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Desenvolvimento de método para detecção e quantificação evento-específico do feijoeiro Embrapa 5.1 por PCR em tempo real (qPCR)

Treml, Diana January 2015 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-09-01T04:07:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334055.pdf: 1523188 bytes, checksum: 19249766aa4d27ecac6bc781bb2d7fcf (MD5) Previous issue date: 2015 / Entre os métodos de quantificação de OGM para rotulagem de alimentos, o método que utiliza reação em cadeia de polimerase quantitativa (qPCR) evento-específico é o mais adequado. O evento feijoeiro GM Embrapa 5.1 foi aprovado para comercialização no Brasil em 2011, tornando necessário a sua rotulagem em alimentos. Nesse trabalho foi desenvolvido um método qPCR evento-específica para detecção de feijão GM Embrapa 5.1, pelo desenho de um par de iniciadores e uma sonda para a região de junção do DNA do feijão com o DNA recombinante. O método foi validado utilizando-se dois protocolos para a extração do DNA da folha do feijão: CTAB e DNeasy Plant Mini kit. A especificidade dos iniciadores na qPCR foi avaliada utilizando a metodologia SYBR Green. Os iniciadores apresentaram maior especificidade quando a quantidade final de iniciadores na reação de qPCR foi de 300 nM, com elevada especificidade. A sonda TaqMan foi desenvolvida para aumentar a especificidade, com melhores resultados obtidos utilizando-se uma quantidade final de sonda de 250 nM. Os ensaios de repetibilidade, através da amplificação das amostras compondo uma diluição seriada, apresentaram eficiências entre 85 e 103% para amostras de feijão GM Embrapa 5.1 das variedades Pérola e Pontal extraídas com DNeasy Plant mini kit e de 89 e 85% para as mesmas amostras extraídas pelo método CTAB. O limite de detecção do ensaio foi de 10² cópias de DNA quando o DNA de feijão GM foi diluído em DNA de feijão não GM, utilizando a metodologia TaqMan. A eficiência média da qPCR com amostras de semente de feijão Pérola GM Embrapa 5.1 extraídas com DNeasy Plant Mini kit, foi de 100%. O método de qPCR desenvolvido nesse trabalho apresenta parâmetros adequados quanto a especificidade, eficiência, linearidade e limite de detecção para a identificação e quantificação do evento feijão GM Embrapa 5.1.<br> / Abstract : Among the methods for GMO quantification for food labeling, the method that uses quantitative event-specific polymerase chain reaction (qPCR) is the most suitable. The event GM common bean Embrapa 5.1 was approved for commercialization in Brazil, in 2011. So, it is necessary to label it in foods. In this work it was developed an event-specific qPCR method to detect GM common bean Embrapa 5.1, through the design of a primer pair and a probe that target the region of junction of common bean DNA with the recombinant DNA. The method was validated using two protocols to DNA extraction from common bean leaves: CTAB and DNeasy plant mini kit. The specificity of the primer pair was assessed using SYBR Green. The primers showed higher specificity when the final quantity of primer was 300 nM. One TaqMan probe was developed to increase the specificity with best results achieved when the probe concentration was 250 nM. The repeatability assay, through the amplification of samples serially diluted in water, showed efficiencies between 85 and 103% for varieties of Pérola and Pontal GM common bean Embrapa 5.1 extracted with DNeasy Plant mini kit and of 89 and 85% for the same samples extracted with CTAB. The limit of detection of the assay was 10² copies when DNA of GM common bean was diluted in DNA of non-GM common bean using a TaqMan probe. The mean efficiency of qPCR with samples of grain of GM Pérola 5.1 extracted with DNeasy Plant mini kit was of 100%. The qPCR method developed in this work showed suitable parameters regarding to specificity, efficiency, linearity and limit of detection for the identification and quantification of the event Embrapa 5.1.
