El objetivo de la presente memoria de esta tesis doctoral fue evaluar el papel de diferentes ingredientes en la dieta para reducir las patologías digestivas en los lechones tras el destete, incrementando así su bienestar y productividad. En los primeros dos ensayos se determinó la influencia de la suplementación con fibra dietética en la productividad animal y en parámetros del desarrollo intestinal. En el tercer experimento fue realizado un ensayo in vivo que tuvo por objetivo la búsqueda de ingredientes anti-adhesivos frente a E. coli enterotoxigenica (ETEC) K88 y identificándose tres de ellos (extracto de salvado de trigo, WB; glicomacropéptido de caseina, CGMP; y exopolisacarideos de lactobacilli, EPS) como prometedores candidatos. En el cuarto ensayo fue medida la respuesta inflamatoria de células epiteliales intestinales, desafiadas por ETEC K88 y la influencia de algunos ingredientes en la regulación de esta respuesta. En este ensayo, WB y CGMP obtuvieron una mayor bajada en la respuesta inflamatoria. Finalmente, en el quinto experimento, CGMP fue empleado como una terapia anti-adhesiva frente a una infección experimental de ETEC K88. Los resultados de esta prueba sugieren que el CGMP puede ser usado con éxito como una estrategia alimentaria para control de enfermedades intestinales causadas por ETEC K88. Los resultados de esta tesis doctoral apoyan el interés por incluir niveles moderados de fibra en la dieta de animales jóvenes, para estimular la función intestinal y de reducir la proliferación de patógenos intestinales. Nuestro trabajo también da los primeros pasos hacia el desarrollo de estrategias de alimentación para mejorar la resistencia animal a patógenos, a través del uso de ingredientes con un potencial anti-adhesivo. Entre los ingredientes valorados, los extractos solubles de salvado de trigo, el caseín glicomacropéptido derivado de la leche de vaca y los extractos de exopolisacáridos de lactobacilos obtenidos de salmuera de aceituna han sido algunos de los que han presentado resultados más prometedores y que merecería la pena ser estudiados con mayor profundidad. / The main objective of this thesis was to evaluate different feed strategies to reduce enteric disorders in young pigs, in order to help their adaptation to weaning and enhance productivity and health. In the first two experimental trials it was measured the influence of dietary fiber supplementation on animal performance and parameters of intestinal development. In the third trial it was performed a in vitro trial aiming to search anti-adhesive feed ingredients against enterotoxigenic E. coli (ETEC) K88 and it was identified three of them (wheat bran extract, WB; casein glycomacropeptide, CGMP; and exopolysaccharides of lactobacilli, EPS) as promising candidates to be further studied. In fourth trial it was measured the inflammatory response of intestinal epithelial cells to an ETEC K88 challenge and the influence of certain feed ingredients to regulate that response. In this trial, WB and CGMP better down-regulate the inflammatory response of intestinal cells to ETEC K88, when compared to a positive control and other ingredients. Finally, on fifth trial, CGMP was employed as an anti-adhesive therapy, where piglets were challenged by ETEC K88. Results suggest that CGMP can successfully be used as a feed strategy against enteric disorders caused by ETEC K88. The results of this doctoral thesis support the interest of including moderate levels fiber in the diet of the young animals, in order to stimulate the gut function and reduce the proliferation of gut pathogens. Our work also gives the first steps for the development of feeding strategies to improve the animal resistance to the intestinal pathogens, through the use of anti-adhesive feedstuffs rather than antimicrobial properties. Among the evaluated ingredients, soluble extracts of wheat bran, casein glycomacropeptide derived from cow's milk and extracts of lactobacilli exopolysaccharides were some with the most promising results and worth to be studied further.

