Submitted by Allison Andrade (allisonandrade.13@hotmail.com) on 2016-03-21T15:26:37Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Andréa Monteiro Tarragô.pdf: 36367610 bytes, checksum: 9c4888659b80bc207673a93a896cbff5 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-03-29T18:22:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Andréa Monteiro Tarragô.pdf: 36367610 bytes, checksum: 9c4888659b80bc207673a93a896cbff5 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-03-29T18:36:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Andréa Monteiro Tarragô.pdf: 36367610 bytes, checksum: 9c4888659b80bc207673a93a896cbff5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-29T18:36:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Andréa Monteiro Tarragô.pdf: 36367610 bytes, checksum: 9c4888659b80bc207673a93a896cbff5 (MD5) Previous issue date: 2013-04-19 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Introduction: Hepatitis C is a public health problem that affects over 150 million people worldwide. It is a very variable disease prognosis that may progress to healing or the development of chronic hepatitis C, liver cirrhosis, hepatocellular carcinoma and death. Identification of polymorphic regions that influence the concentrations of cytokines is something that has been studied to justify the susceptibility of certain individuals in developing hepatitis C crônica. Objective: The aim of this study was to evaluate the influence of polymorphisms: IL28B (rs8103142), -308TNFα, -174IL6 and -1082IL10 on the cytokine profile TH1, TH2 and TH17, in samples from patients with chronic hepatitis C before treatment begins and blood donors candidates. Méthods: The techniques used in this study were: Flow Cytometry for the cytokine dosages, PCR-RFLP and qPCR to determine polymorphisms. Results: A total of 116 subjects were studied, 69 HCV+ and 47 controls. We observed a higher prevalence males in both groups, with an average age above 40 years for HCV +. The most frequent genotype for the IL28B was CT, TT and CC followed in both groups. For -308TNFα, the GG genotype was the most prevalent, both in patients and in controls. We observed statistically significant differences in genotype GA HCV+ among patients and controls. To -174IL6, the GG genotype was the most prevalent in both groups, followed by GC. The CC genotype was not found in the control group. The AA genotype was more prevalent for -1082IL10, HCV+ patients and controls, followed by AG and GG. The cytokines IL-2, IL-6, IFN-y, IL-17A, showed to be increased in HCV+ patients compared to controls. The concentration of IL-10 was higher in the control group compared to HCV + patients. Patients with genotype GA for -308TNFα showed higher concentrations of TNF-α compared with control subjects. It was also observed that patients HCV+ with genotypes GG and GC for IL-6 had a higher concentration of IL-6 compared to controls, were not observed significant associations between genotype frequencies of -1082IL10 and the concentrations of cytokines in patients HCV+. Conclusion: The results suggest a possible influence of polymorphisms of TNF-α and IL-6 on the production and release of cytokines. / Introdução: A hepatite C é um problema de saúde pública que afeta mais de 150 milhões de pessoas no mundo. É uma doença de prognóstico muito variável que pode evoluir para cura ou para o desenvolvimento de hepatite C crônica, cirrose hepática, carcinoma hepatocelular e morte. A identificação de regiões polimórficas que interferem nas concentrações de citocinas é algo que tem sido estudado para justificar a suscetibilidade de determinados indivíduos em desenvolver hepatite C crônica.Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar a influência dos polimorfismos de IL28B (rs8103142) , -308TNFα, -174IL6 e -1082IL10 sobre o perfil de citocinas TH1, TH2 e TH17, em amostras de pacientes com Hepatite C crônica antes do início do tratamento e candidatos a doadores de sangue. Métodos: As técnicas empregadas neste estudo foram: Citometria de Fluxo para a dosagem de citocinas, PCR-RFLP e qPCR para determinação dos polimorfismos. Resultados: No total de 116 indivíduos foram estudados, sendo 69 HCV+ e 47 controles. Foi observado maior prevalência em relação ao sexo masculino, em ambos os grupos, com média de idade acima de 40 anos para os HCV+. O genótipo de maior frequência para IL28B foi o CT, seguido do CC e TT, em ambos os grupos. Para o TNFα, o genótipo GG foi o de maior prevalência, tanto nos pacientes como nos controles. Foi observada diferença estatística significativa para o genótipo GA entre pacientes HCV+ e controles. Para -174IL6, o genótipo GG foi o mais prevalente nos dois grupos estudados, seguido de GC. O genótipo CC não foi encontrado no grupo controle. O genótipo AA foi o mais prevalente para a -1082IL10, em pacientes HCV+ e controles, seguido de AG e GG. As citocinas IL-2, IL-6, IFN-y, IL-17A, apresentaram-se aumentadas nos pacientes HCV+ quando comparado aos controles. A concentração de IL-10 foi maior em indivíduos do grupo controle em relação aos pacientes HCV+. Pacientes com genótipo GA para -308TNFα apresentaram concentrações mais elevadas de TNF-α em comparação com indivíduos controles. Também foi observado que pacientes HCV+ com os genótipos GG e GC para IL-6 apresentaram uma maior concentração de IL-6 em relação aos controles, Não foram observadas associações significativas entre as frequências genotípicas de IL10 e as concentrações de citocinas em pacientes HCV+. Conclusão: Os resultados sugerem uma possível influência dos polimorfismos de TNF-α e IL-6 sobre a produção e liberação de citocinas.

