Orientador: Maria Valnice Boldrin / Banca: Ângela Regina Araujo / Banca: Danielle Palma de Oliveira / Resumo: O presente trabalho investiga os subprodutos de oxidação e redução dos corantes Sudan III e Disperso Amarelo 9 (DA9) usando os processos de redução e oxidação eletroquímica sobre eletrodo de rede de platina, redução com hidrossulfito de sódio, oxidação com cloro ativo, oxidação com terc-butilhidroperóxido catalisado por ferroporfirina (FeTMPyP) e ação do complexo enzimático S9, com o objetivo de identificar aminas aromáticas carcinogênicas. O corante Sudan III é usado como adulterante em alimentos, e o corante DA9 usado na indústria têxtil e foram escolhidos no presente estudo por ostentar em sua estrutura grupos azo e grupos nitros, respectivamente passíveis de formarem amino derivados. A oxidação eletroquímica de ambos os corantes, foi investigada em potenciais de +1,5V, e as seguintes aminas foram detectadas como subprodutos: 2-naftilamina, 4-aminobifenil, 2-metoxi-5- metilanilina, benzidina, 4,4'-metileno-bis-2-metilanilina, e o precursor fast garnet gbc, para o corante Sudan III e para o corante DA9 foram identificadas as seguintes aminas: anilina, 4,4'-oxidianilina, 3,3'-dimetilbenzidina, 4,4'-metileno-bis-2-metilanilina e o precursor fast garnet gbc. Na redução eletroquímica foi utilizado um potencial de -1,2V para ambos os corantes e os subprodutos identificados foram: 2,6-dimetilanilina, 4,4'- oxidianilina, o-toluidina, benzidina, 4,4'-metileno-bis-2-metilanilina e 4-aminobifenil para o corante Sudan III e para o DA9 foram identificadas os seguintes subprodutos: 2,4- diaminotoluidina, o-toluidina, 2,6-dimetilanilina, 2-nitroanisol, 4-aminobifenil. Para a redução com hidrossulfito de sódio foram identificados: anilina e o-toluidina para o Sudan III e anilina, o-toluidina e 4,4'-metileno-bis-2-metilanilina para DA9. Na cloração química dos corantes não se observou a formação de nenhuma das 25 aminas carcinogênicas usadas como padrão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This work investigates the by products of oxidation and reduction of dyes Sudan III and Disperse Yellow 9 (DA9) using the processes of electrochemical oxidation and reduction on platinum electrode network, reduction with sodium hydrosulphite, oxidation with active chlorine, oxidation with tert-butylhydroperoxide catalyzed by Ironporphyrin (FeTMPyP) and action of the enzyme complex S9, to identify carcinogenic aromatic amines. The dye Sudan III is used as in food adulterate and DA9 dye used in textile industry and in this study were chosen for display in its structure azo groups and nitro groups, respectively, likely to form amino derivatives. The electrochemical oxidation of both dyes, was investigated in potential of +1.5 V, and the following amines were detected as by-products: 2-naphthylamine, 4-aminobiphenyl, 2-methoxy-5-methylaniline, benzidine, 4,4'-methylene-bis-2-methylaniline, and precursory fast Garnet gbc to the dye Sudan III and for the dye DA9 were identified the following amines: aniline, 4,4'- oxydianiline, 3,3'-dimethylbenzidine, 4,4'-methylene-bis-2-methylaniline and precursory fast garnet gbc. Was used in the electrochemical reduction potential of -1.2 V for both dyes and by products identified were: 2,6-dimethylaniline, 4,4 '-oxydianiline, o-toluidine, benzidine, 4,4'-methylene-bis-2-methylaniline and 4-aminobiphenyl to the dye Sudan III and the DA9 were identified the following products: 2,4-diaminotoluidina, o-toluidine, 2,6-dimethylaniline, 2-nitroanisole, 4-aminobiphenyl. For the reduction with sodium hydrosulphite were identified as aniline and o-toluidine for Sudan III and aniline, otoluidine and 4,4'-methylene-bis-2-methylaniline in DA9. In chlorination chemistry of dyes was not observed the formation of any of 25 carcinogenic amines used as standard. However prior to chlorination after electrochemical oxidation of Sudan III formed... