Neste trabalho, foi realizado um estudo crítico dos modelos metodológicos in vivo e in vitro sobre a avaliação microbiológica da clorexidina empregada como agente irrigante e medicação intracanal na terapia endodôntica. Para tanto, foi realizada uma busca sistemática nas bases de dados: Medline, Lilacs e BBO nos últimos dez anos sobre o assunto em questão. Foram selecionados os trabalhos que avaliaram a clorexidina de uma maneira não combinada com outras substâncias ou fármacos, abordando sua utilização tanto como irrigante endodôntico, e como medicação intracanal. Para uma melhor análise, os trabalhos foram agrupados de acordo com a forma de uso e metodologia com seus dados tabulados, respectivamente: Clorexidina como irrigante in vitro, Clorexidina como irrigante in vivo, Clorexidina como medicação intracanal in vitro e Clorexidina como medicação intracanal in vivo. Na análise, pode-se observar a efetividade antimicrobiana da clorexidina como irrigante nos ensaios laboratoriais e clínicos, sendo nas formas de gel e líquida com variação na concentração de 0.2 a 2%. Quanto o uso da clorexidina como medicação intracanal, pode ser constatada sua atividade antimicrobiana em ambos ambientes experimentais, embora com poucos trabalhos in vivo, seu desempenho foi observado apresentando largo espectro de ação quando utilizada a 2% em gel por um período de sete dias. / In this essay, it was realized a critical study of the methodological models, in vivo and in vitro, about the microbiological assessment of the chlorhexidine employed as root canal irrigants and dressing in the Endodontics. A systematic search was carried out on the databases: Medline, Lilacs and BBO from the last ten years concerning the respective subject. There were selected the papers which evaluated the chlorhexedine as an individual group, without joined to another substances or drugs, broaching its application as root canal irrigants as much as dressing. For improved analyzed, the investigations were divided according its way of use and methodology, with its data tabulated in the respective way: Chlorhexidine as irrigant in vitro, Chlorhexidine as irrigant in vivo, Chlorhexidine as intracanal dressing in vitro and Chlorhexidine as intracanal dressing in vivo. At the analysis, it can be observed the antimicrobial effectiveness of the chlorhexidine as irrigant in the clinical and laboratories tests, being the gel and liquid form with concentration changed from 0.2 to 2%. About the chlorhexidine as root canal dressing, it can be evidenced its antimicrobial activity in both experimental methods, although a few trials in vivo, its performance was observed showing a large spectral action when used in 2% gel for a period of seven days.

Introdução: Os efeitos antimicrobianos de óleos essenciais têm sido relatados na literatura científica, sobretudo referentes ao óleo essencial de Melaleuca alternifolia, também denominado óleo essencial de Tea Tree (OTT). Tal óleo essencial apresenta propriedades antissépticas e pode representar uma alternativa de um produto natural para higienização das mãos (HM) nos estabelecimentos de assistência à saúde que atualmente utilizam predominantemente produtos à base de triclosan e clorexidina. Objetivo: Avaliar a eficácia antimicrobiana na higiene das mãos realizada com três diferentes formulações de sabonetes líquidos distintos, contendo: óleo essencial de Melaleuca alternifolia a 2,0%; sabonete com triclosan a 0,5%; sabonete com clorexidina a 2,0%, bem como compreender de que forma o uso de um sabonete com óleo essencial na higienização das mãos na prática assistencial é percebido por profissionais de saúde. Métodos: Para o experimento (etapa quantitativa) foram utilizadas as diretrizes da metodologia do Comitê Europeu de Padronização, EN1499 versão abril 2013 (phase2/step2), indicada para avaliar a eficácia de antissépticos para higienização das mãos. Foram contaminadas artificialmente as mãos de 15 voluntários sadios com Escherichia coli K12, seguida pela lavagem das mãos utilizando-se cada um dos produtos em avaliação ou um sabão de referência (soft soap). Realizou-se a contagem do número de microrganismos antes (pré-valores) e após (pós-valores) cada procedimento e foi estabelecida a redução logarítmica microbiana para cada um dos participantes em cada procedimento. Os dados foram analisados aplicando-se dois testes não paramétricos. Para a obtenção dos dados qualiquantitativos realizaram-se entrevistas cujos discursos foram analisados conforme metodologia proposta pelo discurso do sujeito coletivo (DSC). Resultados: ao ser aplicado o Teste de Wilcoxon, os três sabonetes testados obtiveram resultados superiores ao