Cette thèse de maîtrise porte sur la résistance paysanne de l’Ile-à-Vache (Haïti) face au projet de développement écotouristique de l’État sur l’île. Elle s’inscrit au carrefour des sociologies du développement et des mouvements sociaux. Il s’agit d’une recherche qualitative menée à partir d’une étude de cas avec des entretiens et des observations informelles à Ile-à-Vache. D’une part, cette thèse montre que la question foncière était le principal enjeu autour duquel le projet (éco) touristique de l’État ainsi que la résistance induite par cedit projet étaient construits. D’autre part, cette recherche met en évidence la contradiction existante entre la mise en œuvre du projet et sa prétention écotouristique à travers un choix délibéré de l’État d’exclure la population locale, les impacts socio-environnementaux néfastes et sa contribution à la dégradation des conditions matérielles d’existence des paysan.ne.s. Ce qui a occasionné un mouvement de résistance coordonné par KOPI (Konbit peyizan Ilavach) qui a fait un travail de conscientisation au niveau de la population locale sur les enjeux, menaces et dangers du projet afin de parvenir à un engagement collectif d’une part, et un travail de médiatisation qui a donné une visibilité nationale et internationale à cette résistance paysanne, d’autre part. Tout ce processus avait bénéficié de la solidarité des acteurs externes venus principalement de Port-au-Prince. Ainsi, la résistance a choisi de s’exprimer à travers des manifestations qui ont été systématiquement réprimées par la police. Le blocage était aussi une autre forme de protestation qui s’exprimait à travers des actions nocturnes et discrètes. Malgré les tentatives de cooptation et de répression, la résistance paysanne de cette île a réussi à bloquer le projet, une réussite qu’on ne saurait voir de manière isolée puisque le contexte social et politique était également important. Le mouvement national populaire contre le régime au pouvoir qui a provoqué la démission du gouvernement a favorisé ce succès.

Pour pallier aux problèmes d'infertilité masculine, de plus en plus de cliniques de fertilité font appel à l'injection intracytoplasmique d'un spermatozoïde (ICSI) directement dans un ovule. Le gamète mâle peut alors être isolé du testicule, de l'épididyme, ou obtenu après éjaculation. Les risques associés à l'ICSI font l'objet de nombreux débats en ce qui concerne les modifications -en particulier épigénétiques- que cette technique peut induire sur les gamètes et la santé de la progéniture. L'objectif de ma thèse était de cartographier le profil de méthylation d'ADN spermatique dans les différents segments du tractus mâle, de comprendre les mécanismes impliqués dans ces changements, et ultimement évaluer les conséquences que ces marques épigénétiques pourraient avoir sur le développement embryonnaire. Dans le cadre de mon projet, les spermatozoïdes testiculaires et épididymaires ont été purifiés à partir du modèle de souris transgénique (CAG/su9-DsRed2, Acr3-EGFP) dans lequel les gamètes mâles présentent une fluorescence endogène et peuvent être isolés par cytométrie en flux. L'analyse par séquençage bisulfite d'une représentation réduite (RRBS) du méthylome de l'ADN spermatique a mis en évidence un profil de méthylation d'ADN variable au niveau post-testiculaire, les spermatozoïdes de la région proximale de l'épididyme présentant des marques de méthylation d'ADN les plus distinctes des autres régions anatomiques. L'analyse in silico de ces changements de méthylation d'ADN nous a permis de définir que la plupart des gènes ciblés par ces modifications sont associés à des fonctions importantes pour le développement embryonnaire. Afin d'étudier les mécanismes potentiellement impliqués dans ces changements, l'activité des ADN (dé)méthyltransférases a été évaluée dans l'épididyme. Bien que ces enzymes soient détectées au niveau testiculaire et post-testiculaire, leur activité est réduite dans cet organe, mettant ainsi en évidence une cause alternative à ces changements. Grâce à nos analyses de cytométrie en flux, nous avons identifié l'existence de deux populations spermatiques présentant des niveaux de fluorescence CAG-DsRed distincts dans la région proximale de l'épididyme. Ces deux populations ont des profils de méthylation d'ADN significativement différents pour trois gènes d'intérêt et sont sensibles au traitement DNAse. Ceci suggère que l'association d'ADN extracellulaire avec une sous-population spermatique serait responsable du changement du profile de méthylation d'ADN observé dans la région proximale de l'épididyme. La réalisation de ce projet nous a permis 1) de définir l'hétérogénéité du méthylome de l'ADN spermatique au cours de la maturation post-testiculaire à l'aide d'outils de pointe, et 2) d'identifier les sources potentielles de ces changements. En plus de contribuer à l'avancement des connaissances, notre recherche réalisée sur un modèle murin pourrait avoir des implications directes en santé humaine. En effet, l'évaluation du degré de conservation de cette hétérogénéité épigénétique chez l'homme pourrait ultimement améliorer les critères de sélection des spermatozoïdes de la région proximale de l'épididyme utilisés pour l'ICSI et diminuer les risques associés. / The technique, intracytoplasmic sperm injection (ICSI), is applied more and more frequently in infertility clinics to overcome male infertility issues. In that context, spermatozoa can be collected from the testis, epididymis, or from the ejaculate, and directly injected into an egg. However, the risks associated with ICSI are the subject of much debate with regard to the modifications -particularly epigenetic- that this technique can induce on the gametes and the health of the offspring. Therefore, the main objective of my thesis was to map-out the sperm DNA methylation profile in different segments of the male tract to understand the mechanisms involved in these changes, and ultimately to assess the consequences that these epigenetic marks could have on embryonic development. As part of my project, testicular and epididymal spermatozoa were purified from the transgenic mouse model (CAG/su9-DsRed2, Acr3-EGFP) in which male gametes exhibit endogenous fluorescence and can be isolated by flow cytometry. Reduced representation bisulfite sequencing (RRBS) of the sperm DNA methylome showed a variable DNA methylation profile at the post-testicular level, with sperm from the epididymal proximal region exhibiting DNA methylation marks most distinct from other anatomical regions. The in silico analysis of these DNA methylation changes allowed us to define that most of the genes targeted by these modifications are associated with important functions for embryonic development. In order to study the mechanisms potentially involved in these changes, the expression and activity of (de)methyltransferases were assessed in the epididymis. Although these enzymes were detected at the testicular and post-testicular levels, their activity was reduced in this organ, thus highlighting an alternative cause for these changes. Through our flow cytometry analyses, we identified the existence of two sperm populations with distinct CAG-DsRed fluorescence levels in the proximal region of the epididymis. These two populations displayed significantly different DNA methylation profiles for three genes of interest and were sensitive to DNAse treatment. This suggests that the association of extracellular DNA with a sperm subpopulation would be responsible for the change in the DNA methylation profile observed in the proximal region of the epididymis. The achievement of this project allowed us to 1) define sperm DNA methylome heterogeneity during post-testicular maturation using state-of-the-art tools, and 2) identify potential sources of these changes. In addition to contributing to the advancement of knowledge, our research carried out on a mouse model could have direct implications for human health. Indeed, evaluating the degree of conservation of this epigenetic heterogeneity in humans could ultimately improve the selection criteria for spermatozoa from the proximal region of the epididymis used for ICSI and reduce the associated risks.

La présente thèse vise à analyser l'influence duale de l'environnement académique et socio-institutionnel sur l'entrepreneuriat des étudiants dans les pays en développement (PED). Cet objectif global a été décliné en trois objectifs spécifiques qui ont fait l'objet des trois articles scientifiques que contient cette thèse. Le premier article constitue une revue systématique de littérature qui nous a permis d'examiner les études antérieures en vue de : (i) recenser les différents indicateurs qui ont été utilisés dans la littérature pour analyser l'impact de l'éducation à l'entrepreneuriat (EE) dans les PED; (ii) recenser et catégoriser les approches pédagogiques adoptées dans les différents programmes d'EE évalués dans la littérature; (iii) analyser l'effet global dominant de ces différentes approches sur les indicateurs d'impact étudiés ; (iv) élaborer un cadre conceptuel intégrateur qui permet de mieux comprendre comment l'EE affecte l'orientation entrepreneuriale des étudiants dans les PED. Dans le deuxième article, nous avons proposé un cadre d'analyse basé sur la théorie institutionnelle pour analyser l'effet du contexte socio-institutionnel sur les retombées de l'EE dans le contexte spécifique de deux pays africains. Cette étude révèle qu'au-delà de l'EE, le contexte socio-institutionnel constitue aussi un facteur déterminant de l'intention entrepreneuriale des étudiants. Il en ressort également que les institutions informelles ont un effet de contingence tandis que le contexte institutionnel formel joue un rôle complémentaire dans l'impact de l'EE sur l'intention entrepreneuriale des étudiants. Dans le troisième article, nous avons développé un modèle théorique qui combine l'approche institutionnelle et celle des ressources pour expliquer comment les ressources universitaires et l'environnement socio-institutionnel interagissent sur l'engagement entrepreneurial des étudiants pour favoriser leur passage de l'intention à l'action. Le test empirique de ce modèle confirme en partie les résultats du deuxième article en montrant que les composantes normative et cognitive de l'environnement institutionnel contingentent l'impact des ressources universitaires tandis que la composante régulatrice les amplifie. Les résultats de cette étude apportent de nouvelles perspectives qui permettent de mieux comprendre comment les ressources universitaires et les différentes composantes de l'environnement socio-institutionnel interagissent sur l'entrepreneuriat des étudiants. / This thesis aims to analyze the dual influence of the academic and socio-institutional environment on student entrepreneurship in developing countries (DCs). This general objective has been broken down into three specific objectives that have been the focus of the three articles in this thesis. The first article is a systematic review of literature that allowed us to examine previous studies in order to: (i) identify the different indicators that have been used in the literature to analyze the impact of entrepreneurship education (EE) in DCs; (ii) identify and categorize the pedagogical