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Casca de banana (Musa cavendishii) como fonte de energia e caracterização do resíduo mineral fixo

Leobet, Jaqueline January 2016 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências dos Alimentos, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-10-18T03:03:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 342126.pdf: 1289737 bytes, checksum: a3bed1a2c6051aee3c9d6b900a817f24 (MD5) Previous issue date: 2016 / O controle do consumo de energia em processos industriais é um diferencial competitivo para as empresas. Aliada à redução do impacto ambiental das atividades agrícolas, a utilização de resíduos agroindustriais na produção de energia já é uma realidade em muitos setores. O processamento de banana gera um resíduo estimado em até 40 % do fruto. Embora apenas uma pequena quantidade ? entre 2,5 e 3 % - da banana produzida no Brasil seja industrializada, esta quantidade se torna valiosa quando comparada à grande produção nacional, que chegou a 6.902.184 toneladas em 2012. O atual destino de grande parte deste resíduo é a aplicação no solo. Embora esta seja uma fonte de energia limpa, são geradas cinzas como resíduos da queima, o que justifica a realização de estudos para a sua caracterização, visando sugerir aplicações às mesmas. As determinações do PCS (Poder Calorífico Superior) das amostras apresentou resultados próximos de 4.000 Kcal kg -1. Abaixo dos valores estimados pela análise imediata e acima dos valores previstos pela composição centesimal. Também foi possível identificar a necessidade de pré-secagem das cascas destinadas a queima em caldeira até pelo menos 50 %, partindo de uma percentagem média inicial 86 %. A caracterização das cinzas mostrou que não existem elementos que limitem sua aplicação na alimentação humana ou animal enquanto que o elemento presente em maior quantidade foi o potássio, que representa uma média de 336,07 g kg -1 de cinzas. Estas características permitem sugerir a aplicação deste resíduo como substituto de sal (em 50 %) ou fonte de potássio para produção de bebidas isotônicas.<br> / Abstract : The control of energy consumption in industrial processes is a competitive advantage for companies. Together with the reduction of the environmental impact of agricultural activities, the use of agro-industrial waste to produce energy is already a reality in many sectors. The banana processing generates an estimated waste by up to 40 % of the fruit. Although only a small amount ? between 2.5 and 3 % - of banana produced in Brazil is industrialized, this amount becomes valuable when compared to the large national production, which reached 6.902.184 tons in 2012. The present destination of most of this waste is soil application. Although this is a source of clean energy, ashes are generated as waste, which justifies the conduction of studies for its characterization, in order to suggest applications to them. The determinations of the HHV (Higher Heating Value) of the samples present results close to 4.000 kcal kg -1. Below the values estimated by the proximate analyses and above the values predicted by the centesimal composition. In addition, it was also possible to identify the need for prior dehydration of the peels destined to boiler burning to at least 50%, starting from an initial percentage average of 86%. The characterization of the ashes demonstrated that there are no elements that limit their application for human or animal nutrition, while the element present in greater amounts was potassium, which represents an average of 336.07 g kg -1 of the ashes. These features allows the suggestion of the application of this residue as a salt substitute (in 50 %) or as a potassium source for the production of isotonic beverages.
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Desenvolvimento de iniciadores e sonda espécie-específicos para quantificação por PCR em tempo real de feijão (Phaseolus vulgaris L) em alimentos

Venturelli, Gustavo Luiz January 2014 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:57:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 327001.pdf: 1518423 bytes, checksum: fd32c8d9d8e9dc8d241f276f283d883d (MD5) Previous issue date: 2014 / A cada ano, no Brasil, o número de aprovações para eventos geneticamente modificados cresce, bem como a área plantada de culturas transgênicas. Uma vez que no Brasil a legislação exige que produtos que contenham mais de 1% de organismos geneticamente modificados (OGM) em sua composição sejam rotulados, a identificação e quantificação destes OGM se fazem necessária. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um método de detecção e quantificação, por PCR em tempo real, para o feijoeiro GM Embrapa 5.1 a partir de uma nova referência endógena táxon-específica para Phaseolus vulgaris, tendo como alvo uma sequência de um gene de proteína. Para isso, três genes candidatos foram selecionados e os iniciadores testados com SYBR Green. O ensaio para o gene da Arcelina não apresentou amplificação. Ambos os ensaios para o gene da Lectina e Faseolina apresentaram especificidade esperada, entretanto o da Lectina apresentou maior especificidade e eficiência. Uma sonda TaqMan foi então desenhada, para tornar o ensaio da Lectina ainda mais específico. A especificidade do ensaio LEC foi testada com 50 amostras de feijão, provenientes de dois pools genéticos, Andino e Mesoamericano e 15 amostras de controle negativo. O ensaio táxon-específico FEI, previamente desenvolvido, foi testado com 44 amostras de feijão, a fim de comparação com o ensaio LEC. As amostras de DNA de feijão apresentaram a amplificação esperada para ambos os ensaios, LEC e FEI, apresentando um Ct médio de 20,3 ± 0,73 e 26,34 ± 1,26, respectivamente. Isto sugere que o ensaio LEC possui uma especificidade maior que o ensaio FEI. A alta homogeneidade apresentada capacita o ensaio LEC a detectar variedades de feijão dos dois pools genéticos existentes. O ensaio LEC apresentou amplificação com Ct tardio (Ct > 35) para quatro amostras negativas, porém em apenas algumas reações onde foram testadas. As eficiências do método LEC foram testadas com as amostras Pérola, Pérola GM, Pontal e Pontal GM e variaram de 92% a 101% com o R2 variando entre 0,994 e 0,998. O limite de detecção para o método foi de 101 cópias de DNA genômico. Os resultados obtidos com o ensaio LEC estão dentro dos parâmetros propostos pelo European Network of GMO Laboratories (ENGL), podendo, desta forma, o ensaio ser utilizado em estudos de análise de feijão GM. Além disso, os iniciadores desenvolvidos podem ser utilizados para quantificação e detecção tanto do feijão convencional quanto do feijoeiro Embrapa 5.1 com ambos os sistemas de PCR, TaqMan e SYBR Green.<br> / Abstract : Every year the number of approvals for genetically modified events grows in Brazil as well as the area of cultivated transgenic crops. Once Brazilian legislation requires the labeling on products containing > 1% of GMOs in its composition, methods for the detection and quantification of new GMOs are necessary. The aim of the present work was to develop a new real time PCR assay for the detection and quantification of the GM common bean Embrapa 5.1 using a new taxon-specific endogenous reference targeting a coding gene of Phaseolus vulgaris. Three genes encoding common bean proteins were chosen and tested using SYBR Green chemistry. The assay for the Arcelin gene did not show amplification. Both Lectin and Faseolin assays showed the expected specificity although the Lectin assay presented higher specificity and efficiency. A TaqMan probe was then designed in order to develop a more specific detection method. The specificity of LEC assay was tested for 50 common bean samples from two gene pools, Andean and Mesoamerican, and 15 negative control samples. The previously developed taxon-specific FEI assay was evaluated by testing forty-four Phaseolus vulgaris varieties in order to compare with LEC assay. These common bean DNA samples presented the expected amplification signal and the mean Ct was 20.3 ± 0.73 and 26.34 ± 1.26 for LEC and FEI assays, respectively. It suggests that LEC assay has higher specificity than FEI assay. The high homogeneity makes the LEC assay able to reliably detect common bean varieties from both gene pools. LEC assay presented amplification at late Ct (Ct value > 35) in few reactions of four negative samples. The efficiencies of LEC method were performed using non-GM Pérola, non-GM Pontal, GM Pérola and GM Pontal samples and they ranged from 92% to 101% and R2 ranged from 0.994 to 0.998. Moreover, this assay presented a limit of detection of 101 genome copies. The results showed that the LEC assay meets the requirements proposed by the ENGL and it can be used in further studies of GM common bean analyses. Furthermore, the primers and probe developed in this work are suitable for both real time PCR detection chemistries, TaqMan and SYBR Green and they are suitable to detect and quantify either GM and non-GM common bean.
