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Fluorescent labeling is a method used for visualization of various types of biomolecules including proteins and protein complexes. However, the effect of protein labeling on protein structure and functions has not been investigated so far. The goal of the diploma thesis was to examine an influence of NHS-fluorescein binding on structure and function of human carbonic anhydrase I (hCA-I). The particular aims of this work were to prepare recombinant 15N-hCA-I which was used for NMR structure analysis of carbonic anhydrase upon fluorescent labeling. Furthermore, enzyme activity was measured in order to find out a correlation between the concentration of NHS- fluorescein and protein function. In addition, the reaction mixtures were systematically analyzed by ESI FT-ICR mass spectrometry. The analysis revealed experimental conditions for fluorescent labeling of human carbonic anhydrase I with minimal effect on protein structure and function. The results of this study show that the calculation of molar excess of NHS-fluorescein cannot rely on a simple procedure provided by manufacturer. However, due to decrease of enzyme activity upon fluorescent labeling, it is better to take into count the influence of NHS-fluorescein concentration on the relative enzymatic activity. Moreover, the calculation of molar...

O fungo Aspergillus fumigatus é o segundo maior causador de infecções fúngicas invasivas em pacientes imunocomprometidos e a principal espécie causadora da aspergilose invasiva, doença de alta taxa de mortalidade que atinge principalmente os pulmões e que pode se disseminar pelo organismo. Durante o processo de infecção, o fungo precisa adaptar-se ao organismo do hospedeiro e um dos obstáculos encontrados é a mudança na concentração de dióxido de carbono (CO2), que, de 0,033% no ambiente, chega a até 6% no interior do hospedeiro. As anidrases carbônicas são enzimas envolvidas na hidratação reversível do CO2 e já foram apontadas como importantes na virulência de patógenos como Plasmodium falciparum, Mycobacterium tuberculosis, Helicobacter pylori, Cryptococcus neoformans e Candida albicans. Esse trabalho teve como objetivo avaliar o papel da enzima anidrase carbônica no desenvolvimento e virulência do fungo A. fumigatus, que apresenta quatro homólogos desta enzima (cafA, cafB, cafC e cafD). Para isso, foram utilizadas linhagens de A. fumigatus com os homólogos da enzima deletados (?cafA, ?cafB, ?cafC, ?cafD e ?cafA?cafB) e a linhagem selvagem (?akuBku80), da qual foram originadas as mutantes. Foram realizadas avaliações fenotípicas da estrutura dos conidióforos das diferentes linhagens, determinação da sensibilidade frente a diferentes agentes estressantes (antifúngicos, promotores de apoptose, estresse iônico, nitroativo, oxidativo, e de parede celular) e determinação da expressão gênica global em diferentes concentrações de CO2. Foi verificado que a deleção de cada um dos homólogos da anidrase carbônica de A. fumigatus não interfere na estrutura dos conidióforos deste fungo. Por outro lado, a deleção induziu alteração da sensibilidade do fungo frente a alguns compostos estressantes (ácido acético e peróxido de hidrogênio). Ainda, a análise da expressão gênica revelou um gene envolvido na adaptação do fungo ao aumento da concentração de CO2, o gene cipC, que não apresenta homólogos nas células de mamíferos. Este gene foi caracterizado neste trabalho por meio de sua deleção na linhagem selvagem (?akuBku80) de A. fumigatus e avaliação fenotípica microscópica e de sensibilidade a agentes estressantes (antifúngicos, promotores de apoptose, estresse iônico, nitroativo, oxidativo, e de parede celular). A deleção do gene não interferiu na estrutura do fungo, porém aumentou sua sensibilidade a alguns compostos (calcoflúor e menadiona). Foram realizados, ainda, testes de virulência em modelo animal utilizando-se o mutante ?cipC, os quais revelaram que a deleção deste gene atenua a virulência do fungo. Assim, foi possível concluir que as anidrases carbônicas não são relevantes para o desenvolvimento e virulência de A. fumigatus; porém, este fungo modifica a expressão de seus genes de modo a adaptar-se às variações na concentração atmosférica de CO2. O gene cipC está envolvido nesse processo de adaptação e é importante para o desenvolvimento do fungo e sua virulência, tornando-se um alvo para o estudo de novas terapias para o tratamento da aspergilose invasiva. / The fungus Aspergillus fumigatus is the second cause of fungal infections in immunocompromised patients and it is the main specie which causes invasive aspergillosis, a disease with high mortality rate that mainly affects the lungs and it can spread through the body. During the infectious process, the fungus must adapt to the host and one of the obstacles is the drastic change of the carbon dioxide (CO2) concentration, which is 0.033% in the environment and until 6% inside the host. The carbonic anhydrases are enzymes which are involved in the reversible hydration of carbon dioxide and they have been pointed as important in the virulence of pathogens such as Plasmodium falciparum, Mycobacterium tuberculosis, Helicobacter pylori, Cryptococcus neoformans and Candida albicans. This work aimed to evaluate the role of the enzyme carbonic anhydrase in the development and