Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-09-01T04:07:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334055.pdf: 1523188 bytes, checksum: 19249766aa4d27ecac6bc781bb2d7fcf (MD5) Previous issue date: 2015 / Entre os métodos de quantificação de OGM para rotulagem de alimentos, o método que utiliza reação em cadeia de polimerase quantitativa (qPCR) evento-específico é o mais adequado. O evento feijoeiro GM Embrapa 5.1 foi aprovado para comercialização no Brasil em 2011, tornando necessário a sua rotulagem em alimentos. Nesse trabalho foi desenvolvido um método qPCR evento-específica para detecção de feijão GM Embrapa 5.1, pelo desenho de um par de iniciadores e uma sonda para a região de junção do DNA do feijão com o DNA recombinante. O método foi validado utilizando-se dois protocolos para a extração do DNA da folha do feijão: CTAB e DNeasy Plant Mini kit. A especificidade dos iniciadores na qPCR foi avaliada utilizando a metodologia SYBR Green. Os iniciadores apresentaram maior especificidade quando a quantidade final de iniciadores na reação de qPCR foi de 300 nM, com elevada especificidade. A sonda TaqMan foi desenvolvida para aumentar a especificidade, com melhores resultados obtidos utilizando-se uma quantidade final de sonda de 250 nM. Os ensaios de repetibilidade, através da amplificação das amostras compondo uma diluição seriada, apresentaram eficiências entre 85 e 103% para amostras de feijão GM Embrapa 5.1 das variedades Pérola e Pontal extraídas com DNeasy Plant mini kit e de 89 e 85% para as mesmas amostras extraídas pelo método CTAB. O limite de detecção do ensaio foi de 10² cópias de DNA quando o DNA de feijão GM foi diluído em DNA de feijão não GM, utilizando a metodologia TaqMan. A eficiência média da qPCR com amostras de semente de feijão Pérola GM Embrapa 5.1 extraídas com DNeasy Plant Mini kit, foi de 100%. O método de qPCR desenvolvido nesse trabalho apresenta parâmetros adequados quanto a especificidade, eficiência, linearidade e limite de detecção para a identificação e quantificação do evento feijão GM Embrapa 5.1.<br> / Abstract : Among the methods for GMO quantification for food labeling, the method that uses quantitative event-specific polymerase chain reaction (qPCR) is the most suitable. The event GM common bean Embrapa 5.1 was approved for commercialization in Brazil, in 2011. So, it is necessary to label it in foods. In this work it was developed an event-specific qPCR method to detect GM common bean Embrapa 5.1, through the design of a primer pair and a probe that target the region of junction of common bean DNA with the recombinant DNA. The method was validated using two protocols to DNA extraction from common bean leaves: CTAB and DNeasy plant mini kit. The specificity of the primer pair was assessed using SYBR Green. The primers showed higher specificity when the final quantity of primer was 300 nM. One TaqMan probe was developed to increase the specificity with best results achieved when the probe concentration was 250 nM. The repeatability assay, through the amplification of samples serially diluted in water, showed efficiencies between 85 and 103% for varieties of Pérola and Pontal GM common bean Embrapa 5.1 extracted with DNeasy Plant mini kit and of 89 and 85% for the same samples extracted with CTAB. The limit of detection of the assay was 10² copies when DNA of GM common bean was diluted in DNA of non-GM common bean using a TaqMan probe. The mean efficiency of qPCR with samples of grain of GM Pérola 5.1 extracted with DNeasy Plant mini kit was of 100%. The qPCR method developed in this work showed suitable parameters regarding to specificity, efficiency, linearity and limit of detection for the identification and quantification of the event Embrapa 5.1.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências dos Alimentos, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-10-18T03:03:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 342126.pdf: 1289737 bytes, checksum: a3bed1a2c6051aee3c9d6b900a817f24 (MD5) Previous issue date: 2016 / O controle do consumo de energia em processos industriais é um diferencial competitivo para as empresas. Aliada à redução do impacto ambiental das atividades agrícolas, a utilização de resíduos agroindustriais na produção de energia já é uma realidade em muitos setores. O processamento de banana gera um resíduo estimado em até 40 % do fruto. Embora apenas uma pequena quantidade ? entre 2,5 e 3 % - da banana produzida no Brasil seja industrializada, esta quantidade se torna valiosa quando comparada à grande produção nacional, que chegou a 6.902.184 toneladas em 2012. O atual destino de grande parte deste resíduo é a aplicação no solo. Embora esta seja uma fonte de energia limpa, são geradas cinzas como resíduos da queima, o que justifica a realização de estudos para a sua caracterização, visando sugerir aplicações às mesmas. As determinações do PCS (Poder Calorífico Superior) das amostras apresentou resultados próximos de 4.000 Kcal kg -1. Abaixo dos valores estimados pela análise imediata e acima dos valores previstos pela composição centesimal. Também foi possível identificar a necessidade de pré-secagem das cascas destinadas a queima em caldeira até pelo menos 50 %, partindo de uma percentagem média inicial 86 %. A caracterização das cinzas mostrou que não existem elementos que limitem sua aplicação na alimentação humana ou animal enquanto que o elemento presente em maior quantidade foi o potássio, que representa uma média de 336,07 g kg -1 de cinzas. Estas características permitem sugerir a aplicação deste resíduo como substituto de sal (em 50 %) ou fonte de potássio para produção de bebidas isotônicas.