O conhecimento a respeito da composição inorgânica dos tecidos dentários, principalmente das concentrações de cálcio (Ca), fosfato inorgânico (Pi) e flúor (F), é importante uma vez que estes elementos contribuem diretamente no processo de desmineralização e remineralização, no esmalte e na dentina. A análise da composição inorgânica da dentina é necessária tanto em dentes hígidos, para estabelecer padrões de normalidade, quanto em uma comparação entre hígidos e cariados, para verificar as alterações que ocorrem em estados patológicos. Assim, o objetivo deste trabalho foi analisar a composição inorgânica da dentina de dentes permanentes através da análise bioquímica das concentrações dos íons Ca, Pi e F em diferentes camadas na dentina hígida de dentes permanentes e comparar as concentrações de Ca, Pi e F em tecido dentinário cariado e hígido de dentes permanentes. A metodologia utilizada foi a análise bioquímica, através do método colorimétrico para análise das concentrações de Ca e Pi e utilização de um eletrodo específico para análise da concentração de flúor. Este trabalho será apresentado na forma de um artigo científico no qual dois experimentos serão relatados. O objetivo do artigo foi verificar as concentrações dos íons Ca, Pi e F nas camadas interna e externa da dentina hígida e, comparar as concentrações destes elementos na dentina hígida e cariada de dentes permanentes. A partir dos resultados deste trabalho, conclui-se que há uma maior concentração de flúor na camada interna de dentina do que na externa e, também, que há significativamente menores quantidades de cálcio, fosfato inorgânico e flúor na dentina cariada do que na hígida. / The knowledge about the inorganic composition of dental tissues, especially calcium (Ca), inorganic phosphate (Pi) and fluoride (F) is important as these elements contribute directly in the demineralization and remineralization process of enamel and dentin. The analysis of the inorganic composition of dentin is required both in sound dentine, to establish normal patterns, and in a comparison between sound and carious dentine, to verify the changes that occur in pathological states. The objective of this study was to analyze the inorganic composition of dentine in permanent teeth by analyzing ion concentrations of Ca, Pi and F in different layers of dentine and to compare the concentrations of Ca, Pi and F in carious and sound dentine of permanent teeth. The methodology used was biochemical analysis with colorimetric method for Ca and Pi analysis and an electrode for fluoride analysis. This study will be presented as a scientific article in which two experiments were reported to verify ion concentrations of Ca, Pi and F in dentine internal and external layers, and also to compare the concentrations of these elements in sound and carious dentine of permanent teeth. We concluded that there was a higher concentration of fluoride in dentine internal layer than external layer, and also that there were significantly smaller amounts of calcium, inorganic phosphate and fluoride in carious than in sound dentine.

O conhecimento a respeito da composição inorgânica dos tecidos dentários, principalmente das concentrações de cálcio (Ca), fosfato inorgânico (Pi) e flúor (F), é importante uma vez que estes elementos contribuem diretamente no processo de desmineralização e remineralização, no esmalte e na dentina. A análise da composição inorgânica da dentina é necessária tanto em dentes hígidos, para estabelecer padrões de normalidade, quanto em uma comparação entre hígidos e cariados, para verificar as alterações que ocorrem em estados patológicos. Assim, o objetivo deste trabalho foi analisar a composição inorgânica da dentina de dentes permanentes através da análise bioquímica das concentrações dos íons Ca, Pi e F em diferentes camadas na dentina hígida de dentes permanentes e comparar as concentrações de Ca, Pi e F em tecido dentinário cariado e hígido de dentes permanentes. A metodologia utilizada foi a análise bioquímica, através do método colorimétrico para análise das concentrações de Ca e Pi e utilização de um eletrodo específico para análise da concentração de flúor. Este trabalho será apresentado na forma de um artigo científico no qual dois experimentos serão relatados. O objetivo do artigo foi verificar as concentrações dos íons Ca, Pi e F nas camadas interna e externa da dentina hígida e, comparar as concentrações destes elementos na dentina hígida e cariada de dentes permanentes. A partir dos resultados deste trabalho, conclui-se que há uma maior concentração de flúor na camada interna de dentina do que na externa e, também, que há significativamente menores quantidades de cálcio, fosfato inorgânico e flúor na dentina cariada do que na hígida. / The knowledge about the inorganic composition of dental tissues, especially calcium (Ca), inorganic phosphate (Pi) and fluoride (F) is important as these elements contribute directly in the demineralization and remineralization process of enamel and dentin. The analysis of the inorganic composition of dentin is required both in sound dentine, to establish normal patterns, and in a comparison between sound and carious dentine, to verify the changes that occur in pathological states. The objective of this study was to analyze the inorganic composition of dentine in permanent teeth by analyzing ion concentrations of Ca, Pi and F in different layers of dentine and to compare the concentrations of Ca, Pi and F in carious and sound dentine of permanent teeth. The methodology used was biochemical analysis with colorimetric method for Ca and Pi analysis and an electrode for fluoride analysis. This study will be presented as a scientific article in which two experiments were reported to verify ion concentrations of Ca, Pi and F in dentine internal and external layers, and also to compare the concentrations of these elements in sound and carious dentine of permanent teeth. We concluded that there was a higher concentration of fluoride in dentine internal layer than external layer, and also that there were significantly smaller amounts of calcium, inorganic phosphate and fluoride in carious than in sound dentine.

