Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-09Bitstream added on 2014-06-13T18:29:07Z : No. of bitstreams: 1 souza_ga_me_botfm.pdf: 728875 bytes, checksum: bb4ff0462cb962c5ab274f53fd982306 (MD5) / Dietas inadequadas, enriquecidas com carboidratos e lipídios, têm sido responsáveis pelo desenvolvimento de diversas patologias relacionadas ao estresse oxidativo. Portanto, atualmente vem crescendo o interesse na descoberta de substâncias naturais que possam atuar como agentes antioxidantes, capazes de conter, ou até mesmo reverter os danos provocados pelo estresse oxidativo. O objetivo deste capítulo foi determinar os efeitos do chá de folhas de graviola e do seu componente -sitosterol, em condições normais e de ingestão de dieta rica em colesterol e sacarose sobre os parâmetros nutricionais, morfométricos e calorimétricos, bem como sobre as concentrações séricas de glicose. Foram utilizados 48 ratos machos, adultos, Wistar, divididos em 6 grupos: PC (controle) que recebeu ração padrão (DP) e água para beber; PA, que recebeu DP e chá de folhas de Annona muricata (30g/L); PB, DP e beta-sitosterol na água de beber (0,02g/L); HC, dieta hipercalórica (DH) e água para beber; HA, DH e chá de folhas de Annona muricata (30g/L); HB, DH e beta-sitosterol na água de beber. Após 42 dias de tratamento, foi realizada calorimetria indireta, em condições alimentado e jejum. Após 49 dias foi realizada a glicemia de jejum, o teste oral de tolerância a glicose (TOTG) e o sacrifício dos animais, sendo coletado o sangue, que foi utilizado para determinação da concentração de hidroperóxido de lipídio e substâncias antioxidantes totais. A obesidade foi evidenciada nos animais que receberam DH pela elevação no peso final, ganho de peso e índice de Lee, quando comparados aos animais que receberam dieta padrão. Animais do grupo HA apresentaram menor circunferência abdominal em relação aos grupos HB e HC. Houve correlação linear positiva entre o peso final e IMC e entre o peso final...

Orientador: Ana Lúcia Barretto Penna / Banca: Ariene G. Fernandes Van Dender / Banca: Elisa Helena Giglio Ponsano / Banca: Hamilton Cabral / Banca: Roberto da Silva / Resumo: O queijo Prato é o principal queijo maturado brasileiro e o segundo tipo de queijo mais consumido no Brasil. O produto desenvolve características próprias durante o processo de maturação, que deve ser de no mínimo 25 dias. Sua versão com teor reduzido de gordura tem sido objeto de estudos devido à importância que se tem dado aos alimentos pouco calóricos. Queijos com teor reduzido de gordura normalmente necessitam de um maior período para adquirir suas características organolépticas. Neste trabalho, a temperatura de maturação e a adição de enzimas proteolíticas, de origem vegetal (fastuosaína) e microbiana (Protemax® 403), foram avaliadas durante a maturação do queijo Prato. Os índices de maturação dos queijos foram maiores com o uso da enzima Protemax® 403 com atividade enzimática 1.200.000 U. e temperatura de maturação de 12ºC. A adição das enzimas promoveu aumento na concentração de compostos voláteis (ácidos carboxílicos, álcoois, cetonas e compostos sulfurados) sem afetar o perfil de ácidos graxos durante a maturação do queijo Prato com teor reduzido de gordura. A partir destes resultados, o efeito da adição da enzima proteolítica Protemax® 403 sobre as características microbiológicas, físicas e sensoriais dos queijos foi conduzido. O uso da Protemax® 403 não influenciou a população de bactérias láticas, a composição físico-química e a capacidade de derretimento dos queijos, porém, modificou os valores de pH, a acidez, os índices de maturação, a textura, a microestrutura e as características sensoriais. Tais resultados levam à conclusão que a enzima de origem microbiana teve papel significativamente positivo na maturação do queijo Prato com teor reduzido de gordura / Abstract: Prato cheese is the main Brazilian ripened cheese and the second most consumed cheese in Brazil. The product develops its characteristics during the ripening process which must be of at least 25 days. Cheeses with reduced fat content have been studied due to the importance that has been given to low calorie foods. These products normally need a large period to acquire these organoleptic characteristics. In this work, the temperature of ripening and the addition of proteolytic enzymes, of vegetal (fastuosaína) and microbial (Protemax® 403) origin were studied during the ripening of Prato