Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-03-27T11:08:06Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 804061 bytes, checksum: 838b093e59c37c217194ba149cea7b92 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-27T11:08:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 804061 bytes, checksum: 838b093e59c37c217194ba149cea7b92 (MD5) Previous issue date: 2016-06-28 / O fitato é a principal forma de armazenamento de fósforo em plantas e cereais usados na formulação de rações e limita a eficiência de utilização do fósforo e outros nutrientes nesses alimentos. Fitases hidrolisam o fitato para obtenção de fósforo inorgânico e a redução dos custos de produção dessa enzima poderia desonerar o sistema de criação de suínos. Portanto, neste trabalho fitases foram produzidas utilizando resíduos agroindustriais e os extratos fúngicos foram caracterizados visando o uso em rações para suínos. O fungo filamentoso Acremonium zeaeB (AZB) e a levedura Kluyveromyces marxianus (KM) apresentaram alta produtividade de fitases quando cultivados em farelo de milho e arroz, respectivamente.O fungo, cultivado via fermentação em estado sólido, produziu as maiores atividades de fitase em 5 dias com 20% (m/v) dosubstrato em pH 4,0 e 28 oC. O extrato produzido a partir dele apresentou atividades máximas de fitase a 50 oC e pH 7,5, além de elevada estabilidade térmica. Isso indica que o extrato de AZB é promissor para aplicação em rações, embora tenha sido sensível a diversos íons. A produtividade apresentada pela levedura KM em meio líquido foi 337 vezes maior em relação à apresentada pelo fungo, tendo a produção máxima de fitase em 48 h de produção com 2% (m/v) de substrato em pH 4,0 a 25-30oC. O extrato produzido apresentou máxima atividade de fitase a 60 e 80 oC, indicando a possibilidade da presença de pelo menos duas enzimas.O fato de o extrato ter alta estabilidade a pH ácido, com máxima atividade em pH 4,0, e manter pelo menos 40% de sua atividade após 5 minutos a 80 oC, indica que ele pode ser ainda mais interessante para a aplicação desejada, uma vez que seria capaz de manter a atividade no estômago dos animais, ao contrário do extrato produzido por AZB. Além disso, a atividade no extrato foi amplamente estimulada na presença de diversos íons. A alta produtividade alcançada utilizando resíduos agroindustriais, aliada à estabilidade dos extratos produzidos, indicam o potencial de produção de enzimas por estes microrganismos visando aplicações industriais. Para viabilização de seu uso, os extratos deverão ser utilizados na produção de ração e fornecidos a suínos, confirmando dessa forma o emprego dessas enzimas, a baixo custo de produção, na criação animal. / Phytate is the main form for storage of phosphorus in plants and grains used for feed formulation and limits the utilization of phosphorus and other nutrients in these foods. Phytases hydrolyze phytate to obtain inorganic phosphorus and to reduce the costs of enzyme production is primordial for the sector. Therefore, in this work, phytases were produced using agricultural waste and fungal extracts generated were characterized for their use in feed. The filamentous fungus Acremonium zeae B (AZB) and the yeast Kluyveromyces marxianus (KM) showed high productivity of phytases when grown in residues of corn and rice, respectively. The fungus has produced, via solid-state fermentation, the highest phytase activity on day 5 with 20% (w/v) of substrate at pH 4.0 and 28 °C. The extract produced from it had maximal activities of phytase and at 50 oC and pH7.5, and high thermal stability. This indicates that the AZB extract is promising for use in animal feed, although it is sensitive to many ions. The productivity presented by yeast KM in liquid medium was 337 times higher than that shown by the fungus, and the maximum production of phytase was in 48 h with 2% (w/v) substrate at pH 4.0 and 25-30 ° The extract showed maximum phytase activity at 60 and 80 C. ° indicating the possible presence of two enzymes. The extract have high stability at C, acidic pH, with maximum activity at pH 4.0, and maintain at least 40% of its activity after 5 minutes at 80 ° This indicates that the extract produced by KM can be even C. more interesting for the desired application instead of the extract produced by AZB, since KMK extract would be able to maintain activity in the stomach of animal. Furthermore, the phytase activity in the KM extract was largely stimulated in the presence of various ions. The high productivity achieved using agroindustrial waste, combined with the stability of the extracts indicate the potential for production of enzymes by these microorganisms targeting industrial applications. For enabling its use, extracts should be add to feed and used to fed pigs, thus proving the use of these enzymes, at low production costs, for animal husbandry.