Orientador: Jose Pedrazzoli Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:44:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ramos_RenataFilomenaBonatti_M.pdf: 1507438 bytes, checksum: 604f180c4363cbd6c98c8e6e0a0dd795 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: A hepatite C é a principal causa de doença hepática crônica, cirrose e carcinoma hepatocelular na atualidade. Estima-se que 170 milhões de pessoas no mundo estejam infectadas. Testes quantitativos utilizando-se do clearance hepático vêm sendo propostos para um diagnóstico precoce da função hepática. A metacetina é uma droga de metabolização hepática, resultando em CO2 e acetaminofeno. O objetivo do estudo foi avaliar a utilidade da determinação da metabolização da 13C-metacetina administrada por via oral, como teste função hepática em pacientes portadores de hepatopatia por vírus da hepatite C. Foram avaliados 71 indivíduos encaminhados do Hospital Universitário São Francisco e região, classificados em 6 grupos (VOL=20; HCL=9; HCMS=18; CHA=18; CHB=1; CHC=5), de acordo com avaliação clínica e laboratorial. Administrou-se uma dose de 75 mg de metacetina, com posterior coleta de ar expirado durante 120 minutos. A determinação do C13 expirado nas amostras foi realizada por meio de espectrometria infravermelha não dispersiva, seletiva para isótopo ¿ IRIS na FCM da UFMG. Para análise estatística foram utilizados os métodos de análise de variância (ANOVA), Teste Qui-quadrado e o Teste de Fischer. O Teste de Tukey foi usado para comparações múltiplas. Obteve-se curva padrão composta por grupo controle. A média da variável DOB (delta over baseline) aos 20 minutos foi 22.44 para VOL; 18.71 para HCL; 20.83 para HCMS; 15.53 para CHA; 4.80 para CHB e 1.88 para CHC. Foi obtido um a £ 0,05, entre os grupos VOL/CHA; VOL/CHC; HCL/CHC; HCMS/CHA; HCMS/CHC E CHA/CHC no tempo de 30 minutos (teste de Tukey). Foi encontrada diferença estatística entre VOL/CHA; VOL/CHC; CHA/CHC; HCL/CHC; HCMS/CHC em todos os tempos e de HCMS/CHA somente no tempo de 30 minutos. O teste não diferenciou grupo controle de hepatite crônica, nem portadores de hepatite crônica leve de moderada a severa. Houve uma sobreposição de valores individualmente. Deve-se avaliar um número maior de pacientes para definição de sua aplicabilidade clínica! / Abstract: Hepatitis C is now the main cause of chronic hepatic disease, cirrhosis and hepatocellular carcinoma. It is estimated that 170 million persons in the world are infected with hepatitis C. Quantitative tests evaluating hepatic functioning, using hepatic clearance, have been suggested for early diagnosis. Methacetin is a drug used for hepatic metabolization, resulting in CO2 and acetaminophen. The objective of this study was to appraise the usefulness of determining the metabolization of 13C methacetin, administered orally, as a test of hepatic functioning in patients with hepatopathy from the hepatitis C virus. Seventy-one individuals referred by the São Francisco University Hospital and from the neighboring region were evaluated and then classified into 6 groups (VOL = 20, HCL = 9, HCMS = 18, CHA = 18, CHB = 1, and CHC = 5), according to clinical and laboratory evaluations. One 75-mg dose of methacetin was administered, with later collection of air expired for 120 minutes. The C13 expired in the samples was determined by means of non-dispersive infrared spectrometry, selective for the IRIS isotope, at the Medical School of the Minas Gerais Federal University in Brazil. Variance analysis (ANOVA), the Chi square test and Fischer¿s Test methods were used for statistical analysis. Tukey¿s Test was used for multiple comparisons. A standard curve was obtained from a control group. The average of the DOB (delta over baseline) variable after 20 minutes was 22.44 for VOL, 18.71 for HCL, 20.83 for HCMS, 15.53 for CHA, 4.80 for CHB, and 1.88 for CHC. An a £ 0.05 was obtained between groups VOL/CHA, VOL/CHC, HCL/CHC, HCMS/CHA, HCMS/CHC, and CHA/CHC at 30 minutes (Tukey¿s Test). A statistical difference was found between VOL/CHA, VOL/CHC, CHA/CHC, HCL/CHC, and HCMS/CHC for all measurements and between HCMS/CHA only at 30 minutes. The test failed to differentiate the control group from chronic hepatitis, nor patients with light chronic hepatitis from cases if moderate to severe chronic hepatitis. There was individual overlapping of values. A larger number of patients should be evaluated in order to define clinical applicability / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientadores : Ilka de Fatima Santana Ferreira Boin, Desenka Dragosavac / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T23:01:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Veloso_CristinaAparecida_M.pdf: 1235930 bytes, checksum: b059866d5c879e6291338dc4f039d061 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A hipertensão pulmonar (PAPm - pressão arterial pulmonar média - acima de 25mmHg) é um achado freqüente no período pós-operatório (PO) de transplante de fígado (TF). Objetivo: comparar, retrospectivamente, a função respiratória e a taxa de sobrevivência em pacientes com e sem hipertensão pulmonar (HP), no PO de transplante de fígado. Metodologia: cinqüenta e sete pacientes submetidos a transplante de fígado no período de 01/99 a 12/00 foram divididos em dois grupos: grupo 1 (G1, n = 26) sem HP e grupo 2 (G2, n = 31) com HP moderada. Os dados comparados foram: no período pré-operatório a classificação de Child-Pugh, a prova de função pulmonar, a PAPm, a pressão capilar pulmonar (PCP) e o gradiente