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Avaliação de isolados de Trichoderma spp. para controle de Phytophthora nicotianae /

Melo, Jaila Ferreira. January 2015 (has links)
Orientador: Kátia Cristina Kuppper / Coorientador: Eduardo da Silva Martins / Banca: Flavia Rodrigues Alves Patricio / Banca: Margarete Camargo / Resumo: A cultura da laranja no Brasil é afetada por várias doenças, como a gomose, causada por Phytophtora nicotianae Breda de Haan (synonymous whit P. parasítica Dast.), cujo controle é comumente realizado com aplicações de fungicidas e medidas de exclusão. Porém, devido aos custos financeiros e problemas ambientais ocasionados pelo uso intenso destas aplicações, faz-se necessário a busca por métodos alternativos de controle. Este trabalho teve por objetivo avaliar 50 isolados de Trichoderma spp. como antagonista de P. nicotianae, sendo que os isolados foram avaliados, através da produção de compostos antimicrobianos por meio destes microrganismos, além da realização de um bioensaio com plântulas de alfafa. No cultivo pareado observou-se que todos os isolados inibiram o crescimento micelial do fitopatógeno. Na produção de compostos antimicrobianos, 41 isolados produziram compostos voláteis utilizando dextrose como fonte de carbono. No entanto, em estudos posteriores, foi verificado que a utilização de sacarose ou maltose como fontes de carbono, aumentou a produção destes compostos. Sete isolados de Trichoderma produziram compostos termoestáveis e 14 produziram compostos antimicrobianos livres de células do antagônico. No bioensaio com plântulas de alfafa foi observado que quatro isolados de Trichoderma inibiram a formação de esporângios e de micélios do fitopatógeno. Diante dos resultados obtidos, concluiu-se que as avaliações in vitro com relação à produção de compostos antimicrobianos pelos isolados de Trichoderma e o bioensaio com plântulas de alfafa mostraram capacidade para selecionar isolados com potencial para o controle de P. nicotianae. Os isolados TB12, TB14, TB28 e TB 30 foram os que proporcionaram maior controle da doença / Abstract: - Orange crops in the Brazil are affected by various diseases such as gummosis caused by Phytophtora nicotianae Breda de Haan (synonymous whit P. parasítica Dast.), which is controlled by chemical fungicides. However, the high costs and environmental problems caused by the intensive use of these fungicides have led to the search for alternative methods of control. The objective of this study was to evaluate the antagonistic activity of 50 Trichoderma spp. isolates against P. nicotianae by the production of antimicrobial compounds and an alfalfa seedling bioassay. The paired culture showed that all isolates tested inhibited the mycelial growth of the pathogen. In the production of antimicrobial compounds, 41 isolates produced volatile compounds using dextrose as carbon source; however, further assays showed that the use of sucrose or maltose as carbon source increases the production of these compounds. Seven isolates of Trichoderma spp. produced thermostable compounds and 14 isolates produced cell-free culture antimicrobial compounds of the antagonist. In the alfalfa seedling bioassay, four isolates of Trichoderma spp. inhibited the formation of sporangia and mycelia growth. The evaluation in vitro concerning to the antimicrobial compound production by the Trichoderma spp. isolates and the alfalfa seedling bioassay both were able to select biocontrol agents to control of P. nicotianae. The Trichoderma spp. isolates, TB12, TB14, TB28, and TB30 presented the best disease control / Mestre
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Mecanismos de ação e influência de nutrientes na atividade antagônica de Aureobasidium pullulans à Geotrichum citri-aurantii /

Klein, Mariana Nadjara. January 2016 (has links)
Orientador: Katia Cristina Kupper / Banca: Sérgio Florentino Pascholati / Banca: João Martins Pizauro Junior / Banca: Rita de Cássia Panizzi / Banca: Sandra Regina Ceccato Antonini / Resumo: The biocontrol efficiency of Aureobasidium pullulans strain ACBL-77 was evaluated against Geotrichum citri-aurantii, the causal agent of sour rot in citrus, and their interactions were studied in vitro and in vivo. For this purpuse, were evaluated (i) the biocontrol efficiency of A. pullulans ACBL-77 against the pathogen; (ii) the effect of different culture media on the production of yeast cells; (iii) the incorporation of nutritional sources in optimizing the antagonistic activity; (iv) the competition for nutrients between the microorganisms; (v) the effect of nutrients on yeast cell and biofilm production and their relation in the biocontrol of disease; (vi) the survival of yeast in citrus fruits; (vii) the interaction between the microorganisms by scanning electron microscopy; (viii) the effect of A. pullulans applications in the citrus fruits quality; (ix) the effect of ACBL-77 in the activity of the enzymes possibly involved with resistance induction. In the results this study, were verified that in the fruits treated with A. pullulans ACBL-77, preventively, the control percentage was higher than the curative treatment. The potato-dextrose-agar medium promoted the highest amount of yeast cells. The incorporation of micronutrients, such as boric acid, cobalt chloride and ammonium molybdate (1 mM), favoured the antagonistic action of A. pullulans in vitro. Ammonium sulphate 1mM and sucrose 0.5% favoured the yeast during the competition between the microorganisms. However... