Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T13:22:30Z No. of bitstreams: 2 tiago_jose_silva.pdf: 1811358 bytes, checksum: 1654fd6d60ba2571e51302a48d7407c9 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T13:25:31Z (GMT) No. of bitstreams: 2 tiago_jose_silva.pdf: 1811358 bytes, checksum: 1654fd6d60ba2571e51302a48d7407c9 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T13:25:33Z (GMT) No. of bitstreams: 2 tiago_jose_silva.pdf: 1811358 bytes, checksum: 1654fd6d60ba2571e51302a48d7407c9 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T13:26:09Z (GMT) No. of bitstreams: 2 tiago_jose_silva.pdf: 1811358 bytes, checksum: 1654fd6d60ba2571e51302a48d7407c9 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-07T13:26:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 tiago_jose_silva.pdf: 1811358 bytes, checksum: 1654fd6d60ba2571e51302a48d7407c9 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Previous issue date: 2014 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / A produ??o biotecnol?gica de enzimas por fungos filamentosos requer o conhecimento das suas caracter?sticas de crescimento, fisiologia e metabolismo porque a compreens?o das respostas biol?gicas e nutricionais contribui para o ajuste dos bioprocessos. Neste trabalho foram analisados o crescimento apical e alguns par?metros bioqu?micos e fisiol?gicos da resposta das linhagens Aspergillus tubingensis AN1257 e Talaromyces trachyspermus T10.5 a fontes de carbono complexas indutoras de carboidrases. Foi utilizada uma abordagem polif?sica de identifica??o baseada em caracter?sticas fenot?picas e moleculares. As linhagens foram cultivadas em meio suplementado com glicose (controle), amido e carboximetilcelulose (CMC). O crescimento apical foi avaliado quanto aos eventos iniciais, hidrata??o, polariza??o e extens?o do tubo germinativo, bem como foi investigado o papel da via de PKC nestes processos. As linhagens diferiram quanto ao potencial de produ??o de carboidrases sendo o T. trachyspermus T10.5 o mais eficiente para a express?o de amilase. A produ??o de celulase foi verificada apenas em meio s?lido. Os eventos iniciais do crescimento apical de T. trachyspermus T10.5 foram atrasados pelos carboidratos polim?ricos em meio s?lido: ap?s 14h de cultivo a propor??o de con?dios apolares, polares e com tubo germinativo foi de 31,0 ? 5,7%; 34,0 ? 0,0% e 35,0 ? 5,7% (glicose) contra 40,0 ? 0,0%; 45,0 ? 0,8% e 14,0 ? 1,6% (amido) ou 90,0 ? 4,9%; 6,0 ? 1,6% e 4,0 ? 3,3% (CMC). A biomassa de T. trachyspermus T10.5 foi formada exponencialmente no per?odo de 24 a 48h em cultivo submerso e n?o foi diminu?da por nenhuma fonte de carbono. Nas culturas submersas, a fase exponencial de crescimento foi simult?nea ao consumo exponencial do substrato; o esgotamento das fontes de carbono precedeu o in?cio da fase estacion?ria; a atividade de ?-amilase (239,2 ? 11 U/min.mL) induzida por amido coincidiu com o crescimento exponencial, permaneceu est?vel durante a fase estacion?ria e foi reprimida por glicose. O crescimento apical de A. tubingensis AN1257 respondeu mais rapidamente ? fonte de carbono: 36,0 ? 4,3% dos con?dios cultivados em meio suplementado com glicose estavam polarizados ap?s 6h, contra 1,3 ? 0,9% (amido) e 2,7 ? 1,9% (CMC). A extens?o do tubo germinativo da linhagem AN1257 tamb?m foi atrasada e reduzida por amido e CMC. A forma??o de biomassa de A. tubingensis AN1257 nas culturas submersas foi fortemente reduzida por CMC, que apresentou um efeito tamponante no meio. Nas demais culturas submersas, o crescimento exponencial de A. tubingensis AN1257 ocorreu entre 0 a 24h (glicose) ou 12 a 24h (amido) coincidindo com forte acidifica??o do meio e consumo acentuado de substrato. O efeito da ativa??o de PKC foi distinto nas duas linhagens: a ativa??o dessa enzima n?o parece modular a germina??o em A tubingensis AN1257, mas inibe fortemente a germina??o de T. trachyspermus T10.5. Assim, as duas esp?cies apresentaram respostas diferentes ? fonte de carbono e ? ativa??o de PKC, com fisiologia, germina??o e crescimento apical peculiares, cuja compreens?o permitir? direcionar a aplica??o biotecnol?gica das linhagens AN1257 e T10.5 de forma mais eficiente. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-gradua??o em Ci?ncias Farmac?uticas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2014. / ABSTRACT The biotechnological production of enzymes by filamentous fungi requires the knowledge of its characteristics of growth, physiology and metabolism because the comprehension of the biological and nutritional responses contributes to the adjustment of the bioprocesses. In this work, it were analyzed the apical growth, and some biochemical and physiological parameters of the response of the strains Aspergillus tubingensis AN1257 and Talaromyces trachyspermus T10.5 to complex carbon sources that induce carbohydrases. It was utilized a polyphasic approach of identification based on phenotypic and molecular characteristics. The strains were cultivated in media supplemented with glucose (control), starch and carboxy-methylcellulose (CMC). The apical growth was evaluated regarding the initial events, hydration, polarization and germtube extension, and the role of the PKC pathway in these processes was investigated as well. The strains differed according to their potential for carbohydrase production and T. trachyspermus T10.5 was the more efficient for amylase expression. Cellulase production was verified only in solid media. The initial events of T. trachyspermus T10.5 apical growth were delayed by the polymeric carbohydrates in solid media: after 14h of cultivation, the proportion of non-polar, polar and germtube-containing conidia was 31.0 ? 5.7%; 34.0 ? 0.0% and 35.0 ? 5.7% (glucose) versus 40.0 ? 0.0%; 45.0 ? 0.8% and 14.0 ? 1.6% (starch) or 90.0 ? 4.9%; 6.0 ? 1.6% and 4.0 ? 3.3% (CMC). The biomass of T. trachyspermus T10.5 was formed exponentially from 24 to 48h during submerged cultivation, and it was not decreased by any carbon source. In the submerged cultures, the exponential growth phase was simultaneous to the exponential consumption of the substrate; depletion of the carbon sources preceded the stationary phase; the ?-amylase activity (239.2 ? 11 U/min. mL) induced by starch coincided with the exponential growth, remained stable during the stationary phase and was repressed by glucose. A. tubingensis AN1257 apical growth responded more promptly to the carbon source: 36.0 ? 4.3% of the conidia cultivated in medium supplemented with glucose were polarized after 6h, versus 1.3 ? 0.9% (starch) and 2.7 ? 1.9% (CMC). Germtube extension by strain AN1257 was also delayed and reduced by starch and CMC. Biomass formation by A. tubingensis AN1257 in submerged cultures was strongly reduced by CMC, which presented a buffering effect in the medium. In other submerged cultures, the exponential growth of A. tubingensis AN1257 occurred from 0 to 24h (glucose) or 12 to 24h (starch), concomitant to a strong acidification of the medium and to intense substrate consumption. The effect of PKC activation was different in the two strains: activation of this enzyme does not seem to modulate germination in A. tubingensis AN1257, but it strongly inhibits T. trachyspermus T10.5 germination. Thus, the two species presented different responses to the carbon source and to PKC activation, with peculiar physiology, germination and apical growth, whose comprehension will allow direct the biotechnological application of strains AN1257 and T10.5 more efficiently.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-21Bitstream added on 2014-06-13T20:30:46Z : No. of bitstreams: 1 sa_fc_me_jabo.pdf: 521957 bytes, checksum: 8f14fb22de3782d8087ec8fc4daa49de (MD5) / Granotec do Brasil S.A / O farelo de trigo é um coproduto da indústria alimentícia com custo acessível e importante fonte de fibra e amido que vem sendo empregado para cães. Contudo, este ingrediente apresenta Polissacarídeos Não Amiláceos (PNA’s), que não são digeridos pelos cães e podem causar distúrbios gastrintestinais, que interferem na absorção dos nutrientes. Com o intuito de aumentar a biodisponibilidade dos nutrientes do farelo de trigo em dietas extrusadas para cães, avaliou-se a suplementação com uma mistura de enzimas sobre o coeficiente de digestibilidade dos nutrientes, qualidade e produção de fezes e parâmetros fermentativos intestinais. Foram formuladas duas dietas experimentais isonutritivas. A primeira possuía apenas milho e quirera de arroz