alvéolo-arterial de oxigênio (PA-aO2). No intra-operatório foram analisados os tempos de isquemia fria e quente e a quantidade de transfusão de hemoderivados, e, no PO, a PAPm, a PCP, a relação PaO2/FiO2, o tempo de desmame, o tempo de internação na UTI e a sobrevida de 30 dias. Resultados: a pressão média da artéria pulmonar no POI foi de 21 ± 3mmHg e de 32 ± 4mmHg (p<0,0001), para os grupos 1 e 2, respectivamente. A relação PaO2/FiO2 foi 310 ± 82 no grupo 1 e 272 ± 84 no grupo 2 (p=0,48). No pacientes do grupo 1, 77% foram desmamados nas primeiras 24 horas contra 74% do grupo 2 (p=0,10). O tempo de internação na UTI foi de 4,7 (1,9-45,8) dias no grupo 1 e 4,3 (1,9-11,8) dias no grupo 2 (p=0,36). Nos primeiros 30 dias seis (n=26) pacientes do grupo 1 foram a óbito versus cinco (n=31) do grupo 2 (p=0,44). Conclusão: nesta casuística, a presença de hipertensão pulmonar moderada no PO de TF não se revelou fator de risco adicional para disfunção pulmonar, aumento no tempo de internação na UTI ou na sobrevida de 30 dias / Abstract: Pulmonary hypertension (PH) [mean pulmonary arterial pressure, mPAP>25mmHg] is frequently found during the post-operative period (post-OP) of liver transplantation (LT). Objective. To compare respiratory function, ICU length of stay (LOS) and 30th day survival rate in patients evolving with PH with those not developing it, during the post-OP of LT. Methods. 57 patients undergoing LT between January 1999 and December 2000 were divided in two groups: Group 1 (G1; n=26): without PH; and Group 2 (G2; n=31): with moderate PH. In the pre-OP Child-Pugh¿s classification, pulmonary function tests, mPAP and PA-aO2 were recorded. During the intra-OP, hot and cold ischemia times and the amount of blood transfusion were evaluated, while mPAP, PaO2/FiO2 ratio, the weaning time, ICU LOS and the 30th day survival rate were considered in post-OP. Results. mPAP in early post-OP was 21±13 mmHg and 32±4 mmHg in G1 and G2, respectively (P<0.0001). PaO2/FiO2 was 310±82 mmHg in G1 and 272±84 mmHg in G2 (P =0.48). In G1 and G2, 77% and 74% of the patients, respectively, were successfully weaned in the first 24h post-OP (P=0.10). ICU LOS was 4,7 (1,9-45,8) days in G1 and 4,3 (1,9-11,8) days in G2 (P=0.36). The 30th day survival rate was 20/26 (77%) in G1 and 26/31 (84%) in G2 (P=0.44). Conclusion. Our data indicate that a moderate pulmonary hypertension in the early post-OP of LT can¿t be considered an additional risk factor for pulmonary dysfunction and increased ICU LOS or 30th day mortality rate / Mestrado / Pesquisa Experimental / Mestre em Cirurgia

Introdução: A Doença Hepática Gordurosa Não Alcoólica (DHGNA) tem sido considerada atualmente a forma mais comum de doença hepática no mundo ocidental, relacionada principalmente ao aumento da prevalência da obesidade. A DHGNA abrange um largo espectro de doença, desde casos de esteatose simples até esteato-hepatite (ENA) e fibrose, podendo evoluir para cirrose e carcinoma hepatocelular (CHC). Embora se conheçam os fatores predisponentes para o desenvolvimento da ENA, sua patogênese, assim como tratamento eficaz, permanecem pouco conhecidos. Yo Jyo Hen Shi Ko (YHK), produto derivado do Henshiko, é formado por 4 ingredientes: Panax pseudo ginseng, Eucommia ulmoides, Polygonati rhizoma, e Licorice root. Estes compostos que apresentam propriedades antioxidantes, hepatoprotetoras, hipoglicemiantes e hipolipemiantes. Objetivos: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do YHK na ENA em camundongos obesos (ob/ob). Métodos: ENA foi induzida em camundongos ob/ob, machos, pesando 40-50g, com 8 semanas de vida, por meio de dieta deficiente em colina e metionina (DCM) ou dieta hiperlipídica (H) durante 4 semanas. Os animais foram distribuídos aleatoriamente por meio de tabela de classificação seqüencial randomizada em 5 grupos, com 5 animais em cada grupo: 1) Grupo DCM: submetidos à dieta em pó, deficiente em colina e metionina por um período de 4 semanas associada a 0,3 mL de solução fisiológica por meio de gavagem diária; 2) Grupo DCM tratado com YHK: submetidos à dieta em pó, deficiente em colina e metionina por um período de 4 semanas associada à solução de YHK (Kyotsu,Yokyo, Japan) (20mg/kg/dia diluída em 0,3mL de solução fisiológica) administrados diariamente por gavagem; 3) Grupo H: submetidos à dieta em pó, hiperlipídica, por 4 semanas associada a 0,3 mL de solução fisiológica diariamente por meio de gavagem; 4) Grupo H tratado com YHK: submetidos à dieta hiperlipídica por um período de 4 semanas associada a solução de YHK (Kyotsu, Yokyo, Japan) (20mg/Kg/dia diluída em 0,3mL solução fisiológica) administrados diariamente por gavagem; 5) Grupo C: submetidos à dieta padrão NUVILAB CR1 (NUVITAL Industria Brasileira Ltda.) por um período de 4 semanas associada a 0,3 mL de solução fisiológica diariamente por meio de gavagem. O diagnóstico histológico de DHGNA e ENA foi determinado segundo a classificação padronizada pelo \"Pathology Committee of the NASH Clinical Research Network\", que designou e validou as características histológicas e um sistema de escore de atividade para DHGNA. Resultados: Os animais das dietas DCM e H não tratados com YHK desenvolveram moderada esteatose macro e microgoticular, balonização hepatocelular e infiltrado inflamatório misto. Com a adição de YHK, ocorreu uma redução na esteatose e inflamação em ambas as dietas. No que se refere à bioquímica hepática, as aminotransferases reduziram-se significativamente em ambos os grupos tratados com o YHK. Associadamente observou-se perda de peso