O conhecimento a respeito da composição inorgânica dos tecidos dentários, principalmente das concentrações de cálcio (Ca), fosfato inorgânico (Pi) e flúor (F), é importante uma vez que estes elementos contribuem diretamente no processo de desmineralização e remineralização, no esmalte e na dentina. A análise da composição inorgânica da dentina é necessária tanto em dentes hígidos, para estabelecer padrões de normalidade, quanto em uma comparação entre hígidos e cariados, para verificar as alterações que ocorrem em estados patológicos. Assim, o objetivo deste trabalho foi analisar a composição inorgânica da dentina de dentes permanentes através da análise bioquímica das concentrações dos íons Ca, Pi e F em diferentes camadas na dentina hígida de dentes permanentes e comparar as concentrações de Ca, Pi e F em tecido dentinário cariado e hígido de dentes permanentes. A metodologia utilizada foi a análise bioquímica, através do método colorimétrico para análise das concentrações de Ca e Pi e utilização de um eletrodo específico para análise da concentração de flúor. Este trabalho será apresentado na forma de um artigo científico no qual dois experimentos serão relatados. O objetivo do artigo foi verificar as concentrações dos íons Ca, Pi e F nas camadas interna e externa da dentina hígida e, comparar as concentrações destes elementos na dentina hígida e cariada de dentes permanentes. A partir dos resultados deste trabalho, conclui-se que há uma maior concentração de flúor na camada interna de dentina do que na externa e, também, que há significativamente menores quantidades de cálcio, fosfato inorgânico e flúor na dentina cariada do que na hígida. / The knowledge about the inorganic composition of dental tissues, especially calcium (Ca), inorganic phosphate (Pi) and fluoride (F) is important as these elements contribute directly in the demineralization and remineralization process of enamel and dentin. The analysis of the inorganic composition of dentin is required both in sound dentine, to establish normal patterns, and in a comparison between sound and carious dentine, to verify the changes that occur in pathological states. The objective of this study was to analyze the inorganic composition of dentine in permanent teeth by analyzing ion concentrations of Ca, Pi and F in different layers of dentine and to compare the concentrations of Ca, Pi and F in carious and sound dentine of permanent teeth. The methodology used was biochemical analysis with colorimetric method for Ca and Pi analysis and an electrode for fluoride analysis. This study will be presented as a scientific article in which two experiments were reported to verify ion concentrations of Ca, Pi and F in dentine internal and external layers, and also to compare the concentrations of these elements in sound and carious dentine of permanent teeth. We concluded that there was a higher concentration of fluoride in dentine internal layer than external layer, and also that there were significantly smaller amounts of calcium, inorganic phosphate and fluoride in carious than in sound dentine.

O objetivo do estudo foi avaliar, in vitro, a influência da fotobiomodulação (PBM) na, viabilidade e migração, relacionados à acetilação das histonas, e na diferenciação de células-tronco da polpa de dentes permanentes humanos (hDPSCs); e, in vivo, sua influência no reparo radicular de molares de ratos com necrose pulpar e rizogênese incompleta. hDPSCs foram caracterizadas e utilizadas nos experimentos de três artigos científicos. A PBM foi empregada utilizando-se laser diodo InGaAlP (100mW, 660nm, 3J/cm2, energia total por aplicação 1J em 10s). Em todos os experimentos in vitro os grupos foram divididos de acordo com o uso da PBM e os intervalos de irradiação foram de 6 horas. A viabilidade destas células foi avaliada pelo ensaio de MTT e a migração pelo scratch. A acetilação das histonas das hDPSCs foi avaliada por imunofluorescência. Para avaliar o potencial de diferenciação e a deposição de tecido mineralizado, foram utilizados os meios adipogênico, condrogênico e osteogênico, complementado pelo ensaio de atividade ALP, em modelo 3D, em gel de agarose 0,3%. Nos ensaios de diferenciação também foi avaliada a condição nutricional (regular: 10% SFB; ou déficit: 5%SFB). Os resultados do MTT, scratch e da acetilação das histonas foram obtidos em até 24 horas e nos ensaios de diferenciação foram analisados em 7 e 14 dias. Para o experimento in vivo, molares inferiores de ratos Wistar foram expostos ao meio bucal por 3 semanas e, após, tratados com pasta antibiótica por uma semana. A seguir, os canais foram irrigados e divididos em 6 grupos (n=6): MTA; coágulo sanguíneo (CS); hDPSC; MTA+PBM; CS+PBM; hDPSC+PBM. Dois grupos não foram expostos ao meio bucal: Dente hígido+PBM (n=6), Dente hígido (controle positivo, n=3); e um grupo foi mantido exposto durante todo o período experimental: Dente necrótico (controle negativo, n=3). Durante 30 dias as irradiações foram feitas com intervalos de 24 horas. Após, os ratos foram eutanasiados e realizou-se avaliação histológica e imunohistoquímica. Os dados obtidos foram tabulados e analisados estatisticamente. A PBM aumentou a viabilidade das células (P<0.001). No ensaio de scratch o grupo PBM acelerou o fechamento do ferida até 12 horas (P<0.001) e esta fechou em 18 horas, sendo mais rápido que o controle (P<0.05). A PBM aumentou a acetilação das histonas (P<0.001); Após 14 dias, a PBM intensificou a diferenciação nos três meios empregados e na atividade ALP, comparado com os controles (P<0.05). No estudo in vivo, o controle negativo apresentou infiltrado de neutrófilos maior do que os demais grupos (P<0.05). Os grupos Controle negativo, Dente hígido e Dente hígido+PBM apresentaram menos condensação fibrosa (P<0.05). Todos os grupos formaram mais tecido mineralizado que o controle negativo (P<0.05). PBM+MTA, +CS ou +hDPSC formaram mais tecido mineralizado que os grupos não irradiados (P<0.05). MTA+PBM induziu apicificação (P<0.05). A marcação para BSP confirmou os achados histológicos relacionados a formação de tecido mineralizado e as hDPSCs, com e sem PBM, exibiram maior porcentagem de células positivas para BSP. Conclui-se que a PBM desempenhou papel importante, in vitro, aumentando a diferenciação, viabilidade e migração celular que estão relacionados a acetilação das histonas. Além disso, a PBM pode ser uma alternativa de tratamento adjuvante para dentes permanentes com necrose pulpar e rizogênese incompleta favorecendo o reparo radicular. / The aim of this study was to evaluate, in vitro, the influence of photobiomodulation (PBM) on viability and migration, related to histone acetylation, and differentiation of human dental pulp stem cells (hDPSCs); and, in vivo, its influence on the root repair of rat molars with pulp necrosis and open apex. The hDPSCs were characterized and used in the experiments of three scientific papers. The PBM was applied using InGaAlP diode laser (100mW, 660nm, 3J / cm2, total energy per application 1J in 10s). In all in vitro experiments, the groups were divided according to the use of PBM, with 6-hour irradiation intervals. The viability of these cells was assessed by MTT assay and migration by scratch. The histone acetylationof hDPSCs was evaluated by immunofluorescence. To evaluate the potential for differentiation and deposition of mineralized tissue, adipogenic, chondrogenic and osteogenic mediums were used, complemented by the ALP activity assay in 3D model, in 0.3% agarose gel. In differentiation assays, the nutritional status was also evaluated (regular: 10% FBS; or deficit: 5% FBS). The MTT, scratch and histone acetylation results were obtained until 24 hours, and the differentiation assays were analyzed at 7 and 14 days. For the in vivo experiment, lower molars of Wistar rats were exposed to oral environment for 3 weeks and then treated with antibiotic paste for one week. Next the root canals were irrigated and divided into 6 groups (n=6): MTA; BC (blood clot); hDPSC; healthy tooth+PBM; MTA+PBM; BC+PBM; hDPSC+PBM. In hDSPC groups, 1% agarose gel scaffold was used for cell support. Two groups were not exposed to the oral environment: healthy tooth+PBM (n=6), healthy tooth (positive control, n=3); and one stayed exposed during the role experimental period: necrotic tooth (negative control, n=3). For 30 days the irradiations were done at 24-hour intervals. Thereafter, the rats were euthanized and histological and immunohistochemical evaluations were performed. Data were tabulated and statistically analyzed. PBM increased cell viability (P<0.001). In the scratch assay, the PBM group accelerated wound closure up to 12 hours (P<0.001) and closed at 18 hours, being faster than the control (P<0.05). PBM increased histone acetylation (P<0.001). After 14 days, PBM improved the differentiation in the three mediums employed and the ALP activity, compared to the controls (P<0.05). In the in vivo study, the negative control had greater neutrophil infiltrate than the other groups (P<0.05). Negative Control, Healthy tooth and Healthy tooth+PBM groups presented less fibrous condensation (P<0.05). All groups formed more mineralized tissue than the negative control (P<0.05). PBM+MTA, +BC or +hDPSC formed more mineralized tissue than non-irradiated groups (P<0.05). MTA+PBM induced inoculation (P<0.05). BSP labeling confirmed the histological findings related to mineralized tissue formation and hDPSCs, with and without PBM, exhibited a higher percentage of BSP-positive cells. It is concluded that PBM played an important role, in vitro, increasing differentiation, viability and cell migration that are related to histone acetylation. Moreover, the PBM may be an adjutant treatment alternative for permanent teeth with pulp necrosis and open apex, favoring root repair.

