Existe un gran interés por estudiar productos naturales bioactivos que ofrezcan una alternativa sustentable para el control de las enfermedades en cultivos. El propóleos y los aceites esenciales se presentan como candidatos promisorios en tal sentido, ya que poseen compuestos derivados del metabolismo secundario vegetal con actividad biológica. No obstante, las investigaciones al respecto son escasas. En este contexto, el objetivo de esta tesis fue estudiar de forma integral las características de extractos de propóleos y de aceites esenciales de orégano, su actividad antimicrobiana individual y combinada frente a diversos fitopatógenos y su acción fitoinhibitoria sobre propágulos de especies cultivadas. Para esto, el esquema de trabajo comenzó con la bioprospección de distintos extractos de propóleos (EP), así como de aceites esenciales de orégano (AEO). Las muestras presentaron diversas características, destacándose que todas contenían una abundante cantidad de compuestos bioactivos pertenecientes al grupo de los fenoles en los EP, y de los terpenos en los AEO. Luego, se probaron in vitro las propiedades antimicrobianas del EP y del AEO frente a fitopatógenos aislados de propágulos hortícolas y caracterizados morfológica y genotípicamente. Ambos productos mostraron diferencias en su eficacia y forma de actuar frente a Penicillium allii y a Sclerotinia sclerotiorum. El hallazgo más novedoso de estos estudios fue que la combinación de EP con AEO tuvo un efecto antifúngico sinérgico frente a los mencionados patógenos. Por otro lado, también se probó la acción antibacteriana del EP sobre bacterias fitopatógenas. Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis, Xanthomonas gardneri, X. vesicatoria y Pseudomonas corrugata resultaron sensibles a dicho producto. En los estudios referidos a las propiedades fitoinhibitorias del EP y del AEO sobre propágulos de lechuga (Lactuca sativa), ajo (Allium sativum) y poroto pallares (Phaseolous lunatus), se evidenció que existen diferencias en su tolerancia a la aplicación de los productos estudiados. Estos ensayos permitieron seleccionar formulaciones a base de EP y/o de AEO sin efectos adversos para dichos disemínulos, lo que fue fundamental para evitar comprometer su calidad fisiológica. Por último, a través de estudios in vivo, se determinó que la combinación de EP con AEO disminuyó la incidencia y la severidad de la mufa del ajo causada por P. allii en bulbillos, y de moho blanco causado por S. sclerotiorum en semillas de poroto pallares. Estos resultados constituyeron el primer reporte respecto de la actividad antifúngica in vivo del EP combinado con AEO frente a las mencionadas enfermedades. El trabajo realizado en esta tesis, además de ser de gran interés respecto de las características y propiedades del EP y del AEO, reporta por primera vez la acción antifúngica sinérgica que se logra al combinarlos. Los resultados obtenidos demostraron el gran potencial que poseen ambos productos para el control de enfermedades en las semillas, lo que permitirá avanzar en el desarrollo de alternativas sustentables para el manejo de fitopatógenos en la horticultura. / In recent years, there has been a growing interest in the use of biofungicides as safe and effective alternatives for crop protection. Propolis and essential oils are potential candidates, due to their biological activity related to the secondary metabolites they content. However, research in this area is scarce. The aim of this thesis was to comprehensively study the characteristics of propolis extracts and oregano essential oils, their individual and combined antimicrobial activity against several phytopathogens, and their phytoinhibitory action on plant crop propagules. Accordingly, a work scheme was followed. It began with the bioprospection of different samples of propolis extracts (PE), as well as of different oregano essential oils (OEO). The samples showed different characteristics, all containing a large number of bioactive compounds from the group of phenols in PE and terpenes in OEO. The antimicrobial properties of PE and OEO were then tested in vitro against phytopathogens isolated from horticultural seeds previously characterized morphologically and genotypically. Both products showed differences in their efficacy and mode of action against Penicillium allii and Sclerotinia sclerotiorum. The most significant finding was that the combination of PE with OEO had a synergistic antifungal effect against the fungi mentioned. On the other hand, the antibacterial activity of PE against several phytopathogenic bacteria was also demonstrated. Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis, Xanthomonas gardneri, X. vesicatoria, and Pseudomonas corrugata showed sensitivity to this product. Studies on the phytoinhibitory properties of PE and OEO over lettuce (Lactuca sativa), garlic (Allium sativum), and lima bean (Phaseolous lunatus) propagules showed that there are differences in the tolerance of these structures to the tested products. These assays allowed selecting formulations based on PE and/or OEO without evidencing adverse effects on the seeds, which was crucial to avoid compromising their physiological quality. Finally, through in vivo studies, it was determined that the combination of PE with OEO reduced the incidence and severity of blue mold caused by P. allii in garlic bulbs and of white mold caused by S. sclerotiorum in lima bean seeds. These results led to the first report of in vivo antifungal activity of PE combined with OEO against those diseases. This work provides valuable information on the characteristics and properties of PE and OEO. It also proves the synergistic antifungal action exerted when combining them. The results reported show the significant potential of both products to control seed disease. These findings will allow developing sustainable alternatives for the management of phytopathogens in horticulture.