<br> / Abstract : The control of energy consumption in industrial processes is a competitive advantage for companies. Together with the reduction of the environmental impact of agricultural activities, the use of agro-industrial waste to produce energy is already a reality in many sectors. The banana processing generates an estimated waste by up to 40 % of the fruit. Although only a small amount ? between 2.5 and 3 % - of banana produced in Brazil is industrialized, this amount becomes valuable when compared to the large national production, which reached 6.902.184 tons in 2012. The present destination of most of this waste is soil application. Although this is a source of clean energy, ashes are generated as waste, which justifies the conduction of studies for its characterization, in order to suggest applications to them. The determinations of the HHV (Higher Heating Value) of the samples present results close to 4.000 kcal kg -1. Below the values estimated by the proximate analyses and above the values predicted by the centesimal composition. In addition, it was also possible to identify the need for prior dehydration of the peels destined to boiler burning to at least 50%, starting from an initial percentage average of 86%. The characterization of the ashes demonstrated that there are no elements that limit their application for human or animal nutrition, while the element present in greater amounts was potassium, which represents an average of 336.07 g kg -1 of the ashes. These features allows the suggestion of the application of this residue as a salt substitute (in 50 %) or as a potassium source for the production of isotonic beverages.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-04-24T11:16:57Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3000743 bytes, checksum: 61e8fbfe5c46a31572eba149e556aad4 (MD5) / Approved for entry into archive by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-04-24T11:17:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3000743 bytes, checksum: 61e8fbfe5c46a31572eba149e556aad4 (MD5) / Approved for entry into archive by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-04-24T11:17:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3000743 bytes, checksum: 61e8fbfe5c46a31572eba149e556aad4 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-24T11:18:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3000743 bytes, checksum: 61e8fbfe5c46a31572eba149e556aad4 (MD5) Previous issue date: 2016 / Este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar a viabilidade da extração de óleo e compostos bioativos presentes nas sementes de marolo e graviola. A primeira parte do trabalho foi a caracterização das sementes, cujos resultados mostraram que elas apresentam elevado conteúdo de óleos e compostos fenólicos. As sementes, após serem caracterizadas, foram submetidas a processos de extração, utilizando solventes puros (etanol, hexano, isopropanol e acetona), em três diferentes temperaturas (35 oC, 45 oC e 55 oC) e três diferentes relações sólido-líquido (1:5, 1:7,5 e 1:10). Os resultados obtidos nesta etapa mostraram que o solvente hexano apresentou maiores rendimentos de extração de sólidos solúveis e menores rendimentos de extração de fenólicos totais. A terceira parte do estudo abordou a otimização dos processos de extração das sementes utilizando etanol como solvente. Para este fim, foi realizado um delineamento compostos central rotacional (DCCR), avaliando os efeítos das concentrações de cossolventes (hexano e isopropanol) e temperatura nas variáveis respostas. O resultado mostrou que a adição de hexano e o aumento da temperatura aumentaram o rendimento de extração de sólidos solúveis. No entanto a adição do hexano diminuiu as extrações de compostos fenólicos. A quarta parte do estudo apresentou os cálculos dos parâmetros cinéticos e termodinâmicos dos processos de extração das sementes, utilizando solventes puros, obtendo resultados coerentes ao equilíbrio sólido-líquido. Também foi mostrado que o processo de lavagem controla os processos de extração de sólidos solúveis para as duas sementes. A análise termodinâmica dos dados mostrou que as ΔH foram positivas, as ΔS foram positivas e ΔG foram negativas, indicando que os processos são endotérmicos e espontâneos. Por ultimo, foram realizados processos de extração, utilizando aparelho Soxhlet, assistido por ultrassom e extração aquosa enzimática. Ao utilizar solvente hexano, os rendimentos de extração obtidos foram semelhantes e a extração enzimática apresentou baixo rendimento. Por meio dos resultados obtidos, pode- se demonstrar que as sementes de marolo e graviola podem ser utilizadas para as extrações de óleos, destinados às indústrias alimentícias e/ou farmacêuticas. / This work was carried out to evaluate the viability of the extraction of oil and bioactive compounds in seed marolo and soursop. The first step was to characterize the seed, the results show that seeds have high oil and phenolic compounds concentrations. Seeds after having been characterized have been subjected to extraction processes using pure solvents (ethanol, hexane, isopropanol and acetone) at three different temperatures (35oC, 45oC and 55oC) and three different solid-liquid ratios (1: 5, 1: 7, 5 and 1:10), the results obtained at this stage showed that the hexane solvent showed higher yields of soluble solids extraction and lower yields of phenolic extractions. The third part of the study addressed the optimization of seed extraction processes using ethanol as solvent for this purpose was made a design central rotational compounds (CCRD) evaluating the effects of the independent variables concentrations of co- solvents (hexane and isopropanol) and temperature the response variables, the result showed that the addition of hexane and increasing temperature increased yield of soluble solids extractions, however the addition of hexane decreased phenolic extractions. The fourth part of the study had the calculation of kinetic and thermodynamic parameters of seed extraction processes using pure solvents: obtaining consistent results to the solid-liquid equilibrium was also shown that the washing process controls the solids extraction processes soluble paras the two seeds. Thermodynamic analysis of data show that the DH were positive, the ΔG Ds were positive and were negative indicating that the processes are endothermic and spontaneous. Finally extractions were performed processes using Soxhlet apparatus, assisted by ultrasound and aqueous enzymatic extraction, using solvent hexane the yields obtained extractions were similar enzymatic extraction had low extraction yield. Through the results obtained, it can be shown that the seeds of marolo and soursop can be used for the extraction of oils from that, adding value to an agro-industrial waste. / Cpf não encontrado, autor não apresentou título em inglês.