do sabão de referência (soft soap) e foram considerados antimicrobianos; constatou-se ainda a superioridade do sabonete contendo OTT e contendo triclosan em relação ao sabonete com clorexidina. Quando aplicado o Teste de Friedman, os sabonetes contendo triclosan e OTT, que apresentaram eficácias equivalentes, podem ser considerados antimicrobianos. A maior parte dos profissionais tinha algum conhecimento sobre Aromaterapia (65,21%), mas menos da metade conhecia as aplicações do OTT (43,47%). Profissionais mais jovens e menos experientes acharam o aroma do OTT agradável ou forte, mas não desagradável. Profissionais mais experientes e com mais idade o associaram ao aroma de pinho e levantaram a questão de o aroma ser incômodo para alérgicos. As principais diferenças observadas entre o sabonete com OTT e os demais sabonetes da prática assistencial foram em relação a aspectos físicos, como textura mais agradável, ao aroma e ao fato de ser menos agressivo à pele. A não agressão à pele foi considerada pelos participantes como o grande diferencial do sabonete contendo OTT, sobrepondo-se, inclusive, ao fator aroma, e que poderia contribuir para aumentar a adesão à HM. Conclusão: os sabonetes contendo OTT 2,0% e contendo triclosan 0,5% demonstraram desempenho superior em relação à clorexidina 2,0%. O não ressecamento da pele por produtos de HM é fundamental para aumentar a adesão dos profissionais de saúde. Além disso, a presença do aroma no sabonete pode ou não ser um fator de estímulo. / Introduction: The antimicrobial effects of essential oils have been reported in the scientific literature, especially regarding the essential oil of Melaleuca alternifolia, also known as tea tree essential oil (TTO). This essential oil has antiseptic properties and can represent a natural-product alternative for hand hygiene (HH) in health-care settings, which currently use mainly products based on triclosan and chlorhexidine. Objective: To evaluate the antimicrobial efficacy in HH performed using three distinct liquid soap formulations containing 2.0% Melaleuca alternifolia essential oil; 0.5% triclosan; 2.0% chlorhexidine and assess how using a soap with essential oil for HH in healthcare practice is perceived by health professionals. Methods: For the experiment (quantitative phase) we used the methodology guidelines of the European Committee for Standardization, EN1499 version April 2013 (phase2/step2), indicated to evaluate the efficacy of antiseptics for HH. The hands of 15 healthy volunteers were artificially contaminated with Escherichia coli K12 and then the hands were washed with each of the products being assessed or the reference soap (soft soap). The number of microorganisms was counted before (pre-values) and after (post-values) each procedure and microbial logarithmic reduction was performed for each of the participants in each procedure. Data were analyzed using two non-parametric tests. To obtain the qualiquantitative data, interviews were carried out, of which contents were analyzed according to the methodology proposed by the Collective Subject Discourse (CSD). Results: When the Wilcoxon test was applied, the three assessed soaps showed better results than the reference soap (soft soap) and were considered as exhibiting antimicrobial action; the soaps containing TTO and triclosan showed to be superior to the one containing chlorhexidine. When Friedmans test was applied, the soaps containing triclosan and TTO, which showed similar efficacy, were considered antimicrobials. Most of the professionals had some knowledge of aromatherapy (65.21%), but less than half knew about TTO uses (43.47%). Younger and less experienced professionals found the smell of TTO pleasant or strong, but not unpleasant. Older and more experienced professionals associated it to the smell of pine and raised the question of the smell being displeasing for allergic individuals. The main differences between the TTO soap and the other soaps used in health care practice were related to the physical aspects, such as a more pleasant texture, smell and the fact of its being less aggressive to the skin. The fact that it was less aggressive to the skin was perceived by participants as the great differential of the soap containing TTO, overriding even the scent factor, which could help to increase adherence to HH. Conclusion: The soaps containing 2.0% TTO and 0.5% triclosan showed superior performance when compared to the one with 2.0% chlorhexidine. The fact that a soap used in HH does not dry the skin is considered a critical point for adherence by health care professionals. Additionally, the soap smell may or may not be a stimulating factor for HH.

