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Investigação de alterações no nível e na ativação de proteínas cinases no neocórtex e no hipocampo de camundongos submetidos ao modelo de kindling por pentilenotetrazolBen, Juliana January 2014 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2014-08-06T18:07:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2014 / A epileptogênese é um processo que envolve a sinalização celular e a neuroplasticidade. As proteínas cinases ativadas por mitógenos, MAPKs (subfamílias ERK1/2, JNK1/2 e p38MAPK), a fosfatidil-inositol 3-cinase (PI3K)/Akt (PKB ou Akt) e a glicogênio sintase cinase-3? (GSK-3?) regulam uma variedade de eventos intracelulares envolvidos na diferenciação, sobrevivência e morte celular e na plasticidade sináptica. Nós quantificamos através de western blotting, os níveis de MAPKs (ERK1/2, JNK1/2 e p38MAPK), Akt e GSK-3? totais e fosforiladas no neocórtex e no hipocampo de camundongos Swiss machos, 48 h após a última injeção do modelo de kindling por pentilenotetrazol (PTZ, 35 mg/kg, i.p., em dias alternados, total de 8 injeções). Os níveis totais das proteínas cinases nas estruturas estudadas não foram afetados pelo kindling por PTZ. Os níveis de MAPKs fosforiladas permaneceram inalterados nos animais que não apresentaram crises convulsivas. Os níveis de JNK2 fosforilada, mas não de JNK1 fosforilada, aumentaram no hipocampo dos animais que apresentaram poucos dias com crise convulsiva (1 a 3 dias), e permaneceram semelhantes aos controles nos animais que apresentaram mais de três dias com crise convulsiva. Os níveis de ERK1/2 fosforiladas diminuíram no neocórtex e aumentaram no hipocampo de animais com 1 a 4 dias com crise convulsiva, e permaneceram inalterados nos animais que tiveram mais de 4 dias com crise convulsiva. Já a GSK-3? teve os seus níveis de fosforilação aumentados no neocórtex, mas não no hipocampo, nos animais que tiveram de 0 a 3 dias com crise convulsiva, caindo drasticamente para níveis inferiores ao controle nos animais que apresentaram 4 ou mais dias com crise convulsiva. Uma regressão linear múltipla mostrou que 85% da variação na progressão do kindling por PTZ foi explicada pela latência para a ocorrência da crise no primeiro e no último dia de estimulação e pelos níveis de GSK-3? fosforilada no neocórtex. A análise também mostrou que 87% da variação na latência para a ocorrência da última crise convulsiva é explicada pela latência para a ocorrência da primeira crise convulsiva, progressão do kindling, níveis de GSK-3? fosforilada no neocórtex e de Akt fosforilada no hipocampo. Utilizando apenas os animais que evoluíram para o kindling evidenciou-se que os níveis de ERK1 fosforilada, JNK2 fosforilada, JNK1 total e JNK1 fosforilada no hipocampo estiveram independentemente associados negativa ou positivamente ao número de dias com crise convulsiva. No mesmo grupo de animais, apenas o nível de p38MAPK fosforilada no neocórtex esteve associado, positivamente, à latência para a ocorrência da crise convulsiva na última estimulação com PTZ. Os resultados do presente estudo sugerem uma dissociação entre os níveis cerebrais regionais de MAPKs, GSK-3? e Akt associados à epileptogênese (progressão do kindling) e ao limiar (latência) para a ocorrência da crise convulsiva em animais sensibilizados pelo PTZ. Esta dissociação pode contribuir para o entendimento da ausência de efeito anti-epileptogênico clinicamente relevante dos fármacos utilizados para o controle das crises epilépticas.<br> / Abstract : Epileptogenesis is a process that involves neuroplasticity and cellular signaling. The mitogen-activated protein kinases, MAPKs (subfamilies ERK1/2, JNK1/2, and p38MAPK), phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/Akt (PKB or Akt) and glycogen synthase kinase-3? (GSK-3?) regulate a variety of intracellular events involved in the cell differentiation, survival and death and synaptic plasticity. Herein we quantified by Western blotting the phosphorylation and total levels of MAPKs (ERK1/2, JNK1/2, and p38MAPK), Akt and GSK-3? in the neocortex and hippocampus from male Swiss mice, 48 hours after the last injection of the kindling pentylenetetrazol procedure (PTZ, 35 mg/kg, i.p., on alternate days, in a total of 8 injections). The total levels of such protein kinases in the investigated structures were not altered by PTZ kindling. The total levels of MAPKs were unchanged in animals that did not develop convulsive seizures. The levels of JNK2 phosphorylation, but not JNK1 phosphorylation, increased in the hippocampus of animals with fewer days with convulsive seizures (1-3 days), and remained similar to controls in animals that had more than three days with convulsive seizures. The levels of ERK1/2 phosphorylation decreased in the neocortex and increased in the hippocampus of animals with 1 to 4 days with convulsive seizures and remained unchanged in animals that had more than 4 days with convulsive seizures. The phosphorylation levels of GSK-3? was increased in the neocortex, but not in the hippocampus, in animals with 0-3 days with convulsive seizures, and reduced drastically in animals with 4 or more days with convulsive seizures. A multiple linear regression analysis showed that 85% of the kindling progression variance is explained by the latencies for the first and the last days with convulsive seizures and the neocortical levels of GSK-3? phosphorylation. This analysis also showed that 87% of the variance in the latency for the last day with convulsive seizure is explained by the latency for the first days with convulsive seizure, kindling progression, neocortical GSK-3? phosphorylation and hippocampal Akt phosphorylation. Analyzing only the animals that developed kindling, we showed that the levels of total ERK1, total JNK1, ERK1 phosphorylation and JNK1 phosphorylation in the hippocampus were independently associated with the number of days with convulsive seizures. In the same group of animals, only the level of p38MAPK phosphorylation in the neocortex was positvely or negatively associated with the latency to the occurrence of convulsive seizure in the last stimulation day with PTZ. These findings suggest dissociation between the MAPKs, GSK-3? and Akt regional brain levels and the seizure threshold and kindling progression in mice. These results may contribute to explain the absence of clinically relevant anti-epileptogenic effects of drugs currently used to treat seizures.
