Orientador: Mário Tanomaru Filho / Resumo: Este estudo avaliou morfologia, preparo e obturação com diferentes técnicas e materiais em canais radiculares ovais. Quinhentos e vinte incisivos inferiores foram avaliados por meio de radiografias digitais nos sentidos vestíbulo lingual (VL) e mesio distal (MD), sendo obtidos a partir da relação de diâmetro VL/MD: 23.3% canais achatados; 41.3% ovais; 27.3% arredondados; 4.5% redondos e 3.6% com achatamento VL (Publicação 1). Os incisivos classificados como ovais foram preparados: Reciproc 40 (R40) reciprocante anti-horário; MTwo 40, taper .06 (M 40.06) reciprocante horário (150° horário e 30° anti-horário); e MTwo 20, taper .06 seguido de MTwo 40, taper .06 (M 20/40.06) em reciprocante horário (Publicação 2); R40, Unicone 20.06 seguido de 40.06 reciprocante (Uni20/40.06) e sistema Mtwo até 40.06 rotatório (Mtwo seq) (Publicação 3); e R40, M40.06 e Mtwo seq (Publicação 4). A obturação foi realizada pelas técnicas de cone único (CU) ou condensação lateral (CL) e cimento AH Plus (AHP) (Publicação 4); CU e AHP ou Neo MTA Plus (NMTAP) (Publicação 5); e CL e MTA Fillapex (MTAF) ou AHP (Publicação 6). Escaneamentos foram realizados antes e após cada etapa experimental, utilizando o microtomófrafo SkyScan 1176. Volume, porcentagem de debris, de superfície não instrumentada e de falhas na obturação foram obtidos. Dados foram submetidos aos testes estatísticos ANOVA e Tukey, Kruskal-Wallis e Dunn, T Pareado ou Mann-Whitney (α=0.05). Reciproc e MTwo usando diferentes cinemáticas aprese... (Complete abstract click electronic access below) / Abstract: This study evaluated the morphology, preparation and filling using different techniques and materials in oval-shaped canals. Five hundred and twenty mandibular incisors were evaluated using digital radiography in the buccolingual (BL) and mesio distal (MD) directions, being obtained from the VL / MD diameter ratio: 23.3% flattened canals; 41.3% ovals; 27.3% rounded; 4.5% round e 3.6% with flattening BL (Publication 1). The oval-shaped incisors were prepared: Reciproc 40 (R40) counterclockwise reciprocating; MTwo 40, taper .06 (M 40.06) clockwise reciprocating (150° clockwise and 30° counterclockwise); and MTwo 20, taper .06 and MTwo 40, taper .06 (M 20/40.06) clockwise reciprocating (Publication 2); R40, Unicone 20.06 and 40.06 reciprocanting (Uni20/40.06) and Mtwo rotary system until 40.06 (Mtwo seq) (Publication 3); and R40, M40.06 e Mtwo seq (Publication 4). Filling was performed using single-cone technique (SC) or lateral condensation (LC) and AH Plus sealer (AHP) (Publication 4); SC and AHP or Neo MTA Plus (NMTAP) sealer (Publication 5); and LC using MTA Fillapex (MTAF) or AHP sealer (Publication 6). Scans were performed before and after each experimental stage, using the SkyScan 1176 micro-computed tomography. Volume, percentage of debris, percentage of uninstrumented surface and voids in obturation were obtained. Data were submetted to ANOVA and Tukey's tests or Kruskal-Wallis and Dunn tests, non-paired T test or Mann-Whitney (α=0.05). Reciproc and Mtwo using different... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Orientador: Gisele Faria / Resumo: O hipoclorito de cálcio [Ca(OCl)2] e o cloridrato de octenidina (OCT) têm sido estudados como potenciais soluções irrigadoras endodônticas alternativas ao hipoclorito de sódio (NaOCl) ou à clorexidina (CHX). Os objetivos deste estudo foram avaliar a citotoxicidade do Ca(OCl)2 e do OCT (Publicação 1), e o efeito do OCT na limpeza do canal radicular (Publicação 2). Para a avaliação da citotoxicidade, foram utilizadas células do ligamento periodontal humano (hPDL) e fibroblastos da linhagem L929. As células foram expostas a diferentes diluições das soluções de Ca(OCl)2 a 2,5 e 5%, OCT a 0,1%, NaOCl a 2,5% e CHX a 2%. A viabilidade celular foi avaliada por meio dos ensaios do