El objetivo del presente informe, es desarrollar un plan de negocio para la empresa DNA Biotecnología, que busca introducir un biofungicida en el mercado nacional. La necesidad de este producto surge del sector exportador de frutas frescas y tiene posibilidades de expandirse al sector productor (no exportador), tanto de frutas como hortalizas y también al extranjero. Las altas pérdidas económicas que se tienen debido a la pudrición de la fruta, que en algunos casos alcanza el 20%, han llevado a las empresas a buscar una alternativa sustentable, que les permita prolongar la calidad de la fruta e ingresar sus productos a los mercados más exigentes en términos sanitarios, entregando a los consumidores una fruta que no posee residuos químicos. Por ejemplo, para el caso de la uva de mesa, el porcentaje de pérdidas representa cerca de US$120 millones. Para desarrollar el plan de negocio de este biofungicida, se realizó en primera instancia un estudio de mercado para detectar los diferentes segmentos a los cuales apuntaría el producto, las características y el crecimiento del mercado nacional, las tendencias internacionales, un análisis interno de la empresa y finalmente identificar a los principales competidores. Del análisis efectuado se desprende que el tamaño potencial del mercado chileno es de US$32 millones anuales con un crecimiento del 4% anual, siendo en el extranjero mayor debido al aumento en el consumo de productos orgánicos en los países desarrollados. Los segmentos a los que apunta el producto son en primer lugar las grandes empresas exportadoras de uvas, kiwis y cerezas; y en segunda instancia pequeñas empresas productoras-exportadoras que se encuentren en zonas geográficamente lejanas. Las ventajas competitivas de este producto frente a otras alternativas de control son: eficacia en el control de Botrytis y Pudrición Acida, evita desarrollo de resistencia, no tiene carencia y es seguro para el operador y el medio ambiente. Una vez definido el producto, se analizan las estrategias de ingreso, marketing y comercialización del biofungicida, a través de distribuidores locales, avisos publicitarios en revistas especializadas y venta directa. Estos puntos representan un aspecto fundamental para el éxito del negocio, por tratarse de un producto nuevo, que no posee el respaldo de una marca conocida. Luego se detallan las estrategias competitivas que debe seguir la empresa para iniciar y mantener el negocio en el largo plazo, como son: posicionamiento de la marca, aprovechamiento de la curva de experiencia, innovación tecnológica y desarrollo de canales de distribución. Finalmente se efectúa un análisis financiero del proyecto con las proyecciones de venta para los primeros 5 años. Si bien, el proyecto entrega un VPN de US$210.000, es necesario poner énfasis en la capacidad de producción de la empresa, ya que ésta limita las ventas y puede afectar el precio del producto. Por otro lado, se obtuvo una tasa interna de retorno de 59% y un periodo de recuperación de la inversión de 5 años.

