Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-10-03T14:58:49Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1535650 bytes, checksum: 3f7a877b6b568460f4e6f26fa968315f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-03T14:58:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1535650 bytes, checksum: 3f7a877b6b568460f4e6f26fa968315f (MD5) Previous issue date: 2016-03-23 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Para que os inimigos naturais encontrem as plantas e se estabeleçam em uma área de cultivo para fornecer o serviço de controle biológico, eles precisam ser atraídos para o local, sobreviver, reproduzirem-se e serem capazes de predar as pragas presentes nesse cultivo. Geralmente, a atração de inimigos naturais está direta ou indiretamente ligada às necessidades alimentares. Uma vez atraídos para a área, as fontes de alimento no cultivo e arredores devem ser apropriadas para promover o crescimento e estabelecimento das populações desses inimigos naturais. Nosso objetivo foi entender aspectos chave da ecologia alimentar de crisopídeos, predadores generalistas encontrados naturalmente em agroecossistemas e comumente comercializados como agentes de controle biológico. No Capítulo I, avaliamos a atratividade de espécies de plantas aromáticas a Ceraeochrysa cubana Hagen, uma espécie de crisopídeo com ampla distribuição geográfica e que pode ser encontrada em diversos sistemas de cultivo. Adicionalmente, foram testados os efeitos dessas plantas aromáticas na sobrevivência e performance de larvas e adultos de C. cubana, a fim de elucidar a importância dessas plantas para o estabelecimento de populações de crisopídeos. Constatamos que plantas de Ocimum basilicum (manjericão) sem flores e não infestadas foram atrativas para C. cubana, e que as larvas podem sobreviver em O. basilicum por um período de tempo maior em comparação com as outras espécies de plantas aromáticas avaliadas. Adicionalmente, as flores de O. basilicum proporcionaram uma sobrevivência longa para larvas e adultos de C. cubana, em comparação com o controle negativo (água). Os resultados indicam que a utilização de O. basilicum como um componente de diversificação em áreas agrícolas pode ser benéfico para a atração e manutenção de populações de C. cubana para favorecer o controle biológico. No Capítulo II, foi estudada a amplitude de dieta de Chrysoperla rufilabris Burmeister, uma espécie de crisopídeo comumente usada e comercializada como agente de controle biológico, com 16 espécies de afideos, avaliando-se a qualidade dessas espécies para a sobrevivência e o fitness desse predador generalista. Os resultados mostraram que C rufilabris se alimentou de todas as espécies de afideo oferecidas. No entanto, esse crisopídeo se desenvolveu e produziu ovos apenas quando alimentado por sete das 16 espécies avaliadas, estando a maioria destas espécies agrupadas em um mesmo ramo filogenético. Também foi encontrado um forte sinal filogenético para a sobrevivência, consumo de afídeos e produção de ovos de C. ruleabris, indicando que a maioria das espécies apropriadas a C. ruleabris são filogeneticamente próximas, o que demonstra que essa espécie de crisopídeo é menos generalista do que se havia suposto. Assim, C. ruleabris pode não se beneficiar de uma grande amplitude de presas e isso deve ser levado em consideração no planejamento de estratégias de controle biológico que visem utilizar esse crisopídeo. Conclui-se que o conhecimento sobre a ecologia alimentar de agentes de controle biológico é essencial antes da escolha das espécies a serem liberadas ou atraídas e mantidas em uma área cultivada. Nesse sentido, O. basilicum é uma espécie de planta aromática promissora para atrair e manter populações de crisopídeos no campo. Além da atratividade, é importante considerar a filogenia das presas em estudos de amplitude de dieta de predadores generalistas a fim de se obter melhores resultados em programas de controle biológico. / Biological control is a pest management strategy that relies on the action of natural enemies to control the populations of herbivores, minimizing their damage on cultivated areas. For natural enemies to find and establish in a cropping area to provide biological control services they need to be attracted to the area, survive, reproduce, and be capable of preying on the pests present in the crop. Usually, natural enemy attraction is direct or indirectly linked with feeding needs. Once attracted to the area, the food resources in the crop and surroundings must be suitable to promote population growth and establishment of natural enemies populations. Therefore, the aim of this thesis was to understand key aspects of the feeding ecology of green lacewings, generalist predators naturally found in agroecosystems and commonly commercialized as biological control agents. On Chapter I, we assessed the attractiveness of aromatic plant species to Ceraeochrysa cabana Hagen, a lacewing species with a broad geographical range that can be found in several cropping systems. Additionally, we tested the effects of those aromatic plants on survival and performance of larvae and adults of C. cabana, in order to elucidate the importance of such plant species to the establishment of green lacewing populations. We found that non-flowering and uninfested Ocimam basilicam (basil) plants were attractive to C. cabana, and that larvae could survive for a longer period of time in O. basilicam leaves compared to the other aromatic plant species tested. Additionally, O. basilicam flowers promoted a long survival for larvae and adults of C. cabana, compared to the negative control (water). Results indicate that using O. basilicam as a diversification component in cultivated areas may be beneficial to attract and maintain C. cabana populations to support