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Influência da maturação sobre o conteúdo e bioacessibilidade de minerais e perfil de compostos fenólicos dos frutos da palmeira Juçara (Euterpe edulis Martius)

Schulz, Mayara January 2015 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-09-22T04:07:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334480.pdf: 2182180 bytes, checksum: 4e848e3b031babd1940ddf358b23e5ff (MD5) Previous issue date: 2015 / Espécie nativa da Mata Atlântica, encontrada desde o sul da Bahia até o norte do Rio Grande do Sul, a palmeira juçara (Euterpe edulis Mart.) apresenta grande importância ecológica e econômica para o Brasil, em especial para os estados de Santa Catarina, Paraná e São Paulo. A exploração extrativista contínua e desordenada para a produção de palmito acarretou em risco de extinção da espécie, visto que a extração do palmito implica no sacrifício da planta. Recentemente, maior atenção vem sendo dada à exploração de seus frutos, muito semelhantes aos frutos do açaizeiro (Euterpe oleracea Mart.) cultivado na Amazônia e utilizado para a produção de açaí. Os frutos de juçara são arredondados e apresentam coloração violáceo-púrpura quando maduros, sua utilização para obtenção de polpa tornou-se uma forma de conciliar proteção ambiental da espécie com agregação de valor econômico. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o conteúdo de minerais, sua bioacessibilidade e determinar o perfil de compostos fenólicos em frutos de palmeira juçara coletados em Florianópolis/SC em diferentes estádios de maturação. Os minerais e sua bioacessibilidade, bem como o conteúdo de compostos fenólicos apresentaram mudanças com o avanço da maturação. A partir da utilização da metodologia de bioacessibilidade in vitro mostrou-se que os frutos coletados no final da maturação, nos estádios definidos como sexto e sétimo, apresentaram um melhor aproveitamento nutricional com relação aos minerais, especialmente para Mn, Se, Cu, Ca e Fe. Com o emprego da HPLC-ESI-MS/MS foram identificados ácidos fenólicos (protocatecuico, ?-cumárico e gálico), flavonoides (campferol, aromadendrina, hispidulina, quercetina, taxifolina, miricetina e rutina) e estilbeno (resveratrol). Os ácidos fenólicos e os flavonoides apresentaram as maiores concentrações, em sua maioria, nos frutos coletados até o terceiro estádio de maturação, com exceção da rutina e quercetina, que apresentaram os maiores teores no final do ciclo de maturação. Os resultados obtidos neste trabalho demonstram que o consumo de frutos de juçara pode contribuir significativamente para a ingestão diária recomendada de minerais e maximizar a ingestão dietética de compostos antioxidantes, os quais podem trazer benefícios à saúde do consumidor.<br> / Abstract : Native to Atlantic Forest, found from south Bahia to the north of Rio Grande do Sul, the juçara palm (Euterpe edulis Mart.) has great ecological and economic importance to Brazil, especially in the states of Santa Catarina, Paraná and São Paulo. The continuous and disorderly exploitation for palm heart production resulted in near extinction of the species, since palm heart extraction involves the sacrifice of the plant. Recently, more attention has been given to the exploitation of juçara fruits, very similar to the fruits grown in Amazon (Euterpe oleracea species) and used for the production of açaí. The juçara fruits are rounded, when ripe are violet-purple color, and its use to obtain pulp has become a way of reconciling environmental protection of the species with added economic value. This study aimed to evaluate the mineral content and its bioaccessibility and the profile of phenolic compounds in juçara fruit collected in Florianópolis/SC at different ripening stages. Minerals and their bioaccessibility, and the content of phenolic compounds showed changes during advancing maturity. The application of the in vitro bioaccessibility methodology showed that the fruits harvested at the end of ripening stages (sixth and seventh) showed a better mineral content, especially Mn, Se, Cu, Ca and Fe. With the use of HPLC-ESI-MS / MS were identified phenolic acids (protocatechuic, gallic and ?-coumaric acid), flavonoids (kaempferol, aromadendrin, hispidulin, quercetin, taxifolin, myricetin and rutin) and stilbene (resveratrol). The phenolic acids and flavonoids shown the highest concentrations, mostly in fruits collected until the third ripening stage, with the exception of rutin and quercetin, which showed the highest levels at the end of the ripening cycle. The results of this study show that the consumption of juçara fruit can significantly contribute to the recommended daily intake of minerals and maximize dietary intake of antioxidant compounds, which can benefit the consumer health.
