Para auxiliar no controle da tuberculose são necessários novos métodos de detecção de Mycobacterium tuberculosis que sejam rápidos, específicos e de aplicabilidade em laboratórios de saúde pública, principalmente em países em desenvolvimento. Vários métodos moleculares de detecção e identificação de micobactérias em amostras clínicas têm sido desenvolvidos. Com o objetivo de padronizar e aplicar essas metodologias em laboratório foi desenvolvido um protocolo baseado na amplificação de DNA por reação em cadeia da polimerase (PCR) e na detecção colorimétrica em microplacas. Uma região interna do elemento de inserção IS6110, específico do complexo M. tuberculosis, foi selecionada como alvo para amplificação por PCR com primers biotinilados. Uma sonda complementar a uma região interna do fragmento foi fixada em microplacas onde, posteriormente, foi hibridizado o produto amplificado. A detecção através de hibridização foi feita utilizando um conjugado estreptavidina peroxidase. A eficácia da técnica foi testada em amostras clínicas pulmonares de pacientes com suspeita de infecção e sem tratamento prévio para tuberculose. O padrão ouro no diagnóstico de infecção por M. tuberculosis foi a associação da baciloscopia com a cultura a partir da amostra clínica dos pacientes selecionados. Foram testadas 303 amostras de escarro induzido de 303 pacientes com suspeita de TB pulmonar, dos quais 69 apresentaram resultado positivo e 234 negativo para TB. A sensibilidade e especificidade obtidas foram 88% e 98% e os Valores Preditivos Positivo (VPP) e Negativo (VPN) foram 92% e 97%, respectivamente. Os resultados obtidos demonstraram que a técnica desenvolvida no presente estudo pode ser uma importante ferramenta no diagnóstico de tuberculose e poderia ser utilizada como um teste complementar no diagnóstico da doença. / New methods to detect Mycobacterium tuberculosis rapidly, accurately and that are feasible to apply in laboratories of developing countries are necessaries. Several methods for direct detection and identification of mycobacteria in clinical samples have been developed. With the aim to standardize the application of such methods in laboratory, we developed a molecular method for DNA extraction and PCR detection using a microwell plate hybridization assay. An internal region of the repetitive element, specific of M. tuberculosis complex, called IS6110 was selected as a target for amplification using specific biotinylated primers. The detection of amplified fragments was performed using microwell plates. An aminated DNA fragment complementary to an internal region of the amplified fragment was used as a probe. The biotinylated amplified products were added to the plate and identified with the use of streptavidin conjugated to horseradish peroxidase. The efficacy of the method was tested to detect pulmonary tuberculosis in patients suspected of TB infection with no previous treatment. As gold standard, the bacteriological criteria was used. Three hundred and three induced sputum samples from 303 pulmonary TB suspects were evaluated, of which 69 showed positive result and 224 negative for TB. The sensitivity and specificity obtained were 88% and 98% and Positive and Negative Predictive Values were 92% and 98%, respectively. The obtained results demonstrated that the PCR detection using a microwell plate hybridization assay may be an important tool for the diagnosis of tuberculosis and suggest that it could be used as a complementary diagnostic method.