biological control. On chapter II, we studied the diet breadth of Chrysoperla rafilabris Burmeister, a green lacewing commonly used and commercialized as a biological control agent, over 16 aphid species, assessing the quality of those species on survival and fitness of this generalist predator. Results demonstrated that C. rafilabris preyed over all the aphid species, but could develop and produce eggs only in seven species, most of them from the same cluster in a phylogenetic tree. We also found a strong phylogenetic signal for survival, aphid consumption and egg load of C. rafilabris, indicating that most of the species more suitable to C. rufilabris were closely related, which demonstrate that this green lacewing species is less generalist than it was supposed. Thus, C. rufilabris may not benefit from a broad prey range and that has to be taken into consideration when planning biological control strategies using this green lacewing species. In conclusion, knowledge on the feeding ecology of biological control agents is essential before choosing the species to be released or that to be attracted to and to maintain in the cropping system. In this sense, O. basilicum is a promising aromatic plant species to attract and maintain lacewing populations in the field. Additionally to attractiveness, it is important to consider prey phylogeny in the study of generalist predators diet breadth in order to have better results in biological control programs.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Brasília, Instituto de Biologia, Departamento de Biologia Celular, Programa de Pós-graduação em Biologia Molecular, 2014. / Submitted by Tania Milca Carvalho Malheiros (tania@bce.unb.br) on 2016-03-21T13:05:26Z No. of bitstreams: 1 2014_PablineMarinhoVieira_Parcial.pdf: 10665470 bytes, checksum: f1332eb503825366aa2631b295e58808 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2016-03-21T13:45:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_PablineMarinhoVieira_Parcial.pdf: 10665470 bytes, checksum: f1332eb503825366aa2631b295e58808 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-21T13:45:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_PablineMarinhoVieira_Parcial.pdf: 10665470 bytes, checksum: f1332eb503825366aa2631b295e58808 (MD5) / Trichoderma harzianum é um microorganismo de controle biológico eficaz contra várias espécies de patógenos de plantas. Dentre estes, Fusarium solani é um importante causador de prejuízos econômicos na agricultura. Nesse trabalho, através de bibliotecas subtrativas (SSH) e RT-PCR tempo real, foram identificados genes de T. harzianum que estão envolvidos no controle biológico deste fitopatógeno. A análise comparativa de respostas transcricionais em Trichoderma harzianum permitiu uma interpretação abrangente do micoparasitismo, identificou genes marcadores para o biocontrole, e principalmente, de interesse biotecnológico na agricultura. Como os desafios em biotecnologia agrícola incluem identificar genes para estratégias de resistência a estresses bióticos e abióticos em plantas, uma aquaporina identificada nesta biblioteca foi utilizada para a transformação genética de Trichoderma harzianum e Nicotianatabacum (tabaco). Organismos geneticamente modificados com o gene codificador de uma aquaporina foram avaliados em diferentes condições de estresses abióticos (etanol, peróxido de hidrogênio, polietileno-glicol, sorbitol e cloreto de sódio) e biótico (Fusarium solani). Em condições ótimas de crescimento, não foram observadas alterações na germinação ou crescimento em T. harzianum e tabaco. Em ensaios de tolerância a Fusarium solani, linhagens de plantas geneticamente modificadas não apresentaram resistência ao fitopatógeno. Entretanto, nas condições de estresse abióticos avaliadas, aquaporina aumentou a tolerância a estresse salino em ambos os organismos transformados. Sendo assim, nossos resultados confirmam o elevado potencial de T. harzianum como fonte de genes com aplicações promissoras em plantas transgênicas resistentes a estresses abióticos sem alteração fenotípica. / Trichoderma harzianum, a filamentous soil fungus, is an effective biocontrol agent against many plant-pathogen species. Despite its relevance in plant protection, there is a lack of studies concerning its use as a biological control agent against Fusarium solani, which is involved in several crop diseases. In order to provide information about the genes from T. harzianum that are involved in the biocontrol of this pathogen, we have used subtractive library hybridization (SSH) and RT-PCR techniques. Transcriptional responses in Trichoderma harzianum allowed a comprehensive interpretation of my coparasitism, identified biocontrol-related genes, and also genes of biotechnological value. Following its identification in our library, a gene encodinganaquaporinhasbeenusedtoenhancetolerancetobioticandabioticstresses in both Trichoderma harzianum and Nicotiana tabacum plants. Transformants were selected and evaluated underdifferent abiotic (ethanol, hydrogen peroxide, polyethyleneglycol, sorbitol and sodium chloride) andbiotic (Fusarium solani) stresses. Analysis under stress-free condition showed that both Trichoderma harzianum and to bacco plants transformed with aquaporin did not present differences in growth and germination rates when compared with wild type. Furthermore, potential tolerance against Fusarium solani was assessed in plants by challeng in gleaves with the pathogen and no tolerance was observed in all lines tested. However, evaluations under abiotic stresses revealed that both organisms presented tolerance to salt stresses. Our results under scorethe high potential of T. harzianum as a sourceof genes with promising applications in transgenic plants resistant to abiotic stresses without phenotypic alteration.

