Orientador: Adriana de Jesus Soares / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-19T22:30:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Winocur_EstelaMartaDoffode_D.pdf: 39787975 bytes, checksum: dfb0acb3bf358d565765b0c840c32986 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: O objetivo deste estudo in vitro foi avaliar o selamento apical após obturação endodôntica, em dentes humanos preparados com e sem ampliação do forame apical, com o Sistema Rotatório Mtwo® (VDW, Munique, Alemanha). Vinte prémolares inferiores foram divididos em dois grupos. No Grupo I, os canais radiculares foram preparados 1mm além do forame apical e, no Grupo II, 1 mm aquém do CRC. Os dentes foram preparados para avaliação no MEV (JEOL, Modelo JSM 5600LV, Tókio, Japão) e as imagens do forame apical obtidas em aumento de 75x, em posições padronizadas, permitindo a mensuração da área foraminal antes, após o preparo e após a obturação. Por meio do processo do Sistema de Subtração de Imagens (Emago® Sistema de Diagnóstico Oral, Louwesweg, Amsterdam, Holanda), foi possível identificar as variações de forma e transporte do forame apical assim como o nível de preenchimento de sua circunferência pelo cimento obturador Pulp Canal Sealer (Sybron Endo, USA) após o preparo. Os resultados encontrados, submetidos à análise estatística, permitiram concluir que os dentes do Grupo I apresentaram maior diâmetro foraminal que os do Grupo II (Teste Anova, p<0,05) e que houve diferença estatisticamente significante quanto ao transporte do forame (Teste Exato de Fisher, p=0,0108); quanto ao selamento apical houve diferença estatisticamente significante entre os grupos I e II (Testes t de Student e Exato de Fisher, p=0,0007) sendo que, no Grupo I, ocorreram selamento em 100% dos espécimes analisados / Abstract: The aim of this in vitro study was to evaluate the apical root sealing after endodontic filling, in human teeth that were prepared with and without apical foramen enlargement by Mtwo® Rotary System (VDW, Munich, Germany). Twenty mandibular premolars were divided in two groups. Group I had root canals prepared 1mm beyond apical foramen, and in Group II, 1mm below RCL. Teeth were prepared for an electronic microscopy analysis (JEOL, Model JSM 5600LV, Tokyo, Japan). Apical foramen images were 75 times magnified, at standardized positions, allowing measurements from apical foramen area before and after root canal preparation, and after root filling. By using the Image Subtraction System (Emago®, Oral Diagnostic System, Louwesweg, Amsterdam, Netherlands) apical foramen shape modifications and transportation as well as the level of its circumferential filling by Pulp Canal Sealer cement (Sybron Endo, USA) after root canal preparation were accessed. After statistical analysis, results allowed to conclude that Group I teeth showed larger foraminal diameter than Group II (Anova Test, p<0,05) and that foramen transportation difference was statistically significant (Fisher Exact Test, p=0,0108); apical foramen sealing also differed statistically between groups I and II (Student t Test and Fisher Exact Test, p=0,0007) and that 100% of Group I specimens showed apical root sealing / Doutorado / Endodontia / Doutor em Clínica Odontológica

L'évaluation de l'étanchéité des obturations endodontiques in vitro donne lieu à des résultats non reproductibles voir contradictoires qui ne permettent pas de conclure à la supériorité d'une méthode ou d'un matériau. Cette thèse a pour but d'améliorer la connaissance des techniques d'évaluation de l'étanchéité utilisées en endodontie et de mettre au point une nouvelle méthode d'évaluation de la perméabilité des obturations endodontiques utilisant la mesure d'un flux d'azote. Dans une première partie bibliographique, nous réalisons une analyse critique des méthodes d'évaluation de l'étanchéité couramment utilisées en endodontie. Dans la seconde partie nous décrivons la méthode de perméabilité gazeuse, ses aspects physiques et son application à l'endodontie. Dans la troisième partie, nous traitons de la perméabilité à l'eau en comparant la technique de filtration de fluide et la perméabilité à l'azote et nous modélisons la manière dont les colorants pénètrent l'interface endodontique dans les techniques d'infiltration de colorants. Dans la quatrième partie nous décrivons l'adaptation de la méthode de perméabilité gazeuse à l'étude de l'étanchéité des connexions des implants dentaires comportant deux parties. / Sealing evaluation of endodontic fillings in vitro leads to irreproducible or contradictory results which preclude concluding to the superiority of one method or material. This thesis is intended to improve knowledge of evaluating techniques for endodontic sealing and to develop a new method to evaluate the permeability of root canal fillings using the measure of a nitrogen flow.In the first part, we perform a critical analysis of evaluation methods of sealing commonly used in endodontics from a review of literature. In the second part we describe the gas permeability method, its physical process and its application in endodontics. In the third part, we treat water permeability by comparing the technique of fluid filtration and nitrogen permeability. Also, we model with physical laws the penetration process of dyes in the endodontic interface with protocols corresponding to dye leakage studies. In the fourth section we describe the adaptation of the method of gas permeability to the study of dental implant connections tightness.