virulence of the fungus A. fumigatus, which has four homologues of this enzyme (cafA, cafB, cafC e cafD). Therefore, strains, which have the homologues of the enzyme deleted (?cafA, ?cafB, ?cafC, ?cafD and ?cafA?cafB) were used in parallel with the wild strain (?akuBku80), which originated the mutant ones. We did structure phenotypic evaluations of the different strains of conidiophores, sensibility determination against different stressors (antifungal agents, apoptosis, ionic, nitrosative, oxidative, and cell wall stress promoters) and global gene expression determination at different carbon dioxide concentrations. It was verified that the carbonic anhydrases homologues deletion of A. fumigatus did not interfere on the n structure (conidiophore) of this fungus, in the tested conditions. On the other hand, the deletion caused a change in sensibility of the fungus against some stressors (acetic acid and hydrogen peroxide). The gene expression experiments showed a gene involved in the adaptation to the increase of CO2 concentration, the cipC gene. This gene does not have homologues in the mammalian cells. The cipC gene was characterized in this work by its deletion in the A. fumigatus wild strain (?akuBku80) and microscopic phenotypic evaluation and sensibility tests against stressors (antifungal agents, apoptosis, ionic, nitrosative, oxidative, and cell wall stress promoters). The gene deletion did not interfere on the fungus conidiophore structure but increase its sensibility to some compounds (calcoflúor white and menadione). Virulence tests in animal model using the ?cipC mutant were done and they showed that the deletion of this gene attenuates the fungus virulence. In conclusion, the carbonic anhydrases are not relevant to development and virulence of the fungus, which modifies the gene expression to adapt to the variations of atmospheric CO2 concentration. Besides, the cipC gene seems to be involved in this adaptation process. Moreover, the cipC gene showed to be important to the development of the fungus and its virulence, which makes the gene a target for the study of new therapies for the treatment of invasive aspergillosis.

A proteção ambiental dos recursos geológicos é uma questão com crescente interesse. A exploração de cavernas é uma das formas de turismo associada a recursos geológicos mais difundida. Por isso, deve-se conhecer suas características ambientais, tais como os climáticas, para definir estratégias de gestão e conservação ambiental associadas a seu uso turístico. Assim, o objetivo geral da pesquisa é detectar as principais alterações microclimáticas ocorridas no ambiente cavernícola em decorrência das visitas turísticas no interior das grutas do PEI, SP. Como objetivos específicos, definiu-se: caracterizar o microclima do ambiente de caverna em condições naturais e elencar características físicas da cavidade que influenciem em seu microclima. A metodologia consistiu na coleta de dados de temperatura e umidade relativa do ar de nove cavidades com registradores autônomos. Também foram registrados os valores de CO2. A variação dos atributos do clima foi analisada em situação natural e na presença de visitantes. Os resultados mostram que o microclima das cavernas tende à estabilidade dos valores de temperatura do ar e apresentam umidade relativa do ar e concentração de gás carbônico elevada. Cavernas com rios caudalosos e claraboias não apresentam impacto em sua atmosfera decorrente do turismo, pois as trocas gasosas com o meio externo são facilitadas. Nas grutas secas e afóticas, com entradas e corredores estreitos, o microclima tende à estabilidade, estando mais sujeito a impactos, especialmente elevações na temperatura do ar. O uso de carbureteira também gera acréscimos significativos nas concentrações de gás carbônico. / The ambient protection of the geologic resources is a question with increasing interest. The caves exploration is one of the geological tourism forms more spread out. Therefore, the characteristics of its ambient must be known, such as the climatic ones, to define strategies of management and ambient conservation associates with its tourist use. Thus, the general objective of this research is to detect the main microclimatic alterations in the cave environment in result of the tourist visits in the interior of grottos of PEI, SP. As specific objective, it was purposed to characterize the cave microclimate in natural conditions and to detect the physics characteristics of the caves that influence in its microclimate. The methodology consisted in collect data of temperature and relative humidity of the air of nine caves with automatic sensors. Also the values of carbonic gas had been registered. The variation of the climatic attributes was analyzed in natural situation and in presence of visitors. The results show that the caves microclimate tends to have stability values of air temperature and present high values of air relative humidity and carbonic gas concentration. Caves with rivers of great volume and skylights do not present impact in its atmosphere, even in the presence or tourists, because the gaseous exchanges with the external way are facilitated. In dry and dark grottos, with narrow entrances and corridors, the microclimate tends to stability, being subject to impacts, especially rises in the air temperature.