approaches adopted in the different EE programs evaluated in the literature; (iii) analyze the overall dominant effect of these different approaches on the impact indicators studied; (iv) develop an integrative conceptual framework for a better understanding of how EE affects the entrepreneurial orientation of students in DCs. In the second article, we proposed an analytical framework based on the institutional theory to analyze the effect of the socio-institutional context on the impact of EE in the specific context of two African countries. This study reveals that beyond EE, the socio-institutional context also constitutes a determining factor of students' entrepreneurial intention. It also shows that informal institutions have a contingency effect while the formal institutional context plays a complementary role in the impact of EE on students' entrepreneurial intention. In the third article, we developed a theoretical model that combines the institutional and the resource-based view to provide new insights into how university resources and the socio-institutional environment interact on students' entrepreneurial engagement to foster their transition from intention to action. The empirical test of this model partially confirms the results of the second article by showing that the normative and cognitive components of the institutional environment contingent the impact of university resources while the regulatory component amplifies them. The results of this study provide new perspectives that allow for a better understanding of how university resources and the different components of the socio-institutional environment interact on student entrepreneurship.

Environ 500 000 enfants au Canada souffrent de maladies génétiques rares. Chacune de ces pathologies causant divers problèmes de santé et touchant un nombre restreint d'individus, nos connaissances des mécanismes sous-jacents et des possibles approches thérapeutiques sont ainsi limitées. Néanmoins, les progrès actuels des technologies de séquençage de l'ADN permettent désormais de découvrir efficacement de nouveaux gènes impliqués dans les maladies neuronales. Grâce à cette approche, le gène de la Tenascin R (TNR) a récemment été identifié comme étant à l'origine d'une maladie neurologique rare. Jusqu'ici, il a été montré chez un enfant souffrant de troubles du développement neurologique que des mutations de la TNR sont associées à une ataxie cérébelleuse et un retard de développement global. TNR est une glycoprotéine de la matrice extracellulaire exclusivement exprimée dans le système nerveux central. Elle participe à la régulation de l'extension et la régénération de l'axone, mais également à la synaptogenèse, la croissance et la migration neuronales. Néanmoins, nos connaissances du rôle de la TNR dans les processus neurodéveloppementaux se basent sur des travaux réalisés chez des rongeurs, et la fonction de cette protéine au cours du développement du cerveau humain demeure inconnue. L'objectif de mon projet de recherche est d'investiguer le profil développemental de cellules progénitrices neuronales humaines (NPCs) issues du patient mentionné ci-dessus, et de déterminer si les anomalies observées au sein du cerveau humain présentant une mutation de TNR sont liées à une altération de la migration, maturation ou encore intégration fonctionnelle des neurones. Grâce à ces travaux, il sera possible d'acquérir des informations importantes sur la fonction de la TNR dans la migration et la maturation des neurones humains. Ce programme de recherche approfondira également notre compréhension des mécanismes fondamentaux régulant le développement neuronal des NPCs issues de patients, ceci étant essentiel à la conception de stratégies thérapeutiques ainsi qu'à la validation de médicaments. / Approximately 500,000 children in Canada are affected by rare genetic disorders. Each specific disorder causes several health problems and affects a small number of individuals, therefore our knowledge about mechanisms underlying the disease and possible therapeutic interventions are strongly limited. However, the progress in DNA sequencing technologies now provides an effective way to discover new genes involved in neuronal diseases. Using this innovative approach, Tenascin R (TNR) gene has been recently identified as novel rare neurological disease-causing gene. So far, it has been showed, in a child affected by neurodevelopmental disorder, that mutations in TNR correlate with cerebellar ataxia and global development delay. TNR is a member of extracellular matrix glycoproteins and is exclusively expressed in the central nervous system. TNR contributes to the regulation of axon extension and regeneration, but also to synaptogenesis, neuronal growth and migration. However, our knowledge about the role of TNR in different neurodevelopmental processes is based on experimental work performed in rodents, and the function of this protein in human brain development remains unknown. The aim of this research project is to study the developmental profile of human neuronal progenitor cells (NPCs) derived from the above-mentioned patient and control subjects and to determine whether abnormalities observed in the human brain with TNR mutation are linked to affected neuronal migration, maturation or functional integration. This work will provide crucial information on TNR function during migration and maturation of human neurons. This research project will also deepen our understanding of fundamental mechanisms regulating neuronal development of patient-derived NPCs which will be crucial for designing treatment strategies and drug testing/validation.