como fonte de amido e fibra de cana de açúcar como fonte de fibra, que foi denominada ração controle negativo (CN). A segunda formulação apresentava 25% de farelo de trigo e foi desdobrada em quatro tratamentos: CP - dieta controle positivo, com farelo de trigo e sem adição de enzimas; ENZ1 – com enzimas na mistura antes da extrusão; ENZ2 - com as enzimas do ENZ1 mais α-amilase, na mistura antes da extrusão; ENZ2Pex - com as enzimas do ENZ2 após extrusão, como cobertura. O experimento seguiu delineamento em blocos casualizados no tempo, com dois blocos de 15 animais, três animais por tratamento em cada bloco e seis cães por tratamento. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e as médias dos cinco tratamentos comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. Os resultados foram, também, avaliados por meio de contrastes ortogonais pré-estabelecidos, a 5% de probabilidade. A adição de farelo de trigo levou à redução da digestibilidade dos nutrientes (p<0,05). A mistura de enzimas não resultou em diferenças na digestibilidade, qualidade das fezes e produtos de fermentação microbiana fecal... / The wheat bran is a byproduct of the food industry with affordable and important source of fiber and starch that has been used for dogs. However, this ingredient has no-starch polysaccharides (NSP), which are not digested by dogs and can cause gastrointestinal disturbances, which interfere with absorption of nutrients. In order to increase the bioavailability of nutrients in wheat bran extruded diets for dogs, we assessed whether supplementation with a mixture of enzymes on the digestibility of nutrients, quality and production of feces and intestinal fermentation parameters. Two experimental diets were formulated isonutrients. The first had only corn and broken rice as a source of starch and sugar cane fiber as a fiber source, which was designated negative control diet (NC). The second formulation showed a 25% wheat bran and was split into four treatments: CP - positive control diet with wheat bran and without enzymes; ENZ1 - with enzymes in the mixture before extrusion; ENZ2 - with enzymes ENZ1 more α-amylase in the mixture before extrusion; ENZ2Pex - with enzymes ENZ2 after extrusion, as cover. The experiment followed a randomized block design in time, with two blocks of 15 animals, three animals per treatment in each block and six dogs per treatment. The data were subjected to analysis of variance and the mean of five treatment groups were compared by Tukey test at 5% probability. The results were also evaluated using orthogonal contrasts pre-set at 5% probability. The addition of wheat bran led to reduced digestibility of nutrients (p <0.05). The mixture of enzymes resulted in no differences in digestibility, stool quality and fecal microbial fermentation products (p> 0.05). The productivity of feed increased with the addition of the mixture of enzymes ENZ2, reducing the cost of eletctricity production in the diet

Foram utilizados 192 leitões Daland de 15,68±1,48 kg de peso vivo dos 49 aos 132 dias de idade em um experimento com o objetivo de avaliar a utilização de um complexo enzimático em dietas e seu efeito sobre o desempenho e rendimento de carcaça . Os animais foram distribuídos em 48 baias, sendo cada unidade experimental composta por quatro leitões. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos ao acaso em esquema fatorial 2 x 3: dois sexos (machos e fêmeas) e três níveis nutricionais (convencional, reduzido + complexo enzimático e reduzido) totalizando seis tratamentos com oito repetições. Os tratamentos foram: TCM Dieta basal controle para machos, TRM Dieta reduzida para machos, TEM Dieta reduzida com adição da enzima fornecida para machos, TCF Dieta basal controle fornecida para fêmeas, TRF Dieta reduzida fornecida para fêmeas e TEF Dieta reduzida com adição da enzima fornecida para fêmeas. A redução nutricional foi de 110 kcal/Kg, 0,15 % de fósforo disponível, 0,16% de cálcio e 1,4% em todos os aminoácidos e proteína. A ração experimental foi constituída de milho, farelo de soja, vitaminas e minerais mais a adição do complexo enzimático (50g/ton), para alguns tratamentos. As características zootécnicas avaliadas foram o ganho de peso (kg), o consumo