Tesis por compendio de publicaciones / La preselección del sexo de la descendencia mediante el uso espermatozoides portadores del cromosoma X o del Y separados por citometría de flujo es hoy en día una realidad. Sin embargo, mientras el semen separado está disponible comercialmente en bovino, en otras especies domesticas, incluyendo la especie porcina, la técnica está todavía a nivel experimental. La finalidad principal de esta tesis fue desarrollar un protocolo para la aplicación eficiente de los espermatozoides de verraco separados mediante citometría de flujo. Para ello, se han desarrollado los siguientes estudios. En el primer estudio, se evaluó la capacidad de los espermatozoides procedentes de eyaculados de diferentes verracos para resistir el procedimiento de separación espermática. Para ello, eyaculados de verraco fueron fueron sometidos a diferentes tratamientos: conservación en estado líquido, congelación estándar, separación espermática mediante citometría de flujo y separación y congelación. Los parámetros evaludados fueron: motilidad, viabilidad, oxidación lipídica de la membrana plasmática y fragmentación del ADN. El segundo estudio tuvo como objetivo la optimización los protocolos para la criopreservación de los espermatozoides separados de verraco. Para ello fueron evaluados los efectos de la congelación estándar (3% glicerol) sobre las características in vitro de los espermatozoides separados y congelados a una baja concentración espermática. Así como los efectos de diferentes concentraciones de glicerol sobre la calidad espermática de los espermatozoides separados y congelados a bajas concentraciones. El objetivo del tercer estudio fue diseñar un protocolo adecuado para la manipulación de los espermatozoides de verraco durante y después del proceso de separación con el fin de obtener espermatozoides separados con una óptima capacidad fecundante. Para este proposito, diferentes aspectos de la separación espermática fueron evaluados. Se evaluó el efecto de la alta dilución, el medio de recolección usado y la composición del fluido recirculante sobre la calidad (motilidad y viabilidad) y la funcionalidad (capacidad fecundante in vitro) de espermatozoides separados. El objetivo del cuarto estudio fue desarrollar un procedimiento útil de inseminación laparoscópica utilizando un número muy bajo de espermatozoides separados por citomería de flujo que permita obtener óptimos resultados de fertilidad a nivel de granja. Se evaluó el efecto de una inseminación laparoscópica simple (oviductos) y doble (oviductos y cuernos uterinos) con espermatozoides separados, sobre los parámetros reproductivos de las cerdas inseminadas. Tras los resultados de estos estudios, podemos concluir que: Existe una variabilidad individual entre verracos respecto a su capacidad para resistir el proceso de separación espermática por citometría de flujo. Además la respuesta de los espermatozoides de un verraco a una determinada biotecnología espermática no predice la respuesta de los mismos a otros procedimientos. La congelación de espermatozoides a bajas concentraciones en combinación con el uso de concentraciones finales de glicerol de 0.5–1% podría ser un método apropiado para la criopreservación de espermatozoides de verraco separados por citometría de flujo. La adición de EDTA en el fluido envolvente y de yema de huevo en el medio de recogida mejora la capacidad fecundante in vitro de los espermatozoides de verraco separados y ambos agentes deberían ser incluidos como componentes esenciales en los medios utilizados en los procedimientos de separación espermática por citometría de flujo en porcino. El procedimiento de inseminación laparoscópica descrito en el presente estudio es un método efectivo y aplicable en condiciones de granja para la obtención de descendencia de sexo deseado en ganado porcino. El protocolo de doble inseminación laparoscópica, usando entre 3 y 6 millones de espermatozoides separados por cerda permite obtener unos adecuados parámetros reproductivos a nivel de granja, haciendo que la tecnología de separación espermática por citometría de flujo sea potencialmente aplicable en núcleos de selección genética en ganado porcino. / Sex pre-selection of the offspring by using X or Y chromosome bearing spermatozoa sorted by flow cytometry is nowadays a reality. However, while sexed spermatozoa are commercially available for bovine, in other domestic species including the pig the technique is still at experimental level. The main objective of this thesis was to develop a protocol to efficiently apply flow cytometric sex-sorting procedure on boar spermatozoa. To achieve this objective, the following studies were developed. In the first study, the ability of ejaculated spermatozoa from individual boars to withstand flow cytometric sex-sorting procedure was evaluated. Sperm-rich ejaculate samples were split into three aliquots. The aliquots were (1) diluted and stored, (2) frozen-thawed using standard protocols, or (3) sex-sorted with subsequent liquid storage or frozen-thawed. The sperm quality was evaluated based on total sperm motility, viability, lipid peroxidation and DNA fragmentation. The objective of the second study was to optimize protocols for cryopreservation of sex-sorted boar spermatozoa. We evaluated the effects of a standard boar sperm cryopreservation procedure on the in vitro characteristics of sex-sorted sperm frozen at low sperm concentrations and the effects of different final glycerol concentrations on post-thaw quality. The objective of the third experimental study was to design and adequate protocol for boar sperm handling during and after sperm sex sorting for obtaining sex sorted boar sperm with an optimal in vitro fertilizing ability. For this purpose, different aspects of the sorting procedure were examined. The effects of the high dilution rates, type of collection medium used, and sheath fluid composition on sorted boar sperm quality and function were evaluated. Sperm quality was assessed by motility and viability tests, whereas sperm function was evaluated by an in vitro fertilization assay which determined the penetration and polyspermy rates as well as the mean number of sperm penetrating each oocyte. The objective of the fourth study was to develop a useful procedure for laparoscopic inseminations with sex-sorted spermatozoa that allows obtaining optimal fertility results at a farm level. We evaluated the effects of single (oviducts) and double (oviducts and tips of the uterine horns) laparoscopic insemination with sex-sorted sperm on the reproductive performance of sows. The results achieved in these four studies have generated the following conclusions: There is an individual variability among boars to withstand the sorting procedure by flow cytometry. The response of spermatozoa to a specific semen-processing technique does not predict the response of spermatozoa from the same boar to other semen-processing techniques. Freezing at low sperm concentration in combination with the use of a final glycerol concentrations of 0.5–1% could be a suitable method for the cryopreservation of sex-sorted boar sperm. The addition of EDTA to sheath fluid and EY to collection medium improved the in vitro fertilizing ability of sex-sorted sperm, and both agents should be included as essential media components for flow cytometric sperm sex sorting in swine. The laparoscopic insemination procedure described in the present study is an effective method for obtaining offspring of the desired sex in swine at a farm level. The double laparoscopic insemination procedure, using between 3 and 6 millions of sex-sorted sperm per sow produces adequate results for reproductive parameters, making sperm-sexing technology potentially applicable in elite breeding units.