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The biocontrol efficiency of Aureobasidium pullulans strain ACBL-77 was evaluated against Geotrichum citri-aurantii, the causal agent of sour rot in citrus, and their interactions were studied in vitro and in vivo. For this purpuse, were evaluated (i) the biocontrol efficiency of A. pullulans ACBL-77 against the pathogen; (ii) the effect of different culture media on the production of yeast cells; (iii) the incorporation of nutritional sources in optimizing the antagonistic activity; (iv) the competition for nutrients between the microorganisms; (v) the effect of nutrients on yeast cell and biofilm production and their relation in the biocontrol of disease; (vi) the survival of yeast in citrus fruits; (vii) the interaction between the microorganisms by scanning electron microscopy; (viii) the effect of A. pullulans applications in the citrus fruits quality; (ix) the effect of ACBL-77 in the activity of the enzymes possibly involved with resistance induction. In the results this study, were verified that in the fruits treated with A. pullulans ACBL-77, preventively, the control percentage was higher than the curative treatment. The potato-dextrose-agar medium promoted the highest amount of yeast cells. The incorporation of micronutrients, such as boric acid, cobalt chloride and ammonium molybdate (1 mM), favoured the antagonistic action of A. pullulans in vitro. Ammonium sulphate 1mM and sucrose 0.5% favoured the yeast during the competition between the microorganisms. However, the addition of ammonium sulphate at 1% in the yeast culture stimulated biofilm production and consequently increased the antagonistic activity against the pathogen in vivo. The application of A. pullulans to fruits allowed the better survival of yeast in wounded sites of citrus fruit. The yeast was found to be able to form biofilm on citrus, deforming the ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Aplicação de produtos fitossanitários na cultura dos citros utilizando pulverizador envolvente /

Carvalho, Giorge França Gomes de. January 2014 (has links)
Orientador: Marcelo da Costa Ferreira / Banca: Ana Lúcia Paschoa B. Barbosa / Banca: Otávio Jorge Grigoli Abi-Saab / Banca: Rita de Cássia Panizzi / Banca: Raphael de Campos Castilho / Resumo: O setor produtivo da citricultura brasileira, maior do mundo em laranjas e em suco de laranja concentrado, enfrenta intensa ocorrência de pragas e doenças. Visando manter a sua produtividade os produtores recorrem à utilização intensa de agrotóxicos nas áreas de produção. O local de ocorrência, os graus de infestação e de movimentação das pragas têm grande interferência no tratamento fitossanitário, cuja eficácia depende da distribuição do produto pela copa das plantas. São várias as causas que levam ao insucesso do tratamento fitossanitário na cultura de citros. Entre as principais, os equipamentos mal calibrados e mal dimensionados em relação ao porte das plantas de citros, associados ao projeto dos pulverizadores que proporcionam dificuldades para direcionar melhor o jato de calda às plantas. Além destes, há também consequências econômicas e ambientais relacionadas às perdas por escorrimento e por deriva da calda aplicada, verificadas até maiores do que 50% do volume aplicado. Desta forma, elaborou-se o presente projeto com o objetivo de avaliar um pulverizador envolvente, desenvolvido com base na taxa de aplicação, distribuição da calda para avaliar a deposição de calda em diferentes posições das plantas de laranja, a mortalidade do ácaro-da-leprose dos citros Brevipalpus phoenicis (Geijskes, 1939) e o controle do fungo causador da mancha preta dos citros Guignardia citricarpa Kiely [Phyllosticta citricarpa (McAlp.) van der Aa.]), definidos em função de se constituírem nos principais componentes individuais dos atuais custos de produção da citricultura paulista e por serem considerados entre os principais problemas fitossanitários da cultura na atualidade. Para as avaliações serão utilizados dois modelos de pulverizadores de arrasto tratorizados, sendo um o modelo Arbus 2000® fabricado por Máquinas Agrícolas Jacto S.A., de uso corrente na citricultura nacional, considerado ... / Abstract: The productive sector of the Brazilian citrus industry, the largest at the world in oranges and concentrated citrus juice, faces intense occurrence of pests and diseases. In an attempt to maintain its productivity it makes intense use of pesticides on