Made available in DSpace on 2016-08-12T19:15:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Renata DamascenoMoura.pdf: 1585836 bytes, checksum: 46aa646391a0b24176cc1eebf422215a (MD5) Previous issue date: 2007-05-05 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The aim this study was to evaluate the effect of the application of biological, alternative and chemical products on the control of postharvest diseases and conservation of Cantaloupe melon. In the control experiment in vitro (Test of Antagonist) was verified the ocorrence of antagonistic between isolates of Trichoderma (SN11, T15, T25, TR2) with relation the all pathogenic isolates to melon (Fusarium sp, Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Rhizopus stlonifer and Lasiodiplodia theobromae). For the treatments, the most effective in the inhibition of the fungi mycelial growth were the nature fungicide 20 mL-1 and Lippia sidoides, that were effectives in 100% to all evaluated fungi; the Cymbopogum citratus was only less effective on the A. flavus fungi (75,3%) and the Imazalil fungicide has lower efficiency on the R stolonifer fungi (1,54%). The treatment with nature fungicide 2mL-1 has higher efficiency in relation to Fusarium sp and L. theobromae, with inhibitions of 88,9 and 86,2% respectively, and lower efficciency on the R. stolonifer (3,3%). In assay in vivo it was used split spot in a completely randomized design, with three replicates and three fruits for treatment. In the spots were alloted the periods of storage (0, 7, 14, 21 and 28 days) and the subplots, the treatments (Trichoderma + hipoclorito), (Trichoderma without hipoclorito), (nature fungicide 20 mL-1), (nature fungicide 2 mL-1), (essential oil of Cymbopogum citratus 2 mL-1), (essential oil of Lippia sidoides 2 mL-1), (Chemical Imazalil 1 mL-1) and (Control - application of destiled water). After the treatments, the fruits were conservated in boxes of paper, it using modify atmosphere with poliméricos films xtend and stored in a temperature of 6°C and UR 90±5%. The fruits were evaluated with relation to incidence of diseases, external and internal appearences, color, loss of matter fresh, pulp firmness, soluble solids, total soluble sugar, pH and titritable total acidity at 7, 14, 21 and 28 days after the period of storage of three days at 22º C ± 2º C and UR of 50% ± 5%. It was observed significant interation between treatments and storage time for occurence of disease, extern and intern appearence, color, titritable total acidity, pH and soluble solids. For the variable loss of fresch mass, it was verified that the treated fruits with nature fungicide 20 and 2 mL.L-1, Lippia sidoides and Cymbopogum citratus presented lower values, did not differing between them nor of the treatment with destiled water. The pulp firmness of treated fruits with Trichoderma (T1) presented value of 26,19 N and differed only of Trichoderma without hipoclorito (T2) and Cymbopogum citratus (T5), that showed fruits less firm (20,51 and 22,72 N, respectively). There was not statistical difference between treatments for the variables: soluble solids and total soluble sugar. The nature fungicide 20 mL1 Trichoderma with hipoclorito, Lippia sidoides and Imazalil were the treatments most effectives in the control of postharvest diseases of Cantaloupe hybrids melon ( Hy Mark ) / Objetivou-se estudar o efeito da aplicação de produtos biológicos, alternativos e químicos no controle de doenças pós-colheita e conservação de melões Cantaloupe. No ensaio de controle in vitro (Teste de Antagonismo) foi possível verificar a ocorrência de antagonismo entre os isolados de Trichoderma (SN11, T15, T25, TR2) em relação a todos os isolados patogênicos ao melão (Fusarium sp, Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Rhizopus stlonifer e Lasiodiplodia theobromae). Quanto aos tratamentos os mais efetivos na inibição do crescimento micelial dos fungos foram o fungicida natural a 20. mL-1, e alecrim pimenta nos quais foram efetivos em 100% para todos os fungos avaliados, o capim citronela foi apenas menos efetivo sobre o fungo A. flavus (75,3%) e o fungicida Imazalil teve menor eficiência sobre o fungo R stolonifer (1,54%). O tratamento com fungicida natural a 2 mL-1teve maior eficiência em relação aos fungos Fusarium sp e L. theobromae, com inibições de 88,9 e 86,2 % respectivamente, e menor eficiência