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Potencial de tecnologias emergentes para a conservação e aumento do valor nutricional de leite humano

Berenhauser, Ana Claudia January 2017 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-08-01T04:15:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 348595.pdf: 1898431 bytes, checksum: 06980268687e7d40b8576b69f9af4340 (MD5) Previous issue date: 2017 / O leite humano proveniente de bancos de leite necessita ser seguro do ponto de vista nutricional, imunológico e microbiológico, garantindo assim o crescimento e desenvolvimento de recém-nascidos pré-termo e de baixo peso. O estudo de tecnologias alternativas à pasteurização, que é o tratamento térmico atualmente utilizado nos bancos de leite, é importante para minimizar as degradações ocorridas com processos térmicos. Tecnologias alternativas que possam agregar valor nutricional ao leite humano também são de interesse. Na primeira etapa do presente estudo foi investigada a inativação microbiana de mesófilos aeróbios naturalmente presentes e, Escherichia coli ATCC 25922 inoculada artificialmente ao leite humano através da aplicação do CO2 supercrítico. Foram estudados o efeito da razão entre a massa de amostra (leite humano cru) e CO2 (1:0,2; 1:0,6 e 1:1 m/m); taxa de despressurização (1; 5,5 e 10 MPa/min), e ciclos de pressão (1, 3 e 5). As melhores reduções em mesófilos aeróbicos e E. coli ATCC 25922 (6,0 e 5,7 log, respectivamente) foram obtidas com uma razão de 1:1, taxa de despressurização de 10 MPa/min, e 1 ciclo de pressurização/despressurização. Os resultados obtidos na primeira etapa do estudo sugerem que o processamento com CO2 supercrítico poderia ser aplicado ao leite humano como uma alternativa segura ao processo de pasteurização. Na segunda etapa do estudo o leite humano foi concentrado por meio da técnica de crioconcentração em bloco. Foram avaliados os efeitos crioconcentração sobre as propriedades físico- químicas, eficiência do processo, parâmetros de cor, densidade e viscosidade dinâmica do leite humano. A tecnologia de crioconcentração foi utilizada para concentrar com sucesso o leite humano a um fator igual a 180,48% e 72% de retenção de sólidos totais no segundo estágio de crioconcentração. Os valores observados nos concentrados para as propriedades bioquímicas demonstraram que a segunda fração concentrada (C2) apresentou valores de carboidratos (17,35 g/100g), proteínas (3,34 g/100g) e energia (85,91 Kcal/100g) elevados. O valor calórico elevado observado na primeira fração de gelo (I1) relacionou-se à retenção de lipídios (4,6 g/100g) na mesma. Se adicionados ao leite humano, o C2 e I1 poderiam atender aos requisitos especiais de nutrientes e energia para garantir o crescimento e desenvolvimento de recém- nascidos pré termo.<br> / Abstract : Human milk from milk banks should be nutritionally, immunologically and microbiologically safe, ensuring the growth and development of preterm and low weight newborns. The study of alternative technologies to pasteurization, which is the heat treatment currently used in milk banks, is important to minimize the degradations that occur with thermal processes. Alternative technologies that may add nutritional value to human milk are also of interest. In the first step of this study the microbial inactivation of naturally occurring aerobic mesophilic and Escherichia coli ATCC 25922 artificially inoculated to human milk through the application of supercritical CO2 has been investigated. The effect of the ratio between sample mass (raw human milk) and CO2 (1: 0.2, 1: 0.6 and 1:1 m/m); depressurization rate (1, 5.5 and 10 MPa/min), and pressure cycling (1, 3 and 5) was studied. The best reductions in aerobic mesophilic and E. coli ATCC 25922 (6.0 and 5.7 log, respectively) were obtained with a ratio of 1:1, depressurization rate of 10 MPa/min, and 1 pressurization/depressurization cycle. The results obtained suggest that the processing with supercritical CO2 could be applied to human milk as a safe alternative to the pasteurization. In the second stage of the study, the human milk was concentrated using the block freeze cryoconcentration technique. The effects of cryoconcentration on the physico-chemical properties, process efficiency, color parameters, density and dynamic viscosity of human milk were evaluated. The human milk was successfully concentrated at a factor equal to 180.48% and 72% of total solids retention in the second stage of cryoconcentration. The values observed in the concentrates for the biochemical properties showed that the fraction of concentrated fluid human milk of the second stage (C2) presented elevated amounts of carbohydrates, protein and energy. The elevated caloric value observed in the ice fraction of the first stage (I1) refers to the retention of lipids in it. When added to human milk, C2 and I1 may satisfy the special requisites of nutrients and energy to guarantee the growth and development of preterm neonates.