cheese. The proteolysis indices of the cheeses were highest with the use of Protemax® 403 with enzymatic activity 1.200.000 U and ripening temperature of 12 ºC. Enzyme addition provided an increase in the concentration of volatile compounds (carboxylic acid, alcohol, ketones and sulphur compounds) and they had no influence on the free fatty acid profile of the reduced fat Prato cheese, during ripening. From these results, the effect of the addition of the proteolytic enzyme (Protemax® 403), on the microbiological, physical and sensorial characteristics of the cheese, were studied. The use of proteolytic enzyme Protemax® 403 did not influence the population of lactic bacteria, the physicochemical composition nor the meltability of the cheeses. However, it modified pH values, acidity, proteolysis indices, texture, microstructure and sensorial characteristics. From these results it can be concluded that the microbial enzyme had a positive action on the ripening of reduced fat content Prato cheese / Doutor

Orientador: Ethel Lourenzi Barbosa Noveli / Banca: Marilia Afonso Rabelo Buzalaf / Banca: Célia Regina Nogueira / Resumo: Dietas inadequadas, enriquecidas com carboidratos e lipídios, têm sido responsáveis pelo desenvolvimento de diversas patologias relacionadas ao estresse oxidativo. Portanto, atualmente vem crescendo o interesse na descoberta de substâncias naturais que possam atuar como agentes antioxidantes, capazes de conter, ou até mesmo reverter os danos provocados pelo estresse oxidativo. O objetivo deste capítulo foi determinar os efeitos do chá de folhas de graviola e do seu componente -sitosterol, em condições normais e de ingestão de dieta rica em colesterol e sacarose sobre os parâmetros nutricionais, morfométricos e calorimétricos, bem como sobre as concentrações séricas de glicose. Foram utilizados 48 ratos machos, adultos, Wistar, divididos em 6 grupos: PC (controle) que recebeu ração padrão (DP) e água para beber; PA, que recebeu DP e chá de folhas de Annona muricata (30g/L); PB, DP e beta-sitosterol na água de beber (0,02g/L); HC, dieta hipercalórica (DH) e água para beber; HA, DH e chá de folhas de Annona muricata (30g/L); HB, DH e beta-sitosterol na água de beber. Após 42 dias de tratamento, foi realizada calorimetria indireta, em condições alimentado e jejum. Após 49 dias foi realizada a glicemia de jejum, o teste oral de tolerância a glicose (TOTG) e o sacrifício dos animais, sendo coletado o sangue, que foi utilizado para determinação da concentração de hidroperóxido de lipídio e substâncias antioxidantes totais. A obesidade foi evidenciada nos animais que receberam DH pela elevação no peso final, ganho de peso e índice de Lee, quando comparados aos animais que receberam dieta padrão. Animais do grupo HA apresentaram menor circunferência abdominal em relação aos grupos HB e HC. Houve correlação linear positiva entre o peso final e IMC e entre o peso final... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Not available / Mestre

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A obesidade é uma doença crônica não transmissível, caracterizada pelo excesso de gordura corporal. Então, a gordura acumulada na região abdominal promove resistência à insulina e conseqüentemente alterações metabólicas as quais em conjunto configuram o quadro de síndrome metabólica (SM). O genótipo Pro12Pro parece estar relacionado à menor sensibilidade à insulina, desencadeando o processo fisiopatológico da SM. Então, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de uma dieta hipocalórica sobre o perfil metabólico e composição corporal de mulheres com e sem SM com genótipo Pro12Pro no gene PPAR&#947;2. O presente estudo trata-se de um ensaio clínico, onde mulheres entre 30 e 45 anos, obesas grau I, sem SM (n=23) e com SM (n=7) foram submetidas à dieta hipocalórica por 90 dias. A identificação do genótipo foi realizada por reação em cadeia da polimerase (PCR). No início e nos dias 30, 60 e 90 foram avaliados peso corporal, massa magra (MM), massa gorda (MG), componentes da SM, uricemia, insulinemia, leptinemia, adiponectinemia, os índices HOMA-IR e QUICKI. O consumo energético foi avaliado nas 12 semanas de tratamento. Foi utilizado o teste t de Student para amostras independentes foi utilizado para comparar os grupos entre si, e o modelo pareado para comparar a evolução dentro de cada grupo em relação ao início do estudo. Todas as mulheres apresentaram genótipo Pro12Pro. O grupo com