Submitted by Gustavo Caixeta (gucaixeta@gmail.com) on 2017-03-06T13:38:41Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 311016 bytes, checksum: 3f878e0d4b80c40a80e4a639f7ed9767 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-06T13:38:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 311016 bytes, checksum: 3f878e0d4b80c40a80e4a639f7ed9767 (MD5) Previous issue date: 2016-04-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Dos mais de 90 elementos de ocorrência natural na superfície terrestre, menos de 30 são essenciais aos organismos. As rochas são fonte de quase todos os elementos químicos que ocorrem naturalmente na superfície terrestre. No homem, a maior parte destes elementos estão presentes em concentrações menores que 0,1 % da massa corpórea e são denominados micronutrientes. Estes micronutrientes exercem uma enorme gama de funções no organismo. Os elementos constituintes das rochas, ao serem liberados pelo intemperismo, podem ser disponibilizados no solo e entrarem na cadeia alimentar através das plantas. No Brasil tem havido uma revalorização da aplicação de pós de rochas silicatadas na agricultura, especialmente impulsionada pela situação de dependência externa das fontes solúveis de nutrientes, o que gera demandas crescentes por pesquisas com estas fontes visando melhorar seu aproveitamento. Dessa forma, a presente proposta tem por objetivo quantificar os micronutrientes cobre, zinco, lítio, cobalto, vanádio e níquel em grãos de feijão e café fertilizados com pós de rochas, para verificar se há incremento nos níveis destes micronutrients, além da determinação de proteína, lipídeo, carboidrato e cinzas nos grãos de feijão e da determinação de pH, condutividade elétrica, acidez titulável e análise sensorial dos grãos de café. A fertilização com o pó de basalto, no experimento do feijão, não mostrou incremento em seus componentes (proteínas, lipídeos e carboidratos), somente um aumento do teor de cinzas. Para o experimento do café, cultivados com diferentes fontes de potássio, não houve diferença nos valores de pH, condutividade elétrica e acidez titulável. Na análise sensorial do café, o uso de diferentes fontes de potássio não influenciou nos atributos avaliados. Dentre os micronutrientes avaliados, em ambos os experimentos, foram detectados somente o zinco e o cobre. Nos experimentos realizados, a adição de pós de rocha não alterou os teores de zinco e cobre e os valores encontrados estavam abaixo do máximo permitido pela legislação. Portanto, o uso de pó de rocha como fertilizante demonstrou ser uma alternativa para o uso como fertilizante convencional, uma vez que não alterou a composição química do feijão preto e do café. / Of the more than 90 naturally occurring elements in the earth's surface, less than 30 are essential bodies. Most of these are present in concentrations less than 0.1% of the body mass and are called micronutrients. These micronutrients exert a wide range of functions in the body. The rocks are the source of almost all chemical elements that occur naturally in the earth's surface. The elements of the rocks, to be released by weathering, are available on the ground to then be taken to the waters of rivers and groundwater. In Brazil there has been a revaluation of the post application of silicate rocks in agriculture, especially driven by the situation of foreign-pendency of soluble fertilizers, which creates increasing demands for research on these sources to improve its use. Thus, this proposal aims to quantify the copper micronutrient, zinc, lithium, cobalt, vanadium and nickel in beans and fertilized coffee with rock powders, to check for increased levels of these micronutrients in addition to protein determination, lipid, carbohydrate and ash in beans and determination of pH, conductivity, acidity and sensory analysis of coffee beans. Fertilization with basalt powder, bean experiment, showed no increase in their components (proteins, lipids and carbohydrates), only an increase in ash content. For the coffee experiment, grown with different sources of potassium, there was no difference in pH, electrical conductivity and acidity. Sensory analysis of coffee, the use of different sources of potassium did not influence the evaluated attributes. Of the micronutrients evaluated in both experiments, they were detected only zinc and copper. In the experiments the addition of rock powders did not change the levels of zinc and copper values found were below the maximum allowed by law.Therefore, the use of rock dust as a fertilizer has proved to be an alternative to the conventional use as fertilizer, since it does not alter the chemical composition of black beans and coffee.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-06-09T12:30:16Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 702746 bytes, checksum: ac87c3c253de5c77a4cbffc99874e9d5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-09T12:30:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 702746 bytes, checksum: ac87c3c253de5c77a4cbffc99874e9d5 (MD5) Previous issue date: 2017-02-17 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A curcumina exibe diversas atividades biológicas, mas suas características de baixa solubilidade e pouca estabilidade termodinâmica limitam sua biodisponibilidade. Portanto, é indispensável estudar sua interação com a albumina do soro bovino (BSA), que é conhecida por aumentar a solubilidade e estabilidade de compostos hidrofóbicos em diversas formulações. Neste trabalho estudou-se a interação entre a curcumina e a BSA em suas conformações nativa e desnaturada, em pH 7,0, por meio de diferentes técnicas analíticas, e avaliou- se a cinética de fotodegradação da curcumina na presença da BSA. Pela análise de espectroscopia de fluorescência (EF) e de calorimetria de titulação isotérmica (ITC) os valores da constante de ligação (K a ) entre a proteína e o composto bioativo obtidos foram na ordem de 10 5 L.mol -1 , enquanto que por ressonância plasmônica de superfície (RPS) esse valor foi 3,88x10 3 L.mol -1 . Essas diferenças são explicadas pelas limitações apresentadas por cada técnica. O experimento de competição realizado indicou que a curcumina compete com os marcadores utilizados pelos sítios I, II e III da BSA. Os valores obtidos para ΔH° por EF (-8,67 kJ.mol -1 ) e por ITC (-29,11 kJ.mol -1 ) indicaram que o processo de formação dos complexos foi exotérmico. Nos estudos