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Avaliação da capacidade antioxidante e compostos fenólicos em diferentes estádios de maturação da grumixama (Eugenia brasiliensis Lamarck)

Nehring, Priscila January 2016 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-09-20T05:12:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340541.pdf: 1919422 bytes, checksum: 1952cd354a69bece230b791596b913dd (MD5) Previous issue date: 2016 / O Brasil possui uma ampla diversidade de frutas nativas devido a sua grande extensão territorial. Entre elas destaca-se a grumixama (Eugenia brasiliensis Lamarck), fruto nativo da mata Atlântica. Considerando a escassez de estudos sobre os compostos nutricionais e bioativos que definam o estádio de maturação ideal para a colheita dos frutos, o presente trabalho teve como objetivo a caracterização química, nutricional e capacidade antioxidante em diferentes estádios de maturação dos frutos de grumixama em duas regiões de cultivo do Estado de Santa Catarina, Florianópolis e São Ludjero. O estudo também buscou definir o melhor solvente e mecanismo de extração para quantificação de fenólicos totais (FT), capacidade antioxidante (CA) e o melhor solvente extrator para antocianinas monoméricas totais (AMT). Dos parâmetros analisados através dos métodos na AOAC, os teores de umidade e resíduo mineral fixo não apresentaram oscilações no decorrer da maturação, já para a proteína bruta apresentaram comportamentos distintos entre os estádios nas duas regiões. A concentração dos açúcares, minerais e o perfil dos ácidos orgânicos analisados por eletroforese capilar mostraram que as concentrações dos açúcares glicose e frutose aumentaram no decorrer da maturação dos frutos nas duas regiões. Considerando a concentração dos minerais maiores níveis foram observadas nos estádios 1 e 2 das duas regiões de cultivo. O perfil dos ácidos orgânicos apresentou variações durante a maturação, sendo os ácidos majoritários no estádio final o cítrico e o málico. Na análise de FT pelo método colorimétrico de Folin Ciocalteu e de CA pelo método de captura do radical livre DPPH o solvente acetona/água (80:20, v/v) e o mecanismo de extração por agitação magnética foram os mais eficientes no sistema de extração. O etanol/HCl 1,5 M foi o melhor solvente extrator para AMT. No decorrer da maturação dos frutos o conteúdo de FT apresentou maiores valores no estádio 2 e para os taninos condensados no estádio 3, nas duas regiões. Para AMT os maiores valores foram encontrados no estádio 3 na região A e nos estádios 2 e 3 para a região B. A maior capacidade antioxidante foi observada no estádio 2 através do método DPPH e no estádio 3 pelo método FRAP na região A. Já para a região B os maiores valores foram no estádio 3 para ambos os métodos aplicados. Os compostos fenólicos identificados por HPLC-ESI-MS/MS totalizaram 19 compostos, sendo o p-cumárico, catequina, quercetina, taxifolina e isoquercetina encontrados na forma livre e conjugada em todos os estádios de maturação das duas regiões. Os resultados mostraram que as maiores concentrações de compostos bioativos foram observadas nos estádios 2 e 3 indicando a influência da maturação dos frutos.<br> / Abstract : Due to its large territory, Brazil has a wide variety of native fruits. Among them the grumixama (Eugenia brasiliensis Lamarck) stands out, a native fruit from Atlantic Forest. Concerned to the limited number of studies on nutritional and bioactive compounds, which define the ideal maturity stage for the fruits harvesting this study aimed to characterize the chemical, nutritional and antioxidant capacity in different stages of grumixama?s fruits maturity realized in two regions of Santa Catarina State, Florianópolis and São Ludjero. Furthermore, the research attempt to define the best solvent and extraction mechanism to quantify total phenolics (FT), antioxidant capacity (AC) and the ideal extraction solvent for total monomeric anthocyanins (AMT ). Over the parameters analyzed through the AOAC methods the moisture content and the ashes had not presented any variation during ripening process, and the crude protein had revealed different behavior between the stages in the two regions. The sugars and minerals concentration and the organic acids profile analyzed through the capillary electrophoresis reveal the increase of the sugars glucose and fructose concentration during ripening process in both regions. Considering to the minerals concentration highest numbers were observed on stages 1 and 2 in both cultivated regions. The organic acids profile reported oscillation during ripening process, which the majority acids at the final stage were citric and malic. Concerning to the FT analysis by Folin Ciocalteu colorimetric method and the AC analysis by free radical DPPH capture method the solvent acetone / water (80:20, v / v) and the extraction magnetic stirrer were the most efficient extractor system. Ethanol / HCl 1.5 M was the most excellent extraction solvent for AMT. During the fruit ripening process the FT content indicated higher numbers in the stage 2 and for the condensed tannins in the stage 3, both regions. Regarding to the AMT, highest numbers were found on stage 3 in the region A, and stages 2 and 3 in the region B. The highest antioxidant capacity was observed in the stage 2 through DPPH, and the stage 3 by FRAP method in the region A. In regard to the region B the highest numbers were in the stage 3 for both methods applied. Phenolic compounds identified through HPLC-ESI-MS / MS reached 19 compounds, which p-coumaric, catechin, quercetin, taxifolin and isoquercetin were found in free and conjugated form during the whole ripening process stages in both regions. The results had indicated the bioactive compounds major concentrations were observed in the stages 2 and 3 indicating the influence of ripening process.