Pour pallier aux problèmes d'infertilité masculine, de plus en plus de cliniques de fertilité font appel à l'injection intracytoplasmique d'un spermatozoïde (ICSI) directement dans un ovule. Le gamète mâle peut alors être isolé du testicule, de l'épididyme, ou obtenu après éjaculation. Les risques associés à l'ICSI font l'objet de nombreux débats en ce qui concerne les modifications -en particulier épigénétiques- que cette technique peut induire sur les gamètes et la santé de la progéniture. L'objectif de ma thèse était de cartographier le profil de méthylation d'ADN spermatique dans les différents segments du tractus mâle, de comprendre les mécanismes impliqués dans ces changements, et ultimement évaluer les conséquences que ces marques épigénétiques pourraient avoir sur le développement embryonnaire. Dans le cadre de mon projet, les spermatozoïdes testiculaires et épididymaires ont été purifiés à partir du modèle de souris transgénique (CAG/su9-DsRed2, Acr3- EGFP) dans lequel les gamètes mâles présentent une fluorescence endogène et peuvent être isolés par cytométrie en flux. L'analyse par séquençage bisulfite d'une représentation réduite (RRBS) du méthylome de l'ADN spermatique a mis en évidence un profil de méthylation d'ADN variable au niveau post-testiculaire, les spermatozoïdes de la région proximale de l'épididyme présentant des marques de méthylation d'ADN les plus distinctes des autres régions anatomiques. L'analyse in silico de ces changements de méthylation d'ADN nous a permis de définir que la plupart des gènes ciblés par ces modifications sont associés à des fonctions importantes pour le développement embryonnaire. Afin d'étudier les mécanismes potentiellement impliqués dans ces changements, l'activité des ADN (dé)méthyltransférases a été évaluée dans l'épididyme. Bien que ces enzymes soient détectées au niveau testiculaire et post-testiculaire, leur activité est réduite dans cet organe, mettant ainsi en évidence une cause alternative à ces changements. Grâce à nos analyses de cytométrie en flux, nous avons identifié l'existence de deux populations spermatiques présentant des niveaux de fluorescence CAG-DsRed distincts dans la région proximale de l'épididyme. Ces deux populations ont des profils de méthylation d'ADN significativement différents pour trois gènes d'intérêt et sont sensibles au traitement DNAse. Ceci suggère que l'association d'ADN extracellulaire avec une sous-population spermatique serait responsable du changement du profile de méthylation d'ADN observé dans la région proximale de l'épididyme. La réalisation de ce projet nous a permis 1) de définir l'hétérogénéité du méthylome de l'ADN spermatique au cours de la maturation post-testiculaire à l'aide d'outils de pointe, et 2) d'identifier les sources potentielles de ces changements. En plus de contribuer à l'avancement des connaissances, notre recherche réalisée sur un modèle murin pourrait avoir des implications directes en santé humaine. En effet, l'évaluation du degré de conservation de cette hétérogénéité épigénétique chez l'homme pourrait ultimement améliorer les critères de sélection des spermatozoïdes de la région proximale de l'épididyme utilisés pour l'ICSI et diminuer les risques associés. / The technique, intracytoplasmic sperm injection (ICSI), is applied more and more frequently in infertility clinics to overcome male infertility issues. In that context, spermatozoa can be collected from the testis, epididymis, or from the ejaculate, and directly injected into an egg. However, the risks associated with ICSI are the subject of much debate with regard to the modifications -particularly epigenetic that this technique can induce on the gametes and the health of the offspring. Therefore, the main objective of my thesis was to map-out the sperm DNA methylation profile in different segments of the male tract to understand the mechanisms involved in these changes, and ultimately to assess the consequences that these epigenetic marks could have on embryonic development. As part of my project, testicular and epididymal spermatozoa were purified from the transgenic mouse model (CAG/su9-DsRed2, Acr3-EGFP) in which male gametes exhibit endogenous fluorescence and can be isolated by flow cytometry. Reduced representation bisulfite sequencing (RRBS) of the sperm DNA methylome showed a variable DNA methylation profile at the post-testicular level, with sperm from the epididymal proximal region exhibiting DNA methylation marks most distinct from other anatomical regions. The in silico analysis of these DNA methylation changes allowed us to define that most of the genes targeted by these modifications are associated with important functions for embryonic development. In order to study the mechanisms potentially involved in these changes, the expression and activity of (de)methyltransferases were assessed in the epididymis. Although these enzymes were detected at the testicular and post-testicular levels, their activity was reduced in this organ, thus highlighting an alternative cause for these changes. Through our flow cytometry analyses, we identified the existence of two sperm populations with distinct CAG-DsRed fluorescence levels in the proximal region of the epididymis. These two populations displayed significantly different DNA methylation profiles for three genes of interest and were sensitive to DNAse treatment. This suggests that the association of extracellular DNA with a sperm subpopulation would be responsible for the change in the DNA methylation profile observed in the proximal region of the epididymis. The achievement of this project allowed us to 1) define sperm DNA methylome heterogeneity during post-testicular maturation using state-of-the-art tools, and 2) identify potential sources of these changes. In addition to contributing to the advancement of knowledge, our research carried out on a mouse model could have direct implications for human health. Indeed, evaluating the degree of conservation of this epigenetic heterogeneity in humans could ultimately improve the selection criteria for spermatozoa from the proximal region of the epididymis used for ICSI and reduce the associated risks.