significativa nos camundongos tratados com o YHK em ambas as dietas empregadas (DCM e H) (p<0,05), embora a ingestão alimentar não tenha sido diferente entre os grupos. A redução da ENA e das concentrações de aminotransferases associou-se à redução do estresse oxidativo hepático, avaliado pela diminuição na lipoperoxidação no tecido hepático (redução do MDA - Malonaldeído). Contudo, a glutationa reduzida (GSH) só sofreu redução significativa no grupo da dieta DCM que usou o YHK. Conclusões: Yo Jyo Hen Shi Ko (YHK) inibiu o desenvolvimento da ENA experimental induzida por dieta deficiente em colina e metionina (DCM) e hiperlipídica (H), reduziu as concentrações séricas das aminotransferases e reduziu os parâmetros de estresse oxidativo hepático nesses dois modelos experimentais. Futuros estudos serão necessários para elucidar melhor, o mecanismo de hepatoprotetor do YHK. / Background: Oxidative stress plays a role in the pathogenesis of nonalcoholic steatohepatitis (NASH). Yo Jyo Hen Shi Ko (YHK) is a complex compound purported to reduce reactive oxygen species (ROS) by blocking the propagation of radical-induced reactions. Aim: The aim of this study was to evaluate the role of the effect of YHK in experimental NASH. Methods: NASH was induced in male ob/ob mice by a high-fat (H) diet or methionine/choline deficient (MCD) diet for 4 weeks. YHK-treated animals received YHK solution orally (20 mg/kg/day) in both experimental diets (n = 5; each group) while control animals received only vehicle. Results: The MCD and H groups developed moderate diffuse macrosteatosis, hepatocellular ballooning, and a diffuse inflammatory infiltrate. With the addition of YHK, there was a marked reduction in macrosteatosis in both groups. This was associated with decreased lipoperoxide and reduced glutathione (GSH) concentrations as well as reduced serum aminotransferases and improved histological markers of inflammation. These changes were also associated with weight loss in the MCD+YHK group and diminished weight gain in the H+YHK group. Conclusion: YHK therapy blunts the development of macrosteatosis in these models of NASH and significantly reduces markers of oxidative stress. YHK also diminishes weight gain in this obesity prone model. Our findings warrant further study on the mechanisms involved with these effects.

Os processos fibrogênicos, ativados por mecanismos como estresse oxidativo, podem levar a um quadro de cirrose hepática, que representa uma das principais causas de morte no ocidente. Entretanto, em alguns estudos, substâncias fenólicas, como o Ácido Gálico (AG), demonstraram inibir e até regredir esses processos. O objetivo do presente estudo foi investigar os efeitos do composto fenólico AG no processo fibrogênico hepático murino. Os mesmos foram avaliados tanto na fase de progressão da fibrose, como na cirrose hepática estabelecida pela administração crônica de tetracloreto de carbono em camundongos C57. Para isso foram realizadas análises histológicas, imuno-histoquímicas, PCR e Western-bloting, estimando-se fatores relacionados à fibrogênese e mediadores inflamatórios associados. Observou-se uma diminuição importante na percentagem de áreas coradas pelo Sirius red, ou seja, redução na percentagem de fibrose nos grupos tratados com AG, tanto durante a prevenção (p<0,05), quanto na regressão da cirrose (p<0,05). Esta melhora foi acompanhada de redução no número de células marcadas pela SMA nos grupos tratados (p<0,05). Estes mesmos parâmetros foram confirmados através da análise genômica para colágeno, assim como pelo TIMP e pelo TGF 1; e proteômica para NFB e p38 MAPK. Os achados do presente estudo demonstraram o efeito do AG sobre a prevenção e reversão do processo fibrogênico hepático. Os principais mecanismos deste processo envolvem atividades anti-inflamatórias via TGF-1 e p38 MAPK, principalmente durante a indução de fibrose; assim como restrição da capacidade anti-apoptótica do NFB sobre as células estreladas hepáticas (CEH) na cirrose já estabelecida. / The fibrogenic processes activate by mechanisms such as oxidative stress can lead to a picture of liver cirrhosis, which represents a major cause of death in West. However, in some studies, phenolic substances, such as Gallic Acid (GA) shown to inhibit and even regress theses processes. The aim of this study was to investigate the effects of the phenolic compound GA in murine liver fibrogenic process. They were evaluated both in progression of fibrosis and in liver cirrhosis established by administration carbon tetrachloride im mice C57. For this, was performed histological, immunohistochemical, PCR and Western blotting analysis, estimating factors related to fibrogenesis and inflammatory mediators associated. There was a significant decrease of area stained by Sirius Red, which means reduction in the percentage of fibrosis in the groups treated with GA. Both for prevention (p<0,05) and for the regression of the cirrhosis (p<0,05). This improvement was accompanied by a reduction in the number of cells marked by SMA in the treated groups (p<0,05). These parameters was confirmed by genomic analysis for collagen, as well as by TIMP 1 and TGF 1, and proteomics for p38 MPK and NFkB. The findings of this study demonstrade the effect of GA in the prevention and of liver fibrogenic process. The main mechanisms of this process involves anti-inflammatory activity via TGF 1 and p38 MAPK, especially during induction of fibrosis, as well as restriction of antiapoptotic capacity of NFkB on the CEH in established cirrhosis.