Introdução: As estatinas são drogas amplamente utilizadas na prevenção primária e secundária de doenças cardiovasculares, por reduzirem o nível de colesterol. Porém alguns pacientes podem apresentar elevação da creatinofosfoquinase (CPK) e sintomas musculares relacionados ao seu uso. Além da CPK, outros marcadores de dano muscular podem apresentar alterações. Este estudo analisou a concentração dos marcadores bioquímicos, CKMB e anidrase carbônica III (CAIII) e sua relação com a presença de miosite. Métodos: Foram selecionados pacientes em tratamento com estatinas e com elevação da CPK. Foram realizadas as determinações de CKMB e CAIII e analisadas as variáveis clínicas e laboratoriais destes pacientes. Resultados: Cerca de 10% dos pacientes em tratamento com estatina apresentaram elevações de CPK acima 1x o limite superior de normalidade (LSN). Desses, 50,4% apresentaram sintomas musculares, definido como miosite. O uso de sinvastatina [OR=2,24 (IC95%:1,47-3,42)], o índice de massa corpórea > 28 Kg/m2 [OR=1,06 (IC95%: 1,01-1,10)] e a CKMB > 1xLSN [OR=1,59 (IC95%: 1,02-2,49)] apresentaram-se como preditores independentes para a ocorrência de miosite. A CKMB aumentada foi observada em 36,2% dos pacientes (7,17±4,4 ng/mL). Os pacientes com e sem miosite apresentaram valores semelhantes de CAIII (211,3±93,4pg/mL vs 204,0±84,6pg/mL; p=0,549). Pacientes diabéticos apresentaram elevações significantes de CKMB em relação aos não diabéticos (4,8±4,6ng/mL vs 3,5±2,4ng/mL; p=0,0006) e não apresentaram diferenças quanto à presença de miosite. Conclusão: A CKMB apresentou alteração em parte dos pacientes tratados com estatinas e foi um preditor independente para a presença de miosite. A CAIII não foi considerada um bom marcador de dano muscular na população deste estudo / Introduction: Statins are drugs widely used in primary and secondary prevention of cardiovascular diseases, due to the decreasing effect on cholesterol level. However, some patients may present elevated levels of creatine phosphokinase (CK) and muscle symptoms related to statin use. In addition to CK, other markers of muscle damage may present changes. This study analyzed the concentration of biochemical markers, CKMB and carbonic anhydrase III (CAIII) and related them to the presence of myositis. Methods: Patients on statin therapy and CK elevation were selected. CKMB and (CAIII) assays were performed and the clinical and laboratory variables of these patients were analyzed. Results: About 10% of the patients receiving statin therapy (6692) presented CK elevations above 1x upper reference limit (URL). Muscular symptoms, defined as myositis, were presented in 50.4% of these patients. Use of simvastatin [OR=2,24 (IC95%:1,47-3,42)], a body mass index > 28 kg / m2 [OR = 1.06 (95% CI: 1.01-1, 10)] and a concentration of CKMB > 1x URL [OR = 1.59 (95% CI: 1.02-2.49)] presented as independent predictors for the occurrence of myositis. Increased CKMB was observed in 36.2% of patients (7.17 ± 4.4 ng / mL). Patients with and without myositis had similar CAIII values (211.3 ± 93.4pg / mL vs 204.0 ± 84.6pg / mL, p = 0.549). Diabetic patients showed significant elevations of CKMB compared to non-diabetic patients (4.8 ± 4.6 ng / mL vs. 3.5 ± 2.4 ng / mL, p = 0.0006) and did not present differences regarding the presence of myositis. Conclusion: CKMB level changed in part of the patients treated with statins and this enzyme was an independent predictor for the presence of myositis. CAIII was not considered a good marker of muscle damage in the studied population