Tesis por compendio de publicaciones / La transferencia de embriones debería jugar un crítico papel en los sistemas actuales de producción porcina ya que posibilita el movimiento nacional e internacional de material genético. El objetivo principal de esta tesis fue desarrollar un procedimiento práctico y efectivo de transferencia intrauterina profunda de embriones frescos. En el primer trabajo estudiamos el efecto de dos dosis de eCG para inducir una respuesta superovulatoria en donantes y el rendimiento reproductivo de las receptoras después de la transferencia intrauterina profunda de embriones. En el segundo estudiamos el efecto de la sincronía del ciclo estral en el rendimiento reproductivo de las receptoras. Las transferencias se realizaron en receptoras que salieron en celo 24 h antes o 0 h, 24 h o 48 h después de las donantes. Finalmente, en el tercer estudio se evaluó la transferencia intrauterina profunda no quirúrgica con mórulas producidas in vivo y cultivadas durante 24 h en un medio líquido. En el experimento 1, se estudiaron dos temperaturas y dos medios. En el experimento 2, las mórulas obtenidas se cultivaron en el medio definido a 37 ºC y los blastocistos resultantes de ese se transfirieron a las receptoras. Los resultados de demuestran que el número de donantes para transferir 30 embriones por receptora por vía no quirúrgica se puede reducir mediante los tratamientos de superovulación. Concretamente, una dosis de 1000 UI de eCG es suficiente para obtener unos resultados reproductivos satisfactorios en las receptoras. Los embriones porcinos toleran mejor un ambiente uterino más temprano del que les corresponde cuando son transferidos por vía no quirúrgica en la profundidad de un cuerno uterino. El medio TL-PVA es un medio químicamente definido capaz de mantener una elevada viabilidad in vitro de mórulas porcinas cultivadas a 37 ºC durante 24 h. El rendimiento reproductivo de las receptoras tras la transferencia no quirúrgica en la profundidad de un cuerno uterino reportados en estos estudios representa un avance muy importante para la difusión y comercialización de esta tecnología por la industria porcina. Palabras clave: transferencia de embriones, no-quirúrgica / The use of porcine embryo transfer should play a critical role in pig production because it allows the movement of genetic resources. The main objective of this thesis was to develop an efficient and practical procedure for nonsurgical deep-uterine embryo transfer with fresh embryos. In the first study we evaluated the effect of two doses of eCG to induce superovulation in donor sows and evaluate the reproductive performance of recipients after nonsurgical deep-uterine embryo transfer. In the second study we studied the effect of recipient-donor estrous cycle synchrony on the reproductive performance of recipients. The transfers were conducted in recipients sows that started estrus 24 h before or 0 h, 24 h or 48 h after the donors. Finally, in the third experimental study we evaluated the potential application of non-surgical deep uterine transfers with in vivo-derived morulae cultured for 24 h. In Experiment 1, two temperatures and two media were assessed. In Experiment 2, morulae were cultured in the defined medium at 37 ºC for 24 h, and the resulting blastocysts were transferred to the recipients. The results achieved in these three studies demonstrate that the number of donors needed to nonsurgically transfer 30 embryos per recipient can be decreased and that a dosage of 1000 IU eCG is enough to obtain a satisfactory reproductive performance of the recipients. Porcine embryos tolerate better a less advanced uterine environment if they are nonsurgically transferred deep into a uterine horn. The TL-PVA medium provided a chemically defined medium capable of maintaining a high in vitro viability of porcine morula cultured at 37ºC for 24 h. The excellent reproductive performance of the recipients following NsDU–ETs reported in these three studies represents an important advance for the widespread commercial use of ET by the pig industry.