de ração (kg) e o índice de conversão alimentar. Todos os animais foram pesados no início e no final de cada fase, ocasião em que também foi realizado o controle do consumo das rações experimentais. Também foram avaliadas a tipificação de carcaças pelo método SEUROP. Os resultados demonstraram que o uso de carboidrases+fitase é uma ferramenta nutricional muito importante para a nutrição de leitões, pois melhora as suas características produtivas. Além disso, foi importante observar que os leitões, machos e fêmeas, apresentam comportamentos diferentes quando recebem o complexo enzimático. / One hundred ninety two piglets Daland, 15.68 ± 1.48 kg body weight, from 49 to 132 days of age were used in a trial with the aim of evaluate the use of a enzyme complex in the diet on performance and carcass yield. The animals were divided into 48 pens with four piglets each. The experimental design was randomized blocks in factorial 2 x 3: two sex (male and female) and three nutrient levels (conventional, reduced + enzyme complex and reduced) totalizing six treatments with eight replicates. The treatments were: TCM Basal diet control for males, TRM - Diet reduced for males, TEM - Diet reduced with the addition of the enzyme for males, TCF - Basal diet control for females, TRF - Diet reduced for females and TEF Diet reduced with the addition of the enzyme for females. The reduction on nutrition levels was 110 kcal / kg of energy, 0.15% of phosphorus, 0.16% of calcium and 1.4% for all amino acids and protein. The experimental diet consisted of corn, soybean meal, vitamins and minerals plus the addition of the enzyme complex (50g/ton), for some treatments. The husbandry characteristics evaluated were weight gain (kg), feed intake (kg) and feed conversion ratio. All animals were weighed at the beginning and end of each phase, at which was also performed to control the consumption of the experimental diets. We evaluated the classification of carcasses by the method SEUROP. The results demonstrated that the use of carbohydrases + phytase is an important nutritional tool for the nutrition of pigs because it improves their performance. Furthermore, it was important to note that the piglets, male and female, behave differently when they receive the enzyme complex.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao BRUNO DUARTE ALVES FORTES.pdf: 1519992 bytes, checksum: dfdd5d666c37f57143bd189881ea16c7 (MD5) Previous issue date: 2010-01-09 / The experiment was conducted to evaluate different programs Nutritional supplementation of carbohydrases and phytase enzymes) in broiler diets on performance and carcass yield. We used the test in 2016 male chicks a day, Cobb-500 distributed in 32 boxes of 2.10 m x 2.50 m. We used a randomized complete block design with two blocks (sheds), four treatments, four replicates and 63 birds per plot. The experimental diets were based on corn and soybean meal. The treatments were: T1) Nutritional program Cobb, T2) 4% reduction in metabolizable energy (ME), 3% crude protein (CP) and 10% of the recommendations of the amino acids of T1, T3) reformulated Diet isonutriente to T1 with 200 g / t carbohydrases ( beta-glucanase, xylanase, alpha-galactosidase and Galactomannanase) + 50 g / t phytase, T4) reformulated Diet isonutriente to T2 with 200 g / t carbohydrases (beta-glucanase, xylanase, alpha-galactosidase and Galactomannanase) + 50 g / t phytase. There were no differences on the feed phase integral (1-42dias) created for the different treatments. However, feed intake and weight gain were affected (P <0.05), where the treatments supplemented with enzymes had higher feed intake than the treatments without enzyme supplementation is consistent with the weight gain in the treatments 3 and 4 showed weight gains higher than treatments 1 and 2. It is concluded that the use of carbohydrases associated with inclusion of phytase was effective to elevate the metabolizable energy of diets based on corn and soybean meal, and that the addition of enzymes in the diet of the birds led to an increase in food consumption of 5 , 18%, and improved weight gain of 4.39% and did not affect carcass characteristics / O experimento foi conduzido para avaliar diferentes programas nutricionais