Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-06-01Bitstream added on 2014-06-13T18:31:28Z : No. of bitstreams: 1 drubi_aj_me_jabo.pdf: 226658 bytes, checksum: d4452fb0ea178bd72151b90b192941f4 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade microbiológica de matérias-primas alimentícias de origem animal na região de Ribeirão Preto (SP). Para tal foram utilizados três tipos de amostras: carne, queijo e frango, perfazendo respectivamente um total de 34, 38 e 25 amostras. Os resultados obtidos das análises microbiológicas para carne apresentaram ausência de Salmonella sp e valores abaixo do padrão permitido para coliformes fecais. Nas amostras de frango observou-se a ausência de Salmonella sp, e os agentes Staphylococcus sp e Clostrídios apresentaram-se dentro dos limites estabelecidos pelo Ministério da Saúde. Do total de 38 amostras de queijo analisadas, foram encontradas nove (24,0%) com a presença de coliformes fecais acima dos limites estabelecidos pela legislação vigente. Os principais gêneros ou espécies encontrados com maior freqüência nestas amostras foram Escherichia coli (44,4%), seguidas por Klebsiella sp (22,2%), Enterobacter sp (11,1%), Proteus sp (11,1%) e Citrobacter sp (11,1%). Nenhuma das quatro cepas de Escherichia coli isoladas apresentaram aglutinação com os soros polivalentes A, B e C e respectivos monovalentes das espécies EPEC (Escherichia coli enteropatogênica). Os níveis de Staphylococcus sp encontrados ficaram dentro dos valores permitidos e Salmonella sp não foi detectada. Nas amostras de queijo foi realizado teste de sensibilidade utilizando-se o método de difusão em ágar com discos impregnados de antimicrobianos. Foram utilizadas as seguintes drogas: gentamicina, amicacina, sulfametoxazol+trimetoprima, ceftriaxona, aztreonam, ampicilina e cefalotina para as cepas de Escherichia coli. Os resultados revelaram que as cepas de Escherichia coli isoladas foram resistentes a diversos antimicrobianos, destacando-se 50,0% para sulfametoxazol+trimetoprima, 25,0% para o antibiótico aztreonama e 25,0% para cefalotina e ampicilina... . / The objective of this work was to evaluate the microbiology quality of the alimentary raw material of animal origin in the region of Ribeirão Preto. For such they were utilized three kinds of samples: meat, cheese and chicken, making up respectively a gross one of 34, 38 and 25 samples. The results obtained from the microbiological analyses for meat presented absence of Salmonella sp and down the values of the standard permitted for fecal coliforms. In the samples of chicken observed absence of Salmonella sp, and the agents Staphylococcus sp and Clostridium, presented itself inside the limits established by the Health Department. Of the gross one of 38 samples of cheese analyzed, were found nine (24,0%) with the presence of fecais coliforms above of the limits established by the force legislation. The main kinds or species met frequently in these samples were, Escherichia coli (44,4%), followed by Klebsiella sp (22,2%), Enterobacter sp (11,1%), Proteus sp (11,1%) and Citrobacter sp (11,1%). None of the four lineages of isolated Escherichia coli presented agglutination with the multivalence serum A, B and C and respective monovalence from the species EPEC (Escherichia coli enteropatogênica). The levels of Staphylococcus sp founded stayed inside the values permitted and Salmonella sp was not detected. In the samples of cheese was carried out sensibility test utilizing the approach of diffusion in ágar with disks impregnated of antimicrobes. They were utilized the following drugs: gentamicina, amicacina, sulfametoxazol + trimetoprima, ceftriaxona, aztreonam, ampicilina and cefalotina for the lineages of Escherichia coli. The results revealed that the lineages of Escherichia coli isolated were resistant to diverse antimicrobes, detaching 50,0% for sulfametoxazol + trimetoprima, 25,0% for the antibiotic aztreonama and 25,0% for cefalotina and ampicilina... (Complete abstract, click electronic address below).

