Charles Univerzity in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmaceutical Technology Candidate: Veronika Müllnerová Consultant: Doc. RNDr. Milan Dittrich, CSc. Title of thesis: Impact of molecular weight and the grade of branching of aliphatic oligoesters on their hydrolytic degradation Theoretical part of the thesis deals with behavior, properties and applications of biodegradable polyesters, mainly copolymers of lactic and glycolic acid (PLGA). This part concerns degradation, erosion and release mechanism. Furthermore, it describes properties that influence the drug release kinetics from systems based on PLGA. The final section of theoretical part is focused on the in situ forming implants, whose carrier of active substance is biodegradable polyester. The experimental part analyzes the influence of different pH of the medium within physiologically common boundaries and also the influence of ionic force on the degree of swelling and polymer erosion. These degradation parameters have been studied on three potential polyester carriers of active substances - PLGA, M3 (terpolymer of lactic and glycolic acid with mannit) and T3 (terpolymer of lactic and glycolic acid with tripentaerythritol). Polymer bodies were kept in temperature of 37řC inside phosphate-citrate buffers with...

Micro-irradiation systems are used to analyse the effect of ionizing radiation at the cellular and tissue level, targeting individual cells within a population with a controlled low dose. Cell survival experiments using micro-irradiation systems are limited by factors including: 1) the radiation attenuation and optical properties of the chosen cell dish substrate, 2) the registration of the cell dish before and after irradiation or between multiple imaging modalities and 3) the analysis of the cell or colony growth after irradiation. In this thesis, a set of tools have been developed to improve micro-irradiation experiments and to increase the accuracy of information provided by the cell survival data. The first contribution, the substrate cell dish evaluation, provides a set of characteristics defining the substrates used for micro-irradiation experiments based on minimal energy loss and optical clarity using unstained cell imaging. The second contribution was the development of a novel and low cost fiducial marking device for micro-irradiation experiments using an 808 nm laser and providing marks suitable for imaging with multiple modalities. The minimum focused spot diameter was calculated as 22.9 urn and the device was used to create fiducial marks with diameters ranging from 20 urn to 130 urn. The third contribution, the development of a cell counting methodology for use with a lens-free imaging device, has been shown to accurately count thousands of cells suitable for immediate analysis. Approximately 1000 cell colonies, containing 17 729 cells on 11 cell dishes were used for testing and training for automatic cell counting. Validation of the cell counting method showed that 76% and 89% of the cell colonies were counted within a ± 20% and ± 30% error of the ground truth, respectively. Further development of the fiducial marking device, by modifying the choice of laser and making it suitable for multiple types of cell dish substrates, would increase the applications of the device. Development of the cell counting methodology for different cells line, and for cells grown on multiple types of substrates, would make the system suitable for analysis of a wide variety of cell survival studies. The cell counting methodology, applied to the CyMap lens-free imaging device, has the potential to be an extremely useful and cost effective tool for cell survival studies.

Dans le contexte du traitement du kératocône, une formulation contenant de la riboflavine, un principe actif hydrosoluble, deux tensio-actifs (le poloxamère 407 et la monooléine) et de l'eau a été préparée par un processus d'homogénéisation. Un plan factoriel fractionnaire a été utilisé pour estimer les effets principaux et les interactions de cinq paramètres sur deux réponses pertinentes, à savoir la taille des particules et l'efficacité d'encapsulation. Les cinq paramètres étudiés étaient la température des deux phases, la durée de l'émulsification, la présence du chauffage pendant l'homogénéisation, le nombre de cycles et la pression. Il a ainsi été montré que les paramètres les plus influents sont la présence du chauffage pendant l'homogénéisation et la pression qui ont conduit à l'obtention de nanoparticules d'une taille moyenne de 145 nm et une efficacité d'encapsulation moyenne de 46%. La détermination des paramètres optimaux du procédé de fabrication a conduit à l'optimisation de la formulation par le biais de plans d'expériences. L'influence combinée de trois composants a été étudiée dans une partie du diagramme de phase. Ainsi, douze formules décrivant l'espace de conception ont été préparées. Les résultats obtenus par diffraction des rayons X aux petits angles et par cryo-microscopie électronique