metil-tiazol-tetrazólio (MTT) e do vermelho neutro (NR), e a migração celular pelo teste de cicatrização. A análise estatística foi efetuada empregando ANOVA de dois fatores e teste de Bonferroni (α=0,05). Os ensaios MTT e NR mostraram, nas células do hPDL, que o OCT a 0,1% foi menos citotóxico (P<0,05), seguido da CHX a 2% e do Ca(OCl)2 a 2,5% (P<0,05). Não houve diferença significativa entre NaOCl a 2,5% e Ca(OCl)2 a 5% (P>0,05), sendo que estas soluções apresentaram maior citotoxicidade que as demais. Em L929, o resultado foi similar, exceto que não houve diferença significativa entre CHX a 2% e Ca(OCl)2 a 2,5% (P>0,05). No teste de cicatrização, tanto nas células do hPDL quanto L929, a migração celular do OCT a 0,1%, CHX a 2%, Ca(OCl)2 a 2,5% foi significativamente maior do que o Ca(OCl)2 a 5% e NaOCl a ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Calcium hypochlorite [Ca(OCl)2] and octenidine hydrochloride (OCT) have been studied as alternative irrigating solutions to sodium hypochlorite (NaOCl) or chlorhexidine (CHX). The objectives of this study were to evaluate the cytotoxicity of Ca(OCl)2 and OCT (Publication 1), and the effect of OCT on root canal cleaning (Publication 2). For cytotoxicity evaluation, human periodontal ligament (hPDL) cells and permanent cell line of mouse fibroblasts L929 were used. The cells were exposed to different doses of different solutions: 2.5% and 5% Ca(OCl)2, 0.1% OCT, 2.5% NaOCl and 2% CHX for 10 minutes. Cell viability was assessed by methyl-thiazoltetrazolium (MTT) and neutral red (NR) assays, and cell migration was determined by the scratch assay. Statistical analysis was performed by two-way ANOVA and Bonferroni tests (α=0.05). The MTT and NR assays revealed that 0.1% OCT was less cytotoxic in hPDL cells (P<0.05), followed by 2% CHX and 2.5% Ca(OCl)2 (P<0.05). There was no significant difference between 2.5% NaOCl and 5% Ca(OCl)2 (P>0.05), but these solutions showed greater cytotoxicity than the others. The result was the same for L929 cells, except that there was no significant difference between 2% CHX and 2.5% Ca(OCl)2 (P>0.05). Scratch assay in L929 and hPDL cells showed that cell migration of 0.1% OCT, 2% CHX and 2.5% Ca(OCl)2 groups was higher than 5% Ca(OCl)2 and 2.5% NaOCl groups at 24 hours (P<0.05). For evaluation of OCT cleaning capacity, fifty human unirradicular extra... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Gisele Faria / Resumo: Avaliar o efeito do ácido peracético (AP) a 1% como solução irrigadora única sobre a dentina radicular por meio da análise da microdureza, erosão, rugosi-dade, presença de smear layer, resistência de união e penetrabilidade intraden-tinária de cimento endodôntico. Hemi-secções radiculares de dentes de huma-nos foram submetidas a análise de microdureza, rugosidade (n=10) e a incidên-cia de erosão dentinária (n=15) após a aplicação dos protocolos de irrigação em-pregados no preparo biomecânico: G1-AP a 1%, G2-NaOCl a 2,5%, G3-NaOCl a 2,5%+EDTA a 17%+NaOCl a 2,5% e G4-solução salina. Para a avaliação de smear layer (MEV - Microscópio Eletrônico de Varredura) (n=15) e na avalia-ção da resistência de união (push - out) do cimento AH Plus à dentina e pene-tração intradentinária do cimento endodôntico (n= 10) outras raízes foram igual-mente preparadas. Os resultados foram submetidos aos testes de ANOVA ou Kruskal Wallis (α=0,05). Houve redução da microdureza e aumento da rugosi-dade dentinária em G1 e G3 (P>0,05), que diferiram de G2 e G4 (P<0,05). G3 apresentou maior incidência de erosão dentinária nos terços cervical e médio radicular que os demais grupos (P<0,05). Em todos os terços radiculares, G1 e G3 apresentaram similar presença de smear layer (P>0,05), porém em menor presença que G2 e G4 (P<0,05). A resistência de união e penetrabilidade do cimento endodôntico foi maior em G1 e G3 que nos demais grupos (P<0,05). Entre G1 e G3 e G2 e G4 não houve diferenças (P>0,05). O AP pro... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: To evaluate the effects of peracetic acid (PA) on root dentin through microhard-ness, erosion, roughness, smear layer, bond strength and intradentinal penetra-bility of endodontic cement. Root hemi sections were subjected to analysis mi-crohardness, roughness (n=10) and incidence of dentin erosion (n=15) after ap-plication of irrigation protocols: G1- 1% PA, G2- 2.5% NaOCl, G3- 2.5%NaOCl + 17% EDTA + 2.5% NaOCl and G4- saline. Roots were also prepared for the eval-uation of smear layer (MEV) (n=15) and other roots for evaluation of bond strength and intradentinal penetration (confocal microscopy) of endodontic ce-ment (n=10). The results were submitted to ANOVA or Kruskal Wallis tests (α = 0.05). There was reduction of microhardness and increase of dentin roughness in G1 and G3 (P> 0.05), which differed from G2 and G4 (P <0.05). G3 presented a higher incidence of dentin erosion in the cervical and middle thirds than the other groups (P <0.05). In all the thirds, G1 and G3 had a similar presence of smear layer (P> 0.05), however in less presence than G2 and G4 (P <0.05). The bond strength and penetrability of the endodontic cement was higher in G1 and G3 than in the other groups (P <0.05). Between G1 and G3 and G2 and G4 there were no differences (P> 0.05). The AP provides similar reduction of microhard-ness and increase of roughness, cleaning, bond strength and cement penetrabil-ity in the dentin to the protocol with NaOCl and EDTA, but with a lower incidence of dentin erosio... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Milton Carlos kuga / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do álcool isopropílico, soro fisiológico, ácido citríco 10% e ácido peracético 1% como soluções de irrigação intermediária entre o hipoclorito de sódio 2,5% (NaOCl) e o digluconato de clorexidina 2% (CHX) sobre a dentina de canais radiculares. Inicialmente cento e vinte caninos humanos extraídos foram preparados até o instrumento F5 e irrigados com NaOCl a 2,5% e EDTA 17%. Sessenta dentes foram divididos em 6 grupos (n = 10), de acordo com o protocolo de irrigação intermediária: G1 (controle negativo, EDTA 17% e NaOCl 2,5%); G2 (controle positivo, CHX); G3 (soro fisiológico); G4 (álcool isopropílico); G5 (ácido cítrico); G6 (ácido peracético) . Em seguida, os espécimes foram clivados e a dentina do canal radicular analisada através de microscopia eletrônica de varredura (MEV), nos segmentos cervical-médio e médio-apical, a fim de detectar a presença de debris e smear layer. Em seguida foi realizada análise de EDS para detectar a quantidade de Cl, Ca, P e O. Outros 60 dentes foram tratados igualmente ao estudo anterior, obturados adicionando rodamina ao cimento obturador para posterior análise de confocal, a fim de analisar a penetrabilidade do cimento endodôntico na dentina radicular, e então submetidos ao teste de push out, nos terços cervical, médio e apical radicular. Os espécimes foram avaliados utilizando uma máquina universal de ensaios mecânicos. Análises estatística foram submetidas aos testes de Kruskal –Wallis, Du... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

O objetivo do presente estudo foi determinar a capacidade de dissolução tecidual, tensão superficial, e capacidade de limpeza de soluções Ca(OCl)2 e compará-las ao NaOCl. A dissolução tecidual foi testada em fragmentos de polpas bovinas divididos em 18 grupos, metade deles utilizando as amostras livremente depositadas em poços de cultura de células e a outra metade utilizando as amostras fixadas em bases de dentina bovina. As soluções testadas foram o NaOCl a 0,5%, 1%, 2,5% e 5,25% e o Ca(OCl)2 a 0,5%, 1%, 2,5% e 5,25%. O grupo controle foi o soro fisiológico. Essas soluções foram empregadas sobre as amostras com