com a BSA desnaturada houve um ligeiro aumento nos valores de K a (4,53x10 5 L.mol -1 e 2,00x10 6 L.mol -1 , obtidos por EF e ITC, respectivamente, a 25 °C), comparados aos valores encontrados com a BSA nativa, o que indicou que há outros locais na BSA para ligação da curcumina além dos mostrados no experimento de competição. O perfil termodinâmico foi semelhante ao obtido para a conformação nativa, mas ΔH° foi mais negativo (- 16,12 kJ.mol -1 e -42,63 kJ.mol -1 , por EF e ITC, respectivamente), indicando que a mudança de conformação da BSA proporcionou uma interação mais exotérmica. No experimento de fotodegradação, à medida que a concentração de BSA aumentou, os valores da constante de degradação (K d ) da curcumina diminuíram exponencialmente e seu tempo de meia-vida (t 1/2 ) aumentou linearmente, o que indicou que a BSA protege a curcumina da fotodegradação. Esse trabalho contribui para um conhecimento mais aprofundado da interação intermolecular entre curcumina e BSA por trazer resultados obtidos por técnicas com diferentes fundamentos e parâmetros cinéticos da degradação da curcumina na presença de diferentes concentrações de BSA, o que ainda era ausente na literatura, fornecendo informações importantes para o sucesso da aplicação tecnológica da curcumina em diferentes formulações. / Curcumin exhibits various biological activities, but its low solubility and stability characteristics limit its bioavailability. Therefore, it is indispensable to study its interaction with bovine serum albumin (BSA), which can increase the solubility and stability of several hydrophobic compounds in various formulations. Here, we studied the interaction between curcumin and BSA in its native and denatured conformations, at pH 7.0, was studied through different analytical techniques, and the kinetics of curcumin photodegradation was evaluated in the presence of BSA. By the analysis of fluorescence spectroscopy (FS) and isothermal titration calorimetry (ITC) the values of the binding constant (K a ) between the protein and the bioactive compound obtained were in the order of 10 5 L.mol -1 , whereas by surface plasmonic resonance (SPR), this value was 3.88x10 3 L.mol -1 . These differences are explained by the limitations presented by each technique. The competition experiment performed indicated that curcumin competes with the markers used by sites I, II and III of the BSA. The values obtained for ΔH ° by FS (-8.67 kJ.mol -1 ) and by ITC (-29.11 kJ.mol -1 ) indicated that the process of forming the complexes was exothermic. In the studies with denatured BSA there was a slight increase in K a values (4.53x10 5 L.mol -1 and 2.00x10 6 L.mol -1 , obtained by FS and ITC, respectively, at 298 K), compared to the values found with the native BSA, which indicated that there are other BSA sites for curcumin binding in addition to those shown in the competition experiment. The thermodynamic profile was like that obtained for the native conformation, but ΔH ° was more negative (- 16.12 kJ.mol -1 and -42.63 kJ.mol -1 , by FS and ITC, respectively), indicating that the change in conformation of the BSA provided a more exothermic interaction. In the photodegradation experiment, as the BSA concentration increased, the values of the curcumin degradative constant (K d ) decreased exponentially and its half-life (t 1/2 ) increased linearly, which indicated that BSA protected the curcumin from photodegradation. This work contributes to a more deepened knowledge of the intermolecular interaction between curcumin and BSA by bringing results obtained by techniques with different fundamentals and kinetic parameters of curcumin degradation in the presence of different BSA concentrations, which was still absent in the literature, providing important information to the success of the technological application of curcumin in different formulations.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-12-21T15:31:36Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 872043 bytes, checksum: 845a84971937f7aec4e98d018ff5e12d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-21T15:31:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 872043 bytes, checksum: 845a84971937f7aec4e98d018ff5e12d (MD5) Previous issue date: 2017-08-09 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O yacon (Smallanthus sonchifolius) é uma raiz que apresenta características funcionais, pois possui 67% da sua massa seca composta por frutooligossacarídeos (FOS). FOS são polímeros de frutose que comportam- se como fibras dietéticas no organismo, conferindo ao yacon características prebióticas que podem ser prejudicadas pela hidrólise das moléculas de FOS. Assim o presente estudo teve como objetivos (i) avaliar a estabilidade do teor de FOS, glicose, sacarose e frutose, o pH e os parâmetros de cor L, h, IE e C no extrato aquoso de yacon preparado por imersão e branqueamento e com diferentes agentes anti-escurescimento (ácido tartárico, ácido ascórbico, ácido cítrico e cisteína), ao longo do tempo de armazenamento e (ii) avaliar a estabilidade dos carboidratos nos extratos em forma de pó (liofilizado e seco a vácuo) e no extrato na forma de xarope (concentrado a vácuo). O valor do pH foi dependente do tipo de agente para os extratos produzidos por imersão, sendo os menores valores encontrados nos ácidos cítrico e tartárico. Ocorreu uma redução do pH ao longo do tempo nos extratos produzidos por branqueamento e naqueles produzidos por imersão. Foi constatado contagem de bactérias lácticas em um dos extratos ao qual ocorreu queda de pH, indicando a ocorrência da fermentação. Os extratos produzidos com os diferentes agentes em valores de pH iniciais acima de 4 também apresentaram variação de pH significativa com o tempo. Em relação à análise de cor, a luminosidade foi dependente do tipo de agente, sendo que o menor valor foi atribuído ao extrato controle que apresentou coloração próxima ao preto. Houve também alteração de L com o tempo, principalmente no extrato controle que variou de 48 para 40. Os extratos obtidos via branqueamento apresentaram maior saturação do que aqueles preparados por imersão. Os valores de tonalidade foram em torno de 90o o que caracteriza tonalidade próxima ao amarelo. Os ácidos cítricos e tartárico foram os que apresentaram maior tonalidade. Para o índice de escurecimento o