Resumo: Melhorar o potencial produtivo de plantas cultivadas através de práticas de cultivo é um dos principais desafios da pesquisa frente à crescente demanda de alimentos em nível mundial. Assim, o presente estudo teve por objetivo investigar as alterações morfofisiológicas ocorridas no colmo principal e em perfilhos, bem como caracterizar os processos envolvidos com a plasticidade do desenvolvimento de plantas de trigo em função da densidade de semeadura e da aplicação de regulares vegetais. O experimento foi conduzido no ano agrícola de 2010 na Fazenda Experimental Lageado, Faculdade de Ciências Agronômicas, UNESP, em Botucatu (SP). O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados, em esquema de parcelas subdivididas. As parcelas foram formadas por quatro densidades de semeadura (30, 50, 70 e 90 plantas m-1), cultivar IAC 370, enquanto as subparcelas foram formadas pela aplicação de reguladores vegetais [controle, (Ax+GA+CK), Etil-Trinexapac e (Ax+GA+CK) + Etil-Trinexapac]. Foram avaliados a emissão de perfilhos, o acúmulo de matéria seca em perfilhos e no colmo principal, a altura de plantas, as trocas gasosas, características morfofisiológicas da folha bandeira e sua relações com a espiga, além dos componentes da produção para perfilhos e colmo principal e da produtividade final da cultura. Ao final do experimento foram determinadas a participação de perfilhos no desenvolvimento e na produção de grãos, bem como o potencial produtivo de perfilhos em relação ao colmo principal. A aplicação de Etil- Trinexapac resultou em alterações morfofisiológicas em plantas de trigo, como altura de plantas, redução da distância entre fonte e dreno, teor de clorofila e comprimento da folha bandeira, não afetou a produtividade de grãos, tampouco as relações entre colmo principal e perfilhos de trigo. O aumento do número de plantas por unidade de área... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Improve on yield potential of plants by crop management is the main research challenge due to the growing of food demand worldwide. The objective of this work was to study morphological and physiological changes in main stem and tillers, and to characterize the processes involved on developmental plasticity of wheat plants affected by sowing densities under plant growth regulators application. The experiment was carried out at Faculdade de Ciencias Agronômicas - Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho", Botucatu (SP) in 2010 crop season. The experimental design was split-plot with four replications. The plots were consisted by four plant densities (30, 50 70 and 90 plants m-1) and the subplots were consisted by plant growth regulators [control, (Ax+GA+CK), Trinexapac- Ethyl e (Ax+GA+CK) + Trinexapac-Ethyl]. Tiller emission, main stem and tiller dry mass accumulation, plant height, gas exchange, morphological and physiological characteristics of flag leaf, main stem and tiller yield components and yield were determined. The contribution of main stem and tillers on grain yield and yield potential of tillers in relation to main stem were evaluated at the end of the crop cycle. Trinexapac-Ethyl application resulted in decreasing of plant height, source-sink distance, flag leaf length and chlorophyll content, however, the grain yield was not affected. The increase in the number of plants per unit area resulted in linear lower emission of tillers, dry matter accumulation and relationship between main stem and tillers, with direct relation to the yield. The increase in yield of the lower plant populations occurred due to the higher number of grain weight per spike, offsetting the decrease in the number of spikes per square meter. The competition for production factors resulted in decreasing in contribution of tillers on grain yield and yield potential... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: João Domingos Rodrigues / Coorientador: Silvio José Bicudo / Banca: Elizabeth Orika Ono / Banca: Vander Francisco Guimarães / Mestre

Orientador: Elizabeth Orika Ono / Banca: João Domingos Rodrigues / Banca: Jaime Duarte Filho / Resumo: Objetivou-se estudar os efeitos de citocinina e bioestimulante (citocinina/giberelina) para promover brotações em estacas de raízes e de auxina para promover a formação de raízes nessas brotações, com isso, propondo uma alternativa para a produção de mudas da amoreira-preta. O primeiro experimento constou de cinco concentrações de 6-benziloaminopurina (BAP), na forma de solução: T1= 0 mg L-1; T2= 100 mg L-1, T3= 200 mg L-1, T4= 400 mg L-1 e T5= 800 mg L-1, aplicadas em toda a estaca de raiz por imersão durante 18 horas, distribuídas em quatro repetições, sendo a parcela de 15 estacas radiciais. No segundo experimento adotou-se cinco concentrações do bioestimulante Promalin® na forma de solução: T1= 0 mg L-1; T2 = 10 mg L-1, T3= 20 mg L-1, T4= 40 mg L 1 e T5= 80 mg L-1. Posteriormente, as estacas radiciais foram mergulhadas nessas soluções durante 12 horas. Utilizaram-se sete repetições, com a parcela constituída por uma bandeja com 10 estacas radiciais, durante 70 dias. A aplicação dos reguladores vegetais, BAP e PromalinÒ, em concentrações altas inibiram o desenvolvimento de brotações em estacas radiciais de amoreira-preta e as características de desenvolvimento dessas brotações, sendo os melhores resultados alcançados sem a aplicação dos reguladores vegetais. Posteriormente, as estacas de raízes de amoreira-preta (sem aplicação de regulador vegetal) foram coletadas de plantas matrizes e colocadas em câmara de nebulização, sendo dispostas em bandejas de polietileno brancas, com casca de arroz carbonizada, conforme o melhor tratamento. Após 60 dias, procedeu-se a retirada das brotações das estacas radiciais, com o corte rente à estaca. Foi feita a seleção e padronização das estacas de brotações, sendo deixadas com altura de dez centímetros e três a quatro folhas por broto, utilizadas para a instalação do terceiro experimento... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective was to study the effects of cytokinin and plant growth regulators (cytokinin/gibberellin) to promote shoot growth on root cuttings and auxin to promote root formation in these shoots with that proposing an alternative for the production of seedlings of blackberry. The first experiment consisted of five concentrations of 6- benzylaminopurine (BAP): T1= 0 mg L-1, T2= 100 mg L-1, T3= 200 mg L-1, T4= 400 mg L- 1 and T5= 800 mg L-1, applied across the cutting immersed for 18 hours, divided into four replicates of plot share of 15 root cuttings. The second experiment has five Promalin ®concentrations: T1= 0 mg L-1, T2= 10 mg L-1, T3= 20 mg L-1, T4= 40 mg L-1 and T5= 80 mg L-1, then the root cuttings were dipped in these solutions for 12 hours. Seven replicates were used with the plot had a tray with 10 root cuttings during 70 days. The application of BAP and PromalinÒ in high concentrations inhibited the shoots development in root cuttings of blackberry and the best results was without the application of plant growth regulators. The root cuttings of blackberry (without aplicacation of plant growth regulator) were colleted from stock plants and placed in a mist chamber, being arranged in white polyethylene trays with carbonized rice hull, as the best treatment. After 60 days, we proceeded to the removal of the shoots, cut flush with the close root cutting. It was made the selection and standardization of shoot cuttings, being left with a height of ten inches and three to four leaves per shoot, used for the installation of the third experiment. The treatments consisted of six concentrations of indole-3-butyric acid (IBA): T1= 0 mg L-1, T2= 250 mg L-1, T3= 500 mg L-1, T4= 1000 mg L- 1, T5= 2000 mg L-1 and T6= 4000 mg L-1 applied on the basis of shoot cuttings for ten seconds, in six replication of 12 shoots, for 60 days. The highest concentrations of IBA inhibited root development... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