dez irrigações/aspirações sucessivas de 1 minuto. A capacidade de dissolução foi mensurada pela percentagem de perda de peso. A tensão superficial do NaOCl a 0,5%, 1%, 2,5% e 5,25% e do Ca(OCl)2 a 0,5%, 1%, 2,5% e 5,25%, além de um grupo controle, água destilada, foi mensurada através da técnica do anel de platina com um tensiômetro de Du Noüy. Foram realizadas nove mensurações de cada solução e o resultado expresso em média e desvio padrão. Para a análise da capacidade de limpeza foram utilizados 50 dentes monorradiculares humanos, divididos em 5 grupos, que foram preparados com limas tipo K e irrigados com NaOCl a 2,5%, NaOCl 5,25%, Ca(OCl)2 2,5% ou Ca(OCl)2 5,25%. O grupo controle foi irrigado com soro fisiológico. Através da microscopia eletrônica de varredura foram analisados os diferentes terços dos canais quanto à remoção de debris e à presença de smear layer. Foram atribuídos escores de 1 a 4 e a frequência destes foi verificada para cada grupo. Os resultados mostraram que quanto à dissolução não houve diferença significante entre NaOCl e Ca(OCl)2 para iguais concentrações. As soluções mais concentradas foram mais eficazes na dissolução. Os valores de tensão superficial das soluções de Ca(OCl)2 variaram de 68,48 a 72,88 mJ/m. A remoção de debris do grupo do Ca(OCl)2 a 5,25% foi inferior ao grupo controle no terço cervical. Nos demais terços não houve diferença entre os grupos. Quanto à remoção de smear layer, não houve diferença entre os grupos. As soluções de hipoclorito de cálcio apresentam capacidade de dissolução tecidual, entretanto suas tensões superficiais foram superiores quando comparadas às soluções de hipoclorito de sódio. Além disso, não foram capazes de remover a smear layer e debris. / The aim of this study was to determine the tissue dissolution capacity, surface tension, and cleaning ability of Ca(OCl)2 solutions and compare to the NaOCl properties. The dissolution was tested on bovine pulps fragments divided into 18 groups, half of them was freely deposited samples in cell culture wells and the remaining samples were fixed on bovine dentin bases. The solutions tested were 0.5% NaOCl, 1.0% NaOCl, 2.5% NaOCl and 5.25% NaOCl, and 0.5% Ca(OCl)2, 1.0% Ca(OCl)2, 2.5% Ca(OCl)2, and 5.25% Ca(OCl)2. The control group was saline. These solutions were used on samples and were successively irrigated/aspirated 10 times, for 1 minute each. The dissolving capacity was measured by the percentual weight loss. The surface tension of all tested solutions and control was measured by the platinum ring technique with a Du Noüy tensiometer. Nine measurements were taken of each solution and the result expressed as mean and standard deviation. For the analysis of cleaning capacity, 50 monoradicular human teeth were divided into five groups. They were prepared with K files and irrigated with 2.5% NaOCl, 5.25% NaOCl, 2.5% Ca(OCl)2 or 5.25% Ca(OCl)2. The control group was irrigated with saline. The samples were analyzed by scanning electron microscopy. Each third of the root canals received a score regarding the removal of debris and the presence of smear layer. Scores were assigned from 1 to 4 and their frequency for each group was determined. There was no significant difference between NaOCl and Ca(OCl)2 with the same concentrations. The most concentrated solutions were more effectively in dissolution. The surface tension values of solutions for Ca(OCl)2 varied from 68.48 to 72.88 mJ/m. Debris removal for 5.25% Ca(OCl)2 was lower than the control group in the cervical third. In the other thirds there was no difference among groups. There was no difference for the smear layer removal among groups. Calcium hypochlorite solutions showed tissue dissolution ability, however their surface tensions were higher when compared with sodium hypochlorite solutions. Moreover, were not able to remove debris and smear layer.