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Resposta biológica do gastrópode antártico Nacella concinna (Strebel 1908) ao óleo diesel como possível biomarcador de impacto ambiental na zona entre as marésOliveira, Mariana Feijó de 06 August 2013 (has links)
Resumo: A Antártica é considerada a região mais preservada do planeta, embora venha sofrendo os impactos da presença humana na região. A queima e o vazamento de combustível fóssil na Antártica têm impactado seus ecossistemas, o que tem suscitado preocupações e motivado pesquisas na área de monitoramento ambiental. O presente estudo teve como objetivo verificar o efeito do óleo diesel, em quatro diferentes condições termo-salinas (0 e 4oC, e 35 e 25psu), sobre as respostas metabólicas do gastrópode antártico Nacella concinna, e o potencial uso dessas respostas como biomarcadores de poluição por diesel na zona entre marés. As atividades das enzimas glutationa redutase (GR), superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PDH), hexoquinase (HK), fosfofrutoquinase (PFK), lactato desidrogenase (LDH), citrato sintase (CS), malato desidrogenase (MDH), e arginase (ARG), foram determinadas nas brânquias e pé muscular. Os níveis de GR, SOD, CAT e glutationa S-transferase (GST), bem como lipoperoxidação (LPO) e carbonilação proteica (PCO), como marcadores de lesão oxidativa, foram determinados na glândula digestiva. A exposição ao óleo diesel modulou: a) positivamente os níveis de GR, SOD e LPO viscerais, GR branquial, CAT e HK muscular; b) negativamente os níveis de CAT e G6PDH branquial, bem como SOD, G6PDH e ARG no pé muscular. Grande parte das enzimas analisadas na glândula digestiva, brânquias e pé muscular de N. concinna foram moduladas por aquecimento, baixa salinidade, bem como por interações entre esses fatores e o diesel. Comparando os níveis enzimáticos dos animais do controle experimental com os do referencial da natureza, constatamos que diversas enzimas foram moduladas de forma distinta nesses dois grupos. Dentre as enzimas da defesa antioxidante analisadas, somente a GR branquial apresentou potencial biomarcador de exposição ao diesel. Já em relação ao metabolismo energético, apenas a HK muscular despontou como potencial biomarcador de exposição ao diesel.
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Avaliação da remodelação óssea após a interrupção do tratamento com bifosfonato por um período prolongado e seu efeito sobre a osseointegraçãoBorges Filho, Fausto Frizzera [UNESP] 16 March 2012 (has links) (PDF)
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borgesfilho_ff_me_arafo.pdf: 745382 bytes, checksum: 3bdf7ce6d813ab8f259810f63dcaaf19 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O objetivo deste estudo foi avaliar as alterações no processo de remodelação óssea após a suspensão do tratamento com alendronato e sua influência sobre a osseointegração de implantes. Para isso, setenta ratas Wistar foram divididas em 2 grupos que receberam no dia 0 placebo (grupo controle-CTLE, n = 10) ou alendronato, na dose de 1 mg/kg (grupo teste, n = 60), uma vez por semana, por 120 dias. No dia 120 o tratamento com alendronato foi interrompido em 50 animais. Um implante de titânio foi instalado na metáfise tibial esquerda nos dias 0, 7, 14, 28 e 45 dias após a interrupção do tratamento (n=10 em cada período). O grupo CTLE e um grupo que continuou a receber o alendronato até o fim do experimento (grupo ininterrupto – INT, n=10) foram submetidos à cirurgia para instalação do implante no dia 120. Todos animais foram sacrificados 28 dias após a instalação dos implantes. Foram avaliados a densidade mineral óssea do fêmur e das vértebras lombares, os marcadores bioquímicos de remodelação óssea osteocalcina (OCN), propeptídeo aminoterminal do colágeno tipo I (P1NP), telopeptídeo carboxiterminal do colágeno tipo I (CTX) no dia da instalação do implante e no dia do sacrifício. O tecido ósseo ao redor dos implantes foi analisado de forma descritiva, e por meio da avaliação da quantidade de tecido ósseo em contato com a superfície do implante (BIC) e da área de tecido ósseo presente entre as roscas do implante (BAFO). Todos os grupos submetidos ao tratamento com alendronato apresentaram valores de densidade óssea significativamente maiores quando comparados ao grupo CTLE. Os marcadores de remodelação óssea apresentaram concentrações séricas menores no grupo teste, sendo que após a suspensão do tratamento com alendronato observou-se discreto aumento nos períodos... / The