L'auxine régule la croissance et le développement des plantes grâce aux facteurs de transcription de la famille des "AUXIN RESPONSE FACTOR" (ARF). Chez Arabidopsis thaliana en particulier, ARF5, 6, 7, 8 et 19 activent l'expression de gènes cibles en réponse à l'auxine. Ces cinq ARF activateurs contrôlent de façon plus ou moins redondante des processus divers au cours du développement de la plante, notamment la régulation des croissances au niveau des méristèmes racinaires et aériens ainsi que la formation des racines latérales ou des méristèmes axillaires.Chacun de ces cinq ARF activateurs présente des patrons d'expression uniques dans chacun des tissus racinaires et aériens, en association avec leurs fonctions particulières. Il est probable que cette expression tissu-spécifique trouve son origine dans un contrôle différencié de leur transcription. Dans cette étude, des régulateurs amonts de la transcription de ARF5, 6, 7, 8 et 19 ont été identifiés par une méthode haut-débit de crible simple hybride en levure (Y1H). Une procédure d'expression transitoire en protoplastes a permis de confirmer que l'expression de chaque ARF activateur est contrôlée par des régulateurs spécifiques, dont la majorité se comportent comme des répresseurs de la transcription des ARF in planta. Parmi les régulateurs identifiés, les facteurs de transcription ont été étudiés grâce à des mutants pour préciser les interactions in planta. Ces mutants montrent des phénotypes développementaux typiques de perturbations de l'auxine dans les racines et les tiges : altérations des cinétiques de croissance, de l'émergence des organes latéraux ou de réponses à l'auxine et modification de l'expression des ARF activateurs.Par ailleurs, ce travail aborde également les dialogues entre les voies de signalisation de l'auxine et des cytokinines, et en particulier le rôle de ces interactions dans le développement des racines et des tiges. Une des interactions identifiées dans le crible Y1H est la répression de ARF7 par CRF10, un gène membre de la famille des "Cytokinin Response Factors". Nous avons mis en évidence l'importance de cette interaction pour le maintien de l'architecture du méristème apical racinaire, pour la sénescence des feuille et pour la réponse phototropique à la lumière bleue dans les hypocotyles. / Auxin regulates plant growth and development through the transcription factors of the AUXIN RESPONSE FACTOR (ARF) gene family. Most notably in Arabidopsis thaliana ARF5, 6, 7, 8 and 19 activate expression of target genes in response to auxin. These five ARF activators control both variable and overlapping processes during plant development including regulation of growth at the root and the shoot apical meristems, lateral root and axillary shoot formation. Each of the five ARF activators shows unique tissue-specific expression patterns in the root and the shoot associated with their distinct functions. This tissue-specific expression is likely derived from the differences in the control of ARF activator transcription. In this study the upstream regulators of ARF5, 6, 7, 8 and 19 transcription were identified. This was achieved by utilizing a high-throughput yeast one-hybrid (Y1H) method. The transient protoplast assay revealed that each ARF activator is controlled by specific transcriptional regulators and that the majority of these regulators are repressors of ARF transcription in planta. Mutants of the regulatory transcription factors were utilized to additionally investigate the interactions in planta. These mutants display auxin-related developmental phenotypes in the root and the shoot including alternations in growth kinetics, emergence of lateral organs, responses to auxin and altered expression of ARF activators. Furthermore, this study additionally focuses on cross-talk between the auxin and cytokinin signaling pathways and its role in root and shoot development. One of the interactions identified in the Y1H screen is a repression of ARF7 by CRF10, a member of the Cytokinin Response Factors gene family. The importance of this interaction in maintaining architecture of the root apical meristem, in leaf senescence and in the phototropic response to blue light in hypocotyls is studied.

Moniliophthora perniciosa é o agente causal da doença vassoura-de-bruxa em cacaueiro (Theobroma cacao). Os sintomas da doença compreendem perda de dominância apical, inchamento e excesso de brotações em ramos novos, reversão de meristemas florais em vegetativos, partenocarpia e lesões necróticas em frutos, sugerindo a ocorrência de alterações hormonais no hospedeiro. A disponibilidade de isolados do biótipo-S capazes de infectar o tomateiro, permitiu a utilização da cultivar miniatura \'Micro-Tom\' (MT) como um modelo para estudo da interação Moniliophthora perniciosa x Solanum lycopersicum. Além de provocar sintomas característicos no MT, a disponibilidade de mutantes e linhas transgênicas introgredidos em MT, com alterações que afetam o metabolismo e sensibilidade hormonal, permitem investigar o papel dos hormônios vegetais no desenvolvimento dos sintomas. Inicialmente, foi avaliada a agressividade de três isolados do biótipo-S no MT, sendo que um isolado de Tiradentes apresentou maior agressividade, com maior incidência dos sintomas, maior engrossamento do caule, redução na altura das plantas, aumento no número de lóculos nos frutos e redução na biomassa radicular. Mutantes com alterações na percepção para auxina (diageotropica e entire) e uma linha transgênica expressando uma citocinina oxidase de Arabidopsis (35S::AtCKX2) diferiram para o engrossamento do caule e distribuição do número de lóculos nos frutos em relação ao MT. A linha transgênica 35S::AtCKX2 diferiu significativamente de MT com menor incidência de infecção. O engrossamento do caule associa-se ao aumento na área do córtex e, principalmente do xilema e floema. A aplicação exógena de citocinina sintética benzil-adenina (BA) e da auxina sintética ácido naftaleno acético (ANA) em MT evocam sintomas similares aos de plantas infectadas com M. perniciosa. Linhas transgênicas repórter de sinalização por citocinina (ARR5::GUS) ou auxina (DR5::GUS) indicaram sinalização diferencial por citocinina a 24 h e 36 h após inoculação (HAI) e 48 HAI por auxina. A infecção por M. perniciosa aumentou os níveis de ácido jasmônico, ácido salicílico (AS) e auxina em MT entre 5 d a 30 DAI, com maior incremento aos 5 DAI, enquanto que o nível de ácido abscísico aumentou aos 20 d e 30 DAI, e AS foi o único detectado em micélio dicariótico do biótipo-S. Genes de biossíntese de citocinina (IPT), ativação (LOG), degradação (CKX) e resposta à citocinina (ARRs e CRF) e auxina (AUX/IAA, ARFs, SAUR e GH3) foram induzidos em MT inoculado de 12 h a 5 DAI, mas com maior