Introdução: Os objetivos do presente estudo foram comparar a extrusão apical de detritos durante o preparo apical #25 com os sistemas Twisted File Adaptive (TFA), WaveOne Gold (WOG) e técnica manual (TM), registrar o tempo de preparo; e comparar WOG com TFA em relação ao transporte do canal radicular (TCR) e centralização (CR) com diâmetros apicais #25 e #35. Metodologia: Quarenta e cinco canais mésio-vestibulares de molares inferiores foram preparados e divididos em 3 grupos (n=15) para avaliar extrusão apical. A extrusão de detritos foi quantificada subtraindo-se o peso final do peso inicial dos tubos Eppendorf. TCR e CR foram avaliados em micro-TC com os sistemas TFA e WOG (n=15). A normalidade dos valores obtidos para cada grupo foi verificada usando teste de Kolmogorov-Smirnov. Para quantificar detritos extruídos e tempo de preparo, os dados foram paramétricos, sendo utilizado o Teste ANOVA de 1 via e post hoc de Tukey’s. Para avaliar TCR e CR, o teste estatístico foi Mann Whitney e Wilcoxon (α=.05). Resultados: Em relação aos detritos, o sistema WOG foi associado com menos extrusão em comparação com TM (P<0,05) ou com o sistema TFA (P> 0,05). O tempo de preparo exigido pela TM foi significativamente maior do que o exigido pelas outras técnicas (P<0,05). Não foram encontradas diferenças estatisticamente significantes entre WOG e TFA em relação à centralização em todos os níveis, quando usado diâmetro apical #25 ou #35 (P> 0,05). Para TCR, diferença significativa foi encontrada entre TFA e WOG a 1 e 7mm com diâmetro apical #25 e #35 (P<0,05). Foi encontrada diferença significante para TFA em 4mm, quando os diâmetros apicais #25 e #35 foram avaliados no mesmo sistema (P <0,05). Conclusões: Todos os sistemas de instrumentação causaram extrusão de detritos apicais em algum grau. TFA e WOG podem ser usados em canais radiculares curvos com segurança com diâmetros apicais# 25 ou 35. / Introduction: The aims of this study were to assess the amount of apically debris during root canal preparation with apical size #25 with the Twisted File Adaptive system (TFA), WaveOne Gold system (WOG) and manual technique (MT), and recorded working time; and to assess WOG with TFA in relation to root canal transportation (RCT) and centering ratio (CR) with apical diameters # 25 and # 35. Methods: Forty-five mesiobuccal root canals of mandibular molars were prepared and assigned into 3 groups (n = 15) to evaluate apical extrusion. Debris extrusion was quantified by subtracting the final from the initial weight of the Eppendorf tubes. RCT and CR were evaluated in Micro-TC with the TFA and WOG systems (n = 15). The normality values obtained for each group were tested using the Kolmogorov-Smirnov test. To quantify extruded debris and preparation time, the data were parametric, using the Tukey's 1-way and post-hoc ANOVA test. To evaluate RCT and CR, the statistical test was Mann Whitney (α =.05). Results: The WaveOne Gold reciprocating single-file system was associated with less extrusion of debris compared with hand files (P < 0.05) or with the Twisted File Adaptive system (P > 0.05). The preparation time required by hand files was significantly longer than that required by the other techniques (P < 0.05). No significant differences were found between WOG and TFA regarding CR for all levels when used #25 or #35 apical size preparation (p>0.05). For RCT, significant difference was found among TFA and WOG at 1 mm and 7 mm with diameter apical #25 and #35. (p<0.05). Statistically different for the TFA in 4 mm was observed when the apical diameters # 25 and # 35 was evaluated in the same system (P <0,05). Conclusions: All of the instrumentation systems caused apical debris extrusion to some degrees. TFA and WOG can be used in curved root canals with safety with #25 or 35 apical diameters.