SM apresentou menor HDL-c (44,43,2 vs. 56,82,4 mg/dL, p=0,013), e maior triglicerídeo (180,926,7 vs. 89,76,6mg/dL, p=0,014) e VLDL-c (36,25,3 vs. 17,91,3mg/dL, p=0,014) no início do estudo. Ambos os grupos apresentaram redução ponderal (-3,30,7% grupo sem SM e - 4,20,9% grupo com SM) e da circunferência da cintura (-2,40,5% grupo sem SM e - 5,91,4% grupo com SM) significativas. O grupo sem SM reduziu da MG progressivamente até os 90 dias (37,00,8 para 36,60,5%, p=0,02), e com isso aumentou MM (62,00,5 para 63,40,5%, p=0,01), o grupo com SM também reduziu MG ao longo do estudo (32,62,3 para 29,62,4%, p<0,01) e aumentou MM significativamente (62,21,0 para 64,31,3%). A pressão arterial sistólica reduziu no primeiro mês de tratamento no grupo sem SM (de 120,41,8 para 112,32,1 mmHg, p<0,01). No que diz respeito aos parâmetros metabólicos, o grupo sem SM mostrou redução da insulinemia (32,54,2 para 25,92,4U/mL, p=0,05) e aumento da adiponectinemia (4,70,6 para 5,10,8 ng/mL, p=0,02) aos 30 dias, do colesterol total (180,25,8 para 173,85,4 mg/dL, p=0,04), e da leptina (27,01,9 para 18,21,4 ng/mL, p<0,01) aos 60 dias, porém, houve redução do QUICKI aos 90 dias (0,390,03 para 0,350,01, p=0,01). No grupo com SM, a leptinemia reduziu aos 60 dias (20,31,9 para 14,71,1 ng/mL, p=0,01) e a adiponectinemia aos 90 dias (5,71,2 para 7,11,4 ng/mL, p<0,01), também houve remissão de 57,1% dos casos de SM. Sugerimos que, a dieta hipocalórica foi eficaz na redução do peso corporal e da MG, principalmente a localizada na região abdominal. Conseqüentemente, houve melhora considerável do perfil metabólico relacionado à obesidade no grupo sem SM, e também dos marcadores de sensibilidade à insulina e cardioprotetores relacionados à SM, além da remissão dos casos de SM. / Obesity is a non-transmissible chronic disease, characterized by excess of body fat. Then, the accumulated fat in the abdominal region promotes insulin resistance and therefore metabolic changes which together form the clustering of the metabolic syndrome (MS). Genotype Pro12Pro seems to be related to reduced insulin sensitivity, triggering the process of the MS. The objective of this study was to evaluate the effect of a low-calorie diet on metabolic profile and body composition in women with and without MS with genotype Pro12Pro on PPAR&#947;2 gene. It is a clinical trial where women between 30 and 45 years, obese class I, without MS (n = 23) and with MS (n = 7) were submitted to a hypocaloric diet for 90 days. The identification of genotype was performed by polymerase chain reaction (PCR). At the beginning and on 30, 60 and 90 days were evaluated body weight, lean body mass (LBM), body fat mass (BFM) components of MS, serum uric acid, insulin, leptin, adiponectin, the indexes HOMA-IR and QUICKI. The energy consumption was assessed at 12 weeks of treatment. The Student t test for independent samples was used for comparison between groups, and the dependent samples test to compare the evolution within each group relative to baseline. All women had Pro12Pro genotype. The MS group had lower HDL-C (44.43.2 vs. 56.82.4 mg/dL, p=0.013) and higher triglyceride (180.926.7 vs. 89.76.6 mg/dL, p=0.014) and VLDL-c (36.25.3 vs. 17.91.3 mg/dL, p=0.014) at baseline. Both groups showed significant weight reduction (-3.30.7% without MS group and -4.20.9% SM group) and waist circumference (-2.40.5% group without SM and -5.91.4% SM group). The group without MS reduced BFM progressively until 90 days (37.00.8 to 36.60.5%, p=0.02), and increased LBM (62.00.5 to 63.40.5%, p=0.01), also the group with SM reduced BFM during the study (32.62.3 to 29.62.4%, p<0.01) and increased LBM significantly (62.21.0 to 64.31.3%). systolic blood pressure (SBP) decreased in the first month of treatment in the group without MS (120.41.8 to 112.32.1 mmHg, p<0.01). With regard to metabolic parameters, the group without SM showed a reduction of serum insulin (32.54.2 to 25.92.4 U/mL, p = 0.05) and increase of serum adiponectin (4.7 0.6 to 5.10.8 ng/mL, p=0.02) at 30 days, total cholesterol (180.25.8 to 173.85.4 mg/dL, p=0.04) and HDL-c (56.82.4 to 52.22.2 mg/dL, p=0.04) and serum leptin (27.01.9 to 18.21.4 ng/mL, p< 0.01) at 60 days, although had a reduction of QUICKI to 90 days (0.390.03 to 0.350.01, p=0.01). The MS group, the serum leptin levels decreased at 60 days (20.31.9 to 14.71.1 ng/mL, p=0.01) and serum adiponectin to 90 days (5.71.2 to 7.11.4 ng/mL, p<0.01), there was also a remission of 57,1% in cases of MS. We suggest that the hypocaloric diet was efficient on reduction in body weight and BFM, mainly located in the abdominal region. Therefore, considerable improvement of metabolic profile related to obesity in the group without MS was observed, as well as improvement of markers of insulin sensitivity and cardioprotection related to SM, in addition to remission of cases of MS.