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Maria Valnice Boldrin / Banca: Marilda das Dores Assis / Banca: Marcio Fernando Bergamini / Resumo: A tintura de cabelo é um processo adotado por milhões de pessoas, independente da raça, sexo, nacionalidade, religião ou idade. No entanto, os métodos analíticos disponíveis para avaliação destes produtos em formulação comercial, efluentes de salão de beleza, esgotos e águas superficiais são escassos. O presente trabalho investiga o desenvolvimento de um método analítico baseado em cromatografia líquida de alta eficiência com detector de arranjo de diodos para determinação dos corantes: Azul básico 99, Violeta ácido 43, Marrom básico 16, Vermelho básico 76 e Amarelo básico 57, usados em tinturas semipermanentes de cabelo. As melhores condições experimentais para separação dos corantes de cabelo de interesse foram: acetonitrila/água 35:65 (v/v) com adição de 4,0 x 10-2 mol L-1 de líquido iônico tetrafluoroborato de 1-butil-3-metilimidazólio (BMIm-BF4), à fase móvel, vazão: 0,4 mL min-1. Nestas condições experimentais observa-se melhor resolução e definição dos picos presentes nos cromatogramas nos respectivos tempos de retenção: AB 99 (tr =8,80 min), VA 43 (tr =14,78 min), MB 16 (tr =19,10 min), VB 76 (tr =25,08 min) e AB 57 (tr =34,17 min), confirmados pelos respectivos espectros hidrodinâmicos UV-Vis obtidos e comparados com o padrão de cada corante. O uso de liquido iônico como aditivo da fase móvel mostrou-se relevante para a detecção de corantes de cabelo melhorando significativamente a separação e encaudamento dos picos. Curvas analíticas foram construídas para cada corante de cabelo no intervalo de concentração de 1,0x10-7 a 8,0x10-5 mol L-1. O índice de recuperação dos corantes em água fortificadas por cada corante indicou valores entre 84 - 117 %. Amostras da tintura de cabelo comercial (HF 65, Arianor) foram submetidas à análise usando o método proposto e a concentração obtida... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The hair dye is a process used by millions of people regardless of race, sex, nationality, religion or age. However, the analytical methods available for evaluating these products in pharmaceutical formulation effluent salon, sewers and surface waters are scarce. This paper investigates the development of an analytical method based on high performance liquid chromatography with diode array detector for determination of dyes: Basic blue 99, Acid violet 43, Basic brown 16, Basic red 76 and Basic yellow 57 dyes used in semipermanent hair. Optimum conditions for separation of hair dyes of interest were acetonitrile / water 35:65 (v / v) with addition of 40 x 10-3 mol L-1 ionic liquid 1-butyl-3-methylimidazolium tetrafluoroborate (BMIm-BF4), to the mobile phase flow rate: 0,4 ml min-1. Under these experimental conditions is observed better resolution and definition of these peaks in the chromatograms in the respective retention times: 99 AB (tr = 8.80 min) and VA 43 (tr = 14.78 min), 16 MB (tr = 19, 10 min), VB 76 (tr = 25.08 min) and 57 AB (tr = 34.17 min), confirmed by the respective UV-Vis spectra hydrodynamic obtained and compared with the pattern of each dye. The addition of ionic liquid additive as the mobile phase was found to be relevant for the detection of hair dyes significantly improved separation and peak tailing. Curves were constructed for each hair dye in the range of 1x10-7 to 8x10-5 mol L-1. The recovery rate of dyes in fortifield water indicated values between 84-117%. Samples of commercial hair dye (HF 65, Arianor) were analyzed using the proposed method and the concentration obtained for the dyes in the dye indicated the occurrence of AB 99, VA 43, MB 16, VB 76 and AB 57 in a concentration of 4,33 x 10-5, 8,81 x 10-6, 5,86 x 10-6, 1,31 x 10-4 and 1,99 x 10-5 mol L-1, respectively. The analytical method... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Edésio Luiz Simionatto. / Dissertação (Mestrado em Química) - Programa de Pós-Graduação em Química, Centro de Ciências Exatas e Naturais, Universidade Regional de Blumenau, Blumenau.