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Busca conocer la eficacia de la deshidrogenasa láctica OptiMal ® DiaMed IT con relación a la gota gruesa, en la detección del aclaramiento de la parasitemia en los días de control post tratamiento en pacientes con malaria. Se realizó un estudio de pruebas diagnósticas de pacientes identificados en el periodo marzo a diciembre del 2004. Busca evaluar las características de validez de una prueba diagnóstica (sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo, valor predictivo negativo) tanto de forma global y en el aclaramiento parasitario de los pacientes post tratamiento y atendidos en centros de salud de la selva oriental de Perú. Se revisó las fichas de atención de cada paciente, a quienes se les realizó la gota gruesa (prueba de referencia), se les calculó la densidad parasitaria y la prueba de OptiMal®. Se calculó la sensibilidad (S), especificidad (E), valor predictivo positivo (VPP) y valor predictivo negativo (VPN) y la concordancia de la prueba OptiMal ® con la prueba de referencia. Se incluyeron 376 casos de malaria el día 0, 310 (82.5%) casos fueron de P. vivax y 66 (17.5%) casos eran por P. falciparum. Durante el seguimiento desde el día 2 al 21 se recolectaron en total 1,570 muestras. La positividad con la prueba de gota gruesa fue de 14.6% el día 2 a 4.0% el día 14. La concordancia con la prueba Optimal® Diamed IT, fue en todos los días superior al 80%. De manera global (tanto para P. vivax o falciparum), durante el seguimiento la prueba tuvo, sin incluir el día cero, una sensibilidad S de 9.4% y especificidad E 99.5% y VPP 61.1% y VPN 93.2%. La prueba OptiMal® en este estudio demostró tener eficacia en el aclaramiento parasitario post tratamiento con relación a la gota gruesa pues tuvo alta concordancia y una buena especificidad, la baja sensibilidad se podría deber a la baja densidad parasitaria luego de iniciado el tratamiento, lo que sugiere que su aplicación sería óptima en escenarios epidemiológicos de transmisión moderada a alta. / Tesis

Introducción: La esclerosis múltiple (EM) es una enfermedad desmielinizante crónica que afecta al sistema nervioso central cuya característica principal es la destrucción selectiva de la mielina (áreas de desmielinización). Ninguna prueba individual proporciona información suficiente para diagnosticar EM, por lo cual los criterios de McDonald son usados para tal fin. Incluyen criterios clínicos, de laboratorio (bandas oligoclonales) e imagenológicos (resonancia magnética) lo cual nos permite un diagnóstico precoz de EM. Objetivo: Determinar el cumplimiento de los criterios clínicos, de laboratorio e imagenológicos para el diagnóstico de esclerosis múltiple en el Instituto Nacional de Ciencias Neurológicas durante el 2001-2010 Método: Estudio no experimental de tipo observacional y descriptivo. Se obtuvieron 110 historias clínicas de pacientes con diagnóstico de EM, que fueron hospitalizados desde enero de 2001 hasta diciembre del 2010 en el INCN, de las cuales se consideraron 63 casos por cumplir los criterios de inclusión Resultados: De 63 historias clínicas, 38 (60,3%) casos correspondían a mujeres, y 25 (39,7%) correspondían a varones. El 49.2% (31) de historias clínicas cumplieron los criterios diagnósticos para EM definida, el 28.6% (18) fueron calificadas como probable y 14 casos (22.2%) no cumplieron los criterios diagnósticos para esclerosis múltiple. El criterio clínico fue el principal para dirigir el diagnostico hacia la identificación de esta enfermedad. Conclusiones: Más del 50% (32) de las historias clínicas revisadas no cumplieron con el registro mínimo necesario para el cumplimiento de criterios diagnóstico de EM. La anamnesis fue el mejor criterio clínico para el diagnóstico. No existe un registro adecuado de la información en las historias clínicas sobre los exámenes solicitados ni de los resultados obtenidos.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / La fotografía digital actual dista mucho de la compleja técnica profesional que fue en antaño, con un conocimiento básico del manejo de las luces, del funcionamiento de nuestros equipos digitales y del programa de postproducción digital más popular del mundo Adobe Photoshop podemos conseguir imágenes de una calidad aceptable para ser utilizadas en el registro del trabajo clínico. Actualmente, la fotografía digital, se ha consolidado como una herramienta para mostrar restauraciones en publicaciones, congresos, afiches, libros, páginas web, clases e incluso en la interacción con los pacientes; pero no existen estudios que correlacionen la información contenida en estas imágenes con lo que podemos apreciar