Submitted by Napoleana Barros Martins (napoleana_martins@hotmail.com) on 2016-08-08T13:34:15Z No. of bitstreams: 1 Dissertação- Márcia Regina Pereira das Neves.pdf: 1414436 bytes, checksum: 0d8d84d35c876b0040aa1f5d3c6e67f9 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-08-26T13:40:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação- Márcia Regina Pereira das Neves.pdf: 1414436 bytes, checksum: 0d8d84d35c876b0040aa1f5d3c6e67f9 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-08-26T13:44:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação- Márcia Regina Pereira das Neves.pdf: 1414436 bytes, checksum: 0d8d84d35c876b0040aa1f5d3c6e67f9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-26T13:44:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação- Márcia Regina Pereira das Neves.pdf: 1414436 bytes, checksum: 0d8d84d35c876b0040aa1f5d3c6e67f9 (MD5) Previous issue date: 2016-03-21 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Lately there has been a great interest in natural dyes due to problems of toxicity and biodegradability associated with the use of synthetic colorings. Colorants from fungal metabolites are still underexplored despite having a very attractive biotechnological potential. In this context, the aim of this study was to investigate the production of dyes and biological activity of sclerotiorin. Then in sequence, bioprocesses in a submerged solid media were realized in order to investigate the influence of the bioprocess factors in the production of colorants. The colorants produced were subjected to isolation methods (column chromatography, thin-layer chromatography), and identification of the chemical structure (nuclear magnetic resonance). The sclerotiorin dye was purchased commercially and it was evaluated their cytotoxic and antifungal activity. In relation to the bioprocesses, factors: sucrose, peptone, bioprocess time and orbital shaking had influence in the submerged bioprocesses, while only the time factor was shown to have influence on the bioprocess in a solid medium. It was not possible to isolate and identify colorants with strain P. sclerotiorum 2AV2, however the oleic acid was obtained as a major component in a colored fraction (PS 4.2). Finally, when performed sclerotiorin in bioassays, this compound demonstrated antitumor activity against the SKMEL-19, SKMEL-28, and MESA-DX cells. In addition, it can demonstrate the antifungal activity of sclerotiorin against the pathogenic fungus Cryptococcus neoformans. The biotechnological potential of the pigments produced by fungi is great and motivates further research that may result in new biotechnological products. / Ultimamente tem havido um grande interesse por colorantes naturais devido a problemas de toxicidade e biodegradabilidade associados ao uso de colorantes sintéticos. Os colorantes provenientes de metabólitos fúngicos ainda são pouco explorados apesar de apresentarem um potencial biotecnológico muito atraente. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi investigar a produção de colorantes e atividade biológica de esclerotiorina. Em seguida, bioprocessos em meio submerso e sólido foram realizados com a finalidade de investigar a influência dos fatores de bioprocesso na produção dos colorantes. Os colorantes produzidos foram submetidos a metodologias de isolamento (cromatografia em coluna, cromatografia de camada delgada) e identificação da sua estrutura química (ressonância magnética nuclear). O colorante esclerotiorina foi adquirido comercialmente e avaliou-se a sua atividade citotóxica e antifúngica. Quanto aos bioprocessos, os fatores: sacarose, peptona, tempo de bioprocesso e agitação orbital tiveram influência nos bioprocessos submersos, enquanto que apenas o fator tempo demonstrou ter influência nos bioprocessos em meio sólido. Não foi possível isolar e nem identificar colorantes com a cepa P. sclerotiorum 2AV2, no entanto foi obtido o ácido oleico como componente majoritário em uma fração colorida (PS 4.2). Por fim, quando avaliada a esclerotiorina em bioensaios, essa demonstrou atividade antitumoral frente às linhagens SKMEL-19, SKMEL-28 e MESA-DX. Em acréscimo, pode-se demonstrar a atividade antifúngica da esclerotiorina frente ao fungo patogênico Cryptococcus neoformans. O potencial biotecnológico dos pigmentos produzidos por fungos é grande e motiva novas pesquisas que possam resultar em novos produtos biotecnológicos.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Socratea exorrhiza (Mart.) H. Wendland é conhecida popularmente como paxiuba. Esta Arecaceae ocorre naturalmente na região amazônica. É muito utilizada por caboclos e índios de Roraima, porém pouco estudada quanto ao perfil químico e biológico. Neste trabalho investigou-se o potencial bioativo dos extratos da parte externa e interna da raiz e do broto da raiz de S. exorrhiza, mediante testes de atividade citotóxica (Artemia salina Laech), antioxidante (DPPH) e antimicrobiana contra as bactérias (Staphylococcus aureus ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus mirabilis ATCC 7002) e a levedura Candida albicans ATCC18804. Dos extratos mais ativos determinaram-se os teores de fenólicos e flavonóides por espectrofotometria. O processo de extração foi a quente em sistema de Soxhlet, usando solventes orgânicos de polaridades crescentes (hexano, clorofórmio, acetato de etila e metanol). Os resultados mostraram que os extratos acetato de etila da parte externa da raiz e do broto da raiz destacaram se nos testes de atividade citotóxica e antioxidante, sendo o do broto da raiz (DL50 473 e IC50 24,03 μg/mL) o mais ativo para os dois testes. A ação positiva desses extratos nas atividades biológicas pode estar relacionada à presença de flavonoides evidenciada pelo elevado teor encontrado (76,8% e 64,66%, respectivamente). Os extratos metanólicos da parte externa da raiz e do broto da raiz apresentaram alto poder inibitório frente à levedura C. albicans (halos de18 e 25 mm) respectivamente. Todos os extratos do broto da raiz apresentaram ação inibitória moderada contra o crescimento das bactérias Gram-negativas E. coli e P. mirabilis com halos que variaram entre 10 e 17 