O objetivo desse trabalho foi descobrir melhores estratégias de controle de perdas em silagens de cana-de-açúcar, utilizando combinações de aditivos químicos e microbianos ou estratégias de vedações. No primeiro experimento o intuito foi estudar estratégias de controle de clostrídios em silagens de cana-de-açúcar aditivadas com cal virgem. Os tratamentos foram: 1) controle; 2) 1,5% cal virgem (Cal); 3) 1,5% cal virgem + 5×105 ufc/g Lactobacillus plantarum Ma 18/5U (Cal+LP); 4) 1.5% cal virgem + 5×105 ufc/g Lactobacillus buchneri 40788 (Cal+LB); 5) 1,5% cal virgem + 0,07% nitrito de sódio (Cal+Nitrito); 6) 1,5% cal virgem + 0,15% benzoato de sódio (Cal+Benzoato). Como silos experimentais foram utilizados baldes plásticos com capacidade de 20 L. A cal não foi eficiente em diminuir perdas em relação ao controle (20,6% e 19,1%, respectivamente) já as combinações cal+Benzoato, cal+Nitrito, cal+LB e cal+LP, diminuíram perdas, apresentando os valores de 11,2%, 14,1%, 14,1% e 13,9%, respectivamente. A estabilidade aeróbia das silagens tratadas com cal (172 h), cal+Benzoato (155 h) e cal+Nitrito (223 h), foram maiores em comparação às tratadas com cal+LB (49 h), cal+LP (48,4 h) e controle (51,9 h). A silagem controle apresentou menores contagens de clostrídios (3,26 log ufc/g) e os tratamentos Cal e Cal+LB apresentaram as contagens mais altas (6,74 log ufc/g e 5,96 log ufc/g, respectivamente), enquanto Cal+nitrito (5,24 log ufc/g), Cal+LP (4,63 log ufc/g) e Cal+benzoato (4,41 log ufc/g) apresentaram contagens intermediárias. Nenhum tratamento imposto foi capaz de controlar o crescimento de clostrídios estimulado pela cal virgem. No segundo ensaio o objetivo foi comparar filmes plásticos na vedação de silagens de cana-de-açúcar. Os tratamentos impostos foram: 1) filme de poliamida 45?m, recoberta com manta de polietileno para proteção contra raios ultravioleta e danos físicos (PA45+M); 2) filme de polietileno coextrusado com poliamida, dupla face, 125?m (PA125); 3) filme de polietileno, dupla face, 200?m (DF). Três silos tipo trincheira foram preenchidos simultaneamente e durante o abastecimento a cana-de-açúcar picada foi tratada com benzoato de sódio na dose 0,15% da matéria natural. Decorridos 90 dias de armazenamento, os silos foram abertos e as silagens utilizadas como ingredientes para alimentação de vacas em lactação. Quinze vacas Holandesas (615 kg PV) foram alocadas aleatoriamente em três Quadrados Latinos 3x3, com períodos de 18 dias. O consumo de matéria seca (CMS). Amostras de leite foram coletadas para análises de proteína, gordura, lactose, caseína, ácidos graxos livres, sólidos totais, Nuréico e contagem de células somáticas. O óxido de cromo foi utilizado como marcador externo para estimar a produção fecal. As diferentes estratégias de vedação não influenciaram a qualidade das silagens e, consequentemente, não afetaram o CMS 19,9 kg/dia, a produção 25,1 kg/dia e a composição do leite (gordura 3,5%, proteína 3,3%, lactose 4,4%), das vacas. As diferentes estratégias de vedação utilizadas não influenciam a qualidade das silagens de cana-de-açúcar e o desempenho de vacas leiteiras e se mostraram efetivas para vedação de silos horizontais. No presente estudo, tanto a utilização de aditivos como a adoção de estratégias de vedação não foram efetivas em controlar perdas em silagens de cana-de-açúcar. / The aim of this study was to discover the best strategies to control losses in sugarcane silages, using combinations of chemical and microbial additives or covering strategies. In the first trial the aim was to compare strategies to prevent clostridium grow in sugarcane silages added with lime. Treatments were Control: no additives; L: 1.5% lime; L + LP: 1.5% lime + Lactobacillus plantarum Ma 18/5U (5×105 cfu/g fresh forage); L + LB: 1.5% lime + Lactobacillus buchneri 40788 (5×105 cfu/g fresh forage); L + N: 1.5% lime + 0.07% sodium nitrite; L + B: 1.5% lime + 0.15% sodium benzoate. As experimental silos were used plastic buckets with a capacity of 20 L. Mini bags were prepared with the following treatments 1) control, 2) 1.5 % of lime and 3) 1.5 % of lime + 5 × 105 cfu/g of L. plantarum, in order to analyze the pH drop at the onset of fermentation. The lime was not effective in decreasing losses compared to control silages (20.6% and 19.1%, respectively) however the treatments lime+Benzoate, lime+nitrite, lime+LP and lime+LB, decreased losses, showing lower values: 11.2%, 14.1%, 14.1% and 13.9%, respectively. The aerobic stability of silages treated with lime (172 h), lime+Benzoate (155 h) and lime+Nitrite (223 h) were higher compared to those treated with lime+LB (49 h), lime+LP (48.4 h) and control (51.9 h). The control treatment showed the lowest counts of clostridia (3.26 log cfu/g) and treatment with lime and lime+LB had the highest counts (6.74 log cfu/g and 5.96 log cfu/g, respectively), while