Orientador: Francisco Jorge Cividanes / Banca: Alexandre de Sene Pinto / Banca; Nilza Maria Martinelli / Resumo: A utilização de plantas herbáceas floríferas no Controle Biológico Conservativo pode atrair e favorecer a presença de inimigos naturais, como os formicídeos. Assim, este estudo visou avaliar a influência de plantas herbáceas floríferas (PHF) e espontâneas (PE) sobre a ocorrência de formigas predadoras e onívoras em algodoeiro colorido. Para isso, determinou-se a composição de espécies, abundância, flutuação populacional e correlação com fatores meteorológicos e comparou-se os índices de diversidade, equitabilidade e similaridade dessas formigas em algodoeiro colorido e nas plantas adjacentes. Foi avaliada uma área de 8.000 m² constituída por cinco blocos de algodoeiro colorido e quatro canteiros cultivados com Fagopyrum esculentum Moench, Lobularia maritima (L.), Tagetes erecta L e PE. Em cada bloco foram instaladas 24 armadilhas tipo alçapão distribuídas no interior dos canteiros e na cultura. As amostragens foram quinzenais, sendo realizadas de março a junho de 2012 e dezembro de 2012 a maio de 2013. As espécies predominantes foram Solenopsis sp., Pheidole oxyops Forel, 1908, Pheidole sp.2, Pheidole sp.1, Brachymyrmex sp., Camponotus melanoticus Emery, 1894 e Dorymyrmex sp. Em F. esculentum observou-se o maior índice de equitabilidade em relação ao algodoeiro, enquanto em T. erecta, L. maritima e PE este índice foi mais elevado no algodoeiro a 1 m da borda. Os maiores índices de diversidade de Shannon-Weaner (H') ocorreram em T. erecta, F. esculentum e plantas espontâneas, ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The flowering herbaceous plants in Conservative Biological Control can attract and promote the presence of natural enemies, like ants. So, this study aims to evaluate the influence of flowering herbaceous plantas (FHP) and weed plants (WP) on the occurrence of predatory and omnivorous ants in colored cotton. For this, the composition of species, abundance, population fluctuation and correlation with meteorological factors was determined and the diversity index, evenness and similarity between these ants in colored cotton and adjacent plants were compared. The experimental area was composed of five blocks with colored cotton and four beds with Fagopyrum esculentum Moech, Lobularia maritima (L.), Tagetes erecta L. and WP, totalizing 8000m2 . In each block 24 pitfall traps were installed and distributed inside the beds and in the crop. The samplings were fortnightly covering the periods from March to June 2012 and December 2012 to May 2013. The predominant species were Solenopsis sp., Pheidole oxyops Forel, 1908, Pheidole sp.2, Pheidole sp.1, Brachymyrmex sp., Camponotus melanoticus Emery, 1894 and Dorymyrmex sp. In Fagopyrum esculentum was observed higher evenness indice than colored cotton while T. erecta, L. maritima and WP the higher indice were in crop distance 1 m from edge. The highest Shannon-weaner (H') indice occurred in T. erecta, F. esculentum and weed plants and there was no significant difference between the diversity indice inside the bed and 1 m from edge. The si... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-05-21T14:15:29Z No. of bitstreams: 1 2013_AnabeleAzevedoLima.pdf: 3543950 bytes, checksum: 6ba8669583b959be92fa864df919b6e5 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-05-21T15:18:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_AnabeleAzevedoLima.pdf: 3543950 bytes, checksum: 6ba8669583b959be92fa864df919b6e5 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-21T15:18:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_AnabeleAzevedoLima.pdf: 3543950 bytes, checksum: 6ba8669583b959be92fa864df919b6e5 (MD5) / O Brasil destaca-se por ser um dos maiores exportadores de produtos agrícolas no mundo e diante dessa realidade a utilização de agrotóxicos impacta tanto o meio ambiente quanto a saúde pública. Uma alternativa a essa prática é a utilização de agentes biológicos no controle de pragas. Um exemplo é a utilização do baculovírus Anticarsia gemmatalis multiple nucleopolyhedrovirus (AgMNPV) no controle da lagarta da soja, Anticarsia gemmatalis, sendo o maior exemplo mundial de sucesso de um vírus utilizado como bioinseticida. Os baculovírus são vírus de DNA fita dupla, específicos de artrópodes. Uma das características apresentada no genoma viral do isolado AgMNPV-2D está na ausência dos genes quitinase (chiA) e catepsina (v-cath). Essa ausência pode ser responsável por não ocorrer a liquefação e a melanização das larvas de A. gemmatalis mortas pela infecção com o AgMNPV-2D. O capítulo I do presente trabalho teve como objetivo analisar o efeito da expressão dessas proteínas em insetos infectados com AgMNPV recombinantes contendo esses genes derivados de dois baculovírus (Choristoneura fumiferana defective nucleopolyhedrovirus - CfDefNPV e Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus - AcMNPV). O vírus recombinante, contendo os genes chiA e v-cath provenientes do baculovírus CfDefNPV, (vAgp2100Cf.chiA/v-cath) foi capaz de promover a liquefação e melanização do corpo das larvas de A. gemmatalis após a morte das mesmas, entretanto, o vírus vAgp2100Ac.chiA/v-cath, construído neste trabalho, não teve o mesmo efeito. Bioensaios com larvas neonatas e de terceiro instar de A. gemmatalis infectadas com o vírus recombinante vAgp2100Cf.chiA/v-cath apresentaram uma maior atividade inseticida. A CL 50 do vírus recombinante foi de 3 (para larvas neonatas) a 4 vezes (para larvas de 3º estágio) menor do que a CL 50 do vírus selvagem. A expressão dos genes chiA e v-cath durante a infecção de células de inseto pelo vírus recombinante foi analisada por qPCR e detectou a presença e aumento de transcritos dos genes a partir de 6 h até 72 h p.i. Outro exemplo à prática de utilização de agentes biológicos no controle de inseto-praga destaca-se o fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae. O capítulo II do presente trabalho propôs avaliar se a expressão de enzimas quitinase do fungo durante a infecção do vírus é capaz de aumentar a patogenicidade viral em larvas de Spodoptera frugiperda. Foi construído um vírus recombinante inserindo o gene de uma quitinase (chi2) do fungo entomopatogênico M. anisopliae no genoma do vírus AcMNPV, para avaliar o efeito da expressão heteróloga na patogenicidade do vírus recombinante. A CL 50 apresentada pelo vírus recombinante sugere um aumento na virulência quando comparado com o vírus selvagem e a quantidade de enzima detectada também apresentou maiores níveis em células de inseto infectadas com o vírus recombinante comparado ao vírus selvagem. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Brazil stands out for being one of the largest exporters of agricultural products in the world, therefore the use of pesticides impacts on both the environment and public health. An alternative to this practice is the use of biological agents to control pests. An example is the use of baculovirus Anticarsia gemmatalis multiple nucleopolyhedrovirus (AgMNPV) in the control of velvetbean caterpillar, A. gemmatalis, which is the greatest global example of successfully using a virus as a bio-insecticide. Baculoviruses are arthropod-specific double-stranded DNA viruses. One of the interesting features of the AgMNPV-2D isolateviral genome is the absence of chitinase (chiA) and cathepsin (v- cath) genes. This absence can be responsible for the lack of liquefaction and larval melanization in A. gemmatalis killed by AgMNPV-2D infection. Chapter I of this study intended to analyze the effect of these proteins expression in insects infected by recombinant AgMNPV containing these genes derived from two baculovirus (Choristoneura fumiferana defective nucleopolyhedrovirus - CfDefNPV e Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus - AcMNPV). The recombinant viruses containing the genes v-cath and chiA from the baculovirus CfDefNPV (vAgp2100Cf.chiA/v-cath) was able to promote the liquefaction and melanization of A. gemmatalis larvae bodies after their death, although the vAgp2100Ac.chiA/v-cath virus prepared in this study, did not present the same effect. Bioassays with third-instar neonate larvae of A. gemmatalis infected with the vAgp2100Cf.chiA/v-cath recombinant virus showed higher insecticidal activity. The LC 50 of the recombinant virus was from 3 (for neonate larvae) to 4 times (for 3rd larval stage) lower than the LC 50 of the wild-type virus. The expression of v-cath and chiA genes during infection of insect cells by the recombinant virus was analyzed by qPCR, which detected both the presence and the increase of gene transcripts from 6 h to 72 h p.i. Another noteworthy example of the practical use of biological agents to control insect pest is the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae. Chapter II of this study aimed to assess whether the expression of fungal chitinase enzymes during viral infection is able to increase viral pathogenicity in larvae of Spodoptera frugiperda. Constructs was made inserting a chitinase gene (chi2) from the entomopathogenic fungus M. anisopliae into the genome of AcMNPV virus, in order to evaluate the effect of heterologous expression in the recombinant virus pathogenicity. The LC 50 presented by the recombinant virus suggests an increase in virulence when compared to wild type virus and the amount of enzyme also showed the highest levels detected in insect cells infected with recombinant virus compared to wild virus.

