extent as did the volatile fraction, a fact that permits us to attribute to this compound the anti-inflammatory activity observed.

A carqueja, Baccharis trimera (Less) DC (Asteraceae), é uma espécie vegetal de pequeno porte, característica de regiões tropicais muito utilizada na medicina popular como antiinflamatória, hipoglicemiante e em tratamento de problemas digestivos. Este trabalho tem por finalidade o estudo farmacognóstico, farmacológico e toxicológico de B. trimera. O extrato hidroetanólico a 70%, obtido por percolação, a partir da droga pulverizada, foi concentrado e liofilizado. O extrato foi fracionado com solventes de diferentes polaridades (clorofórmio, acetato de etila, etanol e etanol 50%). O perfil cromatográfico foi determinado para os extratos e as frações. A triagem fitoquímica da droga indicou a presença flavonóides, taninos, saponinas e óleos essenciais. O teor de flavonóides verificado na droga foi de 0,05%, no extrato bruto liofilizado, de 0,21%, no extrato liofilizado da \"resina\" (uma mistura viscosa, semi-sólida que ficava depositada no fundo do recipiente) 1,52%, na fração clorofórmica 1,17%, acetato de etila 0,40%, etanólica, 0,17% e etanólica 50%, de 0,10%. A avaliação da atividade antiúlcera do extrato bruto liofilizado e do extrato liofilizado da \"resina\" foi realizada através de indução aguda por etanol acidificado. O extrato bruto liofilizado, na dose de 400mg/kg, reduziu a área de lesão em 90%, 200mg/kg, em 87%, 100mg/kg, em 66% e o fármaco controle (lansoprazol), em 66%. O extrato liofilizado da \"resina\", administrado na dose de 400mg/kg, reduziu a área de lesão em 82%, 200mg/kg, em 82%, 100mg/kg, em 53% e o fármaco controle (lansoprazol), em 70% . A atividade antioxidante foi ensaiada com o extrato bruto liofilizado, com o extrato liofilizado da \"resina\", com o pó da droga e com as frações clorofórmica, acetato de etila, etanol e etanol 50% através do método que reduz o radical 2,2\'-difenil-1-picril-hidrazil (DPPH), permitindo após o equilíbrio da reação, calcular a concentração de antioxidante gasta para reduzir 50% do DPPH, apresentando resultado evidente, comparado à vitamina E. A toxicidade aguda foi avaliada através da administração oral do extrato em dose única de 5g/kg, a camundongos. Após a observação de 14 dias não foi verificada alteração aparente. / This search aims the pharmacognostic, pharmacologic and toxicity study of Baccharis trimera (Less) DC (Asteraceae), a medicinal Brazilian plant well-known by carqueja. Natural from tropical regions, it is a small plant widely used as home-made medicine as anti-inflammatory, hypoglycemiant and for the treatment of digestive problems. The 70% hydroethanolic extract, obtained from the pulverized drug through percolation, was concentrated and lyophilized. The extract was fractioned by using solvents from different polarities (chloroform, ethyl acetate, ethanol and ethanol 50%). The chromatographic fingerprint was determined for the extracts and the fractions. The phytochemical investigation indicated the presence of flavanoids, saponins and essential oils. The content of flavanoids in the drug reached 0,05%, in the lyophilized extract: 0,21%, in the lyophilized resin (portion which during the extracts concentration was settled at the bottom of the recipient, showing a viscous and clammy aspects), reached 1,52%, in the chloroform fraction reached 1,17%, ethyl acetate: 0,40%, ethanolic fraction: 0,17% and ethanolic 50%: 0,10%. The evaluation of the antiulcer activity of the extract and the resin was accomplished through the acute induction by acidified ethanol. The lyophilized extract, at a dose of 400mg/kg, reduced the lesion area at 90%; 200mg/kg, at 87%; 100mg/kg, at 66%; and the control (lansoprazol) at 66%. The resin administered at the 400mg/kg dose reduced the lesion area at 82%; 200mg/kg, at 82%, 100mg/kg, at 53% and the control (lansoprazol), at 70%. The antioxidant activity of the lyophilized extract, of the resin, of the powdered drug, of the chloroform, ethyl acetate, ethanol and 50% ethanol fractions was tested following the method which reduces the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH) radical, permitting after the reaction balance, to calculate the amount of antioxidant spent to reduce 50% of the DPPH. The result was meaningful, when compared with the vitamin E result. The acute toxicity was evaluated after administration of the extract to mice at a 5g/kg single oral dose. No apparent alteration was confirmed after 14 days.

O estudo de determinada espécie vegetal com fins medicinais é uma tarefa multidisciplinar que envolve a realização de pesquisas físicas, químicas e biológicas. Neste contexto, estudos farmacológicos e toxicológicos possuem papel de destaque pois permitem avaliar parâmetros como segurança e eficácia do medicamento, essenciais para o paciente e necessários para o registro aos órgãos reguladores. Lychnophora ericoides (arnica da serra), uma espécie endêmica no Brasil, é amplamente utilizada pela medicina tradicional para o tratamento de dor e inflamação. Por outro lado, a espécie carece de estudos para comprovar sua segurança e propriedades terapêuticas. Assim, os objetivos deste trabalho são: realizar ensaios farmacológicos in vivo para avaliar as propriedades analgésica (modelo da contorção abdominal induzida por ácido acético em camundongos e teste da formalina em ratos), antiinflamatória (edema de pata induzido por carragenina em ratos) e antipirética (febre induzida por LPS em ratos) de frações polares de L. ericoides e do ácido clorogênico (CGA, ácido 5-cafeoilquínico); avaliar o efeito de metabólitos secundários de L. ericoides sobre a síntese de mediadores inflamatórios produzidos por células U-937 cultivadas in vitro; e estudar o metabolismo oxidativo destes metabólitos em reações catalisadas por metaloporfirinas sintéticas (sistema biomimético do citocromo P450) e por mitocôndrias isoladas de fígado de ratos. Os resultados obtidos nos ensaios farmacológicos mostram que as propriedades farmacológicas do vegetal estão distribuídas em partes distintas da planta. Enquanto as raízes são predominantemente analgésicas, as folhas são tanto analgésicas como antiinflamatórias. Ainda, o ACG possui propriedades tanto analgésica como antiinflamatória, mas não antipirética. Quanto ao efeito dos metabólitos secundários sobre a produção de mediadores inflamatórios, observa-se que a vicenina-2 (VIC-2) é capaz de reduzir significativamente o mediador prostaglandina E2 (PGE2). Este efeito da VIC-2 sobre a PGE2 não decorre da inibição da transcrição/tradução da enzima cicloxigenase-2 e também não decorre da inibição direta da atividade catalítica da enzima. Baixas concentrações do ácido 3,5-dicafeoilquínico e do ácido 4,5-dicafeoilquínico possuem efeito moderado sobre a produção de PGE2, enquanto altas doses levam a um aumento da produção do mediador. Além disso, os ácidos dicafeoilquínicos mencionados e o ácido 3,4,5-tricafeoilquínico são capazes de inibir significativamente a produção da proteína quimioatraente de monócitos-3 (MCP-3), envolvida na migração de células imunes para o foco inflamatório. O ACG é capaz de inibir algumas citocinas, como o fator de necrose tumoral-alfa, interleucina-6 e MCP-3. Por outro lado, seu metabólito oxidado majoritário OX-ACG, obtido nas reações biomiméticas com metaloporfirna, é inativo ou fracamente ativo sobre estes mediadores. Os resultados do metabolismo oxidativo do ACG por metaloporfirinas sintéticas mostram a formação de 3 metabólitos: hidroxilado, dicarbonilado e carbonilado (OX-ACG), sendo o último produzido majoritariamente neste sistema biomimético. O mesmo padrão de oxidação foi verificado nas reações de metabolismo oxidativo dos ácidos dicafeoilquínicos. Por fim, o único metabólito oxidado do ACG produzido