lime+nitrite (5.24 log cfu/g), lime+LP (4.63 log cfu/g) and lime+benzoate (4.41 log cfu/g) showed intermediate counts of clostridia. None of additives combined with lime were able to provide butyric acid free silages. In the second trial the aim was to compare plastic films for sealing sugarcane silages. Treatments were: 1) polyamide film 45?m plus a protection against physical damage and ultraviolet light (PA45 + P), 2) polyethylene film coextruded with polyamide, black-on--white, 125?m (PA125), 3) polyethylene film, blackon- white 200?m (BW). Three trench silos were filled out simultaneously with chopped sugarcane treated with 0.15% of sodium benzoate (as fed basis). After 90 days of storage, the silos were opened and silages fed to lactating cows as total mixed rations. . Fifteen Holstein cows (615 kg BW) were randomly allocated into 3x3 Latin square with periods of 18 days. Dry matter intake, diet apparent digestibility, milk yield and milk composition were evaluated on days 14 to 18 in each period. Chromium oxide was used as external marker to estimate fecal excretion. Sealing strategies had no influence on silage quality and cows performance. Dry matter intake (19.9 kg /day), milk yield (25.1 kg/day), and milk composition (fat 3.5%, 3.3% protein, and 4.4% lactose) were quite similar across treatments. The different sealing strategies do not affect sugarcane silage quality and dairy cows performance and proven effective for sealing horizontal silos. In the present study, neither additives nor covering strategies were effective in reducing losses in sugarcane silages.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-06-06Bitstream added on 2014-06-13T19:35:10Z : No. of bitstreams: 1 felipe_lm_me_jabo.pdf: 356871 bytes, checksum: 16d6d5f606db8c2a71fd32fc4c6570dc (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A deterioração “blown pack” é caracterizada por abundante produção de gás, induzindo a completa distensão da embalagem durante o processo de estocagem sob refrigeração. Quando a embalagem é aberta, há um odor desagradável, levemente fecal. O gás presente na embalagem é composto por dióxido de carbono e hidrogênio e por vários tipos butíricos do metabolismo fermentativo. O objetivo deste experimento foi determinar possíveis causadores deste tipo de deterioração, quantificando as populações de bactérias da família Enterobacteriaceae, e caracterizando-as nos principais gêneros e espécies encontradas, o número de bactérias ácido-lácticas, a freqüência de Clostridium estertheticum e do Clostridium gasigenes, em carnes próprias para o consumo e em carnes que apresentaram a deterioração “blown pack”. Para contagem e identificação dos membros da família Enterobacteriaceae e contagem de bactérias ácido-lácticas utilizou-se de técnicas microbiológicas clássicas. Já para pesquisa do C. estertheticum e C. gasigenes fez-se uso de técnicas de biologia molecular. Os microrganismos da família Enterobacteriaceae e bactérias ácido-láticas estavam presentes em populações elevadas e em maior número nas carnes com deterioração “blown pack”. A espécie mais freqüentemente encontrada foi a Hafnia alvei. As amostras com deterioração “blown pack’ apresentaram maior positividade para o C. estertethicum que amostras não deterioradas. Não houve diferença estatística de positividade para a presença do C. gasigenes entre amostras com deterioração “blown pack” e carnes não deterioradas. A principal forma de controle desta deterioração é a prevenção da contaminação da carne por material fecal. / The blown pack spoilage is characterised by abundant gas production, leading to complete gross distention pack during refrigerated storage. When the packaging is opened, there is an unpleasant smell, lightly fecal. The gas present in the package is composed of carbon dioxide and hydrogen and also of several butyric types of metabolism fermentation. The purpose of this experiment was to determine possible causes of this spoilage type, quantifying the populations of bacteria of the family Enterobacteriaceae, and characterizing them in the major genera and species found, the number of lactic acid bacteria, the frequency of Clostridium estertheticum and Clostridium gasigenes in meat proper for consumption and meat which showed the blown pack spoilage. In order to enumerate and identify the members of the Enterobacteriaceae family, and to enumerate the lactic acid bacteria the procedure was classical microbiological