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-21Bitstream added on 2014-06-13T20:30:46Z : No. of bitstreams: 1 sa_fc_me_jabo.pdf: 521957 bytes, checksum: 8f14fb22de3782d8087ec8fc4daa49de (MD5) / Granotec do Brasil S.A / O farelo de trigo é um coproduto da indústria alimentícia com custo acessível e importante fonte de fibra e amido que vem sendo empregado para cães. Contudo, este ingrediente apresenta Polissacarídeos Não Amiláceos (PNA’s), que não são digeridos pelos cães e podem causar distúrbios gastrintestinais, que interferem na absorção dos nutrientes. Com o intuito de aumentar a biodisponibilidade dos nutrientes do farelo de trigo em dietas extrusadas para cães, avaliou-se a suplementação com uma mistura de enzimas sobre o coeficiente de digestibilidade dos nutrientes, qualidade e produção de fezes e parâmetros fermentativos intestinais. Foram formuladas duas dietas experimentais isonutritivas. A primeira possuía apenas milho e quirera de arroz como fonte de amido e fibra de cana de açúcar como fonte de fibra, que foi denominada ração controle negativo (CN). A segunda formulação apresentava 25% de farelo de trigo e foi desdobrada em quatro tratamentos: CP - dieta controle positivo, com farelo de trigo e sem adição de enzimas; ENZ1 – com enzimas na mistura antes da extrusão; ENZ2 - com as enzimas do ENZ1 mais α-amilase, na mistura antes da extrusão; ENZ2Pex - com as enzimas do ENZ2 após extrusão, como cobertura. O experimento seguiu delineamento em blocos casualizados no tempo, com dois blocos de 15 animais, três animais por tratamento em cada bloco e seis cães por tratamento. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e as médias dos cinco tratamentos comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. Os resultados foram, também, avaliados por meio de contrastes ortogonais pré-estabelecidos, a 5% de probabilidade. A adição de farelo de trigo levou à redução da digestibilidade dos nutrientes (p<0,05). A mistura de enzimas não resultou em diferenças na digestibilidade, qualidade das fezes e produtos de fermentação microbiana fecal... / The wheat bran is a byproduct of the food industry with affordable and important source of fiber and starch that has been used for dogs. However, this ingredient has no-starch polysaccharides (NSP), which are not digested by dogs and can cause gastrointestinal disturbances, which interfere with absorption of nutrients. In order to increase the bioavailability of nutrients in wheat bran extruded diets for dogs, we assessed whether supplementation with a mixture of enzymes on the digestibility of nutrients, quality and production of feces and intestinal fermentation parameters. Two experimental diets were formulated isonutrients. The first had only corn and broken rice as a source of starch and sugar cane fiber as a fiber source, which was designated negative control diet (NC). The second formulation showed a 25% wheat bran and was split into four treatments: CP - positive control diet with wheat bran and without enzymes; ENZ1 - with enzymes in the mixture before extrusion; ENZ2 - with enzymes ENZ1 more α-amylase in the mixture before extrusion; ENZ2Pex - with enzymes ENZ2 after extrusion, as cover. The experiment followed a randomized block design in time, with two blocks of 15 animals, three animals per treatment in each block and six dogs per treatment. The data were subjected to analysis of variance and the mean of five treatment groups were compared by Tukey test at 5% probability. The results were also evaluated using orthogonal contrasts pre-set at 5% probability. The addition of wheat bran led to reduced digestibility of nutrients (p <0.05). The mixture of enzymes resulted in no differences in digestibility, stool quality and fecal microbial fermentation products (p> 0.05). The productivity of feed increased with the addition of the mixture of enzymes ENZ2, reducing the cost of eletctricity production in the diet

Orientador: Gabriela Alves Macedo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-14T10:38:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Schons_PatriciaFernanda.pdf: 1271406 bytes, checksum: 668e62b416afd72ff47587e7425cecd0 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Este trabalho visou avaliar o efeito do fungo Paecilomyces variotti e das enzimas fitase e tanase sobre fatores antinutricionais, taninos e fitatos presentes no sorgo tipo vassoura. A enzima tanase produzida pelo fungo Paecilomyces variotti apresentou atividade enzimática de 626U/g, além desta enzima, estavam presentes no extrato enzimático, com menor atividade protease, carboximetilcelulase, polimetilgalacturonase e fitase. A fitase empregada foi comercial (NATUPHOS ¿ BASF) e apresentou atividade de 660U/g. O sorgo utilizado neste estudo possui 13,6% de proteína, 4,2% de lipídeos, 1,7% de cinzas e 80,5% de carboidratos, elevada concentração de compostos fenólicos, especialmente taninos condensados e 226mg/100g de sorgo de fósforo inorgânico. O sorgo foi preparado e tratado com Paecilomyces variotti, tanase e fitase em diferentes combinações. As respostas diminuição de tanino e aumento de fósforo foram avaliados, os melhores resultados foram obtidos quando a farinha de sorgo foi tratada com tanase e fitase durante 5 dias. Por meio de planejamento experimental foi feito estudo do tratamento de sorgo com as enzimas fitase e tanase, o qual indicou a relação entre sorgo:água, como sendo a variável mais significativa para o processo. O processamento (maceração e fervura) e adição das enzimas foram efetivos na redução de taninos e aumento de fósforo, quando comparamos estes resultados com o sorgo cru, porém, as diferentes concentrações das enzimas não tiveram efeito sobre os parâmetros avaliados. Baseado nos resultados expostos, o sorgo para a elaboração das dietas foi tratado com a concentração inferior de enzimas estudada (100U/Kg). O estudo in vivo mostrou que a dieta elaborada com sorgo tratado enzimaticamente foi efetivo na melhoria da digestibilidade aparente de fósforo, na diminuição da excreção de fósforo, resultaram em melhores índice bioquímico