abstract: As part of the recently passed Patient Protection and Affordable Care Act, chain restaurants with 20 or more locations nationwide are required to post calorie information on menus and menu boards in order to help consumers make healthier decisions when dining out. Previous studies that have evaluated menu-labeling policies show mixed results and the majority have been conducted in urban cities along the east coast. This study was the first to look at the effectiveness of menu labeling in a southwest population. The primary objective of this cross-sectional study was to determine if noticing or using calorie menu labels in a fast food restaurant was associated with purchasing fewer calories. A second aim of this study was to evaluate the relationship between socio-demographic characteristics and the likelihood of noticing and using menu labeling. Customer receipts and survey data were collected from 329 participants using street-intercept survey methodology at 29 McDonald's locations in low- and high-income neighborhoods throughout the Phoenix metropolitan area. The study population was 63.5% male, 53.8% non-Hispanic white, and 50.8% low-income. Results showed that almost 60% of the study sample noticed calorie menu labeling and only 16% of participants reported using the information for food or beverage purchases. Income was the only socio-demographic characteristic that was associated with noticing menu labeling, with higher-income individuals being more likely to notice the information (p=0.029). Income was also found to be associated with using menu labels, with higher income individuals being more likely to use the information (p=0.04). Additionally, individuals with a bachelors degree or higher were more likely to use the information (p=0.023) and individuals aged 36 to 49 were least likely to use the information (p=0.046). There were no significant differences in average calories purchased among those who noticed menu labeling; however, those who reported using calorie information purchased 146 fewer calories than those who did not use the information (p=0.001). Based on these findings it is concluded that calorie menu labeling is an effective public policy and that nutrition education campaigns should accompany national menu labeling implementation in order to make the policy more effective across all socio-demographic groups. / Dissertation/Thesis / M.S. Nutrition 2014

O envelhecimento envolve um progressivo declínio na eficiência metabólica dos sistemas biológicos ao longo do tempo. Embora não possa ser evitado, o envelhecimento pode ter seus fenótipos típicos mitigados em organismos submetidos à restrição calórica, um regime dietético que consiste em uma oferta diminuída de calorias. Ao longo do tempo, a levedura Saccharomyces cerevisiae mostrou-se um importante organismo modelo para o estudo de importantes marcas relacionadas ao envelhecimento, sobretudo por ser responsiva à restrição calórica. Através de uma abordagem do metabolismo energético e do estado de óxido-redução celular, nós temos buscado identificar quais são os fatores imprescindíveis para a exibição do aumento do tempo de vida cronológico dessa levedura. Nós verificamos que defeitos específicos na síntese de nicotinamida adenina dinucleotídeo aumentam a geração mitocondrial de espécies reativas de oxigênio pela enzima dihidrolipoil desidrogenase, porém não suprimem o aumento da do tempo de vida cronológico de S. cerevisiae. Por outro lado, os mutantes dessa levedura irreponsíveis à restrição calórica são aqueles que possuem defeitos no metabolismo aeróbico, mais especificamente na montagem da cadeia de transporte de elétrons. Também verificamos que diferentes mutações em enzimas do ciclo dos ácidos tricarboxílicos alteram a taxa de perda do DNA mitocondrial de S. cerevisiae numa forma dependente da concentração inicial de glicose nos meios de cultura e também do tempo de cultivo. Também observamos que a eficiência energética em S. cerevisiae cultivada sob restrição calórica é aumentada em relação à levedura cultivada em