Submitted by Alisson Mota (alisson.davidbeckam@gmail.com) on 2015-07-22T19:45:47Z No. of bitstreams: 1 Tese - Girlene Soares de Figueirêdo.pdf: 7458867 bytes, checksum: 0a95aefc0abe9034ecaa3b1fed6cda3b (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-23T14:53:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Girlene Soares de Figueirêdo.pdf: 7458867 bytes, checksum: 0a95aefc0abe9034ecaa3b1fed6cda3b (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-23T14:59:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Girlene Soares de Figueirêdo.pdf: 7458867 bytes, checksum: 0a95aefc0abe9034ecaa3b1fed6cda3b (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-23T14:59:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese - Girlene Soares de Figueirêdo.pdf: 7458867 bytes, checksum: 0a95aefc0abe9034ecaa3b1fed6cda3b (MD5) Previous issue date: 2010-08-25 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Guaran´a is one of the most important crops in the state of Amazonas. Commercially, their use is as refrigerant, however, the industry of Guaran´a has been growing and diversifying its products, including the foreign market. The main disease that affects the culture of guarana is anthracnose, and its etiologic agent, is the pathogen Colletotrichum guaranicola. The main form of anthracnose control is the use of chemical fungicides, but in some regions, which have gained the recognition of organic agriculture, this control measure is not appropriate to the needs of production. Several species of genus Trichoderma, are antagonists used effectively in biological control of some plant pathogens, including the genus Colletotrichum. The presence of dsRNAs is common in fungi, being reported in the literature many studies associating them with various aspects of these hosts: hipovirulence morphological changes, the phenotype “ killer”in yeast, and others changes in these microorganisms. The main objective of this research was investigate the presence and influence of dsRNA on the antagonistic potential of Trichoderma spp. against C. guaranicola. We analyzed 100 isolates of Trichoderma spp., and only one presented dsRNA. The species was determined by sequencing the ITS region of rDNA and its micromorphological aspects (optical and electron microscopy) as Trichoderma asperellum. We proceeded to purify this material by column chromatography on cellulose and digestion with nucleases (DNase I and nuclease S1). To analyze the possible interference of these particles in the antagonistic potential of Trichoderma, the dsRNA was eliminated with sodium deoxycholate, added to PDA medium at a concentration of 200 mg / mL. Tests of antagonism in vitro (by the method of pairing in Petri dishes), showed a difference between inbred strains (with and without dsRNA) against the pathogen. In vivo tests, in plants of Mucuna aterrima, showed no statistical difference between the isolates with and without dsRNA. Morphological alterations were observed betweem isolates with and without dsRNA, the absence of dsRNA showed higher mycelial growth and higher production of spores. Based on these results it was concluded that dsRNA present in T. asperellum interfere in its potential antagonist in vitro tests, but not to its performance in vivo tests. / O guaran´a (Paulinia cupana) ´e uma das mais importantes culturas do Estado do Amazonas. Comercialmente, sua utilizac¸ ˜ao ´e maior nos refrigerantes gaseificados, no entanto, a ind´ustria do guaran´a vem crescendo e diversificando seus produtos, inclusive no mercado internacional. A principal doenc¸a que afeta a cultura do guaran´a ´e a antracnose, sendo seu agente etiol´ogico o fitopat´ogeno Colletotrichum guaranicola. A principal forma de controle da antracnose ´e o emprego de fungicidas qu´ımicos, por´em, em algumas regi˜oes, que adquiriram o reconhecimento de cultura orgˆanica, esta medida de controle n˜ao se adequa `as necessidades da produc¸ ˜ao. As esp´ecies do gˆenero Trichoderma, s˜ao antagonistas utilizadas eficazmente no controle biol´ogico de algumas esp´ecies fitopatogˆenicas, incluindo o gˆenero Colletotrichum. A presenc¸a de dsRNAs ´e frequente em fungos, sendo relatada na literatura muitas pesquisas associando-os com v´arios aspectos nestes hospedeiros: fen´otipos hipovirulentos, alterac¸ ˜oes morfol´ogicas, o fen´otipo “killer” em leveduras, ou ainda, a nenhuma alterac¸ ˜ao nestes microrganismos. Esta pesquisa teve por objetivos investigar a presenc¸a e influˆencia de dsRNA sobre o potencial antagˆonico de Trichoderma spp. contra C. guaranicola. Foram analisados 100 isolados de Trichoderma spp., sendo que apenas um apresentou dsRNA. A esp´ecie foi determinada por sequenciamento da regi˜ao ITS do rDNA e seus aspectos micromorfol´ogicos (microscopia ´optica e eletrˆonica de varredura) como Trichoderma asperellum. Procedeu-se a purificac¸ ˜ao deste material por meio de cromatografia em coluna de celulose e a digest˜ao com nucleases (DNAse I e nuclease S1). Para analisar a poss´ıvel interferˆencia destas part´ıculas no potencial antagˆonico dos isolados de Trichoderma, eliminou-se o dsRNA do isolado infectado com a substˆancia desoxicolato de s´odio, adicionada ao meio BDA na concentrac¸ ˜ao de 200 mg/mL. Testes de antagonismo in vitro (pelo m´etodo de pareamento em placa), revelaram diferenc¸a entre as linhagens is´ogenas (com e sem dsRNA) contra o fitopat´ogeno. O teste in vivo, pelo m´etodo de adic¸ ˜ao de esporos de antagonista e fitopat´ogenos em plantas de Mucuna aterrima, n˜ao apresentou diferenc¸a estat´ıstica entre as li-nhagens. Morfologicamente houve alterac¸ ˜oes entre os isolados com e sem dsRNA, sendo que os sem dsRNA, apresentaram maior crescimento micelial e maior produc¸ ˜ao de esporos. Diante dos resultados obtidos concluiu-se que o dsRNA presente em T. asperellum interfere no seu potencial antagonista em testes in vitro, mas n˜ao no seu desempenho em testes in vivo.