por mitocôndrias de fígado de ratos corresponde ao metabólito carbonilado majoritário OX-ACG obtido das reações com metaloporfirina. / The scientific study of medicinal plants is a multidisciplinary task and involves many fields of knowledge such as physics, chemistry and biology. In this context, pharmacological and toxicological studies play an important role since they allow evaluating parameters such as safety and efficacy. These parameters have to be well established, being essential for the patient?s safety and mandatory for the regulatory agencies. Lychnophora ericoides (arnica da serra), an endemic plant from Brazil, is widely used in traditional medicine to treat pain and inflammation. On the other hand, the species still lacks solid information on its safety and therapeutic properties. Therefore, the goals of this study are: to perform in vivo pharmacological assays (acetic acid-induced writhing test in mice, formalin pain in rats, carrageenan-induced rat paw edema, LPS-induced fever in rats) with polar fractions from L. ericoides and also chlorogenic acid (CGA, 5-caffeoylquinic acid); to evaluate the effect of secondary metabolites from L. ericoides on the synthesis of inflammatory mediators produced by in vitro cultured U-937 cells; to study the oxidative metabolism of the metabolites aforementioned catalyzed by synthetic metalloporphyrin (cytochrome P450 biomimetic system) and also by rat liver mitochondria. The results obtained in the pharmacological assays show that the analgesic and anti-inflammatory activities are distributed in distinct parts of the plant. Whereas the roots are predominantly analgesic, the leaves are both analgesic and anti-inflammatory. Also, CGA present both analgesic and anti-inflammatory activities but no antipyretic activity. When it comes to the effect of the secondary metabolites on the production of inflammatory mediators, vicenin-2 (VIC-2) is able to significantly inhibit PGE2 in a dose-dependent fashion. The effect exerted by VIC-2 on PGE2 is due neither to its inhibition on the synthesis of cycloxigenase-2 nor on the direct inhibition of the catalytic activity of the enzyme. Lower concentrations of 3,5-dicaffeoylquinic and 4,5-dicaffeoylquinic acids present a slight inhibitory effect on PGE2 synthesis; however, increasing doses stimulate the production of the mediator. In addition, the dicaffeoylquinic acids and the 3,4,5-tricaffeoylquinic acid are able to significantly inhibit the production of the chemokine monocyte chemoattractant protein-3 (MCP-3), involved in the migration of immune cells to the inflammatory site. CGA is able to inhibit some of the evaluated cytokines, such as tumor necrosis factor alpha, interleukin-6 and MCP-3. On the other hand, the major oxidized metabolite from CGA (OX-CGA) obtained from the metalloporphyrin biomimetic reactions is inactive or weakly active on the production of such cytokines. The results obtained in the metalloporphyrin-catalyzed oxidation reactions of CGA show the formation of 3 metabolites: hydroxylated, dicarbonylated and carbonylated (OX-CGA), the last being the major compound obtained in this biomimetic system. The same oxidation pattern is observed in the biomimetic oxidation of the dicaffeoylquinic acids. Finally, the single CGA oxidized metabolite produced by rat liver mitochondria corresponds to the carbonylated metabolite OX-CGA obtained in the metalloporphyrin reactions.

A carqueja, Baccharis trimera (Less) DC (Asteraceae), é uma espécie vegetal de pequeno porte, característica de regiões tropicais muito utilizada na medicina popular como antiinflamatória, hipoglicemiante e em tratamento de problemas digestivos. Este trabalho tem por finalidade o estudo farmacognóstico, farmacológico e toxicológico de B. trimera. O extrato hidroetanólico a 70%, obtido por percolação, a partir da droga pulverizada, foi concentrado e liofilizado. O extrato foi fracionado com solventes de diferentes polaridades (clorofórmio, acetato de etila, etanol e etanol 50%). O perfil cromatográfico foi determinado para os extratos e as frações. A triagem fitoquímica da droga indicou a presença flavonóides, taninos, saponinas e óleos essenciais. O teor de flavonóides verificado na droga foi de 0,05%, no extrato bruto liofilizado, de 0,21%, no extrato liofilizado da \"resina\" (uma mistura viscosa, semi-sólida que ficava depositada no fundo do recipiente) 1,52%, na fração clorofórmica 1,17%, acetato de etila 0,40%, etanólica, 0,17% e etanólica 50%, de 0,10%. A avaliação da atividade antiúlcera do extrato bruto liofilizado e do extrato liofilizado da \"resina\" foi realizada através de indução aguda por etanol acidificado. O extrato bruto liofilizado, na dose de 400mg/kg, reduziu a área de lesão em 90%, 200mg/kg, em 87%, 100mg/kg, em 66% e o fármaco controle (lansoprazol), em 66%. O extrato liofilizado da \"resina\", administrado na dose de 400mg/kg, reduziu a área de lesão em 82%, 200mg/kg, em 82%, 100mg/kg, em 53% e o fármaco controle (lansoprazol), em 70% . A atividade antioxidante foi ensaiada com o extrato bruto liofilizado, com o extrato liofilizado da \"resina\", com o pó da droga e com as frações clorofórmica, acetato de etila, etanol e etanol 50% através do método que reduz o radical 2,2\'-difenil-1-picril-hidrazil (DPPH), permitindo após o equilíbrio da reação, calcular a concentração de antioxidante gasta para reduzir 50% do DPPH, apresentando resultado evidente, comparado à vitamina E. A toxicidade aguda foi avaliada através da administração oral do extrato em dose única de 5g/kg, a camundongos. Após a observação de 14 dias não foi verificada alteração aparente. / This search aims the pharmacognostic, pharmacologic and toxicity study of Baccharis trimera (Less) DC (Asteraceae), a medicinal Brazilian plant well-known by carqueja. Natural from tropical regions, it is a small plant widely used as home-made medicine as anti-inflammatory, hypoglycemiant and for the treatment of digestive problems. The 70% hydroethanolic extract, obtained from the pulverized drug through percolation, was concentrated and lyophilized. The extract was fractioned by using solvents from different polarities (chloroform, ethyl acetate, ethanol and ethanol 50%). The chromatographic fingerprint was determined for the extracts and the fractions. The phytochemical investigation indicated the presence of flavanoids, saponins and essential oils. The content of flavanoids in the drug reached 0,05%, in the lyophilized extract: 0,21%, in the lyophilized resin (portion which during the extracts concentration was settled at the bottom of the recipient, showing a viscous and clammy aspects), reached 1,52%, in the chloroform fraction reached 1,17%, ethyl acetate: 0,40%, ethanolic fraction: 0,17% and ethanolic 50%: 0,10%. The evaluation of the antiulcer activity of the extract and the resin was accomplished through the acute induction by acidified ethanol. The lyophilized extract, at a dose of 400mg/kg, reduced the lesion area at 90%; 200mg/kg, at 87%; 100mg/kg, at 66%; and the control (lansoprazol) at 66%. The resin administered at the 400mg/kg dose reduced the lesion area at 82%; 200mg/kg, at 82%, 100mg/kg, at 53% and the control (lansoprazol), at 70%. The antioxidant activity of the lyophilized extract, of the resin, of the powdered drug, of the chloroform, ethyl acetate, ethanol and 50% ethanol fractions was tested following the method which reduces the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH) radical, permitting after the reaction balance, to calculate the amount of antioxidant spent to reduce 50% of the DPPH. The result was meaningful, when compared with the vitamin E result. The acute toxicity was evaluated after administration of the extract to mice at a 5g/kg single oral dose. No apparent alteration was confirmed after 14 days.