Made available in DSpace on 2016-12-23T14:04:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gabriel Hector Fontana.pdf: 3326725 bytes, checksum: 0537b69671db327278e7294ee7cfec00 (MD5) Previous issue date: 2012-12-03 / Monitoring water quality in the inner Continental Shelf (CS) has shown to be costly when conventional methods are employed. Orbital Remote Sensing appears as an alternative tool to monitoring important variables such as sea surface temperature (SST) and suspended sediment concentration (SSC). This study aims at assessing spatial distribution of SST and SSC in the continental shelf area of the Brazilian State of Espírito Santo using, respectively, Band 2 (0.569μm) and Band 6 (11.435μm) data from Thematic Mapper (TM) sensor on board of satellite Landsat 5. Thus, a data bank was built out of 127 images pre-processed and registered by the TM sensor. Of these 127 images, only 4 were selected for SST and SSC analyses. During image pre-processing, geometric and reflectance corrections are made. Geometric correction is carried out based on a second image orthorectified so that there is correct georeferencing. Reflectance correction is performed using an atmospheric compensation model. Through this model, sea surface reflectance is obtained. SST is estimated based on the adjustment of Brightness Temperature (BT) derived from Band 6 with data from the Multi-scale Ultra-high Resolution Sea Surface Temperature (MURSST). In case of not enough sediment field data to carry out curve adjustment, SSC calculation is performed using the empirical logarithm algorithm proposed by Tassan (1987), which uses Band 2 data. The corrected reflectance spectrum is compared to TOA reflectance spectrum. The corrected spectrum complied with the literature on natural targets analyzed: cloud, vegetation, water and water with sediments. Landsat BT adjustment with SST of MURSST showed to be significant, according to statistical F-test and to r2 = 0.87. Results of the 4 scenes for SST and SSC fields. For winter SST, a more homogeneous temperature of ~23ºC is observed, whereas the summer scene is characterized by thermal contrasts between the area closer to the coast (~21ºC) and the area further from the coast (~26ºC). Further, hotspot plumes associated to the mouths of Jucu and Doce Rivers and Espírito Santo Bay are also verified. For the SSC fields, higher-concentration plumes are observed, which are advected southeast. The highest concentrations are associated to the Doce River (over 60 mg/L). SSC values comply with the values reported in the relevant literature, i.e. close to the coastal line, in the summer scene, values of ~15mg/L were verified. On the other hand, for autumn and winter scenes, these values are about ~35mg/L. Both atmospheric correction and SSC distribution values found in this study are according to the data and studies reported in the relevant literature. Therefore, we can conclude that the method employed showed to be functional to process the data gathered in this study / O monitoramento da qualidade da água nas regiões internas à Plataforma Continental (PC) apresenta-se dispendioso quando são usados métodos convencionais. O Sensoriamento Remoto Orbital apresenta-se como uma ferramenta alternativa ao monitoramento de variáveis importantes como a Temperatura da Superfície do Mar (TSM) e a Concentração de Sedimentos em Suspensão (CSS). Este trabalho tem como objetivo avaliar a distribuição espacial da TSM e da CSS na região da PC capixaba usando, respectivamente, os dados da Banda 2 (0,569μm) e da Banda 6 (11,435μm) do sensor Thematic Mapper (TM) abordo do satélite Landsat 5. Sendo assim, é construído um banco de dados a partir de 127 imagens pré-processadas e registradas pelo sensor TM, e destas imagens, 4 foram selecionadas para a análise dos campos de TSM e CSS. No pré-processamento é realizada a correção geométrica e a correção da reflectância. A correção geométrica é realizada tomando como referência uma segunda imagem ortoretificada para que haja um correto georreferenciamento. A correção da reflectância é feita utilizando um modelo de compensação atmosférica, e através desse modelo é obtida a reflectância superficial da água do mar. A TSM é estimada a partir do ajuste da Temperatura de Brilho (TB) derivada da Banda 6 com os dados do produto Multi-scale Ultra-high