Como a clorexidina (CHX) tem sido recomendada como solução irrigadora de canais radiculares e como curativo de demora, o objetivo do presente estudo foi caracterizar in vivo a lesão induzida pela injeção de CHX a 0,125, 0,25, 0,5 e 1,0% na pata de camundongos em intervalos de tempo selecionados (24 e 48 horas e 7 e 14 dias) e in vitro o modo e a causa morte celular (necrose e/ou apoptose) e o estresse causado pela exposição de fibroblastos L929 em cultura a concentrações crescentes da droga (0,000125, 0,00025, 0,0005, 0,001, 0,002, 0,004, 0,008 e 0,016%) por 24 horas. A proliferação celular foi avaliada por meio da incorporação de metil-3H-timidina ao DNA das células e imunomarcação para PCNA. A ultraestrutura foi analisada em microscópio eletrônico de transmissão e de varredura e o citoesqueleto das células por meio de marcação para actina e α-tubulina. Citometria de fluxo (Anexina-V FITC/iodeto de propídeo) foi empregada para diferenciar células necróticas de apoptóticas. Também, foi efetuada marcação para retículo endoplasmático, Bcl-2 (B-célula CLL/linfoma 2), Hsp70 (proteína de choque térmico 70) e Grp78 (glucose-regulated protein 78). Quando injetada no espaço subplantar da pata traseira de camundongos, a CHX induziu alterações necróticas na epiderme, derme e tecido subcutâneo em associação com uma resposta inflamatória reacional, particularmente nas concentrações mais elevadas. Em cultura de fibroblastos, a CHX induziu a diminuição da proliferação celular, causou morte celular por apoptose e necrose, desestruturação do citoesqueleto, alteração da morfologia celular, aumento da área das células, dilatação do retículo endoplasmático rugoso e acúmulo de proteínas nas cisternas. Além disso, a CHX causou aumento da expressão de Hsp70, de Grp78 (indicadores de estresse celular) e de Bcl-2 (proteína anti-apoptótica). Em conclusão, a CHX injetada no espaço subplantar da pata traseira de camundongos induz efeitos tóxicos severos. Além disso, a CHX adicionada em cultura de fibroblastos causou estresse do retículo endoplasmático como consequência do acúmulo de proteínas nas cisternas e induziu a morte celular por necrose e apoptose via estresse do retículo endoplasmático, além de causar estresse celular. Os resultados sugerem que a CHX poderia ter um efeito desfavorável na resolução de lesões periapicais em decorrência de sua ação tóxica sobre as células do tecido em torno do ápice dentário. / Because chlorhexidine (CHX) has been recommended as either endodontic irrigant or root canal dressing, this study aimed to characterize in vivo the lesion induced by injection of CHX at concentrations of 0.125, 0.25, 0.5 and 1.0% in the paw of mice at selected time intervals (24 and 48 hours and 7 and 14 days) and in vitro the mode and the cause of cell death (necrosis and /or apoptosis), and the cellular stress caused by exposition of cultured L929 fibroblasts to ascending concentrations of the drug ( 0.000125, 0.00025, 0.0005, 0.001, 0.002, 0.004, 0.008 and 0.016%) for 24 hours. The cell proliferation assay was performed by measuring incorporation of metil-3H-thymidine to cell DNA and immunocytochemical staining analysis of PCNA. The cell ultrastructure was analyzed in transmission and scanning electron microscopes and the cell cytoskeleton by florescence analysis of actin and α- tubulin. Apoptosis and necrosis were discriminated by flow cytometry with annexin V-FITC and PI. In addition endoplasmic reticulum, Bcl-2 (B-cell CLL/lymphoma 2), Hsp70 (heat shock protein 70) and Grp78 (glucoseregulated protein 78) were detected by fluorescence. CHX injected in the sub plantar space of the hind paw of mice induced necrotic changes in the epidermis, dermis and subcutaneous tissue in association with reactive inflammatory response, particularly at higher concentrations. In cultured fibroblasts, CHX decreased cellular proliferation, caused cell death by apoptosis and necrosis, disruption of the cytoskeleton, morphological cellular alterations, increased cells size (area), rough endoplasmic reticulum dilatation with accumulation of cysternal protein. In addition, CHX induced increased expression of Hsp 70, Grp78 (indicators of cellular stress) and Bcl-2 (anti-apoptotic protein). It was concluded that CHX injected in the sub plantar space of the hind paw of mice could induce severe toxic effect. In addition CHX caused endoplasmic reticulum stress as a consequence of accumulation of proteins in the endoplasmic reticulum cysterns and induced cell death by apoptosis and necrosis via endoplasmic reticulum stress and caused cellular stress. Taken together, these findings suggest that CHX may have an unfavorable effect on the resolution of apical periodontitis, due a toxic effect on the periapical tissue cells.

