Submitted by Edileide Reis (leyde-landy@hotmail.com) on 2015-04-08T21:24:34Z No. of bitstreams: 1 Márcia Sacramento Cunha Machado.pdf: 2145514 bytes, checksum: 5c4ac4862de6cc6c8841617df08590b4 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-08T21:24:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Márcia Sacramento Cunha Machado.pdf: 2145514 bytes, checksum: 5c4ac4862de6cc6c8841617df08590b4 (MD5) Previous issue date: 2011 / A incidência de doenças sexualmente transmissíveis (DST) vem aumentando em todo o mundo, especialmente entre adolescentes. Entretanto, poucos estudos foram realizados no Brasil para abordar este tema. Com o objetivo de estimar a prevalência, identificar a etiologia e possíveis fatores associados para DST na adolescência, foi realizado um estudo transversal. Cem adolescentes sexualmente ativas do sexo feminino foram avaliadas em Salvador, Bahia entre 2008 e 2010. Foram realizados exames citológicos, microbiológicos, PCR da secreção cervico-vaginal para Chlamydia trachomatis e HPV, testes sorológicos para sífilis, Herpes simplex vírus I/II (IgG e IgM), AgHBs, anti-HBc e anti-HBs, para hepatite B; anti-HCV, para hepatite C; HTLV I/II e HIV. A idade média das adolescentes foi de 16,6 + 1,6 anos. A prevalência de DST foi de 90%. O HPV representou principal etiologia (88%), seguido de Chlamydia trachomatis (31%). Quatro pacientes (4%) apresentaram positividade para herpes simples vírus IgM e uma adolescente apresentou Trichomonas vaginalis. Co-infecção foi observada em 30% dos casos. Nenhuma paciente foi encontrada com infecção por hepatite B ou C, HIV, HTLV e sífilis. Conclusão: A prevalência de doenças sexualmente transmissíveis foi elevada entre as adolescentes avaliadas. Os resultados reforçam a situação de risco e a necessidade de políticas públicas voltadas para esta população específica. Além disso, técnicas para o diagnóstico molecular de DST, especialmente para HPV e Chlamydia trachomatis, devem ser disponibilizadas no SUS, sobretudo na adolescência, possibilitando a identificação do risco para câncer de colo uterino.

Infecções por Chlamydia trachomatis estão entre as mais freqüentes doenças sexualmente transmissíveis (DST) em todo o mundo, apresentando grande importância epidemiológica. A identificação deste patógeno pode ser difícil e um método de detecção baseado na amplificação de ácidos nucleicos é altamente desejável, por sua acurácia e rapidez. O presente estudo avaliou a acurácia, sensibilidade e especificidade de uma reação em cadeia da polimerase (PCR) in “house” em amostras de urina de homens com e sem sintomas de DST comparados a um teste comercial, o COBAS Amplicor CT/NG (Roche, Suiça). Foram utilizados primers específicos para amplificar um segmento do plasmídio críptico de C. trachomatis gerando um fragmento de 201 pb, cuja seqüência foi confirmada por clivagem enzimática e seqüenciamento automático. A especificidade analítica dos primers foi confirmada frente ao DNA de diferentes microrganismos patogênicos e não patogênicos da microbiota urogenital masculina. A detecção limite do DNA clamidial pela PCR in house após hibridização (Southern blot), foi de 1 pg. O COBAS Amplicor CT/NG foi considerado o teste de referência por ser automatizado e conter um programa de controle interno da reação para identificar inibição da DNA polimerase. Entre as 37 amostras testadas positivas para C. trachomatis pelo COBAS