Os anticonvulsivantes são fármacos bastante utilizados no tratamento da epilepsia. Todavia, sua periculosidade é elevada, visto que há uma grande proximidade entre a faixa terapêutica e a dose tóxica. Assim sendo, a avaliação do perfil cinético dessa classe de substâncias é imprescindível. Entretanto, analisar substâncias em fluidos biológicos não é uma tarefa trivial visto que os analitos estão imersos em matrizes complexas, sendo necessária uma preparação da amostra para retirada de interferentes. Uma opção interessante para realizar extrações diretas é trabalhar com materiais que possuam a capacidade de reter compostos de baixo peso molecular e ao mesmo tempo excluírem proteínas da amostra, como é o caso dos nanotubos de carbono de acesso restrito (RACNTs). Neste trabalho, foi realizada a síntese dos RACNTs por meio do recobrimento dos CNTs comercial com albumina de soro bovino (BSA) para posteriormente utilizá-los como adsorventes (coluna extratora) em um sistema de Cromatografia Líquida multidimensional em modo column switching, para análise direta de fenobarbital, carbamazepina e primidona em plasma sanguíneo humano. Os modelos de quimissorção e Sips foram os que melhores se ajustaram aos dados experimentais nos estudos cinéticos e de equilíbrio, respectivamente. A análise dos cromatogramas obtidos permitiu identificar todos os compostos de interesse devido aos bons valores obtidos de resolução de pico. A faixa analítica testada foi de 2 e 40 µg mL-¹ (R² > 0,99). O limite de quantificação foi de 2 µg mL-¹ para todos os fármacos, ao passo que o limite de detecção assumiu um valor igual a 0,1 µg mL-¹. Com relação à precisão (intra e intercorrida) e exatidão (intra e intercorrida) os analitos apresentaram valores inferiores a 15% e entre -15 e 15%, respectivamente. O método proposto mostrou-se eficiente na extração e separação de fármacos anticonvulsivantes em amostras reais, o que sinaliza sua possível utilização na monitorização terapêutica. / Anticonvulsivant are drugs often used in the treatment of the epilepsy. However, their danger is high, whereas there is a close proximity between the therapeutic range with the toxic dose. Therefore, the evaluation of the kinetic profile of this class of drugs is essential. But, analyze substances in biological fluids is not a trivial task because the analytes are immersed in complex matrices, making it necessary to sample preparation for removal of interfering. An interesting option to make direct extractions is to work with materials that having the capacity to retain low molecular weight while excluding the sample proteins, such as the restricted access carbon nanotubes (RACNTs). In this work, was made the synthesis of RACNTs by recoating of CNTs commercial with bovine serum albumin (BSA) to subsequently use them as adsorbents (extraction column) in a multidimensional Liquid Chromatography system in column switching mode for direct analysis of phenobarbital, carbamazepine and primidone from human blood plasma. The models of chemisorption and Sips were the best fitted to the experimental data in kinetic studies and equilibrium, respectively. It was possible to identify all compounds of interest in the obtained chromatograms, due to the good values of peak resolution. The analytical curve ranges from 2 to 40 mg L-¹ (R² > 0.99) for all the analytes. The limit of quantitation was of 2 mg L-¹ for all drugs, while the limit of detection assumed values equal to 0.1 µg mL-¹. Concerning precision (within and between-day) and accuracy (within and between-day) the analytes presented values less that 15% and between -15 and 15%, respectively. Additionally, the proposed method was efficient in the extraction and separation of anticonvulsivants drugs from real samples, being possible its use in therapy monitoring.