O sistema de saúde é desafiado diariamente por complicações infecciosas relacionadas à assistência, que constituem grave problema de saúde pública mundial, aumentando a morbidade e a mortalidade dos pacientes assistidos e elevando os custos hospitalares. O Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA), endêmico em várias instituições de saúde no mundo, é um dos principais agentes etiológicos de infecção relacionada à assistência à saúde. A colonização é um importante fator na patogênese das infecções causadas pelo MRSA, elevando o risco de uma infecção em portadores nasais desta bactéria. Além disso, sabe-se que pacientes colonizados ou infectados representam um importante reservatório desta bactéria. Atualmente, a descolonização dos portadores de MRSA é uma medida recomendada para o controle da disseminação desta bactéria. A mupirocina tem sido amplamente utilizada para a descolonização nasal, no entanto cepas de MRSA resistentes à mupirocina tem se tornado mais frequente na última década. Além disso, a formulação de mupirocina disponível no Brasil é inadequada para aplicação em mucosas, causando efeitos adversos intoleráveis. Uma vez que a sulfadiazina de prata é bastante ativa contra o MRSA in vitro, este estudo se propôs avaliar a efetividade da aplicação intranasal dessa substância para a descolonização de pacientes hospitalizados e colonizados por MRSA. Trata-se de um ensaio clínico randomizado, duplamente cego, controlado com placebo, cuja intervenção consistiu na terapia de descolonização nasal, com a aplicação intranasal de gel de sulfadiazina de prata a 1%, duas vezes por dia, associado a utilização de clorexidina degermante a 2% para o banho diário, por 5 dias consecutivos nos pacientes internados em um hospital terciário, com colonização nasal por MRSA, demonstrada por meio de cultura seletiva de swab nasal. O desfecho primário do estudo foi a identificação de swab nasal negativo para MRSA coletado imediatamente após o fim do tratamento. A comparação da taxa de descolonização nasal entre os grupos foi feita usando-se o teste do Qui quadrado, com correção de Person, e por meio de um modelo de regressão logística. Foram identificados 279 pacientes colonizados por MRSA, no entanto 156 apresentavam critérios de exclusão e 79 não estavam mais internados no momento da inclusão, sendo incluídos 44 pacientes. A mediana de idade dos incluídos foi de 57,5 anos. Após a randomização, restaram 22 pacientes em cada grupo. Oito pacientes não completaram o protocolo, e foram excluídos da análise. A descolonização nasal foi obtida em 10/16 pacientes (62,50%) no grupo controle e 10/20 (50,00%) no grupo experimental (p=0,453). A descolonização corporal global ocorreu em 8/16 (50,00%) no grupo controle e 9/20 (45,00%) no grupo experimental (p=0,765). Na análise multivariada, nenhuma das variáveis independentes incluídas, a saber sexo, idade, uso de sulfadiazina de prata, e uso de antimicrobianos sistêmicos com atividade anti-MRSA exibiu associação com o desfecho primário. Não houve diferença, entre os grupos, na incidência de infecções por MRSA após o término da terapia. Dois pacientes apresentaram irritação nasal no grupo experimental. De acordo com os nossos resultados, a sulfadiazina de prata a 1% não foi superior ao placebo para a descolonização de pacientes com colonização nasal por MRSA. / The health system is daily challenged by health-care associated infections, which constitute a global public health problem, increasing morbidity and mortality of assisted patients as well as hospital costs. The methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA), endemic in several facilities worldwide, is a major etiologic agent of health-care associated infections. MRSA colonization is a relevant risk factor in the pathogenesis of infections caused by MRSA. Moreover, it is known that colonized or infected patients represent an important reservoir of this pathogen. Currently, the decolonization of MRSA carriers is a recommended measure to control the spread of this pathogen. Mupirocin has been widely used for nasal decolonization, however MRSA strains resistant to mupirocin has become more common over the last decade. In addition, mupirocin formulation available in Brazil is inappropriate for application to mucosal causing intolerable side effects. Once silver sulfadiazine is active against MRSA in vitro, this study aimed to evaluate the effectiveness of intranasal application of this substance for decolonizing hospitalized patients harboring MRSA. This is a randomized, double-blind, placebo-controlled trial, which intervention consisted in intranasal application of silver sulfadiazine gel 1%, twice a day, associated with the use of chlorhexidine soap 2% for daily bath for 5 consecutive days in patients admitted to a tertiary hospital with nasal MRSA colonization, demonstrated by selective culture of nasal swab. The primary endpoint of the study was the identification of negative nasal swab for MRSA collected immediately after the end of treatment. Comparison of decolonization rate between groups was performed using Person\'s corrected chi square, and through a logistic regression model. From 279 patients colonized by MRSA identified, 156 met exclusion criteria and 79 were no longer in hospital at the time of inclusion, so 44 patients were included. The median age of those included was 57.5 years. After randomization, 22 patients remained in each group. Eight patients did not complete the protocol and were excluded from analysis. Nasal decolonization was achieved in 10/16 patients (62.50%) in the control group and 10/20 (50.00%) in the experimental group (p = 0.453). The global body decolonization occurred in 8/16 (50.00%) in the control group and 9/20 (45.00%) in the experimental group (p = 0.765). In multivariate analysis, none of the included independent variables, namely sex, age, use of silver sulfadiazine, and use of systemic antibiotics with anti-MRSA activity showed association with primary endpoint. There was no difference between groups in the incidence of MRSA infections after the end of therapy. Two patients had nasal irritation in the experimental group. According to our results, silver sulfadiazine 1% was not superior to placebo for decolonizing patients with nasal MRSA colonization.