para glicose e colesterol, apresentaram uma menor atividade de enzimas hepáticas aspartato aminotrasnferase (AST) e alanina aminotransferase (ALT), comparando com sorgo cru. No entanto, não teve efeito significativo na melhoria do ganho de peso, da digestibilidade aparente de proteína, na concentração de fósforo, ferro e cálcio plasmático, bem como na concentração de mineral contido no fêmur / Abstract: This work aimed assess the fungus Paecilomyces variotti and enzymes phytase, tannase effects on the antinutritional factors, tannins and phytates present in sorghum. The tannase produced by the fungus Paecilomyces variotti has enzymatic activity of 626U/g, in addition this enzyme were present in the enzymatic extract protease, in less activity protease, carboxymetilcellulase, polymetilgalacturonase and phytase. The phytase used is commercially (NATUPHOS ¿ BASF) and has activity of 660U/g. The sorghum utilized in this study has 13.6% protein, 4.2% of lipids, 1.7% ash and 80.5% carbohydrate, high concentration of phenolic, mainly condensed tannins and inorganic phosphorus 226mg/100g sorghum. The sorghum was prepared and treated by using Paecilomyces variotti, tannase and phytase in different combinations. The decrease in the tannins and increase in the phosphorus were evaluated, the best results were obtained when sorghum flour was treated with tannase and phytase for 5 days. Through experimental design were made a study about sorghum treated by the enzymes tannase and phytase, which indicated the relationship between sorghum:water, as the most significant variable in the process. The processing (soaking and boiling) and addition of enzymes were effective in reducing tannin and increase phosphorus, when comparing these results with the raw sorghum, however, different concentrations of the enzymes had no effect on the parameters evaluated. Based on the results above, the sorghum for the preparation of the diets were treated with lower concentration of enzymes studied (100U/Kg). The in vivo assay showed that the diet prepared using sorghum treated enzimaticaly was effective in improving digestibility of phosphorus, reducing the phosphorus excretion, resulting in better biochemical index for glucose and cholesterol, showed a lower activity of liver enzymes aspartate aminotransferase (AST) and alanin aminotransferase (ALT), compared with raw sorghum. However, it had no significant effects in improve weight, the apparent digestibility of protein, and the concentration of phosphorus, iron and calcium in the plasma and mineral content in the femur / Universidade Estadual de Campi / Ciência de Alimentos / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientador: Antonio Carlos de Laurentiz / Resumo: Um experimento foi realizado na UNESP – Faculdade de Engenharia – Campus de Ilha Solteira Setor de Avicultura, tendo como objetivo avaliar a matriz nutricional, preconizada pela literatura, da enzima fitase e da goma de soja, isoladas e associadas em dietas para frangos de corte nas fases inicial, crescimento e final, avaliando características de desempenho zootécnico ( consumo de ração, ganho de peso e conversão alimentar) nas fases de 7 a 21, 22 a 35, 36 a 42 e na fase total de 7 a 42 dias de idade, sendo estes dados utilizados para a análise econômica. Foram utilizadas 700 aves da linhagem Coob® (lote sexado – machos), as aves foram distribuídas em um delineamento inteiramente casualizado, contendo 7 tratamentos e 5 repetições de 20 aves. Os dados foram submetidos à análise de variância e quando apresentaram diferenças significativas as médias foram comparadas pelo teste SNK 5% de probabilidade, utilizando o programa estatístico SISVAR 5.1 (2001). A valorização individual da matriz nutricional da enzima fitase e da goma de soja, na formulação de ração para frango de corte é uma alternativa para reduzir custos de produção sem afetar o desempenho zootécnico, entretanto ao associar essas matrizes o efeito acumulativo não ocorre. / Abstract: An experiment was carried out at UNESP - Faculty of Engineering - Campus de Ilha Solteira Poultry Sector, with the objective of evaluating the nutritional matrix, recommended by the literature, of phytase enzyme and soybean gum, isolated and associated in diets for broiler chickens. (feed intake, weight gain and feed conversion) in stages 7 to 21, 22 to 35, 36 to 42 and in the total phase of 7 to 42 days of age , and these data are used for economic analysis. A total of 700 birds of the Coob lineage were used (batch sexed - males), the birds were distributed in a completely randomized design, containing 7 treatments and 5 replicates of 20 birds. The data were submitted to analysis of variance and when significant differences were found the mean values were compared by the SNK 5% probability test, using the statistical program SISVAR 5.1 (2001). The individual valorization of the nutritional matrix of the enzyme phytase and soybean gum in the formulation of ration for broiler chickens is an alternative to reduce production costs without affecting the zootechnical performance, however when associating these matrices the cumulative effect does not occur. / Mestre