Aquesta tesi es va plantejar per obtenir informació sobre l'efecte de l'edat al deslletament i la suplementació durant la lactació, sobre els rendiments tècnic-econòmics de vedells en condicions de producció mediterrànies. Es van estudiar, les pautes de creixement i desenvolupament dels vedells durant la lactació y l'engreix, les característiques de la canal i la carn, els resultats econòmics, la resposta fisiològica al deslletament i la reactividad enfront d'humans. L'Assaig 1 es va dur a terme amb vedells de raça PM nascuts a la primavera, deslletats amb 90 (precoç) o 180 dies (tradicional), aquests últims pastaren en ports de muntanya durant l'estiu (90 a 180 d). L'edat al deslletament va modificar les pautes de creixement, ja que entre deslletaments, els vedells deslletats precoçment van presentar un guany de pes mès alt mentre que des de 180 d al sacrifici els vedells deslletats tradicionalment van mostrar creixement compensador, arribant al mateix pes al sacrifici. El deslletament precoç va millorar el rendiment canal però va allargar la durada del engreix i va incrementar la ingestió total de pinso i per tant, els costos d'alimentació. En l'Assaig 2, es va avaluar l'efecte de la suplementació del vedell durant la lactació (amb vs. sense) en vedells nascuts a la tardor, de raça PM, deslletats precoç (90 d) i tradicionalment (150 d). La suplementació va millorar el guany de pes del vedells deslletats tradicionalment durant la lactació però no el dels vedells deslletats precoçment. El rendimient en la finalització (d 150-sacrifici) no es va veure afectat per cap dels efectes. El deslletament precoç va millorar el rendiment canal. La suplementació en els vedells deslletats tradicionalment va reduir la durada del engreix i va millorar el marge economic. Els vedells deslletats tradicionalment i sense suplementació van ser els quals menor marge econòmic van obtenir. En l'Assaig 3, es van utilitzar vedells deslletats precoç i tradicionalment de les races PM i Pi nascuts a la tardor. L'edat al deslletament únicament va modificar el guany de pes en el període entre deslletaments. No va modificar el marge econòmic. Pel que fa a l'efecte de la raça, els vedells de raça PM van presentar un major pes al dia 90 i 150 que els de raça Pi. Durant la finalització, els rendiments van ser similars. No obstant això, la raça va afectar a les característiques de la canal, sent millors les de la raça Pi, i a algunes característiques de la carn, i al marge econòmic, que va ser superior per a la raça Pi. En l'Assaig 4, es va estudiar en els mateixos vedells de l'Assaig 3 la resposta fisiològica a l'estrès i la por enfront d'humans. Mentre que l'edat al deslletament no va tenir efectes importants en la resposta a l'estrès, la raça si va influir al ser els vedells de raça Pi més reactius a l'estrès produït pel deslletament i a la presència humana.Aquests resultats dels efectes dels diferents manejos del vedell (edat al deslletament i suplementació) proporcionen les bases tècniques per a la presa de decisions en l'explotació de boví de carn, per a adaptar-se a situacions canviants de mercat. / En la presente Tesis se han analizado los efectos de la edad al destete y la suplementación de concentrado al ternero durante la lactación sobre los rendimientos técnico-económicos de terneros en condiciones de producción mediterráneas. Se estudiaron las pautas de crecimiento y desarrollo de los terneros durante la lactación y el cebo intensivo, y las características de la canal y de la carne. También se evaluó la respuesta fisiológica al destete y la reactividad frente a humanos, y, por último, se analizaron los resultados económicos derivados de las diferentes estrategias de manejo.En el Ensayo 1 se analizó el efecto del destete precoz (90d) o tradicional (180d) en terneros de raza Parda de Montaña (PM) nacidos en primavera. Entre destetes (90-180d), los terneros destetados precozmente presentaron mayores ganancias de peso en cebo que los destetados tradicionalmente, que pastaron junto a sus madres en puertos de montaña. Estos, sin embargo, experimentaron un crecimiento compensador desde 180d al sacrificio, alcanzando el mismo peso al sacrificio a la misma edad. El destete precoz mejoró el rendimiento canal, aunque motivó un mayor consumo de pienso total, debido a la mayor duración de la fase de cebo intensivo, y por lo tanto mayores costes de alimentación que en los terneros destetados tradicionalmente.En el Ensayo 2 se evaluó el efecto de la edad al destete (90 vs. 150 d) y la suplementación del ternero durante la lactación (con vs. sin) en terneros de raza PM nacidos en otoño. La suplementación afectó a las ganancias de peso previas al destete en los terneros destetados tradicionalmente, pero no a las de los destetados precozmente. El rendimiento en la finalización (150d-sacrificio) no se vio afectado por ninguno de los efectos evaluados. Sin embargo, el destete precoz mejoró el rendimiento canal, mientras que la suplementación en los terneros destetados tradicionalmente redujo la duración de la fase de finalización y mejoró los resultados económicos. Los terneros destetados tradicionalmente sin suplementación generaron el margen económico más bajo.En el Ensayo 3 se estudió el efecto de la edad al destete (90 vs. 150 d) y la raza (PM y Pirenaica, Pi) en terneros nacidos en otoño. El destete precoz mejoró la ganancia de peso en el periodo entre destetes y la conformación de la canal, aunque no afectó al margen económico. Con respecto al efecto de la raza, los terneros de raza PM presentaron mayor peso a d 90 y 150 que los de raza Pi. Durante la fase de finalización, los rendimientos globales fueron similares, pero al sacrificio la raza Pi presentó una calidad de la canal superior, que generó un mayor margen económico que la raza PM.En el Ensayo 4 se estudiaron en los mismos terneros del Ensayo 3 la respuesta fisiológica al estrés y la reactividad frente a humanos. Mientras que la edad al destete no tuvo efectos importantes en la respuesta al estrés, la raza sí influyó, al ser los terneros de raza Pi más reactivos al estrés producido por el destete y también a la presencia humana.Los resultados obtenidos en este trabajo proporcionan las bases técnicas para la toma de decisiones en las explotaciones