en transmission ont mis en évidence la présence de nano-objets de structure éponge et/ou hexagonale inverse. Le pourcentage de chacun des composants a été déterminé pour obtenir à la fois une grande efficacité d'encapsulation et une petite taille de particules. Deux formulations très proches dans le diagramme de phase ternaire, ont répondu à ces exigences. / In the context of the keratoconus treatment, a formulation containing riboflavin a water-soluble drug, two surfactants (poloxamer 407 and mono acyl glycerol) and water was optimized and prepared by emulsification and a homogenization process. A fractional factorial design was applied to estimate the main effects and interaction effects of five parameters on two relevant responses, namely particle size and encapsulation efficiency. The five parameters studied were the temperature of the two phases, the duration of emulsification, the presence of heating during homogenization, the number of passes and pressure. It has been shown that the most influent parameters are the presence of heating during the homogenization and the pressure that led to the production of nanoparticles with an average size of 145 nm and an average encapsulation efficiency of 46 %. The determination of the optimal parameters of the process led to an optimization of the formulation by using experimental design. The combined influence of three factor variables (or components) of the formulation that are water, monoolein and poloxamer 407 were, studied. In this way, twelve formulas describing the design space were prepared. Results obtained using SAXS and cryo-TEM evidenced the presence of nano-objects with either sponge or hexagonal inverted structure. In the zone of interest, the percentage of each component was determined to obtain both high encapsulation efficiency and small size of particles. Two formulations are very close in the ternary phase diagram, and have responded to these requirements.

Introdução: Várias controvérsias e diversos questionamentos existem sobre a fisiopatogenia e o melhor tratamento para a doença Rinossinusite Crônica (RSC). Alguns estudos apontam que a dosagem de Óxido Nítrico (ON) do ar expirado pelas narinas pode contribuir no diagnóstico e seguimento desta afecção. Objetivos: Determinar se há diferença na dosagem de ON expirado pelas narinas de pacientes com RSC e indivíduos sem RSC e estabelecer correlação entre os achados clínicos, exames complementares e a quantidade de ON encontrada nos pacientes. Casuística e Método: Estudo retrospectivo com 104 pacientes com RSC e 35 indivíduos sem RSC, atendidos no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo, entre os anos de 2013 e 2016. Foram realizadas dosagens de ON do ar expirado pelas narinas dos pacientes e controles. Posteriormente, realizou-se correlação entre os achados clínicos e exames complementares dos pacientes e a quantidade de ON obtida. Resultados: As dosagens de ON nos pacientes com RSC foram significativamente menores em relação aos controles. Também se observou relação entre dosagem de ON e intensidade de sintomas, queixas clínicas, achados endoscópicos e tomográficos, e o número de seios acometidos, quando realizada a cirurgia. Conclusão: Diante dos resultados obtidos, o que mais chama atenção é a possibilidade de avaliação dos pacientes portadores de RSC com ou sem pólipo nasal por um método aqui padronizado, de fácil manuseio pelos técnicos e pacientes, de baixo custo, não invasivo e que permite também comparar resultados antes e após o tratamento. / Introduction: Chronic rhinosinusitis (CRS) is a disease of the upper respiratory tract with great questions regarding its clinical management. Nitric Oxide (NO) dosing by the air expiratory by the nostrils, can contribute to the diagnosis and follow-up of this affection. Objectives: To determine if there is a difference in the NO expiratory dose in the nostrils of people with CRS and people who do not have CRS, and to establish a clinical correlation between the findings and the amount of NO found in the patients. Casuistic and Method: Retrospective study conducted in 104 patients with CRS and 35 individuals without CRS at Hospital of Clínics of Ribeirão Preto Medical School, University of São Paulo. Between the years of 2013 and 2016. NO dosages were performed by expiratory air from the nostrils of people with and without CRS, and, later an analysis of the clinical findings of the patients with the amount of NO obtained was performed. Results: The NO dosages of patients with CRS were significantly lower in relation to those without CRS. We also found a relationship between the NO dosage, and the intensity of the symptoms, clinical complaints, endoscopic and tomographic findings, and the number of sinuses involved in the surgery. Conclusions: In view of the results obtained, what is most striking is the possibility of evaluating patients with CRS with or without PN, using a low-cost, noninvasive method that is easy to handle by technicians and patients. before and after treatment.