Reprodução eletrostatica / Orientador: Kenneth Elmer Collins / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química / Made available in DSpace on 2018-07-13T20:07:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bonato_PierinaSueli_M.pdf: 7050074 bytes, checksum: 63f44a8be92aa065780bd1dd3d72de81 (MD5) Previous issue date: 1983 / Resumo: A captura de um nêutron pelo núcleo do átomo de bromo, na molécula de CBr4, tem como resultado a quebra de ligações C-Br, devido ao recuo do átomo alvo relacionado com a emissão de fótons gama, ou devldo a Explosão Coulômbica ocasionada pela forte repu!são eletrostática dos íons positivos formados no processo Auger. A reformação de ligações pode dar origem a vários produtos marcados com radiobromo, como C*Br4, C2*Br4, C2*Br6 e *Br2. Na literatura, são usados vários métodos para a separação destas espécies marcadas e os resultados da distribuição de radiobromo nos produtos obtidos, são diferentes em cada um dos trabalhos. O uso de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência tornou possível a separação destas espécies marcadas com radiobromo, para a determinação da distribuição de radioatividade em cada uma delas, bem como verificar a influência de certos fatores sobre estes vaIores . Os valores de rendimento de 95,0% para C*Br4, 3,2% para C2*Br6, 0,2% para C2* Br4 e 1,6% para com um tempo de irradiação de dez minutos, modificaram-se quando este tempo de irradiação ou o tamanho dos cristais irradiados foram alterados. Os resultados alcançados por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência foram comparados com aqueles obtidos usando extração por solventes e evaporação do solvente bromo, como métodos de separação das espécies marcadas. Observou-se no primeiro caso, um aumento no rendimento inorgânico de acordo com o aumento das concentrações de sulfito na fase aquosa, e no segundo caso, uma perda de C*Br4 por volatilização. Estas observações, bem como aqueIas relacionadas com os efeitos da dose de irradiação e tamanho dos cristais irradiados, explicam as dlscrepâncias encontradas na literatura / Abstract: Neutron capture by the nucleus of a bromine atom in a CBr4 molecule results in the breaking af one or more C-Br bonds. This is due to the recoil of the target atom as a result of gamma-ray emission in the excitation of the activated bromine nucleus or to "Coulombic Explosion" caused by the multiple ionization which accompanies the Auger process. Bond reformation can rise to several radiobromine labelled compounds, such as C*Br4, C2*Br4, C2*Br6 and *Br2. The results described in the literature for the distribution of radiobromine among the product species have shown considerable disagreement for solid targets of CBr4. Use of High Performance Liquid Chromatography has made possible the separation of these radiobromine-labelled species and the subsequent determination of radioactivity distribution among these species and to investigate the influence of experimental parameters on these values. Yield values of 95,0% for C*Br4, 3,2% for C2*Br6, 0,2% for C2*Br4 and 1,6% for *Br2 with a irradiation time of ten minutes, are changed when this irradiation time or size of the irradiated crystals is alterated. The results obtained by High Performance Liquid Chromatography have been compared with those obtained by means of the solvent extraction and bromine solvent evaporation. In the first case, an increase is observed in the inorganic yield when the sulfite concentration in the water extraction phase is increased. In the second case, C*Br4 is lost by volatilization during the bromine evaporation. These observations, along with those on the effects of irradiation dose and crystal size, expIain discrepancies found in the liteterature / Mestrado / Quimica Analitica / Mestre em Química

Orientador: Felix Guillermo Reyes Reyes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-09-11T20:56:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lobato_Veronica_D.pdf: 19424184 bytes, checksum: fdb61d7d5f390118b2f0330dc933bb34 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Foi validado um método para o monitoramento de ivermectina em leite destinado ao consumo humano, utilizando cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detector de fluorescência. Após separação da ivermectina da matriz, por extração líquido-líquido, e etapas de purificação do extrato, a mesma foi derivatizada com 1-metilimidazol em meio de N,N-dimetilformamida para a formação de derivado fluorescente, o qual foi determinado por CLAE em fase reversa C18,fase móvel metanol:água (96:4 v/v) e fluxo de 0,7 mL/min. Os sinais de excitação e emissão do detector de fIuorescência foram fixados em 360 e 470 nm, respectivamente. A curva padrão mostrou-se linear no intervalo de 10 a 100 ng de ivermectina/mL. Considerando-se 5 mL de amostra, o limite de quantificação do método foi calculado em 2 ).Lgde ivermectina/L de leite. A taxa