O estudo de determinada espécie vegetal com fins medicinais é uma tarefa multidisciplinar que envolve a realização de pesquisas físicas, químicas e biológicas. Neste contexto, estudos farmacológicos e toxicológicos possuem papel de destaque pois permitem avaliar parâmetros como segurança e eficácia do medicamento, essenciais para o paciente e necessários para o registro aos órgãos reguladores. Lychnophora ericoides (arnica da serra), uma espécie endêmica no Brasil, é amplamente utilizada pela medicina tradicional para o tratamento de dor e inflamação. Por outro lado, a espécie carece de estudos para comprovar sua segurança e propriedades terapêuticas. Assim, os objetivos deste trabalho são: realizar ensaios farmacológicos in vivo para avaliar as propriedades analgésica (modelo da contorção abdominal induzida por ácido acético em camundongos e teste da formalina em ratos), antiinflamatória (edema de pata induzido por carragenina em ratos) e antipirética (febre induzida por LPS em ratos) de frações polares de L. ericoides e do ácido clorogênico (CGA, ácido 5-cafeoilquínico); avaliar o efeito de metabólitos secundários de L. ericoides sobre a síntese de mediadores inflamatórios produzidos por células U-937 cultivadas in vitro; e estudar o metabolismo oxidativo destes metabólitos em reações catalisadas por metaloporfirinas sintéticas (sistema biomimético do citocromo P450) e por mitocôndrias isoladas de fígado de ratos. Os resultados obtidos nos ensaios farmacológicos mostram que as propriedades farmacológicas do vegetal estão distribuídas em partes distintas da planta. Enquanto as raízes são predominantemente analgésicas, as folhas são tanto analgésicas como antiinflamatórias. Ainda, o ACG possui propriedades tanto analgésica como antiinflamatória, mas não antipirética. Quanto ao efeito dos metabólitos secundários sobre a produção de mediadores inflamatórios, observa-se que a vicenina-2 (VIC-2) é capaz de reduzir significativamente o mediador prostaglandina E2 (PGE2). Este efeito da VIC-2 sobre a PGE2 não decorre da inibição da transcrição/tradução da enzima cicloxigenase-2 e também não decorre da inibição direta da atividade catalítica da enzima. Baixas concentrações do ácido 3,5-dicafeoilquínico e do ácido 4,5-dicafeoilquínico possuem efeito moderado sobre a produção de PGE2, enquanto altas doses levam a um aumento da produção do mediador. Além disso, os ácidos dicafeoilquínicos mencionados e o ácido 3,4,5-tricafeoilquínico são capazes de inibir significativamente a produção da proteína quimioatraente de monócitos-3 (MCP-3), envolvida na migração de células imunes para o foco inflamatório. O ACG é capaz de inibir algumas citocinas, como o fator de necrose tumoral-alfa, interleucina-6 e MCP-3. Por outro lado, seu metabólito oxidado majoritário OX-ACG, obtido nas reações biomiméticas com metaloporfirna, é inativo ou fracamente ativo sobre estes mediadores. Os resultados do metabolismo oxidativo do ACG por metaloporfirinas sintéticas mostram a formação de 3 metabólitos: hidroxilado, dicarbonilado e carbonilado (OX-ACG), sendo o último produzido majoritariamente neste sistema biomimético. O mesmo padrão de oxidação foi verificado nas reações de metabolismo oxidativo dos ácidos dicafeoilquínicos. Por fim, o único metabólito oxidado do ACG produzido por mitocôndrias de fígado de ratos corresponde ao metabólito carbonilado majoritário OX-ACG obtido das reações com metaloporfirina. / The scientific study of medicinal plants is a multidisciplinary task and involves many fields of knowledge such as physics, chemistry and biology. In this context, pharmacological and toxicological studies play an important role since they allow evaluating parameters such as safety and efficacy. These parameters have to be well established, being essential for the patient?s safety and mandatory for the regulatory agencies. Lychnophora ericoides (arnica da serra), an endemic plant from Brazil, is widely used in traditional medicine to treat pain and inflammation. On the other hand, the species still lacks solid information on its safety and therapeutic properties. Therefore, the goals of this study are: to perform in vivo pharmacological assays (acetic acid-induced writhing test in mice, formalin pain in rats, carrageenan-induced rat paw edema, LPS-induced fever in rats) with polar fractions from L. ericoides and also chlorogenic acid (CGA, 5-caffeoylquinic acid); to evaluate the effect of secondary metabolites from L. ericoides on the synthesis of inflammatory mediators produced by in vitro cultured U-937 cells; to study the oxidative metabolism of the metabolites aforementioned catalyzed by synthetic metalloporphyrin (cytochrome P450 biomimetic system) and also by rat liver mitochondria. The results obtained in the pharmacological assays show that the analgesic and anti-inflammatory activities are distributed in distinct parts of the plant. Whereas the roots are predominantly analgesic, the leaves are both analgesic and anti-inflammatory. Also, CGA present both analgesic and anti-inflammatory activities but no antipyretic activity. When it comes to the effect of the secondary metabolites on the production of inflammatory mediators, vicenin-2 (VIC-2) is able to significantly inhibit PGE2 in a dose-dependent fashion. The effect exerted by VIC-2 on PGE2 is due neither to its inhibition on the synthesis of cycloxigenase-2 nor on the direct inhibition of the catalytic activity of the enzyme. Lower concentrations of 3,5-dicaffeoylquinic and 4,5-dicaffeoylquinic acids present a slight inhibitory effect on PGE2 synthesis; however, increasing doses stimulate the production of the mediator. In addition, the dicaffeoylquinic acids and the 3,4,5-tricaffeoylquinic acid are able to significantly inhibit the production of the chemokine monocyte chemoattractant protein-3 (MCP-3), involved in the migration of immune cells to the inflammatory site. CGA is able to inhibit some of the evaluated cytokines, such as tumor necrosis factor alpha, interleukin-6 and MCP-3. On the other hand, the major oxidized metabolite from CGA (OX-CGA) obtained from the metalloporphyrin biomimetic reactions is inactive or weakly active on the production of such cytokines. The results obtained in the metalloporphyrin-catalyzed oxidation reactions of CGA show the formation of 3 metabolites: hydroxylated, dicarbonylated and carbonylated (OX-CGA), the last being the major compound obtained in this biomimetic system. The same oxidation pattern is observed in the biomimetic oxidation of the dicaffeoylquinic acids. Finally, the single CGA oxidized metabolite produced by rat liver mitochondria corresponds to the carbonylated metabolite OX-CGA obtained in the metalloporphyrin reactions.