Submitted by SBI Biblioteca Digital (sbi.bibliotecadigital@puc-campinas.edu.br) on 2017-02-21T18:17:11Z No. of bitstreams: 1 Diana Roberta Pereira Grandizoli.pdf: 22186247 bytes, checksum: eda73530f877f7998ed73ea7c0033e18 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-21T18:17:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Diana Roberta Pereira Grandizoli.pdf: 22186247 bytes, checksum: eda73530f877f7998ed73ea7c0033e18 (MD5) Previous issue date: 2016-12-19 / The present study sought to evaluate the influence of protease inhibitors on the bond strength of a self-etch adhesive system during hybrid layer formation in caries-affected dentin. The occlusal thirds of 80 permanent third molars were ground down to flat dentin surfaces. Dentinal caries were induced artificially by the microbial method. Groups were divided as follows: G1 (n=20), application of Clearfil SE Bond adhesive system (CL) alone; G2 (n=20), pretreatment with 2% chlorhexidine (CLX)+CL; G3 (n=20), pretreatment with sodium bicarbonate (BIC)+CL; G4 (n = 20), BI +CLX+CL. Bond strength was assessed immediately and at 6 months. Composite resin (Z350) build-ups were made on the dentin surfaces, and beam-shaped specimens with a cross-sectional area of 1 mm? were obtained. Microtensile bond strength testing was performed. Only adhesive or mixed-mode fractures were taken into account for calculation of bond strength. The results were submitted to the Kruskal-Wallis test (Student-Newman-Keuls). There was no significant difference on bond strength between the control, bicarbonate and chlorhexidine groups in the immediate test (p> 0.05). After 6 months, adhesive resistance fell for all groups. The control group had higher bond strength (p <0.05). The predominant fracture was of the adhesive type independent of the period evaluated. It can be concluded that after six months, there was decrease on bond strength for all groups. This reduction was greater in the groups in which the inhibitors were used / O objetivo desse trabalho foi avaliar a influ?ncia do bicarbonato de s?dio na resist?ncia adesiva durante a hibridiza??o da dentina cariada utilizando o sistema adesivo autocondicionante. Foram selecionados 80 terceiros molares permanentes, feita a remo??o do ter?o oclusal e superf?cies dentin?rias planas foram obtidas. A les?o de c?rie dentin?ria foi confeccionada atrav?s do m?todo microbiol?gico. Os grupos foram: G1 (n=20): aplica??o do sistema adesivo Clearfil (CL), G2 (n=20): aplica??o de clorexidina 2% (CLX) + CL, G3 (n=20): aplica??o de bicarbonato de s?dio (BI) + CL, G4 (n=20): BI + CLX + CL. A resist?ncia adesiva foi avaliada imediatamente e ap?s seis meses. Um bloco de resina composta Z350 foi constru?do em dentina. Cada bloco dente/adesivo/resina foi seccionado com disco diamantado acoplado ? m?quina de corte em planos paralelos obtendo-se corpos de prova em forma de palito, com ?rea de sec??o transversal de 1 mm?. Foi realizado teste de resist?ncia de uni?o por meio do teste de microtra??o. Foi considerada apenas fratura adesiva/mista para c?lculo da resist?ncia de uni?o. Os resultados foram submetidos aos teste de Kruskal-Wallis (Student-Newman-Keuls). N?o houve diferen?a significante na resist?ncia de uni?o entre os grupos controle, bicarbonato e clorexidina no teste imediato (p>0.05). Ap?s 6 meses, houve queda da resist?ncia adesiva para todos os grupos. O grupo controle apresentou maior resist?ncia de uni?o (p<0.05). A fratura predominante foi do tipo adesiva independente do per?odo avaliado. Pode-se concluir que ap?s seis meses, houve diminui??o na for?a de uni?o para todos os grupos. Essa redu??o apresentou-se maior nos grupos em que os inibidores foram utilizados.