O estudo tem como objetivo propor método de avaliação de efeito econômico do manejo dos dejetos com a utilização de diferentes estratégias nutricionais de suínos em crescimento e terminação. Especificamente, procura-se: i) Calcular as margens de comercialização para as diferentes estratégias nutricionais; ii)Avaliar o efeito econômico das diferentes estratégias nutricionais na excreção e aproveitamento de nutrientes pelos animais; iii) Valorar o consumo de água dos animais; iv) Valorar os dejetos gerados pelos suínos em relação ao seu potencial uso como fertilizante orgânico; v) Avaliar o impacto de cada estratégia nutricional sobre o custo do armazenamento (esterqueira) e uso dos dejetos, e sobre o seu tratamento por biodigestor e posterior utilização; vi) Avaliar a viabilidade econômica dos diferentes sistemas nutricionais e posterior utilização dos dejetos como fertilizante orgânico após tratamento por biodigestor e esterqueira. Os tratamentos a partir dos quais os dados foram obtidos são: T1: Dieta com nível alto de proteína bruta e suplementação mínima de aminoácidos (Dieta Controle); T2: T1 com redução do nível de proteína bruta, mediante a suplementação de lisina, metionina, treonina e triptofano industriais, considerando o conceito de proteína ideal; T3: T1 com a inclusão de 0, 010 (%/kg de dieta) fitase e redução dos teores de cálcio e fósforo da dieta; T4: T1 com a suplementação de 40% de minerais orgânicos (Cu, Zn e Mn) e 50% de minerais inorgânicos; T5: T1 combinando os tratamentos descritos anteriormente. As análises estatísticas foram realizadas utilizando o pacote computacional SAS, com nível de significância de 5%. As características de desempenho zootécnico, peso médio, consumo médio de ração, ganho médio de peso e conversão alimentar e as margens de comercialização não apresentaram diferenças significativas nos diferentes tratamentos e períodos. Os tratamentos T4 e T5 apresentaram melhor eficiência na utilização de nutriente e menor excreção dos nutrientes.Os tratamentos T5 e T4 apresentaram menor consumo e menor custo na valoração da água. A valoração dos dejetos foi favorável ao T1 com maior quantidade de NPK. Os tratamentos ambientalmente mais eficientes apresentaram menores custos na construção da esterqueira e biodigestor em ambos os materiais, PVC e PEAD; os mesmos tratamentos apresentaram menor potencial fertilizante; o caminhão com tanque de 15t apresentou menores custos no transporte e distribuição dos dejetos. Em todos os cenários avaliados dos diferentes sistemas nutricionais e posterior utilização dos dejetos como fertilizante orgânico após tratamento por biodigestor e esterqueira foram viáveis economicamente com payback de um ano. Os métodos ambientais propostos se mostraram válidos, pois foram capazes de identificar que dietas com maior aporte tecnológico apresentaram vantagens frente à dieta controle, entretanto economicamente o T1 apresentou maior quantidade na produção e consequente valoração de NPK. / The study aims to propose economic effect evaluation method of manure management with the use of different nutritional strategies of growing and finishing pigs. Specifically, the objectives were: i) To calculate marketing margins for the different nutritional strategies; ii) To evaluate the economic effect of different nutritional strategies on excretion and utilization of nutrients by the animals; iii) Valuing water consumption of animals; iv) Valuing the waste generated by the pigs in relation to its potential use as organic fertilizer; v) Valuing the impact of each nutritional strategy on storage cost (composting) and use of waste products, and about their treatment by bio-digester and later use; and vi) Valuing the economic viability of the different nutritional systems and subsequent use of manure as organic fertilizer after treatment by bio-digester and composting. The treatments from which data were collected were: T1: diet with high level of crude protein and minimum supplementation of amino acids (Control Diet); T2: Diet T1 with a reduction in the level of crude protein by supplementation of lysine, methionine, threonine and tryptophan, assuring the industrial ideal protein of all essential amino acids; T3: T1 with the inclusion of 0.010 phytase (%/kg diet) and reduction of the levels of calcium and phosphorus in the diet; T4: T1 with 40% supplementation of organic minerals (Cu, Zn and Mn) and 50% of inorganic minerals; T5: T1 combining the treatments described previously. Statistical analyses were performed using SAS computing package, with a significance level of 5%. The performance characteristics, average weight, average consumption of rations, average gain of weight and feed conversion and marketing margins showed no significant differences in the treatments and periods. The treatments T4 and T5 showed better efficiency in nutrient utilization and lower nutrient excretion. The T5 and T4 treatments showed lower consumption and lower cost at valuation of water. The valuation of the manure was favorable to T1 with largest amount of NPK. Environmentally efficient treatments showed lower costs in building the composting and biodigester in both materials, PVC and PEAD; the same treatments showed lower potential fertilizer; the tank truck 15 m3 presented lower costs in transportation and distribution of manure. In all scenarios evaluated the different nutritional systems and subsequent use of manure as organic fertilizer after treatment by bio-digester and composting were economically viable with payback of one year. Environmental methods proposed were valid, because they were able to identify that diets with higher technological contribution presented advantages the control diet, however economically the T1 was more quantity in production and consequent valuation of NPK.