Magister Chirurgiae Dentium - MChD / Purpose: To compare the intra-oral approach using a contra-angled hand piece with the standard transbuccal approach in the treatment of mandibular angle fractures. Patients and Methods: Thirty patients with isolated fractures of the mandibular angle were treated by open reduction and internal fixation using one three-dimensional “strut” or “geometric” Synthes® angle plate. Patients were selected randomly for placement of two-millimeter self-threading screws, either through the standard transbuccal technique or with an intra-oral approach using a contra-angle hand piece. None of the patients were placed into post-surgical maxillomandibular fixation (MMF). Swelling and pain were measured pre-operatively and again twenty-four hours after surgery. The actual cutting time from first incision to placement of last suture was documented, as well as the perception of difficulty of the specific case by a single operating surgeon. Results: No statistically significant difference in perception of pain was experienced between the two groups of patients during the first twenty-four hours after surgery. There was also no statistically relevant difference in cutting time between the two placement techniques. A small statistically relevant difference (p-value = 0.089) was found in the amount of swelling post-operatively between the two groups, with more swelling in the control group. Conclusion: The use of a contra-angle hand piece to place screws in the compression band area in a mandible angle fracture is an acceptable alternative to the transbuccal approach. / South Africa

The use of sodium hypochlorite (NaOCI) as an endodontic irrigation solution is effective in eliminating microorganisms from the root canals of human teeth. The purpose of this in vitro study was to evaluate the antimicrobial effectiveness of electro-chemically activated water (ECA) as an endodontic irrigation solution. ECA is a solution comprising many different ions, molecules and radicals. Sixty caries-free, single root, adult, maxillary, anterior human teeth were used. The root canals were instrumented and irrigated with NaGCI in a similar method to that employed for in vivo root canal treatment. The external root surface of each tooth was sealed and the access cavity kept patent so that root canals could be inoculated with a suspension containing four bacterial. The teeth were randomly divided into four groups (n=15). Each group was irrigated ultrasonically, using solutions of distilled water (control), NaOCI (3.5%), and ECA, the latter at pH's 7.0 and 9.0 respectively. Antimicrobial effectiveness was established directly after irrigation and again seven days later, by counting colony forming units on blood agar plates and by spectrophotometric analysis. The surfaces of the root canals were visually examined by means of scanning electron microscopy. Large numbers of bacteria were present in the canals of teeth irrigated with distilled water. No bacteria were observed following irrigation with NaGCI. Neither of the ECA solutions were found to be effective against all the bacteria. Although some reduction in the number of bacteria was evident in the ECA groups, this was not statistically significant (p>0.05). Within the confines of this study ECA did not demonstrate antimicrobial effectiveness. / Dissertation (MChD (Prosthodontics))--University of Pretoria, 2007. / Orthodontics / unrestricted

Orientador: Alexandre Augusto Zaia / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-22T06:45:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_EmmanuelJoaoNogueiraLealda_D.pdf: 1714957 bytes, checksum: f1c68cf66ee3885a81240bb463ccf365 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O cimento endodôntico obturador MTA Fillapex® foi criado numa tentativa de aliar as propriedades físico-químicas e a capacidade seladora dos cimentos resinosos às excelentes propriedades biológicas do agregado trióxido mineral (MTA). Entretanto, ainda existe uma escassez de trabalhos na literatura avaliando as suas características físico-químicas e biológicas. Dessa forma, os objetivos deste estudo foram: 1) avaliar propriedades físico-químicas (radiopacidade, escoamento e pH) e biológicas (citotoxicidade) do cimento endodôntico MTA Fillapex e comparar com o cimento AH Plus, 2) realizar um acompanhamento em longo prazo do efeito citotóxico em fibroblastos 3T3 de diferentes cimentos endodônticos contemporâneos, e 3) avaliarem a partir de um ensaio multiparamétrico em longo prazo os efeitos citotóxicos do MTA Fillapex e do AH Plus em uma cultura primária de osteoblastos humanos. Os resultados do estudo mostraram que embora o AH Plus tenha apresentado radiopacidade estatisticamente maior que o MTA Fillapex (P<0.05), ambos os cimentos obtiveram os valores mínimos exigidos pela ISO 6876/2001. O MTA Fillapex apresentou um pH alcalino em todos os períodos experimentais, enquanto o AH Plus demonstrou um pH ligeiramente neutro, com diferenças estatisticamente significantes entre os cimentos (P<0.05). Com relação ao escoamento, ambos os cimentos apresentaram os valores mínimos exigidos pela ISO 6876/2001, no entanto o AH Plus apresentou valor estatisticamente mais baixo do que o do MTA Fillapex (P<0.05). Com relação à citotoxicidade, em todos os períodos testados o MTA Fillapex foi mais citotóxico do que o AH Plus (P<0.05). Quando comparado com diversos cimentos endodônticos, novamente o MTA Fillapex apresentou os maiores valores de citotoxicidade (P<0.05), permanecendo moderadamente citotóxico mesmo após 5 semanas de sua manipulação. Quando testados em um ensaio multiparamétrico utilizando culturas de osteoblastos humanos, ambos os cimentos foram citotóxicos sem apresentar nenhuma diferença significativa quando testados imediatamente após a manipulação (P>0.05). No entanto, uma semana após sua manipulação o AH Plus se tornou não citotóxico em todos os parâmetros avaliados. Por outro lado, o MTA Fillapex permaneceu