mm, sendo que o extrato metanólico do broto da raiz obteve alto poder inibitório no crescimento de P. mirabilis (halo 22 mm). A ação positiva dos extratos da parte externa da raiz e do broto da raiz contra bactérias Gram-negativas corrobora com o conhecimento tradicional, que preconiza a utilização das raízes de S. exorrhiza na medicina popular para o tratamento de doenças sexualmente transmissíveis, o que torna ainda maior o valor dos resultados obtidos. Outro dado importante obtido com trabalho é o novo registro de ocorrência de S. exorrhiza para o estado de Roraima. Os resultados aqui apresentados são inéditos e importantes na ampliação do conhecimento sobre esta palmeira, estimulando a continuidade de estudos mais aprofundados. / Socratea exorrhiza (Mart.) H. Wendland is popularly known as paxiuba. This Arecaceae occurs naturally in the rain forest. It is widely used by the locals and the native Indians of Roraima, however it is not as studied as in regards to its biological and chemical profile. In this work, it was investigated that the extracts of the bioactive potential of the outer and inner parts of the root and of the sprout from the root of S. exorrhiza, by cytotoxic activity tests (Artemia salina Laech), antioxidant (DPPH) and antimicrobial against bacteria (Staphylococcus aureus ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus mirabilis ATCC 7002) and with Candida albicans yeast ATCC18804. Among the most active extracts were determined the levels of phenolics and flavonoids by spectrophotometry method. The extraction process was heat by the Soxhlet method, using organic solvents of increasing polarity (hexane, chloroform, ethyl acetate and methanolic). extracts of the outer part of the root and the sprout from the root stood out on the cytotoxic activity and the antioxidant tests, being the sprout from the root (DL50 473 and IC50 24,03 μg/mL) the most active of the two tests. The positive Action of these two extracts on the biological activities can be related to the presence of flavonoids evidenced by the high content found on the of the outer part of the root extracts 76,8% and sprout from the root 64,66%. The methanolic extracts of the outer part of the root and the sprout from the root demonstrated high inhibitory power before the C. albicans yeast (halos of 18 and 25 mm) respectively. All the sprouts from the root extracts presented moderate inhibitory action against the growth of the Gram-negative E. coli and P. mirabilis bacteria with halos that varied between 10 and 17mm, and the methanolic extracts sprout from the root obtained high inhibitory power on the growth of P. mirabilis (halo 22 mm). The extracts‟ positive action of the outer part of the root and the sprout from the root against Gram-negative bacteria collaborates with the traditional knowledge that advocates the use of the S. exorrhiza roots in popular medicine for the sexually transmitted diseases (STD), which makes even higher the values of the results with these extracts. Another important finding in this work is the new record of occurrence of S. exorrhiza for the state of Roraima.The data herein presented is new and important in advancing knowledge about this palm tree, stimulating the continuity of deeper studies.

Foram isolados 37 fungos endofíticos de Viguiera arenaria (VA1 a VA37), sendo 32 oriundos de folhas e 5 de raízes. Os fungos foram classificados por métodos de biologia molecular, sendo Glomerella cingulata a espécie predominante. Os fungos foram cultivados em culturas fermentativas em duas etapas, em pequena escala, para obtenção dos extratos em AcOEt, BuOH e MeOH. Os extratos em AcOEt foram avaliados em ensaios antimicrobianos, citotóxicos frente a células leucemia T humana (JURKAT) e frente às enzimas GAPDH de Trypanosoma cruzi e APRT de Leishmania tarentolae. Diversos extratos apresentaram atividades biológicas significativas. Os perfis químicos dos extratos em AcOEt foram avaliados através de CLAE-UV e RMN 1H. Os fungos VA1 (Glomerella cingulata) e VA17 (Fusarium sp.), selecionados após as triagens química e biológica, foram cultivados em escala ampliada. A partir do extrato AcOEt do fungo VA1 foram isoladas duas substâncias, nectriapirona (I) e tirosol (II). A nectriapirona apresentou atividade citotóxica significativa contra células de leucemia T humana (linhagens JURKAT) e melanoma (linhagens B16F10). Ergosterol (III) foi isolado do extrato micelial metanólico do fungo VA1. A partir do extrato micelial metanólico do fungo VA5 (G. cingulata), cultivado em pequena escala, foi isolado o manitol (IV). Após do cultivo em escala ampliada do fungo VA17 (Fusarium sp.) foram isolados três derivados dicetopiperazinícos, um oriundo do extrato AcOEt, substância V, ainda não relatada na literatura, e dois do extrato micelial MeOH, fusaperazina B (VI) e substância VII, também inédita na literatura. O isolamento das substâncias foi realizado através de técnicas cromatográficas, como CC, CCDP e CLAE. As estruturas químicas foram elucidadas com auxílio de técnicas espectroscópicas (RMN 1H e 13C, HMQC, HMBC, NOE-diff) e espectrométricas (ESI-MS). Experimentos de modelagem molecular foram realizados com a fusaperazina B (VI), que corroboraram com os dados de NOE-diff, indicando que a conformação dobrada do anel dicetopiperazínico é a mais predominante. Foi ainda realizada avaliação do perfil químico dos extratos obtidos em pequena escala dos fungos classificados como G. cingulata, via CLAE e RMN 1H, verificando-se diferenças químicas significativas, o que pode sugerir variabilidade genética entre as linhagens. O tirosol (II) foi detectado na maioria dos extratos de G. cingulata. / A total of 37 endophytic fungi were isolated from Viguiera arenaria (VA1 to VA37), 32 from the leaves and 5 from the roots. Endophytes were classified by means of molecular biology methods, and Glomerella cingulata was the predominant species. The endophytes were cultured in a two step fermentative process in small scale to give the EtOAc, BuOH and MeOH extracts. The EtOAc extracts were submitted to antimicrobial assays, citotoxic assays against human leukemia T cells (JURKAT) and assays against two