sobre o fungo R. stolonifer (3,3%). Para o experimento in vivo o delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado em parcelas subdivididas com três repetições e três frutos por tratamento. Nas parcelas foram alocados os períodos de armazenamento (0, 7, 14, 21, 28 dias) e nas subparcelas os seguintes tratamentos (Trichoderma + hipoclorito), (Trichoderma sem hipoclorito), (fungicida natural 20 mL-1), (fungicida natural 2 mL-1), (óleo essencial de capim citronela 2 mL-1), (óleo essencial de alecrim pimenta 2 mL-1), (Químico Imazalil 1mL-1) e (Testemunha- aplicação de água destilada). Após os tratamentos os frutos foram acondicionados em caixas de papelão, usando-se também atmosfera modificada com filmes poliméricos x-tend e armazenados sob refrigeração com temperatura de 6°C e UR 90±5%. As avaliações nos frutos foram realizadas para avaliação de doenças, aparência externa e interna, cor, perda de matéria fresca, firmeza de polpa, sólidos solúveis, açúcares solúveis totais, pH e acidez titulável realizadas a 7, 14, 21, e 28 dias após o período de prateleira de três dias a 22º C ± 2º C e UR de 50% ± 5%. Observou-se, interação significativa entre os tratamentos e o tempo de armazenamento para incidência de doença, aparência externa e interna, cor, acidez titulavel, pH, na relação sólidos solúveis e acidez titulavel. Para variável perda de massa fresca verificou-se que os frutos tratados com fungicida natural 20 e 2 mL.L-1, alecrim pimenta e capim citronela apresentaram os menores valores de perda de massa fresca, não diferindo entre si e nem do tratamento com água. Para firmeza de polpa frutos tratados com Trichoderma (T1) apresentaram firmeza entorno de 26,19 N, diferindo apenas de Trichoderma sem hipoclorito (T2) e capim citronela (T5) que proporcionaram frutos menos firmes 20,51 e 22,72 N respectivamente. Não foi observada diferença estatística entre os tratamentos pelo teste Tukey para as variáveis sólidos solúveis e açúcares solúveis totais. Os tratamentos que se mostraram mais efetivos no controle de doenças em pós-colheita do melão Cantaloupe híbrido Hy Mark foram fungicida natural a 20 mL1,Trichoderma com hipoclorito, alecrim pimenta e Imazalil

Made available in DSpace on 2016-08-12T19:18:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Renata DamascenoMoura.pdf: 1585836 bytes, checksum: 46aa646391a0b24176cc1eebf422215a (MD5) Previous issue date: 2007-05-05 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The aim this study was to evaluate the effect of the application of biological, alternative and chemical products on the control of postharvest diseases and conservation of Cantaloupe melon. In the control experiment in vitro (Test of Antagonist) was verified the ocorrence of antagonistic between isolates of Trichoderma (SN11, T15, T25, TR2) with relation the all pathogenic isolates to melon (Fusarium sp, Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Rhizopus stlonifer and Lasiodiplodia theobromae). For the treatments, the most effective in the inhibition of the fungi mycelial growth were the nature fungicide 20 mL-1 and Lippia sidoides, that were effectives in 100% to all evaluated fungi; the Cymbopogum citratus was only less effective on the A. flavus fungi (75,3%) and the Imazalil fungicide has lower efficiency on the R stolonifer fungi (1,54%). The treatment with nature fungicide 2mL-1 has higher efficiency in relation to Fusarium sp and L. theobromae, with inhibitions of 88,9 and 86,2% respectively, and lower efficciency on the R. stolonifer (3,3%). In assay in vivo it was used split spot in a completely randomized design, with three replicates and three fruits for treatment. In the spots were alloted the periods of storage (0, 7, 14, 21 and 28 days) and the subplots, the treatments (Trichoderma + hipoclorito), (Trichoderma without hipoclorito), (nature fungicide 20 mL-1), (nature fungicide 2 mL-1), (essential oil of Cymbopogum citratus 2 mL-1), (essential oil of Lippia sidoides 2 mL-1), (Chemical Imazalil 1 mL-1) and (Control - application of destiled water). After the treatments, the fruits were conservated in boxes of paper, it using modify atmosphere with poliméricos films xtend and stored in a temperature of 6°C and UR 90±5%. The fruits were evaluated with relation to incidence of diseases, external and internal appearences, color, loss of matter fresh, pulp firmness, soluble