acúmulo de transcritos aos 30 DAI. M. perniciosa induziu maior expressão desses genes citados e de biossíntese auxina, nos momentos iniciais da interação (12 h a 5 DAI) em 35S::AtCKX2 do que no MT. O efeito da infecção em aumentar o número de lóculos nos frutos parece ser independente ou downstream a mutação fasciated, Mouse ears e ovate. A mutação Lanceolate parece ter um papel na redução do efeito da infecção em aumentar o número de lóculos. Os resultados obtidos sugerem que a infecção pelo M. perniciosa em MT altere os níveis/sinalização dos hormônios vegetais, principalmente auxina e citocinina, provocando o engrossamento do caule (aumento no xilema, floema e córtex), redução no crescimento e na biomassa radicular e aumento no número de lóculos nos frutos / Moniliophthora pernicisa is the causal agent of witches\' broom disease in cocoa (Theobroma cacao). The disease symptoms comprise loss of apical dominance, thickening and proliferation of axillary shoots, shift from inflorescence into vegetative meristem, parthernocarpy and necrotic lesions on fruits, suggesting a host hormonal imbalance. The availability of an isolated of S-biotype M. perniciosa, which colonizes tomato, enabled the utilization of the miniature tomato (Solanum lycopersicum) cultivar \'Micro-Tom\' (MT) as a suitable model to study the pathosystem M. perniciosa x S. lycopersicum. In addition to the characteristic symptoms of the infection in MT, the availability of mutants and transgenic lines introgessed into MT, with changes in plant metabolism and hormonal sensitivity, enable the investigation of the role of plant hormones in the development of symptoms. Initially, we evaluated the aggressiveness of three S-biotype M. perniciosa isolates. The isolate \'Tiradentes\' showed greater aggressiveness infecting MT, with higher plant infection incidence, greater stem thickening, reduction in plant height, increase in fruit locule number and reduction in root dry weight. Mutants with altered auxin perception (diageotropica e entire) and the transgenic line expressing a cytokinin oxidase gene of arabidopsis (35S::AtCKX2) differed in stem thickening and fruit locule number distribution, as compared to MT. The transgenic line 35S::AtCKX2 differed significantly from MT, showing lower incidence of infection. The thickening of the stem may be related with an increase in area of the cortex, especially xylem and phloem. The exogenous application of synthetic cytokinin benzyl adenine (BA) and auxin naphthalene acetic acid (NAA) in MT induces similar symptoms to plants infected with M. perniciosa. Cytokinin (ARR5::GUS) and auxin (DR5::GUS) signaling reporter transgenic lines revealed differential cytokinin signaling 24 h e 36 h hours after inoculation (HAI) and differential auxin signaling in 48 HAI. Infection of MT by M. perniciosa increased the content of JA, SA and auxin during the development of symptoms from 5 d to 30 DAI, with greater increase at an early stage of symptoms development (5 days after inoculation - DAI), whereas abcisic acid content increased in 20 and 30 DAI, and only AS was detected in dicariotic mycelium of the S-biotype M. perniciosa. Cytokinin biosynthesis (IPT), activating (LOG), and breakdown (CKX) genes and response to cytokynin genes (ARRs e CRF) and auxin (AUX/IAA, ARFs, SAUR e GH3) were induced in MT infected in 12 h a 5 DAI, with greater accumulation of transcripts in 30 DAI. M. perniciosa induced higher levels of IPT, LOG, CKX, ARRs, and CRF genes and auxin biosynthesis genes at an ealry stage of infection (12 h a 5 DAI) in 35S::AtCKX2, as compared to MT. The effect of the infection on increasing fruit locule number seems to be independent or downstream fasciated, Mouse ears and ovate mutation. Lanceolate mutation seems to play a role in reducing M. perniciosa ability of increasing fruit locule number. The results suggest infection of MT by S-biotpye M. perniciosa alters levels/signaling of the hormones, especially auxin and cytokinin, inducing stem thickening (increasing xylem, phloem and cortex), reduction in plant height, root dry weight and increase in fruit locule number

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:36:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1982474 bytes, checksum: 1612e19e8ad39e9083e77817292c4d1a (MD5) Previous issue date: 2013-02-27 / The auxins IAA (indole-3-acetic, natural), 2,4-D (2,4-dichlorophenoxyacetic acid) and 2,4,5-T (2,4,5-trichlorophenoxyacetic acid, the latter two synthetic) were sprayed on corn (Zea mays, monocot) and beans (Phaseolus vulgaris, dicot), in order to investigate some differential responses of the two plant groups as associated to ethylene metabolism. Corn plants treated with the auxins did not produce ethylene, not exhibiting also any senescence symptom. Beans plants, on the other hand, produced large amounts of ethylene following treatment with auxins. Aminoethoxyvinylglycine (AVG) plus Co2+ (ethylene biosynthesis inhibitors) were not able to relieve the epinasty, drying and leaf wrinkling effects in bean plants, but leaf yellowing was considerebly reduced, suggesting this was an ethylene effect. Following spraying with auxins, corn plants showed no production of 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid (ACC), a response shown by beans plants. Therefore in the monocot, auxins seemed not to induce the expression of ACC synthase (ACS) or its activity. When treated with ACC, corn plants failed to produce any trace of ethylene, unlikely bean plants. This suggested that in monocot, auxins seemed also not to induce the expression or activity of ACC oxidase (ACO) or the enzyme is not activated. Potassium ferrocyanide, employed as a source of cyanide ions, was much more toxic to bean plants than to corn and so the monocot seemed to be more resistant than bean plants. Maximum quantum yield of photosystem II (Fv/Fm) and photosynthetic pigments contents kept unchanged in corn plants treated with the auxins. Bean plants showed significant decreases in both variables following spraying with 2,4-D and 2,4,5-T. Decreases in chlorophyll contents in bean plants treated with 2,4-D and 2,4,5-T correlated well with leaf chlorosis what was shown to be due to a more pronounced fall of chlorophyll contents rather than to an increase in carotenoid contents. The xanthophylls (neoxanthin, violaxanthin and anteraxantina) also showed a higher degradation than the alpha and beta carotenes in bean plants treated with 2,4-D and 2,4,5-T. When AVG and Co2+ were supplied together with auxin, no appreciable decrease in either the Fv/Fm ratio or pigment contents was observed, with the exception of alpha carotene. Also the ratio of chlorophyll a to chlorophyll b was also larger in bean plants treated with 2,4-D and 2,4,5-T than in the plants treated with 2,4-D and 2,4,5-T plus AVG and Co2+. The ratio of chlorophyll a to chlorophyll b did not show any significance in bean plants upon treatment with IAA. / As auxinas AIA (ácido indol-3-acético, natural), 2,4-D (ácido 2,4-diclorofenoxiacético) e 2,4,5-T (ácido 2,4,5-triclorofenoxiacético, as duas últimas sintéticas) foram aplicadas em plantas de milho (Zea mays, monocotiledônea) e feijão (Phaseolus vulgaris, dicotiledônea), visando investigarem-se algumas respostas diferenciais dos dois grupos em relação ao metabolismo do etileno. Plantas de milho tratadas com as