enzymes, GAPDH from Trypanosoma cruzi and APRT from Leishmania tarentolae. Several extracts showed promising activities in the bioassays. The chemical profiles of the EtOAc extracts were obtained through HPLC and 1H NMR. Endophytes VA1 (Glomerella cingulata) e VA17 (Fusarium sp.) were cultured in large scale after chemical and biological screenings. Nectriapyrone (I) and tirosol (II) were isolated from the EtOAc extract from VA1. Nectriapyrone showed high citotoxicity against leukemia T human cells (JURKAT) and melanoma cells (B16F10). Ergosterol (III) was isolated from the micelial MeOH extract of VA1. Mannitol (IV) was isolated from the micelial MeOH extract from the fungus VA5 (G. cingulata). Extracts from VA17 (Fusarium sp.), obtained in large scale, yielded three diketopiperazine derivatives. A novel derivative was isolated from the EtOAc extract (compound V). Two derivatives were obtained from the micelial MeOH extract, fusaperazine B (VI) and a new diketopiperazine (VII). The isolation of the compounds was carried out using chromatography techniques (column, prep. TLC, and HPLC) and the identification was achieved by spectroscopic (1D and 2D NMR) and spectrometric methods (ESI-MS). Molecular modeling experiments were carried out with fusaperazine B (VI), showing that the diketopiperazine ring is predominantly in the folded conformation, in agreement with NOE-diff experiments. Significant differences were observed in the HPLC profiles and 1H NMR spectra of the extracts from the G. cingulata strains, which might be related to genetic variability among the strains. Tirosol (II) was detected in the majority of G. cingulata extracts

O estudo fitoquímico dos extratos de plantas adultas e plântulas da espécie Piper reticulatum, coletada na Floresta Nacional de Carajás, levou ao isolamento de quatro amidas, incluindo diidrowisanidina, descrita previamente nesta espécie, wisanidina, (2E,4E)-N-isobutileicosa-2,4-dienamida, (3E,5E,14E)-N-pirrolidileicosa-3,5,14-trienamida (inédita em função da posição das insaturações da cadeia alquílica), uma lignana (siringaresinol) e uma nitrila (benzoato de cianobenzila), além de terem sido propostas as estruturas de oito amidas contendo longa cadeia alquílica, com base nos dados de cromatografia gasosa e líquida acoplada a espectrometria de massas. Os extratos e produtos naturais isolados foram avaliados quanto aos seus potenciais antifúngicos frente aos fitopatógenos Cladosporium cladosporioides e C. sphaerospermum e atividade inibidora da enzima acetilcolinesterase, sendo constatada forte atividade para as amidas em ambos ensaios, além de forte atividade para a nitrila contra C. sphaerospermum. Além disso, os extratos de plantas adultas e plântulas de P. reticulatum foram analisados através de EM (ESI+) e os dados analisados por PCA (análise dos componentes principais) e através de HCA (análise por agrupamento hierárquico) juntamente com a espécie P. amalago, filogeneticamente relacionada com P. reticulatum, P. crassinervium, P. solmsianum, P. fuligineum, P. gaudichaudianum, P. aduncum e P. tuberculatum, afim de uma distinção ou classificação de grupos seguindo parâmetros metabólicos. / The phytochemical study of extracts from adult plants and seedlings of the species Piper reticulatum, collected in the Carajás National Forest, afforded the isolation of four amides, including dihydrowisanidine, previously described from this species, wisanidine, (2E,4E)-N-2-isobutyleicosa-2,4-dienamide, (3E,5E,14E)-N-3,5,14-pyrrolidyleicosa-trienamide (novel based on the unsaturations position at the alkyl chain), a lignan (syringaresinol) and a nitrile (cianobenzyl benzoate) and, additionaly eigh amides containing long alkyl chain had their structures proposed based on gas and liquid chromatography coupled to mass spectrometry data. The extracts and the isolated natural products were evaluated for their potential antifungal activity against the phytopathogens Cladosporium cladosporioides and C. sphaerospermum and acetylcholinesterase inhibitory activity, being found strong activity for amides for both two tests, and strong activity for nitrile against C. sphaerospermum. In addition, extracts of adult plants and seedlings of P. reticulatum were analyzed by MS (ESI +) and by PCA (principal component analysis) and HCA (hierarchical cluster analysis) together with the species P. amalago, phylogenetically related to P. reticulatum, P. crassinervium, P. solmsianum, P. fuligineum, P. gaudichaudianum, P. aduncum and P. tuberculatum in order to distinguish or classify them according to the metabolic profile.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-07-12T13:41:01Z No. of bitstreams: 1 samiragamareis.pdf: 1183975 bytes, checksum: 4d919d44dc79995d42cbfa4fd3437a68 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-07-13T16:48:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 samiragamareis.pdf: 1183975 bytes, checksum: 4d919d44dc79995d42cbfa4fd3437a68 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T16:48:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 samiragamareis.pdf: 1183975 bytes, checksum: 4d919d44dc79995d42cbfa4fd3437a68 (MD5) Previous issue date: 2012-08-24 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Tem-se observado um aumento do número de bactérias e protozoários resistentes aos quimioterápicos em uso. Desta forma, esses fármacos correm o risco de se tornarem obsoletos, tornando imprescindível o desenvolvimento de novos compostos que sejam biologicamente ativos. Dentre as diversas classes de compostos antimicrobianos ou antiprotozoários têm tido destaque os grupos aminoalcoóis e os heterociclos aromáticos, presente em muitos fármacos. Dando continuidade aos estudos realizados por nosso grupo de pesquisa, neste trabalho são descritas as sínteses de aminas e aminoalcoóis por aminação redutiva de benzaldeídos substituídos (p-octiloxi-, p-nitrobenzaldeído, p-metóxi benzaldeído), e de 2- e 4-piridina carboxaldeídos com monoetanolamina, 2-amino-2-metilpropanol e com a octilamina. Na segunda parte do trabalho foram sintetizados compostos derivados do metronidazol, substância de amplo espectro de atividade. Os compostos