de vacuno de carne, con el objeto de adaptarse mejor a situaciones cambiantes de mercado. / The objective of this thesis was to assess the effect of early weaning and concentrate feeding during the pre-weaning period on calf performance during lactation and fattening in Mediterranean conditions. Calf growth, carcass and meat quality, economic performance and the physiological response to weaning and fear to humans were studied. In Experiment 1, Parda de Montaña (PM) spring-born calves were either early (EW, 90 d of age) or normal weaned (NW, 180 d of age). From day 90 to 180, NW calves were turned out with their dams to high mountain pastures. Age at weaning modified growth paths, because EW calves gained faster between weaning dates, but during the finishing phase NW calves showed compensatory growth, and reached similar weight at slaughter at the same age. On the other hand, early weaning improved the dressing percentage, although it increased the length of the feedlot phase and total concentrate intake, with a concomitant increase of feeding costs. In Experiment 2, the effect of age at weaning (EW, d90, vs. TW, 150 d) and pre-weaning concentrate feeding (supplemented vs. non supplemented) was evaluated in PM autumn-born calves. Pre-weaning concentrate feeding increased weight gains of TW calves during lactation but not those of EW calves. Overall performance in the finishing phase (150-slaughter) was not affected by any effects. However, early weaning increased the dressing percentage whereas pre-weaning concentrate feeding shortened the length of the finishing phase and increased the economic margin. Non-supplemented, TW calves had the lowest economic margin.In Experiment 3, the effect of age at weaning and breed were studied in autumn-born PM and Pirenaica (Pi) calves, that were either early (d 90) or traditionally weaned (d 150). Age at weaning improved weight gains between weaning dates, and carcass conformation score, but it did not affect the economic margin. Concerning the breed effect, PM calves were heavier at 90 and 150 d. However, overall performance in the finishing period did not differ between breeds. On the other hand, carcass quality and some meat characteristics were affected by the breed, with Pi calves presenting better carcass quality, which led to a higher economic margin. In Experiment 4, PM and Pi calves involved in Experiment 3 were used to study the stress response of calves to weaning and their reactions to humans. Age at weaning had no major effects on the stress response to weaning or fear to humans. On the other hand, Pi calves were more reactive than PM calves to the stress of weaning and human presence.The technical and economical results obtained with the different management strategies (age at weaning and pre-weaning concentrate feeding) tested in this thesis can provide technical basis to help the beef cattle farmer in decision-making, in order to adapt farm management to changing conditions.

L’objectiu general de la tesis ha estat el desenvolupament d’assajos i biosensors per a la detecció de toxines que estan presents en el medi aquàtic i l’estudi de la seva aplicabilitat a l’anàlisi de mostres reals. Per tal d’assolir aquest objectiu, s’han caracteritzat proteïnes fosfatases recombinants en quan a activitat, emmagatzematge i estabilitat operacional, així com també la capacitat de ser inhibides per toxines marines (àcid okadaic i els seus anàlegs) i d’aigua dolça (microcistines). S’han establert factors equivalents d’inhibició per a l`àcid okadaic i els seus anàlegs i diverses variants de microcistines, contribuint així a entendre millor la complexitat de perfils multi-toxines en mostres naturals. D’altra banda, s’han explotat l’ús de partícules magnètiques com a suports d’immobilització d’anticossos i enzims en biosensors electroquímics i com a transportadors d’anticossos en immunosensors òptics. Finalment, s’ha avaluat l’aplicabilitat dels assajos i biosensors per a l’anàlisis de mostres de marisc i cianobactèries, correlacionant els resultats amb altres tècniques d’anàlisis establertes. / El objetivo general de esta tesis ha sido el desarrollo de ensayos y biosensores para la detección de toxinas que están presentes en el medio acuático y el estudio de su aplicabilidad al análisis de muestras reales. Para lograr este objetivo, se han caracterizado proteínas fosfatasas recombinantes en términos de actividad, almacenaje y estabilidad operacional, así como la capacidad para ser inhibidas por toxinas marinas (ácido okadaico y sus análogos) y de agua dulce (microcistinas). Se han establecido factores equivalentes de inhibición para el ácido okadaico y sus análogos y varias variantes de microcistinas, contribuyendo a entender mejor la complexidad de perfiles multi-toxinas en muestras naturales. Port otra parte, se ha explotado el uso de partículas magnéticas como soportes de inmovilización de anticuerpos y enzimas en biosensores electroquímicos y como transportadores de anticuerpos en imunosensores ópticos. Finalmente, se ha evaluado la aplicabilidad de los ensayos y biosensores para el análisis de muestras de marisco y cianobacterias, correlacionando los resultados con otras técnicas de análisis establecidas. / The general objective of this thesis has been to develop assays and biosensors for the detection of toxins from aquatic media and to study their applicability to the analysis of samples. To achieve this goal, recombinant protein phosphatases have been characterised in terms of activity, storage and operational stability, as well as ability to be inhibited by marine (okadaic acid and its analogues) and freshwater (microcystins) toxins. Inhibition equivalency factors (IEFs) for the okadaic acid analogues and several microcystin variants have been established, contributing to better understand the complexity of multi-toxin profiles in natural samples. Moreover, magnetic particles have been exploited as antibody and enzyme immobilisation supports in electrochemical biosensors and as antibody carriers in optical immunosensors. Finally, the applicability of assays and biosensors to the analysis of shellfish and cyanobacteria samples has been evaluated, and correlations with other analysis techniques have been established.