Orientador: Renato de Toledo Leonardo / Banca: Idomeo Bonetti Filho / Banca: Celso Kenji Nishiyama / Resumo: Foram avaliadas comparativamente três técnicas híbridas automatizadas de preparo de canais radiculares, Free Tip, Endo-Eze Híbrida e Race. Neste trabalho, foram utilizados 24 pré-molares artificiais, confeccionados em resina, com canais radiculares únicos, com curvatura de quarenta graus e raio de quatro milímetros. Para a avaliação dos preparos dos canais radiculares, os dentes foram divididos em três grupos e seccionados no terço apical das raízes. As secções das raízes foram então captadas antes e após a instrumentação de forma padronizada e as imagens transferidas para o computador que procedeu às analises comparativas. A avaliação baseou-se na extensão do deslocamento e na direção do movimento do centro do canal radicular. Apesar de a técnica Endo-Eze Híbrida ter apresentado um menor deslocamento do centro do canal radicular do que as técnicas Free Tip e Race, não houve diferença estatisticamente significante entre as técnicas estudadas. / Abstract: Three different techniques of automated instrumentation of root canal preparation were evaluated, Free tip, Hybrid Endo-Eze and Race. Twenty four single rooted artificial resin pre-molars were manufactured whith an apical curvature of 40-degree angle and 4 millimeters of radius each. For the evaluation of root canal preparation, the artificial teeth were divided in three groups and sectioned at the apical third. The sections were taken before and after the instrumentation on a standardize way and the images obtained were transferred to a computer for comparative analysis. The evaluation was based on the extension of canal displacement and the direction of the canal center movement. Although the Hybrid Endo-Eze technique had presented a smaller deviation of root canal center than Free Tip and Race techniques, there was no statistical difference between the analysed techniques. / Doutor

Objetivo: O objetivo do presente estudo foi avaliar morfologicamente os tecidos pulpar e periapical de molares de ratos com a polpa vital e expostos ao meio bucal durante o desenvolvimento radicular, além de detectar a localização do STRO-1 e do BMP4 nos mesmos. Métodos: Foram utilizados 24 ratos machos da linhagem Wistar com quatro semanas de idade. A fim de induzir a necrose, foi realizada a exposição pulpar dos primeiros molares inferiores esquerdos em condições não-assépticas e deixando a polpa exposta ao ambiente oral (grupo teste). Os molares inferiores do lado direito não sofreram intervenção e serviram como grupo controle. A eutanásia dos animais foi realizada nos tempos de 7, 10, 13 e 16 semanas de vida (o equivalente a 3, 6, 9 e 12 semanas após a intervenção). Após, as mandíbulas foram dissecadas e processadas para a análise histológica através de Hematoxilina-Eosina e Imunohistoquímica. Foram comparadas, entre os grupos, em cada um dos períodos, a reação inflamatória periapical, as características do tecido pulpar (células inflamatórias, vascularização, odontoblastos, degeneração, destruição tecidual), fechamento do forame e presença de reabsorções. Resultados: Todos os dentes do grupo teste apresentaram necrose pulpar e a interrupção do desenvolvimento radicular. Enquanto isso, os dentes do grupo controle apresentaram o desenvolvimento normal dos tecidos dentários. Quanto à imunohistoquímica, foi constatada a marcação pelo BMP-4 no tecido pulpar dos dentes do grupo controle. Não houve, no entanto, marcação nos dentes do grupo teste. Para o STRO-1, a marcação foi mais evidente na região dos vasos sanguíneos, tanto no grupo controle, quanto no grupo teste. Para nenhum dos anticorpos, foi constatada marcação na região da papila apical. Conclusão: No presente estudo, a técnica imunohistoquímica não foi suficiente para a avaliação da presença de células-tronco na região da papila de dentes com rizogênese incompleta e necrose pulpar. É possível que a presença de infecção e a reação inflamatória tenham bloqueado a expressão do STRO-1 e do BMP-4. / Objective: the aim of this study was to