aim of this study was to evaluate bone turnover alterations after alendronate withdrawal and its influence on dental implants osseointegration. Seventy female Wistar rats were divided in 2 groups that received on day 0 either placebo (control group – CTLE, n = 10) or alendronate 1mg/kg (test group, n = 60) once a week for 120 days. At day 120 alendronate treatment was suspended for 50 animals. A titanium implant was placed in rats’ left tibiae on days 0, 7, 14, 28 and 45 after alendronate withdrawal (n=10 for each period). CTLE group and a group that received alendronate until the end of the experimental period (non interrupted group - INT, n = 10) underwent implant placement surgery on day 120. All animals were euthanized 28 days after implant surgery. Bone mineral density (BMD) of femur and lumbar vertebrae and biochemical markers of bone turnover of serum collected on implant placement surgery’s and euthanization’s days were analyzed. Bone tissue around implants was submitted to descriptive analysis, bone-to-implant contact (BIC) and bone area fraction occupancy between implant threads (BAFO). All groups receiving alendronate showed higher BMD values when compared to CTLE group. Bone turnover markers presented decreased concentrations in test group. After alendronate withdrawal these values were slightly increased in the initials periods followed by another decrease in biomarkers concentrations in the late periods. No difference was 17 observed between groups for the BIC ratio. However group 45 days BAFO were statically significant lower than group 0 day. Although there was not difference in the bone quantity around implants, its quality was apparently compromised in the groups that received alendronate. The findings of this study demonstrated that alendronate... (Complete abstract click electronic access below)
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Efeito da suplementação de prebiótico ou simbiótico sobre marcadores inflamatórios após a derivação gástrica em Y de RouxFernandes, Ricardo January 2014 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Nutrição, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:54:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2014 / A derivação gástrica em Y de Roux (RYGB) é a cirurgia bariátrica mais realizada em todo o mundo, no entanto, existem poucas evidências sobre o papel da microbiota intestinal na melhora de parâmetros imunológicos após a RYGB, tampouco o impacto de prebióticos e simbióticos neste contexto. Evidências mostram que estas substâncias promovem efeitos positivos na saúde de indivíduos obesos, como a imunorregulação. Diante disso, o objetivo deste ensaio clínico randomizado, controlado e triplo-cego foi investigar os efeitos da suplementação de prebiótico e simbiótico em marcadores inflamatórios de indivíduos submetidos à RYGB. Nove indivíduos submetidos à RYGB e nove indivíduos saudáveis foram randomizados em três grupos cada: placebo, prebiótico e simbiótico. O grupo placebo recebeu 6 g/dia de maltodextrina, o grupo prebiótico recebeu 6 g/dia de fruto-oligossacarídeo (FOS) e o grupo simbiótico recebeu 6 g/dia de FOS + 1x109 de Lactobacillus rhamnosus HN001, 1x109 Lactobacillus acidophilus NCFM, 1x109 Lactobacillus paracasei LPC-37 e 1x109 Bifidobacterium lactis HN019, durante 15 dias. Para os indivíduos submetidos à RYGB, os desfechos foram avaliados 30 (basal) e 45 dias após a cirurgia (momento final). Para os indivíduos saudáveis, os desfechos foram avaliados antes (basal) e após a suplementação (momento final). Os desfechos primários foram a alteração das concentrações plasmáticas de interleucina-1 beta (IL-1ß), interleucina-6 (IL-6), fator de necrose tumoral alfa (TNF-a) e das concentrações séricas de proteína C-reativa (PCR), albumina, além da relação PCR/albumina. Os desfechos secundários foram a alteração do peso, do índice de massa corporal (IMC) e da porcentagem da perda do excesso de peso. A IL-6, TNF-a, PCR, albumina e relação PCR/albumina não apresentaram alterações significativas na comparação entre os grupos após a suplementação, tanto entre os que foram submetidos à RYGB quanto entre os saudáveis, enquanto a IL-1ß foi maior no grupo simbiótico que no grupo placebo entre os indivíduos saudáveis após a suplementação (p=0,049). A redução no peso corporal dos indivíduos submetidos à RYGB foi significativamente maior no grupo prebiótico comparado ao placebo (-0,7 kg, p=0,001) e ao simbiótico (-0,9 kg, p=0,001). A redução média no IMC daqueles que