Resolution Sea Surface Temperature (MURSST). Na falta de dados de campo de sedimento para realizar o ajuste de curva, o cálculo da CSS é feito utilizando o algoritmo logarítmico empírico proposto por Tassan (1987) que usa os dados da Banda 2. O espectro da reflectância corrigida é comparado com o espectro da reflectância TOA. O espectro corrigido mostrou-se condizente com o da literatura para os alvos naturais analisados: nuvem, vegetação, água e água com sedimento. O ajuste da TB do Landsat com a TSM do MURSST apresentou-se significante, segundo a Estatística teste F e com um r2 = 0,87. Os resultados das 4 cenas para os campos de TSM e CSS. Para a TSM de inverno observa-se uma distribuição de temperatura mais homogênea de ~23ºC, enquanto a cena de verão é caracterizada por contrates térmicos entre a região junto da costa (~21ºC) e a região mais afastada (~26ºC). Além disso, verificam-se plumas térmicas associadas às desembocaduras de rios, Jucu e Doce, e à Baía do Espírito Santo. Para os campos de CSS são observadas plumas de maior concentração sendo advectadas para sudoeste, sendo as maiores concentrações associadas ao Rio Doce, acima de 60 mg/L. Os valores de CSS apresentam-se em concordância com os valores reportados na literatura, de forma que, próximo à linha de costa, na cena de verão, são observados valores de~15mg/L. Já para cenas de outono e inverno os valores são entorno de ~35mg/L. Ambos os resultados, de correção atmosférica e de distribuição da CSS, apresentam-se em conformidade com os dados e trabalhos da literatura e portanto, concluiu-se que o método utilizado se mostrou funcional para o processamento dos dados deste trabalho

Com o objetivo de se estudar os efeitos do enriquecimento com CO2 sobre as características fisiológicas da cultura da batateira e a sua influência na produtividade e qualidade dos tubérculos, foi conduzida a pesquisa em condições de campo na área experimental da Fazenda Areão pertencente ao Departamento de Engenharia Rural da Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz” - USP, localizado no município de Piracicaba - São Paulo. Foram conduzidos dois experimentos. No primeiro, trabalhou-se com o cultivar Itararé e as concentrações de CO2 foram: T1=0 (sem aplicação de CO2); T2= 205,20; T3= 279,36; T4= 353,52; e T5= 427,68 Kg ha -1 de CO2. Os parâmetros avaliados foram: número de folhas (NF), número de estolões (NE), área foliar (AF), índice de área foliar (IAF), número de tubérculos (NT), massa seca da parte aérea (MSPA), massa seca de raízes (MSR), massa seca de tubérculos (MST), relação parte aérea/raízes, produção de batata, teor de matéria seca (TMS) e teor de sólidos solúveis totais (TSST). O delineamento estatístico para os parâmetros avaliados durante o desenvolvimento fisiológico foi de parcelas subdivididas no tempo; o delineamento utilizado para análise da produção foi de blocos ao acaso. Já no experimento II, trabalhou-se com os cultivares Atlantic, Jatte-Bintje e Monalisa e as concentrações de CO2 foram: T1= 0, T2=145,36 e T3=290,72 kg ha -1 . Os parâmetros avaliados foram os mesmos que no experimento I e também: pH do solo, pH da polpa, acidez titulável (AT), firmeza da polpa (FP), TSST, cor da polpa (CP), TMS, teor de açúcares redutores (TAR) e amido dos tubérculos. O delineamento estatístico para os parâmetros avaliados durante o desenvolvimento fisiológico foi o de análise de regressão múltipla, enquanto o delineamento utilizado para análise da produção, pH da polpa, AT, FP, TSST, CP, TMS, AR e amido foi de blocos ao acaso, com arranjo fatorial 3 x 3. Do experimento I conclui-se que o cultivar Itararé não apresentou variação de produtividade total com o aumento das doses de CO2; mais de 50% da produção comercial do cultivar Itararé foi classificada como classe especial independente das doses de CO2; o TSST nos tubérculos do cultivar Itararé decresceram com o aumento das doses de CO2. Do experimento II conclui-se que a