foram obtidos a partir de substituição nucleofílica do mesilato de metronidazol, com diferentes amino álcoois e octilamina. Após purificação e caracterização através dos métodos espectroscópicos usuais (RMN 1H e 13C e IV), as propriedades biológicas dos compostos obtidos foram avaliados in vitro. A avaliação da atividade antibacteriana contra diversos micro-organismos Gram-positivos e G ram-negativos foi feita através da análise do halo de inibição (método de difusão em Agar) e da concentração inibitória mínima (CIM). Os derivados de metronidazol estão sendo avaliados quanto a sua atividade antiparasitária. Os resultados mostraram que a atividade antibacteriana depende da lipofilia, já que todos os compostos possuindo a cadeia octila inibiram o crescimento bacteriana. / An increased number of bacteria and protozoa resistant to the usual chemotherapy has been observed. Thus, these drugs could become obsolete, making essential the development of new biologically active compounds. Among the various classes of antimicrobial and antiprotozoal compounds, amino alcohols and heterocyclic aromatic groups have been high lighted, as they are found in many drugs. Giving continuity to the ongoing studies conducted by our research group, in this work are described the synthesis of amines and amino alcohols by reductive amination of substituted benzaldehydes (p-octyloxy, p-methoxy and p-nitro benzaldehyde) and of 2-pyridil and 4- pyridil carboxaldehydes with monoethanolamine, 2-amino-2-methylproanol and octylamine. In the second part of the work compounds were synthesized from metronidazole, a substance with a broad spectrum of activity. The compounds were obtained by nucleophilic substitution of metronidazole mesylate with different amino alcohols and octylamine. After purification and characterization through the usual spectroscopic methods (1H NMR, 13C NMR and IR), the biologic properties of the obtained compounds were evaluated in vitro. The evaluation of the antibacterial activity was performed against gram-positive and gramnegative microorganisms, through the analysis of the halo of inhibition and of the minimum inhibitory concentration. The metronidazole derivatives are being evaluated for their antiparasitic properties. The results show that the antibacterial activity depends on lipophilicity, since all the compounds carrying the octyl chain were active.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-05-03T15:55:30Z No. of bitstreams: 1 angelinamariadealmeida.pdf: 27513122 bytes, checksum: 4a1c9bd4d957558435fb0e88c9c8bae9 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-05-13T13:36:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 angelinamariadealmeida.pdf: 27513122 bytes, checksum: 4a1c9bd4d957558435fb0e88c9c8bae9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-13T13:36:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 angelinamariadealmeida.pdf: 27513122 bytes, checksum: 4a1c9bd4d957558435fb0e88c9c8bae9 (MD5) Previous issue date: 2013-03-01 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Neste trabalho foram realizadas as sínteses de aminas e amidas aromáticas anfifílicas inéditas derivadas do Tris. A primeira série foi obtida através da reação de aminação redutiva de p- alquiloxibenzadeídos com o TRIS. A série das amidas foi obtida a partir do ácido p- alquiloxibenzóicos: esses foram convertidos a cloretos de acila e tratados com TRIS. As metodologias usadas foram simples e todos os compostos foram obtidos em rendimentos satisfatórios. Após purificação e caracterização através das técnicas espectroscópicas usuais (IV, RMN de ¹H e ¹³C e espectroscopia de massas). Os compostos sintetizados foram avaliados quanto as suas propriedades biológicas in vitro. A atividade antimicrobiana foi avaliada frente a bactérias Gram-positivas (ATCC e MRSA), bactérias Gram-negativas (ATCC) e fungos Candida. O potencial anti-inflamatório foi avaliado através da capacidade dos compostos de inibirem a produção de óxido nítrico por macrófagos ativados. A citotoxicidade foi investigada através do método do MTT. Os resultados obtidos mostraram que apenas as aminas foram ativas nos testes, com concentrações inibitórias mínimas comparáveis ou superiores as dos padrões usados como controle (cloranfenicol e itraconazol), e não apresentaram toxicidade nessas concentrações. Foi possível estabelecer uma boa correlação positiva entre a lipofilicidade dos compostos testados e a atividade antimicrobiana. Os estudos físico-químicos ainda estão em andamento com o intuito de estabelecer uma relação entre atividade biológica e propriedades surfactantes das novas aminas anfifílicas. / In this work were carried out the synthesis of novel amphiphilic aromatic amines and amides derived from Tris. The first set was obtained by reductive amination reaction of p- alkyloxybenzadehydes with TRIS. The series of amides was obtained starting from p- akyloxylbenzoic acid: these were converted to the acyl chlorides and treated with TRIS. The methodologies used were simple and all compounds were obtained in satisfactory yields. After purification and characterization through the usual spectroscopic techniques (IR, 1 H NMR, ¹³C NMR and mass spectroscopy), the synthesized compounds were evaluated for their biological properties in vitro. The antimicrobial activity was evaluated against Gram-positive bacteria (ATCC and MRSA), Gram-negative bacteria (ATCC) and fungi of Candida. The anti inflammatory potential was assessed by the ability of the compounds to inhibit nitric oxide production by activated macrophages. Cytotoxicity was assessed by the MTT method. The results showed that only the amines were active in the tests, with minimum inhibitory concentrations comparable or superior to the standards used as control (chloramphenicol and itraconazole), and showed no toxicity in these concentrations. It was possible to establish a good correlation between the lipophilicity of the tested compounds and the antimicrobial activity. The physico-chemical studies are still under going aiming to establish a relationship between the biological activity and the surfactant properties of the new amphiphilic amines.