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No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO COMPLETA ERICA SILVA BIANCHETTI.pdf: 401322 bytes, checksum: d859a5d12a9b16ecd28ee0fecfa86d09 (MD5) Previous issue date: 2006-06-01 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientifico e Tecnologico / Etoricoxib is a new medicine expected to lead the next generation of selective inhibitors of COX-2 Presently the focus of many clinical assays it is a potent fast-action second generation coxib and the most selective of all The purpose of this study was to evaluate the interference of different nutritional diets in the anti-inflammatory and analgesic actions of etoricoxib and also the interactions of this NSAID plus different diets and their gastric and hematological side effects The following assays were carried out a) paw edema induced by carrageenin b) granuloma test c) dermatitis induced by croton oil d) vascular permeability in rats e) writhing test in mice f) formalin test g) gastric ulcers by stress and h) evaluation of the hematological parameters after sub-chronic treatment With regard to edema by carrageenin the etoricoxib-treated group showed a maximum peak of edema 49.04% (1.061 +- 0.1886) the other groups showed the following percentages of inhibiton etoricoxib + hyperproteic diet 30.2% (1.4537 +- 0.0955) etoricoxib + hyperlipidic diet 35.96% (64.04 +- 0.0578) etoricoxib + hyperglicidic diet 35.35% (1.346 +-0.0423) etoricoxib + standardized diet 33% (1.2968+-0.047) all of them in relation to the control group (2.0825+-0.1886) and the results were statistically significant (p < 0.01) However when the groups treated with etoricoxib associated to different diets were compared there was no statistically significant difference In the granuloma test the daily oral administration of 1 mg/kg of etoricoxib during 6 days significantly (p < 0.01) inhibited the formation of granulomatous tissue 57.02% (153.2 +- 21.908) the other groups showed the following percentages of inhibition etoricoxib + hyperlipidic diet 59% (144.98 +- 9.632) etoricoxib + hyperproteic diet 47.5% (185.575 +- 26.043) etoricoxib + hyperglicidic diet 38.5% (217.4 +- 21.318) etoricoxib + standardized diet 47.13% (166.583 2 +- 2.229) all of them in relation to the control group (353.475 +- 37.692) In the croton oil-induced dermatitis the edema of the control group had 10.33 mg The treatment with etoricoxib (1 mg/kg) associated with different nutritional diets showed inhibition of the edema but not significantly when compared to the control group The inhibition percentages were etoricoxib-treated group 7.86% (9.525 +- 1.345) etoricoxib + hyperproteic diet 31.43% (7.0875 +- 1.160) etoricoxib + hyperlipidic diet 35.6% (6.6625 +- 1.523) etoricoxib + hyperglicidic diet 39.5% (6.2571 +- 1.362) etoricoxib + standardized diet 30.7% (7.1875 +- 1.130) *p < 0.05 (Student s t test) when compared to the control group (10.3375 +- 1.462) In the vascular permeability by histamine etoricoxib (1 mg/kg) etoricoxib + hyperproteic diet etoricoxib + hyperlipidic diet etoricoxib + hyperglicidic diet and etoricoxib + standardized diet exhibited the following inhibition percentages 5.29% -31.4% -31.3% 4.05% and 15.82 respectively These results were not significant when compared to the control group (527.862 +- 66.869) In the writhing test the administration of etoricoxib (1mg/kg) inhibited the algogenic process in 9.32% (49.86 +- 4.166) When associated with different nutritional diets the inhibition percentages were hyperproteic diet 29.27% (38.9 +- 6.166) hyperlipidic diet 11.36% (48.75 +- 5.384) hyperglicidic diet 9.81% (49.6 +- 6.775) standardized diet -7.3% (59 +- 4.946) In the formalin test both in the acute and late phase all the treatments caused significant (p < 0.05) inhibitions of the hyperalgesic process etoricoxib (1mg/kg) 47.74% (62.71 +- 8.462) etoricoxib + hyperproteic diet 74.64% (30.428 +- 5.163) etoricoxib + hyperglicidic diet 68.61% (37.67 +- 5.308) etoricoxib + hyperlipidic diet 46.46% (64.25 +- 5.662) etoricoxib + standardized diet 68.2% (38.17 +- 5.528) when compared to the control group (120 +- 5.021) In the late phase the percentages of inhibition were 84.4% (10.142 +- 2.98) for etoricoxib 82.65% (11.28 +- 2.705) for etoricoxib + hyperproteic diet 66.16% (22 +- 11.781) for etoricoxib + hyperlipidic diet 98.72% (0.18 +- 0.0) for etoricoxib + hyperglicidic diet and 99.74% (0.16 +- 0.1667) for etoricoxib + standardized diet in comparison with the control group (65 +- 4.167) In the test of stress-induced ulcer the animals treated with etoricoxib (1mg/kg) + standardized diet showed the highest lesion index when compared to the other groups The lowest lesion index was shown by the group treated with etoricoxib + hyperlipidic diet whose significance was p < 0.01 (Student s t test) when compared to the control group The hematological parameters in the groups treated with etoricoxib (1mg/kg) + hyperlipidic diet (19.637 +- 3.879) and etoricoxib + hyperglicidic diet (19.3 +- 4.562) showed statistically significant differences in the hematocrit (HCT) in relation to the group treated only with etoricoxib (40.5375 +- 2.410) for p < 0.01 (Student s t test) There was a significant difference in the group treated with etoricoxib + hyperglicidic diet (8.9 +- 1.940) in relation to the group treated with etoricoxib (19.9 +- 2.134) (Student s t test) In the erythrocyte dosage the group etoricoxib + hyperglicidic diet (3.82125 +- 0.893) showed a significant difference when compared to the group treated with etoricoxib (9.4037 +- 1.027) (p < 0.01 Student s t test) No statistically significant differences were observed in the other hematological parameters The evaluation of the ponderal development of the animals treated with etoricoxib (1mg/kg) and etoricoxib assiciated with different kinds of nutritional diets showed no significant differences between the treated and control groups however the group treated with etoricoxib + hyperglicidic diet revealed lower ponderal development than the other groups With regard to diuresis there were variations in all the groups For water and feed consumption variations were practically similar in all the experimental groups The weight of the organs from different groups of animals treated with etoricoxib (1mg/kg) and etoricoxib associated with different nutritional diets showed no significant differences when