Introdução: Fibrose hepática é a resposta cicatricial a lesões celulares agudas ou crônicas do fígado. Produtos derivados do intestino podem chegar ao fígado através da veia porta e mediar resposta inflamatória via receptores TLR4. O aumento de citocinas inflamatórias induz a ativação de células estreladas, fibroblastos periportais e células de Kupffer. A ativação destas células estimula a secreção de TGFβ e a deposição excessiva de colágeno. Assim, a modulação da microbiota intestinal com uso de probióticos poderia reduzir a inflamação e fibrogênese hepática. Objetivo: Avaliar o efeito do Lactobacillus rhamnosus GG (LGG) sobre a fibrose hepática em modelo de hepatopatia colestática crônica em ratos. Métodos: Ratos Wistar (n = 29) adultos machos (299,89g ± 42,89 g) foram submetidos a ligadura de ducto biliar (BDL) ou a manipulação de ducto biliar comum sem ligadura (Ctrl). Após 14 dias, os grupos foram novamente divididos para receber gavagens durante 14 dias: os grupos Ctrl e BDL receberam 1 ml de PBS e os grupos Ctrl-P e BDL-P, 1 ml de PBS contendo 2,5 × 107 UFC de LGG. A eutanásia ocorreu 5 dias após o término do tratamento quando foram coletados amostras de sangue e fígado. Resultados: A ligadura de ducto biliar promoveu redução no peso e na albumina plasmática acompanhado da elevação das provas de disfunção hepatobiliar em comparação aos grupos controle. O tratamento com LGG não alterou os parâmetros séricos ou o peso corporal dos animais. Não houve diferença na atividade de superóxido dismutase (SOD) entre os grupos. A atividade de catalase (CAT) e os níveis de sulfidrilas foram significativamente menores no grupo BDL em relação aos controles. O tratamento com LGG mostrou uma tendência ao aumento dos níveis de sulfidrilas. A razão SOD/CAT foi maior no grupo BDL em relação aos controles e o tratamento com LGG preveniu este desequilíbrio. O tratamento com LGG mostrou uma tendência a redução da razão SOD / CAT. A expressão gênica de Tlr4, Tnfα e Il6 e os níveis de IL1β foram maiores no grupo BDL em relação ao controle. O tratamento com LGG atenuou parcialmente a elevação de IL1β e Tlr4. O grupo BDL-P teve redução da expressão gênica de Il6 em relação ao grupo BDL. A expressão gênica de Tgfβ foi maior no grupo BDL em comparação ao Ctrl. A expressão de metaloproteinases 2 e 9 foi significativamente maior nos grupos BDL e BDLP, sem diferença em relação ao tratamento com LGG. A deposição de colágeno e a reação ductular avaliado pelo conteúdo de citoqueratina 7 (CK7) foi maior nos animais submetidos a ligadura de ducto biliar. O tratamento com LGG reduziu significativamente a deposição de colágeno e conteúdo de CK7 no fígado em comparação com grupo de BDL. Conclusão: O tratamento com LGG foi capaz de reduzir a fibrose hepática, a reação ductular e a expressão gênica de Il6 em modelo de hepatopatia colestática crônica em ratos. / Introduction: Liver fibrosis is a wound-healing response to acute or chronic cellular liver injury. Gut-derived products can reach the liver through the portal vein and mediate inflammatory response via TLR4. The increase of inflammatory cytokines induces the activation of stellate cells, periportal fibroblasts and Kupffer cells. The activation of these cells stimulates the secretion of TGFβ and the excessive collagen deposition. Thus, modulation of gut microbiota using probiotics could reduce inflammation and hepatic fibrogenesis. Aim: To evaluate the effect of Lactobacillus rhamnosus GG (LGG) on liver fibrosis in a model of cholestatic liver disease in rats. Methods: Adult male (n = 29) Wistar rats (299.89 g ± 42.89 g) were subjected to bile duct ligation (BDL) or the manipulation of common bile duct without ligation (Ctrl). After 14 days, groups were again divided to receive gavagens during 14 days: Ctrl and BDL groups received 1 ml of PBS and Ctrl-P and BDL-P groups, 1 ml of PBS containing 2.5 × 107 CFU of LGG. Euthanasia occurred five days after the end of the treatment when were collected samples of blood and liver tissue. Results: The bile duct ligation promoted a reduction in body weight and plasma albumin levels followed by an increase of liver dysfunction parameters in comparison to control groups. LGG treatment did not change serum analyses or body weight of animals. There was no difference in superoxide dismutase activity (SOD) between groups. The catalase activity (CAT) and sulfhydryl levels were significantly lower in the BDL group compared to controls. Treatment with LGG showed a tendency to increase sulfhydryl levels. The SOD / CAT ratio was higher in BDL group compared to controls and treatment with LGG prevented this imbalance. Treatment with LGG showed a tendency to decrease SOD / CAT ratio. The gene expression of Tlr4, Tnfα and Il6 and IL1β levels were higher in the BDL group compared to the control. Treatment with LGG partially attenuated the increase of IL1β and Tlr4. The BDL-P group had decreasing in Il6 gene expression compared to the untreated group. The gene expression of Tgfβ was higher in the BDL group compared to the Ctrl. The expression of metalloproteinases 2 and 9 was significantly higher in BDL and BDL-P groups, with no difference in comparison to treatment with LGG. The collagen deposition and ductular reaction evaluated by the content of cytokeratin 7 (CK7) was higher in animals submitted to the bile duct ligation. The hepatic collagen deposition and CK7 content was significantly decreased in BDL-P compared to BDL group. Conclusion: Treatment with LGG was able to reduce liver fibrosis, ductular reaction and Il-6 gene expression in a model of chronic cholestatic liver disease in rats.