produtividade total de batata dos cultivares Atlantic, Jatte-Bintje e Monalisa diminuiu com doses crescentes de CO2; o cultivar Monalisa apresentou maior produtividade do que os cultivares Jatte-Bintje e Atlantic, respectivamente, independente das doses de CO2; a aplicação de CO2 nos cultivares Atlantic, Jatte-Bintje e Monalisa não alterou significati vamente a acidez, o TSST e o TMS dos tubérculos. Entretanto, os tubérculos dos cultivares Monalisa e Atlantic perderam firmeza, e o cv. Jatte-Bintje não sofreu impacto do tratamento. Os cultivares Atlantic e Jatte-Bintje apresentaram variação do teor de amido com a aplicação de CO2. Além disso, houve aumento de TAR no cultivar Jatte-Bintje com a aplicação do tratamento. / With the objective to study the effects with CO2 enrichment on the physiological characteristics of potatoes and its influence in the productivity and quality of the tubers, this research was carried out in field conditions at the experimental area “Fazenda Areão” of the Department of Rural Engineering of the “Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz – Universidade de São Paulo”, in Piracicaba, São Paulo State, Brazil. Two experiments was carried out. In the experiment 1 with cultivar Itararé the CO2 levels were: T1=0 (without application of CO2) T2 = 205,20; T3 = 279,36; T4 = 353,52; and T5 = 427,68 kg ha -1 . The appraised parameters were: leaves number, stolons number, area foliate, index of the area foliate, tubers number, dry mass of the aerial part, dry mass of the roots, dry mass of the tubers, aerial/roots ratio, potato productivity, content of dry matter, content of soluble solids. The statistical design was of split-splot in the time for the appraised parameters during the physiologic development and randomized blocks for the analysis of the productivity. In the experiment 2, with Atlantic, Jatte-Bintje and Monalisa cultivars; the CO2 levels were: T1 = 0, T2=145,36 and T3=290,72 kg ha -1 . The appraised parameters were the same ones that in the experiment 1, including the soil pH, pulp pH, acidity, firmness of the pulp, the content of soluble solids, color of the pulp, content of dry matter, reducers sugars and starch of the tubers. The design statistical was analysis of multiple regression for the appraised parameters during the physiologic development and randomized block design with factorial arrangement 3 x 3 for the analysis productivity, pulp pH, acidity, pulp firmness, content of soluble solids, pulp color, content of dry matter, reducers sugars and starch of the tubers. From the experiment 1 it was concluded that cultivar Itararé did not present variation of total productivity with the increase of the CO2 levels; more than 50% of the commercial production of the Itararé cultivar was classified as special class independent of the CO2 levels; content of soluble solids in the tubers of the Itararé cultivar decreased with the increase of the CO2 levels. From the experiment 2 it was concluded that the total productivity of potato in Atlantic, Jatte-Bintje and Monalisa cultivars decreased with increasing of the CO2 levels; Monalisa cultivar presented larger productivity than Jatte-Bintje and Atlantic cultivars, respectively, independent of the CO2 levels; Atlantic cultivar presented larger percentage of tubers of special class than the Monalisa and Jatte-Bintje cultivars, respectively, independent of the amount of applied CO2; the application of CO2 in Atlantic, Jatte-Bintje and Monalisa cultivars did not alter the acidity significantly and the content of soluble solids and the content of dry matter of the tubers. However, the tubers of the Monalisa and Atlantic cultivars lost firmness and the Jatte-Bintje cultivar did not suffer impact of the treatment; the Atlantic and Jatte-Bintje cultivars ranged the content of starch with the application of CO2. Besides, the content of reducers sugars in Jatte-Bintje cultivar increased with the treatment application.