techniques. However to search the C. estertheticum and C. gasigenes the procedure was molecular biology techniques. The microorganisms of the family Enterobacteriaceae and lactic acid bacteria were present in large populations and in greater numbers in meat with blown pack spoilage. The species which were found more often was the Hafnia alvei. Samples of blown pack“ spoilage had greater positive features for C. estertethicum than samples not damaged. There was no statistical difference of positive features for the presence of C. gasigenes between samples of blown pack spoilage and not damaged meat. The main way to control this spoilage is the prevention of contamination of meat by fecal material.

O objetivo desse trabalho foi descobrir melhores estratégias de controle de perdas em silagens de cana-de-açúcar, utilizando combinações de aditivos químicos e microbianos ou estratégias de vedações. No primeiro experimento o intuito foi estudar estratégias de controle de clostrídios em silagens de cana-de-açúcar aditivadas com cal virgem. Os tratamentos foram: 1) controle; 2) 1,5% cal virgem (Cal); 3) 1,5% cal virgem + 5×105 ufc/g Lactobacillus plantarum Ma 18/5U (Cal+LP); 4) 1.5% cal virgem + 5×105 ufc/g Lactobacillus buchneri 40788 (Cal+LB); 5) 1,5% cal virgem + 0,07% nitrito de sódio (Cal+Nitrito); 6) 1,5% cal virgem + 0,15% benzoato de sódio (Cal+Benzoato). Como silos experimentais foram utilizados baldes plásticos com capacidade de 20 L. A cal não foi eficiente em diminuir perdas em relação ao controle (20,6% e 19,1%, respectivamente) já as combinações cal+Benzoato, cal+Nitrito, cal+LB e cal+LP, diminuíram perdas, apresentando os valores de 11,2%, 14,1%, 14,1% e 13,9%, respectivamente. A estabilidade aeróbia das silagens tratadas com cal (172 h), cal+Benzoato (155 h) e cal+Nitrito (223 h), foram maiores em comparação às tratadas com cal+LB (49 h), cal+LP (48,4 h) e controle (51,9 h). A silagem controle apresentou menores contagens de clostrídios (3,26 log ufc/g) e os tratamentos Cal e Cal+LB apresentaram as contagens mais altas (6,74 log ufc/g e 5,96 log ufc/g, respectivamente), enquanto Cal+nitrito (5,24 log ufc/g), Cal+LP (4,63 log ufc/g) e Cal+benzoato (4,41 log ufc/g) apresentaram contagens intermediárias. Nenhum tratamento imposto foi capaz de controlar o crescimento de clostrídios estimulado pela cal virgem. No segundo ensaio o objetivo foi comparar filmes plásticos na vedação de silagens de cana-de-açúcar. Os tratamentos impostos foram: 1) filme de poliamida 45?m, recoberta com manta de polietileno para proteção contra raios ultravioleta e danos físicos (PA45+M); 2) filme de polietileno coextrusado com poliamida, dupla face, 125?m (PA125); 3) filme de polietileno, dupla face, 200?m (DF). Três silos tipo trincheira foram preenchidos simultaneamente e durante o abastecimento a cana-de-açúcar picada foi tratada com benzoato de sódio na dose 0,15% da matéria natural. Decorridos 90 dias de armazenamento, os silos foram abertos e as silagens utilizadas como ingredientes para alimentação de vacas em lactação. Quinze vacas Holandesas (615 kg PV) foram alocadas aleatoriamente em três Quadrados Latinos 3x3, com períodos de 18 dias. O consumo de matéria seca (CMS). Amostras de leite foram coletadas para análises de proteína, gordura, lactose, caseína, ácidos graxos livres, sólidos totais, Nuréico e contagem de células somáticas. O óxido de cromo foi utilizado como marcador externo para estimar a produção fecal. As diferentes estratégias de vedação não influenciaram a qualidade das silagens e, consequentemente, não afetaram o CMS 19,9 kg/dia, a produção 25,1 kg/dia e a composição do leite (gordura 3,5%, proteína 3,3%, lactose 4,4%), das vacas. As diferentes estratégias de vedação utilizadas não influenciam a qualidade das silagens de cana-de-açúcar e o desempenho de vacas leiteiras e se mostraram efetivas para vedação de silos horizontais. No presente estudo, tanto a utilização de aditivos como a adoção de estratégias de vedação não foram efetivas em controlar perdas em silagens de cana-de-açúcar. / The aim of this study was to discover the best strategies to control losses in sugarcane silages, using combinations of chemical and microbial additives or covering strategies. In the first trial the aim was to compare strategies to prevent clostridium grow in sugarcane silages added with lime. Treatments were Control: no additives; L: 1.5% lime; L + LP: 1.5% lime + Lactobacillus plantarum