associados à suplementação de enzimas carboidrases e fitase) em rações de frangos de corte sobre o desempenho e rendimento de carcaça. Foram utilizados no ensaio 2016 pintos machos de um dia da linhagem Cobb-500 distribuídos em 32 boxes de 2,10 m x 2,50 m. Utilizou-se delineamento experimental de blocos casualizados, com dois blocos (galpões), quatro tratamentos, quatro repetições e 63 aves por parcela. As rações experimentais foram à base de milho e farelo de soja. Os tratamentos utilizados foram: T1) Programa nutricional Cobb, T2) Redução de 4% na energia metabolizável (EM); de 3% proteína bruta (PB) e de 10% nas recomendações dos aminoácidos do T1, T3) Dieta reformulada isonutriente a T1 com 200 g/t carboidrases (beta-glucanase, xilanase, alfa-galactosidade e galactomananase) + 50 g/t fitase, T4) Dieta reformulada isonutriente a T2 com 200 g/t carboidrases (beta-glucanase, xilanase, alfa-galactosidade e galactomananase) + 50 g/t fitase. Não foram observadas diferenças sobre a conversão alimentar na fase integral (1-42dias) de criação para os diferentes tratamentos. Contudo, o consumo de ração e ganho de peso foram afetados (P<0,05), onde os tratamentos suplementados com enzimas apresentaram consumo de ração maior do que os tratamentos sem a suplementação enzimática sendo coerente com o ganho de peso, em que os tratamentos 3 e 4 apresentaram ganhos de peso maiores que os tratamentos 1 e 2. Conclui-se que o uso das carboidrases associada a inclusão de fitase foi efetivo para elevar a energia metabolizável das rações a base de milho e farelo de soja, e que a adição das enzimas na dieta das aves permitiu um aumento no consumo de ração de 5,18%, e melhoria no ganho de peso de 4,39% e não influenciaram as características de carcaça

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2016-09-02T20:56:18Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Lindolfo Dorcino dos Santos Neto - 2016.pdf: 2203935 bytes, checksum: 598c0a2555c114e14f9d9f2a30f2cd63 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2016-09-02T21:13:01Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Lindolfo Dorcino dos Santos Neto - 2016.pdf: 2203935 bytes, checksum: 598c0a2555c114e14f9d9f2a30f2cd63 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-02T21:13:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Lindolfo Dorcino dos Santos Neto - 2016.pdf: 2203935 bytes, checksum: 598c0a2555c114e14f9d9f2a30f2cd63 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-03-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective of study was to evaluate the combination of different enzyme complexes on animal performance, digestibility nutrient based on corn and soybean meal and on the biochemical characteristics of these complexes. The first experiment was used randomized design with 7 treatments and 6 replicates, 30 birds per repetition, a total of 1,260 birds a day old. The treatments were treatment 1: Basal diet; Treatment 2: Basal diet with addition of complex A (phytase, protease, xylanase, beta-glucanase, cellulase, amylase, pectinase) + B complex (protease and cellulase); Treatment 3: Basal diet with addition of complex A + complex B + enzyme (α-galactosidase); Treatment 4: Basal diet with addition of complex A + α-galactosidase; Treatment 5: Basal diet with addition of complex C (xylanase, amylase, protease) + Phytase B and α-galactosidase; Treatment 6: Basal diet with addition of complex C + Phytase C + α-galactosidase; Treatment 7: Basal diet with addition of complex C + Phytase D + α-galactosidase. The performance characteristics and carcass yield and statistical analysis were evaluated with the R software using the Tukey test at 5% probability. The treatments 3 and 5 improvement in the average final weight, weight gain and feed conversion (p <0.05) at seven days of age and the average final weight and gain weight at 14 days of age. There were no significant differences (p> 0.05) in the other stages between the groups and the carcass yield and cuts made in two birds from each experimental unit at 42 days old.The second experiment used 112 birds with 25 days of age, being held the total collection of excreta from 28 to 32 days old. It used the same treatments in the first experiment. Nitrogen