auxinas não produziram etileno e não exibiram quaisquer sintomas de senescência e epinastia. O feijão produziu bastante etileno após tratamento. Quando se utilizou aminoetoxivinilglicina (AVG) mais Co2+ (inibidores da biossíntese de etileno), a epinastia das plantas de feijão foi mantida mas o amarelecimento das plantas mostrou-se reduzido, deduzindo-se ser o amarelecimento um sintoma da ação do etileno. Após pulverização com as auxinas, o milho não exibiu produção do ácido 1-carboxílico-1- amino-ciclopropano (ACC), fato observado no feijão. Assim, na monocotiledônea, as auxinas parecem não induzir a expressão da sintase do ACC (ACS) ou, pelo menos, sua atividade. Quando tratadas com o ACC, as plantas de milho não produziram qualquer traço de etileno, ao contrário as plantas de feijão. Daí deduzir-se que na monocotiledônea, as auxinas parecem também não induzir a expressão ou atividade da oxidase do ACC (ACO) ou a enzima não é ativada. Empregando-se K4Fe(CN)6 como fonte de íons cianeto, as plantas de milho pareceram se mostrar mais resistentes à intoxicação do que as plantas de feijão. O rendimento quântico máximo de fotossistema II (razão Fv/Fm) e os níveis dos pigmentos fotossintéticos não sofreram alterações em plantas de milho tratadas com as auxinas. As plantas de feijão mostraram quedas significativas em ambas variáveis após pulverização com 2,4-D e 2,4,5-T, mas não com o AIA. A redução nos níveis das clorofilas em plantas de feijão tratadas com 2,4-D e 2,4,5-T relacionou-se com a clorose observada, desde que ocorreu uma degradação mais acentuada das clorofilas do que dos carotenoides. As xantofilas (neoxantina, anteraxantina e violaxantina) também sofreram uma degradação mais acentuada do que o alfa e beta caroteno em plantas de feijão tratadas com 2,4-D e 2,4,5-T. Quando AVG e Co2+ foram fornecidos conjuntamente com as auxinas, não ocorreu queda na razão Fv/Fm e nem no nível dos pigmentos, com exceção do alfa caroteno. A razão entre clorofila a e clorofila b também mostrou-se maior nas plantas de feijão tratadas com 2,4-D e 2,4,5-T do que nas plantas tratadas com 2,4-D e 2,4,5-T mais AVG e Co2+. Nas plantas tratadas com AIA o aumento na razão entre clorofila a e clorofila b não foi significativo.

O acamamento de plantas provoca perdas significativas no rendimento de grãos da cultura da soja e por isso estratégias de manejo para minimizar o acamamento são importante necessidade na agricultura atual. O objetivo desse trabalho foi estudar ação de reguladores de crescimento vegetal sobre o acamamento e outras características agronômicas da cultivar de soja CD 214 RR, em épocas de semeadura e densidades distintas. Foram conduzidos dois experimentos na Estação Experimental da Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Campus Pato Branco. No primeiro experimento foram testados diferentes reguladores de crescimento, sob concentrações distintas. O delineamento experimental foi inteiramente ao acaso com trinta e um tratamentos e quatro repetições. As quatro melhores combinações de reguladores/concentrações neste experimento foram utilizadas no segundo experimento. O segundo experimento foi conduzido em delineamento experimental de blocos ao acaso, com 3 repetições, em um esquema fatorial 5x3x3, em que o primeiro fator correspondeu às quatro combinações de reguladores/concentrações selecionadas no primeiro experimento e, também, a testemunha sem aplicação; o segundo fator correspondeu a três diferentes épocas de semeadura (01 de novembro, 15 de novembro, e 11 de dezembro); o terceiro fator correspondeu a três diferentes densidades de semeadura, em que a população final para cada densidade foi de 200.000, 300.000 e 400.000 plantas ha-1. No primeiro experimento, foram avaliados o acamamento, injúria e estatura de planta, durante o desenvolvimento da cultura. No segundo experimento também foram avaliadas estas variáveis, somente ao final do ciclo da cultura. No primeiro experimento foram coletadas amostras de plantas em 0,45 m2, na área útil da parcela, para posterior determinação dos componentes do rendimento, no estádio R9. Uma amostra foi coletada no estádio R8, representada por 10 plantas por parcela, em que foi obtido o índice de colheita e rendimento biológico aparente. Em ambos os experimentos, no estádio R9 da cultura, houve a colheita do restante da área útil da parcela, para determinação do rendimento de grãos. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância pelo teste F e foram comparados através de testes de comparação de médias. A relação entre variáveis dependentes e independentes foi ajustada através de regressão polinomial. Todos os tratamentos, de todos os seis grupos de reguladors vegetais foram eficientes em controlar o acamamento durante a maior parte do ciclo da cultura. O grupo do precursor de etileno ocasionou maior grau de fitotoxidade à cultura. Os compostos inibidores de auxina, inibidores de protox e bioestimulantes (AIB, GA3 e cinetina) apresentaram bons resultados na redução de estatura e do acamamento, apresentando grau de fitotoxidade leve e rápida recuperação dos sintomas de injúria. Os reguladores trinexapac ethyl (312,5 g ha-1), IBA+GA3+cinetina (0,0375+0,0375+0,0675 g ha-¹) e lactofen (144 g ha-1) resultaram em rendimento de grãos mais elevados. Isoladamente, as três concentrações de ethephon estudadas apresentam menor número de vagens por planta, menor peso de grão e menor rendimento de grãos. Os efeitos de fitorreguladores sobre o rendimento de grãos e componentes foram dependentes dos níveis em que estes foram aplicados sobre as plantas de soja. Onze tratamentos perfizeram o grupo que apresentou os rendimento de grãos mais elevados, entre eles os compostos por trinexapac ethyl (312,5 g ha-1), IBA+GA3+cinetina (0,0375+0,0375+0,0675 g ha-1) e lactofen (144 g ha-1). Entre todos os tratamentos, três concentrações de ethephon estudadas apresentam menor número de vagens por planta, menor peso de grão e menor rendimento de grãos. O lactofen (144 g ha-1) promoveu maior redução em estatura, em plantas semeadas na primeira (01/11/08) e terceira época (11/12/08). Já o cloreto de mepiquat (250 g ha-1)foi mais eficaz na redução de estatura de plantas da terceira época de semeadura (11/12/08). O menor acamamento ocorreu na segunda época de semeadura, na densidade de 200.000 plantas ha-1. Considerando-se a média de densidades e épocas de semeadura, os reguladores TIBA (6 g ha-¹), lactofen (144 g ha-¹) e AIB+GA3+Cinetina (0,0375+0,0375+0,0675 g ha-¹) apresentaram o melhor desempenho na redução do acamamento. O maior rendimento de grãos de soja ocorreu na semeadura de 11 de dezembro, não sendo influenciado pela densidade de plantas nesta época. O menor rendimento de grãos em soja ocorreu na semeadura do início de novembro, na densidade de 400.000 plantas ha-1. No segundo experimento, as plantas de todos os tratamentos com regulador de crescimento não apresentaram sintoma de injúria na avaliação realizada no estádio R1 da cultura. / The lodging of plants causes significant losses in grain yield of soybean and therefore management strategies to minimize the lodging are important in agriculture today. The aim of this work was to study the action of reducers of plant growth on lodging and other agronomic characteristics of soybean CD 214 RR at sowing dates and different densities. Two experiments were conducted at the Experimental