compared to the control group The mean weight of the organs are within the normal parameters for rats The results suggest that a) the association of etoricoxib to different kinds of diets did not change the anti-inflammatory effect in the present assays b) the association of different types of diets potentialized the analgesic effect mainly when associated to hyperproteic diet for peripheral pain and hyperglicidic diet for central pain c) the association of etoricoxib to hyperglicidic diet decreases the gastric lesion index d) the use of etoricoxib alone did not interfere with the hematological parameters e) the association of etoricoxib to hyperglicidic diet interfered with the hemoglobin and erythrocyte index f) the treatment of the sub-chronic phase (30 days) with etoricoxib alone and etoricoxib associated to different nutritional diets caused no changes on the ponderal development diuresis and water and feed consumption / O etoricoxib (Arcóxia®) um medicamento novo posicionado para liderar a próxima geração de inibidores seletivos de COX-2 é um coxib de segunda geração potente e de ação rápida sendo motivo atualmente de muitos ensaios clínicos É o mais seletivo de COX-2 de todos os coxibs O objetivo deste estudo foi estudar em modelos in vivo a interferência sobre a atividade antiinflamatória e analgésica do etoricoxib antiinflamatório inibidor seletivo de COX-2 associado a diferentes tipos de dietas nutricionais observando as possíveis interações entre este AINE com as dietas empregadas e observar possíveis efeitos adversos ao nível gástrico e hematológico com o uso da associação do etoricoxib com as dietas nutricionais Para tanto foram utilizados os seguintes ensaios a) edema de pata por carragenina b) teste do granuloma c) dermatite induzida por óleo de croton d) permeabilidade vascular em ratos e) contorções em camundongos f) teste da formalina g) úlcera por estresse e h) avaliação dos parâmetros hematológicos após tratamento sub-crônico No edema por carragenina o grupo tratado com etoricoxib produziu inibição no pico máximo do edema de 49,04% (1.061 +- 0.1886) no tratado com etoricoxib + dieta hiperprotéica a inibição foi de 30,2% (1.4537 +- 0.0955) no tratado com etoricoxib + dieta hiperlipídica a inibição foi de 35,96% (64.04 +- 0.0578) no tratado com etoricoxib + dieta hiperglicidica a inibição foi de 35,36% (1.346 +- 0.0423) e no grupo tratado com etoricoxib + dieta padrão a inibição foi de 33% (1.3968 +- 0.047) todos em relação ao grupo controle (2.0825 +- 0.1886) apresentando resultados significativos estatisticamente (p < 0,01) Entretanto quando comparados entre si os grupos tratados com etoricoxib associado às diferentes dietas não houve diferença estatística significativa No teste do granuloma a administração diária de 1 mg/kg/v.o de etoricoxib durante 6 dias inibiu de forma significativa a formação do tecido granulomatoso (p < 0,01) em 57,02% (153.2 +- 21.908) e 59% (144.98 +- 9.632) pelo grupo tratado com etoricoxib + dieta hiperlipídica respectivamente no grupo tratado com etoricoxib + dieta hiperprotéica a inibição foi de 47,5% (185.575 +- 26.043) no tratado com etoricoxib + dieta hiperglicídica a inibição foi de 38,5% (217.4 +- 21.318) e no tratado com etoricoxib + dieta padrão foi 47,13% (166.583 2 +- 2.229) todas em relação ao grupo controle (353.475 +- 37.692) Na dermatite por óleo de cróton o edema no grupo controle foi de 10,33 mg Neste experimento observou-se que o tratamento dos animais com etoricoxib (1mg/kg) associado aos diferentes tipos de dietas nutricionais apresentou inibição do processo edematogênico mas não de forma significativa quando comparado com o grupo controle Para o grupo tratado com etoricoxib a inibição foi de 7,86% (9.525 +- 1.354) etoricoxib + dieta hiperprotéica foi de 31,43% (7.0875 +- 1.160) etoricoxib + dieta hiperlipídica foi de 35,6% (6.6625 +- 1.523) etoricoxib + dieta hiperglicídica foi de 39,5% (6.2571 +- 1.362) e etoricoxib + dieta padrão foi de 30.7% (7.1875 +- 1.130) *p < 0.05 ( teste t de Student) quando comparado ao grupo controle (10.3375 +- 1.462) Na permeabilidade vascular por histamina o etoricoxib (1mg/kg) etoricoxib + dieta hiperprotéica etoricoxib + dieta hiperlipídica etoricoxib + dieta hiperglicídica e etoricoxib + dieta padrão apresentaram inibições de 5,29% -18.4% -31.3% 4,05% e 15,82% respectivamente não sendo significativas quando comparados ao grupo controle (527.862 +- 66.869) No teste de contorções a administração de etoricoxib (1mg/kg) produziu 9,32% (49.86 +- 4.166) de inibição do processo algogênico e quando associado as diferentes dietas nutricionais a inibição foi de dieta hiperprotéica 29,27% (38.9 +- 6.166) dieta hiperlipídica 11,36% (48.75 +- 5.384) hiperglicídica 9,81% (49.6 +- 6.775) e dieta padrão 7,3% (59 +- 4.946) No teste da formalina tanto na fase aguda quanto na fase tardia todos os tratamentos produziram inibições significativas do processo hiperalgésico (p < 0.05) cujas percentagens de inibições foram de 47,74% para etoricoxib (1mg/kg) (62.71 +- 8.462) 74,64% para etoricoxib (1mg/kg) + dieta hiperprotéica (30.428 +- 5.163) 68,61% para etoricoxib (1mg/kg) + dieta hiperglicídica (37.67 +- 5.308) 46,46% para etoricoxib (1mg/kg) + dieta hiperlipídica (64.25 +- 5.662) e 68,2% para etoricoxib (1mg/kg) + dieta padrão (38.17 +- 5.528) quando comparados ao grupo controle (120 +- 5.021) Na fase tardia as percentagens de inibições foram de 84,4% (10.142 +- 2.98) para etoricoxib 82,65% (11.28 +- 2.705) para etoricoxib + dieta hiperprotéica 66,16% (22 +- 11.781) para etoricoxib + dieta hiperlipídica 98,72% (0,18 +- 0.0) para etoricoxib + dieta hiperglicídica e 99,74% (0.16 +- 0.1667) para etoricoxib + dieta padrão em comparação com o grupo controle (65 +- 4.167) No teste de úlcera por estresse observou-se que o tratamento dos animais com etoricoxib (1mg/kg) + dieta padrão foi o grupo que apresentou maior índice de lesão comparado aos outros grupos de tratamentos Já o grupo tratado com etoricoxib (1mg/kg) + dieta hiperglicídica foi o que apresentou menor índice de lesão cuja significância quando comparado ao grupo controle foi de p < 0.01 (teste t de Student) Os parâmetros hematológicos nos grupos tratados com etoricoxib (1mg/kg) + dieta hiperlipídica (19.637 +- 3.879) e etoricoxib + dieta hiperglicídica (19.3 +- 4.562) apresentaram diferenças estatisticamente significativas para o hematócrito (HCT) em relação ao grupo tratado