O presente trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar as condições de pastagens em degradação e a influência do nitrogênio e do enxofre na recuperação de Brachiaria decumbens Stapf. em estado de degradação. O estudo foi realizado em duas etapas. A primeira consistiu no levantamento das condições nutricionais da forrageira em duas áreas contíguas, sendo uma não recentemente adubada e outra recentemente adubada. Foram coletadas folhas diagnósticas e raízes, bem como foram realizadas avaliações do teor de clorofila. Amostras de solo nas camadas de 0 a 10 cm e 10 a 20 cm também foram coletadas para a avaliação de fertilidade do solo. O solo amostrado na área recentemente adubada apresentou teores mais elevados de matéria orgânica, B, Cu, Fe e Zn em ambas camadas, que aquele da área não recentemente adubada. O capim na pastagem da área recentemente adubada apresentou concentrações mais elevadas de N, Cu, Fe e Zn que o capim da área não recentemente adubada. A segunda etapa, constituída de dois experimentos, foi conduzida em casa-de-vegetação com a utilização de 96 cilindros de solo contendo capim-braquiária, coletados nas áreas em estudo e colocados em vasos plásticos. Empregou-se um esquema fatorial 4 x 3 (doses de nitrogênio e de enxofre) perfazendo 12 combinações, as quais foram distribuídas segundo o delineamento experimental de blocos completos ao acaso, com quatro repetições, para cada experimento. Foram utilizadas quatro doses de nitrogênio (0; 50; 100 e 200 mg dm-3) em combinação com três doses de enxofre (0; 30 e 60 mg dm-3), com objetivo de avaliar os efeitos na produção de matéria seca da parte aérea, no perfilhamento, no teor de clorofila, na área foliar e na composição mineral da folha diagnóstica dessa forrageira. O primeiro corte das plantas ocorreu 40 dias após o corte de nivelamento, o segundo corte aos 40 dias após o primeiro corte e o terceiro corte aos 40 dias após o segundo corte. Os resultados evidenciaram que a interação entre nitrogênio e enxofre foi significativa (P<0,01) na produção de matéria seca da parte aérea da Brachiaria decumbens, no primeiro e no segundo crescimentos. Para o terceiro crescimento houve significância (P<0,01) para as doses de nitrogênio para a forrageira procedente da área não recentemente adubada. Na produção de matéria seca da área recentemente adubada houve significância (P<0,01) para as doses de nitrogênio e de enxofre no primeiro e no terceiro crescimentos. No segundo crescimento houve efeito significativo (P<0,01) para doses de nitrogênio. No perfilhamento da forrageira houve significância (P<0,01) para as doses de nitrogênio, nos crescimentos avaliados da forrageira, nos dois experimentos. As doses de nitrogênio tiveram significância (P<0,01) na concentração de nitrogênio na folha diagnóstica dessa forrageira no primeiro crescimento, para ambos os experimentos. A interação entre doses de nitrogênio e de enxofre foi significativa (P<0,01) para a concentração de nitrogênio na folha diagnóstica no segundo crescimento, nos dois experimentos e para a concentração de enxofre no terceiro crescimento, no experimento da área recentemente adubada. Para a produtividade da Brachiaria decumbens na pastagem estudada sugere-se a aplicação conjunta de nitrogênio e enxofre. / The present work was conducted with the objective of evaluating pastures under degradation and the influences of nitrogen and sulfur supply for Brachiaria decumbens recovery. The study was accomplished in two stages. In the first one it was evaluated the nutritional conditions of this grass in two areas, one not recently fertilized and another recently fertilized. Diagnostic leaf laminae and roots were collected and chlorophyll concentration was determined. Soil samples, at 0 to 10 cm and 10 to 20 cm depth, were also collected for soil fertility evaluation. The soil sampled in the recently fertilized area showed higher concentrations of organic matter, B, Cu, Fe and Zn in both soil depth, than in the not recently fertilized area. The grass in the pasture of the recently fertilized area showed higher concentrations of N, Cu, Fe and Zn than in the not recently fertilized area. The second stage of this research was carried out in two experiments in a greenhouse for which 96 soil cores containing signal grass were collected in the studied pastures and put in plastic pots. A 4 x 3 factorial (nitrogen rates and sulfur rates) in a randomized complete block design, with four replications, was used in each experiment. Nitrogen rates were 0; 50; 100 and 200 mg dm-3 whereas sulfur rates were 0; 30 and 60 mg dm-3. Plant tops dry matter yield, plant tillering, chlorophyll concentration, leaf area and plant tissue mineral composition were evaluated. Plants were harvested three times at: 40 days after the leveling cut, 40 days after the first harvest and 40 days after the second harvest. The results showed that the nitrogen x sulfur interaction was significant (P<0.01) for the plant tops forage yield in the first and second harvests of both experiments. For the third harvest, nitrogen application had significant (P<0.01) effect on forage yield in the grass coming from the area not fertilized in the field. Dry matter yield by the grass collected in the fertilized area was significantly (P<0.01) affected by the nitrogen and sulfur rates in the first and third harvests. In the second harvest nitrogen rates had significant (P<0.01) effects on forage yield. For the tiller number nitrogen rates were significant (P<0.01), in the two experiments. Nitrogen rates significantly (P<0.01) influenced nitrogen concentration in the diagnostic leaf laminae from the first harvest, in both experiments. Nitrogen x sulfur interaction was significant (P<0.01) for the nitrogen concentration in diagnostic leaf laminae in the second harvest in the two experiments, and for the sulfur concentration in diagnostic leaf laminae in the experiment with the grass originated in the not recently fertilized area. The joint application of nitrogen and sulfur is suggested for the productivity of Brachiaria decumbens in the studied pastures.