analysis was performed, ether extract, crude energy and dry matter. From these data was performed to analyze statistically the R software using the Tukey test at 5% probability. No significant differences were observed (p> 0.05) for the CMMS, CMN, EMAn, BN with the inclusion of enzyme complexes, as for CMEE significant differences (p <0.05), demonstrating the treatments 2 and 4 with greater efficiency in metabolizing ether extract. The third experiment analyzed the samples of each product used in In Vivo experiments were carried out a number of enzymatic assays. These data was performed to analyze statistically the R software using the Tukey test at 5% probability. There were statistically significant differences (p <0.05) for the total protein assay, reducing sugar and β-1,3-glucanase assays, xylanase, CMCase, FPase, amylase, pectinase, acid phosphatase and protease. The complexes A, B, C and the enzyme α – gal shown in most of these assays described the specific and higher enzymatic activity, these results that can be related to the performance results found in the 1 at 7 and 1 at 14 days. / O objetivo deste trabalho foi avaliar a combinação de diferentes complexos enzimáticos disponíveis no mercado sobre o desempenho animal, digestiblidade dos nutrientes de ração à base de milho e soja e sobre às características bioquímicas destes complexos. Foram realizados três experimentos, no primeiro foi utilizado um delineamento inteiramente casualisado com 7 tratamentos e 6 repetições, sendo 30 aves por repetição, um total de 1260 aves com um dia de idade. Os tratamentos utilizados foram, tratamento 1: Dieta basal ou tratamento controle; tratamento 2: Dieta Basal com adição de Complexo A (fitase, protease, xilanase, ß-glucanase, celulase, amilase, pectinase) + Complexo B (protease e celulase); tratamento 3: Dieta Basal com adição de Complexo A + Complexo B + Enzima A (α- galactosidase); tratamento 4: Dieta Basal com adição de Complexo A + α-galactosidase; tratamento 5: Dieta Basal com adição de Complexo C (xilanase, amilase, protease) + Fitase B e α-galactosidase; tratamento 6: Dieta Basal com adição de Complexo C + Fitase C + α- galactosidase; tratamento 7: Dieta Basal com adição de Complexo C + Fitase D + α- galactosidase. Foram avaliadas as características de desempenho e rendimento de carcaça e a analise estatística foi realizada pelo software R utilizando o teste de Tukey á 5% de probabilidade. Observou-se melhoria no peso médio final, ganho de peso e conversão alimentar (p<0,05) aos sete dias de idade para as aves dos tratamentos 3 e 5 em relação as aves dos demais grupos e para o peso médio final e ganho de peso aos 14 dias de idade. Não houve diferenças significativas (p>0,05) nas demais fases entre os grupos e também no rendimento de carcaça e cortes realizados em 2 aves de cada unidade experimental aos 42 dias de idade. O segundo experimento utilizou 112 aves com 25 dias de idade, sendo realizado a coleta total de excreta dos 28 aos 32 dias de idade. Foi utilizado os mesmos tratamentos do primeiro experimento. Foram realizadas analise de nitrogênio, extrato etéreo, energia bruta e matéria seca. A partir desses dados foi realizada a analise estatística pelo software R utilizando o teste de Tukey á 5% de probabilidade. Não foram observadas diferenças significativa (p>0,05) para o CMMS, CMN, EMAn, BN com a inclusão de complexos enzimáticos, já para o CMEE houve diferenças significativa(p<0,05), demonstrando os tratamentos 2 e 4 com maior eficiência em metabolizar extrato etéreo. O terceiro experimento analisou as amostras de cada produto utilizado nos experimentos In Vivo, foram realizados uma série de ensaios enzimáticos. A partir desses dados foi realizada a analise estatística pelo software R utilizando o teste de Tukey á 5% de probabilidade. Observou-se diferenças significativas (p<0,05) para o teste de proteína total, açúcar redutor e os ensaios de β-1,3- glucanase,xilanase, CMCase, FPase, amilase, pectinase, fosfatase acida e protease. Os complexos A, B, C e a enzima A demonstram na maioria desses ensaios descritos as maiores atividade enzimáticas e especificas, resultados esses que podem ser relacionados aos resultados de desempenho encontrados nos 1 aos 7 e 1 aos 14 dias.