receberam placebo e prebiótico foi significativamente maior comparado àqueles que foram suplementados com simbiótico (-0,4 kg/m², p=0,037; -0,6 kg/m², p=0,003, respectivamente). Do mesmo modo, o aumento médio no percentual de perda de excesso de peso daqueles que receberam placebo14ou prebiótico foi significativamente maior comparado àqueles que foram suplementados com simbiótico (+2,4%, p=0,030; +3,2%, p=0,007, respectivamente). Entre os indivíduos saudáveis, não houve alteração significativa no IMC e percentual de perda do excesso de peso após a suplementação, mas houve redução significativa do peso no grupo simbiótico (-0,3 kg, p=0,038), embora a magnitude dessa redução não tenha sido significativamente maior que a perda de peso nos grupos placebo e prebiótico. Em conclusão, estes resultados sustentam a hipótese de que a administração oral de FOS após a RYGB promove redução significativa no peso corporal, embora não tenha havido melhora significativa nos marcadores inflamatórios com o uso de prebiótico e simbiótico. Baseado nos resultados apresentados, a utilização de FOS pode representar um potencial adjuvante no tratamento da obesidade.<br> / Abstract : Roux-en-Y gastric bypass (RYGB) is the most commonly performed bariatric surgery around the world, however, there is little evidence on the role of gut microbiota in the improvement of immunological parameters after RYGB, nor the impact of prebiotics and synbiotics in this context. Evidences show that these substances promote positive health effects in obese individuals, such as immunoregulation. Therefore, the aim of this randomized, controlled, triple-blind study was to investigate the effects of prebiotic and synbiotic supplementation on inflammatory markers of subjects undergoing RYGB. Nine individuals undergoing RYGB and nine healthy individuals were randomized into three groups each: placebo, prebiotic and synbiotic. The placebo group received 6 g/day of maltodextrin, the prebiotic group receives 6 g/day of fructo-oligosaccharide (FOS) and the synbiotic group received 6 g/day of FOS + 1x109 Lactobacillus rhamnosus HN001, 1x109 Lactobacillus acidophilus NCFM, 1x109 Lactobacillus paracasei LPC-37 and 1x109 Bifidobacterium lactis HN019 for 15 days. For individuals who underwent RYGB, outcomes were assessed 30 (baseline) and 45 days after surgery (final time point). For healthy individuals, outcomes were assessed before (baseline) and after supplementation (final time point). The primary outcomes were change in plasma concentrations of interleukin-1 beta (IL-1ß), interleukin-6 (IL-6), tumor necrosis factor alpha (TNF-a) and changes in serum concentrations of C-reactive protein (CRP), albumin and CRP/albumin ratio. Secondary outcomes were the change of body weight, body mass index (BMI) and percentage of excess weight loss. IL-6, TNF-a, CRP, albumin and CRP/albumin ratio did not change significantly in the comparison between groups after supplementation, both among those who underwent surgery and among those who were healthy, while IL-1ß was higher in the synbiotic group than in the placebo group among healthy individuals after supplementation (p=0.049). The reduction in body weight of subjects undergoing RYGB was significantly higher in the prebiotic group compared to placebo (-0.7 kg, p=0.001) and compared to synbiotic (-0.9 kg, p=0.001). The mean reduction in BMI of those who received placebo and prebiotic was significantly higher compared to those who were supplemented with synbiotic (-0.4 kg/m², p=0.037; -0.6 kg/m², p=0.003, respectively). Similarly, the average increase in the percentage of excess weight loss of those who received placebo or prebiotic was significantly higher compared to those who were supplemented with synbiotic (+ 2.4%, p=0.030; + 3.2%, p=0.007, respectively). Among16healthy subjects, there was no significant change in BMI and percentage of excess weight loss after supplementation, but there was a significant reduction of body weight in the synbiotic group (-0.3 kg, p=0.038), although the magnitude of this reduction not was significantly higher than the weight loss in the placebo and prebiotic groups. In conclusion, these results support the hypothesis that oral administration of FOS after RYGB promotes significant reduction in body weight, although there was no significant improvement in inflammatory markers with the use of prebiotic and synbiotic. Based on the results presented, the use of FOS may represent a potential adjuvant to surgical treatment of obesity.