INTRODUCTION : La compréhension inférentielle joue un rôle clé en lecture à l’âge scolaire et émergerait dès l’âge de 3 ou 4 ans. Or, malgré sa pertinence pendant la période préscolaire, elle est relativement peu documentée chez les enfants de 3 à 6 ans. Une meilleure description de ses jalons développementaux contribuerait aux connaissances nécessaires pour mieux la mesurer et la stimuler chez les jeunes enfants. OBJECTIFS : La thèse vise à décrire le développement de la compréhension de six types d’inférences causales liées à la grammaire de récit d’une histoire (les réponses internes, le problème, le but, les tentatives de résolution du problème, les prédictions et la solution) en contexte de lecture partagée chez les enfants de 3 à 6 ans. L’objectif 1 consiste à dégager une proposition théorique de la séquence développementale par le biais d’une recension des écrits. À partir des jalons théoriques proposés, l’objectif 2 est de concevoir un outil d’évaluation et d’en déterminer les qualités psychométriques. Avec l’outil, l’objectif 3 est d’en décrire le développement auprès d’enfants âgés de 3 à 6 ans. MÉTHODES : Suivant la recension des écrits, l’outil de lecture partagée Un abri pour Pinson est conçu sur iPad. Pour répondre aux objectifs 2 et 3, les participants sont 121 enfants au développement typique âgés de 3 à 6 ans divisés en trois groupes selon l’âge et le milieu éducatif fréquenté (milieu de garde ou maternelle). RÉSULTATS : Une séquence développementale de la compréhension des inférences causales chez les enfants de 3 à 6 ans est proposée. Dès 3 ans, les enfants démontrent des habiletés inférentielles émergentes, qui s’améliorent significativement avec l’âge. Dès 4 ans, les enfants peuvent inférer les réponses internes, le problème et les prédictions. Vers 5 et 6 ans, les enfants infèrent plus facilement le but, les tentatives de résolution du problème et la solution. Également, avec l’âge, les enfants se rapprochent des cibles attendues en termes de qualité de réponses produites. CONCLUSION : Cette thèse contribue à une meilleure caractérisation d’un pilier important à la compréhension en lecture et ouvre sur des pistes de réflexion quant à la stimulation de cette habileté au préscolaire. / INTRODUCTION: Inferential abilities play a critical role in reading comprehension at school age and emerge between 3 or 4 years of age. Despite its relevance during the preschool period, it is relatively poorly documented in children aged 3-6. A better description of its developmental milestones would contribute to the knowledge needed to better measure and stimulate it in young children. OBJECTIVES: This thesis aims to describe the development of comprehension of six causal inferences in children between 3-6 years old. These inferences target elements of story grammar (i.e. internal responses, problem, goal, attempts to solve the problem, predictions and solution) in the context of a narrative. The first aim is to propose milestones in the development of this ability through a scoping review. The second, based on the theoretical sequence proposed, is to create a dialogic reading task application for iPad and to evaluate its psychometric properties. The third aim is to describe the inferential comprehension development of 3 to 6-year-old by using the dialogic reading task on iPad. METHODS: Following the scoping review, the task Un abri pour Pinson (“A shelter for Pinson”) was created for use on the iPad. To answer objectives 2 and 3, 121 typically developing children from 3-6 years of age are divided into three groups according to age range and program attended (daycare centers or kindergarten). RESULTS: A developmental sequence of the comprehension of six causal inferences targeting elements of story grammar is proposed for children from 3-6 years old. Inferential comprehension emerged early, from 3-4 years old, with considerable inter-individual variability. The ability to infer the problem of the story, the internal response of a character, and predictions were easier starting at age 4. Then, the 5-6 years old were better able to infer the goal, the attempt to solve the problem, and the resolution. Finally, between the ages of 3 and 6, children improved in terms of the quality of response they provided. CONCLUSION: This thesis contributes to a better characterization of an important pillar of reading success. This knowledge will lead to better support educational and intervention strategies with regards to this ability in preschool facilities.