apenas com etoricoxib (40.5375 +- 2.410) para p < 0.01 (teste t de student) Quanto à hemoglobina (HGB) foi significativa a diferença para o grupo tratado com etoricoxib + dieta hiperglicídica (8.9 +- 1.940) em relação ao grupo tratado com etoricoxib (19.9 +- 2.134) (p < 0.05, teste t de Student) Na dosagem de hemácias o grupo etoricoxib + dieta hiperglicídica (3.82125+- 0.893) apresentou diferença significativa quando comparada com o grupo tratado com etoricoxib (9.4037 +- 1.027) (p < 0.01, teste t de Student) Em relação aos outros parâmetros hematológicos não foram observadas diferenças significativas estatisticamente Na avaliação do desenvolvimento ponderal dos animais tratados com etoricoxib (1mg/kg) e etoricoxib associado aos diferentes tipos de dietas nutricionais não foram observadas diferenças significativas entre os grupos tratados e o controle entretanto o grupo tratado com etoricoxib + dieta hiperglicidica apresentou desenvolvimento ponderal menor que os outros grupos Em relação à diurese pôde-se observar ocorrência de variações em todos os grupos Para os consumos de água e ração houve variações praticamente semelhantes em todos os grupos experimentais Quanto ao peso dos órgãos dos diferentes grupos de animais tratados com etoricoxib (1mg/kg) e etoricoxib associado a diferentes dietas nutricionais não apresentaram diferenças significativas quando comparados ao grupo controle O peso médio dos órgãos encontram-se dentro dos parâmetros normais para a espécie animal (ratos) A partir dos resultados obtidos pode-se sugerir que a) A associação do etoricoxib aos diferentes tipos de dietas empregadas não alterou o efeito antiinflamatório nos ensaios empregados b) A associação do etoricoxib aos diferentes tipos de dietas empregadas potencializou o efeito analgésico principalmente quando associado à dieta hiperprotéica para dor periférica e dieta hiperglicídica para dor central c) A associação do etoricoxib à dieta hiperglicídica diminui o índice de lesão gástrica d) O tratamento com etoricoxib isolado não interferiu sobre os parâmetros hematológicos avaliados e) A associação do etoricoxib à dieta hiperglicídica provocou interferência sobre a taxa de hemoglobina e hemácias f) O tratamento em fase sub-crônica (30 dias) com etoricoxib e etoricoxib associado às diferentes dietas nutricionais não produziu alterações sobre o desenvolvimento ponderal diurese consumo de água e ração

Made available in DSpace on 2016-05-02T13:55:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Lucimari Romana Dipe de Faria.pdf: 314985 bytes, checksum: e1af9bd84f61c9e4f4ae004b8e226bcb (MD5) Previous issue date: 2005-03-15 / Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de Nïvel Superior / The Rosmarinus officinalis L (rosemary) is widely used in popular medicine The objective of this paper was o study the essential oil of this species (ROEO) on inflammatory and hyperalgesic models in vivo in order to detect the possible involvement of its active principles on the inflammatory and algesic responses and analyze its ulcerogenic potential The following experimental models were used rat paw edema granuloma test vascular permeability ear erythema by croton oil writhing test in mouse formalin test hot plate and gastric ulcer by stress The yield of the essential oil extracted by hydrodestilation of the aerial parts from Rosmarinus officinalis was 1.4% With the oral administration in rats and mice of the doses (50 100 200 500 1000 2000 and 5000 mg/kg) it was not possible to determine the median lethal dose (LD50) With the oral doses of 50 100 200 and 300 mg/kg on the rat paw edema the ROEO produced dose-dependent effect of which the lineal correlation coefficient was r = 0.9986 (y = -13.93 + 0.30) and the median effective dose (ED50) was 212 mg/kg In the writhing test in mice the oral doses of ROEO 10 50 100 200 300 and 400 mg/kg produced dose-dependent effect with a correlation coefficient of r = 0.93095 (y = 30.54 + 0.073) and ED50 of 261 mg/kg The daily administration of ROEO (300 mg/kg, orally) for 6 days inhibited the granulomatous tissue formation in 59% (p <0.001 Student t test) In the ear erythema by croton oil the ROEO in the oral dose of 300 mg/kg provoked the significant inhibitory effect of 77% (p <0.05) In the vascular permeability test the oral treatment with ROEO antagonized the response to histamine thus inhibiting the vascular permeability in 50% (p <0.05, Student t test) The oral treatment with ROEO (300 mg/kg) inhibited phase I of the hyperalgesic process by formalin in 40% (p <0.05 Student t test) while phase II was inhibited in 48% In the hot plate test ROEO (300 mg/kg, orally) produced more latency times than basal times the difference however was not significant In the gastric ulcer trial the ROEO-treated group inhibited in 44% the number of gastric lesions by stress when compared with the control group The results suggest that ROEO shows antiinflammatory activity in both acute and chronic inflammatory processes exhibits analgesic activity and provokes little harmful interference on the gastric mucosa / O Rosmarinus officinalis L (alecrim) é muito utilizado na medicina popular Este trabalho teve como objetivo estudar o óleo essencial desta espécie (OERO) em modelos inflamatórios e hiperalgésicos in vivo a fim de detectar o possível envolvimento de seus princípios ativos na resposta inflamatória algésica e analisar o potencial ulcerogênico Para tanto foram utilizados os seguintes modelos experimentais edema de pata de rato teste do granuloma permeabilidade vascular eritema de orelha por óleo de croton teste de contorções em camundongos teste da formalina placa quente e úlcera gástrica por estresse O rendimento do óleo essencial extraído por hidrodestilação das partes aéreas de Rosmarinus officinalis foi de 1,4% Em ratos e camundongos com a administração das doses (50 100 200 500 1000 2000 e 5000 mg/kg) por via oral (v o) não foi possível determinar a dose letal média (DL50) Com as doses de 50 100 200 e 300 mg/kg v o sobre o edema de pata de rato o OERO produziu efeito dose-dependente cujo coeficiente de correlação linear obtido foi r = 0.9986 (y = -13,93 vezes + 0,30) e a DE50 determinada foi de 212 mg/kg No teste de contorções em camundongos as doses do OERO de 10 50 100 200 300 e 400 mg/kg v o produziram efeito dose-dependente com coeficiente de correlação de r = 0,93095 (y = 30,54 vezes + 0,073), e DE50 de 