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Sobrevida de cinco anos para pacientes com carcinoma ductal infiltrante de mama sem comprometimento de linfonodos axilares: coorte hospitalar, 1992-1996 / Survival analysis five years for patients with breast carcinoma infiltrating duct without comprometiment of axillary lymph nodes: hospital cohort, 1992-1996Eisenberg, Ana Lucia Amaral January 2004 (has links)
Made available in DSpace on 2012-09-05T18:23:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2
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Previous issue date: 2004 / Introdução: No Brasil, o câncer de mama é um importante problema de saúde, pois é o câncer mais incidente em mulheres (cerca de 41.600 casos novos em 2003) e o que apresD AM_doutor AM_doutor.i2id AM_doutor.iso AM_doutor.mst AM_doutor.xrf AM_mestre AM_mestre.i2id AM_mestre.iso AM_mestre.mst AM_mestre.xrf COC_doutor COC_doutor.i2id COC_doutor.iso COC_doutor.mst COC_doutor.xrf COC_mestre COC_mestre.i2id COC_mestre.iso COC_mestre.mst COC_mestre.xrf DoutorUpTo2009.i2id DoutorUpTo2009.iso DoutorUpTo2009.mst DoutorUpTo2009.xrf ENSP_MestreUpTo2009 GM_doutor GM_doutor.i2id GM_doutor.iso GM_doutor.mst GM_doutor.xrf GM_mestre GM_mestre.i2id GM_mestre.iso GM_mestre.mst GM_mestre.xrf INCQS_doutor INCQS_doutor.i2id INCQS_doutor.iso INCQS_doutor.mst INCQS_doutor.xrf INCQS_mestre INCQS_mestre.i2id INCQS_mestre.iso INCQS_mestre.mst INCQS_mestre.xrf IOC_mestre.i2id IOC_mestre.iso IOC_mestre.mst IOC_mestre.xrf IPEC_doutor IPEC_doutor.i2id IPEC_doutor.iso IPEC_doutor.mst IPEC_doutor.xrf IPEC_mestre IPEC_mestre.i2id IPEC_mestre.iso IPEC_mestre.mst IPEC_mestre.xrf MestreUpTo2009.i2id MestreUpTo2009.iso MestreUpTo2009.mst MestreUpTo2009.xrf RR_doutor RR_doutor.i2id RR_doutor.iso RR_doutor.mst RR_doutor.xrf RR_mestre RR_mestre.i2id RR_mestre.iso RR_mestre.mst RR_mestre.xrf URL_AM_doutor.txt URL_AM_mestre.txt URL_COC_doutor.txt URL_COC_mestre.txt URL_GM_doutor.txt URL_GM_mestre.txt URL_INCQS_doutor.txt URL_INCQS_mestre.txt URL_IOC_mestre.txt URL_IPEC_doutor.txt URL_IPEC_mestre.txt URL_RR_doutor.txt URL_RR_mestre.txt gera_xml_teses.sh lista_url.sh saida _teses.txt teses.tar.gz mortalidade no sexo feminino (cerca de 9.300 óbitos em 2003). A detecção precoce desta neoplasia é importante para o tratamento e um dos fatores fundamentais para seu prognóstico é a presença de metástases para os linfonodos axilares. Porém, cerca de 20 a 30 por cento das pacientes com câncer de mama, mesmo que inicialmente apresentem linfonodos axilares negativos, vão recidivar e têm maior probabilidade de morrer da doença e por isso são consideradas pacientes de alto risco. As investigações atuais são dirigidas para identificar estas pacientes de alto risco. Objetivos: Determinar a sobrevida geral de 5 anos e segundo variáveis selecionadas e construir modelo(s) multivariado(s) preditor(es) da sobrevida de mulheres com câncer de mama e linfonodos axilares negativos. Metodologia: Foram selecionadas pacientes com câncer de mama e linfonodos axilares negativos, matriculadas no Hospital do Câncer I / Instituto Nacional de Câncer, Rio de Janeiro, RJ, Brasil, diagnosticadas entre 1/1/1992 e 31/12/1996. Resultados: A sobrevida geral de 5 anos foi de 80 por cento e a sobrevida média de 54 meses (IC95 por cento=53-55). Na análise univariada (Kaplan-Meier) as seguintes variáveis foram estatisticamente significativas: idade da paciente, tratamento, tipo de peça cirúrgica, comprometimento de pele, tamanho do tumor, formação tubular, pleomorfismo nuclear, número de mitoses, grau histológico, invasão vascular, receptor de estrogênio, MIB-1 e p53. Na análise multivariada, foram confeccionados três diferentes modelos de riscos proporcionais de Cox e permaneceram significativas as seguintes variáveis: idade (harzard ratio, HR=1,7; 2,1; 2,3) e invasão vascular (HR=2,5; 1,8; 1,8) (nos 3 modelos), grau histológico (HR=1,0-2,7-4,8; 1,0-2,6-4,3) (em 2 dos modelos) e tratamento (HR=1,0-0,4-0,2-2,3), tamanho do tumor (HR=1,0-1,8-3,5), comprometimento de pele (HR=3,8) e MIB-1 (HR=2,2) (em apenas um dos modelos). Conclusões: Idade, tratamento, tamanho do tumor, comprometimento de pele, grau histológico, invasão vascular e MIB-1 foram as variáveis prognósticas independentes na sobrevida desta coorte de pacientes
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Avaliação da qualidade da água em cinco reservatórios do Rio Iguaçu através de biomarcadores em Astyanax bifasciatus (Characiformes, Characidae)Pereira, Monica Vasques Mangas January 2015 (has links)