Fibrose Hepática Congênita (FHC) é uma hepatopatia hereditária que se manifesta, clinicamente, por diferentes quadros, dependendo da idade dos pacientes e da associação com anomalias em outros órgãos além do fígado. Nos primeiros 2 anos de vida, as manifestações clínicas mais salientes são devidas à concomitância das alterações renais; em escolares, adolescentes e adultos jovens, é a hipertensão porta que domina a cena. A comprovação diagnóstica é histopatológica, caracterizando-se por fibrose porta e perilobular com conservação da arquitetura lobular hepática; em relação aos duetos biliares, são descritos 2 padrões da doença: num há proliferação; no outro ausência dos ductos biliares em meio à fibrose. FHC é uma hepatopatia cujo diagnóstico é de grande importância, possibilitando a detecção de anomalias extra-hepáticas e a descoberta da doença em familiares assintomáticos. Foram estudados 26 pacientes com idade entre 2 horas e 27 anos. Em todos os casos, o diagn6stico de FHC foi feito pelo estudo histopatológico de fígado, tendo o material sido colhido por biópsia em 18 casose por necropsia nos demais. Cerca de 85% amostra era constituída de pacientes com idade inferior a 18 anos e não houve predomínio significativo em relação ao sexo atingido. Constatou-se mais freqüentemente a forma esporádica da doença, tendo se verificado recorrência familiar comprovada em aproximadamente 15% e suspeita em 24%, sugestiva de herança autossômica recessiva. Ao exame físico, esplenomegalia foi uma verificação constante, excetuando os recém-nascidos, e nefromegalia foi constatada apenas em crianças com idade inferior a 3 anos. Ficou demonstrada a pequena intensidade das alterações nos resultados dos exames laboratoriais utilizados para avaliar a "função hepática", excetuando a atividade da fosfatasemia alcalina que se apresentou alterada em aproximadamente 90% dos casos. Considerando a amostra global, hipertensão porta ocorreu em 65,3%, nos pacientes acompanhados clinicamente, em cerca de 90%, tendo a investigação hemodinâmica revelado hipertensão porta intra-hepática pré-sinusoidal. A prevalência de malformações extra-hepáticas foi de 42,3% na amostra global, aumentando para 57,8% nos pacientes submetidos à investigação histológica renal. O sistema urinário foi o mais comumente atingido (57,8%), e a doença renal policística forma infantil (nas suas 4 modalidades) responsável por aproximadamente 80% das malformações renais. Em relação às formas clínicas da doença, a amostra ficou assim distribuída: hipertensiva, 13 casos; renal, 8, latente, 4 e mista, 1. A forma colagítica não foi observada. Demonstrou-se associação significativa (p<0,001) entre a idade dos pacientes e as formas hipertensiva e renal da FCH.

A cirrose hepática é a consequência de todas as doenças crônicas, de longo prazo, que acometem o fígado e é caracterizada a insuficiência hepática (IH) e a hipertensão portal (HP). As coagulopatias vistas em pacientes cirróticos são dependentes de diversos mecanismos, que envolvem tanto a IH como a HP, e que comprometem as funções fisiológicas rotineiras do fígado, entre elas a síntese de todos os fatores de coagulação, com exceção do fator de von Willebrand. Todos os trabalhos publicados até hoje em odontologia não puderam associar os dois testes geralmente utilizados no pré-operatório desses pacientes, o INR e a contagem de plaquetas, com a presença de eventos hemorrágicos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a presença de sangramento intra e pós-operatório de pacientes cirróticos, submetidos a exodontias, e verificar se existe associação entre parâmetros laboratoriais (plaquetas, hemoglobina, INR, TTPa, ureia, creatinina) e clínicos (complicações da cirrose, estágio da doença, MELD, tipo de exodontia, tempo de cirurgia, número de dentes extraídos). Foi realizado um estudo observacional retrospectivo analítico, de corte transversal de pacientes cirróticos em fila de transplante do Centro de Atendimento a Pacientes Especiais (CAPE) da Faculdade de Odontologia da Universidade de São Paulo (FOUSP). Foram transferidos para o EpiInfo, originando um banco de dados, as informações constantes do prontuário de 224 pacientes. Em 99 pacientes foram executados 190 atendimentos que resultaram em 333 dentes extraídos. A maioria dos pacientes era do sexo masculino (75,44%), com idade média de 51,27 anos e escolaridade de nível fundamental (23,56%). A maior causa de cirrose foi a hepatite C (40,18%), e as complicações da cirrose mais comuns foram a circulação colateral (66,80%), encefalopatia hepática (56,30%) e ascite (64,20%). Em 190 hemogramas foi identificada plaquetopenia (95,80%); anemia, em 129 (67,90%) e alterações da série branca em 110 (57,80%). A média do INR foi de 1,45 (mínimo 1,03 e máximo 2,71) e a de plaquetas 76.380 (mínimo 16.000 e máximo de 216.000). Apenas 12 pacientes apresentaram eventos hemorrágicos no intra-operatório e 12 no pós-operatório. A única associação positiva foi entre a contagem de plaquetas e os eventos hemorrágicos intra-operatórios (p=0,26; teste de Mann Whitney, confirmada a associação através de análise de regressão linear). Todos os eventos foram controlados com medidas locais. Pacientes cirróticos em fila de transplante de fígado apresentam poucos eventos relacionados com sangramento e todos de pouca severidade. Existe uma chance maior de sangramento intra-operatório à medida que a contagem de plaquetas diminui, mas o sangramento é controlado com medidas locais simples. Os eventos hemorrágicos pós-operatórios não puderam ser associados com nenhuma das variáveis, mas nenhum paciente necessitou de transfusão e a resolução do quadro foi espontânea. / Hepatic cirrhosis is the result of all long-term chronic diseases, which can compromise the liver, and is characterised by hepatic insufficiency (HI) and portal hypertension (PH). The coagulopathies seen in cirrhotic patients depend on several mechanisms involving both HI and PH, which impairs the