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:16:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo9365_1.pdf: 5395495 bytes, checksum: 18153fda0a4edf8994e025c2f18c749a (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / Os compostos mesoiônicos constituem um grupo de betaínas heterocíclicas estabilizadas por deslocalização de elétrons e cargas, cuja síntese tem mostrado grande interesse, especialmente pela sua larga gama de atividade biológica com grande possibilidade de aproveitamento na obtenção de fármacos, como também pelas suas propriedades físicas especiais tais como em óptica não-linear com alto potencial de aplicabilidade no campo de telecomunicações e por participarem em diversas reações originando novos outros derivados heterocíclicos. Baseados nestes fatores, visando futuro aproveitamento desses compostos para uso em aplicações de óptica não-linear e atividade biológica, sintetizamos e caracterizamos 14 novos derivados mesoiônicos, sendo 10 do sistema 1,3-tiazólio-5-tiolato e 4 do sistema 1,3-diazólio- 5-tiolato, com diferentes grupos doadores e aceitadores de elétrons, ligados à região negativa do anel (associado ao HOMO) e positiva do anel (associado ao LUMO) respectivamente. A metodologia empregada (vide figura 3.1) envolveu a seguinte rota sintética: (i) reação de Strecker com aldeído 1, cianeto de sódio e cloreto de metilamônio forneceu o N-metil-Carilglicina 2 com bons rendimento (ii) aroilação de 2 obteve-se N-metil-N-aroil-C-arilglicina 3 e (iii) ciclodesidratação de 3 com anidrido acético ou anidrido trifluoroacético ou DCC seguido de cicloadição e cicloreversão 1,3-dipolar com dissulfeto de carbono forneceu os mesoiônicos MI-4.1, MI-4.2, MI-4.3, MI-4.4, MI-4.5, MI-4.6, MI-4.7, MI-4.8, MI-4.9 e MI-4.10 do sistema 1,3- tiazólio-5-tiolato na forma de base livres, (iv) alquilação de MI-4.1 e MI-4.2 com iodeto de metila deram MI-5.1 e MI-5.2 na forma de iodetos de sais S-metilados do sistema 1,3- tiazólio-5-tiolato, (v) tratamento de MI-5.1 e MI-5.2 com metilamina forneceu os mesoiônicos MI-6.1 e MI-6.2 do sistema 1,3- diazólio-5-tiolato como base livre; (vi) alquilação de MI-6.1 e MI-6.2 com iodeto de metila produziu MI-7.1 e MI-7.2 como iodeto de sais S-metilado do mesoiônico 1,3- diazólio-5-tiolato. Os produtos foram todos obtidos com bons rendimentos após recristalização em etanol/água As estruturas químicas dos novos derivados mesoiônicos foram bem elucidadas utilizando técnicas de espectrometria de RMN uni-(1D) e bidimensionais (2D), a saber, APT, DEPT, HETCOR ou HMQC e HMBC e esta conformação foram confirmadas por estudos de Análise Elementar, IV, e Massa. Os resultados indicaram que as técnicas de RMN utilizadas para elucidação dos novos derivados mesoiônicos confirmaram com relativa precisão seu esqueleto básico. A atividade antimicrobiana dos novos compostos sintetizados foi verificada pelo método de difusão em disco de papel em meio gelosado (Método Muller Hinton). As amostras foram dissolvidas em DMSO 15mg/ml e umedecida ao disco de papel os quais ficaram a uma concentração de 300μg/ml. Após período de incubação, foi observado que, dos 10 compostos testados apenas 4 apresentaram atividade, os quais 2 do sistema 1,3-tiazólio-5- tiolato (MI-5.1) e (MI-5.2) na forma de iodeto de sais S-metilado foram os mais ativos inibindo 8 dos 10 microorganismos testados apresentando assim melhor atividade para bactérias Gram-positivas e para Monilia sitophila (fungos filamentosos), enquanto que os outros 2 compostos, ambos do sistema 1,3-diazólio-5-tiolato (MI-6.1) e (MI-6.2) na forma de base livre também apresentaram boa atividade para bactérias Gram-positivas, inibindo também o crescimento de Candida albicans embora com menor intensidade e os seis compostos restantes (MI-4.1), (MI-4.2), (MI-4.3), (MI-4.4), (MI-4.6) e (MI-4.7) todos do sistema 1,3-tiazólio-5-tiolato na forma de base livre não foram eficientes para inibir o desenvolvimento dos microorganismos testados, apresentando assim resultados praticamente negativos Estudo das atividades biológicas induzidas pelo composto mesoiônico 2-(4- clorofenil)-3-metil-4-(4-metóxifenil)-1,3-tiazólio-5-tiolato (MI-4.6), (abordagem in vitro), apresentou atividade hipotensora em animais (ratos) normotensos não anestesiados e uma potente atividade relaxante dependente de endotélio em anéis de artérias mesentérica superior de ratos, alem de induzir relaxamento sobre o tônus espontâneo e promoveu efeito espasmolitico inespecífico em traquéia de cobaia. Nos estudos ópticos calculamos através do método de orbitais moleculares semiempírico AM1, implementado ao programa MOPAC93r2, as geometrias otimizadas de 16 compostos mesoiônicos todos do sistema 1,3-tiazólio-5-tiolato (MI-4) em função dos diferentes grupos doadores (Rd = OCH3, CH(CH3)2, CH2 e H) e aceitadores (Ra = NO2, CF3, Cl, e H) de elétrons. Em seguida, utilizando-se o método Hartree-Fock dependente do tempo calculamos a hiperpolarizabilidade estática, β(0), para estes compostos. Os valores obtidos variaram na faixa de 23,16 a 61,49 x 10 30 esu. O mesoiônico (MI-4.10), foi a molécula que apresentou o maior valor de β(0) na faixa de 61,49 x 10 30 seu. Caso se confirme, é o maior valor de hiperpolarizabilidade encontrada para compostos mesoiônicos já sintetizados