Orientador : Prof. Dr. Ciro Alberto de Oliveira Ribeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ecologia e Conservação. Defesa: Curitiba, 24/03/2015 / Inclui referências / Resumo: O rio Iguaçu é o maior do estado do Paraná e o segundo rio urbano mais poluído do Brasil. A avaliação de ecossistemas aquáticos tem utilizado com frequência peixes como bioindicadores de contaminação. No presente estudo, foi utilizada uma espécie de peixe onívora e endêmica da bacia do rio Iguaçu, Astyanax bifasciatus. Biomarcadores são indicadores baseados em respostas mensuráveis, como alterações bioquímicas, celulares, moleculares ou mudanças fisiológicas nas células, fluidos corpóreos, tecidos ou órgãos de um organismo, sendo indicativos da exposição a xenobióticos. Dessa forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar a qualidade da água dos reservatórios presentes ao longo do baixo rio Iguaçu: Foz do Areia, Segredo, Salto Santiago, Salto Osório e Salto Caxias, através do uso de biomarcadores de contaminação ambiental em A. bifasciatus. Os espécimes foram coletados nos períodos de verão e inverno de 2013. Após serem anestesiados, foram obtidos dados biométricos dos peixes para a obtenção do Índice Hepatossomático (IHS) e do Fator de Condição (K). Para as análises bioquímicas, amostras de fígado foram coletadas e congeladas em nitrogênio líquido a fim de avaliar a peroxidação de lipídeos e a atividade da glutationa S-transferase e da catalase. Além disso, foram coletados músculo e cérebro, destinados para análises neurotóxicas, com base na atividade da acetilcolinesterase. Para as análises histopatológicas em fígado, as amostras foram preservadas em ALFAC e analisadas através de microscopia de luz, enquanto as brânquias foram fixadas em glutaraldeído (3%) tamponado em cacodilato de sódio (0,1 M, pH 7,2-7,4) e analisadas por microscopia eletrônica de varredura. A fim de avaliar a genotoxicidade, foi coletado sangue para o Teste de Micronúcleo Písceo e para o Ensaio Cometa. Além disso, análises químicas foram realizadas em água, sedimento e tecido (músculo) para quantificação de metais, e na bile para determinação de hidrocarbonetos policíclicos aromáticos. Os exemplares da espécie A. bifasciatus provenientes dos cinco reservatórios estudados apresentaram alterações medidas através dos biomarcadores que podem ser relacionadas com a baixa qualidade da água, demonstrando que o rio Iguaçu é impactado por xenobióticos, com variações em diferentes épocas do ano. Os resultados deste estudo mostram a importância da ecotoxicologia na avaliação ambiental, e que a integração de diferentes tipos de biomarcadores permite uma visão mais precisa da real situação em que determinado ambiente aquático se encontra. Além disso, os resultados encontrados sugerem a existência de fontes adicionais de contaminação ao longo do baixo rio Iguaçu, e não atribuídas somente à região metropolitana de Curitiba. O rio Iguaçu, além de apresentar unidades de conservação ao longo de seu leito, possui diversas espécies endêmicas, sendo que a manutenção da sua integridade é de extrema importância a sua conservação e manejo. Palavras-chave: biomonitoramento, biomarcadores, Astyanax bifasciatus, rio Iguaçu. / Abstract: Iguaçu river is the largest one in the Paraná state and the second most polluted urban river in Brazil. The studies of aquatic toxicology has frequently used fish as bioindicators of contamination. In the current work was used the species Astyanax bifasciatus, an omnivorous endemic fish species from Iguaçu basin. Biomarkers are indicators based on measurable responses as molecular, biochemical and cellular changes, or even physiological variations in body fluids, tissues or organs, indicating chemical exposure. The aim of the present study was to evaluate the water quality of the reservoirs present along the lower Iguaçu river: Foz do Areia, Segredo, Salto Santiago, Salto Osório and Salto Caxias, through the use of environmental contamination biomarkers in Astyanax bifasciatus. The specimens were collected at the summer and winter of 2013. After anesthesia, the biometric data were measured for obtaining hepatosomatic index (HSI) and the condition factor (K). For the biochemical analyzes, a liver portion was sampled and frozen at liquid nitrogen to assess further lipid peroxidation levels and the glutathione S-transferase and catalase activity. Moreover, muscle and brain were preserved as described above for neurotoxic analysis (acetylcholinesterase activity). To histopathological analyzes in liver, samples were preserved in ALFAC and analyzed by conventional light microscopy, while gills were fixed in glutaraldehyde solution (3%) buffered by cacodilic acid (0.1M, pH 7.2-7.4) and analyzed by scanning electron microscopy JEOL. To assess the genotoxicity, blood was sampled for Piscine Micronucleus test and Comet assay. The chemical analysis were obtained from muscle, water and sediment to metals and in bile to polycyclic aromatic hydrocarbons concentrations. The specimens of A. bifasciatus sampled at the five reservoirs showed some alterations that permit to classify the poor water quality. These results demonstrate that Iguaçu river is impacted by xenobiotics, with variations at different seasons. In addition, the results clearly demonstrated how useful the biomarkers are in the environmental studies, and the integration among them allows a more accurately view of the real situation in the studied area. Furthermore, the results suggest the existence of additional sources of contamination along the river, not only attributed to the Curitiba metropolitan region, as described by governmental reporters. Iguaçu river, besides presenting protected areas along the basin, has several endemic fish species, and the maintenance of its integrity is extremely important to conservation and risk of exposure to fish population and even to human population. Keywords: biomonitoring, biomarkers, Astyanax bifasciatus, Iguaçu river.