Com o objetivo de se estudar os efeitos do enriquecimento com CO2 sobre as características fisiológicas da cultura da batateira e a sua influência na produtividade e qualidade dos tubérculos, foi conduzida a pesquisa em condições de campo na área experimental da Fazenda Areão pertencente ao Departamento de Engenharia Rural da Escola Superior de Agricultura "Luiz de Queiroz" - USP, localizado no município de Piracicaba - São Paulo. Foram conduzidos dois experimentos. No primeiro, trabalhou-se com o cultivar Itararé e as concentrações de CO2 foram: T1=0 (sem aplicação de CO2); T2= 205,20; T3= 279,36; T4= 353,52; e T5= 427,68 Kg ha -1 de CO2. Os parâmetros avaliados foram: número de folhas (NF), número de estolões (NE), área foliar (AF), índice de área foliar (IAF), número de tubérculos (NT), massa seca da parte aérea (MSPA), massa seca de raízes (MSR), massa seca de tubérculos (MST), relação parte aérea/raízes, produção de batata, teor de matéria seca (TMS) e teor de sólidos solúveis totais (TSST). O delineamento estatístico para os parâmetros avaliados durante o desenvolvimento fisiológico foi de parcelas subdivididas no tempo; o delineamento utilizado para análise da produção foi de blocos ao acaso. Já no experimento II, trabalhou-se com os cultivares Atlantic, Jatte-Bintje e Monalisa e as concentrações de CO2 foram: T1= 0, T2=145,36 e T3=290,72 kg ha -1 . Os parâmetros avaliados foram os mesmos que no experimento I e também: pH do solo, pH da polpa, acidez titulável (AT), firmeza da polpa (FP), TSST, cor da polpa (CP), TMS, teor de açúcares redutores (TAR) e amido dos tubérculos. O delineamento estatístico para os parâmetros avaliados durante o desenvolvimento fisiológico foi o de análise de regressão múltipla, enquanto o delineamento utilizado para análise da produção, pH da polpa, AT, FP, TSST, CP, TMS, AR e amido foi de blocos ao acaso, com arranjo fatorial 3 x 3. Do experimento I conclui-se que o cultivar Itararé não apresentou variação de produtividade total com o aumento das doses de CO2; mais de 50% da produção comercial do cultivar Itararé foi classificada como classe especial independente das doses de CO2; o TSST nos tubérculos do cultivar Itararé decresceram com o aumento das doses de CO2. Do experimento II conclui-se que a produtividade total de batata dos cultivares Atlantic, Jatte-Bintje e Monalisa diminuiu com doses crescentes de CO2; o cultivar Monalisa apresentou maior produtividade do que os cultivares Jatte-Bintje e Atlantic, respectivamente, independente das doses de CO2; a aplicação de CO2 nos cultivares Atlantic, Jatte-Bintje e Monalisa não alterou significati vamente a acidez, o TSST e o TMS dos tubérculos. Entretanto, os tubérculos dos cultivares Monalisa e Atlantic perderam firmeza, e o cv. Jatte-Bintje não sofreu impacto do tratamento. Os cultivares Atlantic e Jatte-Bintje apresentaram variação do teor de amido com a aplicação de CO2. Além disso, houve aumento de TAR no cultivar Jatte-Bintje com a aplicação do tratamento. / With the objective to study the effects with CO2 enrichment on the physiological characteristics of potatoes and its influence in the productivity and quality of the tubers, this research was carried out in field conditions at the experimental area "Fazenda Areão" of the Department of Rural Engineering of the "Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz - Universidade de São Paulo", in Piracicaba, São Paulo State, Brazil. Two experiments was carried out. In the experiment 1 with cultivar Itararé the CO2 levels were: T1=0 (without application of CO2) T2 = 205,20; T3 = 279,36; T4 = 353,52; and T5 = 427,68 kg ha -1 . The appraised parameters were: leaves number, stolons number, area foliate, index of the area foliate, tubers number, dry mass of the aerial part, dry mass of the roots, dry mass of the tubers, aerial/roots ratio, potato productivity, content of dry matter, content of soluble solids. The statistical design was of split-splot in the time for the appraised parameters during the physiologic development and randomized blocks for the analysis of the productivity. In the experiment 2, with Atlantic, Jatte-Bintje and Monalisa cultivars; the CO2 levels were: T1 = 0, T2=145,36 and T3=290,72 kg ha -1 . The appraised parameters were the same ones that in the experiment 1, including the soil pH, pulp pH, acidity, firmness of the pulp, the content of soluble solids, color of the pulp, content of dry matter, reducers sugars and starch of the tubers. The design statistical was analysis of multiple regression for the appraised parameters during the physiologic development and randomized block design with factorial arrangement 3 x 3 for the analysis productivity, pulp pH, acidity, pulp firmness, content of soluble solids, pulp color, content of dry matter, reducers sugars and starch of the tubers. From the experiment 1 it was concluded that cultivar Itararé did not present variation of total productivity with the increase of the CO2 levels; more than 50% of the commercial production of the Itararé cultivar was classified as special class independent of the CO2 levels; content of soluble solids in the tubers of the Itararé cultivar decreased with the increase of the CO2 levels. From the experiment 2 it was concluded that the total productivity of potato in Atlantic, Jatte-Bintje and Monalisa cultivars decreased with increasing of the CO2 levels; Monalisa cultivar presented larger productivity than Jatte-Bintje and Atlantic cultivars, respectively, independent of the CO2 levels; Atlantic cultivar presented larger percentage of tubers of special class than the Monalisa and Jatte-Bintje cultivars, respectively, independent of the amount of applied CO2; the application of CO2 in Atlantic, Jatte-Bintje and Monalisa cultivars did not alter the acidity significantly and the content of soluble solids and the content of dry matter of the tubers. However, the tubers of the Monalisa and Atlantic cultivars lost firmness and the Jatte-Bintje cultivar did not suffer impact of the treatment; the Atlantic and Jatte-Bintje cultivars ranged the content of starch with the application of CO2. Besides, the content of reducers sugars in Jatte-Bintje cultivar increased with the treatment application.