Foram utilizados 192 leitões Daland de 15,68±1,48 kg de peso vivo dos 49 aos 132 dias de idade em um experimento com o objetivo de avaliar a utilização de um complexo enzimático em dietas e seu efeito sobre o desempenho e rendimento de carcaça . Os animais foram distribuídos em 48 baias, sendo cada unidade experimental composta por quatro leitões. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos ao acaso em esquema fatorial 2 x 3: dois sexos (machos e fêmeas) e três níveis nutricionais (convencional, reduzido + complexo enzimático e reduzido) totalizando seis tratamentos com oito repetições. Os tratamentos foram: TCM Dieta basal controle para machos, TRM Dieta reduzida para machos, TEM Dieta reduzida com adição da enzima fornecida para machos, TCF Dieta basal controle fornecida para fêmeas, TRF Dieta reduzida fornecida para fêmeas e TEF Dieta reduzida com adição da enzima fornecida para fêmeas. A redução nutricional foi de 110 kcal/Kg, 0,15 % de fósforo disponível, 0,16% de cálcio e 1,4% em todos os aminoácidos e proteína. A ração experimental foi constituída de milho, farelo de soja, vitaminas e minerais mais a adição do complexo enzimático (50g/ton), para alguns tratamentos. As características zootécnicas avaliadas foram o ganho de peso (kg), o consumo de ração (kg) e o índice de conversão alimentar. Todos os animais foram pesados no início e no final de cada fase, ocasião em que também foi realizado o controle do consumo das rações experimentais. Também foram avaliadas a tipificação de carcaças pelo método SEUROP. Os resultados demonstraram que o uso de carboidrases+fitase é uma ferramenta nutricional muito importante para a nutrição de leitões, pois melhora as suas características produtivas. Além disso, foi importante observar que os leitões, machos e fêmeas, apresentam comportamentos diferentes quando recebem o complexo enzimático. / One hundred ninety two piglets Daland, 15.68 ± 1.48 kg body weight, from 49 to 132 days of age were used in a trial with the aim of evaluate the use of a enzyme complex in the diet on performance and carcass yield. The animals were divided into 48 pens with four piglets each. The experimental design was randomized blocks in factorial 2 x 3: two sex (male and female) and three nutrient levels (conventional, reduced + enzyme complex and reduced) totalizing six treatments with eight replicates. The treatments were: TCM Basal diet control for males, TRM - Diet reduced for males, TEM - Diet reduced with the addition of the enzyme for males, TCF - Basal diet control for females, TRF - Diet reduced for females and TEF Diet reduced with the addition of the enzyme for females. The reduction on nutrition levels was 110 kcal / kg of energy, 0.15% of phosphorus, 0.16% of calcium and 1.4% for all amino acids and protein. The experimental diet consisted of corn, soybean meal, vitamins and minerals plus the addition of the enzyme complex (50g/ton), for some treatments. The husbandry characteristics evaluated were weight gain (kg), feed intake (kg) and feed conversion ratio. All animals were weighed at the beginning and end of each phase, at which was also performed to control the consumption of the experimental diets. We evaluated the classification of carcasses by the method SEUROP. The results demonstrated that the use of carbohydrases + phytase is an important nutritional tool for the nutrition of pigs because it improves their performance. Furthermore, it was important to note that the piglets, male and female, behave differently when they receive the enzyme complex.