clínicamente. El presente trabajo consiste en una comparación de diagnósticos de restauraciones dentales de acuerdo a los criterios Ryge modificados entre el sistema de evaluación clínico y el de diferentes imágenes digitales generadas en Adobe Photoshop donde se incluyen variaciones de zoom de visualización y retoque digital. Material y método: De un banco de 174 fotografías de las restauraciones analizadas en el estudio multicéntrico “Aumento de longevidad de restauraciones mediante remodelado, reparación y sellado de resinas compuestas y amalgamas” realizado durante el año 2008 (Trabajo adscrito al proyecto PRI-ODO 0207 Facultad de Odontología Universidad de Chile) (42) , fueron seleccionadas 89 que cumplieron con los criterios de inclusión. Las restauraciones fueron evaluadas clínicamente usando los criterios de Ryge modificados por un operador calibrado (Kappa de Cohen 0,76). Todas las fotografías fueron obtenidas bajo las mismas condiciones, con una Cámara digital Nikon D100, utilizando un lente AF-S VR Micro-NIKKOR 105mm f/2.8G IF-ED y un flash Nikon macro speedlight sb-29s. Posteriormente se generaron cuatro imágenes a partir de cada fotografía seleccionada, con la ayuda del software de diseño gráfico Adobe Photoshop CS3 (al 100% de visualización, al 100% de visualización y modificada, al 150% de visualización y al 150% de visualización y modificada). Cada copia fue visualizada en un macbook de pantalla led, previamente calibrado con el espectrofotómetro profesional efi es-1000. Y posteriormente evaluada en el año 2010, por un operador calibrado (Kappa de Cohen 0,76) en la aplicación de los criterios de Ryge modificados (49) en los parámetros de: adaptación marginal oclusal, anatomía, rugosidad, tinción marginal oclusal, brillo y caries secundaria. Para las restauraciones de resina compuesta se incluyó además color. Finalmente, todos los datos obtenidos fueron dicotomizados y se realizó la prueba de los rangos con signo de Wilcoxon en el programa SPSS 11.5. Resultados: Para los parámetros Color, Adaptación Marginal Oclusal y Anatomía, las evaluaciones de las diferentes imágenes de acuerdo a los criterios Ryge modificados es idéntica. A diferencia de lo que ocurre para Rugosidad, Tinción de Márgenes Oclusales y Brillo, donde se presentan diferencias estadísticamente significativas entre varios diagnósticos de las imágenes (p<0,05). Al comparar la evaluación clínica con la de las diferentes imágenes tenemos que existe una fuerte tendencia en todos los parámetros evaluados hacia un diagnóstico más crítico, aumento de evaluaciones Bravo y Charlie a expensas de Alfa. Para el parámetro Color existen diferencias estadísticamente significativas para Alfa y Bravo (p<0,05). Para los parámetros Adaptación Marginal Oclusal y Anatomía existen diferencias estadísticamente significativas para Alfa y Charlie (p<0,05) Para el parámetro Rugosidad no existen diferencias estadísticamente significativas sólo para el diagnóstico Bravo en la evaluación de las imágenes F (p>0.05) Para el parámetro Tinción de Márgenes Oclusales no existen diferencias estadísticamente significativas sólo para Bravo en la evaluación de cada una de las imágenes (p>0,05). Para el parámetro Brillo no existen diferencias estadísticamente significativas sólo para el diagnóstico Bravo en la evaluación de las imágenes F 100 y F En la evaluación de caries secundaria existen diferencias entre el diagnóstico clínico y el de las imágenes F 100m , F . Conclusiones: 150 y F 150m Bajo las condiciones experimentales de obtención y visualización fotográfica desarrolladas en el presente estudio es posible concluir que: 150 La tendencia de la evaluación fotográfica es hacia un diagnóstico más crítico que el obtenido durante la evaluación clínica, es decir, mayor número de criterios Bravo y Charlie a expensas de Alfa para todos los criterios evaluados exceptuando Caries Secundaria. Una imagen magnificada y/o retocada en Adobe Photoshop es equivalente a la imagen desplegada en su 100% (píxel por píxel) en cuanto a la información diagnóstica que nos provee para la evaluación de: Color, Adaptación Marginal Oclusal y Anatomía. (p>0,05). 100 En el diagnóstico fotográfico de Caries Secundaria, la magnificación y/o la manipulación de las imágenes originales podrían producir sobre-diagnósticos en comparación con la evaluación Clínica. La evaluación de las imágenes digitales es más congruente con la evaluación clínica cuando se analizan restauraciones que clínicamente presentan alguna deficiencia moderada (Bravo) y menos congruente cuando clínicamente la restauración es diagnosticada como satisfactoria (Alfa) o como que presenta una deficiencia severa (Charlie).