O objetivo do estudo foi avaliar, in vitro, a influência da fotobiomodulação (PBM) na, viabilidade e migração, relacionados à acetilação das histonas, e na diferenciação de células-tronco da polpa de dentes permanentes humanos (hDPSCs); e, in vivo, sua influência no reparo radicular de molares de ratos com necrose pulpar e rizogênese incompleta. hDPSCs foram caracterizadas e utilizadas nos experimentos de três artigos científicos. A PBM foi empregada utilizando-se laser diodo InGaAlP (100mW, 660nm, 3J/cm2, energia total por aplicação 1J em 10s). Em todos os experimentos in vitro os grupos foram divididos de acordo com o uso da PBM e os intervalos de irradiação foram de 6 horas. A viabilidade destas células foi avaliada pelo ensaio de MTT e a migração pelo scratch. A acetilação das histonas das hDPSCs foi avaliada por imunofluorescência. Para avaliar o potencial de diferenciação e a deposição de tecido mineralizado, foram utilizados os meios adipogênico, condrogênico e osteogênico, complementado pelo ensaio de atividade ALP, em modelo 3D, em gel de agarose 0,3%. Nos ensaios de diferenciação também foi avaliada a condição nutricional (regular: 10% SFB; ou déficit: 5%SFB). Os resultados do MTT, scratch e da acetilação das histonas foram obtidos em até 24 horas e nos ensaios de diferenciação foram analisados em 7 e 14 dias. Para o experimento in vivo, molares inferiores de ratos Wistar foram expostos ao meio bucal por 3 semanas e, após, tratados com pasta antibiótica por uma semana. A seguir, os canais foram irrigados e divididos em 6 grupos (n=6): MTA; coágulo sanguíneo (CS); hDPSC; MTA+PBM; CS+PBM; hDPSC+PBM. Dois grupos não foram expostos ao meio bucal: Dente hígido+PBM (n=6), Dente hígido (controle positivo, n=3); e um grupo foi mantido exposto durante todo o período experimental: Dente necrótico (controle negativo, n=3). Durante 30 dias as irradiações foram feitas com intervalos de 24 horas. Após, os ratos foram eutanasiados e realizou-se avaliação histológica e imunohistoquímica. Os dados obtidos foram tabulados e analisados estatisticamente. A PBM aumentou a viabilidade das células (P<0.001). No ensaio de scratch o grupo PBM acelerou o fechamento do ferida até 12 horas (P<0.001) e esta fechou em 18 horas, sendo mais rápido que o controle (P<0.05). A PBM aumentou a acetilação das histonas (P<0.001); Após 14 dias, a PBM intensificou a diferenciação nos três meios empregados e na atividade ALP, comparado com os controles (P<0.05). No estudo in vivo, o controle negativo apresentou infiltrado de neutrófilos maior do que os demais grupos (P<0.05). Os grupos Controle negativo, Dente hígido e Dente hígido+PBM apresentaram menos condensação fibrosa (P<0.05). Todos os grupos formaram mais tecido mineralizado que o controle negativo (P<0.05). PBM+MTA, +CS ou +hDPSC formaram mais tecido mineralizado que os grupos não irradiados (P<0.05). MTA+PBM induziu apicificação (P<0.05). A marcação para BSP confirmou os achados histológicos relacionados a formação de tecido mineralizado e as hDPSCs, com e sem PBM, exibiram maior porcentagem de células positivas para BSP. Conclui-se que a PBM desempenhou papel importante, in vitro, aumentando a diferenciação, viabilidade e migração celular que estão relacionados a acetilação das histonas. Além disso, a PBM pode ser uma alternativa de tratamento adjuvante para dentes permanentes com necrose pulpar e rizogênese incompleta favorecendo o reparo radicular. / The aim of this study was to evaluate, in vitro, the influence of photobiomodulation (PBM) on viability and migration, related to histone acetylation, and differentiation of human dental pulp stem cells (hDPSCs); and, in vivo, its influence on the root repair of rat molars with pulp necrosis and open apex. The hDPSCs were characterized and used in the experiments of three scientific papers. The PBM was applied using InGaAlP diode laser (100mW, 660nm, 3J / cm2, total energy per application 1J in 10s). In all in vitro experiments, the groups were divided according to the use of PBM, with 6-hour irradiation intervals. The viability of these cells was assessed by MTT assay and migration by scratch. The histone acetylationof hDPSCs was evaluated by immunofluorescence. To evaluate the potential for differentiation and deposition of mineralized tissue, adipogenic, chondrogenic and osteogenic mediums were used, complemented by the ALP activity assay in 3D model, in 0.3% agarose gel. In differentiation assays, the nutritional status was also evaluated (regular: 10% FBS; or deficit: 5% FBS). The MTT, scratch and histone acetylation results were obtained until 24 hours, and the differentiation assays were analyzed at 7 and 14 days. For the in vivo experiment, lower molars of Wistar rats were exposed to oral environment for 3 weeks and then treated with antibiotic paste for one week. Next the root canals were irrigated and divided into 6 groups (n=6): MTA; BC (blood clot); hDPSC; healthy tooth+PBM; MTA+PBM; BC+PBM; hDPSC+PBM. In hDSPC groups, 1% agarose gel scaffold was used for cell support. Two groups were not exposed to the oral environment: healthy tooth+PBM (n=6), healthy tooth (positive control, n=3); and one stayed exposed during the role experimental period: necrotic tooth (negative control, n=3). For 30 days the irradiations were done at 24-hour intervals. Thereafter, the rats were euthanized and histological and immunohistochemical evaluations were performed. Data were tabulated and statistically analyzed. PBM increased cell viability (P<0.001). In the scratch assay, the PBM group accelerated wound closure up to 12 hours (P<0.001) and closed at 18 hours, being faster than the control (P<0.05). PBM increased histone acetylation (P<0.001). After 14 days, PBM improved the differentiation in the three mediums employed and the ALP activity, compared to the controls (P<0.05). In the in vivo study, the negative control had greater neutrophil infiltrate than the other groups (P<0.05). Negative Control, Healthy tooth and Healthy tooth+PBM groups presented less fibrous condensation (P<0.05). All groups formed more mineralized tissue than the negative control (P<0.05). PBM+MTA, +BC or +hDPSC formed more mineralized tissue than non-irradiated groups (P<0.05). MTA+PBM induced inoculation (P<0.05). BSP labeling confirmed the histological findings related to mineralized tissue formation and hDPSCs, with and without PBM, exhibited a higher percentage of BSP-positive cells. It is concluded that PBM played an important role, in vitro, increasing differentiation, viability and cell migration that are related to histone acetylation. Moreover, the PBM may be an adjutant treatment alternative for permanent teeth with pulp necrosis and open apex, favoring root repair.