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-04-05T18:50:23Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1802151 bytes, checksum: 55ced28e2e4f99399e06e35026253dfd (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-05T18:50:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1802151 bytes, checksum: 55ced28e2e4f99399e06e35026253dfd (MD5) Previous issue date: 2005-06-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O interesse por métodos não-químicos de controle de pragas em grãos armazenados vem aumentando, uma vez que os consumidores estão menos tolerantes aos resíduos nos alimentos e há sucessivos relatos de resistência a inseticidas em muitas espécies de insetos de produtos armazenados. O controle biológico surge como uma das alternativas e existem vários casos de sucesso desse método, principalmente quando inserido em programas de manejo integrado de pragas. Pesquisas com o ácaro Acarophenax lacunatus (Cross & Krantz) vêm sendo desenvolvidas e demonstram que sua utilização no controle biológico de coleópteros-praga de produtos armazenados é promissora. Assim, esta pesquisa foi dividida em cinco etapas que abordam estudos básicos com este inimigo natural, visando fornecer subsídios para sua futura liberação em programas de controle biológico em ambientes de armazenamento. A primeira etapa está relacionada com a capacidade de A. lacunatus sobreviver à inanição sob diferentes temperaturas. Foram simuladas situações de escassez de alimento, sendo observado que A. lacunatus conseguiu sobreviver na ausência de alimento por até 108 horas, nas temperaturas de 20, 25 e 28 0C. A segunda etapa avaliou se este ácaro dispersa numa massa de grãos e consegue localizar o hospedeiro Rhyzopertha dominica (Fabricius). Constatou-se a habilidade de A. lacunatus em penetrar até 20 cm de profundidade e localizar ovos de R. dominica em diferentes regiões na massa de grãos, colonizando o ambiente de forma ativa. A terceira etapa consistiu no estudo da biologia de A. lacunatus sobre os hospedeiros Tribolium castaneum (Herbst) e Cryptolestes ferrugineus (Stephens) nas temperaturas 20, 25, 28, 30, 32 e 35 0C. A temperatura influenciou os parâmetros biológicos do ácaro, sendo a taxa intrínseca de crescimento (rm), a taxa líquida reprodutiva (Ro) e a razão sexual diretamente proporcionais ao aumento da temperatura. As maiores progênies (19 indivíduos/fêmea do ácaro em T. castaneum e 15 indivíduos/fêmea do ácaro em C. ferrugineus) foram observadas à temperatura de desenvolvimento. 30 A 0 C, demonstrando quarta que essa temperatura favorece seu etapa abordou um estudo de seleção de linhagens de A. lacunatus, que foram mantidas por sucessivas gerações, isoladamente, sobre os hospedeiros T. castaneum, C. ferrugineus e R. dominica. Teve como objetivo testar a preferência do ácaro por ovos desses coleópteros, em testes mensais, durante nove meses, na tentativa de detectar possíveis mudanças nessa preferência que possam indicar a seleção de linhagens desse ácaro com uma melhor performance sobre estes insetos. Houve uma influência significativa do tempo sobre a taxa de parasitismo, sendo R. dominica o hospedeiro mais parasitado em todas as situações, indicando que esta preferência parece estar fixada geneticamente, uma vez que A. lacunatus vem sendo mantido sobre este hospedeiro desde sua introdução no Brasil. Foi calculada a herdabilidade (h2) para T. castaneum e C. ferrugineus, sendo que este valor foi maior para T. castaneum. Isso indica que a seleção de linhagens desse ácaro com um melhor desempenho sobre T. castaneum pode ser realizada. Já a quinta etapa consistiu no estudo do potencial de parasitismo de A. lacunatus sobre o coleóptero T. castaneum, onde observou-se que o aumento da densidade do ácaro implicou no aumento do número de ovos parasitados, com conseqüente redução das populações desse inseto. Assim, novas informações sobre A. lacunatus são acrescentadas e indicam que sua utilização no controle biológico de T. castaneum, C. ferrugineus e R. dominica pode ser viável. / The interest for non-chemical control methods of stored grain pests is increasing since the consumers are less tolerant about insecticide residues on food and there are reports of insecticide resistance in insects of stored products. The biological control appears as an alternative and there are several success cases of the control method, mainly within integrated pest management programs. Studies with the mite Acarophenax lacunatus (Cross & Krantz) have been carried out and show the potential of its use in the biological control of stored grain beetles. Therefore the present study was divided in five phases encompassing basic investigations with this natural enemy aiming to provide support for its future use in biological control programs in storage facilities. The first phase is related with the capacity of A. lacunatus to survive under starvation at different temperatures. This mite species was able to survive for up to 108 hours at the temperatures of 20, 25 and 28 0C. The second phase focused on assessing the dispersal of this mite species in the grain mass and its ability to locate its host Rhyzopertha dominica (Fabricius). The mite was able to penetrate up to 20 cm deep and locate eggs of R. dominica in different regions of the grain mass efectivelly colonizing the environment. The third phase involved the biology of A. lacunatus on the hosts Tribolium castaneum (Herbst) and Cryptolestes ferrugineus (Stephens) at the temperatures 20, 25, 28, 30, 32 and 35 0C. The temperature affected the biological parameters of the mite with a proportional increase in the intrinsic growth rate (rm) net reproductive rate (Ro) and sex ratio with increased temperature. The greates progenies (19 individuals/female in T. castaneum and 15 individuals/female in C. ferrugineus) were observed at 30 0C temperature showing that this temperature