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Vibrio vulnificus em ostras (Crassostrea gigas) em Santa Catarina

Raszl, Simone Moraes January 2016 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-12-20T03:16:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 343109.pdf: 4273942 bytes, checksum: 0190bb7c669406b691be6cda46663d8d (MD5) Previous issue date: 2016 / Vibrio vulnificus é um habitante natural de ambientes marinhos que pode infectar seres humanos através de ferimentos na pele ou pelo consumo de frutos do mar, especialmente ostras consumidas cruas ou mal cozidas. A bactéria pode atravessar a barreira intestinal e alcançar a corrente sanguínea causando septicemia, que pode levar à morte. A hipótese científica deste estudo foi a de que existem cepas potencialmente patogênicas de V. vulnificus, identificadas pelo gene vcgC, nas ostras produzidas no litoral de Santa Catarina. Os objetivos desta tese foram verificar a ocorrência cepas de V. vulnificus com potencial patogenicidade em ostras (Crassostrea gigas) produzidas em Santa Catarina; realizar estudo retrospectivo inédito sobre presença de V. vulnificus e de V. parahaemolyticus na América do Sul; e comparar a performance dos meios de cultivo microbiológico mais comuns para detecção de V. vulnificus quanto a sua capacidade de isolamento e enumeração. A hipótese foi confirmada na análise das amostras coletadas, com confirmação por PCR, indicando a presença de cepas potencialmente patogênicas de V. vulnificus. O estudo de revisão indicou que as infecções causadas por V. parahaemolyticus tem sido mais fortemente relacionadas à ingestão de alimentos de origem marinha e mais frequentes na costa do Oceano Pacífico. Por outro lado, V. vulnificus é mais frequentemente adquirido por contato de lesões de pele e sua presença é mais comum na costa do Oceano Atlântico. Além disso, o estudo indicou que o fenômeno El Niño exerce influência no aumento de casos de V. parahaemolyticus na costa do Pacífico. Entretanto, são necessários mais estudos para confirmar a importância de fatores ambientais na presença e virulência da bactéria nesta região. No Brasil, os casos de infecções causadas por V. vulnificus são restritos basicamente às regiões sul e sudeste, exceto por um caso recente em 2016, na região nordeste do Brasil. Na análise das amostras coletadas, o estudo revelou uma baixa incidência (4%) de V. vulnificus entre as amostras de ostras (C. gigas) durante os meses de outubro/2014 a janeiro/2015, confirmadas por PCR através dos genes vcg. Esta baixa incidência pode ser explicada pela alta salinidade na região, que ultrapassa os valores de 34?. Na análise da performance dos meios usando cepas puras de V. vulnificus de genótipos conhecidos vcgC e vcgE, todos os meios analisados apresentaram performance satisfatória. Com relação à avaliação da performance dos meios para isolamento eenumeração de V. vulnificus em amostras ambientais, o meio CPC+ apresentou a melhor performance. Assim, mesmo tendo em conta a ausência de relatos de casos de infecção humana em Santa Catarina e os fatores ambientais citados, é fundamental a criação de um programa de monitoramento contínuo para avaliar a presença da bactéria, assim como a adoção de um procedimento de comunicação para pessoas portadoras de condições predisponentes e para profissionais de saúde, para que possam orientar seus pacientes e que possam realizar o diagnóstico e consequente tratamento de pessoas acometidas, com a adoção de metodologias mais precisas, rápidas e específicas para detecção de cepas patogênicas, como a detecção do gene vcg por PCR, especialmente no diagnóstico de casos suspeitos, garantindo maior precisão e eficácia de tratamento.<br> / Abstract : Vibrio vulnificus is a natural inhabitant of marine environments that can infect humans through skin wounds or seafood ingestion, especially raw or undercooked shellfish. The bacteria can cross the intestinal barrier and reach the blood stream causing sepsis that can lead to death. The scientific hypothesis of this study was that there are potentially pathogenic strains of V. vulnificus, identified by vcgC gene, on the oysters produced in the coast of Santa Catarina. The objectives of this thesis were to assess the occurrence of potentially pathogenic V. vulnificus strains in oysters (Crassostrea gigas) produced in Santa Catarina; to achieve unprecedented retrospective study on the presence of V. vulnificus and V. parahaemolyticus in South America; and compare the performance of the most common media for microbiological culture used to detect V. vulnificus as its isolation and enumeration capacity. The hypothesis was confirmed through the analysis of samples, confirmed by PCR. The review indicated that the infections caused by V. parahaemolyticus have been more closely related to the ingestion of seafood and more frequent in the Pacific Ocean. On the other hand, V. vulnificus is most often acquired by contact of skin lesions and their presence is more common in the Atlantic Ocean. In addition, the study indicated that the El Niño Southern Oscillation influences the increase in cases of V. parahaemolyticus on the Pacific coast. However, more studies are needed to confirm the importance of environmental factors in the presence and virulence of the bacteria in this region. In Brazil, cases of infection caused by V. vulnificus are basically restricted to the southern and southeastern areas, except for a recent case in 2016, in northeastern Brazil. The study revealed a low incidence (4%) of V. vulnificus between oyster samples (C. gigas) produced in Santa Catarina during the months of October/2014 to January/2015, confirmed by PCR using vcg genes. This low rate can be explained by high salinity in the region, which exceeds 34?. In the media performance research using V. vulnificus pure strains with known vcgC and vcgE genotypes, when considering the performance for total V. vulnificus, all analyzed media showed satisfactory performance. Regarding the assessment of the performance of the media for V. vulnificus isolation and enumeration in environmental samples, CPC+ had the best performance. Thus, considering the absence of reported cases of human infection in Santa Catarina and the environmental factors mentioned, the creation of a continuous monitoring program is critical to assess the presence ofbacteria, as well as the adoption of a communication procedure for people with predisposing conditions and health professionals so that they can guide their patients and can make the diagnosis and subsequent treatment of affected people, and to adopt more precise methodologies, for rapid and specific detection of pathogenic strains such as the detection of the vcg gene by PCR, especially in the case of diagnosis of suspected cases, ensuring greater accuracy and efficacy of treatment.