citotóxico durante todo o período experimental, mostrando diferenças estatisticamente significantes quando comparados com o AH Plus (P<0.05). Dentro da metodologia empregada e de acordo com os resultados apresentados, pode-se concluir que embora o MTA Fillapex tenha apresentado propriedades físico-químicas adequadas para a utilização na terapia endodôntica, o mesmo apresentou-se altamente citotóxico nas diversas condições testadas / Abstract: The endodontic sealer MTA Fillapex® was developed in an attempt to combine the physicochemical properties and sealing capacity of resin-based cements to the excellent biological properties of mineral trioxide aggregate (MTA). However, little information exists regarding MTA Fillapex physicochemical properties. Thus, the aims of the present study were: 1) evaluate the physicochemical (radiopacity, flow and pH) and biological (cytotoxicity) properties of MTA Fillapex and compare it with AH Plus, 2) investigate MTA Fillapex effects on the cytotoxicity during a period of 5 weeks in 3T3 fibroblasts and compare with 7 different endodontic sealers, and 3) verify, through a multiparametric in vitro assay, the long term cytotoxic effects in human osteoblasts of the MTA Fillapex and compare it with AH Plus. The results of the study showed that although AH Plus presented higher radiopacity than MTA Fillapex (P<0.05), both sealers showed ISO 6876/2001 minimum required values. MTA Fillapex presented alkaline pH in all experimental times, while AH Plus demonstrated slightly neutral pH (P<0.05). Both sealers showed ISO 6876/2001 required values for flow, however AH Plus flow was significantly lower than that of MTA Fillapex (P<0.05). In all tested periods, MTA Fillapex was more cytotoxic than AH Plus (P < .05). When compared to 7 different endodontic sealers, MTA Fillapex was associated with significantly less cell viability (P<0.05) even after 5 weeks of manipulation. When tested in a muliparametric assay using human osteoblasts, no significant difference was found among the materials when fresh mixed (p>0.05). After one week AH Plus become noncytotoxic, on all three parameters evaluated. Conversely, MTA Fillapex remained cytotoxic over the entire experimental period, showing significantly differences when compared to AH Plus (P<0.05). Within the employed methodology and according to the results can be concluded that although MTA Fillapex showed suitable physicochemical properties for use in endodontic therapy, it appeared highly cytotoxic in the different tested conditions / Doutorado / Endodontia / Doutor em Clínica Odontológica

Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-22T06:43:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nobrega_LeticiaMariaMenezes_D.pdf: 2252800 bytes, checksum: 31910f0e934110c7e863efa8d0e293da (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Abscessos apicais agudos são condições frequentes na urgência endodôntica. São infecções polimicrobianas que apresentam variações entre indivíduos, e afetam o sistema de canais radiculares e tecidos periapicais. Associações bacterianas podem ser importantes, agindo sinergicamente e aumentando sua virulência, o que agrava os danos causados no hospedeiro. Considerando a etiologia microbiana das alterações pulpares e periapicais, é de fundamental importância identificar corretamente as bactérias presentes nas infecções endodônticas. Métodos moleculares de identificação bacteriana, baseados no sequenciamento do gene 16S rRNA, são importantes e fornecem uma identificação mais fiel que métodos fenotípicos. Estudos metagenômicos são ideais para avaliação da diversidade bacteriana, possibilitando identificação de espécies que se acreditava não estarem sendo cultivadas, ou encontrar espécies que ainda não foram encontradas ou associadas com infecções endodônticas, incluindo espécies ainda não cultiváveis. O objetivo deste estudo foi investigar a diversidade bacteriana de canais radiculares de dentes com abscesso apical agudo por cultura, clonagem e sequenciamento do gene 16S rRNA, compararando a efetividade dos métodos. Foram feitas coletas microbiológicas de 20 canais radiculares utilizando cones de papel absorvente estéreis, transportados em meio VMGA III. Um total de 220 cepas isoladas, identificadas previamente por métodos bioquímicos, foram submetidas à extração de DNA, amplificação do gene 16S rRNA seguido de sequenciamento. Além disso, 10 das 20 amostras coletadas foram também submetidas à clonagem bacteriana através de Escherichia coli DH5? eletrocompetentes. As sequências de nucleotídeos obtidas foram comparadas com o banco de dados do National Center of Biotechnology Information através do BLAST. Trinta e quatro espécies diferentes foram identificadas bioquimicamente e 57 pelo sequenciamento, numa média de 6 espécies por canal. O sequenciamento permitiu identificação de 97% das bactérias isoladas (215), enquanto apenas 70,5% foram identificadas bioquimicamente (155). A concordância entre os métodos de identificação fenotípica e genotípica foi de 49% e as cepas não identificadas bioquimicamente (65/220) foram caracterizadas em 97% (63/65) pelo sequenciamento. As bactérias mais frequentemente identificadas pelo sequenciamento foram Prevotella spp., Pseudoramibacter alactolyticus, Parvimonas micra, Dialister invisus, Filifactor alocis e Peptostreptococcus stomatis. Um total de 689 clones foi analisado e 76 filotipos foram identificados, numa média de 15 por canal. Quarenta e oito espécies diferentes foram identificadas e 28 (36,84%) filotipos representados por espécies ainda não cultivadas ou não caracterizadas. Prevotella spp., Fusobacterium nucleatum, Filifactor alocis e Peptostreptococcus stomatis, foram às espécies mais frequentemente identificadas, seguidas por Dialister invisus, Parvimonas micra, Phocaeicola abscessus, Porphyromonas spp. e Lachnospiraceae oral clone. Nenhuma espécie foi encontrada em todos os casos estudados, e algumas estavam presentes em apenas 1 