orchards areas. Place to occurrence, degree of infestation and pest movement have a great influence to crop protection, which the efficiency depends on of distribution of pesticides around canopy. There are many causes that lead to failure of the treatment plant in citrus. Among the main of that the equipment poorly calibrated and rated in terms of size of citrus trees, associated with the project from the sprayers that provide difficulties to better direct sprays to plants. In addition, there are also economic and environmental consequences related to losses by runoff and drift of spraying applied, and sometimes we lose more than 50% of the volume applied. Due that, we elaborate this study to evaluate a surrounding sprayer developed in bases of application rate, spraying distribution and control of Brevipalpus phoenicis (Geijskes, 1939) and fungus Guignardia citricarpa Kiely [Phyllosticta citricarpa (McAlp.) van der Aa .]) at different positions of citrus trees, chosen to constituted greater crop protection problems and to be among the main components in current production costs of citrus in São Paulo. To evaluations will be used two models of tractor-sprayer, a model Arbus 2000® manufactured by Máquinas Agrícolas Jacto S.A., commonly used in citrus in Brazil, considered in this project as the default system (control applied), and another of model Topspray®, manufactured by Herbicat Ltda. equipment, recently launched and developed in a joint with the company and researchers including the authors of this project. The surrounding sprayer brought with it enough characteristics to be considered a viable alternative to use / Doutor
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Diversidade genética de Xanthomonas citri subsp. citri, caracterização molecular e patogênica de Xanthomonas fuscans subsp. aurantifolii e detecção de Xanthomonas alfalfae em citrumelo ‘Swingle’ (Citrus paradisi Macf. x Poncirus trifoliata L. Raf.) no Brasil

Jaciani, Fabricio José [UNESP] 13 January 2012 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-01-13Bitstream added on 2014-06-13T20:04:34Z : No. of bitstreams: 1 jaciani_fj_dr_jabo.pdf: 1617312 bytes, checksum: 98bec775500aab00ebca7cf99caade23 (MD5) / Um dos objetivos do presente estudo foi avaliar a diversidade genética de isolados brasileiros de X. citri subsp. citri (Xcc) com base em genes efetores do Sistema de Secreção Tipo III (avrXacE1, avrXacE2, avrXacE3, avrBs2, hpaF, XAC3090 e pthA4). Um total de 49 haplótipos foi identificado entre os 157 isolados analisados por “Southern blot”, e o maior polimorfismo genético observado nas análises com a sonda PthA4. Esses efetores estão amplamente distribuídos na população do patógeno e podem ser úteis para uma melhor compreensão da interação patógeno-hospedeiro. Outro objetivo desse trabalho foi a caracterização patogênica e genética de isolados de X. fuscans subsp. aurantifolii tipos B e C (Xfa-B e Xfa-C). Observou-se pequena agressividade dos isolados de Xfa-B e grande variação na patogenicidade de Xfa-C. Os isolados de Xfa-C produtores de pigmento escuro em meio de cultura foram menos agressivos que os isolados não produtores. Alguns isolados de Xfa-C foram patogênicos também a limões, limas ácidas, citrumelo ‘Swingle’ e tangerinas. Os isolados de Xfa-B e Xfa-C foram diferenciados pelas técnicas de AFLP, BOX e ERIC-PCR, com relativa diversidade entre isolados do mesmo patótipo, e análises da sequência do gene gyrB revelaram alta similaridade desses isolados com espécies de Xanthomonas patogênicas a outros hospedeiros (X. fuscans subsp. fuscans e X. axonopodis pvs. anacardii, dieffenbachiae, rhynchosiae, sesbaniae e vignicola). No presente estudo também foi descrito o primeiro relato de X. alfalfae (Xa) no Brasil. Os isolados investigados demonstraram limitada patogenicidade e agruparam-se geneticamente com X. alfalfae subsps. alfalfae e citrumelonis e X. axonopodis pvs. allii, cassiae, desmodii, patelii e ricini / In the present study, as one of the objectives, is showed the genetic diversity of Brazilian strains of X. citri subsp. citri (Xcc) based on effector genes of the Type III Secretion System (avrXacE1, avrXacE2, avrXacE3, avrBs2, hpaF, XAC3090 e pthA4). A total of 49 haplotypes were identified from 157 Xcc strains by Southern blot analysis using the cited genes as DNA probes. The highest polymorphism was observed with the PthA4. Those bacterium genes are extensively present in the Xcc population and can be used to a better comprehension of the Xcc-plant interaction. As a second objective, we present the genetic and pathogenic characterization of X. fuscans subsp. aurantifolii types B and C strains (Xfa-B e Xfa-C). In the pathogenic testes carried out Xfa-B presented a very limited pathogenicity, weaker than Xfa-C. Strains of this last pathotype presented a relatively high degree of pathogenicity variation, and those Xfa-C strains producers of dark pigment on culture medium were less pathogen than those not producers. Also some Xfa-C strains are pathogens to limes, lemons, Swingle citrumelo, and mandarins. Strains of Xfa-B and C were clearly differentiated by the molecular techniques AFLP, BOX and ERIC-PCR. Sequences of the gyrB gene revealed a high similarity of Xfa strains and other pathovars of Xanthomonas not pathogens of citrus. Finally, we presented the first detection of X. alfalfa (Xa) in Brazil, detected on a single Swingle citrumelo tree in São Paulo state. The Brazilian Xa strains showed a very limited pathogenicty, similar of a X. alfalfa subsp. citrumelonis