condição controle. Finalmente, também observamos que a morfologia mitocondrial é alterada pelo estado metabólico celular e se correlaciona com a geração de espécies reativas de oxigênio nesse organismo. Assim sendo, em conjunto, esses dados revelam importantes modificações metabólicas e no estado de óxido redução proporcionadas pela restrição calórica e como os fenótipos típicos do envelhecimento podem ser mitigados em S. cerevisiae, assim como quais são os fatores imprescindíveis para a resposta dessa levedura à restrição calórica. / Aging involves a progressive decline in metabolic efficiency of biological systems over time. Although it cannot be avoided, aging phenotypes are delayed in organisms undergoing caloric restriction, a dietary regimen consisting of a reduced availability of calories. The yeast Saccharomyces cerevisiae has proved to be an important model organism for studying important characteristics related to aging, and is responsive to caloric restriction. We sought to identify factors essential for increased chronological lifespan in yeast by investigating changes in energy metabolism and redox state. We found that defects in the synthesis of nicotinamide adenine dinucleotide increased mitochondrial generation of reactive oxygen species by the enzyme dihidrolipoil dehydrogenase, but did not suppress the increase in chronological life span. On the other hand, mutants of this yeast which do not respond to caloric restriction are those that have defects in aerobic metabolism, specifically in the assembly of the electron transport chain. We also found that different mutations in enzymes of the citric acid cycle alter the rate of loss of mitochondrial in a manner dependent on the initial concentration of glucose in culture media and culture time. We also observed that energy efficiency in S. cerevisiae grown under caloric restriction is increased compared to yeast grown under control conditions. Finally, we also observed that mitochondrial morphology is altered by the cellular metabolic state and correlates with the generation of reactive oxygen species in this organism. Thus, altogether, these data reveal significant changes in metabolism and redox state promoted by caloric restriction, how phenotypes typical of aging can be prevented in S. cerevisiae, as well as what factors are required for the response of yeast to caloric restriction.

Neste estudo, avaliamos o efeito da restrição calórica e do treinamento resistido na massa corporal e na sensibilidade à insulina de ratas ovariectomizadas. 80 ratas fêmeas da linhagem Holtzman foram distribuídas em 8 grupos (n=10 cada): ovariectomizado (OVX), ovariectomizado com restrição calórica (OVX RC), ovariectomizado com treinamento resistido (OVX TR), ovariectomizado com restrição calórica e treinamento resistido (OVX TR+RC), Sham operado (SHAM), Sham com restrição calórica (SHAM RC), sham com treinamento resistido (SHAM TR), sham com restrição calórica e treinamento resistido (SHAM TR+RC). Após 13 semanas de intervenção, foram analisados: massa corporal, gordura corporal; concentrações sanguíneas de glicose, insulina e adiponectina; conteúdo de AKT total e fosforilada, pi3k e Glut 4 (nos tecidos adiposos subcutâneo e retroperitoneal). As ratas ovariectomizadas (OVX, OVX RC, OVX TR e OVX TR+RC) apresentaram maior massa corporal e gordura corporal quando comparadas ao grupo SHAM. As concentrações de glicose e insulina foram semelhantes em todos os grupos experimentais, porém a concentração de adiponectina foi menor nos grupos ovariectomizados (OVX, OVX RC, OVX TR e OVX TR+RC), quando comparados ao grupo SHAM. A RC e o TR aumentaram a concentração de adiponectina quando comparado ao grupo OVX. Não houve diferença entre os grupos em relação à via de sinalização da insulina nos tecidos adiposos subcutâneo e retroperitoneal. Concluímos que a ovariectomia causa aumento de massa e gordura corporal, levando à menor concentração de adiponectina, e que a RC e o TR alteram estas modificações. / In this study, we evaluated the effect of calorie restriction and strength training on the body weight and insulin sensitivity of ovariectomized rats. Eighty female Holtzman rats were divided into eight groups (n=10 per group): ovariectomized (OVX), ovariectomized plus calorie restriction (OVX-CR), ovariectomized plus strength training (OVX-ST), ovariectomized plus strength training and calorie restriction (OVX-ST+CR), sham operated (SHAM), sham plus calorie