caso. Métodos que independem da cultura mostram que a microbiota endodôntica pode ser subestimada por estudos cultura-dependentes. Apesar de algumas espécies serem predominantes em infecções endodônticas primárias, como as anaeróbias Gram-negativas, concluímos que esta infecção é bastante complexa e heterogênea, caracterizada por uma grande diversidade bacteriana. A associação de métodos convencionais e moleculares permite um conhecimento mais acurado da microbiota endodôntica / Abstract: Acute apical abscesses are one of the most frequently treated conditions in endodontic emergency. It is a microbiologically heterogeneous disease presenting different bacterial profiles among the patients. Multiple bacterial combinations play a role in disease, acting synergistically and increasing their virulence, which leads to further damage to the host. Considering the microbial etiology of pulp and periapical disease, it is important to identify correctly microorganisms present in acute endodontic infection. Molecular methods of bacterial identification based on the 16S rRNA gene sequencing represent an important tool for identification and determination of the taxonomic position of microorganisms. The assessment of the endodontic microbiota by metagenomic approaches revealed that these techniques are sensitive and specific to evaluate the bacterial diversity of root canal infections, making possible the identification of some unexpected or not often associated with endodontic infection, including as-yet-uncultivated. The aim of this study was to investigate the bacterial diversity in the root canals of teeth with APA by culture, clonal analysis and 16S rRNA sequencing. Microbial samples were taken from 20 root canals using sterile paper points which were immediately placed into the VMGA III transport medium. A total of 220 isolated strains, previously identified by biochemical methods, were submitted to DNA extraction, 16S rRNA gene amplification and sequencing. Ten out of the 20 samples collected were also subjected to the clonal analysis using electrocompetent Escherichia coli DH5?. The nucleotides sequences obtained were compared with the GenBank database from National Center of Biotechnology Information through the BLAST. Thirty-four different bacteria were identified biochemically and 57 by 16S rRNA sequencing, in an average of 6 species per root canal. Sequencing allowed the identification of 97% of isolates against 70.5% identified biochemically. There was an agreement of 49% between the biochemical and 16S rRNA gene sequencing identification. Strains not identified biochemically (65/220) were characterized in 97% (63/65) by sequencing. The most frequently identified bacteria by sequencing were Prevotella spp., Pseudoramibacter alactolyticus, Parvimonas micra, Dialister invisus, Filifactor alocis and Peptostreptococcus stomatis. A total of 689 clones were analyzed and 76 phylotypes identified, of which 48 (63.15%) were different species and 28 (36.84%) were taxa reported as-yet-uncultivable or as yet-uncharacterized species. Prevotella spp., Fusobacterium nucleatum, Filifactor alocis and Peptostreptococcus stomatis, were the most frequently detected species, followed by Dialister invisus, Parvimonas micra, Phocaeicola abscessus, Porphyromonas spp. and the uncharacterized Lachnospiraceae oral clone. No specie was detected in all studied samples and some species were identified in only one case. Culture-independent methods shown that endodontic microbiota was underestimated in culture studies. Although some species predominate in acute primary endodontic infections, it was concluded that this infection is microbiologically heterogeneous, characterized by a wide diversity in which anaerobic gram-negatives are most frequently, and that the association of conventional and molecular approaches allow a better understanding of these microorganisms / Doutorado / Endodontia / Doutora em Clínica Odontológica

Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-18T10:59:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Martinho_FredericoCanato_D.pdf: 10102770 bytes, checksum: 1acabb89bf73a5204986aa39e6e8213d (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Bactérias Gram-negativas (BG-) e seu sub-produto [Lipopolisacarídeo (LPS) - endotoxina) são capazes de estimular células a produzirem citocinas pró-inflamatórias envolvidas na destruíção tecidual periapical. Os objetivos propostos foram: 1) analisar os diferentes métodos de LAL para quantificação de endotoxinas, revelando o (s) que melhor (es) se adapta (m) para investigação de endotoxina nas infecções de origem endodôntica (capítulo 1); 2) estudar o perfil da microbiota e níveis de endotoxinas nas infecções endodônticas primárias com lesão periapical, determinando a antigenicidade do conteúdo endodôntico contra macrófagos através da produção de IL1- ß e TNF-? (capítulo 2); 3) investigar a presença de espécies bacterianas Gram-negativas "alvos" e níveis de endotoxinas nas infecções endodônticas primárias com lesão periapical, determinando seu potencial antigênico contra macrófagos através da produção de PGE2 (capítulo 3); 4) detectar espécies de Treponema spp e os níveis de endotoxinas em infecções endodônticas primárias e determinar sua antigenicidade contra macrófagos através dos níveis de IL-6 e IL-10, avaliando sua correlação com os achados clínicos e radiográficos (capítulo 4); 5) avaliar a atividade antigênica de LPS isolado de P. gingivalis e F. nucleatum encontrados em canais radiculares infectados sobre macrófagos (RAW 264.7) através dos níveis de IL-1? e TNF-? (capítulo 5); 6) comparar "in vivo" a efetividade do preparo químico-mecânico com NaOCl 2.5% e CLX-gel 2% na eliminação de LPS de bactérias orais presentes em dentes com necrose pulpar e presença de lesão periapical (capítulo 6); 7) avaliar o efeito do preparo químico-mecânico com NaOCl 2.5% + EDTA 17% e limas rotatórias NiTi (Mtwo®) na remoção de endotoxinas de dentes com