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The phytochemical research of crude extract of the bark metanólico and stem fractions of Helietta apiculata Benth, Rutaceae, led to the isolation of four alkaloids furoquinoline (γ-fagarine (9), Maculine (24), Kokusaginine (17) and Isodictamnine (11)), a limonoids known as Limonin (42), a coumarin called Chalepin (27), two derivatives of cinnamic acid in mixture, 4-hydroxy-3,5-dimetoxicinamato methyl (69) and 3, 4, 5- trimetoxicinamato methyl (55), In addition to a mixture of three neolignans (T26). Through the hidrodestilação was the extraction of essential oils of the species H. apiculata in different seasons, with the aim of comparison of chemically the same as seasonality. Being that the main constituents were the gifts, the elemeno, γ-elemol, elemol and espatulenol. While limonene was not biosynthesized during the spring, being present in significant quantities in summer, autumn and winter. The crude extract, fractions and isolated substances were tested as to their antimicrobial, antioxidant activity and inhibition of the enzyme Acetylcholinesterase. When tested against microbial agents, metabolites γ-fagarine, limonin, isodictamnine, derivatives of cinnamic acid and neolignans mixture on demonstrated antimicrobial activity. When testing the antioxidant potential through screening substances γ-fagarine, isodictamnine and maculine, neolignans were more active as antioxidants. To test the ability of inhibition of the enzyme Acetylcholinesterase none of isolated proved with substantial potential inhibitor, since they do not have overcome the pMIQ threshold value of 10,5 established as required value for a substance to be considered such inhibiting enzyme. / A investigação fitoquímica do extrato bruto metanólico e frações da cascas do caule de Helietta apiculata Benth, Rutaceae, levou ao isolamento de quatro alcalóides furoquinolínicos (γ-fagarina (9), Maculina (24), Kokusaginina (17) e Isodictamina (11)), de um limonóide conhecido como Limonina (42), uma cumarina denominada Chalepina (27), dois derivados do ácido cinâmico em mistura, 4-hidroxi-3,5-dimetoxicinamato de metila (69) e 3,4,5- trimetoxicinamato de metila (55), além de uma mistura de três neolignanas (T26).Através da hidrodestilação, fez-se também, a extração dos óleos essenciais da espécie H. apiculata nas diferentes estações do ano, visando à comparação da constituição química do mesmo quanto à sazonalidade. Sendo que os principais constituintes presentes foram o elemeno, o γ-elemol, o elemol e o espatulenol. Ao passo que limoneno não foi biosintetizado pela planta durante a primavera, estando presente em quantidades apreciáveis no verão, outono e inverno. O extrato bruto, as frações e as substâncias isoladas foram testadas quanto à suas atividades antimicrobiana, antioxidante e de inibição da enzima Acetilcolinesterase. Quando testadas frente a agentes microbianos, os metabólitos γ-fagarina, limonina, isodictamina, derivados do ácido cinâmico e a mistura de neolignanas demonstraram relativa atividade antimicrobiana. Ao se testar o potencial antioxidante através de screening as substâncias γ-fagarina, maculina, isodictamina e as neolignanas se mostraram as mais ativas como antioxidantes. Quando testada a capacidade de inibição da enzima Acetilcolinesterase nenhuma das substâncias isoladas se mostrou com potencial inibidor, visto que as mesmas não superaram o valor limite de pMIQ de 10,5 estabelecido como valor necessário para uma substância ser considerada inibidora de tal enzima.

Orientador: Glaúcia Maria Pastore / Tese (doutorado) - Universidade Estadua de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-18T10:58:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Malta_LucianaGomes_D.pdf: 3416128 bytes, checksum: dec89a08c54c6d1964d67b3fdcd3b259 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: A ingestão de muitas frutas convencionais, exóticas e nativas está associada com a redução do risco de doenças crônicas não transmissíveis e até mesmo o câncer. Neste contexto, o presente trabalho tem como proposta estudar atividades biológicas bem como identificar e quantificar os compostos fenólicos das frutas do Cerrado brasileiro, Guapeva (Pouteria cf. guardneriana Radlk.), Murici (Byrsonima verbascifolia Rich.) e Gabiroba (Compomanesia cambessedeana O. Berg.). Além dos compostos fenólicos, foram investigadas as atividades antioxidante, antiinflamatória, antimutagência, antigenotóxica, antiproliferativa e citotóxica. Os compostos fenólicos foram extraídos com etanol 95% e com água. Os fenólicos lipofílicos foram extraídos, a partir da fruta, com hexano. A quantificação dos compostos fenólicos foi realizada e os extratos etanólicos apresentaram melhores resultados quando comparados com os aquosos. O extrato etanólico da Gabiroba concentração de fenólicos de 4610,46 mg Ácido Gálico/100g fruta fresca, sendo superior a todos os outros extratos. Também foi realizada a quantificação dos flavonóides totais, mas apenas para os extratos etanólicos, e a semente da Guapeva apresentou o resultado mais relevante, no valor de 2915,62 mg Catequina/100g fruta fresca. Os extratos do Cerrados foram avaliados quanto a capacidade antioxidante in vitro através dos métodos 2,2- Diphenyl ¿ 1- picrylhydrazil (DPPH), Trolox Equivalent Antioxidant Capacity (TEAC), Oxygen Radical Absorbance Capacity (ORAC) e Peroxyl Radical cavenging Capacity (PSC). Os resultados do teste DPPH foram expostos de duas formas diferentes, como equivalentes de Trolox onde o extrato etanólico da casca da Guapeva destacou-se por apresentar maior potencial antioxidante nos 3 tempos analisados (30, 60 e 90 minutos) e também como IC50, onde o extrato etanólico da Gabiroba apresentou melhor resultado no valor de 11,10 µg/mL de fruta fresca. Para o teste TEAC os extratos etanólicos da casca da Guapeva e a Gabiroba apresentaram maior potencial antioxidante, com resultados de 1543,53 e 1014,25 µM Trolox Equivalentes/100g fruta fresca, respectivamente. Já para os ensaios ORAC e PSC o extrato etanólico da Gabiroba apresentou maior atividade, com resultados de 43780,00 µM TE/100g de fruta e 2342,52 µM Vitamina C/100 g fruta fresca, respectivamente. A identificação e quantificação dos compostos fenólicos presentes nos extratos foram realizadas por Cromatografia líquida de alta eficiência. Foram identificados Ácido ferrúlico, Resveratrol, Etil galato, Catequina, Propil galato e Epicatequina. Ratos