The research for new technologies able to determine quality parameters as well as study the effect of High Pressure Processing (HPP) on dry-cured ham is of scientific interest because the information obtained is useful for understanding the changes to which the product is subjected. Besides, this information is valuable for the dry-cured ham industry, as it could provide products which are better characterized for consumers and of higher quality. The main objective of this thesis was to study the potential of different technologies to determine quality parameters of dry-cured ham and elucidate the effect of HPP on the product. The technologies tested in this thesis appear to be promising as tools to determine quality parameters in dry-cured ham. Some of them are currently available for industry and others could be implemented online in the future. / La investigació en noves tecnologies que permetin determinar paràmetres de qualitat, així com estudiar l'efecte de las altes pressions hidrostàtiques (HPP) en pernil curat és d'interès científic perquè la informació obtinguda pot ser útil per entendre els canvis als quals està sotmès el producte. A més, aquesta informació pot tenir un valor important per a la indústria del pernil curat, permetent-li oferir als consumidors productes de més qualitat i millor caracteritzats. L'objectiu principal d'aquesta tesi va ser estudiar el potencial de diferents tecnologies per determinar paràmetres de qualitat del pernil curat i per estudiar l'efecte de les altes pressions en aquest producte. Les tecnologies estudiades en aquesta tesi són prometedores com a eines per a determinar paràmetres de qualitat en pernil curat. Algunes d'elles ja estan actualment disponibles per a la indústria i d’altres podrien arribar a implentar-se en línia en un futur.

En la presente tesis se han llevado a cabo 4 experimentos con cabras lecheras bajo condiciones de estrés por calor (HS) para medir la respuesta bajo las condiciones de estrés (Exp. 1 y 2) y para evaluar el aceite de soja y el propilenglicol como suplementos alimenticios (Exp. 3 y 4). En los Exp. 1 y 2, 8 cabras lecheras de raza Murciano-Granadina, a final (Exp. 1) y a mitad (Exp. 2) de lactación fueron expuestas a diferentes condiciones ambientales, utilizando jaulas metabólicas en una cámara climática. El diseño experimental fue de efecto cruzado (2 periodos de 28-35 d y 4 cabras por grupo) y las condiciones fueron: 1) temperatura neutral (TN, 15 a 20ºC día-noche) y 2) estrés por calor (HS, 12-h d a 37ºC y 12-h noche a 30ºC). La humedad se mantuvo al 40% y luz-oscuridad fue constante (12-12h). Diariamente, se midió la temperatura rectal, la frecuencia respiratoria (0800, 1200 and 1700 h) y la producción de leche, mientras que la composición de la leche y los parámetros sanguíneos fueron evaluados semanalmente. Se determinó los coeficientes de digestibilidad y el balance N y se registró el comportamiento mediante cámaras de video. Además, se realizaron tratamientos con insulina (4.6 µg/kg BW), epinefrina (2 µg/kg BW) y glucosa (0.25 g/kg BW) y se tomaron muestras de sangre para analizar insulina, NEFA y concentraciones de glucosa. En comparación con las cabras TN, las cabras HS experimentaron una mayor temperatura rectal, frecuencia respiratoria, consumo de agua y evaporación de agua. La ingesta de las cabras HS decreció un 21 y 29% en los Exp. 1 i 2, respectivamente. La leche de las cabras HS mostraron un menor porcentaje de grasa, proteína y lactosa. En comparación a las cabras TN, las cabras HS disminuyeron la concentración y la presión sanguínea del CO2 debido al jadeo y mantuvieron el pH sanguineo al bajar la concentración de HCO3–. Las cabras TN y HS tuvieron niveles similares de NEFA en sangre después de la inyección de insulina, pero después de la administración de epinefrina los valores de NEFA fueron mayores (P < 0.05) en las cabras TN que en las HS. Las cabras HS secretaron menos (P < 0.05) insulina que las cabras TN en respuesta al test de tolerancia de glucosa. Las cabras TN y HS presentaron una similar frecuencia alimentaria, aunque la duración de cada ingesta fue menor en las cabras HS que en las TN. Por otra lado, las cabras HS tuvieron una mayor frecuencia de bebida, aunque no hubo variación en la duración. En los Exp. 3 i 4, se utilizaron 8 cabras lecheras multíparas a mitad de lactación de raza Murciano-Granadinas en un diseño de cuadrado latino 4 x 4 con 4 periodos de 21 d cada uno (14 d de adaptación, 5 d de medidas y 2 d de transición entre periodos). Las cabras fueron asignadas a 4 grupos con un diseño factorial 2 x 2. Los factores fueron la suplementación o no suplementación con aceite de soja (Exp. 3) y propilenglicol (Exp. 4) en condiciones de TN o HS iguales a lo mencionado en Exp. 1 y 2. Se evaluó la ingestión, la producción lechera, la composición de la leche y los metabolitos sanguíneos. Desde el punto de vista de salud humana, el HS mejoró el perfil de ácidos grasos de la leche debido a la disminución de los ácidos grasos saturados y el aumento de los ácidos grasos monoinsaturados sin afectar