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Potencial de leveduras isoladas do solo e do filoplano de plantas cítricas no biocontrole de doenças de pós-colheito de citros /

Cunha, Tatiane da. January 2013 (has links)
Orientador: Katia Cristina Kupper / Banca: Ben-Hur Mattiuz / Banca: Sérgio Florentino Pascholati / Resumo: Dentre as principais doenças que ocorrem na pós-colheita em citros destacam-se o bolor verde, bolor azul e a podridão azeda, ocasionadas pelos fungos Penicillium digitatum, P. italicum e Geotrichum candidum, respectivamente. Uma alternativa para o controle destas doenças se dá por meio da utilização de leveduras. Sendo assim, objetivou-se no presente estudo isolar, selecionar e identificar leveduras de solos, folhas, flores e frutos de citros de diferentes regiões produtoras do estado de São Paulo, com potencial de aplicação como agentes de biocontrole aos fitopatógenos de pós-colheita. Foram obtidos 95 isolados de leveduras de 14 municípios do estado de São Paulo, sendo o filoplano a fonte de 90,5% dos isolados. Nos ensaios in vitro realizados com G. candidum, o ACBL-77 proporcionou o maior valor de inibição do crescimento micelial do fungo (35%) e os isolados ACBL-68 e ACB-K1 (Saccharomyces cerevisiae), os que proporcionaram maiores valores de inibições na germinação de conídios, 83 e 82%, respectivamente. Quando se avaliou o controle da podridão azeda em frutos de Laranja Pêra, três isolados (ACBL-23, ACBL-44 e ACBL-77) foram os mais eficientes no controle da doença de maneira preventiva e curativa. Em ensaios realizados in vitro com P. digitatum, cinco isolados de levedura (ACBL-76, ACBL-82, ACBL-84 e ACBL-87) proporcionaram valores de inibições do crescimento da colônia do fungo acima de 80%. Entretanto, in vivo somente dois isolados (ACBL-82 e ACBL-86) foram capazes de controlar o progresso e também a incidência da doença, quando utilizados preventivamente. Na avaliação da inibição do crescimento micelial in vitro do P. italicum, oito isolados proporcionam valores de inibições acima de 80%, sendo que o ACBL-04 proporcionou 100% de controle. Nos ensaios in vivo, quatro isolados (ACBL-04, ACBL-05, ACBL-08 e ACBL-11) foram eficientes na diminuição ... / Abstract: Among the major diseases that occur in citrus post-harvest stand out green mold, blue mold and sour rot, caused by Penicillium digitatum, Penicillium italicum and Geotrichum candidum, respectively. An alternative for the control of these diseases is through the use of yeasts. Thus, the aim of the present study was to isolate, select and identify yeasts from soil, leaves, flowers and fruits of different citrus producing regions of the São Paulo State, with potential application as biocontrol agents for postharvest pathogens. Ninety-five yeast isolates were obtained from 14 counties in the São Paulo State. The phylloplane was the source of 90.5% of the isolates. Tests conducted in vitro, with G. candidum showed that ACBL-77 presented the highest inhibition of mycelial growth (35%) and both strains ACBL-68 and ACB-K1 (Saccharomyces cerevisiae), provided the highest values of inhibitions of conidia germination, 83 and 82%, respectively. When the control of sour rot in fruits of 'Pera' sweet Orange was evaluated, three isolates (ACBL-23, ACBL-44 and ACBL-77) were the most effective in controlling the disease in a preventive and curative way. In in vitro assays with P. digitatum, five yeast strains (ACBL-76, ACBL-82, ACBL-84 and ACBL-87) inhibited the mycelial growth with values above 80%. However, when the ability of yeast to control green mold was evaluated on orange fruits, only two isolates (ACBL-82 and ACBL-86) were able to decrease the progress and also the incidence of the disease when used preventively. Eight isolates inhibited the mycelial growth of P. italicum above 80%, and the isolate ACBL-04 provided 100% of inhibition. In in vivo assays, four isolates (ACBL-04, ACBL-05, ACBL-08 and ACBL-11) were effective in reducing the progress of blue mold as well as in inhibiting the incidence of disease when applied preventively / Mestre
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Aplicação de produtos fitossanitários na cultura dos citros utilizando pulverizador envolvente