Níveis sangüíneos de ciclosporina A (CSA) que minimizam a rejeição celular aguda (RCA) no transplante renal com o menor efeito tóxico vêm sendo o alvo de recentes pesquisas. A escolha de terapia imunossupressora com várias drogas permite o uso de doses mais baixas e com menores efeitos colaterais. Níveis de CSA necessários para evitar RCA podem variar com diferentes esquemas terapêuticos. Este estudo prospectivo realizado em um único centro avaliou a eficácia e segurança de dois diferentes níveis sangüíneos de CSA através da área sob a curva de doze horas (AUC 0-12). Cinqüenta e oito receptores de transplante renal foram randomizados para dois grupos, 25 para o grupo AUC0-12 alta (9000-11000 ng.h/mL) e 33 para o grupo AUC0-12 baixa (5000-7000 ng.h/mL). Após a introdução da CSA, a AUC foi avaliada nos dias 4, 7, 14, 21, 28, 42, 56, 70, 84 e 90. Os grupos foram comparáveis em idade, sexo, cor, tipo de doador, uso de indução e outras drogas imunossupressoras. Não houve diferença estatística na incidência de RCA. Foi realizada análise dos pacientes que apresentaram RCA em comparação com os pacientes livres de RCA. A análise de regressão logística mostrou que é necessária uma AUC 0-12 >- 9500 ng.h/mL com especificidade de 84% e sensibilidade de 76%, AUC 0-4 4000 ng.h/mL com especificidade de 91% e sensibilidade de 84% e C2 (concentração sangüínea na segunda hora pós- 6 dose) com especificidade de 92% e sensibilidade de 84% >- 1450 ng/ml, para predizer ausência de RCA. Quando utilizada terapia de indução, níveis mais baixos de AUC0-12, AUC0-4 e C2 (8160 3636 ng.h/ml, 3146 +- 262 ng.h/ml, 1043 +- 151 ng/mL, respectivamente) foram necessários para evitar RCA, em relação aos pacientes que não rejeitaram e não receberam indução (11072 +- 3809 ng.h/ml, 5403 +- 1782 ng.h/ml e 1816 +- 151ng/mL, respectivamente). Esses dados confirmam a necessidade de altos níves de CSA, na ausencia de indução para prevenção de RCA nos três primeiros meses pós-transplante renal e, o emprego de indução permite que níveis sangüíneos mais baixos de CSA sejam empregados com o intuito de prevenir RCA nos primeiros 90 dias após transplante renal / Multiple-drug therapy allows the use of lower doses with fewer side effects. Cyclosporin A (CSA) levels necessary to avoid rejection may vary with different drug combinations. To address this issue, fifty-eight kidney transplant recipients were randomized into two groups: 25 patients to the twelve-hour area under the curve (AUC0-12) high arm (9000-11000 ng.h/mL) and 33 to the AUC0-12 low arm (5000-7000 ng.h/mL). After CSA introduction, AUC0-12 was measured at days 4, 7, 14, 21, 28, 42, 56, 70, 84, and 90. The two groups were comparable regarding age, gender, race, donor type, induction therapy and other immunosuppressive drugs. There was no significant difference in the rate of acute cellular rejection episodes between the two groups. A retrospective analysis was carried out comparing rejectors to non-rejectors, related to induction therapy status. Logistic regression analysis revealed that an AUC0-12 >- 9000 ng.h/mL or AUC0-4 >-4000ng.h/mL or two-hour post-dose cyclosporin level (C2) of >- 1450 ng/mL predicted a rejection-free course. Lower levels of C2 and AUC 0-4 (1043 +-151 ng/mL and 3146 +- 262ng/mL, respectively) were required in non-rejecting patients when induction therapy was used

Orientador: Anselmo Gomes de Oliveira / Banca: Rosemeire Cristina Linhari Rodrigues Pietro / Banca: Thalita Pedroni Formariz Pilon / Banca: Clovis Augusto Ribeiro / Banca: Francisco Benedito Teixeira Pessine / Resumo: 2-(2-nitrovinil)furano (G-0) apresenta atividade antiprotozoária, antibacteriana e antifúngica frente a elevado número de patógenos porém, a capacidade de sublimação, baixa velocidade de dissolução em meio aquoso, problemas de compatibilidade com excipientes e fotodegradação, tem limitado sua incorporação em formas farmacêuticas para uso humano e/ou veterinário. O propósito do presente trabalho foi avaliar duas alternativas para a estabilização do candidato a fármaco, através da formação de complexos de inclusão liofilizados (FD) com hidroxipropil-β-ciclodextrina e sulfobutiléter-β-ciclodextrina sódica e utilizando a microencapsulação com