la grasa. El aceite de soja incrementó (P < 0.05) las NEFA en sangre en un 50%, la grasa de la leche en un 30% y el ácido linoleico conjugado en un 360%. La respuesta al aceite de soja fue de la misma magnitud en cabras TN y HS. Por el otro lado, la suplementación con propilenglicol aumentó los niveles de glucosa (P < 0.05) e insulina (P < 0.10), pero disminuyó (P < 0.10) la ingestión y la grasa en leche. Además, los niveles de NEFA y BHBA fueron menores en las cabras suplementadas con el propilenglicol. En conclusion, el HS disminuyó la producción lechera entre un 3 y 10% con una marcada reducción en la proteína de la leche. El tejido lipídico de las cabras HS se volvió insensible a las hormonas lipolíticas, secretando el páncreas menor cantidad de insulina al inyectarle glucosa. El HS no afectó el número de acercamientos al comedero, pero sí redujo su duración. La suplementación con aceite de soja en condiciones HS y TN incrementó de forma similar la grasa de la leche, el ácido trans-vacénico y el ácido linoleico conjugado. Finalmente, el propienglicol incrementó el nivel de glucose e insulina sanguíneo, pero no alteró la proteína de la leche / In the current thesis 4 experiments were carried out using dairy goats under heat stress (HS) to measure responses to HS (Exp. 1 & 2) and to evaluate soybean oil and propylene glycol as feed supplements (Exp. 3 & 4). In Exp. 1 & 2, 8 Murciano-Granadina dairy goats in late (Exp. 1) and mid (Exp. 2) lactation were exposed to different ambient conditions, using metabolic cages in a climatic chamber. Experimental design was a crossover (2 periods of 28-35 d and 4 goats each), and conditions were: 1) thermal neutral (TN, 15 to 20°C day-night), and 2) heat stress (HS, 12-h day at 37°C and 12-h night at 30°C). Humidity was maintained at 40% and light-dark was constant (12-12 h). Rectal temperature and respiratory rate (0800, 1200 and 1700 h) and milk yield were recorded daily, whereas milk composition and blood parameters were evaluated weekly. Digestibility coefficients and N balance were determined and behavior was recorded by video cameras. Moreover, challenges with insulin (4.6 µg/kg BW), epinephrine (2 µg/kg BW) and glucose (0.25 g/kg BW) were done and blood samples were collected for the analysis insulin, NEFA and glucose concentrations. Compared to TN goats, HS goats experienced greater rectal temperature, respiratory rate, water intake, and water evaporation. Intake of HS goats decreased by 21 and 29 in Exp. 1 and 2, respectively. Milk of HS goats contained lower fat, protein and lactose. Panting reduced concentration and pressure of CO2 in blood of HS goats, but they were able to maintain their blood pH similar to TN group by lowering HCO3– in blood. The TN and HS goats had similar blood NEFA after insulin injection, but NEFA values were greater (P < 0.05) in TN than HS goats after epinephrine administration. The HS goats secreted lower (P < 0.05) amounts of insulin than TN goats in response to the glucose tolerance test. Furthermore, TN and HS goats had similar eating bouts, but the duration of each bout was lower in HS than in TN. On the other hand, HS had greater number of drinking bouts with no change in drinking bout durations. In Exp. 3 & 4, 8 multiparous Murciano-Granadina dairy goats at mid lactation were used in a replicated 4 × 4 Latin square design with 4 periods; 21 d each (14 d adaptation, 5 d for measurements and 2 d transition between periods). Goats were allocated to one of 4 treatments in a 2 x 2 factorial arrangement. Factors were supplementation or not with soybean oil (Exp. 3) or propylene glycol (Exp.4, and TN or HS conditions similar to Exp. 1 & 2. Feed intake, milk yield, milk composition, and blood metabolites were evaluated. From the point of view of human health, HS improved milk fatty acid profile by decreasing saturated fatty acids and increasing monounsaturated fatty acids with no effect on milk fat content. The soybean oil increased (P < 0.05) on average blood NEFA by 50%, milk fat by 30%, and conjugated linoleic acid by 360%. The response to soybean oil was with the same magnitude in thermo-neutral and heat stress conditions. On the other hand, the supplementation with propylene glycol increased blood glucose (P < 0.05) and tended to increase (P < 0.10) blood insulin, but dry matter intake and milk fat decreased (P < 0.10). Furthermore, blood NEFA and β-hydroxybutyrate acid decreased (P < 0.05) by propylene glycol. In conclusion, heat stress decreased milk yield by 3 to 10% with a marked reduction in milk protein. Lipid tissue of heat-stressed dairy goats became insensitive to lipolytic hormones and their pancreas secreted lower insulin when glucose was injected. Heat stress had no effect on eating bouts, but the time of each eating bout was shorter. The supplementation with soybean oil increased milk fat, trans-vaccenic acid and conjugated linoleic acid similarly in thermo-neutral as well as in heat stress conditions. Although propylene glycol increased blood glucose and insulin, no change in milk protein was observed.