Foram utilizados 192 leitões Daland de 15,68±1,48 kg de peso vivo dos 49 aos 132 dias de idade em um experimento com o objetivo de avaliar a utilização de um complexo enzimático em dietas e seu efeito sobre o desempenho e rendimento de carcaça . Os animais foram distribuídos em 48 baias, sendo cada unidade experimental composta por quatro leitões. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos ao acaso em esquema fatorial 2 x 3: dois sexos (machos e fêmeas) e três níveis nutricionais (convencional, reduzido + complexo enzimático e reduzido) totalizando seis tratamentos com oito repetições. Os tratamentos foram: TCM Dieta basal controle para machos, TRM Dieta reduzida para machos, TEM Dieta reduzida com adição da enzima fornecida para machos, TCF Dieta basal controle fornecida para fêmeas, TRF Dieta reduzida fornecida para fêmeas e TEF Dieta reduzida com adição da enzima fornecida para fêmeas. A redução nutricional foi de 110 kcal/Kg, 0,15 % de fósforo disponível, 0,16% de cálcio e 1,4% em todos os aminoácidos e proteína. A ração experimental foi constituída de milho, farelo de soja, vitaminas e minerais mais a adição do complexo enzimático (50g/ton), para alguns tratamentos. As características zootécnicas avaliadas foram o ganho de peso (kg), o consumo de ração (kg) e o índice de conversão alimentar. Todos os animais foram pesados no início e no final de cada fase, ocasião em que também foi realizado o controle do consumo das rações experimentais. Também foram avaliadas a tipificação de carcaças pelo método SEUROP. Os resultados demonstraram que o uso de carboidrases+fitase é uma ferramenta nutricional muito importante para a nutrição de leitões, pois melhora as suas características produtivas. Além disso, foi importante observar que os leitões, machos e fêmeas, apresentam comportamentos diferentes quando recebem o complexo enzimático. / One hundred ninety two piglets Daland, 15.68 ± 1.48 kg body weight, from 49 to 132 days of age were used in a trial with the aim of evaluate the use of a enzyme complex in the diet on performance and carcass yield. The animals were divided into 48 pens with four piglets each. The experimental design was randomized blocks in factorial 2 x 3: two sex (male and female) and three nutrient levels (conventional, reduced + enzyme complex and reduced) totalizing six treatments with eight replicates. The treatments were: TCM Basal diet control for males, TRM - Diet reduced for males, TEM - Diet reduced with the addition of the enzyme for males, TCF - Basal diet control for females, TRF - Diet reduced for females and TEF Diet reduced with the addition of the enzyme for females. The reduction on nutrition levels was 110 kcal / kg of energy, 0.15% of phosphorus, 0.16% of calcium and 1.4% for all amino acids and protein. The experimental diet consisted of corn, soybean meal, vitamins and minerals plus the addition of the enzyme complex (50g/ton), for some treatments. The husbandry characteristics evaluated were weight gain (kg), feed intake (kg) and feed conversion ratio. All animals were weighed at the beginning and end of each phase, at which was also performed to control the consumption of the experimental diets. We evaluated the classification of carcasses by the method SEUROP. The results demonstrated that the use of carbohydrases + phytase is an important nutritional tool for the nutrition of pigs because it improves their performance. Furthermore, it was important to note that the piglets, male and female, behave differently when they receive the enzyme complex.

A parede das plantas é formada por uma matriz composta principalmente por celulose, hemicelulose e lignina. Celulose é o principal polissacarídeo das paredes das plantas, apresentando alta cristalinidade e recalcitrância. Xiloglucano (XyG) é um polissacarídeo complexo envolvido no controle da expansão celular e na biossíntese de componentes da parede celular vegetal. Uma complexa rede entre XyG e celulose é mediada por ligações de hidrogênio. A eficiente hidrólise de XyG e celulose é uma estratégia promissora na desconstrução da biomassa lignocelulósica pela ação orquestrada de CAZymes. Aqui são descritas as caracterizações funcional e estrutural de três novas enzimas das hidrolase de glicosídeos das famílias 9 (BlCel9), 48 (BlCel48) e 74 (XcGH74). XcGH74 é uma xiloglucanase de Xanthomonas campestris altamente específica para XyG. Durante a hidrólise do XyG por XcGH74 XX e XG são os produtos finais. A estrutura cristalográfica dessa enzima foi resolvida e as razões moleculares para sua alta permissibilidade no reconhecimento de XyG analisadas. Os resultados sugerem que XcGH74 cliva XyG preferencialmente entre motivos X&ndash;X; no entanto, não hidrolisa entre os motivos L&ndash;L, onde uma substituição da cadeia lateral é um pré-requisito para o reconhecimento do substrato. BlCel9 e BlCel48 são celulases de Bacillus licheniformis. BlCel48 é cataliticamente estável em uma ampla gama de temperaturas e pHs exibindo atividade em celulose inchada com ácido fosfórico (PASC) e celulose