Les maladies mentales sont un phénomène en pleine expansion dans nos sociétés occidentales. Des estimations de l'Organisation Mondiale de la Santé (O.M.S) prévoient que d'ici 2020, la dépression mesurée en DALYs (déficience ajustée par année de survie qui est un indicateur d'années de vie avec une déficience et des années perdues par une mort prématurée) [1] sera la deuxième cause d'invalidité tout âge ou sexe confondu dans le monde ce qui entraînerait un coût exorbitant pour nos sociétés [2]. Investir dans la découverte des causes des maladies mentales ainsi que dans leur traitement représente par conséquent un élément crucial pour conserver la cohésion sociale. Aujourd'hui, l'une des causes les plus probables à l'origine des pathologies mentales semble impliquer une dérégulation de la voie de signalisation neuronale D2R-AKT-GSK-3 au sein du striatum. La première étape de l'étude préclinique des médicaments est le criblage pharmaceutique in-vitro c'est-à-dire un criblage sur cellules et en laboratoire. Ainsi, l'objet de ma maîtrise concerne le développement de modèles d'études in vitro permettant l'étude de la voie de signalisation neuronale D2R-AKT-GSK-3. Compte tenu du manque d'expertise de mon laboratoire d'accueil à l'époque, mon mémoire sera à dominante méthodologique. Tout d'abord, j'ai mis au point un modèle de culture cellulaire de striatum de souris transgéniques sur lamelles. Ceci pour m'assurer que la culture est viable et qu'elle présente les différentes populations neuronales en proportions similaires à ce que l'on trouve chez l'animal. J'ai utilisé cette même culture dans le cadre d'un article édité en 2011 (Swift et al., 2011) afin de prouver que les récepteurs dopaminergiques endogènes peuvent transactiver les récepteurs TrkB endogènes dans les neurones du striatum, phénomène visible via la technique d'Analyse de Distribution d'Intensité Spatiale (SpEDA). Une fois assurée par ces deux résultats que le modèle fonctionne bien et est utilisable dans le cadre d'une étude de stimulation, la seconde étape entreprise a été la mise au point d'une technique de criblage pharmacologique à moyen débit en plaque de 96 puits. Ces résultats me permettent d'envisager que ce modèle est développable et a un véritable potentiel dans le criblage pharmaceutique qui souffre actuellement de nombreuses limitations concernant l'étude des protéines G. En effet, il assure une certaine flexibilité dans l'examen des variables utilisées sans avoir à modifier la trousse de réactifs expérimentale.

Le génome des mammifères contient deux gènes ERK/MAP kinase kinase, soient Mek1 (Map2k1) et Mek2 (Map2k2), qui codent pour des enzymes responsables de l’activation de ERK1/2. Chez la souris, la perte de fonction de Mek1 engendre une mortalité embryonnaire, tandis que les mutants Mek2 survivent sans aucun phénotype apparent. Afin d’élucider les fonctions potentielles associées à MEK2 durant l’embryogenèse, la perte de Mek2 a été étudiée en présence d’une haplo-insuffisance de Mek1. La majorité des embryons Mek1+/-Mek2+/- meurent durant la gestation due à des défauts placentaires affectant les tissus extraembryonnaires. Ainsi, bien que Mek1 joue un rôle prédominant, ces résultats mettre en lumière l’implication de Mek2 durant le développement du placenta. La caractérisation histologique des placentas Mek1+/-Mek2+/- a révélé une diminution de la vascularisation et la formation aberrante de cellules trophoblastiques géantes multinucléées (MTG). Des expériences génétiques de traçage cellulaire in vivo ont démontré que les cellules MTG dérivent d’une différenciation aberrante des SynT-II et que leur formation découle en partie d’un effet cellule autonome. Un second objectif de cette thèse était de mieux caractériser le ou les types cellulaires nécessitant une activation de la voie ERK/MAPK essentielle au développement placentaire. Des analyses génétiques et histologiques ont démontré que la formation des cellules MTG résulte d’une fusion ectopique entre les deux couches de SynT qui participent normalement de façon indépendante à la barrière hématoplacentaire. La barrière hématoplacentaire est constituée d’une double couche de SynT et de cellules dérivées de l’allantoïs, soient les cellules endothéliales et leurs péricytes. La délétion d’un allèle supplémentaire de Mek1 dans l’allantoïs des mutants Mek1+/-Mek2+/- augmente la pénétrance et l’expressivité du phénotype placentaire. De plus, les expériences d’ablation cellulaire in vivo ont permis de démontrer que le développement des SynT-I en une fine couche de cellules multinucléées dépend de la présence de la deuxième couche de SynT. Finalement, par approche de gènes candidats et par analyse de biopuces dans les placentas mutants Mek1Mek2, nous avons montré une expression dérégulée de cibles potentielles de ERK1/2 impliquées dans la déterination, la polarité et la fusion cellulaire, ce qui contribue à la compréhension du phénotype observé. / The mammalian genome contains two ERK/MAP kinase kinase genes, Mek1 and Mek2, which encode dual-specificity kinases responsible for ERK/MAP kinase activation. In the mouse, the loss of Mek1 function causes embryonic lethality, whereas Mek2 mutants survive with a normal lifespan, suggesting that Mek1 rescues the lack of Mek2 function. The first objective of my thesis was to clarify potential functions of Mek2 during mouse embryogenesis. To do, I have analyzed the loss of