etilcelulose pelo método de emulsificação/evaporação do solvente. Uma vez formados e previamente caracterizados, os complexos foram submetidos ao ensaio de estabilidade acelerada a 40°C/75 %HR e ensaios de fotoestabilidade acelerada. A câmara de fotoestabilidade também foi utilizada para confirmar o perfil de degradação dos complexos. Os fotoprodutos foram isolados em coluna analítica e o maioritário foi caracterizado por espectroscopia de RMN. Foi avaliada também a volatilidade do G-0 na forma de complexos comparado com misturas físicas equivalentes através de TGA e CG-HS-FID, complementando assim um estudo desenvolvido anteriormente no modo isotérmico. As propriedades biofarmacêuticas da substância livre e na forma complexada foram estudadas em relação ao comportamento de dissolução em Fluido Vaginal Simulado e a permeação/retenção em muco... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: 2-(2-nitrovinyl)furan (G-0) has antiprotozoal, antibacterial and antifungal activity against a large number of pathogens, although the sublimation, low dissolution rate in aqueous medium, low compatibility with excipients and photodegradation, have hindered the incorporation in pharmaceutical dosage forms, to use in human and/or veterinary medicine. The aim of this work was to evaluate two alternatives for the stabilization of the drug candidate through freeze-drying inclusion complex formation (FD) with hydroxypropyl-β-cyclodextrin and sulfobutylether-β-cyclodextrin sodium salt and through microencapsulation with ethylcellulose by mean of emulsion/solvent evaporation method. Once the complexes were prepared and fully characterized previously, they were subjected to an accelerated stability study at 40°C/75 %RH, and a photostability assay under forced irradiation conditions. A photostability chamber was also used in order to confirm the degradation profile for the complexes. Photoproducts were isolated in analytical column and the main degradation product was characterized aided by NMR. Drug volatility was also evaluated when G-0 was complexed, and compared with equivalent physical mixtures through TGA and GC-HS-FID. Biopharmaceutical properties of free drug and in the complexes were studied in terms of dissolution rate in Simulated Vaginal Fluid and permeation/retention in bovine vaginal mucosa. Finally, the influence of both complexes on the "in vitro" antifungal activity a... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

O objetivo do presente estudo foi avaliar os perfis de metabólitos de glicocorticóides fecais através de radioimunoensaio em cachorros-vinagre (Speothos venaticus) mantidos em cativeiro e suas possíveis implicações na função reprodutiva. Duas fêmeas e quatro machos adultos, após período de condicionamento, foram marcados e tiveram suas fezes recolhidas durante 45 dias. Estes animais recebiam diariamente marcadores (corantes e miçangas) para a devida identificação das amostras fecais. O desafio com ACTH foi realizado em uma das fêmeas e mostrou o perfil reativo esperado, validando a técnica do ponto de vista fisiológico. As concentrações de metabólitos de glicocorticóides fecais para o grupo em geral variaram de 2,32 a 65,09 &mu;/g de fezes secas, com média e desvio-padrão de 18,11&plusmn;11,33 &mu;/g de fezes secas, respectivamente. Quatro animais apresentaram um pico cada um, porém aparentemente, sem relação com qualquer evento estressante em particular. Não se verificou diferença significativa nos perfis de glicocorticóides fecais entre machos e fêmeas, nem entre a fêmea dominante e os outros indivíduos. Tais resultados sugerem que os animais estão bem adaptados à condição do cativeiro e provavelmente isentos ou minimamente afetados pelo estresse. A dosagem dos glicocorticóides fecais é uma ferramenta útil no monitoramento não-invasivo para avaliar a condição de estresse do cachorrovinagre, demonstrando se aspectos de manejo e fatores ambientais interferem de modo importante ou não no bem-estar animal e no potencial reprodutivo, sendo de interesse para a manutenção e conservação da espécie. / The aim of this study was to evaluate the fecal glucocorticoid metabolite profiles by radioimmunoassay in captive bush dog (Speothos venaticus) and