O objetivo do estudo foi avaliar, in vitro, a influência da fotobiomodulação (PBM) na, viabilidade e migração, relacionados à acetilação das histonas, e na diferenciação de células-tronco da polpa de dentes permanentes humanos (hDPSCs); e, in vivo, sua influência no reparo radicular de molares de ratos com necrose pulpar e rizogênese incompleta. hDPSCs foram caracterizadas e utilizadas nos experimentos de três artigos científicos. A PBM foi empregada utilizando-se laser diodo InGaAlP (100mW, 660nm, 3J/cm2, energia total por aplicação 1J em 10s). Em todos os experimentos in vitro os grupos foram divididos de acordo com o uso da PBM e os intervalos de irradiação foram de 6 horas. A viabilidade destas células foi avaliada pelo ensaio de MTT e a migração pelo scratch. A acetilação das histonas das hDPSCs foi avaliada por imunofluorescência. Para avaliar o potencial de diferenciação e a deposição de tecido mineralizado, foram utilizados os meios adipogênico, condrogênico e osteogênico, complementado pelo ensaio de atividade ALP, em modelo 3D, em gel de agarose 0,3%. Nos ensaios de diferenciação também foi avaliada a condição nutricional (regular: 10% SFB; ou déficit: 5%SFB). Os resultados do MTT, scratch e da acetilação das histonas foram obtidos em até 24 horas e nos ensaios de diferenciação foram analisados em 7 e 14 dias. Para o experimento in vivo, molares inferiores de ratos Wistar foram expostos ao meio bucal por 3 semanas e, após, tratados com pasta antibiótica por uma semana. A seguir, os canais foram irrigados e divididos em 6 grupos (n=6): MTA; coágulo sanguíneo (CS); hDPSC; MTA+PBM; CS+PBM; hDPSC+PBM. Dois grupos não foram expostos ao meio bucal: Dente hígido+PBM (n=6), Dente hígido (controle positivo, n=3); e um grupo foi mantido exposto durante todo o período experimental: Dente necrótico (controle negativo, n=3). Durante 30 dias as irradiações foram feitas com intervalos de 24 horas. Após, os ratos foram eutanasiados e realizou-se avaliação histológica e imunohistoquímica. Os dados obtidos foram tabulados e analisados estatisticamente. A PBM aumentou a viabilidade das células (P<0.001). No ensaio de scratch o grupo PBM acelerou o fechamento do ferida até 12 horas (P<0.001) e esta fechou em 18 horas, sendo mais rápido que o controle (P<0.05). A PBM aumentou a acetilação das histonas (P<0.001); Após 14 dias, a PBM intensificou a diferenciação nos três meios empregados e na atividade ALP, comparado com os controles (P<0.05). No estudo in vivo, o controle negativo apresentou infiltrado de neutrófilos maior do que os demais grupos (P<0.05). Os grupos Controle negativo, Dente hígido e Dente hígido+PBM apresentaram menos condensação fibrosa (P<0.05). Todos os grupos formaram mais tecido mineralizado que o controle negativo (P<0.05). PBM+MTA, +CS ou +hDPSC formaram mais tecido mineralizado que os grupos não irradiados (P<0.05). MTA+PBM induziu apicificação (P<0.05). A marcação para BSP confirmou os achados histológicos relacionados a formação de tecido mineralizado e as hDPSCs, com e sem PBM, exibiram maior porcentagem de células positivas para BSP. Conclui-se que a PBM desempenhou papel importante, in vitro, aumentando a diferenciação, viabilidade e migração celular que estão relacionados a acetilação das histonas. Além disso, a PBM pode ser uma alternativa de tratamento adjuvante para dentes permanentes com necrose pulpar e rizogênese incompleta favorecendo o reparo radicular. / The aim of this study was to evaluate, in vitro, the influence of photobiomodulation (PBM) on viability and migration, related to histone acetylation, and differentiation of human dental pulp stem cells (hDPSCs); and, in vivo, its influence on the root repair of rat molars with pulp necrosis and open apex. The hDPSCs were characterized and used in the experiments of three scientific papers. The PBM was applied using InGaAlP diode laser (100mW, 660nm, 3J / cm2, total energy per application 1J in 10s). In all in vitro experiments, the groups were divided according to the use of PBM, with 6-hour irradiation intervals. The viability of these cells was assessed by MTT assay and migration by scratch. The histone acetylationof hDPSCs was evaluated by immunofluorescence. To evaluate the potential for differentiation and deposition of mineralized tissue, adipogenic, chondrogenic and osteogenic mediums were used, complemented by the ALP activity assay in 3D model, in 0.3% agarose gel. In differentiation assays, the nutritional status was also evaluated (regular: 10% FBS; or deficit: 5% FBS). The MTT, scratch and histone acetylation results were obtained until 24 hours, and the differentiation assays were analyzed at 7 and 14 days. For the in vivo experiment, lower molars of Wistar rats were exposed to oral environment for 3 weeks and then treated with antibiotic paste for one week. Next the root canals were irrigated and divided into 6 groups (n=6): MTA; BC (blood clot); hDPSC; healthy tooth+PBM; MTA+PBM; BC+PBM; hDPSC+PBM. In hDSPC groups, 1% agarose gel scaffold was used for cell support. Two groups were not exposed to the oral environment: healthy tooth+PBM (n=6), healthy tooth (positive control, n=3); and one stayed exposed during the role experimental period: necrotic tooth (negative control, n=3). For 30 days the irradiations were done at 24-hour intervals. Thereafter, the rats were euthanized and histological and immunohistochemical evaluations were performed. Data were tabulated and statistically analyzed. PBM increased cell viability (P<0.001). In the scratch assay, the PBM group accelerated wound closure up to 12 hours (P<0.001) and closed at 18 hours, being faster than the control (P<0.05). PBM increased histone acetylation (P<0.001). After 14 days, PBM improved the differentiation in the three mediums employed and the ALP activity, compared to the controls (P<0.05). In the in vivo study, the negative control had greater neutrophil infiltrate than the other groups (P<0.05). Negative Control, Healthy tooth and Healthy tooth+PBM groups presented less fibrous condensation (P<0.05). All groups formed more mineralized tissue than the negative control (P<0.05). PBM+MTA, +BC or +hDPSC formed more mineralized tissue than non-irradiated groups (P<0.05). MTA+PBM induced inoculation (P<0.05). BSP labeling confirmed the histological findings related to mineralized tissue formation and hDPSCs, with and without PBM, exhibited a higher percentage of BSP-positive cells. It is concluded that PBM played an important role, in vitro, increasing differentiation, viability and cell migration that are related to histone acetylation. Moreover, the PBM may be an adjutant treatment alternative for permanent teeth with pulp necrosis and open apex, favoring root repair.