foram tratados com os extratos de frutas e o plasma foi coletado 30, 60 e 90 minutos após a gavagem para análise pelos métodos ORAC, TEAC e fenóis totais. O extrato de casca da Guapeva apresentou maior concentração de fenóis totais após trinta minutos da ingestão e o Murici após 1 hora. Através da análise TEAC, todos os extratos apresentaram maior atividade antioxidante no tempo de 30 minutos quando comparado com os demais tempos. No ensaio ORAC todos os extratos apresentaram maior potencial nos períodos de 30 e 60 minutos. A identificação dos compostos fenólicos no plasma foi determinada por Espectrometria de Massas, sendo que apenas a Catequina foi identificada no grupo que foi tratado com Gabiroba. O potencial antimutagênico/mutagênico foi determinado pelo teste in vivo de Micronúcleos. Todos os extratos mostraram-se antimutagênicos e não mutagênicos. O extrato com maior efeito protetor contra a droga Ciclofosfamida foi o Murici 400 mg extrato/kg P.C. com efeito redutor de 97,71%. A avaliação do efeito antiinflamatório foi realizada pelo teste de Edema de pata, induzido por Carragenina e todos os extratos apresentaram ação antiinflamatória. Também verificou-se que a partir da segunda hora após a injeção da Carragenina, o efeito antiinflamatório apresentado por todos extratos, aumentou. O efeito antigenotóxico foi avaliado pelo ensaio Cometa in vivo. Todos os extratos avaliados não danificaram o DNA e os que apresentaram maior proteção contra dano/lesão no DNA foram a polpa, casca e semente da Guapeva na concentração de 200 mg extrato/kg P.C. e o Murici na concentração de 400 mg extrato/kg P.C. Oito linhagens tumorais humanas foram utilizadas na determinação do potencial antiproliferativo, apenas a Guapeva casca, polpa e o Murici apresentaram início de efeito citostático. A atividade citotóxica e antiproliferativa foi avaliada em hepatocarcinoma humano (HepG2), a semente da fruta Guapeva apresentou citotoxicidade, e a casca e polpa da fruta Guapeva, assim como a Gabiroba se destacaram no potencial antiproliferativo com valores de 11,75; 12,57 e 8,35 mg/mL. O potencial antioxidante celular foi avaliado e a casca da fruta Guapeva apresentou maior atividade, no valor de 99,91 µmol Quercetina/100g fruta de fresca. De acordo com nosso conhecimento, este foi o estudo mais aprofundado sobre as propriedades biológicas das frutas do Cerrado, e que possivelmente possibilitará a utilização destes como alimento funcional / Abstract: There is an association between the conventional intake of many fruits (exotic native species) with reduced risk of chronic diseases and even cancer. In this context, this work aims to study the biological activities, identify and quantify the phenolic compounds of Cerrado's fruits, the Guapeva (Pouteria cf. Guardneriana Radlk), Murici (verbascifolia Byrsonima Rich) and Gabiroba (Compomanesia cambessedeana O. Berg). In addition, we investigated the antioxidant, anti-inflammatory, antimutagenic, antigenotoxic, antiproliferative and cytotoxic properties of these fruits. Phenolic compounds were extracted with 95% ethanol and water. The lipophilic phenolics were extracted from the fruit with hexane. The quantification of phenolic compounds was performed and the ethanol extracts presented better results when compared with aqueous extracts. The Gabiroba extract showed the total phenolic concentration of 4610.46 mg Gallic acid/100g fresh fruit, higher than all other analyzed extracts. Total flavonoids were also quantified, but only the ethanol extracts were used. The seed of the Guapeva presented the most relevant results, amounting to 2915.62 mg Catechin /100g fresh fruit. The Cerrado's extracts were evaluated for antioxidant capacity in vitro using the methods 2,2- Diphenyl ¿ 1- picrylhydrazil (DPPH), Trolox Equivalent Antioxidant Capacity (TEAC), Oxygen Radical Absorbance Capacity (ORAC) e Peroxyl Radical cavenging Capacity (PSC). The DPPH test results were presented in two different ways, one as Trolox equivalents, in which the ethanol extract of the peel of the Guapeva resulted in the highest antioxidant potential for the three analyzed times (30, 60 and 90 minutes) and the other way as EC50, in which it was observed that the ethanol extract of Gabiroba had the best result with a value of 11.10 µg/mL of fresh fruit. From the TEAC test, ethanol extracts of the peel of Guapeva and Gabiroba showed higher antioxidant potential, the results were 1543.53 and 1014.25 uM Trolox Equivalents/100g of fresh fruit, respectively. For the ORAC and PSC tests, the ethanol extract of the Gabiroba presented the highest activity, with results of 43,780.00 µM TE/100g of fresh fruit and 2342.52 µM Vitamin C/100g of fresh fruit, respectively. The identification and quantification of phenolic compounds in the extracts were performed by high performance liquid chromatography. The following standards were identified: Ferrulic acid, resveratrol, ethyl gallate, catechin, Propyl gallate, and epicatechin. Rats were treated with the extract of fruits and plasma was collected 30, 60 and 90 min after gavage for analysis by the methods ORAC, TEAC and Total phenolics. The peel of the Guapeva extract showed the highest concentration of phenolics thirty minutes after treatment and the Murici presented the highest concentration after 1 hour of ingestion. For the TEAC test, all extracts showed higher antioxidant activity at 30 minutes compared to the other analyzed periods. For the ORAC assay, all the extracts had the greatest potential in periods between 30 and 60 minutes. The identification of phenolic compounds in plasma was determined by mass spectrometry, and only the Catechin was identified in the group of animals that received the Gabiroba extract. The antimutagenic / mutagenic test was determined by in vivo micronucleus test. None of the extracts show mutagenic properties. The