its possible role in the reproductive function. Six adult animals (two females and four males), after training, were marked and their fecal samples were collected during 45 days. Every day the animals received markers (dye and colored plastic beads) for the appropriate identification of each sample. One female was used to the ACTH challenge and showed the expected classical response, with a significant peak one day after stimulation, therefore confirming the physiological validation. The overall fecal glucocorticoid metabolite concentrations for the whole group, ranged from 2,32 to 65,09 &mu;/g of dried feces, with an average and standard deviation of 18,11&plusmn;11,33 &mu;/g of dried feces, respectively. Four animals revealed one individual peak during the observation period, however they could not be correlated with any stressful event. The fecal glucocorticoid metabolite concentrations did not show significant differences between males and females neither between the dominant female and the other animals in the study. The results suggest that the animals are well adapted to the captive conditions and likely without or minimally affected by stress. The fecal glucocorticoid metabolite dosage is a useful non-invasive tool to evaluate the bush dog stress situation and to monitor local management and environmental factors that could possibly influence the well being and reproductive success, considered both key factors for the specie maintenance and conservation.

Common methods for commissioning linear accelerators often neglect beam data for small fields. Examining the methods of beam data collection and modeling for commissioning linear accelerators revealed little to no discussion of the protocols for fields smaller than 4 cm x 4 cm. This leads to decreased confidence levels in the dose calculations and associated monitor units (MUs) for Intensity Modulated Radiation Therapy (IMRT). The parameters of commissioning the Novalis linear accelerator (linac) on the Eclipse Treatment Planning System (TPS) led to the study of challenges collecting data for very small fields. The focus of this thesis is the examination of the protocols for output factor collection and their impact on dose calculations by the TPS for IMRT treatment plans. Improving output factor collection methods, led to significant improvement in absolute dose calculations which correlated with the complexity of the plans. / Includes bibliography. / Thesis (M.S.)--Florida Atlantic University, 2014. / FAU Electronic Theses and Dissertations Collection

O principal objetivo desta pesquisa foi o acompanhamento clínico-laboratorial do ciclo reprodutivo de jabuti-piranga (Geochelone carbonaria, SPIX, 1824) e jabuti-tinga (Geochelone denticulata, Lineu, 1766) servindo-se de métodos minimamente invasivos como imagens radiográficas, ultrassonográficas e alterações hormonais séricas em fêmeas hígidas em idade reprodutiva. Para tanto, ao longo de 13 meses seguidos, foram utilizadas 7 fêmeas de G. carbonaria e 5 fêmeas de G. denticulata mantidas em recinto comum, hígidas e em idade reprodutiva. As variações médias de umidade do ar, índices pluviométricos, temperatura e fotoperíodo foram acompanhados semanalmente. Todos os animais foram avaliados uma vez ao mês. As imagens radiográficas dorso-ventrais foram feitas com os animais em estação na Fundação Parque Zoológico de São Paulo em aparelho fixo e submetidos a exposições de 300 mA por 1/60 segundo. Cada fêmea radiografada teve seus ovos mensurados com o auxílio de um paquímetro. No acompanhamento ultrassonográfico utilizou-se aparelho com microtransdutor convexo de freqüência dupla 4 e 7,5 mHz, enfatizando-se as estruturas ovarianas (folículos em desenvolvimento e desenvolvidos) e a presença ou não de ovos com casca no oviduto. Esta avaliação foi feita através das janelas acústicas craniais e inguinais por período um pouco maior que 10 minutos. As estruturas ovarianas foram mensuradas seguindo uma escala interna ao aparelho durante o exame e as imagens foram gravadas digitalmente para posterior recuperação. Realizou-se o acompanhamento do ciclo reprodutivo através de colheitas seriadas de sangue para a dosagem de estrógeno, progesterona, testosterona