Halla la ecuación de regresión lineal simple para la predicción de anchos mesiodistales de canino y premolares por cada arcada y sexo; tomando como predictor la sumatoria de anchos mesiodistales de incisivo central inferior y primera molar superior. Las mediciones de cada pieza dentaria se realizan en tomografías Cone Beam; se usan tomografías de 100 (50 varones y 50 mujeres) pacientes de la Clínica de Radiología de la Facultad de Odontología de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. / Tesis

La tuberculosis es una enfermedad infecciosa que constituye un grave problema de salud pública a nivel mundial principalmente en países en vías de desarrollo, como el Perú. Las limitaciones de los métodos clásicos de diagnostico (baciloscopía y cultivo) así como la alta frecuencia de ésta enfermedad han creado la necesidad de implementar nuevas estrategias para incrementar la sensibilidad de las pruebas y a su vez reducir el tiempo necesario para establecer el diagnostico confirmatorio. Considerando que los estudios correspondientes a la región del Tracto Respiratorio Inferior (TRI) son escasos, el objetivo de esta tesis fue determinar el perfil molecular de Mycobacterium tuberculosis en muestras biológicas del TRI de pacientes limeños con sospecha de tuberculosis. En el presente trabajo se evaluaron 43 muestras de pacientes limeños con sospecha clínica de tuberculosis las cuales fueron obtenidas a través de lavado bronquial, aspirado bronquial, secreción bronquial, lavado bronco-alveolar, aspirado bronco-alveolar y broncofibroscopía. De estas muestras se extrajo DNA y se realizó la prueba del PCR - Nested, para ello se empleó como secuencia diana el gen de la proteína A (65KDa) de Mycobacterium tuberculosis, los productos amplificados fueron evidenciados mediante electroforesis en gel de agarosa y tinción con bromuro de etidio. Los resultados obtenidos muestran que el 77% de las muestras procesadas poseen DNA de Mycobacterium tuberculosis, demostrándose la alta sensibilidad y especificidad del método empleado, el 82% de estas muestras correspondieron a la región del árbol bronquial superior, debido a que esta región es el punto de partida para la diseminación de esta micobacteria hacia otras regiones del tracto respiratorio y además, a que la mayoría de muestras fueron tomadas directamente de esta región. Asimismo, la aplicación de la prueba PCR- Nested incrementó la sensibilidad de detección 5.5 veces con respecto a un único evento de amplificación, lo cual demuestra la utilidad de esta prueba en el análisis de material biológico con baja carga micobacteriana como las empleadas en este trabajo. Finalmente, se concluye que la prueba PCR- Nested es un método altamente sensible y específico para detectar DNA de Mycobacterium tuberculosis a partir de muestras procedentes del TRI. / Tuberculosis is an infectious disease that constitutes a serious public health problem worldwide, mainly in developing countries such as Peru. The limitations of the traditional methods of diagnosis (smear and culture) as well as the high incidence of this disease have created the need to implement new strategies to increase the sensitivity of tests to reduce time to establish a confirmed diagnosis. Since there are not many researches at the region of the Lower Respiratory Tract (LRT), the objective of this study was to determine the molecular profile of Mycobacterium tuberculosis in biological samples taken from the LRT of patients with suspicion tuberculosis. In the present study, 43 samples from patients with clinical suspicion of tuberculosis were evaluated. The samples were obtained through bronchial lavage, bronchial aspirate, bronchial secretions, bronco-alveolar lavage, and sucked bronco-alveolar broncofibroscopy. DNA extraction was prepared from each sample, and it was used in a PCR- Nested test targeting the gene encoding the protein A (65KDa) from M. tuberculosis. The results showed that DNA from M. tuberculosis was detected in 77% of the processed samples, revealing a high sensitivity and specificity of this method. From the positive samples, 82% corresponded to those obtained from the bronchial tree top region. This last result is explained because of the fact that most of the samples were taken directly from this region, which is the starting point for the mycobacteria dissemination toward other regions of the respiratory tract. In addition, the application of the PCR-Nested test increased the sensitivity of detection by 5.5 fold compared to a single event amplification, demonstrating the usefulness of this test in the analysis of biological material with low mycobacterial load as those used in this work. Finally, we conclude that the PCR-Nested test is a highly sensitive and specific method for detecting DNA from Mycobacterium tuberculosis in samples from the LRT.