maior valor médio foi o do extrato controle, 44. Os agentes ácidos, cítrico e tartárico, exibiram menores valores médios de IE, 14 e 12 respectivamente. Os extratos com cisteína apresentaram uma redução dos valores dos índices IE e C com o aumento do tempo de armazenamento. Para o conteúdo de carboidratos houve um maior valor médio da proporção de FOS nos extratos preparados por branqueamento bem como menor média dos outros açúcares. Isto sugere maior hidrólise de FOS no preparo por imersão, com consequente aumento de frutose. Nos extratos contendo cisteína e no controle as concentrações de sacarose foram residuais. Houve uma redução da sacarose com o tempo para o extrato controle e para os extratos produzidos por branqueamento, estes últimos também apresentaram redução de glicose ao longo do tempo. Houve uma tendência de redução da proporção remanescente de FOS com o tempo. Nos extratos produzidos com cisteína e no controle ocorreu produção de manitol durante o armazenamento para os dois tipos de preparo. O extrato produzido por branqueamento com ácido tartárico foi o escolhido para ser submetido às operações da segunda etapa. Foram obtidos (i) o extrato concentrado 46,97% FOS (b.s.), (ii) o extrato em pó seco a vácuo 41,94% FOS (b.s.) (iii) o extrato em pó, liofilizado 39,5 % FOS (b.s.) e o (iv) extrato in natura 42,69% FOS (b.s.). Provavelmente houve hidrólise das cadeias com maior grau de polimerização na operação de concentração, pois esta apresentou conteúdo de FOS maior que o extrato in natura. A estabilidade dos carboidratos foi independente do tipo de operação aplicada ao extrato, nos resultados analisados ao longo de um período de 30 dias de armazenamento. / Yacon (Smallanthus sonchifolius) is a root with functional characteristics, since it has 67% of its dry mass composed of fructooligosaccharides (FOS). FOS are polymers of fructose that behave like dietary fibers in the organism, conferring to the yacon prebiotic characteristics that can be harmed by the hydrolysis of the FOS molecules. The objective of this study was to evaluate the stability of the FOS, glucose, sucrose and fructose content, pH and color parameters L, h, IE and C in the aqueous extract of yacon prepared by immersion and bleaching and with (tartaric acid, ascorbic acid, citric acid and cysteine) throughout the storage time and (ii) to evaluate the stability of the carbohydrates in the extracts in the form of powder (lyophilized and dried under vacuum) and in the extract in the syrup (vacuum concentrate). The pH value was dependent on the type of agent for the extracts produced by immersion, with the lowest values found in citric and tartaric acids. There has been a reduction in pH over time in the extracts produced by bleaching and in those produced by immersion. It was observed a count of lactic bacteria in one of the extracts to which the pH drop occurred, indicating the occurrence of the fermentation. The extracts produced with the different agents at initial pH values above 4 also showed significant pH variation with time. Regarding the color analysis, the luminosity was dependent on the type of agent, and the lowest value was attributed to the control extract, which showed coloration close to black. There was also a change in L over time, especially in the control extract, which varied from 48 to 40. The extracts obtained by bleaching presented higher saturation than those prepared by immersion. The values of tonality were around 90o which characterizes tonality close to yellow. The citric and tartaric acids presented the highest tonality. For the darkening index the highest average value was the control extract, 44. The acidic agents, citric and tartaric, had lower mean values of IE, 14 and 12, respectively. The extracts with cysteine presented a reduction of the values of the IE and C indexes with the increase of the time of storage. For the carbohydrate content there was a higher average value of the proportion of FOS in the extracts prepared by bleaching as well as lower average of the other sugars. This suggests higher FOS hydrolysis in the dip preparation, with consequent increase in fructose. In the extracts containing cysteine and in the control the sucrose concentrations were residual. There was a reduction of the sucrose over time for the control extract and for the extracts produced by bleaching, the latter also showed reduction of glucose over time. There was a tendency to reduce the remaining proportion of FOS over time. In the extracts produced with cysteine and in the control occurred mannitol production during the storage for the two types of preparation. The extract produced by bleaching with tartaric acid was chosen to undergo the operations of the second step. The extracts were dried in vacuo and dried in vacuo. They were obtained (i) the concentrated extract 46.97% FOS (bs), (ii) the vacuum dry powder extract 41.94% FOS (bs) (iii) the freeze-dried powdered extract 39.5% FOS and (iv) in natura extract 42.69% FOS (bs). Probably there was hydrolysis of the chains with the highest degree of polymerization in the concentration operation, since this presented higher FOS content than the in natura extract. The carbohydrate stability was independent of the type of operation applied to the extract, in the results analyzed over a period of 30 days of storage.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:57:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 327001.pdf: 1518423 bytes, checksum: fd32c8d9d8e9dc8d241f276f283d883d (MD5) Previous issue date: 2014 / A cada ano, no Brasil, o número de aprovações para eventos geneticamente modificados cresce, bem como a área plantada de culturas transgênicas. Uma vez que no Brasil a legislação exige que produtos que contenham mais de 1% de organismos geneticamente modificados (OGM) em sua composição sejam rotulados, a identificação e quantificação destes OGM se fazem necessária. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um método de detecção e quantificação, por PCR em tempo real, para o feijoeiro GM Embrapa 5.1 a partir de uma nova referência endógena táxon-específica para Phaseolus vulgaris, tendo como alvo uma sequência de um gene de proteína. Para isso, três genes candidatos foram selecionados e os iniciadores testados com SYBR Green. O ensaio para o gene da Arcelina não apresentou amplificação. Ambos os ensaios para o gene da Lectina e Faseolina apresentaram especificidade esperada, entretanto o da Lectina apresentou maior especificidade e eficiência. Uma sonda TaqMan foi então desenhada, para tornar o ensaio da Lectina ainda mais específico. A especificidade do ensaio LEC foi testada com 50 amostras de feijão, provenientes de dois pools genéticos, Andino e Mesoamericano e 15 amostras de controle negativo. O ensaio táxon-específico FEI, previamente desenvolvido, foi testado com 44 amostras de feijão, a fim de comparação com o ensaio LEC. As amostras de DNA de feijão apresentaram a amplificação esperada para ambos os ensaios, LEC e FEI, apresentando um Ct médio de 20,3 ± 0,73 e 26,34 ± 1,26, respectivamente. Isto sugere que o ensaio LEC possui uma especificidade maior que o ensaio FEI. A alta homogeneidade apresentada capacita o ensaio LEC a detectar variedades de feijão dos dois pools genéticos existentes. O ensaio LEC apresentou amplificação com Ct tardio (Ct > 35) para quatro amostras negativas, porém em apenas algumas reações onde foram testadas. As eficiências do método LEC foram testadas com as amostras Pérola, Pérola GM, Pontal e Pontal GM e variaram de 92% a 101% com o R2 variando entre 0,994 e 0,998. O limite de detecção para o método foi de 101 cópias de DNA genômico. Os resultados obtidos com o ensaio LEC estão dentro dos parâmetros propostos pelo European Network of GMO Laboratories (ENGL), podendo, desta forma, o ensaio ser utilizado em estudos de análise de feijão GM. Além disso, os iniciadores desenvolvidos podem ser utilizados para quantificação e detecção tanto do feijão convencional quanto do feijoeiro Embrapa 5.1 com ambos os sistemas de PCR, TaqMan e SYBR Green.<br> / Abstract : Every year the number of approvals for genetically modified events grows in Brazil as well as the area of cultivated transgenic crops. Once Brazilian legislation requires the labeling on products containing > 1% of GMOs in its composition, methods for the detection and quantification of new GMOs are necessary. The aim of the present work was to develop a new real time PCR assay for the detection and quantification of the GM common bean Embrapa 5.1 using a new taxon-specific endogenous reference targeting a coding gene of Phaseolus vulgaris. Three genes encoding common bean proteins were chosen and tested using SYBR Green chemistry. The assay for the Arcelin gene did not show amplification. Both Lectin and Faseolin assays showed the expected specificity although the Lectin assay presented higher specificity and efficiency. A TaqMan probe was then designed in order to develop a more specific detection method. The specificity of LEC assay was tested for 50 common bean samples from two gene pools, Andean and Mesoamerican, and 15 negative control samples. The previously developed taxon-specific FEI assay was evaluated by testing forty-four Phaseolus vulgaris varieties in order to compare with LEC assay. These common bean DNA samples presented the expected amplification signal and the mean Ct was 20.3 ± 0.73 and 26.34 ± 1.26 for LEC and FEI assays, respectively. It suggests that LEC assay has higher specificity than FEI assay. The high homogeneity makes the LEC assay able to reliably detect common bean varieties from both gene pools. LEC assay presented amplification at late Ct (Ct value > 35) in few reactions of four negative samples. The efficiencies of LEC method were performed using non-GM Pérola, non-GM Pontal, GM Pérola and GM Pontal samples and they ranged from 92% to 101% and R2 ranged from 0.994 to 0.998. Moreover, this assay presented a limit of detection of 101 genome copies. The results showed that the LEC assay meets the requirements proposed by the ENGL and it can be used in further studies of GM common bean analyses. Furthermore, the primers and probe developed in this work are suitable for both real time PCR detection chemistries, TaqMan and SYBR Green and they are suitable to detect and quantify either GM and non-GM common bean.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-09-22T04:07:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334480.pdf: 2182180 bytes, checksum: 4e848e3b031babd1940ddf358b23e5ff (MD5) Previous issue date: 2015 / Espécie nativa da Mata Atlântica, encontrada desde o sul da Bahia até o norte do Rio Grande do Sul, a palmeira juçara (Euterpe edulis Mart.) apresenta grande importância ecológica e econômica para o Brasil, em especial para os estados de Santa Catarina, Paraná e São Paulo. A exploração extrativista contínua e desordenada para a produção de palmito acarretou em risco de extinção da espécie, visto que a extração do palmito implica no sacrifício da planta. Recentemente, maior atenção vem sendo dada à exploração de seus frutos, muito semelhantes aos frutos do açaizeiro (Euterpe oleracea Mart.) cultivado na Amazônia e utilizado para a produção de açaí. Os frutos de juçara são arredondados e apresentam coloração violáceo-púrpura quando maduros, sua utilização para obtenção de polpa tornou-se uma forma de conciliar proteção ambiental da espécie com agregação de valor econômico. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o conteúdo de minerais, sua bioacessibilidade e determinar o perfil de compostos fenólicos em frutos de palmeira juçara coletados em Florianópolis/SC em diferentes estádios de maturação. Os minerais e sua bioacessibilidade, bem como o conteúdo de compostos fenólicos apresentaram mudanças com o avanço da maturação. A partir da utilização da metodologia de bioacessibilidade in vitro mostrou-se que os frutos coletados no final da maturação, nos estádios definidos como sexto e sétimo, apresentaram um melhor aproveitamento nutricional com relação aos minerais, especialmente para Mn, Se, Cu, Ca e Fe. Com o emprego da HPLC-ESI-MS/MS foram identificados ácidos fenólicos (protocatecuico, ?-cumárico e gálico), flavonoides (campferol, aromadendrina, hispidulina, quercetina, taxifolina, miricetina e rutina) e estilbeno (resveratrol). Os ácidos fenólicos e os flavonoides apresentaram as maiores concentrações, em sua maioria, nos frutos coletados até o terceiro estádio de maturação, com exceção da rutina e quercetina, que apresentaram os maiores teores no final do ciclo de maturação. Os resultados obtidos neste trabalho demonstram que o consumo de frutos de juçara pode contribuir significativamente para a ingestão diária recomendada de minerais e maximizar a ingestão dietética de compostos antioxidantes, os quais podem trazer benefícios à saúde do consumidor.