e corticosterona. Para as colheitas de sangue os animais foram fisicamente contidos, permanecendo sustentados por suporte metálico. Estas foram feitas prioritariamente através de punção da veia jugular. As amostras foram dosadas no Laboratório de Dosagens Hormonais do Departamento de Reprodução Animal da Faculdade de Medicina Veterinária da USP, por meio de kits comerciais de radioimunoensaio (RIA) em fase sólida. Onde foi possível se verificar alterações entre as duas espécies no que diz respeito ao ciclo anual. Foi possível verificar um pico de progesterona dois meses antes do pico de folículos em desenvolvimento na G. carbonaria enquanto que na G. denticulata, houve início de desenvolvimento folicular dois meses após uma marcada elevação dos níveis séricos de progesterona, porém o pico de progesterona só se verificou no início do verão. Os níveis séricos de testosterona e corticosterona observados em fêmeas de ambas as espécies não mostraram variações significativas ao longo do ano. Pela ultrassonografia foi possível verificar a vitelogênese nas fêmeas estudadas. A G. carbonaria apresentou pico de estradiol no início do verão enquanto a G. denticulata no final deste, coincidindo coma maior freqüência de observação de folículos desenvolvidos pelo exame ultrassonográfico. As fêmeas de G. carbonaria se mostraram mais eficientes na produção de ovos que as G. denticulata. Ambas as espécies realizaram uma postura anual. / The main objective of this study was to evaluate the reproductive cycle of red-foot (Geochelone carbonaria, SPIX, 1824) and yellow-foot tortoises (Geochelone denticulata, Lineu, 1766) using minimally invasive clinical and laboratory methods, such as radiographic and ultrasound images and hormone dosages. Seven G. carbonaria and 5 G. denticulata healthy females at reproductive age were kept together for 13 consecutive months. Mean variations in air humidity, pluviometric indexes, temperature and photoperiod were recorded weekly. All animals were evaluated once a month. Dorsoventral radiographic images of the animals in a standing position were obtained at the Fundação Parque Zoológico de São Paulo, by means of a fixed x-ray device, using 300 mA for 1/60 second. Eggs of each female that was analyzed by x-ray were measured using a caliper. Ultrasound examination was carried out using a convex micro transducer at two frequencies, 4 and 7.5 mHz. Ovarian structures (developing and developed follicles) were analyzed, as well as the presence or absence of shelled eggs inside the oviduct, using the cranial and inguinal acoustic windows for a little longer than 10 minutes. Ovarian structures were measured during the examination according to an internal scale of the device, and images were digitally recorded to be recovered later. Reproductive cycle was analyzed by means of serial blood collections for estrogen, progesterone, testosterone, and corticosterone dosage. Animals were physically restrained and blood samples were collected, which was preferentially performed by means of a puncture in the jugular vein. Samples were analyzed in the Laboratório de Dosagens Hormonais at the Departamento de Reprodução Animal, Faculdade de Medicina Veterinária at USP, using commercial solid phase radioimmunoassay kits (RIA) in order to assess differences in the annual cycle of the two species. A progesterone peak was observed two months before the peak of developing follicles in G. carbonaria, whereas G. denticulata showed follicular development two months after a marked increase in progesterone serum levels. However, progesterone peak was only observed in the beginning of the summer while in G. denticulata it was observed at the end. Testosterone and corticosterone serum levels observed in females of both species did not show significant variations throughout the year. Ultrasound examination showed vitellogenesis in females studied. An estradiol peak was observed in G. carbonaria in the beginning of the summer, and in G. denticulata in the end of this season, coinciding with a greater rate of developed follicles in ultrasound images. G. carbonaria females were more efficient in egg production than G. denticulata. Both species laid eggs once during the year.