restriction (SHAM-CR), sham plus strength training (SHAM-ST), and sham plus strength training and calorie restriction (SHAM-ST+CR). The following variables were analyzed after 13 weeks of intervention: body weight; body fat; blood concentrations of glucose, insulin and adiponectin; total and phosphorylated AKT content; pi3k and Glut 4 (in subcutaneous and retroperitoneal adipose tissues). Ovariectomized rats (OVX, OVX-CR, OVX-ST, and OVX-ST+CR) had a higher body weight and body fat than SHAM animals. Glucose and insulin concentrations were similar in all experimental groups, but adiponectin concentration was lower in the ovariectomized groups (OVX, OVX-CR, OVX-ST, and OVX-ST+CR) when compared to the SHAM group. Calorie restriction and ST increased the concentration of adiponectin when compared to the OVX group. There was no difference between groups in terms of insulin signaling in subcutaneous or retroperitoneal adipose tissue. We conclude that ovariectomy increases body weight and body fat, reducing adiponectin concentration, and that CR and ST alter these modifications.

hjlahgih / Thesis (DPhil (Human Movement Science))--University of Pretoria, 2005. / Biokinetics, Sport and Leisure Sciences / unrestricted

Master of Science / Department of Computing and Information Sciences / Mitchell L. Neilsen / It is well recognized that staying fit and healthy is a significant public problem now days and engaging in moderate levels of physical activity and having healthy food is associated with positive outcomes. Many dietary applications are being used at present times, but they don’t include physical activity in their assessment and even if they do so they require user to manually enter the data which gives room for unintentional mistakes. Nutritional wizard is a dietary and nutritional coach that works synchronously with Fitbit data to achieve this. This application analyses the food intake of an individual and automatically inspects this with his physical activity recorded through the Fitbit to give a cover on his health and fitness. The application has four main parts, input food, analysis, profile, and recipes. In input food part, user gives all the details of the food he had on that day and nutritional wizard gives the person’s calorie intake, steps he made on that day, calories spent, excess calories stored, steps he has to still make on that day. Analysis part of the application gives graphical representations of daily calorie intake in a specific time frame given by user. Profile has user’s height and weight based on which BMI of user is calculated and is represented in a Gantt chart showing if he is in low, good or high BMI. Last Recipes module has few recipes categorized into different selections low carb, low fat, and low protein which user can use to decrease his calorie intake. The completely developed app can be used by any user maintaining a fit bit account to provide good nutritional benefits.

High calorie intake has proved harmful worldwide, as it has led to many diseases. However, dieticians have deemed that a standard intake of number of calories is essential to maintain the right balance of calorie content in human body. In this thesis, we consider the category of tools that use image processing to recognize single and multiple mixed-food objects, namely Deep Learning and the Support Vector Machine (SVM). We propose a method for the fully automatic and user-friendly calibration of the sizes of food portions. This calibration is required to estimate the total number of calories in food portions. In this work, to compute the number of calories in the food object, we go beyond the finger-based calorie calibration method that has been used in the past, by automatically measuring the distance between the user and the food object. We implement a block resize method that uses the measured distance values along with the recognized food object name to further estimate calories. While measuring distance, the system also assists the user in real time to capture an image that enables the quick and accurate calculation of the number of calories in the food object. The experimental results showed that our method, which uses deep learning to analyze food objects, led to an improvement of 16.58% in terms of recognition, over the SVM-based method. Moreover, the block resize method showed that percentage error for calorie estimation was reduced to 3.64% as compared to 5% achieved in previous methods.