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Nanopartículas de zeína e quitosana contendo óleo essencial de Ocimum gratissimum L. quimiotipos eugenol e geraniol

Freitas, Daniele Ziglia de January 2016 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-03-21T04:13:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 344596.pdf: 3813188 bytes, checksum: 62203ab8c180409258abde1a88b5ce5e (MD5) Previous issue date: 2016 / O presente estudo teve como objetivo, desenvolver e caracterizar nanopartículas contendo óleo essencial de Alfavaca Africana (OcimumgratissimumL.), quimiotipo eugenol e quimiotipo geraniol, assim como seus compostos principais, na forma pura, tendo como material de parede zeína com e sem revestimento de quitosana. As suspensões nanopartículadas foram obtidas pela técnica de nanoprecipitação, com a finalidade de caracterização físico-química e de estabilidade das partículas obtidas, análises de diâmetro médio, índice de polidispersão, potencial zeta, eficiência de encapsulação e atividade antioxidante, foram realizadas nos tempos 1, 30 e 60 dias de armazenamento. As partículas apresentaram diâmetro médio entre 145 e 245 nm, com índice de polidispersão inferiores a 0,226. O potencial zeta variou de + 21 à + 43 mV, possuindo em todas as formulações carga positiva. A eficiência de encapsulação foi de 89 a 99%. A atividade antioxidante das partículas foi avaliada pela capacidade dos compostos presentes nas amostras, em inibir o radical DPPH (2,2-difenil-1-picrilhidrazila), as partículas contendo eugenol em sua composição apresentaram valores acima de 99%, enquanto partículas contendo geraniol obtiveram atividade entre 50 e 10%. Com exceção às partículas contendo geraniol em sua formulação, que obtiveram redução em sua capacidade antioxidante no transcorrer do armazenamento, as partículas demonstraram estabilidade em função do tempo (até 60 dias) em relação às metodologias avaliadas. A morfologia e distribuição de tamanho foram realizadas por microscopia eletrônica de transmissão, demonstrando formato esférico, borda regular e bem definida. Análises termogravimétricas e de espectroscopia no infravermelho também foram realizadas e evidenciaram que as nanopartículas carregadas apresentaram características distintas aos óleos essências e aos compostos puros utilizados na composição das nanopartículas, e comprovaram a encapsulação dos compostos ativos. Através do estudo, pode-se verificar que as partículas apresentam características para uma possível aplicação em alimentos.<br> / Abstract : This study aimed to develop and characterize nanoparticles containing essential oil of African Basil (Ocimum gratissimum L.) eugenol and geraniol chemotypes, as well as its main compounds in pure form. Taking as wall material zein with and without chitosan coating. The nanoparticule suspensions were obtained by nanoprecipitation technique. For the purpose of physical-chemical characterization and stability of the obtained particles, the average diameter, polydispersity index, zeta potential, encapsulation efficiency and antioxidant activity analyzes were performed on days 1, 30 and 60 of storage. The particles had an average diameter of between 145 and 245 nm with a polydispersity index below 0.226. The zeta potential ranged from + 21 to + 43 mV, having positive charge in all formulations. The encapsulation efficiency varied from 89% to 99%.The antioxidant activity of the particles was assessed by the ability of the compounds present in the samples in inhibiting DPPH radical (2,2-diphenyl-1-picrilhidrazila), the particles containing eugenol in its composition had values above 99%, while particles containing geraniol obtained activity between 50 and 10%. Except for the particles containing geraniol in its formulation, which obtained a reduction in its antioxidant capacity in the course of storage, the particles showed stability for the time (60 days) in relation to the assessed methodologies. The morphology and size distribution were performed by transmission electron microscopy, showing spherical shape, regular and well-defined edge. Thermogravimetric and spectroscopic analysis in infrared were also performed and showed that the loaded nanoparticles presented distinct characteristics to essential oils and pure compounds used in the composition of the nanoparticles, and confirmed the encapsulation of active compounds. Through the study it can be seen that the particles have characteristics for possible use in food.