extract with the greatest protective effect against Cyclophosphamide drug was the Murici at 400 mg extract / kg body weight, presenting reduction effect of 97.71%. The evaluation of anti-inflammatory effect was accomplished by testing the paw edema induced by the Carrageenan drug and it was observed that all extracts showed anti-inflammatory properties. It was also found that from the second hour after injection of Carrageenan, all extracts presented an increase of anti-inflammatory effects. The antigenotoxic effect was evaluated by Comet assay in vivo. All the extracts evaluated did not induce DNA damage, the extracts that provided greater protection against DNA damage were the pulp, peel and seed of Guapeva at 200 mg extract/kg body weight and Murici at 400 mg extract/kg body. Eight human tumor cell lines were used to determine the potential antiproliferative effects of the fruits, however just the peel, pulp of Guapeva and Murici showed cytostatic effects. The antiproliferative and cytotoxicity activities were evaluated in human hepatocellular carcinoma cells (HepG2). The seeds of Guapeva presented cytotoxicity, and the peel and pulp of Guapeva, and Gabiroba showed the highest antiproliferative potential with values of 11.75, 12.57 and 8.35 mg/mL, respectively. The cellular antioxidant potential was tested and the peel of the Guapeva showed the highest activity, amounting to 99.91 µmol Quercetin/100g fresh fruit. This study furthers the investigation of the biological properties of the fruits of the Cerrado, and possibly allow the use of these as functional food / Doutorado / Tecnologia de Alimentos / Doutor em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Ronaldo Aloise Pilli / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-14T13:10:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marquissolo_Cilene_M.pdf: 4919703 bytes, checksum: f834b50c778a98043d8f699e6b2947b9 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Este trabalho tem como objetivo preparar análogos furânicos da goniotalamina 31, 32 e 33 em suas duas formas enantioméricas, utilizando-se a alilação catalítica e assimétrica nas condições de Keck e a reação de metátese de olefinas para fechamento de anel. Estes análogos foram obtidos em bons rendimentos e excelentes razões enantioméricas. Estes novos compostos foram submetidos a testes de atividade antiproliferativa frente a nove linhagens de células tumorais e a bioensaios in vitro contra a forma tripomastigota do Trypanosoma cruzi e contra a forma promastigota de Leishmania major e Leishmania brasiliensis. No que diz respeito à atividade antiproliferativa, exceto para as linhagens de melanoma e cólon, os compostos testados apresentaram maior potência do que o controle positivo, doxorrubicina. Adicionalmente, os compostos 31, 32 e 33 mostraram-se mais ativos que a goniotalamina (1), exceto para as linhagens de mama e ovário. Os bioensaios de citotoxicidade com células não infectadas (LLC-MK2) mostraram que os compostos apresentaram baixa citotoxicidade. Com relação à atividade tripanocida, embora o composto (S)-31 tenha se apresentado como o composto mais ativo, mostrou alta citotoxicidade em células não-infectadas. (S)-32 é o composto que apresenta atividade mais interessante contra T. cruzi, além do menor valor de citotoxicidade e alto índice de segurança. Para a atividade leishmanicida, o análogo (S)-31 apresentou-se como o composto mais ativo para ambas as espécies de Leishmania, mostrando-se cerca de 6,5 vezes mais ativo que o controle positivo para Leishmania brasiliensis e cerca de 14,6 vezes para Leishmania major. Os ensaios de citotoxicidade revelaram valores de concentração superiores aos valores de IC50, indicando baixa toxicidade. Para Leishmania brasiliensis e Leishmania major, (R)-31 e (S)-31 mostraram-se como os compostos mais ativos e apresentaram bons índices de segurança. O análogo 33 não apresentou atividade expressiva em nenhum dos testes realizados indicando que a presença do grupo nitro ligado ao anel furânico é de grande importância para as atividades biológicas avaliadas / Abstract: This work describes the preparation of furan analogues of goniothalamin (compounds 31, 32 and 33) in both enantiomeric forms through the utilization of Keck asymmetric allylation and ring-closing methatesis reaction. These analogues were prepared in good overall yield and excellent enantiomeric ratio. These novel compounds were evaluated as antiproliferative agents against a panel of nine cancer cell lines and in vitro bioassays against the tripomastigote form of Trypanosoma cruzi and promastigote form of Leishmania major and Leishmania brasiliensis. Compounds 31-33 were more potent than the positive control (doxorubicin) in the antiproliferative experiments, except for melanoma and colon cancer cells. Additionally compounds 31-33 were more active than goniothalamin (1), except for breast and ovary cancer cells. Regarding their tripanocidal activity, compound (S)-31 was shown to be very toxic to non-infected cells despite its being highly active. Compound (S)-32 was the most promising one against T. cruzi due to its low toxicity and high insurance level. As to the leishmanicidal activity, the analogue (S)-31 was shown to be the most active for both Leishmania species investigated being 6,5 times more active than the positive control for Leishmania brasiliensis and about 14,6 times for Leishmania major, The citotoxicity assays revealed low toxicity against non-infected cells. For Leishmania brasiliensis and Leishmania major (R)-31 and (S)-31 were shown to be more active one and also displayed the best insurance level. Analogue 33 did not display any significant biological activity in our assays indicating that the nitrofuran moiety is very important for the biological activities investigated / Mestrado / Quimica Organica / Mestre em Química