La enfermedad coronaria es la principal causa de mortalidad en la población adulta, alrededor del mundo y en el Perú. Las mujeres representan un grupo de especial interés, con características fisiopatológicas y clínicas propias. Se planteó un estudio de tipo epidemiológico, comparativo, transversal y retrospectivo; en el que se estudiaron todos los casos de enfermedad coronaria aguda (ECA) admitidos al servicio de cardiología del Hospital Carrión entre los años 2000 al 2004. En total se revisaron 524 epicrisis con este diagnóstico, se excluyeron 8, y quedaron 516 pacientes para el análisis. 202 eran mujeres (39.1%) y 314 eran hombres (60.9). La edad de presentación media fue de 64+/-14.3 años en las mujeres y de 58 +/-13.4 años para los hombres con una p<0.01. El diagnóstico de ingreso fue en las mujeres IMA STE en un 18.8%, IMA StnE en un 21.8% y angina inestable (AI) en un 59.4%; los valores respectivos para los hombres fueron 45.9% (p<0.01), 21.7% (p>0.1) y 33.1% (p<0.01). En cuanto a la presencia de factores de riesgo para EC, la prevalencia de HTA fue de 77.2% para las mujeres vs. 49% para los hombres (p<0.01); diabetes mellitus 36.6% vs. 21.7% (p<0.01); dislipidemia 46.5% vs. 38.9% (p no significativa); tabaquismo 14.8% y 42.9% respectivamente (p<0.001) y de síndrome metabólico (SM) 55.4% en las mujeres y 51.6% en los hombres (p>0.1). Entre las mujeres con ECA un 9.9% tenían antecedente de uso de terapia de reemplazo hormonal (TRH). Respecto al destino de hospitalización inicial se observó que las mujeres fueron internadas en cuidados intensivos en un 49.5% vs. 68.1% en el caso de los hombres, con diferencia significativa. El síntoma de presentación fue dolor toráxico típico en un 48.5% en las mujeres y 73.2% en los hombres (p<0.01); dolor toráxico atípico en un 32.7% y 13.4% respectivamente (p<0.01); dísnea 10.9% vs. 5.1% (p<0.05) y otros síntomas en un 7.9% y 8.3% para mujeres y hombres (p>0.1). Se registraron complicaciones durante la hospitalización en un 10.9% en las mujeres y 12.7% en los hombres, sin diferencia significativa. Se concluye que existen importantes diferencias en las características clínicas de la ECA entre los hombres y las mujeres del grupo de estudio.

OBJETIVO: encontrar el grado de concordancia en el diagnóstico clínico, por imágenes e histopatológico de las lesiones de mama en el Hospital Dos de Mayo (HDM) de enero1,999 a enero 2,002. DISEÑO DEL ESTUDIO: Comparativo retrospectivo. MATERIAL Y MÉTODO. Se seleccionaron 195 casos de 265 cirugías de mama realizadas en el servicio de Ginecología del HDM, catalogadas inicialmente como benignas. Se incluyeron todo los casos que hayan tenido dos o mas estudios diagnóstico (clínico - ecografía y/o mamografía – histopatología).Los datos fueron obtenidos de las historias clínicas, y de la base de datos del servicio de Radiología y Anatomía Patológica. El Gold estándar de comparación fue el diagnóstico Histopatológico; los datos fueron ingresados al paquete estadístico SPSS 11.0, las variables fueron cruzadas en tablas de doble entrada y el análisis de concordancia se realizó según el estadístico Kappa de Cohen y el índice de Kappa. RESULTADOS. Existe una alta concordancia entre la clínica, ecografía y mamografía con la histopatología de las lesiones de mama, (Pc = 0.87, 0.88 y 0.75 respectivamente), sin embargo el resultado es mayormente producto del azar. El Diagnóstico clínico y mamográfico tienen una concordancia moderada (k=0.50, k=0.46), y la ecografía sin concordancia (0.14) con respecto al A-P. CONCLUSIONES:- Los estudios clínicos y mamográfico tienen mayor grado de concordancia con el diagnóstico histopatológico de las lesiones de mama en el Hospital Dos de Mayo. RECOMENDACIONES: - Es recomendable utilizar el sistema de información radiológica estandarizada BIRADS en la mamografía para evitar confusiones en el diagnóstico. - Una buena información clínica es importante para realizar una buena interpretación de las imágenes ultrasonográficas de las lesiones de mama.