necrose pulpar e presença de lesão periapical (capítulo 7); 8) comparar a capacidade de diferentes sequências clínicas do sistema rotatório Mtwo® na remoção de endotoxinas em canais radiculares contaminados. (capítulo 8). Método: amostras foram coletadas de canais radiculares com IEPL utilizando cones de papel estéreis/despirogenizados. PCR (16s rDNA) e método LAL foram utilizados. Níveis de citocinas inflamatórias foram quantificados através de ELISA (Duoset-Kit, R&D systems). Resultados: Os testes cinéticos (KQCL - Kinetic Quantitative Chromegenic Limulus e turbidimétrico) mostraram níveis de endotoxinas inferiores (7,49 EU/mL e 9,19 EU/mL, respectivamente), quando comparados ao teste QCL (Quantitative Chromegenic Limulus) (34,20 EU/mL) (p<0,05). Prevotella nigrescens (13/21) foi mais frequentemente encontrada. Dente com exsudato foi relacionado com a presença de F. alocis (p<0,05). Correlações positivas (p<0,05) foram encontradas entre: número de BG- e níveis de IL-1 ß, TNF-? e PGE2; níveis de endotoxinas e de TNF-? (p<0,05); IL-1 ß e tamanho de lesão periapical. Endotoxina foi detectada em 100% dos canais radiculares estudados. Maior redução de entodotoxina foi encontrada nos dentes instrumentados com NaOCl 2,5% (57,98%) versus CLX-gel 2% (47,12%) (p<0,05) utilizando limas manuais K-file. Após PQM com NaOCl 2,5% e limas rotatórias NiTi endotoxina foi reduzida em 98,06% (p<0,05). Conclusão: 1) Os testes cinéticos turbidimétrico e cromogênico de LAL apresentaram resultados mais precisos e de melhor reprodutibilidade quando comparados ao QCL (capítulo 1);. 2) A antigenicidade do conteúdo endodôntico não está relacionada apenas com a quantidade de endotoxinas encontrada nos canais radiculares, mas também com o número de diferentes espécies Gram-negativas presentes na infecção. Maior destruíção óssea periapical foi relacionado com níveis elevados de IL-1ß (capítulo 2); 3) O número de espécies BG- presentes nas IEPL foi relacionado com diferentes níveis de secreção de PGE2 via macrófagos. Maior produção de PGE2 foi relacionada com a presença de sintomatologia clínica (capítulo 3); 4) espécies de Treponema spp. exercem seu papel na patogênese das infecções endodônticas primárias. Além disso, o conteúdo bacteriano e particularmente os níveis de endotoxinas presents nos canais radiculares estimularam a produção de IL-6 e IL-10 por macrófagos (capítulo 4); 5) LPS isolados de P. gingivalis e F. nucleatum de canais radiculares infectados estimulam a produção de IL-1? e TNF-?, que são mediadores inflamatórios pleiotrópicos, podendo iniciar a resposta inflamatória e estimular a produção de mediadores secundários envolvidos na destruição tecidual (capítulo 5); 6) PQM com NaOCl 2,5% ou CLX-gel 2% não foram eficazes na eliminação de endotoxinas presentes na IEPL (capítulo 6); 7) PQM com NaOCl 2,5% + EDTA 17% e limas rotatórias NiTi (Mtwo®) foi eficaz na remoção de endotoxinas em 98,06% (capítulo 7); 8) redução significativa de endotoxinas foi obtida utilizando as sequências Mtwo® finalizadas com o preparo apical final #40.04 or #25.07 (capítulo 8) / Abstract: Gram-negative bacteria (G-ve) and its by-product [Lipopolysaccharide (LPS) - endotoxin] are capable to stimulate cells to release proinflammatory cytokines that lead to tissue destruction. The aims of this study were: 1) to determine which of the quantitative methods, namely, chromogenic endpoint, chromogenic kinetic and turbidimetric kinetic ones, best fit for the analysis of primary endodontic infections (chapter 1); 2) to investigate the microbial profile and the levels of endotoxin found in primary root canal infection with apical periodontitis (PEIAP), and to determine their antigenicity against macrophages through the levels of IL-1ß and TNF-alpha, evaluating their relationship with clinical and radiographic findings (chapter 2); 3) to investigate target G-ve bacteria species and endotoxin in PEIAP, determining their antigenicity against macrophages through the levels of PGE2 and evaluated their relationship with clinical findings (chapter 3); 4) investigation of Treponema spp. and endotoxin in primary endodontic infection and evaluation of the antigenicity of the infectious content against RAW 264.7 macrophages by the levels of IL-6 and IL-10 production (chapter 4); 5) to evaluate the antigenic activity of LPS purified from P. gingivalis and F. nulceatum isolated from infected root canals on macrophages cells (RAW 264.7) by the levels of IL-1? and TNF-?. (chapter 5); 6) to compare the efficacy of chemomechanical preparation with 2.5% NaOCl and 2% CHX-gel on eliminating oral bacterial LPS in teeth with PEIAP (chapter 6); 7) to investigate the ability of chemo-mechanical preparation (CMP) with 2.5% NaOCl + 17% EDTA and rotary NiTi system Mtwo® in removing endotoxin from PEIAP (chapter 7); 8) Comparison of different clinical sequences of NiTi rotary files Mtwo® in the removal of endotoxin from infected root canals (chapter 8). Methods: Samples were taken from root canals with PEIAP with paper points. PCR technique (16S rDNA) was used for the detection of the target bacteria. Limulus Amebocyte Lysate (LAL) was used to measure endotoxin. The amounts of IL-1ß, TNF-alpha and PGE2 in macrophages supernatants were measured by enzyme-linked immunosorbent assay - Duoset-kit (ELISA). Results: The KQCL and Turbidimetric -assay yielded a median value of endotoxin of 7.49 EU/mL and 9.19 EU/mL respectively, significantly different from the endpoint-QCL (34.20 EU/mL) (p<0.05). Prevotella nigrescens (13/21) was the most frequently Gram-negative bacteria species detected. Tooth with radiolucent area ? 