de recuperação variou de 70 a 87%, com uma média de 77,9 :t 3,2 %. O coeficiente de variação do método foi de 13% (n=5). Foram analisadas 168 amostras de leite disponíveis ncomércio, das quais 17,8 % apresentaram nível residual acima do limite de determinação do método. Entretanto, nenhuma das amostras apresentou resíduo de ivermectina acima do limite máximo de resíduo (10 ).Lg/L)estabelecido pelo Ministério da Agricultura e Abastecimento do Brasil. Também avaliou-se a cinética de eliminação da ivermectina no leite de bovinos (n=10, peso corpóreo 420 a 595 kg) tratados, por via subcutânea, com uma dose única de 200 ).Lg/kgpc do princípio ativo de uma formulação comercial ¿Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital. / Abstract: A high performance liquid chromatography (HPLC) with fluorescence detector methodology was validated and used for the surveillance of ivermectin residues in milk intended for human consumption. After extraction of the ivermectin by liquid-liquid extraction and purification of the extract, the compound was derivatized with 1-methylimidazol in N,N-dimethyl formamide for the formation of a fluorescent derivative, which was determined by HPLC, reverse phase C18, mobile phase methanol:water (96:4 v/v) and flow rate 0,7 mL/min. The excitation and emission signals of the fluorescence detector where adjusted at 360 and 470 nm, respectively. The calibration curve was linear in the range of 10 to 100 ng ivermectin/mL. Considering a sample of 5 mL, the quantification limit for milk was calculated to be 2 j..lg ivermectin/L. The percentage of recovery varied from 70 to 87%, with an average of 77,9 :!:3,2%. The coefficient of variation of the method was 13% (n=5). Of 168 samples analyzed, 17,8 % presented residue level above the determination limit. Nevertheless, none of them presented residue level above the maximum residue limit (10 j..lg/L) established by the Brazilian Ministry of Agriculture. Also, it was studied the kinetics of elimination of ivermectin in the milk of bovine (n=10, body weigh 420 to 595 kg) treated with a single subcutaneous dose of 200 j..lg/kgof a commercial formulation. Samples of milk were collected during the morning and afternoon periods, up to 30 days after the drug application, and frozen until the drug assay. The main residue eliminated in the milk was the unalterated drug and it was detected in the milk among 13 hours and 20 days after dosing, in a level higher to the limit of determination of the method. The maximum time (Tmax) to reach the maximumconcentration(Cmax) of 47,50 :!: 6,28 47,5 mg/kg was 2 days, with a daily decay of 19.8 %. Considering the total amount of ivermectin eliminated, the main value of excretion was 1047 j..lg, which is equivalent to 1.03 % of the dose applied to the animais ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Orientador: Hérida Regina Nunes Salgado / Banca: Elfrides Eva Scherman Schapoval / Banca: Magali Benjamim de Araújo / Banca: Álvaro José dos Santos Neto / Banca: Marlus Chorilli / Resumo: O orbifloxacino é uma fluorquinolona antimicrobiana de terceira geração aprovada para o uso veterinário em vários países. Este antimicrobiano possui excelente farmacocinética, com biodisponibilidade oral quase completa e é utilizado no tratamento de infecções causadas por bactérias Gram-negativas, incluindo Enterobacteriaceae e espécies Pseudomonas-resistentes e também por micro-organismos Gram-positivos e Mycoplasma sp. Muitos estudos têm demonstrado que o orbifloxacino é eficaz contra diversos patógenos apresentando baixa concentração inibitória mínima. A importância de se desenvolver e validar métodos analíticos para este fármaco é justificada por seu potencial terapêutico e grande emprego em terapias anti-microbianas, assim como pelo conhecimento de que a baixa qualidade dos produtos anti-infecciosos está relacionada ao desenvolvimento de cepas resistentes, como consequência da administração de doses subterapêuticas. Neste trabalho foram desenvolvidos ensaios para a análise qualitativa de orbifloxacino utilizando a espectrofotometria nas regiões do UV/VIS/IV, cromatografia líquida de alta eficiência, análise térmica, cromatografia em camada delgada e outros métodos gerais para caracterização da substância química de referência (SQR) e comprimidos de orbifloxacino. Técnicas analíticas, espectrofotométrica no UV, indicativa de estabilidade por cromatografia líquida de alta eficiência e microbiológicas - difusão em ágar e turbidimétrica foram utilizadas para o desenvolvimento e validação dos métodos para determinação quantitativa deste fármaco na forma farmacêutica... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Orbifloxacin, a new synthetic third-generation fluoroquinolone antimicrobial drug, was developed exclusively for use in veterinary medicine. This antimicrobial agent has an excellent pharmacokinetics with oral bioavailability almost complete and it is used in treatment of infections caused by Gram-negative bacteria, including Enterobacteriaceae and Pseudomonas-resistant species and also by Gram-positive microorganisms and Mycoplasma sp. Many studies have shown that orbifloxacin is effective against many pathogens and has low minimum inhibitory concentration. Analytical methods for quantitative determination of orbifloxacin are important due to its therapeutic potential and wide use in antimicrobial therapy. Moreover, it is known that the poor quality of antibiotic product is direct related to development of resistant strains, as consequence of sub therapeutic doses administration. Thus, it is important to develop efficient analytical methods for quality control commercialized products. In this work were developed methods for qualitative analysis of orbifloxacin using UV/VIS/IR spectrophotometry, high performance liquid chromatography, thermal analysis, thin-layer chromatography and other general methods for characterization of API and tablets of orbifloxacin. Analytical methods such as UV spectrophotometry, stability-indicating high performance liquid chromatography and microbiological - agar diffusion and turbidimetry were developed and validated for quantitation of this drug in tablets. All... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Alberto José Cavalheiro / Co-orientador: Renato Lajarim Carneiro / Banca: Ian Castro-Gamboa / Banca: Monalisa Sampaio Carneiro / Banca: Rafael Victório Carvalho Guido / Banca: Jairo Kenupp Bastos / Resumo: A cana-de-açúcar é a principal cultura agrícola em importância econômica das regiões tropicais, sendo que o Brasil possui a maior área cultivada e em expansão do mundo. As variedades modernas são oriundas principalmente do cruzamento entre Saccharum officinarum e Saccharum spontaneum. Com o desenvolvimento tecnológico dos programas de melhoramento genético, muitas doenças antigas da cana-de-açúcar foram superadas através do desenvolvimento de genótipos resistente. Entretanto, no ano de 2009 o aparecimento da ferrugem alaranjada no estado de São Paulo causou grande prejuízo econômico, porque variedades com características de alta produtividade e resistência à ferrugem marrom, mostraram-se suscetíveis à ferrugem alaranjada. Diante disso, este trabalho teve por objetivo a caracterização micromolecular de genótipos de cana-de-açúcar resistentes e suscetíveis à ferrugem alaranjada, visando à identificação de marcadores moleculares de resistência a esse patógeno. Para isso, empregaram-se LC-DAD-MS e 1H NMR para obtenção de dados analíticos e métodos quimiométricos para análise multivariada. Para a etapa de caracterização, o extrato hidro-alcoólico preparado a partir de 500 mg das folhas de cana-de-açúcar foi fracionado em HPLC-DAD, fornecendo 60 frações que foram analisadas por LC-DAD-MS e 1H NMR. Esta etapa permitiu a identificação de 52 metabólitos, entre aminoácidos, açúcares, derivados do ácido benzoico, ácido hidroxicinâmico e flavonas C e O glicosiladas. Na segunda etapa foram avaliados os fingerprintings metabólicos dos genótipos resistentes (IAC95 5000) e suscetíveis (SP89 1115) empregando LC-DAD e submetidos a PCA. No primeiro planejamento experimental as mudas de ambos os genótipos com 30 dias foram transferidas para câmara de crescimento e mantidas a 25 ºC durante 30 dias. A PCA deste experimento mostrou que o genótipo resistente possui maior correlação com derivados de... / Abstract: Sugarcane is the main agricultural crop in economic importance of tropical regions and Brazil has the largest cultivation acreage in the world. The modern varieties are arising mainly from the crossing of Saccharum officinarum X Saccharum spontaneum. With the technological development of breeding programs, many old diseases affecting sugarcane were overcome through the development of resistant genotypes. However, in 2009 the first appeareance of orange rust in São Paulo State led to huge economic loss, because varieties with characteristics of high yield and resistance to brown rust were susceptible to orange rust. Therefore, this study aimed the micromolecular characterization of the sugarcane genotypes resistant and susceptible to orange rust by employing LC-DAD-MS and 1H NMR as well as analysis of both genotype extracts by HPLC-DAD and multivariate analysis. For the characterization step, the extract prepared from 500 mg of sugarcane leaves employing H2O/MeOH (8:2) was fractioned in 60 fractions and analyzed by LC-DAD-MS and 1H NMR. This step allowed the identification of 52 metabolites, including amino acids, sugars, organic acids, such as benzoic and phenolic, and flavones, out of which 33 are described for the first time in sugarcane. On the second step, the genotypes IAC95 5000 (resistant) and SP89 1115 (susceptible) growing under control conditions and inoculated with Puccinia kuehnii were analyzed by HPLC-DAD e submitted to multivariate analysis by PCA. In the first experimental design, the seedlings of IAC95 5000 and SP89 1115 genotypes with 30 days were maintained in growth room at 25 ºC. The harvest was carried out on 30, 35, 40, 45 and 60 day old seedlings at 6 am and 8 pm. The PCA of this experiment showed that the resistant genotype has the highest correlation of with luteolin derivatives. In the second experimental design, 25 plants were inoculated and 25 were considered as control for each genotype. The seedlings were... / Doutor