Carvalho, Giorge França Gomes de [UNESP] 01 September 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-09-01Bitstream added on 2015-04-09T12:48:20Z : No. of bitstreams: 1 000817879.pdf: 601535 bytes, checksum: 33ccec4af00f4c162aef05f863287eff (MD5) / O setor produtivo da citricultura brasileira, maior do mundo em laranjas e em suco de laranja concentrado, enfrenta intensa ocorrência de pragas e doenças. Visando manter a sua produtividade os produtores recorrem à utilização intensa de agrotóxicos nas áreas de produção. O local de ocorrência, os graus de infestação e de movimentação das pragas têm grande interferência no tratamento fitossanitário, cuja eficácia depende da distribuição do produto pela copa das plantas. São várias as causas que levam ao insucesso do tratamento fitossanitário na cultura de citros. Entre as principais, os equipamentos mal calibrados e mal dimensionados em relação ao porte das plantas de citros, associados ao projeto dos pulverizadores que proporcionam dificuldades para direcionar melhor o jato de calda às plantas. Além destes, há também consequências econômicas e ambientais relacionadas às perdas por escorrimento e por deriva da calda aplicada, verificadas até maiores do que 50% do volume aplicado. Desta forma, elaborou-se o presente projeto com o objetivo de avaliar um pulverizador envolvente, desenvolvido com base na taxa de aplicação, distribuição da calda para avaliar a deposição de calda em diferentes posições das plantas de laranja, a mortalidade do ácaro-da-leprose dos citros Brevipalpus phoenicis (Geijskes, 1939) e o controle do fungo causador da mancha preta dos citros Guignardia citricarpa Kiely [Phyllosticta citricarpa (McAlp.) van der Aa.]), definidos em função de se constituírem nos principais componentes individuais dos atuais custos de produção da citricultura paulista e por serem considerados entre os principais problemas fitossanitários da cultura na atualidade. Para as avaliações serão utilizados dois modelos de pulverizadores de arrasto tratorizados, sendo um o modelo Arbus 2000® fabricado por Máquinas Agrícolas Jacto S.A., de uso corrente na citricultura nacional, considerado ... / The productive sector of the Brazilian citrus industry, the largest at the world in oranges and concentrated citrus juice, faces intense occurrence of pests and diseases. In an attempt to maintain its productivity it makes intense use of pesticides on orchards areas. Place to occurrence, degree of infestation and pest movement have a great influence to crop protection, which the efficiency depends on of distribution of pesticides around canopy. There are many causes that lead to failure of the treatment plant in citrus. Among the main of that the equipment poorly calibrated and rated in terms of size of citrus trees, associated with the project from the sprayers that provide difficulties to better direct sprays to plants. In addition, there are also economic and environmental consequences related to losses by runoff and drift of spraying applied, and sometimes we lose more than 50% of the volume applied. Due that, we elaborate this study to evaluate a surrounding sprayer developed in bases of application rate, spraying distribution and control of Brevipalpus phoenicis (Geijskes, 1939) and fungus Guignardia citricarpa Kiely [Phyllosticta citricarpa (McAlp.) van der Aa .]) at different positions of citrus trees, chosen to constituted greater crop protection problems and to be among the main components in current production costs of citrus in São Paulo. To evaluations will be used two models of tractor-sprayer, a model Arbus 2000® manufactured by Máquinas Agrícolas Jacto S.A., commonly used in citrus in Brazil, considered in this project as the default system (control applied), and another of model Topspray®, manufactured by Herbicat Ltda. equipment, recently launched and developed in a joint with the company and researchers including the authors of this project. The surrounding sprayer brought with it enough characteristics to be considered a viable alternative to use
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Caracterização molecular de Colletotrichum acutatum e C. gloeosporioides associados a citros, por marcadores ISSR

Silveira, Amanda Letícia da [UNESP] 16 January 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-01-16. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:30Z : No. of bitstreams: 1 000826579.pdf: 368217 bytes, checksum: 8e4e91ae5f9afdf71e55913e7b8beac1 (MD5) / A podridão floral dos citros (PFC) é uma importante doença dessa cultura, responsável por elevadas perdas de produção. Normalmente, essa doença mostra-se limitante quando ocorrem prolongados períodos chuvosos durante o florescimento das plantas ou quando existe intenso molhamento foliar. Duas espécies de Colletotrichum estão associadas à doença: C. acutatum e C. gloeosporioides. Entretanto, recentemente tem-se verificado que, mesmo sob condições não tão propícias, a doença tem ocorrido com relativa frequência; suspeitando-se do envolvimento de outras espécies de Colletotrichum ou de novas condições de adaptação das espécies descritas. Esse trabalho teve como objetivo determinar se há ou não outra espécie de Colletotrichum