Station of the Federal Technological University of Paraná, Pato Branco Campus. In the first experiment, testing different reducers of growth under different concentrations. The experimental design was completely andomized thirty-one treatments and four replicates. The four best combinations of concentrations in this experiment were used in the second experiment. The second experiment was conducted in a randomized block design with 3 replicates in a 5x3x3 factorial design, where the first factor corresponding to four combinations of concentrations selected in the first experiment (and also the control), the second factor corresponded to three different sowing dates (01 November, 15 November, and December 11), the third factor corresponded to three different plant densities in the final population for each density was 200.000, 300.000 and 400.000 plants ha-1. The first experiment examined the lodging, injury and plant height during the development of the culture. In the second experiment also evaluated these variables at the end of the cycle. In the first experiment samples were collected from plants in 0,45 m2 in each parcel, for later determination of yield components, the stage R9. A sample was collected at the R8 stage, represented by 10 plants per plot, which was obtained harvest index and biological yield apparent. In both experiments, the R9 stage of culture, there was the harvest of the remainder of each parcel to determine the yield. The data were subjected to analysis of variance by F test and were compared by means of comparison tests of means. The relationship between dependent and independent variables was adjusted by polynomial regression. All treatments in all six groups retardant were efficient in controlling the lodging for most of the crop cycle. The precursor of ethylene group caused a greater degree of phytotoxicity to the crop. The compounds of auxin inhibitors, protox and biostimulators (IBA, GA3 and kinetin) were able to reduce height and lodging, with slight degree of phytotoxicity and with rapid recovery of symptoms injury. Reducers trinexapac ethyl (312.5 g ha-1), IBA +GA3 +kinetin (0.0375, 0.0375 and 0.0675 g ha-¹) and lactofen (144 g ha-1) resulted in yield higher. Individually, the three concentrations of ethephon studied have a lower number of pods per plant, lower weight and lower grain yield. The effects of growth regulators on yield and components were dependent on the levels at which they are applied on the soybean plants. Eleven treatments accounted for the group the higher yield, among them the trinexapac ethyl (312.5 g ha-1), IBA GA3 kinetin (0.0375, 0.0375 and 0.0675 g ha-¹) and lactofen (144 g ha-1). Among all the treatments, the plants that received the three concentrations of ethephon studied have a lower number of pods per plant, lower weight and lower grain yield. The lactofen (144 g ha- 1) provided greater reduction in height, plants sown in the first (01/11/08) and third time (11/12/08). Since the chloride doses (250 g ha-1) was more effective in reducing plant height of the third sowing date (11/12/08). Smallest lodging occurred in the second sowing date, density of 200.000 plants ha-1. Considering the average densities and sowing dates, regulators TIBA (6 g ha-1), lactofen (144 g ha-1) and IBA +GA3+Kinetin (0.0375+0.0375+0.0675 g ha-1) showed the best performance in reducing lodging. The highest yield of soybean at sowing occurred on December 11 and is not influenced by the density of plants at this time. The lower yield in soybean planting occurred in early November, with a density of 400.000 plants ha-1. In the second experiment, plants of all treatments with growth retardant had no symptoms of injury in the assessment at the R1 stage of culture.

O acamamento de plantas provoca perdas significativas no rendimento de grãos da cultura da soja e por isso estratégias de manejo para minimizar o acamamento são importante necessidade na agricultura atual. O objetivo desse trabalho foi estudar ação de reguladores de crescimento vegetal sobre o acamamento e outras características agronômicas da cultivar de soja CD 214 RR, em épocas de semeadura e densidades distintas. Foram conduzidos dois experimentos na Estação Experimental da Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Campus Pato Branco. No primeiro experimento foram testados diferentes reguladores de crescimento, sob concentrações distintas. O delineamento experimental foi inteiramente ao acaso com trinta e um tratamentos e quatro repetições. As quatro melhores combinações de reguladores/concentrações neste experimento foram utilizadas no segundo experimento. O segundo experimento foi conduzido em delineamento experimental de blocos ao acaso, com 3 repetições, em um esquema fatorial 5x3x3, em que o primeiro fator correspondeu às quatro combinações de reguladores/concentrações selecionadas no primeiro experimento e, também, a testemunha sem aplicação; o segundo fator correspondeu a três diferentes épocas de semeadura (01 de novembro, 15 de novembro, e 11 de dezembro); o terceiro fator correspondeu a três diferentes densidades de semeadura, em que a população final para cada densidade foi de 200.000, 300.000 e 400.000 plantas ha-1. No primeiro experimento, foram avaliados o acamamento, injúria e estatura de planta, durante o desenvolvimento da cultura. No segundo experimento também foram avaliadas estas variáveis, somente ao final do ciclo da cultura. No primeiro experimento foram coletadas amostras de plantas em 0,45 m2, na área útil da parcela, para posterior determinação dos componentes do rendimento, no estádio R9. Uma amostra foi coletada no estádio R8, representada por 10 plantas por parcela, em que foi obtido o índice de colheita e rendimento biológico aparente. Em ambos os experimentos, no estádio R9 da cultura, houve a colheita do restante da área útil da parcela, para determinação do rendimento de grãos. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância pelo teste F e foram comparados através de testes de comparação de médias. A relação entre variáveis dependentes e independentes foi ajustada através de regressão polinomial. Todos os tratamentos, de todos os seis grupos de reguladors vegetais foram eficientes em controlar o acamamento durante a maior parte do ciclo da cultura. O grupo do precursor de etileno ocasionou maior grau de fitotoxidade à cultura. Os compostos inibidores de auxina, inibidores de protox e bioestimulantes (AIB, GA3 e cinetina) apresentaram bons resultados na redução de estatura e do acamamento, apresentando grau de fitotoxidade leve e rápida recuperação dos sintomas de injúria. Os reguladores trinexapac ethyl (312,5 g ha-1), IBA+GA3+cinetina (0,0375+0,0375+0,0675 g ha-¹) e lactofen (144 g ha-1) resultaram em rendimento de grãos mais elevados. Isoladamente, as três concentrações de ethephon estudadas apresentam menor número de vagens por planta, menor peso de grão e menor rendimento de grãos. Os efeitos de fitorreguladores sobre o rendimento de grãos e componentes foram dependentes dos níveis em que estes foram aplicados sobre as plantas de soja. Onze tratamentos perfizeram o grupo que apresentou os rendimento de grãos mais elevados, entre eles os compostos por trinexapac ethyl (312,5 g ha-1), IBA+GA3+cinetina (0,0375+0,0375+0,0675 g ha-1) e lactofen (144 g ha-1). Entre todos os tratamentos, três concentrações