Tese de mestrado integrado. Engenharia Química. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2008

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-09-23Bitstream added on 2014-08-13T18:01:03Z : No. of bitstreams: 1 000747617_20151027.pdf: 725875 bytes, checksum: 4bcd3713cefad3270835c752cfad0181 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-11-03T14:39:14Z: 000747617_20151027.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-11-03T14:40:15Z : No. of bitstreams: 1 000747617.pdf: 8116871 bytes, checksum: d44ac767c3e8b04110e2eb76b107355f (MD5) / O presente trabalho tem como objetivo a busca de compostos, que inibem in vitro a enzima acetilcolinesterase (AChE), úteis para o tratamento de doenças neuro-degenerativas crônicas como o mal de Alzheimer. Neste contexto, a espécie Tetrapterys mucronata Cav. (Malpighiaceae) foi selecionada no banco de extratos do NuBBE, devido ao resultado positivo para a inibição in vitro da AChE. Na literatura, esta espécie também é relatada como uma das espécies usadas em menor escala na preparação da bebida Ayahuasca. Dessa forma, foi realizada a análise fitoquímica dos extratos EtOH e aquoso de T. mucronata. Após obtenção do perfil químico dos referidos extratos através da técnica CLAE-DAD, observou-se a presença de taninos, substâncias que interferem nas análises cromatográficas de identificação e isolamento dos demais constituintes do extrato. Para remoção destes interferentes, foram utilizadas as técnicas de extração líquido-líquido e extração em fase sólida (SPE) com poliamida como fase estacionária. A fração obtida livre de taninos (P6) foi analisada pelas técnicas CLAE-DAD-EM e UPLC-TOF-EM, a fim de identificar os constituintes químicos presentes nesta fração previamente descritos na literatura para a família Malpighiaceae. Esta metodologia permitiu a identificação do flavonol catequina. Como não foi possível identificar os demais constituíntes da fração P6, esta foi submetida a purificação em larga escala, utilizando a técnica de MPLC-UV. As frações obtidas por este procedimento foram analisadas por técnicas espectrométricas e como resultado foi possível identificar e caracterizar 17 compostos destes, 5 novos produtos naturais: dois alcaloides, 5'-hidroxi-3'-etilamina-2'-[3-(3-(1H-indol-3-il)1,2-propanodiol]triptamina (6) e 5'-hidroxi-3'-etil-N,N-dimetilamina-2'-[3-(3-(1H-indol-3-il)1,2-propanodiol]triptamina (7) e três derivados de fenantreno 2,6-diidroxi-9,10-diidrofenantreno (13)... / The present work aims at seeking compounds that inhibit in vitro the enzyme acetylcholinesterase (AChE), and might be useful for the treatment of chronic neuro-degenerative diseases such as Alzheimer's. In this context the species Tetrapterys mucronata Cav. (Malpighiaceae) was selected from NuBBE’s bench of extract to be the focus of this work, due to the positive result for the in vitro inhibition of AChE conducted prior to this study. In the literature this species is also reported as a species used a lesser extent in the preparation of Ayahuasca. Thus, it was performed the phytochemical analysis of EtOH and aqueous extracts of T. mucronata. After analysis by HPLC-DAD of these extracts, was observed the presence of polymeric compunds (tannins). Liquid-Liquid Extraction (LLE) and Solid Phase Extraction (SPE) using polyamide as stationary phase were used to remove these interferents. The tanin free fraction (P6) was analyzed by HPLC-DAD-MS and UPLC-TOF-MS techniques in order to identified chemical constituents present in this fraction which had been previosly described in other species of Malpighiaceae family. This methodology led to the identification of catechin. As almost all the compounds present in the fraction could not be identified by the hyphenated techniques mentioned above, the P6 fraction was subjected to large-scale purification steps using MPLC-UV. The fractions obtained by this procedure were analyzed and as results were thus idintified 17 compounds, 5 of them new natural products: two alkaloids, 3-(3-(2-aminoethyl)-5-hydroxy-1H-indol-2-yl)-3-(1H-indol-3-yl)propane-1,2-diol (6) and 3-(3-(2-N,N-dimethyl-aminoethyl)-5-hydroxy-1H-indol-2-yl)-3-(1H-indol-3-yl)propane-1,2-diol (7); three phenanthrene derivatives 2,6-dihydroxy-9,10-dihydrofenanthrene (13), 2,6-dihydroxifenantrene (14) and 7-methyl-2,6-dihydroxifenantrene (17). 12 compounds were described for the first time in Malpighiaceae family: three tryptamine alkaloids...