Ma 18/5U (5×105 cfu/g fresh forage); L + LB: 1.5% lime + Lactobacillus buchneri 40788 (5×105 cfu/g fresh forage); L + N: 1.5% lime + 0.07% sodium nitrite; L + B: 1.5% lime + 0.15% sodium benzoate. As experimental silos were used plastic buckets with a capacity of 20 L. Mini bags were prepared with the following treatments 1) control, 2) 1.5 % of lime and 3) 1.5 % of lime + 5 × 105 cfu/g of L. plantarum, in order to analyze the pH drop at the onset of fermentation. The lime was not effective in decreasing losses compared to control silages (20.6% and 19.1%, respectively) however the treatments lime+Benzoate, lime+nitrite, lime+LP and lime+LB, decreased losses, showing lower values: 11.2%, 14.1%, 14.1% and 13.9%, respectively. The aerobic stability of silages treated with lime (172 h), lime+Benzoate (155 h) and lime+Nitrite (223 h) were higher compared to those treated with lime+LB (49 h), lime+LP (48.4 h) and control (51.9 h). The control treatment showed the lowest counts of clostridia (3.26 log cfu/g) and treatment with lime and lime+LB had the highest counts (6.74 log cfu/g and 5.96 log cfu/g, respectively), while lime+nitrite (5.24 log cfu/g), lime+LP (4.63 log cfu/g) and lime+benzoate (4.41 log cfu/g) showed intermediate counts of clostridia. None of additives combined with lime were able to provide butyric acid free silages. In the second trial the aim was to compare plastic films for sealing sugarcane silages. Treatments were: 1) polyamide film 45?m plus a protection against physical damage and ultraviolet light (PA45 + P), 2) polyethylene film coextruded with polyamide, black-on--white, 125?m (PA125), 3) polyethylene film, blackon- white 200?m (BW). Three trench silos were filled out simultaneously with chopped sugarcane treated with 0.15% of sodium benzoate (as fed basis). After 90 days of storage, the silos were opened and silages fed to lactating cows as total mixed rations. . Fifteen Holstein cows (615 kg BW) were randomly allocated into 3x3 Latin square with periods of 18 days. Dry matter intake, diet apparent digestibility, milk yield and milk composition were evaluated on days 14 to 18 in each period. Chromium oxide was used as external marker to estimate fecal excretion. Sealing strategies had no influence on silage quality and cows performance. Dry matter intake (19.9 kg /day), milk yield (25.1 kg/day), and milk composition (fat 3.5%, 3.3% protein, and 4.4% lactose) were quite similar across treatments. The different sealing strategies do not affect sugarcane silage quality and dairy cows performance and proven effective for sealing horizontal silos. In the present study, neither additives nor covering strategies were effective in reducing losses in sugarcane silages.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:13:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Claudia peixoto bueno.pdf: 2154558 bytes, checksum: e3212e2f2e948a89b381b38c7ab473b7 (MD5) Previous issue date: 2009-02-20 / The deterioration of vacuum packed refrigerated meat accompanied by large gas production - a phenomenon called blown pack - is considered a major cause of economic losses of the meat industry in several regions of Brazil and the world. Several psychrophilic and psychrotrophic microorganisms may be involved, especially species of Clostridium. The objective of the present study was to perform the molecular characterization, through the use of the PCR technique, and the molecular isolation by conventional bacteriology, of the main microorganisms that cause blown pack in refrigerated meat from Brazil, New Zealand and the United Kingdom. Thus, typing techniques were used to differentiate the species and subspecies involved in this type of deterioration. Tirty-six samples of Brazilian blown pack meat, 6 samples from the UK and 12 experimental blown pack samples of venison from the North Island of New Zealand were analyzed. Three pairs of primers, the RFP / RRP, the 16SEF/16SER and the pair EISRF / EISRR were used for C. estertheticum estertheticum and Clostridium estertheticum like, and one for C. gasigenes (16DBF/16DBR). The samples with the PCR results were sent to a microbiology laboratory for conventional isolation of Clostridium estertheticum. It was concluded that Clostridium estertheticum estertheticum is responsible for the deterioration of meat and hence the blown pack in the UK. Samples of blown pack Brazilian meat have Clostridium estertheticum like as primary causal