favors the mite development. The fourth phase focused the selection of mite strains maintained for several generations in different hosts (T. castaneum, C. ferrugineus and R. dominica). The objective was to test the host egg preference of each selection line in monthly tests trying to detect changes in preference through time. There was a significant influence of time on the parasitism rate with R. dominica always being the preferred host and indicating that this preference was genetically fixed in the mite population. The heritability (h2) of egg preference for the hosts T. castaneum and C. ferrugineus was calculated and higher values were observed for T. castaneum. This indicates that selection for better performance in T. castaneum is possible. In the fifth phase of the present effort, we investigated the parasitism potential of A. lacunatus in the beetle T. castaneum where an increase in mite density led to an increase in the number of parasitized eggs with a consequent reduction of this insect population. Therefore, new information on A. lacunatus was obtained indicating the viability of its use in biological control programs against T. castaneum, C. ferrugineus and R. dominica.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-06-27T17:46:33Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 647098 bytes, checksum: b268e217f616628b33c7d54bc5890149 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-27T17:46:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 647098 bytes, checksum: b268e217f616628b33c7d54bc5890149 (MD5) Previous issue date: 2001-07-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Com a necessidade de buscar alternativas para o uso de agentes químicos em produtos armazenados, devido ao desenvolvimento de resistência em insetos-praga e à possibilidade de contaminação dos alimentos por resíduos, os programas de erradicação de pragas têm dado maior ênfase ao controle biológico. Em razão do exposto, este trabalho foi dividido em três etapas que abordaram o potencial de parasitismo do ácaro Acarophenax lacunatus (Prostigmata: Acarophenacidae) em cinco espécies de insetos de produtos armazenados. Na primeira etapa, avaliou-se a preferência deste ácaro por ovos dos insetos Rhyzopertha dominica (Coleoptera: Bostrichidae), Dinoderus minutus (Coleoptera: Bostrichidae), Tribolium castaneum (Coleoptera: Tenebrionidae) e Oryzaephilus surinamensis (Coleoptera: Silvanidae). A segunda etapa abordou o estudo do potencial de parasitismo do ácaro em D. minutus em mandioca seca armazenada, e a terceira etapa em R. dominica, T. castaneu m, O. surinamensis e Cryptolestes ferrugineus (Coleoptera: Cucujidae) em trigo parcialmente triturado. Todos os testes foram realizados a 28 o C e escotofase de 24 horas, em câmaras climáticas do tipo B.O.D. O estudo da preferência por ovos foi realizado em dois testes: um sem chance de escolha e outro com chance de escolha, utilizando-se placas de Petri (5 cm de diâmetro), as quais foram divididas em quatro quadrantes. No teste sem chance de escolha, foram colocados, em cada quadrante, cinco ovos de apenas um dos insetos e, no centro da placa, uma fêmea de A. lacunatus em processo de fisogastria. O experimento foi realizado com cada uma das espécies. No teste com chance de escolha, foram utilizados ovos de todas as espécies, que foram distribuídos de forma que cada quadrante só recebesse ovos de um dos insetos. Da mesma forma, no centro da placa foi liberada uma fêmea fisogástrica do ácaro. Em nenhum dos testes o ácaro A. lacunatus parasitou ovos de O. surinamensis. No teste sem chance de escolha não foi observada preferência de A. lacunatus por ovos de nenhum dos outros hospedeiros. Entretanto, no teste com livre escolha, A. lacunatus parasitou mais ovos de R. dominica e D. minutus que de T. castaneum. Nas outras etapas do trabalho, avaliou-se a população final dos insetos (larvas e adultos), o número de ovos parasitados e de ácaros em processo de fisogastria, a taxa instantânea de crescimento (r i ) de A. lacunatus e dos insetos, e a perda de peso dos produtos (mandioca e trigo). Foi observado que o ácaro apresenta potencial biótico maior que o dos hospedeiros R. dominica, D. minutus e T. castaneum. Desta forma, o número de larvas e adultos destes insetos sofreu reduções em relação à testemunha, o que também ocorreu com as perdas de matéria seca ocasionadas pelo ataque dos insetos. Também não foi observado parasitismo em populações do coleóptero O. surinamensis. Pelo número de ovos parasitados de R. dominica, D. minutus, T. castaneum e C. ferrugineus, conclui-se que o ácaro A. lacunatus é um inimigo natural eficaz destes insetos, não sendo, portanto, um parasita específico de R. dominica , como se imaginava. / With the necessity of searching for alternatives to the use of chemical control agents in stored products due to development of insecticide resistance in insect-pests and the possibility of foodstuff contamination by residue, pest eradication programs have been putting more emphasis on biological control. As a consequence, the present work was divided in three phases which aimed to assess the parasitism potential of the mite Acarophenax lacunatus (Prostigmata: Acarophenacidae) in five species of insects of stored products. In the first phase, the mite preference for eggs of Rhyzopertha dominica (Coleoptera: Bostrichidae), Dinoderus minutus (Coleoptera: Bostrichidae), Tribolium castaneum (Coleoptera: Tenebrionidae) and Oryzaephilus surinamensis (Coleoptera: Silvanidae) was assessed. In the second phase, the parasitism potential of the mote species of D. minutus attacking dried stored cassava was evaluated and in the third phase the parasitism potential of the same parasitic species was assessed in R. dominica, T. castaneum, O. surinamensis e Cryptolestes ferrugineus (Coleoptera: Cucujidae) infesting wheat. All of the experiments were carried