O conhecimento dos mecanismos celulares envolvidos nos fenômenos orgânicos fisiológicos e/ou patológicos, poderá conduzir a diagnósticos clínicos mais precisos, tratamentos mais direcionados e prognósticos mais favoráveis. Considerando esta premissa, foi objetivo deste estudo avaliar por meio de reação imunohistoquímica a presença ou ausência do vascular endothelial growth factor receptor-2 (VEGFR-2) em células endoteliais pulpares de dentes decíduos e permanentes jovens humanos, assim como a distribuição da sua imuno-marcação. A amostra foi constituída de nove dentes decíduos e quatro dentes permanentes jovens, selecionados de indivíduos de ambos os sexos, com idade entre 5 e 10 anos e 11 e 14 anos, respectivamente. Os espécimes foram fixados em formol diluído a 10% com tampão fosfato 0,1 M por 24 horas e descalcificados com solução de Ana Morse. Após, os mesmos foram processados e incluídos em parafina. Realizaram-se cortes de 5 µm de espessura. Uma lâmina de cada amostra foi corada pela técnica de hematoxilina e eosina (H&E) para análise histológica e as demais foram submetidas à reação imunohistoquímica enzimática. Nesta, utilizou-se como anticorpo primário o anti-h VEGFR-2 na diluição de 1:100 e anticorpo secundário biotinilado na diluição/proporção pré-estabelecidas pelo fabricante. Após o processamento das lâminas, os campos microscópicos mais significativos foram capturados e analisados qualitativamente quanto à presença ou ausência do VEGFR-2 nas células endoteliais pulpares, assim como à distribuição da imuno-marcação Os resultados observados mostraram que tanto os dentes decíduos quanto os dentes permanentes jovens apresentaram, especificamente, as células endoteliais pulpares imuno-marcadas para o VEGFR-2. Entretanto, verificou-se que nem todas apresentaram a mesma distribuição de marcação, sendo esta nos dentes decíduos mais evidente próxima à região subodontoblástica. As células endoteliais da polpa dos dentes permanentes jovens demonstraram no mesmo espécime estudado, ausência e presença de marcação endotelial, entretanto esta se apresentou de forma mais uniforme. Levando-se em consideração as limitações encontradas neste estudo, sugere-se que os dentes decíduos apresentam uma capacidade de resposta maior das células endoteliais pulpares ao anti-h VEGFR-2 quando comparados aos dentes permanentes.

O conhecimento dos mecanismos celulares envolvidos nos fenômenos orgânicos fisiológicos e/ou patológicos, poderá conduzir a diagnósticos clínicos mais precisos, tratamentos mais direcionados e prognósticos mais favoráveis. Considerando esta premissa, foi objetivo deste estudo avaliar por meio de reação imunohistoquímica a presença ou ausência do vascular endothelial growth factor receptor-2 (VEGFR-2) em células endoteliais pulpares de dentes decíduos e permanentes jovens humanos, assim como a distribuição da sua imuno-marcação. A amostra foi constituída de nove dentes decíduos e quatro dentes permanentes jovens, selecionados de indivíduos de ambos os sexos, com idade entre 5 e 10 anos e 11 e 14 anos, respectivamente. Os espécimes foram fixados em formol diluído a 10% com tampão fosfato 0,1 M por 24 horas e descalcificados com solução de Ana Morse. Após, os mesmos foram processados e incluídos em parafina. Realizaram-se cortes de 5 µm de espessura. Uma lâmina de cada amostra foi corada pela técnica de hematoxilina e eosina (H&E) para análise histológica e as demais foram submetidas à reação imunohistoquímica enzimática. Nesta, utilizou-se como anticorpo primário o anti-h VEGFR-2 na diluição de 1:100 e anticorpo secundário biotinilado na diluição/proporção pré-estabelecidas pelo fabricante. Após o processamento das lâminas, os campos microscópicos mais significativos foram capturados e analisados qualitativamente quanto à presença ou ausência do VEGFR-2 nas células endoteliais pulpares, assim como à distribuição da imuno-marcação Os resultados observados mostraram que tanto os dentes decíduos quanto os dentes permanentes jovens apresentaram, especificamente, as células endoteliais pulpares imuno-marcadas para o VEGFR-2. Entretanto, verificou-se que nem todas apresentaram a mesma distribuição de marcação, sendo esta nos dentes decíduos mais evidente próxima à região subodontoblástica. As células endoteliais da polpa dos dentes permanentes jovens demonstraram no mesmo espécime estudado, ausência e presença de marcação endotelial, entretanto esta se apresentou de forma mais uniforme. Levando-se em consideração as limitações encontradas neste estudo, sugere-se que os dentes decíduos apresentam uma capacidade de resposta maior das células endoteliais pulpares ao anti-h VEGFR-2 quando comparados aos dentes permanentes.