2mm was related to Treponema denticola. Correlation was found between the number of Gram-negative bacteria and the levels of IL-1ß, TNF-alpha and PGE2 (p<0.05). Increased levels of endotoxin were followed by TNF-alpha release (p<0.05). Higher levels of IL-1ß (p<0.05) and endotoxin contents were related to the larger size of radiolucent area. Elevated levels of PGE2 were found in teeth with tenderness to percussion and pain on palpation. Endotoxin was detected in 100% of the root canals investigated. Higher percentage value of endotoxin reduction was found in 2.5% NaOCl (57.98%) when compared to 2% CHX-gel (47.12%) (p<0.05) using manual K-files. After chemo-mechanical preparation with 2.5% NaOCl and rotary NI-TI files endotoxin was significantly reduced to 98.06% (p<0.05). Conclusion: 1) Quantitative kinetic-turbidimetric and kinetic-chromogenic LAL methods are best fitted for analysis of endotoxin in root canal infection, both being more precise and allowing better reproducibility compared to the endpoint-QCL assay; 2) The antigenicity of the endodontic contents is not related to only the amount of endotoxin found in root canal, but also with the number of different species of Gram-negative bacteria involved in the infection. Moreover larger size (? 2mm) of radiolucent area was related to IL-1ß and endotoxin; 3) Additive effect between the number of G-ve bacterial species involved in endodontic infection regarding the induction of pro-inflammatory cytokine by macrophage cell. Moreover, teeth with clinical symptomatology were related to higher levels of endotoxin and PGE2 secretion; 4) a wide variety of Treponema species do play a role in primary endodontic. Moreover, the bacterial endodontic contents, particularly the levels of endotoxin present in root canals, were a potent stimuli for the production IL-6 and IL-10 in macrophages; 5) LPS of the P. gingivalis and F. nucleatum isolated from root canal infection is involved in the induction of IL-1 ? and TNF-?, which are pleiotropic inflammatory mediators, that can play a role in the initiation of the upregulation of the inflammatory response and can also stimulate the production of secondary mediators involved in tissue destruction; 6) 2.5% NaOCl and 2% CHX-gel were not effective on eliminating endotoxin from the primarily infected root canals using manual K-files; 7) CMP with 2.5% NaOCl + 17% EDTA and rotary NiTi files was effective in reducing 98.06% of endotoxin from PEIAP; 8) substantial reduction of endotoxin contents was achieved by using the Mtwo® sequences finished in APS #40.04 or #25.07 / Doutorado / Endodontia / Doutor em Clínica Odontológica

Orientador: Adriana de Jesus Soares / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-18T14:40:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lins_FernandaFreitas_M.pdf: 2426957 bytes, checksum: ff06c275f24b04dd8e054840e6559579 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: O propósito do presente estudo restrospectivo foi avaliar os diversos aspectos relacionados às injúrias dentárias traumáticas em relação a sua etiologia, prevalência e classificação, nos pacientes atendidos no Serviço de Trauma Dental da Área de Endodontia da Faculdade de Odontologia de Piracicaba-UNICAMP, no período de Julho de 2000 a Julho de 2010. Os dados obtidos foram tabulados e a análise dos resultados incluiu distribuição de freqüência, teste Qui-quadrado e teste de Mann-Whitney, com nível de significância de 5%. O número total de pacientes foi de 450 (300 do gênero masculino e 150 do gênero feminino) com 1284 dentes traumatizados, representando aproximadamente 2,8 dentes por paciente. Os resultados mostraram que a faixa etária mais prevalente foi de 11 a 15 anos de idade (31,5%) e os fatores etiológicos mais encontrados foram as quedas (35,6%) e os acidentes ciclísticos (26,2%). Os incisivos centrais superiores foram os dentes com maior percentual de trauma (53,7%). O tipo de injúria aos tecidos dentários mais prevalente foi a fratura de esmalte e dentina, enquanto as avulsões e as subluxações foram os tipos de injúrias aos tecidos de suporte mais frequentes. O mês e o dia em que mais ocorreram os traumas foi o mês de Maio e aos Sábados. O gênero exerceu influência em relação a etiologia do trauma (p < 0,05/ Teste Qui-quadrado) e não obteve diferença significativa com as diferentes faixas etárias (p > 0,05 / Teste Mann Whitney). Concluiu-se que o gênero masculino, a faixa etária de 11 a 15 anos, as quedas, os incisivos centrais superiores, as fraturas de esmalte e dentina e as avulsões foram os achados mais freqüentes / Abstract: The purpose of this retrospective study was to evaluate several aspects related to traumatic dental injuries regarding its etiology, prevalence and classification in the patients of Service of Dental Trauma of the Endodontics Area, Faculty of Dentistry of Piracicaba-UNICAMP, from July 2000 to July 2010. The statistical treatment analysed data from frequency distribution, Chi-square test and Mann-Whitney test. The level of significance was set at 5% for all analyses. A total of 450 patients (150 females and 300 males) with 1284 injured teeth, approximately 2,8 per patient. The results showed that the prevalent age group was 11 to 15 years (31.5%) and the most frequent etiological factors of tooth injuries were falls (35.6%) and bicycle accidents (26.2%). The upper central incisors were the teeth with higher percentage of trauma (53.7%). The most prevalent type of injury to dental tissue was fracture of enamel and dentin, while avulsions and subluxations were the most frequently types of injuries to the supporting tissues. The month and day that most occurred dental injuries was May and Saturday respectively. Gender exerted influence over the etiology of trauma (p <0.05 / Chi?square) and had no significant difference with the different age groups (p> 0.05 / Mann Whitney). It was concluded that male gender, age range 11 to 15 years, falls, upper central incisors, the enamel and dentin fractures and avulsions were the most frequently findings / Mestrado / Endodontia / Mestre em Clínica Odontológica

Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-18T14:01:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Chiesa_WandersonMiguelMaia_D.pdf: 2308331 bytes, checksum: 52ef248e0f498c63a519acd9b0b14e9a (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Conteúdos dos canais radiculares podem ficar aderidos às limas endodônticas durante o preparo químico-mecânico, tais como endotoxinas, com grande potencial de desencadear resposta inflamatória. Instrumentos endodônticos são frequentemente reutilizados, existindo preocupação sobre a neutralização daqueles conteúdos pelos métodos de esterilização empregados em consultórios odontológicos. Os objetivos deste estudo foram: avaliar os efeitos de esterilização por estufa de calor seco ou autoclave, na detecção de DNA bacteriano e níveis de endotoxinas de limas endodônticas contaminadas in vivo, verificando correlações entre as espécies detectadas; investigar a produção de IL-1ß por macrófagos murinos estimulados in vitro por amostras coletadas de hastes metálicas contaminadas de limas endodônticas e esterilizadas por estufa de calor seco ou autoclave. Oitenta limas endodônticas manuais número 15 de aço inoxidável ficaram estéreis e apirogênicas, após esterilização pelo calor seco a 200ºC/4h. Vinte limas tiveram seus cabos removidos e as hastes metálicas destinadas ao Grupo I (Controle negativo), em frascos apirogênicos. Vinte pacientes apresentando necrose da polpa dental, lesão periapical e sem dor espontânea foram incluídos nesta pesquisa. Cavidades de acesso foram assepticamente preparadas e três limas apirogênicas sucessivamente introduzidas e removidas até o comprimento de trabalho de cada canal. Depois do uso, os cabos foram removidos, as hastes metálicas inseridas em frascos estéreis e apirogênicos e os outros grupos foram divididos (n=20): Grupo II (Controle positivo) - amostras sem esterilização; Group III - esterilização pela estufa de calor seco (170ºC/1h); Grupo IV - amostras autoclavadas. A técnica PCR (16S rDNA) foi usada para detectar DNA bacteriano, um teste turbidimétrico do Lisado dos Amebócitos de Limulus (LAL) foi usado para mensurar os níveis de endotoxinas e o método ELISA calculou as quantidades de IL-1ß liberadas por macrófagos murinos estimulados pelos conteúdos das limas contaminadas e esterilizadas. Prevotella nigrescens, Porphyromonas endodontalis e Treponema socranskii foram as bactérias-alvo mais frequentemente detectadas, a partir das amostras contaminadas e não esterilizadas. Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, Tanerella forsythia e Prevotella tannerae não foram identificadas. Correlação positiva estatisticamente significante (p<0.05) foi encontrada entre Porphyromonas endodontalis e Treponema denticola, e desta com Treponema socranskii. Depois de esterilização pela estufa de calor seco ou autoclave, o método PCR não detectou bactérias. O teste turbidimétrico indicou a mediana de 1,070 UE/mL, 0,875 UE/mL e 0,251 EU/mL, no grupo sem esterilização, esterilizado pela estufa de calor seco e autoclavado, respectivamente. Macrófagos estimulados pelas amostras das limas contaminadas e autoclavadas liberaram IL-1ß (mediana de 55,39 pg/mL). Conclusão: DNA bacteriano não foi detectado depois da esterilização pela estufa de calor seco ou autoclave, mas estes métodos não foram capazes de eliminar endotoxinas de limas endodônticas contaminadas e não foram encontradas diferenças estatisticamente significantes entre os dois métodos de esterilização empregados (p>0.05). Correlações positivas significantes foram detectadas entre micro-organismos colhidos de limas endodônticas contaminadas. Amostras autoclavadas estimularam a liberação de IL-1ß por macrófagos, mas não foram detectados níveis mensuráveis desta citocina depois da estimulação pelas amostras esterilizadas por calor seco / Abstract: Contents from root canal can be attached on endodontic files during chemomecanical preparation, such as endotoxin, with great potential to trigger inflammation. Endodontic instruments are often reused, and there is a concern about the neutralization of those contents by sterilization methods employed in dental offices. The objectives of this study were: to evaluate the effect of sterilization by dry heat oven or autoclave, in the bacterial DNA detection and endotoxin levels from in vivo contaminated endodontic files, verifying correlations between detected species; to investigate IL-1ß production by murine macrophage stimulated in vitro by samples from contaminated metal shafts of endodontic files and sterilized by dry heat oven or autoclave. Eighty size 15 stainless steel hand files were sterile and apyrogenic, after dry heat sterilization at 200ºC/4h. Twenty files had their handles cut off and metal shafts destined to the Group I (Negative control), in apyrogenic vials. Twenty patients presenting dental pulp necrosis, periapical lesion and without spontaneous pain were included in this research. Access cavities were aseptically prepared and three apyrogenic files were successively introduced and removed at the working length of each canal. After use, handles were cut off, metal shafts inserted in apyrogenic vials and the other groups were divided (n=20): Group II (Positive control) - samples with no sterilization; Group III - sterilization by dry heat oven (170ºC/1h); Group IV- autoclaved samples. PCR technique (16S rDNA) was used to detect bacterial DNA, Limulus Amebocyte Lysate (LAL) turbidimetric test measured endotoxin levels and ELISA method calculated amounts of IL-1ß released by murine macrophage stimulated by contents from the contaminated and sterilized files. Prevotella nigrescens, Porphyromonas endodontalis and Treponema socranskii were the most frequently detected target bacteria, from contaminated and non sterilized samples. Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, Tanerella forsythia and Prevotella tannerae were not identified. Statistically significant positive correlation (p<0.05) was found between Porphyromonas endodontalis and Treponema denticola, and between Treponema denticola and Treponema socranskii. After sterilization by dry heat oven or autoclave, PCR method detected no bacteria. Turbidimetric test indicated median of 1.070 EU/mL, 0.875 EU/mL and 0.251 EU/mL, in the group without sterilization, sterilized by dry heat oven and autoclaved, respectively. Macrophage stimulated by samples from contaminated and autoclaved files released IL-1ß (median of 55.39 pg/mL). Conclusion: no bacterial DNA was detected (PCR technique - 16S rDNA) after sterilization by dry heat oven or autoclave, but these methods were not able to eliminate endotoxin from contaminated endodontic files and no statistically significant differences were found between the two methods of sterilization employed (p>0.05). Significant positive correlations were detected between microorganisms collected from contaminated endodontic files. Autoclaved samples stimulated IL- 1ß releasing by macrophage, but no measurable levels of this cytokine were detected after stimulation by dry heat sterilized samples / Doutorado / Endodontia / Doutor em Clínica Odontológica

Orientador: Adriana de Jesus Soares / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-26T12:44:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima_ThiagoFariasRocha_D.pdf: 1878040 bytes, checksum: 8fd5f1baf140fcbb28173a988c006681 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: O presente trabalho teve como objetivos: avaliar a acurácia da Tomografia Computadorizada de Feixe Cônico e de radiografias periapicais digitais no diagnóstico de reabsorções radiculares em dentes traumatizados e verificar a influência da presença do material obturador na detecção dessas lesões (capítulo 1); relatar dois casos clínicos de reabsorções radiculares cujo diagnóstico foi realizado por meio da Tomografia Computadorizada de Feixe Cônico (capítulo 2). No capítulo 1, a amostra desta pesquisa foi constituída por radiografias e tomografias de pacientes com reabsorções radiculares e histórico de trauma dental, coletadas do banco de dados de uma clínica radiológica. Vinte oito dentes com reabsorções inflamatórias externas (14 com tratamento endodôntico e 14 sem tratamento endodôntico), 8 dentes com reabsorções inflamatórias internas e 4 dentes com reabsorção por substituição foram incluídos. Vinte casos sem reabsorção foram selecionados para o grupo controle. A análise das imagens foi realizada por 2 endodontistas e 2 radiologistas, previamente calibrados. Os resultados revelaram que a sensibilidade, especificidade e acurácia da Tomografia Computadorizada de Feixe Cônico foi superior às radiografias periapicais para o diagnóstico de reabsorções inflamatórias externas e internas (p<0.05 / Teste t). Para reabsorção por substituição, não houve diferença entre os métodos avaliados (p>0.05 / Teste t). Nos dentes tratados endodonticamente, a tomografia também apresentou resultados estatisticamente superiores para o diagnóstico das reabsorções inflamatórias externas (p=0.0138 / Teste t). No capítulo 2, dois casos clínicos de reabsorções radiculares (1 de reabsorção cervical externa e 1 de reabsorção inflamatória interna) foram descritos. A abordagem terapêutica adotada durante o diagnóstico e tratamento foi minuciosamente detalhada. O tratamento da reabsorção cervical externa foi multidisciplinar e envolveu a endodontia e periodontia. No caso com reabsorção interna, apenas o tratamento endodôntico foi necessário. Após o período de proservação, ambos os casos apresentaram-se sem sintomatologia e o sucesso clínico foi verificado. Concluiu-se que a Tomografia Computadorizada de Feixe Cônico foi superior às radiografias periapicais em relação ao diagnóstico de reabsorções inflamatórias (capítulo 1) e apresenta-se como um importante recurso de diagnóstico auxiliar para a detecção, localização e planejamento do tratamento clínico das reabsorções radiculares (capítulo 2) / Abstract: The aims of this study were: to evaluate the accuracy of cone beam computed tomography (CBCT) and digital periapical radiography in diagnosing root resorption following dental trauma and to verify the influence of filling material in detecting these lesions. (Chapter 1); describe two cases reports of root resorptions diagnosed by CBCT (Chapter 2). In chapter 1, periapical radiographs and CBCT images of patients with root resorption and a history of dental trauma from the database of a private radiology clinic were retrospectively reviewed. The sample comprised 28 teeth with external inflammatory resorption (14 with and 14 without endodontic treatment), 8 teeth with internal inflammatory resorption, 4 teeth with replacement resorption and 20 normal teeth as the control group. Images were analyzed by two radiologists and two endodontists who were previously calibrated. The results showed that the sensitivity, specificity and accuracy of CBCT in diagnosing internal and external inflammatory resorption was significantly higher than for radiography (p < 0.05 / t test). For replacement resorption, no statistical difference was noted (p > 0.05 / t test). In endodontically treated teeth, CBCT was also statistically superior in diagnosing external inflammatory resorption (p = 0.0138 / t test). In chapter 2, two cases reports of root resorptions (cervical external resorption and internal inflammatory resorption) were described. The therapeutic approach adopted for the diagnosis and treatment was detailed. Treatment of cervical external resorption involved endodontics and periodontics.In casewith inflammatory internal resorption, only endodontic treatment wasnecessary. After the observation period, both cases were presented without symptoms and clinical success was confirmed. Based on these findings, it was concluded that CBCT was superior to periapical radiography in diagnosing inflammatory root resorption following dental trauma, with or without endodontic treatment (Chapter 1) and presents itself as an important resource of as an auxiliary diagnosis for the detection, location and planning of the clinical treatment of root resorption (Chapter 2) / Doutorado / Endodontia / Doutor em Clínica Odontológica