Amplicor, 33 foram confirmadas positivas pela PCR in house. Foram detectados inibidores da reação nas 4 amostras que apresentaram resultados falso-negativos, utilizando-se a técnica de contaminação da reação com o DNA clamidial (spiked) e um controle interno da reação com primers que amplificam a β-globina do DNA humano. Após congelamento e descongelamento para eliminar prováveis substâncias inibidoras lábeis, as 4 amostras foram re-testadas, resultando na positividade de mais 2 amostras, completando 35 amostras positivas pela PCR in house. Entre as 74 amostras testadas negativas para C. trachomatis pelo COBAS Amplicor, 72 foram confirmadas negativas pela PCR in house. Das 2 amostras prováveis falso-positivas, apenas 1 permaneceu positiva, após re-teste. Dos 111 pacientes analisados, 108 apresentaram resultados idênticos nos dois testes, o equivalente a uma acurácia = 97,3%, sensibilidade = 94,6% e especificidade = 98,6%. A alta sensibilidade e especificidade apresentada pela PCR in house, demonstra a possibilidade de triar e diagnosticar C. trachomatis em urina de homens, importante reservatório da infecção clamidial para as mulheres. / Chlamydia trachomatis infections are among the most commum sexually transmitted diseases and of great epidemiological importance world-wide. Identification of this pathogen can be difficult, and it is highly desirable to have a rapid and accurate nucleic acid amplification based detection method. The present study was designe to evaluate the accuracy, sensitivity and specificity of a in house plasmid-based polymerase chain reaction (PCR) and hybridization on first void urine specimens from symptomatic and asymptomatic men, compared with a commercial test the PCR COBAS Amplicor CT/NG (Roche, Switzerland), for detection of C. trachomatis (CT). Specific primers for the cryptic plasmid of C. trachomatis were designed to amplify a 201 bp fragment confirmed by enzymatic cleavage and automatic sequencing. The analytic specificity was determined by submitting to the intended protocol, the DNA of normal and pathogenic urogenital microbiota, the specific primers anneling was confirmed. The detection limit of the PCR and the Southern blot hibridization, was mesured in 1 pg of chlamydial DNA. The COBAS Amplicor CT/NG was considered the reference test, it contains a internal control (IC) programme to identify DNA polymerase inhibition. Among 37 positive specimens tested by COBAS Amplicor, 33 were confirmed positive by in house PCR and inhibitors of PCR were demonstrated in the 4 possibly false-negative samples performing DNA chlamydial spiking experiments and using a positive internal control of human β-globin DNA. The specimens were freezedthowed and re-tested to remove labile inhibitors, but 2 samples remained negative. Among 74 negative specimens by COBAS Amplicor, 72 were confirmed negative by in house PCR. The 2 problaby false-positive samples were re-tested and just one remained positive. The final results of the two tests were identical for 108 of the 111 pacients, accuracy = 97,3% ; sensitivity = 94,6% and specificity = 98,6%. This study shows that the in house plasmid-based PCR is fasible for detection of Chlamydia trachomatis in male urine specimens. This test presented high accuracy, sensitivity and specificity, offering great potencial for the screening of men, an important reservoir of infection chlamydial for women.