O conhecimento dos mecanismos celulares envolvidos nos fenômenos orgânicos fisiológicos e/ou patológicos, poderá conduzir a diagnósticos clínicos mais precisos, tratamentos mais direcionados e prognósticos mais favoráveis. Considerando esta premissa, foi objetivo deste estudo avaliar por meio de reação imunohistoquímica a presença ou ausência do vascular endothelial growth factor receptor-2 (VEGFR-2) em células endoteliais pulpares de dentes decíduos e permanentes jovens humanos, assim como a distribuição da sua imuno-marcação. A amostra foi constituída de nove dentes decíduos e quatro dentes permanentes jovens, selecionados de indivíduos de ambos os sexos, com idade entre 5 e 10 anos e 11 e 14 anos, respectivamente. Os espécimes foram fixados em formol diluído a 10% com tampão fosfato 0,1 M por 24 horas e descalcificados com solução de Ana Morse. Após, os mesmos foram processados e incluídos em parafina. Realizaram-se cortes de 5 µm de espessura. Uma lâmina de cada amostra foi corada pela técnica de hematoxilina e eosina (H&E) para análise histológica e as demais foram submetidas à reação imunohistoquímica enzimática. Nesta, utilizou-se como anticorpo primário o anti-h VEGFR-2 na diluição de 1:100 e anticorpo secundário biotinilado na diluição/proporção pré-estabelecidas pelo fabricante. Após o processamento das lâminas, os campos microscópicos mais significativos foram capturados e analisados qualitativamente quanto à presença ou ausência do VEGFR-2 nas células endoteliais pulpares, assim como à distribuição da imuno-marcação Os resultados observados mostraram que tanto os dentes decíduos quanto os dentes permanentes jovens apresentaram, especificamente, as células endoteliais pulpares imuno-marcadas para o VEGFR-2. Entretanto, verificou-se que nem todas apresentaram a mesma distribuição de marcação, sendo esta nos dentes decíduos mais evidente próxima à região subodontoblástica. As células endoteliais da polpa dos dentes permanentes jovens demonstraram no mesmo espécime estudado, ausência e presença de marcação endotelial, entretanto esta se apresentou de forma mais uniforme. Levando-se em consideração as limitações encontradas neste estudo, sugere-se que os dentes decíduos apresentam uma capacidade de resposta maior das células endoteliais pulpares ao anti-h VEGFR-2 quando comparados aos dentes permanentes.

Os dentifrícios são veículos fundamentais para a aplicação dos fluoretos. Estudos em dentes humanos e bovinos têm mostrado que os fluoretos podem apresentar efeitos diversos na prevenção e na progressão do desgaste dentário erosivo (DDE). No entanto, pouco se sabe sobre seu efeito em dentes decíduos. Objetivo: 1) Avaliar o efeito preventivo de dentifrícios fluoretados por meio da intensidade de reflexão da superfície especular (IRS), da microdureza de superfície (MDS) e da perda da superfície calculada (PSC) utilizando um modelo inicial de erosão/abrasão; 2) avaliar por meio de perfilometria a perda de superfície (PS) em um modelo de erosão/abrasão avançado e 3) comparar esse efeito preventivo entre os dentes permanentes (DP) e dentes decíduos (dd). Material e Métodos: Amostras de esmalte de dentes permanentes (n = 100) e decíduos (n = 100) foram aleatoriamente divididos em cinco grupos (n = 20) de acordo com os dentifrícios testados: G1 – dentifrício placebo (0ppm), G2 – dentifrício com NaF (controle positivo, 1500ppm, Crest®, P & G), G3 - dentifrício anti-erosão com AmF-NaF-SnCl (1400ppm, elmex Erosion Protection®, GABA - Colgate), G4 - dentifrício com SnF (1100ppm, Sensodyne Repair&Protect®, GSK), G5 - dentifrício anti-erosão com NaF para crianças (1450ppm, Sensodyne ProNamel Junior®, GSK) Metade de cada superfície de esmalte foi coberta com resina à base de metacrilato para criar uma área hígida de referência. As amostras foram então submetidas a ciclos de erosão/abrasão, cinco no protocolo inicial e mais 25 para o protocolo avançado, totalizando 30 ciclos para este último protocolo. Em cada ciclo, as amostras foram incubadas em saliva artificial por 1h hora, submetidas ao desafio erosivo (3min; ácido cítrico 1%; pH 3.6; a 25 ° C) e à abrasão (2min de imersão no slurry; 50 movimentos de escovação; 200 g). Os efeitos das duas co-variáveis "dente" e "dentifrício" foram analisados através do teste ANOVA e as comparações entre os dentifrícios foram realizadas por meio do teste de Kruskal-Wallis e entre os tipos de dente (DP e dd) utilizando o teste de Wilcoxon, com nível de significância de 5%. Resultados: No protocolo inicial, considerando os resultados de MDS, as amostras do grupo do dentifrício placebo apresentaram valores significativamente menores para os ‘DP’ do que os outros grupos (p<0.05), no entanto sem diferença entre os dentifrícios fluoretados. Para os ‘dd’, o dentifrício placebo (G1) e o dentifrício com SnF (G4) também mostraram