de ethephon estudadas apresentam menor número de vagens por planta, menor peso de grão e menor rendimento de grãos. O lactofen (144 g ha-1) promoveu maior redução em estatura, em plantas semeadas na primeira (01/11/08) e terceira época (11/12/08). Já o cloreto de mepiquat (250 g ha-1)foi mais eficaz na redução de estatura de plantas da terceira época de semeadura (11/12/08). O menor acamamento ocorreu na segunda época de semeadura, na densidade de 200.000 plantas ha-1. Considerando-se a média de densidades e épocas de semeadura, os reguladores TIBA (6 g ha-¹), lactofen (144 g ha-¹) e AIB+GA3+Cinetina (0,0375+0,0375+0,0675 g ha-¹) apresentaram o melhor desempenho na redução do acamamento. O maior rendimento de grãos de soja ocorreu na semeadura de 11 de dezembro, não sendo influenciado pela densidade de plantas nesta época. O menor rendimento de grãos em soja ocorreu na semeadura do início de novembro, na densidade de 400.000 plantas ha-1. No segundo experimento, as plantas de todos os tratamentos com regulador de crescimento não apresentaram sintoma de injúria na avaliação realizada no estádio R1 da cultura. / The lodging of plants causes significant losses in grain yield of soybean and therefore management strategies to minimize the lodging are important in agriculture today. The aim of this work was to study the action of reducers of plant growth on lodging and other agronomic characteristics of soybean CD 214 RR at sowing dates and different densities. Two experiments were conducted at the Experimental Station of the Federal Technological University of Paraná, Pato Branco Campus. In the first experiment, testing different reducers of growth under different concentrations. The experimental design was completely andomized thirty-one treatments and four replicates. The four best combinations of concentrations in this experiment were used in the second experiment. The second experiment was conducted in a randomized block design with 3 replicates in a 5x3x3 factorial design, where the first factor corresponding to four combinations of concentrations selected in the first experiment (and also the control), the second factor corresponded to three different sowing dates (01 November, 15 November, and December 11), the third factor corresponded to three different plant densities in the final population for each density was 200.000, 300.000 and 400.000 plants ha-1. The first experiment examined the lodging, injury and plant height during the development of the culture. In the second experiment also evaluated these variables at the end of the cycle. In the first experiment samples were collected from plants in 0,45 m2 in each parcel, for later determination of yield components, the stage R9. A sample was collected at the R8 stage, represented by 10 plants per plot, which was obtained harvest index and biological yield apparent. In both experiments, the R9 stage of culture, there was the harvest of the remainder of each parcel to determine the yield. The data were subjected to analysis of variance by F test and were compared by means of comparison tests of means. The relationship between dependent and independent variables was adjusted by polynomial regression. All treatments in all six groups retardant were efficient in controlling the lodging for most of the crop cycle. The precursor of ethylene group caused a greater degree of phytotoxicity to the crop. The compounds of auxin inhibitors, protox and biostimulators (IBA, GA3 and kinetin) were able to reduce height and lodging, with slight degree of phytotoxicity and with rapid recovery of symptoms injury. Reducers trinexapac ethyl (312.5 g ha-1), IBA +GA3 +kinetin (0.0375, 0.0375 and 0.0675 g ha-¹) and lactofen (144 g ha-1) resulted in yield higher. Individually, the three concentrations of ethephon studied have a lower number of pods per plant, lower weight and lower grain yield. The effects of growth regulators on yield and components were dependent on the levels at which they are applied on the soybean plants. Eleven treatments accounted for the group the higher yield, among them the trinexapac ethyl (312.5 g ha-1), IBA GA3 kinetin (0.0375, 0.0375 and 0.0675 g ha-¹) and lactofen (144 g ha-1). Among all the treatments, the plants that received the three concentrations of ethephon studied have a lower number of pods per plant, lower weight and lower grain yield. The lactofen (144 g ha- 1) provided greater reduction in height, plants sown in the first (01/11/08) and third time (11/12/08). Since the chloride doses (250 g ha-1) was more effective in reducing plant height of the third sowing date (11/12/08). Smallest lodging occurred in the second sowing date, density of 200.000 plants ha-1. Considering the average densities and sowing dates, regulators TIBA (6 g ha-1), lactofen (144 g ha-1) and IBA +GA3+Kinetin (0.0375+0.0375+0.0675 g ha-1) showed the best performance in reducing lodging. The highest yield of soybean at sowing occurred on December 11 and is not influenced by the density of plants at this time. The lower yield in soybean planting occurred in early November, with a density of 400.000 plants ha-1. In the second experiment, plants of all treatments with growth retardant had no symptoms of injury in the assessment at the R1 stage of culture.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-29T13:49:53Z No. of bitstreams: 1 Andresa Priscila Souza Ramos.pdf: 3687585 bytes, checksum: 03a2a3149474293923ca08c0db68bc60 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-29T13:49:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andresa Priscila Souza Ramos.pdf: 3687585 bytes, checksum: 03a2a3149474293923ca08c0db68bc60 (MD5) Previous issue date: 2011-08-26 / The association between bacteria and plants is considered extremely important because it may promote the plant development by providing nutrients, protection, and production of plant growth promoting substances like indole acetic acid (IAA). The sugarcane production is under a great economic and agricultural importance, and increasing its production still depending on several chemical inputs that are expensive and environmentally damaging. A sustainable alternative is the use of beneficial bacteria that may diminish or abolish the use of these inputs and increase agricultural production. Therefore, the objectives of this study were: i) selecting and evaluating IAA producing bacteria, dependent and independent pathway of tryptophan, sugarcane roots plant association in crop fields in Pernambuco, ii) evaluate the influence of niche isolation, the place of cultivation, the cultivation time and host plant genotype on frequency and IAA-producing bacteria; iii) Analyze the genetic variability of IAA-producing bacteria by BOX-PCR, and iv) assess the noncultivable bacterial community sugarcane ratoon-associated v) Evaluate the production of IAA, two endophytic bacteria according to the time. Isolates were studied at four and ten months sugarcane plant cultivation, collected in EECAC Carpina-PE and Petribú factory,Lagoa de Itaenga-PE and isolates from three months on sugarcane plant-ratoon regrowth, collected in EECAC. The results showed that plants from sugarcane crop fields in Pernambuco have a high frequency of bacteria producing IAA in vitro by a tryptophan-dependent and independent pathways, the crop place, cultivation time of the host plant and niche