Les objectifs de ce travail étaient d’approfondir les connaissances sur les capacités d’adaptation des diatomées à différentes concentrations de CO2 et plus précisément sur l’implication des CCM dans l’assimilation du carbone minéral dissous. Des études sur la physiologie, les enzymes de différentes voies métaboliques et des analyses de transcriptomique et de protéomique ont été réalisées. Nous avons observé que les espèces de diatomées étudiées étaient capables de réguler leurs systèmes de concentration du carbone minéral suivant les conditions environnementales. Certaines semblent utiliser préférentiellement le CO2 ou le bicarbonate tandis que d’autres espèces utilisent les deux. L’activité des anhydrases carbonique est fortement induite en faible concentration de CO2. Nos travaux montrent cependant, que l’activité de cette enzyme est variable d’une espèce à l’autre. Nous avons aussi observé que dans la majorité des diatomées que nous avons étudiées, la photosynthèse de type C3 et non de type C4 est présente, apportant ainsi un éclairage à une véritable controverse sur le métabolisme du carbone chez les diatomées. Nos travaux soulignent de plus, une grande diversité de stratégies de CCM chez les diatomées. Chez T. pseudonana, une nouvelle protéine, LCIP63, a été observée en conditions de faible concentration de CO2. Son rôle physiologique est actuellement inconnu ouvrant de nouvelles perspectives de recherche. / The objectives of this work were to improve the knowledge on ability of diatoms to scope with different CO2 concentrations and to study their carbon concentrating mechanisms (CCM). Studies of their physiology, their metabolic enzymes, and analyses at transcriptomic and proteomic levels were performed. In all studied diatoms, the CCMs can be regulated according to CO2 availability in the environment. Some diatoms seem to use preferentially CO2, others, bicarbonate and some can use both. The carbonic anhydrase (CA) activity is strongly induced when cells were grown at low vs high CO2. However, our work shows that CA activity is highly variable among the different diatoms. Most of the studied diatoms perform a C3 photosynthesis and not C4 photosynthesis. In diatoms, there is a huge diversity in the CCM strategy. A new protein, LCIP63, was observed when T. pseudonana was grown under low CO2. The physiological role of this protein is yet unknown and this finding opens new research perspectives.

The aim of this study is to provide knowledge about how preschoolers discuss about carbon dioxide bubbles and its buoyancy. To answer the study´s questions, three focus groups with a total of twelve children and six group interviews with a total of eight children, have been used as a method. In the implementation of the focus groups and the group interviews, the experiment dancing raisins was used. The experiment was used as a concrete material to make the carbonic acid visible to the children. A social constructivist perspective has been used during the analyzes of the data. From the keywords that emerged during the analysis, nine categories have been identified and divided to answer the questions of the study. The result shows that when the children were to describe the carbonic acid, they used the words bubbles and bubble water. Only one child said the word gas, but none of the children used the word carbonic acid. The result also shows that the children in the study have previous experiences that the appearance and characteristics of objects affect whether they float or sink. The result shows that the children mainly used everyday concepts and lack scientific concepts when describing the phenomenon. The result of the study can contribute to a developed chemistry teaching in the preschool, by letting preschool teachers know what words children use to describe a phenomenon and thus adapt the chemistry content of the preschool.