261 mg/kg A administração diária de 300 mg/kg v o do OERO durante 6 dias, inibiu a formação do tecido granulomatoso em 59% (p < 0,001, teste t de Student) No eritema de orelha por óleo de croton o OERO na dose de 300 mg/kg v o provocou efeito inibitório significativo de 77% (p < 0.05) No teste de permeabilidade vascular o tratamento por via oral com o OERO antagonizou a resposta à histamina inibindo a permeabilidade vascular em 50% (p < 0.05 teste t de Student) O tratamento com o OERO (300 mg/kg v o) produziu inibição de 40% (p < 0.05, teste t de Student) da fase I do processo hiperalgésico induzido por formalina enquanto a inibição da fase II foi de 48% No teste de placa quente o OERO (300 mg/kg v o) produziu tempos de latência maiores que os tempos basais Entretanto tal diferença não foi significativa No ensaio de úlcera gástrica o grupo tratado com o OERO inibiu em 44% o número de lesões gástricas por estresse quando comparado ao grupo controle A partir dos resultados obtidos sugere-se que o OERO apresenta atividade antiinflamatória sobre os processos inflamatórios agudo e crônico e atividade analgésica Entretanto provoca pouca interferência danosa sobre a mucosa gástrica

A doença periodontal é caracterizada por alterações inflamatórias, como vermelhidão e edema da margem gengival, sangramento provocado, alterações no contorno gengival e perda óssea alveolar. Evidências recentes sugerem que o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) pode ser um mediador importante na doença periodontal inflamatória. Portanto, este trabalho teve como objetivos avaliar durante a progressão da doença periodontal inflamatória induzida experimentalmente em ratos: 1) o efeito do meloxicam, inibidor preferencial da COX-2, na perda óssea alveolar; 2) a cinética de expressão de RNAm para COX-2, VEGF, VEGFR-1 e VEGFR-2; e 3) a cinética de expressão da proteína VEGF. Cento e vinte (120) ratos foram aleatoriamente divididos em: grupo 1 (sem tratamento com meloxicam) e grupo 2 (tratados com meloxicam). Ligaduras de fio de seda foram colocadas na margem gengival do primeiro molar inferior direito de todos os ratos. O grupo 2 foi tratado por 3, 7, 14 e 30 dias com meloxicam (3 mg/kg/dia, via intraperitoneal) e o grupo 1 foi usado como controle. As técnicas utilizadas para as análises foram: análise microscópica, RT-PCR, Western Blot e imunohistoquímica. Os resultados foram submetidos à análise de Correlação de Pearson, Análise de Variância (ANOVA), seguida do teste de Tukey, sendo adotado nível de significância de 5%. Observou-se, neste estudo, que o meloxicam foi efetivo em diminuir a perda óssea alveolar nos tecidos periodontais em todos os períodos de indução da doença periodontal. Experimentos de RT-PCR revelaram correlação positiva da cinética de expressão de RNAm para COX-2 e VEGF nos tecidos gengivais afetados pela doença periodontal inflamatória (R=0,80). A expressão de RNAm para VEGF na doença periodontal inflamatória, no período de 14 dias, diminuiu no grupo de animais tratados com meloxicam, mostrando diferença estatisticamente significativa quando comparado com os animais não tratados (p=0,023). Não houve diferença significativa na expressão de RNAm para os receptores VEGFR-1 e VEGFR-2 no tecido gengival em nenhum dos períodos de indução da doença periodontal. Nos experimentos de Western Blot houve tendência de menor expressão da proteína VEGF na doença periodontal inflamatória no período de 14 dias nos animais tratados com meloxicam (p=0,08). Em experimentos de imunohistoquímica foi detectado aumento da expressão da proteína VEGF nos tecidos afetados pela doença periodontal em todos os períodos estudados, bem como diminuição da expressão desta proteína nos tecidos periodontais dos animais tratados com meloxicam. Portanto, a análise conjunta dos dados sugere importante participação do VEGF na doença periodontal inflamatória induzida experimentalmente em ratos e o meloxicam, inibidor preferencial da COX-2, pode modificar a progressão da doença periodontal neste modelo experimental por diminuir a perda óssea e a expressão de VEGF. / Inflammatory periodontal disease is characterized by alveolar bone loss and inflammatory changes in the periodontal tissues, which become hemorrhagic and edematous. However, there is little information concerning the biologic mechanisms which may produce these changes. Vascular endothelial growth factor (VEGF) is a macromolecule of importance in inflammation. The aims of this study were to investigate the presence of VEGF during progression of periodontal disease, and to evaluate the effect of a preferential COX-2 inhibitor, meloxicam, on the alveolar bone loss and VEGF expression in experimentally induced periodontitis. One hundred and twenty (120) Wistar rats were randomly separated into two groups [group 1 (no treatment with meloxicam) and group 2 (treatment with meloxicam)]. Silk ligatures were placed at the gingival margin level of the lower right first molar of all rats. Group 2 was treated for 3, 7, 14 and 30 days with meloxicam (3 mg/kg/day, intraperitoneal) and the group 1 was used as control. The expression of VEGF was assessed by RT-PCR, Western Blot and immunohistochemical analysis. Alveolar bone loss was determined by microscopic analysis. The results were submitted to the analysis of Correlation Coefficient by Pearson, Analysis of Variance (ANOVA), and Tukey\'s post test (p<0.05). A reduction of the alveolar bone resorption was observed in the meloxicam treated group (2), as compared with the control group (1) in all periods studied. There was a positive correlation between COX- 2 mRNA and VEGF mRNA in the gingival tissue with periodontal disease (R=0.80). VEGF mRNA expression was significantly lower in rats treated with meloxiam after 14 days (p=0.023). No difference in the expression of VEGFR-1 mRNA and VEGFR-2 mRNA was observed for all the periods studied. VEGF protein expression was significantly higher in diseased sites as compared with healthy sites (p<0.05). After 14 days lower VEGF protein expression in rats treated with meloxicam was detected (p=0.08). Altogether these data suggest an important participation of VEGF in the progression of periodontal disease, and the systemic therapy with meloxicam, preferential COX-2 inhibitor, can modify the progression of experimentally induced periodontitis in rats by reducing the alveolar bone loss and the VEGF expression.