valores significativamente menores do que os outros grupos (p<0.05) Nos resultados de IRS, o dentifrício com SnF (G4) apresentou valores menores em ambos os tipos de dente. Além disso, os dentes decíduos apresentaram significativamente maiores valores de IRS que os dentes permanentes, exceto no grupo do dentifrício anti-erosão com AmF-NaF-SnCl (G3). Os dentes decíduos apresentaram maior PSC do que dentes permanentes, exceto no G3. No protocolo avançado de erosão/abrasão os dentes decíduos (dd) mostraram PS significativamente maior do que os dentes permanentes (DP) em todos os grupos (p <0.001). Os valores médios de PS de cada grupo foram: G1 DP 18.18μm (± 3.98), dd 25.65μm (± 9.21); G2 DP 14.76μm (± 2.82), dd 18.11μm (± 3.92); G3 DP 12.62μm (± 5.29), dd 15.61μm (± 6.70); G4 DP 17.12μm (± 2.24), dd 23.41μm (± 7.9); G5 DP 13.24μm (± 1.29), dd 18.28μm (± 8.96). Conclusões: No protocolo de erosão/abrasão inicial dentes decíduos apresentaram valores mais baixos MDS, valores de IRS mais elevados e maior PSC do que os dentes permanentes durante o experimento. O dentifrício anti-erosão com NaF para crianças apresentou os menores valores de PSC em ambos os dentes permanentes e decíduos, com um melhor efeito preventivo. No protocolo avançado o dentifrício anti-erosão com AmF-NaF-SnCl apresentou o melhor efeito preventivo contra desgaste erosivo nos dentes permanentes. Em dentes decíduos os dentifrícios com NaF (G2), anti-erosão com AmF-NaF-SnCl (G3) e anti-erosão com NaF para crianças (G5) mostraram efeito semelhante. / Toothpastes are key vehicles for fluorides application. Studies have shown that various fluorides have different preventive effect on erosive tooth wear (ETW) progression. Little is known about their effect on deciduous teeth. Aim: 1) To evaluate the preventive effect of the toothpastes through surface specular reflection intensity (SRI), surface microhardness (SMH) and calculated surface loss (CSL) in an initial erosion/abrasion model; 2) to evaluate through profilometry the surface loss (SL) in a severe erosion/abrasion model and 3) to compare this preventive effect between permanent teeth (PT) and deciduous teeth (dt). Material and Methods: Enamel samples of permanent (n=100) and deciduous teeth (n=100) were randomly divided into five groups according to toothpastes tested (n=20). G1 – placebo toothpaste (0ppm), G2 – NaF toothpaste (positive control, 1500ppm, Crest®, P&G), G3 – AmF-NaF-SnCl antierosion toothpaste (1400ppm, elmex Erosion Protection®, GABA – Colgate), G4 – SnF toothpaste (1100ppm, Sensodyne Repair®, GSK), G5 – NaF antierosion toothpaste for children (1450ppm, Sensodyne ProNamel Junior®, GSK). Half of enamel sample surfaces were covered with methacrylate-based resin to create a sound reference area. The samples were submitted to erosion-abrasion cycles, 5 in initial protocol and more 25 in severe protocol, totalizing 30 cycles at the end. In each cycle samples were incubated in artificial saliva (1h), submitted to erosive challenge (3min; 1% citric acid; pH3.6; at 25°C) and to toothbrush abrasion (2min immersion in slurry; 50 strokes; 200g) The effects of the two covariables “tooth” and “toothpaste” were analyzed by ANOVA Comparisons among toothpastes were evaluated using Kruskal-Wallis-tests and between PT and dt using Wilcoxon’s rank sum test. Results: In initial protocol, considering the SMH results, placebo toothpaste showed significantly lower SMH values in PT than the other toothpastes (p<0.05), with no differences between the toothpastes. In dt, placebo and G4 also showed significantly different values than the other groups (p<0.05). In SRI results, SnF toothpaste (G4) showed lower erf values in both PT and dt. Deciduous teeth presented significantly higher SRI than permanent (p<0.05), except on AmF-NaF-SnCl antierosion group (G3). Deciduous teeth presented generally higher CSL than PT, except for G3. In the severe protocol deciduous teeth (dt) showed significant higher SL than permanent teeth (PT) in all groups (p<0.001). The mean values of SL of each group were: G1 PT 18.18(±3.98), dt 25.65(±9.21); G2 PT 14.76(±2.82), dt 18.11(±3.92); G3 PT 12.62(±5.29), dt 15.61(±6.70); G4 PT 17.12(±2.24), dt 23.41(±7.9); G5 PT 13.24(±1.29), dt 18.28(±8.96) Conclusions: In initial protocol deciduous teeth presented lower SMH values, higher SRI values and higher surface loss than permanent teeth during the experiment. The NaF antierosion toothpaste for children presented the lowest values of SL in both permanent and deciduous teeth, with a better preventive effect. In severe protocol, AmF-NaF-SnCl antierosion toothpaste showed the best preventive effect against erosion-abrasion cycles in permanent teeth. In deciduous teeth NaF toothpaste, AmF-NaF-SnCl antierosion toothpaste and NaF antierosion toothpaste for children showed similar effect.