out under controlled conditions of 28 o C and 24 hours scotophase in climatic chambers of the B.O.D. type. The study of egg preference was carried out in two tests: one without opportunity of choice and other with it using Petri dishes divided in four areas. On the non-choice test five eggs of only one species was placed in each different area and a physogastric female of A. lacunatus was placed in the centre of the Petri dish (5 cm diameter). On the choice test there was only eggs of a single species in each of the four areas within the Petri dish and the same procedure was used for each potential prey species. The mite A. lacunatus did not attack eggs of O. surinamensis in any of the tests. No preference of A. lacunatus by eggs of any host was observed on the non-choice test. However, A. lacunatus attacked more eggs R. dominica and D. minutus than of T. castaneum. In the other phases of the work the final insect population (adults and larvae), egg parasitism, number of mites in physogastry, the instantaneous rate of increase of the mite and the insect populations (r i ) and weight loss of the stored product (wheat or cassava). It was observed that the mite has higher biotic potential than the hosts R. dominica, D. minutus and T. castaneum. Therefore, the number of larvae and adults of these insect species were lower than in the control treatment, what was also observed with the losses in dried matter caused by insect infestation. Again, no parasitism on eggs of O. surinamensis was observed. Based on the egg parasitism of R. dominica, D. minutus, T. castaneum and C. ferrugineus, the mite A. lacunatus is an efficient natural enemy for all of this species and not only to R. dominica, as initially reported. / Dissertação importada do Alexandria

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-16Bitstream added on 2014-06-13T20:32:40Z : No. of bitstreams: 1 fraga_df_me_jabo.pdf: 1036947 bytes, checksum: 765bfbd32f9b458cda31ae6bb29934a4 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O conhecimento do comportamento de infestação dos insetos em sistemas agrícolas facilita as amostragens, economiza tempo sem perder a confiabilidade para a tomada de decisões no sistema de manejo de pragas. Assim o objetivo foi estudar a distribuição vertical e temporal de ovos de Alabama argillacea e de Heliothis virescens, e o parasitismo de ovos por Trichogramma pretiosum em cultivares de algodoeiro. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso, com cinco tratamentos (cultivares DeltaOPAL, FMX-933, FMT-701, FMX-910 e NuOPAL), com oito repetições. As avaliações foram semanais, a partir da emergência das plantas. Para a distribuição vertical, as plantas foram avaliadas nas partes superior, média e inferior, anotando-se o número de ovos. Os ovos de A. argillacea e de H. virescens foram parasitados por Trichogramma pretiosum. Não houve preferência para oviposição por A. argillacea e por H. virescens durante os estágios fenológicos das plantas, tal como o grau de parasitismo por T. pretiosum também não foi influenciado. Quanto à distribuição vertical dos ovos, o terço superior e o médio das plantas foram os mais preferidos para oviposição por A. argillacea nas cultivares NuOPAL, DeltaOPAL e FMX-910, enquanto que H. virescens preferiu ovipositar no terço superior das plantas. T. pretiosum preferiu ovipositar em ovos de A. argillacea presentes no terço superior e médio das plantas, sendo que ovos de H. virescens presentes no terço superior das plantas foram mais parasitados por T. pretiosum / The knowledge of a pest infestation behavior on agricultural areas help the sampling and reduce time without lose confidence on decisions in integrated pest management. This work aimed to study the vertical and temporal distribution of Alabama argillacea and Heliothis virescens eggs, as well as parasitism of its eggs by Trichogramma pretiosum in cotton cultivars. The experimental design was randomized blocks with five treatments with five treatments (cultivars DeltaOPAL, FMX-933, FMT-701 and FMX-910 and NuOPAL) and with eight replicates. Evaluations were performed weekly since plant emergence. For the vertical distribution, plants were divided into three parts, upper, middle and bottom. The number of eggs present in plants was recorded. A. argillacea and H. virescens eggs were parasitized by Trichogramma pretiosum. There was no preference for oviposition by A. argillacea and H. virescens during the plants phenological stages, as well as T. pretiosum parasitism. Concerning the vertical distribution of eggs, the upper and middle parts of the plants were the most preferred for oviposition by A. argillacea on cultivars NuOPAL, DeltaOPAL and FMX-910, and H. virescens preferred to oviposit in the upper part of the plants. T. pretiosum preferred to oviposit in A. argillacea eggs on the upper and middle parts of the plants, and in H. virescens on the upper part of the plants

Orientador: Antonio Carlos Busoli / Banca: Marcos Gino Fernandes / Banca: Nilza Maria Martinelli / Resumo: O conhecimento do comportamento de infestação dos insetos em sistemas agrícolas facilita as amostragens, economiza tempo sem perder a confiabilidade para a tomada de decisões no sistema de manejo de pragas. Assim o objetivo foi estudar a distribuição vertical e temporal de ovos de Alabama argillacea e de Heliothis virescens, e o parasitismo de ovos por Trichogramma pretiosum em cultivares de algodoeiro. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso, com cinco tratamentos (cultivares DeltaOPAL, FMX-933, FMT-701, FMX-910 e NuOPAL), com oito repetições. As avaliações foram semanais, a partir da emergência das plantas. Para a distribuição vertical, as plantas foram avaliadas nas partes superior, média e inferior, anotando-se o número de ovos. Os ovos de A. argillacea e de H. virescens foram parasitados por Trichogramma pretiosum. Não houve preferência para oviposição por A. argillacea e por H. virescens durante os estágios fenológicos das plantas, tal como o grau de parasitismo por T. pretiosum também não foi influenciado. Quanto à distribuição vertical dos ovos, o terço superior e o médio das plantas foram os mais preferidos para oviposição por A. argillacea nas cultivares NuOPAL, DeltaOPAL e FMX-910, enquanto que H. virescens preferiu ovipositar no terço superior das plantas. T. pretiosum preferiu ovipositar em ovos de A. argillacea presentes no terço superior e médio das plantas, sendo que ovos de H. virescens presentes no terço superior das plantas foram mais parasitados por T. pretiosum / Abstract: The knowledge of a pest infestation behavior on agricultural areas help the sampling and reduce time without lose confidence on decisions in integrated pest management. This work aimed to study the vertical and temporal distribution of Alabama argillacea and Heliothis virescens eggs, as well as parasitism of its eggs by Trichogramma pretiosum in cotton cultivars. The experimental design was randomized blocks with five treatments with five treatments (cultivars DeltaOPAL, FMX-933, FMT-701 and FMX-910 and NuOPAL) and with eight replicates. Evaluations were performed weekly since plant emergence. For the vertical distribution, plants were divided into three parts, upper, middle and bottom. The number of eggs present in plants was recorded. A. argillacea and H. virescens eggs were parasitized by Trichogramma pretiosum. There was no preference for oviposition by A. argillacea and H. virescens during the plants phenological stages, as well as T. pretiosum parasitism. Concerning the vertical distribution of eggs, the upper and middle parts of the plants were the most preferred for oviposition by A. argillacea on cultivars NuOPAL, DeltaOPAL and FMX-910, and H. virescens preferred to oviposit in the upper part of the plants. T. pretiosum preferred to oviposit in A. argillacea eggs on the upper and middle parts of the plants, and in H. virescens on the upper part of the plants / Mestre

The family Macrochelidae Vitzthum is one of the most abundant and diverse groups of predatory mites living in excrements or decomposing animals. Some species of this family have shown good potential as biological control agents. Stomoxys calcitrans L. is a serious problem that has been faced by cattle raisers in some Brazilian states, causing significant losses. Musca domestica L. may vector several pathogens that affect humans and animals. The aims of the study reported in this document were the preparation of a taxonomic catalog of the world macrochelid species, to determine the macrochelid species in microhabitats where the stable fly is usually found in commercial cow raising farms in São Paulo State, and to evaluate of the effect of different macrochelid species as control agents of harmful muscid flies. A total of 520 species of 23 genera are reported in the catalog. In total, 1359 specimens were collected from cow manure and litter in different regions of São Paulo State. These represented ten species of three genera and one new species, which was described. In laboratory tests, Macrocheles n. sp. presented higher predation and oviposition rates on larvae of S. calcitrans (23.8 larvae consumed and laid about 4 eggs per day, respectively). For Macrocheles n. sp., total immature development (egg-adult) was completed in 1.3 ± 0.01, 1.3 ± 0.01 and 1.5 ± 0.03 days on eggs of S. calcitrans and M. domestica and on Protorhabditis sp., respectively. Fecundity was higher on Protorhabditis sp. (77.2 ± 5.1 eggs/female) than on S. calcitrans (58.0 ± 5.9) and M. domestica (55.0 ± 5.3). Results of this study suggest that Macrocheles n. sp. is a promising biological control agent of S. calcitrans and M. domestica, and that it could be mass reared with the use of Protorhabditis sp. or eggs of M. domestica. / Macrochelidae Vitzthum é um dos mais abundantes e diversos grupos de ácaros predadores que encontrados em excrementos ou em carcaças de animais em decomposição. Algumas espécies dessa família tem mostrado potencial como agentes de controle biológico. Stomoxys calcitrans L. tem sido um problema sério enfrentado por pecuaristas em alguns estados brasileiros e tem causado perdas significativas no setor pecuarista. Já Musca domestica L. pode ser vetora de várias patógenos de seres humanos e de animais. Os objetivos do estudo relatado neste documento foram a elaboração de um catálogo taxonômico de espécies de Macrochelidae do mundo, determinar as espécies de macroquelídeos encontradas em microhabitats em que a mosca-dos-estábulos é geralmente encontrada nas fazendas do Estado de São Paulo, e avaliar o efeito de diferentes espécies de macroquelídeos como possíveis agentes de controle de moscas nocivas. Um total de 520 espécies de 23 gêneros são relatadas no catálogo. No total, 1359 espécimes foram coletados de esterco de gado e serapilheira em diferentes regiões do Estado de São Paulo. Estes representaram dez espécies de três gêneros e uma nova espécie, que foi descrita. Nos testes em laboratório, Macrocheles n. sp. apresentou maiores taxas de predação e oviposição alimentando-se de larvas de S. calcitrans (23,8 larvas predadas e oviposição de cerca de 4 ovos por dia, respectivamente). Para Macrocheles n. sp., o desenvolvimento da fase imatura (ovo-adulto) foi concluído em 1,3 ± 0,01, 1,3 ± 0,01 e 1,5 ± 0,03 dias alimentando-se de ovos de S. calcitrans, M. domestica e de Protorhabditis sp., respectivamente. A fecundidade foi maior quando alimentado com Protorhabditis sp. (77,2 ± 5,1 ovos / fêmea) do que com S. calcitrans (58,0 ± 5,9) e M. domestica (55,0 ± 5,3). Os resultados deste estudo sugerem que Macrocheles n. sp. é um promissor agente de controle biológico de S. calcitrans e M. domestica e que poderia ser criado de forma massal com o uso de Protorhabditis sp. ou ovos de M. domestica.