associada a PFC e avaliar a viabilidade do emprego de marcadores moleculares ISSR na caracterização taxonômica de isolados de Colletotrichum spp. associados a sintomas de PFC em flores, assim como de tecidos foliares e frutos cítricos assintomáticos. Para tanto, foi empregada uma combinação de iniciadores específicos, levando em conta a região ITS e marcadores moleculares ISSR. Os marcadores ISSR mostraram-se eficientes na caracterização taxonômica dos isolados de Colletotrichum analisados. A população avaliada foi constituída apenas por C. acutatum e C. gloeosporioides, descartando o envolvimento de uma espécie adicional, o que converge com os registros na literatura. Foi constatada alta diversidade genética entre os isolados analisados, o que também se mostra convergente quanto às diferenças fenotípicas observadas sob condições de campo. Entretanto, não foi encontrada relação quanto à origem e as espécies de Colletotrichum spp. associadas. De modo inédito, ainda que assintomaticamente, foi detectada a presença de um isolado de C. acutatum associado a frutos cítricos / Postbloom fruit drop of citrus (PFD) is a serious disease of this crop, accounting for high yield losses. Usually, this disease shows to be limiting when there are prolonged rainy periods during plant flowering or when there is intense leaf wetness. Two Colletotrichum species are associated with the disease: C. acutatum and C. gloeosporioides. However, recently, it has been found that, even under not so favorable conditions, the disease has occurred with some frequency; one suspects the involvement of other Colletotrichum species or new adaptation conditions of the described species. This study aimed to determine whether there is another Colletotrichum species associated with PFD and it assess the viability of using molecular markers ISSR for taxonomic characterization of Colletotrichum spp. isolates associated with PFD symptoms in flowers, as well as of leaf tissues and asymptomatic citrus fruits. For this purpose, we used a combination of specific primers, taking into account the ITS region and ISSR molecular markers. ISSR markers have proven to be effective for taxonomic characterization of the Colletotrichum isolates analyzed. The population assessed consisted only of C. acutatum and C. gloeosporioides, discarding the involvement of an additional species, something which converges with records in the literature. We found high genetic diversity among the isolates analyzed, and this also shows to converge as for the phenotypic differences observed under field conditions. However, no relation was found regarding the origin and associated Colletotrichum spp. species. In an unprecedented way, although asymptomatically, we detected the presence of a C. acutatum isolate associated with citrus fruits
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Multiplicação de Diaphorina citri e de Candidatus Liberibacter asiaticus em híbridos de citros indicados como porta-enxerto

Baia, Ana Dulce Botelho [UNESP] 03 March 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-08-20T17:10:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-03. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:03Z : No. of bitstreams: 1 000843406.pdf: 1189340 bytes, checksum: 7b3c890f6719ea226d3e0cc9593afda4 (MD5) / Huanglongbing (HLB) ou greening é uma doença que, no Brasil, está associada às bactérias Candidatus Liberibacter asiaticus e a Ca. L. americanus, ambas transmitidas pelo inseto Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Liviidae). O HLB uma doença altamente destrutiva e de difícil controle, sendo atualmente Ca. L. asiaticus a mais frequentemente encontrada nos pomares. Nenhuma variedade explorada comercialmente é resistente ao patógeno ou ao inseto vetor. Visando suprir as necessidades dos produtores por porta-enxertos mais produtivos e que promovam redução no volume da copa, diversos híbridos têm sido testados para uso comercial nos últimos anos. Sobre esses novos híbridos nada se sabe sobre seu potencial em limitar o desenvolvimento da bactéria do HLB ou do inseto vetor, características que poderiam ser úteis no manejo da doença. Em vista disso, o objetivo do presente trabalho foi avaliar taxas de multiplicação de Ca. L. asiaticus e de D. citri em cinco novos híbridos indicados para uso como porta-enxertos. Para fins de comparação foram também incluídos no estudo os porta-enxertos comerciais limoeiro 'Cravo', o citrumeleiro 'Swingle', Poncirus trifoliata, a tangerineira 'Sunki', variedade de laranja doce 'Valência', e a planta ornamental murta (Murraya exotica). A multiplicação de D. citri foi determinada em brotos jovens sadios pela contagem diária do número de ovos, ninfas e adultos gerados do acasalamento de dois casais confinados por 72 horas ou até que ovos fossem visualizados. A multiplicação de Ca. L. asiaticus foi avaliada por meio de PCR quantitativo em raízes e na parte aérea das plantas seis meses após a inoculação do caule por enxertia de ramos