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Efeitos toxicológicos do diclofenaco em peixes Rhamdia quelenGhelfi, Ariane January 2014 (has links)
Resumo: Entre os contaminantes emergentes que vem impactando os corpos d'água estão os fármacos. A presença de medicamentos tem sido detectada em diversos países não só na água como no solo e em sedimentos. Muitas vezes, os tratamentos de efluentes tradicionais não são eficazes na eliminação dessas substâncias, e desta forma elas ficam disponíveis no ambiente, oferecendo risco a organismos aquáticos e terrestres por serem potencialmente tóxicos. Entre esses fármacos está o diclofenaco, um anti-inflamatório amplamente prescrito mundialmente, que possui ação analgésica, anti-inflamatória e antipirética. Este trabalho objetivou avaliar os potenciais efeitos agudos tóxicos deste medicamento para o ambiente aquático, através de um bioensaio com peixes Rhamdia quelen, uma espécie nativa da América do Sul. Organismos juvenis foram expostos nas concentrações de 0,2, 2 e 20 ?g/L de diclofenaco sódico em água. Após 96 horas de exposição os animais foram anestesiados para a coleta de sangue e posteriormente eutanasiados. No fígado e rim posterior foram avaliados os biomarcadores bioquímicos de estresse oxidativo CAT, SOD, GPX, GSH, GST e LPO e para avaliar a genotoxicidade foi utilizado o ensaio cometa. No sangue foram avaliados biomarcadores hematológicos e o genotóxico. No fígado não foi evidenciada nenhuma alteração nos biomarcadores bioquímicos e na genotoxicidade. No rim foi observado aumento na atividade da SOD nas concentrações de 2 e 20 ?g/L, diminuição da LPO e de dano genético na maior concentração de diclofenaco testada. Nos resultados dos ensaios hematológicos o número de eritrócitos diminuiu nas concentrações de 0,2 e 2 ?g/L, o número de neutrófilos aumentou na maior concentração e o de monócitos apresentou aumento na concentração de 2 ?g/L. O número de linfócitos e mononucleares diminuiu nas concentrações de 2 e 20 ?g/L. Esses resultados sugerem que a exposição aguda ao diclofenaco provoca alterações hematológicas e renais em R. quelen, apresentando risco potencial de afetar essa espécie e consequentemente o ecossistema no qual encontra-se inserida.
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Efeito do manejo da água de cultivo (troca-zero, troca-zero com recirculação e troca diária) sobre a qualidade de água, índices de produção e biomarcadores em juvenis do camarão-branco, Litopenaeus vannameiHerrera Carvallo, Francisco Javier 22 October 2012 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2006. / Made available in DSpace on 2012-10-22T17:43:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Avaliação clínico laboratorial e imunogenética de pacientes com doença óssea de PagetCastro, Gláucio Ricardo Werner de January 2014 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:51:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2014 / Introdução: Muitos aspectos da etiopatogênese da doença óssea de Paget ainda estão por ser elucidados, incluindo seus fatores causais, os motivos de acometer alguns ossos e poupar outros e os fatores determinantes da variabilidade de sua distribuição geográfica. Métodos: Portadores de doença óssea de Paget foram comparado com controles portadores de osteoartrite para avaliar diferenças nas concentrações séricas das citocinas: TNFa, IL1B, IL-6 e IL-17. Em outro protocolo, portadores de doença óssea de Paget foram comparados com controles portadores de osteoartrite para avaliar diferenças nas concentrações séricas dos biomarcadores de metabolismo ósseo: RANKL, osteoprotegerina, DKK-1, sFRP-1 e osteopontina. Para avaliar a presença de mutações genéticas associadas à doença óssea de Paget, portadores de doença óssea de Paget foram avaliados quanto à presença de polimorfismos genéticos dos genes: sequestossomo 1 (SQSTM1), VCP, TNFRSF11B e TNFRSF11A. A qualidade de vida e seus fatores determinantes foram avaliadas com as os questionários de qualidade de vida SF-36 e WHOQOL-bref. Resultados: Portadores de doença óssea de Paget apresentaram concentrações séricas aumentadas de IL-6 (p<0,05) e concentrações séricas reduzidas de IL-17 (p<0,05) quando comparados com o grupo controle. Os pacientes apresentaram concentrações séricas mais elevadas de osteopontina em comparação aos controles (p<0,05). Além disso, as concentrações de osteopontina e fosfatase alcalina óssea se correlacionaram à atividade e à extensão da doença (p<0,05). Quinze sujeitos (20,8%) apresentavam mutações no exon 8 do gene SQSTM1, oito (11,1%) apresentaram a mutação Pro392Leu, e os restantes apresentavam uma mutação ainda não descrita na literatura, Thr430Pro. Os únicos parâmetros significativamente associados à pior qualidade de vida foram: dor óssea, deformidades e estado civil (p<0,05). Conclusão: O presente estudo demonstrou pela primeira vez concentrações reduzidas de IL-17 e aumento das concentrações de osteopontina em portadores de doença óssea de Paget. Além disso, foi encontrada uma mutação do gene SQSTM1 até então inédita na literatura médica.