characterize the features of live and necrotic dental pulps of molar teeth in rats with developing roots, and to assess the expression of STRO-1 and BMP-4. Methods: twenty-four 4-month-old male Wistar rats were used. To induce necrosis, the pulps of the first lower left molars were exposed to the oral environment. The lower right molars served as the control non-operated group. Euthanasia of animals was carried out at 7, 10, 13 and 16 weeks and the jaws were dissected and processed for histological analysis by hematoxylin-eosin and immunohistochemistry. The periapical inflammatory reaction, the characteristics of the pulp tissue (inflammatory cells, vascularity, odontoblasts, degeneration, tissue destruction), closure of the foramen and presence of resorptions were described at each period. Results: all teeth from the test group presented pulp necrosis, occurring discontinuation of root development. Meanwhile, the teeth of the control group showed normal development of dental tissues. BMP-4-positive cells were detected in the pulp of teeth from the control group. However, there was no expression in teeth of the test group. For STRO-1, expression was more evident in the blood vessels, both for the control group and for the test group. Apical papilla evidenced no BMP-4 nor STRO-1 expression. Conclusion: Immunohistochemistry was not sufficient to evaluate the presence of stem cells in the apical papilla region of nonvital immature teeth. It is possible that the inflammatory process has blocked the expression of STRO-1 and BMP-4., Probably, infection has negatively modulated this expression.

As células-tronco provenientes da polpa de dentes decíduos esfoliados (SHED) são uma fonte promissora de células-tronco para a terapia regenerativa. Já foi demonstrado que elas podem se diferenciar em células endoteliais, mas os mecanismos envolvidos nesse processo ainda são desconhecidos. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo elucidar os mecanismos moleculares relacionados à diferenciação endotelial dessas células. Para isso, um meio de cultura para células endoteliais (EGM-2MV), suplementado por 50ng/mL rhVEGF, foi utilizado com sucesso como estímulo para as SHED se diferenciarem em células endoteliais em cultura de monocamada. Uma vez que, elas expressaram os marcadores endoteliais VEGFR-2 e CD-31. Além disso, quando as SHED foram expostas ao meio de diferenciação, a fosforilação de STAT-3 (um marcador de células-tronco) foi inibida de acordo com a concentração utilizada, enquanto a fosforilação de ERK e AKT foi estimulada. Quando um inibidor de ERK foi adicionado ao meio, a fosforilação de STAT-3 aumentou. Por outro lado, quando um inibidor de STAT-3 foi adicionado ao meio de cultura, a fosforilação de ERK aumentou. A inibição de ERK também impediu a diferenciação endotelial. Para confirmar esse resultado, shRNA MEK-1 SHED também falharam em expressar VEGFR-2 quando estimuladas. Além disso, scaffolds de fatias dentais foram semeadas com shRNA VEGFR-1 SHED ou shRNA controle e implantadas no subcutâneo de camundongos imunodeficientes. Após recuperados, um tecido muito semelhante à polpa dental foi formado no interior das fatias. No entanto, havia menos células CD-31 positivas nos vasos sanguíneos dos implantes semeados com VEGFR-1 shRNA SHED, sugerindo um papel do VEGFR-1 na formação de vasos sanguíneos. Em conclusão, o VEGFR-1 e a via de sinalização de ERK estão envolvidos no processo de diferenciação das SHED em células endoteliais. / Stem Cells from Exfoliated Deciduous Teeth (SHED) are a promising source of stem cells for regenerative therapy. It was already shown they can differentiate into endothelial cells, but the mechanisms involved in this process remain unclear. Therefore, the following study aimed to elucidate the molecular mechanisms related to endothelial differentiation of SHED. For this purpose, a culture media for endothelial cells (EGM-2MV), supplemented with 50ng/ml rhVEGF, was successfully used as stimuli for SHED to undergo endothelial differentiation in monolayer culture, as they expressed the endothelial markers