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Efeito do processo hidrotérmico sobre o amido do Feijão macassar (Vigna unguiculata L. Walp) e suas respostas fisiológicas

SALGADO, Silvana Magalhães January 2003 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T23:04:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8934_1.pdf: 1057784 bytes, checksum: 713ac58a79d99a40d3e158b0b1682a0c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2003 / Para avaliar efeitos dos tratamentos hidrotérmicos sobre a formação de amido resistente no feijão macassar verde e seco, as amostras in natura foram caracterizadas quanto a composição centesimal, amido resistente, amilose/amilopectina, difração de raio-X e microscopia e posteriormente submetida a tratamentos hidrotérmicos com e sem pressão seguido do congelamento por 15 e 30 dias. As respostas fisiológicas foram obtidas por fermentação in vitro seguida da contagem de lactobacilos e ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) por cromatografia gasosa e o índice glicêmico (IG) foi calculado a partir da hidrólise enzimática do amido. Segundo os resultados o feijão verde diferiu do seco quanto ao superior teor de açúcares , fibras solúveis e reduzido percentual de amido total; e ao padrão de cristalinidade;dos tratamentos hidrotérmicos a maior formação de AR foi evidenciada no feijão seco após cocção sem pressão e armazenamento por 30 dias sob congelação; a fermentação do amido dos feijões verde e seco propiciou maior crescimento bacteriano e maior produção de AGCC, respectivamente e ambos apresentaram elevados IG. Conclui-se que: as características dos grânulos de amido exceto o aspecto morfológico são influenciadas pelo estádio de maturação; o teor de AR é modificado pelo tipo de processo térmico, tempo e temperatura de armazenamento; AR exerce efeitos prebióticos que beneficiam o metabolismo intestinal
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Meio de cultivo a base de concentrado de dessalinização obtido por osmose inversa para Arthrospira (Spirulina) platensis

Pinho, Miguel Ângelo January 2009 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos. / Made available in DSpace on 2012-10-24T12:23:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 268418.pdf: 1149223 bytes, checksum: 1f816e2604c0a2719d699ef4efe3f4c3 (MD5) / O objetivo deste trabalho foi desenvolver um meio de cultura para Arthrospira (Spirulina) platensis à base de concentrado de dessalinização, estabelecendo um protocolo para tratamento prévio de abrandamento do resíduo e analisar o efeito de diferentes concentrações e fontes de nutrientes adicionados ao meio de cultivo no crescimento dessa microalga. Um estudo prévio demonstrou que sob dureza total de 1.000 mg de CaCO3.L-1, após abrandamento realizado através da adição de carbonato de sódio (Na2CO3), não ocorreu precipitação dos nutrientes adicionados posteriormente, sendo este valor adotado para a base do meio de cultura. Uma vez que o concentrado de dessalinização utilizado apresentou teor demasiadamente alto de dureza total (CaCO3 acima de 5.000 mg.L-1), necessitando de concentrações muito altas de Na2CO3 para seu abrandamento, optou-se por reduzi-la primeiramente a 2.000 mg de CaCO3.L-1, utilizando-se 6,09 g de Na2CO3.L-1, seguida de uma diluição a 50 %. O efeito da variação de nutrientes na produção de Arthrospira platensis foi estudado em ensaios realizados em uma base composta de concentrado de dessalinização previamente tratado segundo o método acima descrito, suplementada com (g.L-1): NaHCO3, 15,15; Na2CO3, 8,89; KNO3, 1,00; solução de micronutrientes, 1 mL; e solução Fe-EDTA, 1 mL. Os nutrientes avaliados foram fosfato de potássio dibásico (K2HPO4), sulfato de sódio (Na2SO4) e uréia (CO(NH2)2. Seu efeito foi avaliado na biomassa produzida após 12 dias de cultivo em ensaios que aplicaram 5 concentrações diferentes desses três nutrientes. Através de metodologia de superfície de resposta determinou-se que as maiores concentrações de biomassa foram obtidas adicionando-se (g.L-1): K2HPO4, 0,752; Na2SO4, 2,20; e CO(NH2)2, 0,57 g.L-1. The aim of this study was to develop a culture medium for Arthrospira (Spirulina) platensis, obtained from the concentrated brackish water from a desalination plant, defining a previous treatment for the softening of the concentrated, and determining the effect of different nutrient concentrations and sources of nutrients in the growth of this microalga. A previous study determined that at the total hardness of 1,000 mg CaCO3.L-1, obtained by means of addition of sodium carbonate (Na2CO3), the nutrients that were added after this softening process didn#t precipitate, thus this total hardness value was adopted to the culture medium. Once the concentrated brine showed an extremely high hardness value (CaCO3 above 5.000 mg.L-1), being necessary high concentrations of Na2CO3, first it was softened until 2.000 mg of CaCO3.L-1 by adding 6,09 g of Na2CO3.L-1, and then a dilution at 50 %. The effect of the different concentrations of nutrients in the Arthrospira platensis production was assessed in a culture basis previously softened following the process described bellow, supplemented with (g.L-1): NaHCO3, 15,15; Na2CO3, 8,89; KNO3, 1,00; micronutrients solution, 1 mL; and Fe-EDTA solution, 1 mL. The nutrients evaluated were potassium phosphate dibasic (K2HPO4), sodium sulphate (Na2SO4) and urea (CO(NH2)2). The effect was analyzed by measuring the biomass obtained after 12 days in experiments that applied 5 different concentrations of those 3 nutrients. A surface response methodology showed that the highest concentrations of biomass were obtained applying (g.L-1): K2HPO4, 0,752; Na2SO4, 2,20; e CO(NH2)2, 0,57 g.L-1.

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