A Chlamydia trachomatis (Ct) à a bactÃria de transmissÃo sexual mais comum em todo o mundo, apesar de existirem poucos dados sobre este agravo na populaÃÃo brasileira. O objetivo da pesquisa foi determinar a prevalÃncia da infecÃÃo por Ct, avaliando os fatores sÃciodemogrÃficos e achados clÃnicos, colposcÃpicos e citopatolÃgicos associados à ocorrÃncia desta infecÃÃo em mulheres jovens na periferia de Fortaleza. Foi realizado um estudo de corte transversal em 200 mulheres sexualmente ativas, com idade entre 12 e 25 anos, atendidas no perÃodo de agosto de 2011 a agosto de 2012, no ambulatÃrio de ginecologia geral do Hospital Distrital Gonzaga Mota â Barra do CearÃ. InformaÃÃes pessoais e dados do exame ginecolÃgico foram anotados em um questionÃrio e as pacientes submeteram-se à coleta de material da endocÃrvice para teste de captura hÃbrida II para Chlamydia trachomatis e para citologia oncÃtica convencional, seguido de colposcopia. Os dados foram analisados utilizando o software Graphpad Prism 5.0, procedendo-se a anÃlise descritiva e analÃtica utilizando o teste t de Student para as variÃveis nominais e o teste exato de Fisher para as variÃveis quantitativas. A prevalÃncia da infecÃÃo por Chlamydia trachomatis foi 15,5% (31/200) em mulheres adolescentes e adultas jovens. NÃo foi encontrada associaÃÃo entre a infecÃÃo estudada e as caracterÃsticas sÃciodemogrÃficas, hÃbitos sexuais, sinais e sintomas questionados, ectopia cilÃndrica e alteraÃÃes colposcÃpicas. Dentre as atipias citolÃgicas, o ASC-US esteve presente em 20,7% dos casos e 4,5% dos controles (p=0,0067, RR=3,452, IC=1,72-6,89), mostrando uma associaÃÃo positiva com a infecÃÃo clamidiana. A G. vaginalis foi encontrada em 54.8% das pacientes infectadas e em 30,7% das pacientes negativas (p=0,0133, RR=2,305. IC=1,21-4,39), mostrando uma relaÃÃo com a infecÃÃo estudada. Concluiu-se que a infecÃÃo por C. trachomatis teve uma prevalÃncia alta na populaÃÃo estudada, que nÃo houve associaÃÃo com fatores de risco sÃcio-demogrÃfico, biolÃgico, com achados clÃnicos e/ou colposcÃpicos. Houve associaÃÃo de ASC-US e G. vaginalis na citologia oncÃtica com a infecÃÃo estudada. / Chlamydia trachomatis (Ct) is the most common bacterial sexually transmitted infection worldwide, but there are few published dates about it in Brazil. The aim of this study was to determinate the prevalence of Chlamydia trachomatis infection and to assess the socialdemographic behavioral, clinical and cytopathological factors associated with this infection among adolescents and young women in a low-income area of Fortaleza - Brazil. A cross-sectional study was conducted in 200 sexually active women aged 12 to 25 years, from august 2011 to august 2012, in gynecology outpatient clinic of the General Hospital District Gonzaga Mota - Barra do CearÃ. Personal information and date of gynecogical examination were recorded in a questionnaire and the patients underwent collection of material from the endocervix to hybrid capture test for C. trachomatis and Pap test, followed by colposcopy. Data were analyzed using Graphpad Prism 5.0 software, proceeding to descriptive and analytical analysis using the Student t test for nominal variables and the Fisher exact test for quantitative variables. No association was found between infection and studied the socio-demographic characteristics, sexual habits, signs and symptoms questioned, cylindrical ectropion and colposcopic changes.Among the abnormal cytological atypia, ASC-US was presented in 20,7% of cases and 4,5% of controls (p=0,0067, RR=3,452, IC=1,72-6,89), with a positive association with the infection. G. vaginalis morphotype was identified in 54,8% of infected women and 30,7% of negative patients (p=0,0133, RR=2,305. IC=1,21-4,39), showing a relationship with the infection. It was concluded that infection with C. trachomatis had a high prevalence in the population studied, no association was observed with socio-demographic, biological and clinical findings and colposcopic changes. There was association of ASC-US and G. vaginalis in cytology with the infection studied.