routine physiological functions of the liver, such as synthesis of all coagulation factors, except the von Willebrand factor. All dental studies published until today could not associate the two tests commonly used prior to tooth extraction in these patients, namely, INR and platelets count, for presence of haemorrhagic events. The objective of this work was to assess the presence of intra- and post-operative bleeding in cirrhotic patients undergoing tooth extraction and to verify whether there exists an association between laboratory (i.e. platelets, haemoglobins, INR, TTPa, urea, creatinine) and clinical parameters (i.e. cirrhosis complications, disease stage, MELD score, type of tooth extraction, surgery time, number of teeth extracted). This is a cross-sectional, retrospective, observational study of cirrhotic patients who were on the liver transplant waiting list at the Healthcare Centre for Special Patients (CAPE) of the University of São Paulo Faculty of Dentistry (FOUSP). Data were obtained from the medical records of 224 patients and the Epi Info software was used to generate a database. A total of 190 visits were performed for 99 patients, resulting in 333 teeth extracted. The majority of the patients were male (75.44%) with mean age of 51.27 years old and elementary education level (23.56%). The greatest cause was hepatitis C (40.18%) and the most common cirrhosis complications were collateral circulation (66.80%), hepatic encephalopathy (56.30%) and ascite (64.20%). Plateletopenia (95.80%) was identified in 190 blood counts, anaemia (67.90%) in 129, and white blood cell changes in 110 (57.80%). The mean scores for INR was 1.45 (minimum 1.03 and maximum 2.71) and for platelets was 76,380 (minimum 16,000 and maximum 216,000). Only 12 patients presented haemorrhagic events during surgery and 12 after it. The only positive association was found between platelet counts and intra-operative haemorrhagic events (P = 0.26; Mann Whitney\'s test, confirmed with linear regression analysis). All the bleeding events were controlled with local measures. Cirrhotic patients who were on the liver transplant waiting list had a few bleeding events, all with little severity. Intra-operative haemorrhagic events are more likely to occur when the platelet count is low, but bleeding can be handled with simple local measures. Post-operative haemorrhagic events could not be associated with any variable, but no patient needed blood transfusion as the clinical picture improved spontaneously.

O uso de tetracloreto de carbono (CCl4) em ratos é um modelo experimental de dano ao tecido hepático, desencadeando fibrose e, a longo prazo, cirrose. Seu metabolismo ocorre no fígado pelo citocromo P450, resultando na produção de radicais livres e estimulação da lipoperoxidação, que induz um processo de necrose, inflamação e maior progressão da fibrose. Vários antioxidantes, entre eles os flavonoides, têm sido referidos como eficazes para diminuir a fibrose em modelos animais. Este estudo pretende avaliar a ação antioxidante da quercetina (Q) em um modelo experimental de cirrose induzida por CCl4 inalatório. Foram utilizados 25 ratos Wistar machos, com peso médio de 250g, divididos em 3 grupos: Controle (CO), CCl4 e CCl4+Q. Os ratos foram submetidos a inalações de CCl4 (2x/semana), durante 16 semanas, recebendo fenobarbital na água de beber na dose de 0,3g/dl, como indutor enzimático. A Q (50mg/Kg) via intraperitoneal foi iniciada na 10ª semana de inalação, perdurando até o final do experimento. A análise estatística foi ANOVA, seguida de Student Newmann Keuls (Média±SEM), considerando-se diferença estatisticamente significativa quando p<0,05. Após o tratamento com quercetina, observamos uma melhora na integridade hepática, diminuição da fibrose, do conteúdo de colágeno e re-estabelecimento nos níveis dos metabólitos do óxido nítrico, comparado ao grupo CCl4. Constatou-se também redução do dano oxidativo, verificada pela diminuição das substâncias que reagem ao ácido tiobarbitúrico (TBA-RS), assim como aumento na atividade das enzimas antioxidantes e da relação GSH/GSSG. A partir desses dados, sugerimos que o emprego da quercetina possa ser promissor como terapia antioxidante nas complicações hepáticas. / Carbon tetrachloride (CCl4) is a classic experimental model of oxidative damage to liver tissue, causing long-term fibrosis and cirrhosis. Metabolism in the liver via cytochrome P450 results in the stimulation of lipid peroxidation and production of free radicals, which induce a process of necrosis, inflammation and greater progression of fibrogenesis. Various antioxidants and flavonoids have been identified as effective in reducing fibrosis in animal models. This study aimed to assess the antioxidant activity of quercetin (Q) in an experimental model of cirrhosis induced by CCl4 inhalation. We used 25 male Wistar rats (250g) that were divided into 3 groups: control (CO), CCl4 and CCl4 + Q. The rats were subjected to CCl4 inhalation (2x/week) for 16 weeks, and they received phenobarbital in their drinking water at a dose of 0.3 g/dl as a P450 enzyme inducer. Q (50 mg/Kg) was initiated intraperitoneally at 10 weeks of inhalation and lasted until the end of the experiment. Statistical analysis was by ANOVA Student-Newman Keuls (mean ± SEM), and differences were considered statistically significant when p <0.05. After treatment with quercetin, we observed an improvement in liver integrity, decreased fibrosis, as analyzed by picrosirius for the quantification of collagen, and restored levels of nitric oxide metabolites compared with the CCl4 group. It also reduced oxidative stress, as confirmed by the decrease of substances reacting to thiobarbituric acid (TBARS), the increased activity of antioxidant enzymes and the reduced glutathione ratio and glutathione disulfide (GSH/GSSG). From these data, we suggest that the use of quercetin might be promising as an antioxidant therapy in liver complications.