bacteriana (BC). BlCel48 libera predominantemente celobiose, e também pequenas quantidades de celotriose, celotetraose como produtos do PASC e tem processividade aparente 4,6 vezes maior em BC do que em PASC. Análises de espalhamento de raios X a baixo ângulo (SAXS) mostraram que essa enzima é globular e monomérica em solução. A estrutura cristalográfica de BlCel48 foi resolvida na presença de ligantes nas posições -5 a -2 e +1 a +2 no sítio catalítico. A especificidade no reconhecimento de celo-oligossacarídeo foi investigada por cromatografia de troca aniônica de alto desempenho (HPLC-PAD), cristalografia de proteínas e análise de acoplamento estatístico, mostrando que esta enzima possui endo iniciação durante a hidrólise de PASC. BlCel9 é uma endoglucanase que exibe eficiência catalítica máxima em pH 7,0 e 60 &deg;C. Tem maior atividade em PASC, seguida por BC e, em menor grau, carboximetilcelulose (CMC). A análise por HPAEC-PAD dos produtos hidrolíticos demonstrou que o produto final da hidrólise é principalmente celobiose. Análises de dados cristalografia de raios X e SAXS mostraram que essa enzima é monomérica em solução, conforme estimado a partir dos dados do SAXS. Tem uma forma alongada composta por um módulo de ligação à carboidratos (CBM3c) N-terminal ligado ao domínio catalítico (GH9) C-terminal por um linker de 20 aminoácidos. Os domínios estão intimamente justapostos em uma conformação estendida e formam uma estrutura relativamente rígida em solução, indicando que as interações entre os domínios catalíticos e CBM3c desta enzima têm um papel cooperativo no reconhecimento da celulose. Juntos, esses resultados lançam alguma luz sobre a relação entre estrutura e função das hidrolases glicosídicas das famílias 9, 48 e 74. / Plant cell walls form a matrix composed mainly of cellulose, hemicellulose, and lignin. Cellulose is the main polysaccharide of the plant cell walls with high crystallinity and recalcitrance. Xyloglucan (XyG) is a complex polysaccharide involved in the control of cell expansion and biosynthesis of cell walls components. A complex crosslink between XyG and cellulose is mediated by H-bonds. An efficient hydrolysis of XyG and cellulose is a promising strategy to achieve an effective lignocellulosic biomass deconstruction by orchestrated action of CAZymes. Here are described the functional and structural characterization of three novel enzymes belonging to glycoside hydrolase families 9 (BlCel9), 48 (BlCel48) and 74 (XcGH74). XcGH74 is a highly specific xyloglucanase from Xanthomonas campestris . During the XyG hydrolysis, XX and XG are its end products. We also solved the structure of this enzyme and analyzed molecular reasons for its high permissibility in XyG recognition. These results suggest that the XcGH74 is able to cleave XyG preferentially between X-X motifs; however, it is unable to hydrolyze the polysaccharide between L-L motifs where a side-chain substitution is a prerequisite to improved substrate recognition. The BlCel9 and BlCel48 are cellulases from Bacillus licheniformis. BlCel48 is catalytically stable in a broad range of temperatures and pH conditions, exhibiting hydrolytic activity against phosphoric acid swollen cellulose (PASC) and bacterial cellulose (BC). BlCel48 releases predominantly cellobiose, and also small amounts of cellotriose and cello-tetraose as products from PASC with apparent processivity 4.6-times greater performance on BC than on PASC. Small-angle X-ray scattering (SAXS) data analysis revealed a globular molecular shape and monomeric state in solution. The crystal structure of BlCel48 was solved and used in presence of ligands spanning -5 to -2 and +1 to +2 subsites into the catalytic site. The specificity of the recognition of the cello-oligosaccharide was investigated by high-performance anion exchange chromatography (HPLC-PAD), protein crystallography, and statistical coupling analysis, which showed that this enzyme has an endo-like initiation on PASC. BlCel9 is a processive endoglucanase exhibiting maximum catalytic efficiency at pH 7.0 and 60 &deg;C, exhibiting highest hydrolytic activity against PASC, followed by BC, and to a lesser extent carboxymethyl-cellulose (CMC). The HPAEC-PAD analysis of the hydrolytic products demonstrated that the end product of the enzymatic hydrolysis is primarily cellobiose. SAXS and X-ray crystallographic data analyses revealed that this enzyme adopts a monomeric state in solution, as estimated from SAXS data; has an elongated shape composed of an N-terminal family 3 carbohydrate-binding module (CBM3c) and a C-terminal GH9 catalytic domain joined together by 20 amino acid residue long linker peptides. The domains are closely juxtaposed in an extended conformation and form a relatively rigid structure in solution, indicating that the interactions between the CBM3c and GH9 catalytic domains might play a key role in cooperative cellulose recognition. Together, these results shed some light on the structure-function relationship of glycoside hydrolases from families 9, 48 and 74.