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The aim of this study was to evaluate the influence of different endodontic irrigants on the cohesive and flexural strength of the root dentin. One hundred of bovine incisor roots were selected, instrumented and randomly divided into 10 experimental groups (n = 10), according to the irrigation solution used: Control - physiological solution; N1 - sodium hypochlorite 1.0%; N5 - sodium hypochlorite 5.25%; N1EDTA - sodium hypochlorite 1.0% associate to EDTA 17%; N5EDTA - sodium hypochlorite 5.25% associate to EDTA 17%; Sclx chlorhexidine gluconate solution 2.0%; Gclx - chlorhexidine gluconate gel 2.0%; SclxEDTA - chlorhexidine gluconate solution 2.0% associate to EDTA 17%; GclxEDTA - chlorhexidine gluconate gel 2.0% associate to EDTA 17% and EDTA - EDTA 17%. The roots were axially sectioned in two halves. Half of them were used for the microtensile cohesive strength test: six 1.0mm thick slices were trimmed to produce hourglass shaped samples with a test area of 1mm2. The other halves were used in a 3-point bend flexural strength by means of dentine bars with 1X1X12 mm. Each sample remained two hours in contact with the irrigant solutions, except for EDTA, which remained for five minutes. After irrigants treatment, samples were rinsed with distilled water, and tested. Specific devices for each test were used, in a universal testing machine with a load cell of 20Kgf, and a crosshead speed of 0.5 mm/minute. Date were recorded and statistically analyzed with one-way ANOVA and Tukey test. Significant reduction in the ultimate cohesive strength and flexural strength was verified only for the groups that used sodium hypochlorite irrespective of the concentration and additional solution, differing significant from the group control. The use of chlorhexidine and EDTA separately did not cause alteration in the mechanical properties of root dentine. / O objetivo desse estudo foi avaliar a influência de diferentes irrigantes endodônticos na resistência coesiva e flexural da dentina radicular. Cem raízes de incisivos bovinos foram selecionadas, instrumentadas e divididas aleatoriamente em 10 grupos experimentais (n= 10), de acordo com a substância irrigadora utilizada: Controle - solução fisiológica; N1 - hipoclorito de sódio a 1,0%; N5 - hipoclorito de sódio a 5,25% ; N1EDTA - hipoclorito de sódio a 1,0% associado à EDTA a 17%; N5EDTA - hipoclorito de sódio a 5,25% associado à EDTA a 17%; Sclx - solução de gluconato de clorexidina a 2,0%; Gclx - gel de gluconato clorexidina a 2,0%; SclxEDTA - solução de gluconato clorexidina 2,0% associado à EDTA a 17%; GclxEDTA - gel de gluconato clorexidina a 2,0% associado à EDTA a 17% e EDTA - EDTA a 17%. As raízes foram axialmente seccionadas em duas metades. Uma metade foi utilizada para ensaio de microtração, da qual foram obtidas seis fatias de 1,0mm de espessura que receberam constrições na face externa, determinando área de teste de 1mm2. A outra metade foi utilizada no ensaio de flexão de 3-pontos, da qual foi extraída uma barra de dentina com dimensões de 1X1X12 mm. Cada amostra permaneceu duas horas em contato com a substância irrigante endodôntica com exceção do EDTA, que atuou por cinco minutos. Após o tratamento com os irrigantes, procedeu-se a lavagem com água destilada, e em seguida executados os ensaios mecânicos. Foram utilizados dispositivos específicos para cada ensaio, acoplados à máquina de ensaio mecânico, utilizando célula de carga de 20Kgf, com velocidade de 0,5 mm/minuto até a fratura da amostra. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e teste Tukey. Verificou-se redução significativa na resistência máxima coesiva e flexural apenas para os grupos que empregaram o hipoclorito de sódio independe da concentração e associação com outra substância, diferindo estatisticamente do grupo controle. O uso de clorexidina e EDTA isoladamente não alterou as propriedades mecânicas da dentina radicular. / Mestre em Odontologia

O tratamento radioterápico para pacientes com neoplasias de cabeça e pescoço pode trazer consequências secundárias graves como alterações da estrutura dental, com conseguinte prejuízo da função oral, a qual influencia negativamente a qualidade de vida. Recentemente trabalhos de pesquisa tem demonstrado que a radiação induz a expressão e ativação das metaloproteinases da matriz (MMPs), consideradas as principais enzimas responsáveis pela remodelação da matriz orgânica, incluindo os componentes e estruturas da junção amelodentinária (JAD). Questiona-se então se as alterações dentais observadas em pacientes pós-radioterapia poderiam ser causadas também pela ativação das MMPs que se encontram na JAD. O presente estudo apresentou três avaliações: a ativação e expressão das MMPs, a implementação de inibidores de proteases como método de inibição das MMPs e a ativação das MMPs devido a um desafio ácido. Para as medições foram utilizados 178 fragmentos dentais de molares, divididos aleatoriamente em 2 grupos (decíduos e permanentes) / 