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A la memòria es presenten els resultats de 4 assajos realitzats per establir l’emissió de GEI (CH4 i N2O) i NH3 en porcs en engreix, diferenciant l’emissió entèrica i la del purí. En el primer, es desenvoluparen els procediments de mostreig als mòduls estancs (ME) i fosa de dejeccions. En el segon s’analitzà l'emissió potencial del purí. En el tercer [transició] i quart[engreix] es va quantificar l’emissió total i procedent del purí. Les emissions de GEI i NH3 incrementaren amb l’edat, el CH4 amb la FND sent el N2O el més variable. L’emissió originada a les dejeccions va contribuir al total emès entre el 3,2 a 17% del CH4; 1,2 a 0,18% del NH3 i 0,92 a 0,05 % del N2O. Les concentracions absolutes de bactèries totals o arquees metanogèniques hidrogeno tròfiques (AMH) i llurs proporcions relatives (AMH) incrementaren al quilo en el seu trànsit a través de l'intestí gros. / En la memoria se presentan 4 ensayos realizadospara establecer la emisión de GEI (CH4 i N2O) y NH3 en cerdos en cebo, diferenciando emisión entérica y procedente del purín. En un primero, se desarrolló el procedimiento de muestreo en módulos (ME) y fosa de deyecciones. En el segundo se analizó la producción potencial del purín. En el tercero (transición) y cuarto (cebo), se determinó la emisión total y la procedente del purín. Las emisiones de GEI y NH3 incrementaron con la edad, el CH4 con la FND y el NH3 con la PB. La emisión procedente de las deyecciones contribuyó al total emitido entre 3,2 a 17% del CH4; 1,2 a 0,18% del NH3 y 0,92 a 0,05% del N2O. Las concentraciones absolutas de bacterias totales o arqueas metanogénicas hidrogenotróficas (AMH) y sus proporciones relativas (AMH) incrementaron en el quilo en su tránsito a través del intestino grueso. / Four trials were conducted to quantify the emission of GHG (CH4 and N2O) and NH3 from the different sources (enteric and slurry) in growing pigs. In the first one, the sampling procedure from the sealed modules (ME) and pits was developed. In the second trial, the potential production of methane from the slurry was determined. In the third (transition phase) and fourth (growing-finishing) trials, the enteric and slurry emissions were measured. GHGs and NH3 increased with age, methane with the NDF and the ammonia with the CP. The emission from slurry in the total emissions was from 3,2 to 17% for CH4; 1,2 to 0,18% for NH3 and 0,92 to 0,05% for N2O. The absolute concentrations of total bacteria or Hydrogenotrophic Methanogenic Archaea (HMA) and the relative proportions of HMA increased in the digesta in their transit through the large intestine.

La cría de avestruces en España se viene desarrollando desde hace algo más de 10 años. Esta tesis trata del desarrollo de marcadores de ADN de utilidad en la cría de estos animales. Los objetivos de la tesis se acordaron mediante un convenio con criadores de avestruz, de acuerdo con su aplicación práctica y su interés científico.La tesis se desarrolla en 5 puntos:1. Obtención de ADN a partir de plumas.2. Identificación de un marcador sexado.3. Identificación individual, test de paternidad y control de genealogías.4. Identificación genética de subespecies.5. Identificación de SNPs en el gen de la hormona de crecimiento. / Ostrich breeding is being developed in Spain in the last 10 years. This PhD thesis devoted to the development of DNA markers of utility in breeding this birds. The objectives of this work were accorded in collaboration with ostrich breeders regarding to its practical application and scientific interest.The thesis includes 5 points:1. Isolation of genomic DNA from feathers.2. Identification of a sex marker.3. Individual identification, paternity test and pedigree control.4. Genetic identification of subspecies.5. Identification of SNPs in the growth homone gene.