VEGFR-2 and CD- 31. Moreover, when SHED were exposed to the differentiation medium, STAT-3 phosphorilation (a stemness marker) was inhibited while the ERK and AKT phosphorilation was stimulated. When an ERK inhibitor was added to the medium, the STAT-3 phosphorilation increased in a dependent concentration manner. On the other hand, when a STAT-3 inhibitor was added the ERK phosphorilation increased. The ERK inhibition also arrested endothelial differentiation. To confirm this results, shRNA MEK-1 SHED also failed to express VEGFR-2 when stimulated. Additionally, tooth slice scaffolds were seeded with shRNA VEGFR-1 SHED or shRNA control SHED and implanted, subcutaneously, into immunodeficient mice. After retrieved, a dental pulp-like tissue had been formed inside the tooth slice. However, there were fewer CD-31 positive blood vessels in the shRNA VEGFR-1 implants suggesting a role of VEGFR-1 in the formation of blood vessels by SHED. In conclusion, the VEGFR-1 and ERK pathway are involved in the process of differentiation of SHED into endothelial cells.

O desvio apical é um fator bastante relevante na terapia endodôntica pela possibilidade de conduzir o tratamento proposto ao insucesso. Este estudo se propôs a realizar uma avaliação in vitro da ocorrência de desvio apical e sua magnitude nas instrumentações manual com limas de aço-inoxidável, rotatória de giro contínuo com o sistema K3 e rotatória de giro alternado com contra-ângulo NSK e limas de aço-inoxidável, em raízes mésio-vestibulares de molares superiores. A amostra foi formada por 60 raízes que, após a inclusão numa modificação da mufla de Bramante, foram seccionadas longitudinalmente. De acordo com o ângulo e raio da curvatura do seu canal, as raízes foram paritariamente divididas em três grupos. Uma das metades de cada raiz teve sua face interna digitalizada por scanner de mesa. As raízes foram remontadas nas muflas e seus canais instrumentados. A mesma metade de cada raiz teve sua face interna novamente digitalizada em três momentos distintos: primeiro, na confecção do preparo apical com a lima 30, após com a lima 35 e, por fim, com a lima 40. Cada imagem pós operatória (limas 30, 35 e 40) foi sobreposta à imagem pré-opertória no programa Adobe Photoshop. Após, foram transferidas ao programa AutoCad, onde o desvio apical foi mensurado. Para a comparação entre as limas dos três grupos foram utilizados os testes nãoparamétricos de Friedman e Wilcoxon que encontraram diferença significativa. (p=0,000) Para a comparação entre os três grupos foi utilizado o teste não-paramétrico Kruskal-Wallis (p=0,000) que demonstrou haver diferença significativa entre os grupos estudados. / Apical transportation has considerable relevance in endodontic therapy, as it may lead to treatment failure. This study conducted an in vitro comparative analysis of apical transportation produced in mesiobuccal roots of upper molars by (i) manual instrumentation using stainless steel files, (ii) K3 rotary Ni-Ti system, and (iii) a reciprocating NSK handpiece, also with stainless steel files. The sample comprised 60 roots that were inserted in a Bramante muffle and then longitudinally sectioned. Roots were subdivided pair-wise into three groups according to canal angle and radius. The inner surface of one root half was digitized using a scanner. Roots were then reassembled onto the muffles and had their canals instrumented. The same root half had its inner surface digitized again after instrumentation with three different file sizes: 30, 35 and 40. Each image obtained therefrom was superimposed over the pre-operative image using the Adobe Photoshop software. After, images were transferred to the AutoCad software for apical transportation measurements. The non-parametric Friedman and Wilcoxon tests were adopted to compare results for the three different file sizes, and showed the statistically significant differences between the results obtained (p=0,000). Similarly, the comparison between the three treatment groups by the nonparametric Kruskal-Wallis test revealed statistically significant differences.