El cáncer de mama es una de las neoplasias más frecuentes en la mujer, y uno de los problemas de salud más importantes por su frecuencia, mortalidad que origina e impacto en la calidad de vida. La incidencia del cáncer de mama en Perú basado en diferentes registros de cáncer, la sitúan como la neoplasia mas frecuente de la mujer en Lima y segunda después del cáncer de cuello uterino en el resto del país. La mortalidad por cáncer de mama es uno de los factores que contribuye a la importancia sanitaria de este problema, pues según el Registro de Cáncer de Lima Metropolitana, el Cáncer de Mama tiene una tasa de incidencia de 31,82 (TEE por 100,000) . El riesgo acumulado de desarrollar cáncer, hasta los 74 años de edad, es de 3,5%, es decir 1 de cada 29 mujeres tiene el riesgo de desarrollar cáncer de mama hasta los 74 años de edad. En el caso de los hombres la proporción es muy baja siendo la relación mujer/hombre de 168:1, o sea, que por cada 168 casos de cáncer de mama en mujeres hay 1 caso de cáncer de mama en hombres. La calidad de vida estará tanto más comprometida cuanto más tardío sea el diagnóstico, ya que la cirugía será más agresiva, la medicación adyuvante más tóxica y las minusvalías más importantes en los aspectos físicos, psicológicos, estéticos, etc.

Objetivos: Determinar las características clínicas de pacientes con síndrome de Turner: cariotipo predominante, fenotipo más frecuente, incidencia de complicaciones y su asociación con otros desórdenes Material y Métodos: Estudio de corte transversal, retrospectivo, descriptivo realizado entre los meses de enero de 1989 y diciembre de 1999. Se revisaron los registros de 41 pacientes. Resultados: El cariotipo predominante fue 45,XO en 27 pacientes (65.9%) y mosaicismo en 14 pacientes (34.1%). La edad al momento de¡ diagnóstico tuvo una media de 9.41 ± 7.76 años. La talla al nacer promedio fue de 45.86 ± 3.93 cm. El peso al nacer promedio fue de 2,496.36 + 890.54. Sólo en edad al momento de¡ diagnóstico se encontró diferencia significativa (p=0.008) con respecto al cariotipo. Destaca en el fenotipo facies característica en 58.5%, acortamiento de metacarpianos en 70.7% y cubitus valgus en 73.2%. El 65% fue sometido a ecocardiografía encontrandose coartación aórtica en 46.1 %. Todos los casos correspondieron al cariotipo 45,XO. Las malformaciones renales se evaluaron con ecografía siendo normal el 85% de los casos. La edad ósea fue discordante con la edad cronológica en 32.3% de casos. El infantilismo sexual se encontró en 86.2% con desarrollo de caracteres sexuales secundarios espontáneo en 13.8%. Reportamos dos casos de oligomenorrea y uno de amenorrea secundaria en personas con mosaícismo. La evaluación de las gónadas se realizó mediante ecografía en 65.9% de pacientes no identificándose ninguna de las dos en 70.4%, mientras en el 14.8% se observaron las dos. La talla corta estuvo en el 100% de los casos con nanismo hipofisiario en 94.4%. Entre las enfermedades asociadas se encontró hipotiroidismo en 22.2%, otitis media crónica en 14.6% y trastornos óseos en 9.8% Conclusiones: El cariotipo predominante es 45,XO. El hallazgo fenotípico más común es talla corta, en rango de nanismo, seguido de infantilismo sexual. La cardiopatía más frecuente es coartación de aorta y se presenta en pacientes con cariotipo 45,XO. La ecografía pélvica no es un buen método para detectar gónadas. El hipotiroidismo es el desorden asociado más común.