Foram realizados dois experimentos distintos com juvenis de bijupirá (Rachycentron canadum) alimentados com dietas com substituição parcial da farinha de peixe e suplementadas com enzimas exógenas na (1) fase de berçário em sistema recirculante com duração de sete semanas e na (2) fase de engorda em tanques-rede no mar, com duração de dez semanas, para avaliação de desempenho, retenção copororal e digestibilidade de nutrientes. Foram formuladas e testadas dietas com substituições parciais de farinha de peixe (FM) por farelo de soja (FS), concentrado proteico de soja (CPS) e farinha de vísceras de frango (FV), e suplementadas com duas enzimas exógenas, fitase e protease. No experimento de engorda no mar (peso inicial 240 g; final 500 g), foram testadas cinco dietas, sendo um controle (49% FM) e quatro com substituições de 50 e 60% FM por diferentes níveis de inclusão FS e FV, sendo duas suplementadas com fitase (750 FTU) e protease (600 ppm) e duas somente com fitase (750 FTU). Não foram encontradas diferenças significativas no crescimento, sobrevivência, índice hepatossomático e na digestibilidade de matéria seca, proteína e fósforo para as cinco dietas (p>0.05). O fator de conversão alimentar (FCA) foi melhor com a dieta controle (1,7) do que com suplementação de fitase e protease (2,12) (p<0,05). No experimento com juvenis em fase de berçário cultivado em sistema de tanques recirculante (peso inicial 14 g; final 100 g), foram testadas oito dietas. Em duas dietas-base com substituições de FM por CPS e FV foram adicionados fitase e/ou protease ou fosfato bicálcico, resultando em 7 diferentes combinações, além da uma dieta controle com 49% FM. Ganho de peso, sobrevivência e índice hepatossomático não apresentaram diferenças significativas, enquanto FCA e taxa de aproveitamento de proteína foram significativamente melhores para as dietas com inclusão de CPS do que o controle e as dietas com FV. A adição de fitase, mas não de protease, nas dietas aumentou a digestibilidade de matéria seca, proteína bruta, energia e fósforo nas dietas com ingredientes vegetais. Fitase e protease adicionadas simultaneamente nas dietas aumentaram a digestibilidade dos nutrientes analisados, comparado com a dieta sem suplementação. A adição de enzimas também influenciou na composição corporal dos peixes, principalmente, aumentando a retenção de fósforo e matéria mineral (p<0,05). Os resultados obtidos sugerem a possibilidade de substituições parciais de farinha de peixe nas rações de juvenis de bijupirá por ingredientes vegetais, como o concentrado proteico de soja, ou por ingredientes animais, como a farinha de vísceras, sem implicar em detrimento no desempenho zootécnico dos peixes. Além disso, a adição de enzimas exógenas em dietas com ingredientes vegetais pode trazer ganhos relevantes na digestibilidade e retenção de nutrientes para juvenis de bijupirá, em fase de berçário. / In the present study, growth, body composition, and nutriente digestibility were assessed in juvenile cobia (Rachycentron canadum) fed diets with partial fish meal replacement and exogenous enzymes supplementation. One trial was carried out in recirculated nursery phase for seven weeks and another in the growout phase in net pens in the sea for ten weeks. Test diets were formulated with partial replacement of fish meal (FM) for soybean meal (SBM), soy protein concentrate (SPC), and poultry by-product meal (PBM), and supplemented with phytase and protease. In the growout trial (mean inital weight 240 g; mean final weight 500 g), five diets were tested, one control (49% FM) and four with 50 and 60% FM replacement with different inclusion levels of SBM and PBM, and two supplemented with both phytase (750 FTU) and protease (600 ppm) and two only with phytase (750 FTU). No significant difference was observed in growth, survival, hepatosomatic index and digestibility of dry matter, crude protein and phosphorus (p>0.05). Better feed conversion ratio (FCR) was observed in the control diet (1.7) than with the phytase and protease supplementation (2.12) (p<0.05). Eight test diets were tested in the nursery phase trial (mean initial weight 14 g; mean final weight 100 g). Phytase and/or protease or dicalcium phosphate were added in two base diets with FM replacement with SPC and PBM, resulting in seven different combinations plus a control diet (49% FM). No significant difference was observed in weight gain, survival and hepatosomatic index, whereas FCR and protein retention were enhanced with SPC diet than control or PBM diets. Supplementation with phytase, but not protease, enhanced digestibility of dry matter, crude protein, energy and phosphorus of diets with plant ingredients. Simultaneous supplementation of phytase and protease enhanced nutrient digestibility compared to unsupplemented diets. Furthermore, enzyme supplementation influenced fish body composition, increasing phosphorus and mineral retention (p<0.05). Results suggest the possible partial replacement of FM in the diets for juvenile cobia for plant ingredients, such as SPC, or other animal ingredient, as PBM, with no reduction in fish growth. Also, the addition of exogenous enzymes in diets with plant ingredients may enhance nutrient digestibility and body retention in juvenile cobia in the nursery phase.