Submitted by Natalia Vieira (natalia.vieira@famerp.br) on 2016-05-19T19:34:50Z No. of bitstreams: 1 odetemauadcavenaghi_dissert.pdf: 773214 bytes, checksum: f8ee778371ec5f6b55320dbef17115cb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-19T19:34:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 odetemauadcavenaghi_dissert.pdf: 773214 bytes, checksum: f8ee778371ec5f6b55320dbef17115cb (MD5) Previous issue date: 2015-12-04 / Introduction: Liver transplantation (TxF) is a complex procedure and considered standard treatment for patients with terminal chronic liver disease, many of them suffering from severe organic deterioration. The CTP Pugh scores (CTP) and Model for End-stage Liver Disease (MELD) have been used to assess the severity of liver disease and the risk of death, respectively. The st Six Minutes Walk Test (6MWT) assesses the functional capacity of these patients. Objective: Our goal was to determine whether there is a correlation between the 6MWT and the CTP and MELD scores in candidates for TxF. Methods: Cross-sectional study of cirrhotic patients undergoing pre-transplant evaluation in a follow-up at the Liver Transplantation United of Hospital de Base, São José do Rio Preto SP, from May 2012 to may 2014 All of them submitted to 6MWT consecutively. The results of the 6MWT and CTP and MELD scores were analyzed by the Student’s t tests and Spearman. Results: We studied 45 men and 11 women with a mean age 54.50 ± 11 years, who walked mean distance of 461.35 ± 87,31m in the 6MWT. It has been found that patients with CTP B and C walked distance significantly shorter when compared with the predicted value (p <0.0001) and with patients presenting CTP score A (p <0.016). There was significant inverse correlation between the 6MWT and the scores CTP (p = 0.01) and native Meld (p value = 0.05). Conclusion: There was inverse correlation between the 6MWT test and the Child and MELD scores. The 6MWT lower values identified patients on the waiting list for liver transplantation, higher Chid carriers (uncompensated) and highest MELD (worse prognosis). This data have strenghthened the potential usefulness of the 6MWT to evaluate the severity and prognosis of these patients. / Introdução: O transplante de fígado, é um procedimento complexo, considerado tratamento padrão para pacientes com doença hepática crônica terminal, muitos deles portadores de grave deterioração orgânica. Os escores Child-Turcotte Pugh (CTP) e o Model for End-Stage Liver Disease (MELD) são utilizados para avaliar a gravidade da doença hepática e o risco de morte, respectivamente. O Teste de Caminhada de Seis Minutos (TC6) avalia a capacidade funcional destes pacientes. Objetivo: O presente estudo teve como objetivo verificar se há correlação entre o teste de caminhada de seis minutos e os escores Child e MELD, em candidatos ao transplante de fígado. Métodos: Estudo transversal de pacientes cirróticos em avaliação pré-transplante na Unidade de Transplante de Fígado do Hospital de Base de São José do Rio Preto, no período de maio de 2012 a maio de 2014. Todos foram submetidos ao TC6, consecutivamente. Os valores do TC6 e dos escores CTP e MELD foram analisados por testes t e Spearman. Resultados: Foram estudados 45 homens e 11 mulheres com idade média 54,50 ± 11 anos, que percorreram distância média no TC6 de 461,35 ± 87,31m. Verificou-se que os pacientes com escore CTP B e C percorreram distância significantemente menor quando comparados com o valor predito (p < 0,0001) e com os portadores de escore CTP A (valor p<0,016). Houve correlação significante entre o TC6 e os escores CTP (valor p=0,01) e MELD real (valor p=0,05). Conclusões: Houve correlação inversa entre o teste TC6 e os escores Child e MELD. Valores mais baixos do TC6 identificaram pacientes em lista de espera para transplante de fígado, portadores de Child mais alto (descompensados) e MELD mais elevado (piores prognósticos). Este dado reforça a utilidade potencial do TC6 na avaliação da gravidade e do prognóstico destes pacientes.