A doença periodontal é caracterizada por alterações inflamatórias, como vermelhidão e edema da margem gengival, sangramento provocado, alterações no contorno gengival e perda óssea alveolar. Evidências recentes sugerem que o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) pode ser um mediador importante na doença periodontal inflamatória. Portanto, este trabalho teve como objetivos avaliar durante a progressão da doença periodontal inflamatória induzida experimentalmente em ratos: 1) o efeito do meloxicam, inibidor preferencial da COX-2, na perda óssea alveolar; 2) a cinética de expressão de RNAm para COX-2, VEGF, VEGFR-1 e VEGFR-2; e 3) a cinética de expressão da proteína VEGF. Cento e vinte (120) ratos foram aleatoriamente divididos em: grupo 1 (sem tratamento com meloxicam) e grupo 2 (tratados com meloxicam). Ligaduras de fio de seda foram colocadas na margem gengival do primeiro molar inferior direito de todos os ratos. O grupo 2 foi tratado por 3, 7, 14 e 30 dias com meloxicam (3 mg/kg/dia, via intraperitoneal) e o grupo 1 foi usado como controle. As técnicas utilizadas para as análises foram: análise microscópica, RT-PCR, Western Blot e imunohistoquímica. Os resultados foram submetidos à análise de Correlação de Pearson, Análise de Variância (ANOVA), seguida do teste de Tukey, sendo adotado nível de significância de 5%. Observou-se, neste estudo, que o meloxicam foi efetivo em diminuir a perda óssea alveolar nos tecidos periodontais em todos os períodos de indução da doença periodontal. Experimentos de RT-PCR revelaram correlação positiva da cinética de expressão de RNAm para COX-2 e VEGF nos tecidos gengivais afetados pela doença periodontal inflamatória (R=0,80). A expressão de RNAm para VEGF na doença periodontal inflamatória, no período de 14 dias, diminuiu no grupo de animais tratados com meloxicam, mostrando diferença estatisticamente significativa quando comparado com os animais não tratados (p=0,023). Não houve diferença significativa na expressão de RNAm para os receptores VEGFR-1 e VEGFR-2 no tecido gengival em nenhum dos períodos de indução da doença periodontal. Nos experimentos de Western Blot houve tendência de menor expressão da proteína VEGF na doença periodontal inflamatória no período de 14 dias nos animais tratados com meloxicam (p=0,08). Em experimentos de imunohistoquímica foi detectado aumento da expressão da proteína VEGF nos tecidos afetados pela doença periodontal em todos os períodos estudados, bem como diminuição da expressão desta proteína nos tecidos periodontais dos animais tratados com meloxicam. Portanto, a análise conjunta dos dados sugere importante participação do VEGF na doença periodontal inflamatória induzida experimentalmente em ratos e o meloxicam, inibidor preferencial da COX-2, pode modificar a progressão da doença periodontal neste modelo experimental por diminuir a perda óssea e a expressão de VEGF. / Inflammatory periodontal disease is characterized by alveolar bone loss and inflammatory changes in the periodontal tissues, which become hemorrhagic and edematous. However, there is little information concerning the biologic mechanisms which may produce these changes. Vascular endothelial growth factor (VEGF) is a macromolecule of importance in inflammation. The aims of this study were to investigate the presence of VEGF during progression of periodontal disease, and to evaluate the effect of a preferential COX-2 inhibitor, meloxicam, on the alveolar bone loss and VEGF expression in experimentally induced periodontitis. One hundred and twenty (120) Wistar rats were randomly separated into two groups [group 1 (no treatment with meloxicam) and group 2 (treatment with meloxicam)]. Silk ligatures were placed at the gingival margin level of the lower right first molar of all rats. Group 2 was treated for 3, 7, 14 and 30 days with meloxicam (3 mg/kg/day, intraperitoneal) and the group 1 was used as control. The expression of VEGF was assessed by RT-PCR, Western Blot and immunohistochemical analysis. Alveolar bone loss was determined by microscopic analysis. The results were submitted to the analysis of Correlation Coefficient by Pearson, Analysis of Variance (ANOVA), and Tukey\'s post test (p<0.05). A reduction of the alveolar bone resorption was observed in the meloxicam treated group (2), as compared with the control group (1) in all periods studied. There was a positive correlation between COX- 2 mRNA and VEGF mRNA in the gingival tissue with periodontal disease (R=0.80). VEGF mRNA expression was significantly lower in rats treated with meloxiam after 14 days (p=0.023). No difference in the expression of VEGFR-1 mRNA and VEGFR-2 mRNA was observed for all the periods studied. VEGF protein expression was significantly higher in diseased sites as compared with healthy sites (p<0.05). After 14 days lower VEGF protein expression in rats treated with meloxicam was detected (p=0.08). Altogether these data suggest an important participation of VEGF in the progression of periodontal disease, and the systemic therapy with meloxicam, preferential COX-2 inhibitor, can modify the progression of experimentally induced periodontitis in rats by reducing the alveolar bone loss and the VEGF expression.

Os gliomas são tumores cerebrais intracraniais caracterizados pelo seu rápido crescimento e pela sua resistência à quimioterapia e radioterapia atuais. Assim, a procura por novos agentes terapêuticos com múltiplos mecanismos de ação têm identificado o ácido <font face=\"symbol\">g-linolênico (GLA), antiinflamatórios não esteroidais (AINEs) e compostos contendo rutênio como possíveis candidatos. Dessa forma, a principal proposta deste projeto foi entender melhor o mecanismo de ação dessas drogas sobre as células C6 de glioma de rato. Foram analisadas proteínas envolvidas no controle do ciclo celular, apoptose, angiogênese, invasão e migração através de RT-PCR e Western Blotting após tratamento in vitro e in vivo. Alterações da expressão de ciclina D1, E2F-1, pRb, p27, p21, p16, p65, c-myc, ERK1/2, nm23 e <font face=\"symbol\">b, MMP-2, Brevican GPI e Secretado, Tenascina-R, Tenascina-C, VEGF-A, Flt1, Flk1, Bax, PPAR<font face=\"symbol\">g, p53, COX-2, EP1, 2, 3 e 4, Ku70 e 80 foram encontradas. Em conclusão, o GLA e o complexo Rutênio-Ibuprofeno possuem múltiplos alvos que levam à inibição da proliferação celular. / Gliomas are intracranial tumors of cerebral origin characterized for its rapid growth and resistance to both conventional chemotherapy and radiotherapy. The search for new therapeutics agents with multiple mechanisms of action has identified <font face=\"symbol\">g-linolenic acid (GLA), nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) and ruthenium containing compounds as possible candidates. The aim of this study was to better know the mechanism of action of these drugs on C6 rat glioma cells. Expression of proteins involved in control of the cell cycle, apoptosis, angiogenesis, invasion and migration was analyzed using RT-PCR and Western Blotting methods after treatment in vitro and in vivo. Alterations in cyclin D1, E2F-1, pRb, p27, p21, p16, p65, c-myc, ERK1/2, nm23 e <font face=\"symbol\">b, MMP-2, GPI and Secreted Brevican, Tenascin-R, Tenascin-C, VEGF-A, Flt1, Flk1, Bax, PPAR<font face=\"symbol\">g, p53, COX-2, EP1, 2, 3 and 4, Ku70 and 80 expression were observed. In conclusion, GLA and Ruthenium-Ibuprofen complex has multiple target wich translate into the inhibition of proliferation.