4 subgrupos experimentais (irradiados e não-irradiados). Os fragmentos foram expostos à radiacao com Co-60, com fracao de dose de 2 Gy, 5 dias consecutivos, ate atingirem a dose total de 60 Gy, com um total de 30 ciclos, durante 6 semanas. Com o objetivo de determinar a expressão e atividade das MMPs, foram realizados os ensaios de imunofluorescência e zimografia in situ, nos fragmentos dentais de 0,6mm, analisando os tecidos duros do esmalte, dentina e JAD. Para avaliar se produtos odontológicos inativam as MMPs, os dentes foram imersos em 0,5ml de digluconato de clorexidina a 0,12%, fluoreto de sódio a 0,05%, polifenol epigalocatequina 3-galato 400&mu;M e água destilada (grupo controle), por 1 hora. Assim também com objetivo de avaliar se em um ambiente ácido, as MMPs apresentariam maior atividade, os dentes foram colocados em contato com 20&mu;l de solucao desmineralizadora com pH de 4,8, por um minuto, e posteriormente lavados com 20&mu;l de água deionizada, por um minuto. De maneira geral pudemos observar que a irradiação ativa as MMPs na JAD e estes efeitos foram mais evidentes nos dentes permanentes que nos decíduos. Com relação à expressão das diferentes MMPs, foi observada uma maior expressão das MMPs-9 e -20 para dentes decíduos, e para dentes permanentes as MMPs-2, -9 e -20 apresentaram expressão semelhante. Tendo em vista que a irradiação foi capaz de ativar as MMPs expressas na JAD de dentes permanentes, e em busca de soluções capazes de inibi-las, observamos que o Digluconato de Clorexidina, o Fluoreto de Sódio e o Polifenol Epigalocatequina 3-galato inibiram a atividade das MMPs na JAD em dentes permanentes. Por último ao investigar o efeito de um desafio ácido, na atividade das MMPs, observamos que a desmineralização não aumentou a atividade das MMPs em dentes não irradiados, porém aumentou a atividade das MMPs em dentes irradiados. Comparando dentes irradiados submetidos ou não à desmineralização, observou-se que a desmineralização incrementou a atividade das MMPs, já induzida pela irradiação. / Radiotherapy for patients with head and neck cancer can have serious secondary consequences such as changes in tooth structure, with consequent loss of oral function which negatively influences an individual\'s quality of life. Recently research work has shown that radiation induces the expression and activation of matrix metalloproteinases (MMPs) which are considered the major enzymes responsible for the remodeling of the organic matrix, including the components and structures of the dentinoenamel junction (DEJ). It is questionable if the dental changes observed in post-radiotherapy patients could also be caused by the activation of MMPs that are in the DEJ. The present study has three assessments: the activation and expression of MMPs, the implementation of protease inhibitors such as method of inactivating MMPs and the activation of MMPs due to an acid challenge. The measurements that were used were 178 molar dental fragments randomly divided into 2 groups (deciduous and permanent) / 4 experimental subgroups (irradiated and non-irradiated). The samples were exposed to radiation using Co-60 at a cumulative dose of 2 Gy fraction, 5 consecutive days, until they reached a total dose of 60 Gy, with a total of 30 cycles for 6 weeks. In order to determine the expression and activity of MMPs immunofluorescence assays were performed and in situ zymography, the dental fragments of 0.6mm, analyzing the DEJ in three areas of the tooth (cervical, cuspal and groove of pit). To assess whether MMPs inactivate dental products, the teeth were immersed in 0.5 ml of chlorhexidine digluconate at 0.12%, sodium fluoride 0.05%, polyphenol epigallocatechin-3 gallate 400&mu;M and distilled water (control group) for 1 hour. To evaluate effects in an acidic environment, MMPs have higher activity, the teeth were put in contact with 20&mu;l of demineralizing solution with pH 4.8, for a minute, and then washed with 20&mu;l of deionized water, one minute. In general we observed that the radiation active MMPs in DEJ and these effects were more evident in the permanent teeth than in the primary teeth. Regarding the expression of different MMPs, showed the greatest expression of MMP-9 and -20 for deciduous teeth, and permanent teeth MMPs-2, -9 and -20 showed similar expression. Given that the irradiation was able to activate MMPs expressed in the DEJ permanent teeth, and looking for solutions that inactive them, we observed that the digluconate Chlorhexidine, the Sodium Fluoride and Polyphenol Epigallocatechin-3-gallate inhibited activity of MMPs in the DEJ in permanent teeth. Finally, to investigate the effect of an acid challenge, in the activity of MMPs, we observed that the demineralization did not increase the activity of MMPs in non-irradiated teeth but increased the activity of MMPs in irradiated teeth. Comparing irradiated whether subjected to demineralization teeth or not, it was found that demineralization increased activity of MMPs, induced by the radiation.