Infecções por Chlamydia trachomatis estão entre as mais freqüentes doenças sexualmente transmissíveis (DST) em todo o mundo, apresentando grande importância epidemiológica. A identificação deste patógeno pode ser difícil e um método de detecção baseado na amplificação de ácidos nucleicos é altamente desejável, por sua acurácia e rapidez. O presente estudo avaliou a acurácia, sensibilidade e especificidade de uma reação em cadeia da polimerase (PCR) in “house” em amostras de urina de homens com e sem sintomas de DST comparados a um teste comercial, o COBAS Amplicor CT/NG (Roche, Suiça). Foram utilizados primers específicos para amplificar um segmento do plasmídio críptico de C. trachomatis gerando um fragmento de 201 pb, cuja seqüência foi confirmada por clivagem enzimática e seqüenciamento automático. A especificidade analítica dos primers foi confirmada frente ao DNA de diferentes microrganismos patogênicos e não patogênicos da microbiota urogenital masculina. A detecção limite do DNA clamidial pela PCR in house após hibridização (Southern blot), foi de 1 pg. O COBAS Amplicor CT/NG foi considerado o teste de referência por ser automatizado e conter um programa de controle interno da reação para identificar inibição da DNA polimerase. Entre as 37 amostras testadas positivas para C. trachomatis pelo COBAS Amplicor, 33 foram confirmadas positivas pela PCR in house. Foram detectados inibidores da reação nas 4 amostras que apresentaram resultados falso-negativos, utilizando-se a técnica de contaminação da reação com o DNA clamidial (spiked) e um controle interno da reação com primers que amplificam a β-globina do DNA humano. Após congelamento e descongelamento para eliminar prováveis substâncias inibidoras lábeis, as 4 amostras foram re-testadas, resultando na positividade de mais 2 amostras, completando 35 amostras positivas pela PCR in house. Entre as 74 amostras testadas negativas para C. trachomatis pelo COBAS Amplicor, 72 foram confirmadas negativas pela PCR in house. Das 2 amostras prováveis falso-positivas, apenas 1 permaneceu positiva, após re-teste. Dos 111 pacientes analisados, 108 apresentaram resultados idênticos nos dois testes, o equivalente a uma acurácia = 97,3%, sensibilidade = 94,6% e especificidade = 98,6%. A alta sensibilidade e especificidade apresentada pela PCR in house, demonstra a possibilidade de triar e diagnosticar C. trachomatis em urina de homens, importante reservatório da infecção clamidial para as mulheres. / Chlamydia trachomatis infections are among the most commum sexually transmitted diseases and of great epidemiological importance world-wide. Identification of this pathogen can be difficult, and it is highly desirable to have a rapid and accurate nucleic acid amplification based detection method. The present study was designe to evaluate the accuracy, sensitivity and specificity of a in house plasmid-based polymerase chain reaction (PCR) and hybridization on first void urine specimens from symptomatic and asymptomatic men, compared with a commercial test the PCR COBAS Amplicor CT/NG (Roche, Switzerland), for detection of C. trachomatis (CT). Specific primers for the cryptic plasmid of C. trachomatis were designed to amplify a 201 bp fragment confirmed by enzymatic cleavage and automatic sequencing. The analytic specificity was determined by submitting to the intended protocol, the DNA of normal and pathogenic urogenital microbiota, the specific primers anneling was confirmed. The detection limit of the PCR and the Southern blot hibridization, was mesured in 1 pg of chlamydial DNA. The COBAS Amplicor CT/NG was considered the reference test, it contains a internal control (IC) programme to identify DNA polymerase inhibition. Among 37 positive specimens tested by COBAS Amplicor, 33 were confirmed positive by in house PCR and inhibitors of PCR were demonstrated in the 4 possibly false-negative samples performing DNA chlamydial spiking experiments and using a positive internal control of human β-globin DNA. The specimens were freezedthowed and re-tested to remove labile inhibitors, but 2 samples remained negative. Among 74 negative specimens by COBAS Amplicor, 72 were confirmed negative by in house PCR. The 2 problaby false-positive samples were re-tested and just one remained positive. The final results of the two tests were identical for 108 of the 111 pacients, accuracy = 97,3% ; sensitivity = 94,6% and specificity = 98,6%. This study shows that the in house plasmid-based PCR is fasible for detection of Chlamydia trachomatis in male urine specimens. This test presented high accuracy, sensitivity and specificity, offering great potencial for the screening of men, an important reservoir of infection chlamydial for women.

Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-03-11T13:27:51Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Keilla Maria Silva.pdf: 4228154 bytes, checksum: ea3da547f9bdeacfacd07ad7ced6d809 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-11T13:27:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Keilla Maria Silva.pdf: 4228154 bytes, checksum: ea3da547f9bdeacfacd07ad7ced6d809 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014-02-25 / CNPq / O Papilomavírus Humano (HPV) é um agente sexualmente transmissível que se destaca por infectar o trato anogenital, e devido à sua associação etiológica com uma grande variedade de carcinomas, encontra-se entre as mais importantes infecções sexualmente transmissíveis (IST) da atualidade. Acredita-se que a presença do vírus da imunodeficiência humana (HIV) e da Chlamydia trachomatis parecem favorecer a infectividade viral, proporcionando o surgimento de lesões que podem levar ao câncer. Desta forma, o presente trabalho teve por objetivo avaliar os genótipos do HPV presentes em amostras cervicais e anais, correlacionando com a infecção por Chlamydia trachomatis. Realizou-se um estudo incluindo 73 mulheres com idade entre 17 e 65 anos, atendidas no Hospital das Clínicas de Pernambuco (HC/UFPE) entre novembro de 2010 e fevereiro de 2013. As amostras foram obtidas e a extração do DNA foi realizada através de kits específicos. Posteriormente, os genótipos do HPV foram determinados pelo PapilloCheck® (GreinerBio-One) e a identificação da Chlamydia trachomatis por PCR em Tempo-Real. A prevalência do HPV no canal anal foi de 83,6%, estando associado com história de intercurso anal (p=0.0295) e infecção por HIV (p=0.0104). Infecção múltipla por HPV foi observada em 50,8% das pacientes, sendo o HPV44 o mais comum. Nos grupos HIV-positivo e HIV-negativo, o genótipo de alto risco mais frequente foi o HPV16, enquanto que HPV44 e o HPV43 foram os genótipos de baixo risco mais encontrados, respectivamente. A taxa de concordância entre os genótipos de HPV cervical e anal chegou a 52%. Apenas um paciente apresentou infecção por Chlamydia trachomatis em canal anal. Os resultados sugerem que o canal anal pode ter participação na infecção cervical funcionando como reservatório do vírus. Desta forma, o rastreamento dessas pacientes no serviço público de saúde pode favorecer um diagnóstico precoce, auxiliando os médicos no acompanhamento e prevenindo a evolução da infecção, principalmente em pacientes HIV-positivas.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2018-05-25T12:56:00Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1186028 bytes, checksum: 22a128dd3187d1676fa8c422340d4483 (MD5) / Approved for entry into archive by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2018-05-25T12:56:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1186028 bytes, checksum: 22a128dd3187d1676fa8c422340d4483 (MD5) / Approved for entry into archive by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2018-05-25T12:56:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1186028 bytes, checksum: 22a128dd3187d1676fa8c422340d4483 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-25T12:56:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1186028 bytes, checksum: 22a128dd3187d1676fa8c422340d4483 (MD5) Previous issue date: 2017 / Algumas infecções vaginais, como as vaginoses e a infecção por C. Trachomatis, foram associadas ao desenvolvimento de hipertrofia cervical e metaplasia escamosa, indicando uma possível relação com o HPV no desenvolvimento das NICs e carcinoma escamoso do colo uterino. Há na literatura alguns estudos sobre o assunto, ainda sem um consenso definitivo. Nesse sentido, este estudo teve como objetivo investigar a presença de C. trachomatis, N. gonorrhoeae e do papilomavírus humano e suas relações com as lesões cervicais em amostras de citologia cervical, casos e controles, obtidas no ambulatório de ginecologia, do Centro de Especialidades Médicas da Santa Casa de Belo Horizonte. A detecção e genotipagem do HPV, além da detecção da C. trachomatis e N. gonorrhoeaea foram realizadas pela técnica de PCR. Das 186 amostras obtidas, 79 eram o grupo controle e 107 eram do grupo dos casos, portadoras de lesão cervical (38 baixo grau,44 alto grau e 25 CCE). A prevalência de HPV foi 67,7%, da clamídia 19,9% e da gonorreia 3,6%. Os genótipos do HPV mais encontrados foram o HPV 16, 59 e 45. A infecção por mais de um genótipo viral teve associação positiva com a presença de lesões cervicais em geral, e especificamente com lesões de alto grau e câncer. Não houve associação com lesões de baixo grau. As infecções por