solids, total soluble sugar, pH and titritable total acidity at 7, 14, 21 and 28 days after the period of storage of three days at 22º C ± 2º C and UR of 50% ± 5%. It was observed significant interation between treatments and storage time for occurence of disease, extern and intern appearence, color, titritable total acidity, pH and soluble solids. For the variable loss of fresch mass, it was verified that the treated fruits with nature fungicide 20 and 2 mL.L-1, Lippia sidoides and Cymbopogum citratus presented lower values, did not differing between them nor of the treatment with destiled water. The pulp firmness of treated fruits with Trichoderma (T1) presented value of 26,19 N and differed only of Trichoderma without hipoclorito (T2) and Cymbopogum citratus (T5), that showed fruits less firm (20,51 and 22,72 N, respectively). There was not statistical difference between treatments for the variables: soluble solids and total soluble sugar. The nature fungicide 20 mL1 Trichoderma with hipoclorito, Lippia sidoides and Imazalil were the treatments most effectives in the control of postharvest diseases of Cantaloupe hybrids melon ( Hy Mark ) / Objetivou-se estudar o efeito da aplicação de produtos biológicos, alternativos e químicos no controle de doenças pós-colheita e conservação de melões Cantaloupe. No ensaio de controle in vitro (Teste de Antagonismo) foi possível verificar a ocorrência de antagonismo entre os isolados de Trichoderma (SN11, T15, T25, TR2) em relação a todos os isolados patogênicos ao melão (Fusarium sp, Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Rhizopus stlonifer e Lasiodiplodia theobromae). Quanto aos tratamentos os mais efetivos na inibição do crescimento micelial dos fungos foram o fungicida natural a 20. mL-1, e alecrim pimenta nos quais foram efetivos em 100% para todos os fungos avaliados, o capim citronela foi apenas menos efetivo sobre o fungo A. flavus (75,3%) e o fungicida Imazalil teve menor eficiência sobre o fungo R stolonifer (1,54%). O tratamento com fungicida natural a 2 mL-1teve maior eficiência em relação aos fungos Fusarium sp e L. theobromae, com inibições de 88,9 e 86,2 % respectivamente, e menor eficiência sobre o fungo R. stolonifer (3,3%). Para o experimento in vivo o delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado em parcelas subdivididas com três repetições e três frutos por tratamento. Nas parcelas foram alocados os períodos de armazenamento (0, 7, 14, 21, 28 dias) e nas subparcelas os seguintes tratamentos (Trichoderma + hipoclorito), (Trichoderma sem hipoclorito), (fungicida natural 20 mL-1), (fungicida natural 2 mL-1), (óleo essencial de capim citronela 2 mL-1), (óleo essencial de alecrim pimenta 2 mL-1), (Químico Imazalil 1mL-1) e (Testemunha- aplicação de água destilada). Após os tratamentos os frutos foram acondicionados em caixas de papelão, usando-se também atmosfera modificada com filmes poliméricos x-tend e armazenados sob refrigeração com temperatura de 6°C e UR 90±5%. As avaliações nos frutos foram realizadas para avaliação de doenças, aparência externa e interna, cor, perda de matéria fresca, firmeza de polpa, sólidos solúveis, açúcares solúveis totais, pH e acidez titulável realizadas a 7, 14, 21, e 28 dias após o período de prateleira de três dias a 22º C ± 2º C e UR de 50% ± 5%. Observou-se, interação significativa entre os tratamentos e o tempo de armazenamento para incidência de doença, aparência externa e interna, cor, acidez titulavel, pH, na relação sólidos solúveis e acidez titulavel. Para variável perda de massa fresca verificou-se que os frutos tratados com fungicida natural 20 e 2 mL.L-1, alecrim pimenta e capim citronela apresentaram os menores valores de perda de massa fresca, não diferindo entre si e nem do tratamento com água. Para firmeza de polpa frutos tratados com Trichoderma (T1) apresentaram firmeza entorno de 26,19 N, diferindo apenas de Trichoderma sem hipoclorito (T2) e capim citronela (T5) que proporcionaram frutos menos firmes 20,51 e 22,72 N respectivamente. Não foi observada diferença estatística entre os tratamentos pelo teste Tukey para as variáveis sólidos solúveis e açúcares solúveis totais. Os tratamentos que se mostraram mais efetivos no controle de doenças em pós-colheita do melão Cantaloupe híbrido Hy Mark foram fungicida natural a 20 mL1,Trichoderma com hipoclorito, alecrim pimenta e Imazalil