<br> / Abstract : Native to Atlantic Forest, found from south Bahia to the north of Rio Grande do Sul, the juçara palm (Euterpe edulis Mart.) has great ecological and economic importance to Brazil, especially in the states of Santa Catarina, Paraná and São Paulo. The continuous and disorderly exploitation for palm heart production resulted in near extinction of the species, since palm heart extraction involves the sacrifice of the plant. Recently, more attention has been given to the exploitation of juçara fruits, very similar to the fruits grown in Amazon (Euterpe oleracea species) and used for the production of açaí. The juçara fruits are rounded, when ripe are violet-purple color, and its use to obtain pulp has become a way of reconciling environmental protection of the species with added economic value. This study aimed to evaluate the mineral content and its bioaccessibility and the profile of phenolic compounds in juçara fruit collected in Florianópolis/SC at different ripening stages. Minerals and their bioaccessibility, and the content of phenolic compounds showed changes during advancing maturity. The application of the in vitro bioaccessibility methodology showed that the fruits harvested at the end of ripening stages (sixth and seventh) showed a better mineral content, especially Mn, Se, Cu, Ca and Fe. With the use of HPLC-ESI-MS / MS were identified phenolic acids (protocatechuic, gallic and ?-coumaric acid), flavonoids (kaempferol, aromadendrin, hispidulin, quercetin, taxifolin, myricetin and rutin) and stilbene (resveratrol). The phenolic acids and flavonoids shown the highest concentrations, mostly in fruits collected until the third ripening stage, with the exception of rutin and quercetin, which showed the highest levels at the end of the ripening cycle. The results of this study show that the consumption of juçara fruit can significantly contribute to the recommended daily intake of minerals and maximize dietary intake of antioxidant compounds, which can benefit the consumer health.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-08-01T04:15:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 348595.pdf: 1898431 bytes, checksum: 06980268687e7d40b8576b69f9af4340 (MD5) Previous issue date: 2017 / O leite humano proveniente de bancos de leite necessita ser seguro do ponto de vista nutricional, imunológico e microbiológico, garantindo assim o crescimento e desenvolvimento de recém-nascidos pré-termo e de baixo peso. O estudo de tecnologias alternativas à pasteurização, que é o tratamento térmico atualmente utilizado nos bancos de leite, é importante para minimizar as degradações ocorridas com processos térmicos. Tecnologias alternativas que possam agregar valor nutricional ao leite humano também são de interesse. Na primeira etapa do presente estudo foi investigada a inativação microbiana de mesófilos aeróbios naturalmente presentes e, Escherichia coli ATCC 25922 inoculada artificialmente ao leite humano através da aplicação do CO2 supercrítico. Foram estudados o efeito da razão entre a massa de amostra (leite humano cru) e CO2 (1:0,2; 1:0,6 e 1:1 m/m); taxa de despressurização (1; 5,5 e 10 MPa/min), e ciclos de pressão (1, 3 e 5). As melhores reduções em mesófilos aeróbicos e E. coli ATCC 25922 (6,0 e 5,7 log, respectivamente) foram obtidas com uma razão de 1:1, taxa de despressurização de 10 MPa/min, e 1 ciclo de pressurização/despressurização. Os resultados obtidos na primeira etapa do estudo sugerem que o processamento com CO2 supercrítico poderia ser aplicado ao leite humano como uma alternativa segura ao processo de pasteurização. Na segunda etapa do estudo o leite humano foi concentrado por meio da técnica de crioconcentração em bloco. Foram avaliados os efeitos crioconcentração sobre as propriedades físico- químicas, eficiência do processo, parâmetros de cor, densidade e viscosidade dinâmica do leite humano. A tecnologia de crioconcentração foi utilizada para concentrar com sucesso o leite humano a um fator igual a 180,48% e 72% de retenção de sólidos totais no segundo estágio de crioconcentração. Os valores observados nos concentrados para as propriedades bioquímicas demonstraram que a segunda fração concentrada (C2) apresentou valores de carboidratos (17,35 g/100g), proteínas (3,34 g/100g) e energia (85,91 Kcal/100g) elevados. O valor calórico elevado observado na primeira fração de gelo (I1) relacionou-se à retenção de lipídios (4,6 g/100g) na mesma. Se adicionados ao leite humano, o C2 e I1 poderiam atender aos requisitos especiais de nutrientes e energia para garantir o crescimento e desenvolvimento de recém- nascidos pré termo.<br> / Abstract : Human milk from milk banks should be nutritionally, immunologically and microbiologically safe, ensuring the growth and development of preterm and low weight newborns. The study of alternative technologies to pasteurization, which is the heat treatment currently used in milk banks, is important to minimize the degradations that occur with thermal processes. Alternative technologies that may add nutritional value to human milk are also of interest. In the first step of this study the microbial inactivation of naturally occurring aerobic mesophilic and Escherichia coli ATCC 25922 artificially inoculated to human milk through the application of supercritical CO2 has been investigated. The effect of the ratio between sample mass (raw human milk) and CO2 (1: 0.2, 1: 0.6 and 1:1 m/m); depressurization rate (1, 5.5 and 10 MPa/min), and pressure cycling (1, 3 and 5) was studied. The best reductions in aerobic mesophilic and E. coli ATCC 25922 (6.0 and 5.7 log, respectively) were obtained with a ratio of 1:1, depressurization rate of 10 MPa/min, and 1 pressurization/depressurization cycle. The results obtained suggest that the processing with supercritical CO2 could be applied to human milk as a safe alternative to the pasteurization. In the second stage of the study, the human milk was concentrated using the block freeze cryoconcentration technique. The effects of cryoconcentration on the physico-chemical properties, process efficiency, color parameters, density and dynamic viscosity of human milk were evaluated. The human milk was successfully concentrated at a factor equal to 180.48% and 72% of total solids retention in the second stage of cryoconcentration. The values observed in the concentrates for the biochemical properties showed that the fraction of concentrated fluid human milk of the second stage (C2) presented elevated amounts of carbohydrates, protein and energy. The elevated caloric value observed in the ice fraction of the first stage (I1) refers to the retention of lipids in it. When added to human milk, C2 and I1 may satisfy the special requisites of nutrients and energy to guarantee the growth and development of preterm neonates.