colonization. Bacterial influence on the distribution of IAA-producing bacteria. In addition, the location, time of cultivation of the host plant genotype and bacterial niche colonization influenced the production levels. The strains showed high genetic variability. In sugarcane plant-ratoon, the bacterial population density was higher than in the rizhosphericsoil and root-endophytic bacteria also showed a high frequency capacity to produce IAA in vitro. Analysis of variability and genetic diversity revealed high genetic variability among bacteria producing IAA and the predominance of dominant bacterial groups not grown in soil and inside the roots of sugarcane plant-ratoon grown in Pernambuco. Some strains of root endophytic sugarcane plant, with capacity to produce IAA, were identified as belonging to the genus Enterobacter and Burkholderia / A associação entre bactérias benéficas e plantas é considerada extremamente importante, pois pode promover o desenvolvimento do vegetal através da disponibilização de nutrientes, proteção e produção de substâncias promotoras de crescimento vegetal, como o ácido indol acético (AIA). A canade- açúcar é uma cultura de grande importância agrícola e econômica, e sua produção crescente ainda depende de diversos insumos químicos que são onerosos e prejudicam o ambiente. Uma alternativa sustentável seria a utilização de bactérias benéficas que possam diminuir ou anular o uso desses insumos e incrementar a produção agrícola. Diante disso, os objetivos deste trabalho foram: i) selecionar e avaliar bactérias produtoras de AIA, via dependente e independente de triptofano, associadas a raízes de plantas de cana-de-açúcar cultivadas em Pernambuco; ii) avaliar a influência dos nichos de colonização, do local e tempo de cultivo e do genótipo da planta hospedeira sobre a frequência e produção de bactérias produtoras de AIA; iii) analisar a variabilidade genética de bactérias produtoras de AIA por BOX-PCR; iv) avaliar a comunidade bacteriana não cultivável associada a cana soca; v) e avaliar a produção de AIA, de duas bactérias endofíticas, em função do tempo. Foram estudadas bactérias isoladas aos quatro e dez meses de cultivo de cana planta, coletadas na EECAC- Carpina-PE e na Usina Petribú- Lagoa de Itaenga-PE e linhagens isoladas aos três meses de rebrota na cana soca, coletadas na EECAC. Os resultados demonstraram que as plantas de cana-deaçúcar cultivadas em Pernambuco apresentam alta frequência de bactérias com capacidade de produzir AIA in vitro, via dependente e independente de triptofano, e que o local, tempo de cultivo da planta hospedeira e o nicho de colonização bacteriana influenciaram na distribuição das bactérias produtoras de AIA. Além disso, o local, tempo de cultivo, genótipo da planta hospedeira e o nicho de colonização bacteriana influenciaram nos níveis de produção e as linhagens apresentaram alta variabilidade genética. Na cana soca, a densidade populacional bacteriana foi maior no solo rizosférico do que endofítica de raiz e também apresentaram alta frequência de bactérias com capacidade de produzir AIA in vitro. A análise da variabilidade e diversidade genética revelaram alta variabilidade genética entre as bactérias produtoras de AIA e a predominância de grupos bacterianos dominantes, não cultivados, no solo e no interior das raízes de cana soca, cultivadas em Pernambuco. Algumas linhagens endofíticas de raiz de cana planta, com capacidade de produzir AIA, foram identificadas como pertencentes aos gêneros Burkholderia e Enterobacter

A cana-de-açúcar é uma monocotiledônea poliplóide, alógama que possui baixa taxa reprodutiva devido a dificuldade de florescimento. Devido estas características genéticas e fisiológicas os programas de melhoramento são longos e laboriosos. Alternativamente, modernas aplicações da biotecnologia visam contribuir com o desenvolvimento de novos cultivares. Neste trabalho estudou-se a metodologia de cultura de tecidos a partir de discos de folhas imaturas para o estabelecimento da cultura de calos embriogênicos e regeneração de plantas a partir dos calos embriogênicos e diretamente, a partir de folhas imaturas. O objetivo principal foi contribuir para o desenvolvimento de métodos eficientes para produção de plantas transgênicas a partir de calos e folhas imaturas, considerando-se a crescente necessidade de produção de novos cultivares com características agronômicas específicas. Diversas concentrações de 2,4-D e cinetina em meio MS foram testadas para o estabelecimento de calos altamente embriogênicos e para a indução da desdiferenciação celular nos discos foliares antecedendo a regeneração de plantas. Meios de cultura sem reguladores de crescimento (MS) e com a adição de BAP e ANA foram testados para a regeneração de plantas a partir de discos foliares. Calos embriogênicos com 12 a 20 semanas de cultivo produziram em média 3 a 5 plantas, em meio de regeneração MS. Folhas imaturas apresentaram elevado potencial de regeneração de plantas quando se utilizou 2,4-D em concentrações de 5 e 8 mg/L nos períodos de 5 e 8 dias no escuro. Houve indução a formação de embriões somáticos que resultaram em média 12 a 16 plantas por explante no período total de 7 a 10 semanas. Além disso, foi testado o pré-tratamento dos discos foliares em meio MS3K, contendo 2,4-D (3mg/L) e cinetina (0,1 mg/L), antes da transferência do discos para meio de regeneração MS. Os discos submetidos a este pré-tratamento durante 14, 21 e 28 dias apresentaram aumento significativo na eficiência de regeneração de plantas, variando em média de 41 a 50 plantas por disco foliar nas variedades RB835089 e RB855156. A redução no tempo para obtenção de plantas aliado ao aumento na média de plantas obtidas é a base para aumentar a eficiência de transformação genética de plantas. Experimentos de cotransformação dos genes neo e comt(AS), foram realizados por biolística. Em plantas regeneradas a partir de folhas imaturas da variedade RB835486, as análises de PCR confirmaram a incorporação do gene marcador neo em 57 e 90% das plantas em meio seletivo com geneticina (30 mg/L), sendo que a maior eficiência de regeneração de transgênicos (90%) foi obtida no pré-tratamento com o meio MS3K. Das plantas transgênicas para o gene neo, 7 e 38% também foram confirmadas para a incorporação do gene comt(AS). Nas plantas regeneradas a partir de calos embriogênicos em meio seletivo, as análises de PCR detectaram somente a incorporação do gene neo, o que ocorreu em 52% das plantas analisadas. Os resultados obtidos mostram que a cultura de discos de folhas imaturas para o processo de transformação genética por biolística é uma metodologia viável, rápida e menos onerosa, quando comparada com a cultura de calos embriogênicos. / Sugarcane is a polyploidy monocot and allogamous species that has low reproductive rate due to the difficulty of flowering. Because of these genetic and physiological characteristics breeding program takes long time and demand hard labor. Alternatively, modern biotechnology approaches contribute to the development of new cultivars. In this work we studied the methodology of plant tissue culture from immature leaf discs to establish callus culture and plant regeneration from those calli and from immature leaves, directly. The main objective was to contribute to the development of efficient methods to produce transgenic plants