Mek2 function in the presence of Mek1 haploinsufficiency. Most Mek1+/-Mek2+/- embryos die during gestation from placenta defects affecting extra-embryonic tissues. Thus, even though Mek1 plays a predominant role, these results enlightened the function of Mek2 in placenta development. The histological characterization of Mek1+/-Mek2+/- placentas revealed a diminution of the vascularization and an aberrant formation of multinucleated trophoblast giant (MTG) cells. Genetic experiments on the SynT-II cellular lineage in vivo demonstrated that MTG cells derive from the aberrant SynT-II differentiation and that their formation results from a cell-autonomous effect. The second objective of my thesis was to determine in which cell types the ERK/MAPK activation is essential for placenta development. Genetic analyses combined with histological studies revealed that MTG formation resulted from the ectopic fusion between both layers of SynT, which normally participate in an independent way in the blood-placental barrier. The blood-placental barrier is constituted of a double layer of SynT and by the cells derived from the allantois, the endothelial cells and their perycites. The deletion of both Mek1 alleles in allantois-derived tissues in a Mek1+/-Mek2+/- placenta environment increases the penetrance and the expressivity of the MTG phenotype. These results demonstrate the role of the ERK/MAPK pathway in defined embryonic and extraembryonic cell populations for correct placenta formation. Using mouse genetics, we also demonstrated that the normal development of syncytiotrophoblasts type I into a thin layer of multinucleated cells depends on the presence of the syncytiotrophoblasts type II. Finally, the combined mutations of Mek1 and Mek2 genes alter the expression of several genes involved in cell fate specification, cell fusion and cell polarity that likely explain the underdeveloped placenta and the MTG phenotype seen in Mek1Mek2 mutants.

Ce projet avait comme objectif d'évaluer l'impact de l'alimentation lactée en pré-sevrage sur le développement des génisses et sur les performances en première lactation. Deux traitements ont été mis en place, le premier suivant la recommandation canadienne actuellement en vigueur (20 % de poids vif à la naissance en aliment lacté) et le second offrant du lactoremplaceur à volonté en période de pré-sevrage. Des collectes de données ont été réalisées afin d'obtenir le poids corporel, la circonférence thoracique, la hauteur aux hanches et au garrot ainsi que la largeur aux hanches sur un total de 179 génisses Holstein d'une ferme commerciale de la région de Québec. Les données de lactation ont été récoltées au cours de la première lactation à l'aide du logiciel en place sur la ferme de l'étude. Les résultats du projet ont montré qu'offrir du lactoremplaceur à volonté permet aux génisses d'atteindre un poids corporel plus élevé à 55 jours d'âge et à 11 mois d'âge en comparaison à l'alimentation selon la recommandation canadienne. Le gain moyen quotidien était aussi plus important pour les génisses suivant un régime alimentaire à volonté pour les mêmes périodes. La hauteur aux hanches était significativement supérieure à 55 jours d'âge, au sevrage et à 11 mois d'âge pour les génisses consommant du lactoremplaceur à volonté avec une consommation de plus de 7,5 l/jour. L'abandon d'une des fermes du projet a résulté en un nombre plus faible que prévu de génisses suivies en post-sevrage, ce qui n'a pas permis de conclure sur l'impact des traitements pour la productivité des animaux en lactation. Les résultats du projet indiquent que la différence de croissance des animaux lorsque nourris à volonté persistent après le sevrage, jusqu'à l'approche de la puberté, et ce même si le traitement comparatif correspond à une quantité d'aliment lacté qui est considéré comme répondant aux besoins des animaux. / The objective of this project was to assess the impact of milk replacer feeding in pre-weaning on the development of heifers as well as on the performance of cows in first lactation. Two treatments during the pre-weaning period were compared 1) the current Canadian recommendation and 2) offering ad libitum access to milk replacer. Measured parameters were: body weight, thoracic circumference, withers height, hips height and hips width. A total of 179 Holstein heifers from a commercial farm in the region of Quebec City participated in the study. Lactation data was recorded throughout the entire lactation using the software in place on the study farm. Results showed that ad libitum milk replacer allows heifers to achieve higher body weight at 55 days of age and at 11 months of age compared to the Canadian recommendation. Thus, the average daily gain was also greater for heifers receiving an ad libitum diet for the same periods. Hip height was significantly higher at 55 days of age, at weaning and at 11 months of age for heifers consuming milk replacer ad libitum with a consumption of more than 7.5 l/day. One of the farms of the project quit for post-weaning measurements resulting in less data, which did not make it possible to conclude on the impact of treatments on the productivity of lactating animals. Results from the project confirm that the increase in growth performance is maintained after weaning, up to puberty, even if in the comparative treatment, the offer of milk replacer is considered to meet the animal needs.