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-09-20T05:12:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340541.pdf: 1919422 bytes, checksum: 1952cd354a69bece230b791596b913dd (MD5) Previous issue date: 2016 / O Brasil possui uma ampla diversidade de frutas nativas devido a sua grande extensão territorial. Entre elas destaca-se a grumixama (Eugenia brasiliensis Lamarck), fruto nativo da mata Atlântica. Considerando a escassez de estudos sobre os compostos nutricionais e bioativos que definam o estádio de maturação ideal para a colheita dos frutos, o presente trabalho teve como objetivo a caracterização química, nutricional e capacidade antioxidante em diferentes estádios de maturação dos frutos de grumixama em duas regiões de cultivo do Estado de Santa Catarina, Florianópolis e São Ludjero. O estudo também buscou definir o melhor solvente e mecanismo de extração para quantificação de fenólicos totais (FT), capacidade antioxidante (CA) e o melhor solvente extrator para antocianinas monoméricas totais (AMT). Dos parâmetros analisados através dos métodos na AOAC, os teores de umidade e resíduo mineral fixo não apresentaram oscilações no decorrer da maturação, já para a proteína bruta apresentaram comportamentos distintos entre os estádios nas duas regiões. A concentração dos açúcares, minerais e o perfil dos ácidos orgânicos analisados por eletroforese capilar mostraram que as concentrações dos açúcares glicose e frutose aumentaram no decorrer da maturação dos frutos nas duas regiões. Considerando a concentração dos minerais maiores níveis foram observadas nos estádios 1 e 2 das duas regiões de cultivo. O perfil dos ácidos orgânicos apresentou variações durante a maturação, sendo os ácidos majoritários no estádio final o cítrico e o málico. Na análise de FT pelo método colorimétrico de Folin Ciocalteu e de CA pelo método de captura do radical livre DPPH o solvente acetona/água (80:20, v/v) e o mecanismo de extração por agitação magnética foram os mais eficientes no sistema de extração. O etanol/HCl 1,5 M foi o melhor solvente extrator para AMT. No decorrer da maturação dos frutos o conteúdo de FT apresentou maiores valores no estádio 2 e para os taninos condensados no estádio 3, nas duas regiões. Para AMT os maiores valores foram encontrados no estádio 3 na região A e nos estádios 2 e 3 para a região B. A maior capacidade antioxidante foi observada no estádio 2 através do método DPPH e no estádio 3 pelo método FRAP na região A. Já para a região B os maiores valores foram no estádio 3 para ambos os métodos aplicados. Os compostos fenólicos identificados por HPLC-ESI-MS/MS totalizaram 19 compostos, sendo o p-cumárico, catequina, quercetina, taxifolina e isoquercetina encontrados na forma livre e conjugada em todos os estádios de maturação das duas regiões. Os resultados mostraram que as maiores concentrações de compostos bioativos foram observadas nos estádios 2 e 3 indicando a influência da maturação dos frutos.<br> / Abstract : Due to its large territory, Brazil has a wide variety of native fruits. Among them the grumixama (Eugenia brasiliensis Lamarck) stands out, a native fruit from Atlantic Forest. Concerned to the limited number of studies on nutritional and bioactive compounds, which define the ideal maturity stage for the fruits harvesting this study aimed to characterize the chemical, nutritional and antioxidant capacity in different stages of grumixama?s fruits maturity realized in two regions of Santa Catarina State, Florianópolis and São Ludjero. Furthermore, the research attempt to define the best solvent and extraction mechanism to quantify total phenolics (FT), antioxidant capacity (AC) and the ideal extraction solvent for total monomeric anthocyanins (AMT ). Over the parameters analyzed through the AOAC methods the moisture content and the ashes had not presented any variation during ripening process, and the crude protein had revealed different behavior between the stages in the two regions. The sugars and minerals concentration and the organic acids profile analyzed through the capillary electrophoresis reveal the increase of the sugars glucose and fructose concentration during ripening process in both regions. Considering to the minerals concentration highest numbers were observed on stages 1 and 2 in both cultivated regions. The organic acids profile reported oscillation during ripening process, which the majority acids at the final stage were citric and malic. Concerning to the FT analysis by Folin Ciocalteu colorimetric method and the AC analysis by free radical DPPH capture method the solvent acetone / water (80:20, v / v) and the extraction magnetic stirrer were the most efficient extractor system. Ethanol / HCl 1.5 M was the most excellent extraction solvent for AMT. During the fruit ripening process the FT content indicated higher numbers in the stage 2 and for the condensed tannins in the stage 3, both regions. Regarding to the AMT, highest numbers were found on stage 3 in the region A, and stages 2 and 3 in the region B. The highest antioxidant capacity was observed in the stage 2 through DPPH, and the stage 3 by FRAP method in the region A. In regard to the region B the highest numbers were in the stage 3 for both methods applied. Phenolic compounds identified through HPLC-ESI-MS / MS reached 19 compounds, which p-coumaric, catechin, quercetin, taxifolin and isoquercetin were found in free and conjugated form during the whole ripening process stages in both regions. The results had indicated the bioactive compounds major concentrations were observed in the stages 2 and 3 indicating the influence of ripening process.