doentes, Influência dos genótipos foi detectada tanto na multiplicação do inseto como na multiplicação da bactéria. Maior número de ovos foi encontrado no híbrido 81G513 e na laranjeira 'Valência', e menor número em... / Huanglongbing (HLB), or greening, is a disease that in Brazil is associated to the Candidatus Liberibacter asiaticus and Ca. Liberibacter americanus, both transmitted by the insect Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Liviidae). HLB is a disease highly destructive and of difficult control. Nowadays Ca. L. asiaticus ismost frequently found in citrus orchards. No commercial variety is resistant to the pathogen or insect vector. In order to satisfy grower necessity for more productive rootstocks and that promote smaller canopies to facilitate harvesting, several new hybrids have been tested for planting in the last years, For these hibrids no information exist on their potential in limiting the multiplication of the HLB bacteria or the vector, which could be used in disease management. In view of this, the objective of the present work was to evaluate multiplication rates of Ca. L. asiaticus and D. citri on five new hybrids suitable for use as rootstocks. For comparison purposes, the commercial rootstocks 'Cravo' Rangpur lime, 'Swingle' citrumelo, Poncirus trifoliata, and 'Sunki' mandarin, the sweet orange variety 'Valencia', and the ornamental orange jasmine Murraya exotica also were included in the study. D. citri multiplication was determined in healthy young shoots by daily counting of the number of eggs, nymphs and adults generated from two adult mating pairs, after confining them for 72 hours on the shoots or until eggs were observed. Ca. L. asiaticus multiplication was evaluated by quantitative PCR on the aerial part and roots of the plants, six months after stem graft inoculation. Influence of genotypes was observed on the multiplication of the insect as well as on the multiplication of the bacteria. The higher number of eggs was found on the hybrid 81G513 and on the orange 'Valencia', and the lower number of eggs on P. trifoliata. Nymph viability was higher on orange jasmine and P. trifoliata and lower on the ...
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Estudo dos mecanismos de ação de leveduras envolvidos no biocontrole de doenças de pós-colheita em citros

Ferraz, Luriany Pompeo [UNESP] 21 February 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-21Bitstream added on 2014-11-10T11:57:41Z : No. of bitstreams: 1 000792114.pdf: 1360577 bytes, checksum: e30201b234dbc8d6d40a9a749ab8571e (MD5) / Dada à importância econômica e social que a citricultura representa para o país, e em particular, para o estado de São Paulo, as plantas cítricas podem ser afetadas por vários agentes fitopatogênicos que, agindo isoladamente, ou em conjunto, sob condições favoráveis, podem tornar-se limitantes à produção em várias regiões produtoras. Dentre tais agentes fitopatogênicos destacam-se Geotrichum candidum, Penicillium digitatum e P. italicum, responsáveis pelas doenças podridão azeda, bolor verde e bolor azul, respectivamente, que ocorrem na pós-colheita em citros. O método mais efetivo de controle destas doenças é o químico, porém, alternativas de controle são necessárias, de forma a diminuir os riscos ambientais e à saúde humana, em decorrência do uso indiscriminado de fungicidas. Dentre os métodos alternativos, o controle biológico tem emergido como um dos mais promissores para controle de doenças na pós-colheita. Diante do exposto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar os mecanismos de ação de 24 isolados de leveduras que apresentam potencialidade de controle da podridão azeda e de bolores em frutos cítricos. Nosso estudo sugere que os múltiplos modos de ação, como apresentado pela maioria dos isolados de leveduras testados, como produção de enzimas hidrolíticas (quitinase e β-1,3-glucanase), atividade killer e inibição da germinação de conídios do fitopatógeno, foram importantes para o potencial de controle de Geotrichum candidum, Penicillium digitatum e P. italicum. Todos os isolados de leveduras apresentaram atividade killer, indicando ser esse o mecanismo de ação comum adotado pelos isolados no biocontrole / Because of the economic and social importance that citrus industry represent to the country, and in particular to the state of São Paulo, citrus plants can be affected by several pathogenic agents , acting alone or together , under favorable conditions may make limiting the production in some production areas. Among these pathogenic agents have more importance Penicillium digitatum, Penicillium italicum and Geotrichum candidum, responsible for diseases that occuring in the post - harvest citrus. The most effective method of controlling these diseases is by means of chemical control, but control alternatives are needed in order to reduce environmental and human health risks due to the indiscriminate use of fungicides. Among the alternative methods, biological control has emerged as one of the most promising for disease control. So the present study was to evaluate the mechanisms of action of 24 yeast isolates that have potential for control of sour rot and mold in citrus fruits. Our study suggests that multiple modes of action, as shown by the majority of yeast isolates tested, which showed production of hydrolytic enzymes (chitinase and β-1,3-glucanase), killer activity and inhibition of conidial germination of the pathogen were important for the potential control of Geotrichum candidum, Penicillium digitatum and P. italicum. All yeast isolates showed killer activity, indicating that this is the common mechanism adopted by the biocontrol isolates