<br> / Abstract : Many aspects of Paget's Disease of Bone (PDB) are still unknown, including its cause, the reasons for its bone distribution and the what determines is geographic distribution. Methods: Patients with PDB were compared with controls with primary osteoarthritis to evaluate possible differences in levels of pro-inflammatory cytokines: TNFa, IL1B, IL-6 and IL-17. In another protocol, patients with PDB were compared with controls with primary osteoarthritis to evaluate possible differences in levels of RANKL, osteoprotegerin, DKK-1, sFRP-1, osteopontin. Polymorphism of the following genes: SQSTM1, VCP, TNFRSF11B and TNFRSF11A were evaluated in PDB patients. To evaluate quality of life and determinant parameters, PDB patients answered to Brazilian versions of SF-36 and WHOQOL questionnaires. Results: Patients with PDB presented higher levels of IL-6 (p<0.05) and lower levels of IL-17 (p<0.05) in comparison to controls. PDB patients presented higher levels of osteopontin in comparison to controls (p<0.05). Moreover, osteopontin and BAP were correlated to disease activity and extension (p<0.05). Fifteen subjects (20.8%) carried mutations in exon 8 of ths SQSTM1 gene, eight (11.1%) carried the Pro392Leu mutation, while the remainders presented a previously undescribed mutation, Thr439Pro. The only parameters significantly associated to quality of life were: bone pain, deformities and marital status (p<0.05). Conclusion: The present study has demonstrated lfor the first time low levels of IL-17 and high levels of osteopontin in PDB patients. Besides, a previously not described mutation of the SQSTM1 gene were found.
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Associação entre marcadores biológicos com os graus de fibrose hepática e atividade inflamatória no complexo hepatite C e esquistossomose / Association between biological markers with the degrees of fibrose hepática and inflammatory activity in the complex hepatitis C and schistosomiasisMorais, Clarice Neuenschwander Lins de January 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007 / A fibrose é a principal causa de morbidade e mortalidade relacionada a hepatite C e esquistossomose. Vários estudos surgiram na tentativa de desenvolver métodos não invasivos para avaliar o grau da fibrose hepática. O grau das lesões necro-inflamatórias, estágio da fibrose e a possível relação sinérgica na co-infecção hepatite C e esquistossomose para uma progressão à doença hepática severa não foi completamente elucidada. O objetivo principal desse projeto foi avaliar marcadores biológicos com potencial para previsão de severidade/gravidade de fibrose hepática na esquistossomose, hepatite C e na co-infecção. Foram selecionados: pacientes com hepatite C (n=37), hepatite C/ esquistossomose hepatoesplênica (n=19), e com esquistossomose hepatoesplênica, (EHE, n=23) e grupo controle (n=13). Biópsias hepáticas, ultrassonografia, parasitológicos de fezes, testes bioquímicos de bilirrubinas, alanina amino transferase (ALT) e aspartato amino transferase (AST), eletroforese de proteínas, gama- glutamil transferase (g-GT), fosfatase alcalina (FA) e ácido hialurônico foram realizados em todos os pacientes. Também foram realizadas pesquisa de anticorpos para hepatite B, anti-HIV, anti-HCV e confirmação da hepatite C através da detecção do RNA viral e genotipagem. As citocinas IFN-g, TGF-b, TNF-? e IL-13 foram dosadas no plasma e as citocinas IL-13 e IFN-g foram detectadas nas biópsias hepáticas através da técnica de RT-PCR em Tempo Real. A análise estatística foi realizada através de ANOVA e curvas ROC, considerando p < 0,05 como significativo. Não se observou diferenças estatísticas nos níveis séricos das citocinas TGF-b, IFN-g, TNF-a e IL-13 entre os 4 grupos estudados. Em relação aos graus de fibrose demonstrou-se que a citocina TNF-a (p= 0,010), ácido hialurônico (p= 0,036) e FA (p= 0,004) diferenciaram os pacientes com hepatite C entre fibrose leve e severa. Nesses pacientes, os níveis de ALT (p = 0,013), AST (p = 0,030) e FA (p = 0,021) diferenciaram em atividade inflamatória leve e severa. Nos pacientes com EHE, demonstramos que a gGT (p= 0,034) e relação AST/ plaquetas diferenciou fibrose grau II e III. Analisando sensibilidade e especificidade, concluiu-se que os possíveis marcadores biológicos para diagnosticar fibrose e atividade inflamatória hepática em pacientes com hepatite C foram TNF-a, ácido hialurônico, FA, ALT e AST
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