clamídia e gonorréia, mesmo em associação com HPV, não resultaram em aumento de alterações cervicais. A infecção por N. gonorrhoeaea teve 100% de coinfecção com C.trachomatis, com OR de 5,8 (p<0,0001, 95% IC 4,21-7,99). / Some vaginal infections, such as vaginosis and chlamydia, have been associated with the development of cervical hypertrophy and squamous metaplasia, indicating a possible relationship with HPV in the development of CINs and squamous carcinoma of the cervix. There are some studies in the literature on the subject, still without a definitive consensus. The objective of this study was to investigate the presence of chlamydia trachomatis, neisseria gonorrhoeae and human papillomavirus and their relationship with cervical lesions in cervical cytology samples, cases and controls obtained from Santa Casa Medical Center in Belo Horizonte. HPV detection and genotyping in addition to the detection of C. trachomatis and N. gonorrhoeae were performed by the PCR technique. Of the 186 samples obtained, 79 were the control group and 107 were from the group of cases, with cervical lesions (38 low grade, 44 high grade and 25 CEC). The prevalence of HPV was 67.7%, chlamydia 19.9% and gonorrhea 3.6%. The most common HPV genotypes were HPV 16, 59 and 45. Infection with more than one viral genotype was positively associated with the presence of cervical lesions in general, and specifically with high grade lesions and cancer. There was no association with low grade lesions. Chlamydia and gonorrhea infections, even in association with HPV, did not result in increased cervical changes. N. gonorrhoeaea infection had 100% coinfection with C.trachomatis, with OR of 5.8 (p <0.0001, 95% CI 4.21-7.99). / Não foi apresentado título em inglês. Não foi localizado o cpf do autor.

Background: Chlamydia screening is an international strategy used to reduce rates of infection in a target population. This thesis set out to explore the behaviour of young people against the principles of this government strategy for infection control and self-empowerment. The work was set in County Durham and Darlington where I led a service for improved awareness and screening for Chlamydia for young people aged 15 – 24 years. Aims: This research was based on interviews with Chlamydia screening service users in order to understand the factors that influenced their risk taking behaviours and to generate theory for public health practice. An analysis of outcomes from a large sample of over 20,000 subjects and observations of young people in settings where Chlamydia testing and advice was available gave context and background to this study. Findings Chlamydia screening was used as a strategy to offset risk taking that enabled young people to continue behaviours that they valued. This finding is a new and unexpected contribution to Chlamydia screening literature, and also supports the developing theory of edgework. Knowledge and awareness of Chlamydia did not change as a result of screening activities, and this did not have a major influence on preventative behaviour. The national messages that one in 10 young people are infected, and that infection is easily detected and managed, was interpreted by some that nine in 10 young people were not infected, and that this was not a significant health threat. Incentives were found to significantly increase screening uptake although this did not lead to a change in risk taking. There was an increased likelihood to have sex with the perception of knowing a partner, although this was not necessarily based upon factual information. Most participants demonstrated lethal patterns of alcohol consumption that commonly led to sexual encounters and all those who stated that they were aware of safe drinking limits demonstrated lethal patterns of alcohol consumption. All participants with a positive test result had a negative result within the previous year suggesting no change in risk taking following screening, and although all participants said that they would modify their behaviour in the future, when they were probed all stated that this would not happen giving reasons such failure to moderate alcohol use. Conclusion: These findings led me to conclude that risk taking in relation to health and potential disease is a normal process in the development of young people. Young people value risk taking activities for promoting self-identity and supporting emotional and social well-being. Public health interventions need to consider the developmental needs of young people using an asset based approach in order to provide interventions that address the causes of risk taking behaviours.