O projeto teve como objetivo avaliar o efeito do uso de enzimas exógenas sobre os grânulos de zimógenos no pâncreas. O projeto foi dividido em três experimentos, sendo o experimento I para avaliação do uso da protease via ração nas dosagens de 50, 100 e 150% das recomendações do fabricante. O experimento II, foi realizado avaliando-se o uso da enzima amilase nas dosagens de 50, 100 e 150% das recomendações do fabricante e o experimento III foi realizado avaliando-se as dosagens de amilase, amilase + fitase, protease e protease + fitase sobre os grânulos de zimógenos. Em cada experimento, foi utilizado delineamento inteiramente casualizado sendo um total de nove tratamentos com oito repetições. Aos 21 e 42 dias de idade, as aves foram sacrificadas por deslocamento cervical para coleta e processamento do pâncreas para análise histopatológica e posterior análise pelo programa Image Pro Plus&reg;. Este programa permitiu a mensurar a porcentagem dos grânulos de zimógenos nas imagens obtendo-se um índice matemático da presença dos grânulos de zimógenos no pâncreas, o qual pode ser avaliado estatisticamente e submetidos a regressão polinomial os experimentos I e II e ao teste de Tukey o experimento III. Uma redução significativa (P<0,05) com efeito quadrático na presença dos grânulos de zimógenos pode ser observada nos experimentos I e II. O experimento III apresentou diferença estatística (P<0,05) entre o uso de fitase 100% + Protease 100% quando comparado com o controle. / This research project was conducted in the poultryhouse of the Faculty of Veterinary Medicine USP - Department of Nutrition and Animal Production, Pirassununga Site. Thus, this present study aimed to evaluate the effect of exogenous enzymes on the zymogenes granules of pancreas. It was performed three experimental trials; the first experiment has evaluated the addition of 50, 100 and 150% of protease manufactory recommendation in the feed. The trial two was conducted to evaluate the addition of 50, 100 and 150% of amylase manufactory recommendation in feed, and the experiment three was conducted to evaluated the addition of amylase, amylase + phytase, protease and protease + phytase in the feed on the zymogens granules. Each experiment was designed totally randomized with a total of nine treatments with eight replicates each. The birds were killed by cervical dislocation at days 21 e 42 to collect the pancreas for histopathology analysis followed by the Image Pro Plus&reg; program analysis, this program allowed to transform the image into a mathematic number, which could be used in statistical analysis. At the experiments I and II, the statistical analysis were conducted by the polynomial regression method and the experiment three was evaluated by Tukey test. A significant reduction (P<0,05) with quadratic effect was observed on the zymogens granules at the experiments I and II. The experiment III show a significant difference between the treatment with phytase 100% + Protease 100% and the control group.

Este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de biossensores eletroquímicos baseados na imobilização de duas enzimas diferentes em filmes de polipirrol (PPI) eletrodepositados, a fitase e a polifenol oxidase (PFO), esta última na forma de extrato bruto do fruto de abacate. Como a fitase hidrolisa cataliticamente ácido fítico (AF) em íons fosfatos, foram preparados biossensores por imobilização da enzima sobre filmes de PPI para a detecção indireta de ácido fítico via íons fosfatos. Foram utilizados dois métodos de imobilização; no primeiro, a enzima, fitase, foi imobilizada ao filme de PPI por imersão do filme em uma solução contendo a enzima por um período de 2 h, no segundo, a fitase foi encapsulada em lipossomos de dipalmitoil fosfatidil glicerol (DPPG) e depois foi imobilizada nos filmes de PPI depositados em eletrodos impressos. O segundo método se mostrou melhor para a detecção de ácido fítico, pois levou a um maior alcance linear e um baixo valor de limite de detecção. Neste caso, verificou-se que o DPPG preservou a integridade enzimática e levou a biossensores mais estáveis e sensíveis. Já para a PFO, que catalisa a oxidação de compostos fenólicos a quinonas, foram preparados biossensores para a detecção indireta de catecol. Para esta enzima, foram utilizados três métodos de imobilização: adsorção, ligação cruzada e confinamento, sendo o último que levou a melhores respostas. O método de confinamento consiste na adição da enzima, juntamente com o monômero, à solução de eletropolimerização, quando se procede com a metodologia normal de preparo dos filmes de PPI, que foram caracterizados por: microscopia de força atômica (AFM), microscopia eletrônica de varredura (MEV), espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier (FTIR) e espectroscopia de reflexão e absorção no infravermelho com modulação da polarização (PM-IRRAS). Estas técnicas de caracterização permitiram com que a presença da enzima fosse associada às modificações das características estruturais e morfológicas dos filmes de PPI. / This doctoral thesis reports on the development of electrochemical biosensors based on the immobilization of enzymes phytase and polyphenol oxidase (PPO) (the latter in the form of crude extract of avocado fruit) on electrodeposited polypyrrole films (PPY). As phytase catalytically hydrolyzes phytic acid (PA) in phosphate ions, biosensors were prepared by its immobilization on PPY films for the indirect detection of PA via phosphate ions. In the first method the enzyme was maintained on the PPY film for a period of 2 h, whereas in the second, it was encapsulated in Dipalmitoyl Phosphatidyl glycerol (DPPG) and immobilized on printed electrodes. The second system proved more viable for the detection of PA and showed broader linear range and low detection limit because DPPG preserved the integrity of the enzyme and produced more stable and sensitive biosensors. Regarding PPO, which catalyzes the oxidation of phenolic compounds to quinones, biosensors for the indirect detection of catechol via the formation of quinone in solution were prepared. Three methods of immobilization were used: adsorption, cross-linking and confinement. The latter yielded favorable results in comparison to other methods. The films were characterized by atomic force microscopy (AFM), scanning electron microscopy (SEM) spectroscopy, fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy and reflection absorption and infrared polarization modulation (PM-IRRAS) techniques and revealed the presence of the enzyme and a modification in the structural characteristics and morphology of the films.