from callus and immature leaves, due to the growing need to produce new cultivars with specific agronomics traits. MS medium with different concentrations of 2,4-D and kinetin were tested to obtain highly embryogenic calli and to induce cellular dedifferentiation in the immature leaf discs prior to plant regeneration. Culture media without growth regulators (MS) and with the addition of BAP and NAA were tested for plant regeneration from leaf discs. Callus culture with 12 to 20 weeks resulted on average 3 to 5 plants on regeneration medium designed as MS. Immature leaves showed a high potential for plant regeneration when 2,4-D at concentrations of 5 and 8 mg/L in periods of 5 and 8 days in the dark. There were inducing of somatic embryos that resulted in average 12 to 16 plants per explant in the total period of 7 to 10 weeks. In addition, we tested the pre-treatment of leaf discs in MS3K medium which contain 2,4-D (3 mg/L) and kinetin (0.1 mg/L) before transfering to plant regeneration MS medium . The discs submitted to this pretreatment for 14, 21 and 28 days showed significant increase in the efficiency of plant regeneration, with on average of 41 to 50 plants per leaf disc in varieties RB835089 and RB855156. The reduction of time to obtain plants coupled with the increase of plants obtained is the basis for increasing the efficiency of plant genetic transformation. Co-transformation with genes neo and comt(AS), were performed by biolistics. Plants regenerated from immature leaves of the variety RB835486, PCR analysis confirmed the incorporation of the neo selection marker gene in 57 and 90% of the plants on selective medium with geneticin (30 mg/L), the higher efficiency of transgenic plants (90%) was obtained on pre-treatment in MS3K medium. Transgenic plants for the neo gene, 7 and 38% were also confirmed for the incorporation of comt (AS). PCR analysis of candidates transgenic plants from callus growing on selective medium, revelled only the insertion of the neo gene, which occurred in 52% of the analyzed plants. The results of this work showed that the approach of using immature leaf discs to obtain plant genetic transformation by biolistics methodology is a viable, cheaper and faster than using embryogenic callus.

Os microRNAs (miRNAs) são pequenos RNAs endógenos não codantes de 21-24 nucleotídeos (nt) que regulam a expressão gênica de genes-alvos. Eles estão envolvidos em diversos aspectos de desenvolvimento da planta, tanto na parte aérea, quanto no sistema radicular. Entre os miRNAs, o miRNA156 (miR156) regula a família de fatores de transcrição SQUAMOSA Promoter-Binding Protein-Like (SPL) afetando diferentes processos do desenvolvimento vegetal. Estudos recentes mostram que a via gênica miR156/SPL apresenta efeito positivo tanto no aumento da formação de raízes laterais, quanto no aumento de regeneração de brotos in vitro a partir de folhas e hipocótilos em Arabidopsis thaliana. Devido ao fato de que a origem da formação de raiz lateral e a regeneração in vitro de brotos a partir de raiz principal compartilham semelhanças anatômicas e moleculares, avaliou-se no presente estudo se a via miR156/SPL, da mesma forma que a partir de explantes aéreos, também é capaz de influenciar na regeneração de brotos in vitro a partir de explantes radiculares. Para tanto foram comparados taxa de regeneração, padrão de distribuição de auxina e citocinina, análises histológicas e histoquímicas das estruturas regeneradas em plantas com via miR156/SPL alterada, incluindo planta mutante hyl1, na qual a produção desse miRNA é severamente reduzida. Além disso, foi avaliado o padrão de expressão do miR156 e específicos genes SPL durante a regeneração de brotos in vitro a partir da raiz principal de Arabidopsis thaliana. No presente trabalho observou-se que a alteração da via gênica miR156/SPL é capaz de modular a capacidade de regeneração de brotos in vitro a partir de raiz principal de Arabidopsis thaliana e a distribuição de auxina e citocinina presente nas células e tecidos envolvidos no processo de regeneração. Plantas superexpressando o miR156 apresentaram redução no número de brotos regenerados, além de ter o plastochron reduzido quando comparado com plantas controle. Adicionalmente, plantas contento o gene SPL9 resistente à clivagem pelo miR156 (rSPL9) apresentaram severa redução na quantidade de brotos, além de terem o plastochron alongado. Interessantemente, plantas mutantes hyl1-2 e plantas rSPL10 não apresentaram regeneração de brotos ao longo da raiz principal, mas sim intensa formação de raízes laterais e protuberâncias, respectivamente, tendo essa última apresentado indícios de diferenciação celular precoce. Tomados em conjunto os dados sugerem que o miR156 apresenta importante papel no controle do processo de regeneração de brotos in vitro. Entretanto, esse efeito é mais complexo em regeneração in vitro a partir de raízes do que a partir de cotilédones ou hipocótilos. / MicroRNAs (miRNAs) are endogenous small non-coding RNAs of 21-24 nucleotides (nt) in length that regulate target gene expression. They are involved in many aspects of plant development, both in the shoot and in the root systems. Among miRNAs, miRNA156 (miR156) regulates SQUAMOSA Promoter Binding-Like (SPL) transcription factor family affecting different plant development processes. Recent studies have shown that the miR156/SPL pathway has a positive effect both in the increase of lateral root formation and regeneration of shoots from leaves and hypocotyls in Arabidopsis thaliana. Because the origin of lateral root formation and in vitro shoot regeneration from primary root share similar anatomical and molecular features, in the present study was evaluated whether the miR156/SPL pathway, in the same manner that from aerial explants, is also able to influence the in vitro shoot regeneration from root explants. For this, it was compared regeneration rates, distribution pattern of auxin and cytokinin, histological and histochemical analyses of the structures regenerated in plants in with the miR156/SPL pathway is modified, including the mutant hyl1-1, in which the biosynthesis of this miRNA is severely reduced. Besides that, it was evaluated the expression pattern of miR156 and specific SPL target genes during in vitro shoot regeneration from primary roots of Arabidopsis it was observed that the alteration on the miR156/SPL pathway is capable to modulate in vitro shoot regeneration from the primary root of Arabidopsis and the distribution of auxin and cytokinin at the tissues and cells involved in the regeneration process. Plants overexpressing the miR156a have shown reduction in the number of regenerated shoots, and displayed a reduction in plastochron when compared with wild type plants. Additionally, plants expressing cleavage-resistant form of SPL9 (rSPL9) presented severe reduction in the amount of shoots, and extended plastochron. Interestingly, mutant hyl1-2 and plants rSPL10 did not show any shoot regeneration along the root, but high formation of lateral roots and protuberances, respectively, having rSPL10 presented evidence of precocious cell differentiation. Taken together, these data suggest that de miR156 and SPLs have an important role in the control the in vitro shoot regeneration process. However, its effect is somehow more complex in roots than in cotyledons or hypocotyls.