Abstract Chlamydia pneumoniae is an obligate intracellular gram-negative bacterium, which causes respiratory infections in humans and may participate in the development of chronic diseases like atherosclerosis, chronic obstructive lung disease, adult-onset asthma and late-onset Alzheimer’s disease. It can infect various cell types, e.g. vascular endothelial cells, smooth muscle cells and monocyte-derived macrophages in vitro. It has been speculated that circulating macrophages disseminate the infection in the body, and that genetically susceptible individuals become chronically infected. Quantification of C. pneumoniae growth inside cultured cells is needed when studying e.g. the effect of drugs or host cell factors on infectivity and replication. Conventionally this has been done by immunofluorescence staining and microscopic counting of chlamydial inclusions. However, this method is usable only if the cell numbers do not fluctuate in cell culture vials and the inclusions are uniform. In macrophages, inclusions are often aberrant, their sizes vary and multiple inclusions are also seen. Therefore we developed a new method based on the real-time PCR quantification of chlamydial genomes adjusted to the number of human genomes and used it to quantify the exact amounts of C. pneumoniae in infected cells. The susceptibility of monocyte-macrophages from healthy individuals to C. pneumoniae infection in vitro was studied first. Intracellular growth of C. pneumoniae was used as an indicator of susceptibility to infection, and it was compared to serum levels of CRP, soluble CD14, human HSP-IgG, human HSP-IgA, C. pneumoniae IgG and IgA antibodies. The growth of C. pneumoniae in infected macrophages was highly variable, ranging from 0 to 638 chlamydial genomes per human genome. C. pneumoniae growth associated positively with serum C. pneumoniae IgA (titer ≥10) and hHSP-IgG and negatively with soluble CD14 concentration. The association between chlamydial IgA antibodies, hHSP-IgG and C. pneumoniae growth was statistically significant only among men. Age did not correlate with the growth. Therefore we hypothesize that persons whose macrophages cannot restrict the growth of C. pneumoniae are more prone to chronic infection by this agent. In the next study, we evaluated the effects of innate immunity genes CD14 -260 C>T, TLR2 Arg753Gln, TLR4 Asp299Gly, LBP Phe436Leu and IL-6 -174 G>C polymorphisms on C. pneumoniae growth in human macrophages in vitro. The growth of C. pneumoniae was highest in CD14 -260 C>T TT genotype cells and the difference to CC or CT genotype was statistically significant. The G-allele of the IL6 -174 G>C polymorphism had a positive influence on chlamydial growth; the difference was statistically significant only between CC and GC genotypes. TLR2 Arg753Gln, TLR4 Asp299Gly, LBP Phe436Leu polymorphisms showed no effect on chlamydial growth.

No description available.

Purpose of Review: To emphasize key gaps in knowledge impacting efforts to control single infection and co-infections with Chlamydia trachomatis (CT) and Neisseria gonorrhoeae (NG), the most common bacterial sexually transmitted infections (STIs) worldwide. Recent Findings: Clinical and epidemiological studies describe gaps in understanding about female rectal CT infection, screening effectiveness, pelvic inflammatory disease, and influence of the microbiome. For NG, gaps in knowledge include factors increasing incidence in men who have sex with men, correlations between treatment and antibiotic resistance, the role of pharyngeal infection, and microbiome influence. CT/NG co-infections are poorly understood, and adequate models to explore pathophysiological consequences of co-infection urgently needed. The sole existing CT/NG co-infection mouse model showed that CT/NG interactions in vivo modulate host response and NG load/shedding—encouraging further consideration of this model and potential alternatives. Summary: We stress key challenges in controlling these important STIs. Appropriate, quality-assured animal models are essential to improve understanding of the pathogenic interplay in CT/NG co-infections.