Foram realizados dois experimentos distintos com juvenis de bijupirá (Rachycentron canadum) alimentados com dietas com substituição parcial da farinha de peixe e suplementadas com enzimas exógenas na (1) fase de berçário em sistema recirculante com duração de sete semanas e na (2) fase de engorda em tanques-rede no mar, com duração de dez semanas, para avaliação de desempenho, retenção copororal e digestibilidade de nutrientes. Foram formuladas e testadas dietas com substituições parciais de farinha de peixe (FM) por farelo de soja (FS), concentrado proteico de soja (CPS) e farinha de vísceras de frango (FV), e suplementadas com duas enzimas exógenas, fitase e protease. No experimento de engorda no mar (peso inicial 240 g; final 500 g), foram testadas cinco dietas, sendo um controle (49% FM) e quatro com substituições de 50 e 60% FM por diferentes níveis de inclusão FS e FV, sendo duas suplementadas com fitase (750 FTU) e protease (600 ppm) e duas somente com fitase (750 FTU). Não foram encontradas diferenças significativas no crescimento, sobrevivência, índice hepatossomático e na digestibilidade de matéria seca, proteína e fósforo para as cinco dietas (p>0.05). O fator de conversão alimentar (FCA) foi melhor com a dieta controle (1,7) do que com suplementação de fitase e protease (2,12) (p<0,05). No experimento com juvenis em fase de berçário cultivado em sistema de tanques recirculante (peso inicial 14 g; final 100 g), foram testadas oito dietas. Em duas dietas-base com substituições de FM por CPS e FV foram adicionados fitase e/ou protease ou fosfato bicálcico, resultando em 7 diferentes combinações, além da uma dieta controle com 49% FM. Ganho de peso, sobrevivência e índice hepatossomático não apresentaram diferenças significativas, enquanto FCA e taxa de aproveitamento de proteína foram significativamente melhores para as dietas com inclusão de CPS do que o controle e as dietas com FV. A adição de fitase, mas não de protease, nas dietas aumentou a digestibilidade de matéria seca, proteína bruta, energia e fósforo nas dietas com ingredientes vegetais. Fitase e protease adicionadas simultaneamente nas dietas aumentaram a digestibilidade dos nutrientes analisados, comparado com a dieta sem suplementação. A adição de enzimas também influenciou na composição corporal dos peixes, principalmente, aumentando a retenção de fósforo e matéria mineral (p<0,05). Os resultados obtidos sugerem a possibilidade de substituições parciais de farinha de peixe nas rações de juvenis de bijupirá por ingredientes vegetais, como o concentrado proteico de soja, ou por ingredientes animais, como a farinha de vísceras, sem implicar em detrimento no desempenho zootécnico dos peixes. Além disso, a adição de enzimas exógenas em dietas com ingredientes vegetais pode trazer ganhos relevantes na digestibilidade e retenção de nutrientes para juvenis de bijupirá, em fase de berçário. / In the present study, growth, body composition, and nutriente digestibility were assessed in juvenile cobia (Rachycentron canadum) fed diets with partial fish meal replacement and exogenous enzymes supplementation. One trial was carried out in recirculated nursery phase for seven weeks and another in the growout phase in net pens in the sea for ten weeks. Test diets were formulated with partial replacement of fish meal (FM) for soybean meal (SBM), soy protein concentrate (SPC), and poultry by-product meal (PBM), and supplemented with phytase and protease. In the growout trial (mean inital weight 240 g; mean final weight 500 g), five diets were tested, one control (49% FM) and four with 50 and 60% FM replacement with different inclusion levels of SBM and PBM, and two supplemented with both phytase (750 FTU) and protease (600 ppm) and two only with phytase (750 FTU). No significant difference was observed in growth, survival, hepatosomatic index and digestibility of dry matter, crude protein and phosphorus (p>0.05). Better feed conversion ratio (FCR) was observed in the control diet (1.7) than with the phytase and protease supplementation (2.12) (p<0.05). Eight test diets were tested in the nursery phase trial (mean initial weight 14 g; mean final weight 100 g). Phytase and/or protease or dicalcium phosphate were added in two base diets with FM replacement with SPC and PBM, resulting in seven different combinations plus a control diet (49% FM). No significant difference was observed in weight gain, survival and hepatosomatic index, whereas FCR and protein retention were enhanced with SPC diet than control or PBM diets. Supplementation with phytase, but not protease, enhanced digestibility of dry matter, crude protein, energy and phosphorus of diets with plant ingredients. Simultaneous supplementation of phytase and protease enhanced nutrient digestibility compared to unsupplemented diets. Furthermore, enzyme supplementation influenced fish body composition, increasing phosphorus and mineral retention (p<0.05). Results suggest the possible partial replacement of FM in the diets for juvenile cobia for plant ingredients, such as SPC, or other animal ingredient, as PBM, with no reduction in fish growth. Also, the addition of exogenous enzymes in diets with plant ingredients may enhance nutrient digestibility and body retention in juvenile cobia in the nursery phase.