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Recuperação e correspondência de depósitos de calda em diferentes superfícies e concentração de acaricida para controle de ácaro Brevipalpus phoenicis (Geijskes, 1939) com volume de aplicação reduzido

Santos, Natali Calazança dos [UNESP] 05 August 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-03-03T11:52:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-05Bitstream added on 2015-03-03T12:06:41Z : No. of bitstreams: 1 000807046.pdf: 983860 bytes, checksum: d29c2dba77d1490dca1eb741971fc13d (MD5) / O objetivo deste trabalho foi avaliar o método de recuperação de marcadores em superfícies naturais e artificiais para a estimativa de depósitos em experimentos de laboratórios e sua correspondência aos verificados sobre plantas de citros a campo e verificar a necessidade em aumentar a concentração do acaricida na calda fitossanitária ao diminuir o volume de aplicação para controle do ácaro-da-leprose-dos-citros. O trabalho foi desenvolvido na UNESP- Universidade Estadual Paulista, Campus de Jaboticabal, Departamento de Fitossanidade, no laboratório do Núcleo de Estudo e Desenvolvimento em Tecnologia de Aplicação (NEDTA). Foram feitas aplicações de calda contendo sulfato de manganês, com pipeta e em Torre de Potter em duas superfícies naturais (casca de fruto e folha de laranja) e em duas superfícies artificiais (lâmina de vidro e papel filtro),fez-se a extração do marcador e a leitura dos extratos Calculou-se a taxa de recuperação nas superfícies e fez-se análise estatística e por meio de análise de regressão linear, comparou-se os depósitos obtidos em laboratório, com depósitos oriundos de aplicações em campo. Posteriormente, fez a pulverização em torre de Potter com o volume de 600?L que corresponde ao depósito do volume de 6L/planta, em frutos de laranja com seis concentrações de acaricida e avaliouse o controle do ácaro B. phoenicis. Verificou-se que os depósitos obtidos em laboratório têm correspondência com os observados no campo e que as maiores concentrações apresentaram maior eficiência de controle. Conclui-se que método foi confiável e coerente quanto aos resultados obtidos, podendo ser utilizado em experimentos de laboratório e campo, e que uma redução no volume de aplicação de 20 para 6L/planta requer a concentração do acaricida entre 1,7 e 2,5 vezes a concentração comercial para resultados equivalentes no controle do ácaro-da-leprose-dos-citros / The aim of this study was to evaluate the method of recovery of markers in natural and artificial surfaces for estimating deposits in laboratory experiments and their correspondence to those observed on citrus plants in the field and verify the need to increase the concentration of sulfur in plant syrup to decrease the volume of application for control of mite-leprosy-the citrus. The study was conducted at UNESP-Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal, Plant Protection Department of the Center for the Study and Development in Technology Application (NEDTA) laboratory. Of spray applications containing manganese sulfate, with pipette and Tower Potter in two natural surfaces (fruit peel and orange leaf) and two artificial surfaces (glass slide and filter paper) were made, it was made to extract the marker and reading the extracts was calculated recovery rate on surfaces and did a statistical analysis and by linear regression analysis, we compared the deposits obtained in the laboratory, with deposits derived from field applications. Subsequently made a Potter spray tower with 600?L volume that corresponds to the filing of the volume of 6L / plant in orange fruits with six concentrations of acaricide and evaluated the control of mite B. phoenicis. Verificou is that deposits obtained in the laboratory has correspondence with those observed in the field and that the highest concentrations had higher control efficiency. It is concluded that the method was reliable and consistent as the results obtained and can be used in laboratory experiments and field, and that a reduction in application volume of 20 to 6L / plant requires the concentration of sulfur between 1.7 and 2, 5 times the commercial concentration to equivalent results in the control of mite-ofleprosy- the citrus

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