Les connaissances des voies moléculaires et cellulaires régulant le développement neuronal dans le cerveau adulte peuvent être utilisées pour mettre au point des stratégies efficaces de thérapie de remplacement cellulaire. L’étude de la dynamique et des mécanismes nécessaires à la neurogenèse adulte, requiert des techniques d’imagerie en temps réel. En outre, il est important de développer des méthodes d'imagerie sans marqueurs. Mon travail vise, en partie, à relever ces défis. Les néo-neurones générés chez l’adulte migrent densément le long des vaisseaux sanguins et des tubes gliaux dans le courant de migration rostral (CMR). Cet alignement peut créer une anisotropie qui peut être détectée en lumière polarisée. J'ai d'abord essayé cette technique pour la détection sans marqueurs des cellules migratrices dans le CMR. Bien que l’imagerie avec la lumière polarisée suscite certaines espérances, elle a toutefois fait apparaître que l'anisotropie des cellules migratrices est très faible et que sa détection est entravée par des signaux de fortes intensités provenant des axones myélinisés se trouvant à proximité. Ensuite, j'ai étudié la migration des neuroblastes marqués viralement pour élucider certains mécanismes nécessaires à leur migration. La signalisation GABAergique joue un rôle important dans la migration neuronale, déterminée par le gradient chlorique trans-membranaire. Ce dernier est, à son tour, contrôlé par KCC2, un co-transporteur responsable de l'extrusion de Cl-. Il est connu que KCC2 est exprimé dans les stades de développement plus avancés. Toutefois, le rôle de KCC2 dans la migration neuronale est inconnu et mes expériences suggèrent que ce co-transporteur est impliqué dans la migration radiale, mais pas tangentielle, de neuroblastes. Enfin, j'ai exploré in vivo comment la plasticité structurelle des néo-neurones générés chez l’adulte dans le bulbe olfactif (BO) est modulée par les odeurs. On ne sait pas comment le fonctionnement du BO s’ajuste à l’environnement olfactif de facon rapide lorsque de nouvelles synapses de néo-neurones ne sont pas encore formées. Mes données in vivo d'imagerie à deux photons complètent les travaux antérieurs de notre laboratoire, révélant une nouvelle forme de plasticité structurale dans le cerveau adulte. Ainsi, en utilisant diverses méthodes d'imagerie j'ai essayé de mieux comprendre la migration et la plasticité des nouveaux neurones dans le cerveau adulte. / The knowledge about molecular and cellular pathways orchestrating neuronal development in the adult brain can be used to build up efficient strategies for cell replacement therapies. Adult neurogenesis is a very dynamic process, and it is crucial to monitor it directly to decipher mechanisms required for neuronal development. Furthermore, it is important to develop label-free imaging methods. My work is, in part, aimed at addressing these challenges. Adult-born neurons migrate densely along blood vessels and glial tubes in the rostral migratory stream (RMS). This alignment may create anisotropy which can be detected in polarized light. I first tried this technique for label-free detection of migratory cells in the RMS. While this imaging may have some promises, it showed that anisotropy in migrating cells is quite low and its detection is hampered by large signals deriving from nearby myelinated axons. I further studied the migration of virally labeled neuroblasts to elucidate some of the mechanisms required for their migration. GABAergic signaling plays an important role in neuronal migration and is defined by transmembrane Cl- gradient. This, in turn is controlled by the Cl- extruding co-transporter KCC2, known to have a late developmental expression. The role of KCC2 in neuronal migration is unknown and my experiments suggest that this co-transporter is involved in the radial, but not tangential migration of neuroblasts. Finally, I explored in vivo the odor-related structural plasticity of adult-born neurons in the olfactory bulb (OB). It remains unknown how OB functioning is adjusted to rapidly changing odor environment when new synapses of adult-born neurons have not yet been formed. My in vivo two-photon imaging data complements the previous work in our lab, revealing altogether a new form of structural plasticity in the adult OB. Thus, using diverse imaging methods I tried to better understand the migration and plasticity of new neurons in the adult brain.