Magister Chirurgiae Dentium - MChD (Oral Medicine and Periodontics) / The aim of this study was to assess whether a mouthwash containing carbohydrate derived fulvic acid, is effective in reducing the salivary microbial count pre-operatively. Endeavours have been made to reduce the risk of infection, bacteraemia and cross-contamination during dental procedures by the application of topical antimicrobial agents. To date chlorhexidine is the most widely evaluated and efficacious agent against oral biofilms but there have been reports of adverse effects ranging from contact dermatitis to severe anaphylactic shock. A new mouth rinse containing carbohydrate derived fulvic acid are reported to have broad spectrum antimicrobial activity against specific oral microbes and Candida albicans with no side effects.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A incorporação do diacetato de clorexidina em resinas macias para reembasamento de próteses pode se tornar uma boa alternativa na terapia com antimicrobianos usados para candidíase oral, uma vez que é independente da cooperação do paciente. Este trabalho teve como objetivo analisar a hipótese que a incorporação de diacetato de clorexidina em resinas macias não alteraria as suas propriedades físico-químicas. Foram analisadas duas resinas macias, uma à base de polimetilmetacrilato (PMMA) e outra à base de polietilmetacrilato (PEMA), com a incorporação de 0,5%, 1,0% e 2,0% de diacetato de clorexidina, além do grupo controle sem diacetato de clorexidina. Os espécimes foram armazenadas em água destilada a 37 durante 2hrs, 48 hrs, 7, 14, 21 e 28 dias e analisados quanto a cristalinidade do polímero através da difração de Raios X, a dureza mensurada com durômetro na escala shore A, o grau de conversão dos monômeros pela Espectroscopia de Infravermelho Transformada de Fourier (FTIR), a lixiviação de monômeros residuais e a liberação da clorexidina por Cromatografia Líquida de Alta Performace (HPLC). Os resultados mostraram que quanto à cristalinidade dos polímeros nas resinas macias à base de PMMA e de PEMA não alteraram após a incorporação de clorexidina, o que está relacionado à dureza Shore A, que aumentou ao longo do tempo, mas sem alteração significativa para nenhuma das concentrações de diacetato de clorexidina testadas. Já quanto ao grau de conversão, após a incorporação de clorexidina, a resina macia à base de PMMA não apresentou diferença estatisticamente significativa (&#1088;>0,05), porém a resina macia à base de PEMA apresentou diminuição significativa do grau de conversão (p<0,05), o que refletiu no aumento significativo da lixiviação de monômeros residuais nas concentrações 0,5% e 1,0% de clorexidina (p<0,05), principalmente nas primeiras 48 horas nessa resina. A resina macia à base de PMMA não apresentou alterações do padrão de lixiviação desses monômeros (&#1088;>0,05) e para ambas as resinas a cinética de liberação de clorexidina foi relacionada à lixiviação de monômeros residuais, que para a resina macia à base de PEMA foi maior significativamente nas primeiras 48 horas (p<0,05) e para a resina macia à base de PMMA não teve alteração estatisticamente significativa (&#1088;>0,05) se mantendo até o último dia de análise. Desse modo, conclui-se que a incorporação do diacetato de clorexidina não afetou a cristalinidade dos polímeros, inalterando a dureza nas duas resinas, porém o grau de conversão sofreu diminuição após a incorporação de diacetato de clorexidina na resina macia à base de PEMA, o que levou ao aumento da lixiviação de monômeros residuais e curta liberação de clorexidina; enquanto que a resina macia à base de PMMA, devido a não alteração significativa do seu grau de conversão, ocorreu menor lixiviação de monômeros residuais e liberação prolongada de clorexidina. / Chlorhexidine incorporation in soft denture liners can become a good antimicrobial treatment alternative for oral candidiasis, since it is independent of patient compliance. Considering this, the present study evaluate the hypothesis that chlorhexidine diacetate (CDA) incorporation in soft denture liners would not change their physical-chemical properties. For this, two soft resins were tested, one based on poly methylmethacrylate (PMMA) and the other based on poly ethylmethacrylate (PEMA), which received 0.5%, 1.0% and 2.0% of CDA incorporation, in addition to a control group without CDA. Specimens were stored in distilled water at 37 C during 2 hrs, 48 hrs, 7, 14, 21 and 28 days, then analyzed for polymer crystallinity through X-Ray diffraction, Shore A hardness measured with a durometer, degree of monomers conversion by Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), the leaching of residual monomers and release of CDA by high performance liquid chromatography (HPLC). Results showed that polymer crystallinity of PEMA and PMMA were not changed after CDA incorporation, this results is related to Shore A hardness, which increased over time, but not for any CDA concentrations tested. Considering the degree of monomers conversion, PMMA based resin did not present significant statistic difference (&#1088;>0.05), however the PEMA based resin had a significantly decrease on its degree of conversion (p<0.05), which was reflected in a significant increase of residual monomers leaching from PEMA based resin with 0.5% and 1.0% CDA incorporation (p<0.05), mainly in the firsts 48 hours. PMMA based resin had no alteration on its monomers leaching (&#1088;>0.05) and for both resins their CDA release kinetics was related to the monomers leaching, which for PEMA based resin was significantly greater in the first 48 hours (p<0.05) and for PMMA based resin was more sustained up to the last day of analysis. Thus, it is concluded that CDA incorporation do not affect polymers crystallinity and do not change their hardness, but the monomers conversion degree decrease for PEMA based resin, leading to an increase of residual monomers leaching and shorter CDA release, while for PMMA based resin, because of no change on their monomers conversion degree, there was less residual monomers leaching and prolonged CDA release.