agent. The typing was carried out in isolates and strains - donated by Mirinz Center / Ruakura Agresearch / Hamilton / New Zealand - together with two isolates from Brazil, involved in this type of deterioration. The selected techniques AFLP and RFLP - PCR were able to distinguish species and subspecies of psychrophilic and psychrotrophic clostridia. However, the AFLP showed the highest discriminatory power, being able to distinguish 100% of the species - C. estertheticum, C. frigoris, C. bowmani, C. lacusfryxellense and C. psychrophylum - and also the subspecies C. estertheticum estertheticum, C. estertheticum laramiense, C. estertheticum like k21 and k24. Through the technique of RFLP, it was possible to differentiate the species of clostridia psychrotrophic, psichrophilic and also the subspecies C. estertheticum estertheticum and Clostridium estertheticum like, along with the use of four restriction endonucleases - AluI, CfoI, TaqI and HaeIII. The HaeIII provided greater variety of fragments and the ability to differentiate the species of clostridia psychrophilic and psychrotrophic, whereas TaqI was the only enzyme capable of differentiating the subspecies of C. estertheticum estertheticum and C. estertheticum laramiense of C. estertheticum like. The Brazilian samples isolated fit into the group of Clostridium estertheticum like, although there is no confirmation of the absence of Clostridium estertheticum estertheticum in the country. / A deterioração de carnes refrigeradas embaladas a vácuo acompanhada de grande produção de gás - fenômeno denominado tufamento de embalagens - é considerada uma das principais causas de perdas econômicas da indústria cárnea, em várias regiões do Brasil e do mundo. Diversos microrganismos psicrofílicos e psicrotróficos podem estar envolvidos, destacando-se espécies do gênero Clostridium. Objetivou-se com o presente estudo a caracterização molecular, por meio do emprego da técnica de PCR e o isolamento pela bacteriologia convencional, dos principais microrganismos causadores do tufamento de embalagens de carnes refrigeradas procedentes do Brasil, Nova Zelândia e Reino Unido. Para tanto, foram empregadas técnicas de tipagem visando a diferenciação das espécies e subespécies envolvidas neste tipo de deterioração. Foram analisadas 36 amostras tufadas de carnes brasileiras, 6 amostras tufadas oriundas do Reino Unido e 12 amostras experimentais tufadas de carne de cervo provenientes da Ilha Norte da Nova Zelândia. Foram utilizados três pares de primers, o RFP/RRP, o 16SEF/16SER e o par EISRF/EISRR para C. estertheticum estertheticum e Clostridium estertheticum like e um para C. gasigenes (16DBF/16DBR). As amostras com os resultados positivos ao PCR foram enviadas para a microbiologia convencional para isolamento do Clostridium estertheticum. Concluiu-se que o Clostridium estertheticum estertheticum é responsável pela deterioração das carnes e, consequentemente, pelo tufamento das embalagens no Reino Unido. As amostras tufadas de embalagens de carnes brasileiras têm como principal agente causador o Clostridium estertheticum like. A tipagem foi relizada em cepas e isolados doados pelo Mirinz Centre/ Ruakura AgResearch/ Hamilton/NZ - juntamente a dois isolados brasileiros, envolvidos nesse tipo de deterioração . As técnicas eleitas AFLP e RFLP PCR foram capazes de distinguir as espécies e subespécies de clostrídios psicrofílicos e psicrotróficos, porém, o AFLP apresentou maior poder discriminatório, sendo capaz de diferenciar 100% das espécies C. estertheticum, C. frigoris, C. bowmani, C. lacusfryxellense e C psychrophylum - e também as subespécies - Clostridium estertheticum estertheticum, Clostridium estertheticum laramiense, o Clostridium estertheticum like K21 e Clostridium estertheticum like K24. Por meio da técnica de RFLP foi possível diferenciar as espécies do clostrídio psicrofílicos e psicrotróficos e também as subespécies C. estertheticum estertheticum e Clostridium estertheticum like, utilizando em conjunto as quatro endonucleases de restrição AluI, CfoI, TaqI e HaeIII. A HaeIII proporciona maior variedade de fragmentos e capacidade de diferenciar as espécies de clostrídios psicrofílicos e psicrotróficos. Já a TaqI foi a única enzima capaz de diferenciar as subespécies C. estertheticum estertheticum e C. estertheticum laramiense do C. estertheticum like. As amostras brasileiras isoladas se enquadraram no grupo do Clostridium estertheticum like.