Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-09-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo do estudo foi investigar possíveis danos no DNA e morte celular a partir da frequência de micronúcleos e citotoxicidade considerando-se a frequência de cariólise, cariorrexe e picnose em células da mucosa bucal promovida pela exposição aos enxaguatórios bucais. Para o estudo in vivo foram utilizados 15 voluntários para cada enxaguatório, a citar: Periogard®, Plax Whitening®, Plax sem álcool®, Listerine® e Cepacol®, o qual se empregou o Teste do Micronúcleo em células esfoliadas da mucosa bucal. Para o estudo in vitro empregou-se o Ensaio do Cometa em sangue periférico a partir de três voluntários saudáveis exposto aos enxaguatórios supracitados na presença e ausência de Metilmetanosulfonato (MMS) e Peróxido de Hidrogênio (H 2 O ). Os resultados do Teste do Micronúcleo demonstraram que a exposição ao Periogard® foi capaz de aumentar a frequência de células micronucleadas (p<0,05). Listerine®, Plax sem álcool®, Plax Whitening® e Cepacol® não foram capazes de alterar nenhum dos parâmetros analisados. Em relação ao Ensaio do Cometa efeito genotóxico do Plax Whitening® (p<0,05), e redução na migração genômica promovida pelo Listerine® perante a exposição prévia ao H 2 O (peróxido de hidrogênio) foram observados. Plax sem álcool®, Cepacol® e Periogard® não foram capazes de induzir danos genéticos, nem tampouco exercer atividade moduladora perante a genotoxicidade induzida pelo MMS ou H 2 O in vitro. Em suma, tais resultados sugerem que Periogard® e Plax Whitening® são genotoxinas para células da mucosa bucal e sangue periférico respectivamente, enquanto que Listerine® foi capaz de exercer efeito antioxidante. / The aim of the present study was comparatively evaluate DNA damage and cellular death in cells exposed to various commercially mouthrinses available: Listerine®, Cepacol®, Plax alcohol free®, Periogard®, Plax Whitening®. A total of 75 volunteers were included being distributed into five groups containing 15 people each for in vivo study. Exfoliated oral mucosa cells were collected immediately before the mouthrinse exposure and after 2 weeks. Furthermore, blood samples were obtained from 3 healthy donors for in vitro study. Ten microliters of the tested mouthrinse was then added to human peripheral blood cells for 1 hour at 37°C. After that, all treatments were incubated with MMS at 10 μmol/L concentration or H 2 O at 100 μmol/L concentration. The negative control cells were treated with PBS for 1 hour at 37°C. The results showed that Periogard promoted an increase of micronucleus frequency after continous exposure. Plax whitening induced extensive genetic damage in peripheral blood cells after in vitro exposure. Listerine was able to reduce genetic damage induced by hydrogen peroxide. Taken together, the results of the present study suggest that Periogard and Plax Whitening are able to induce genetic damage whereas Listerine is an antioxidant agent. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Nos Ãltimos anos, o uso de pesticidas na agricultura tem aumentado e associaÃÃes entre a exposiÃÃo a produtos quÃmicos agrÃcolas e danos ao DNA e cÃncer tem sido relatados. O Brasil à um dos lÃderes mundiais na utilizaÃÃo de pesticidas, no entanto, estudos que avaliem o impacto da exposiÃÃo ocupacional a pesticidas sobre a incidÃncia e mortalidade por cÃncer ainda sÃo escassos na populaÃÃo brasileira. O teste do cometa alcalino e a anÃlise de aberraÃÃes cromossÃmicas (AC) foram utilizados para avaliar danos primÃrios ao DNA em linfÃcitos do sangue perifÃrico de trabalhadores expostos a uma mistura complexa de pesticidas em duas pequenas comunidades rurais nos municÃpios de Tianguà e Ubajara, localizados no oeste do Estado do Cearà (Nordeste do Brasil). Estes MunicÃpios estÃo entre as maiores Ãreas agrÃcolas do Estado. O teste do cometa mostrou que o Ãndice e freqÃÃncia de danos observados nos grupos expostos foram significativamente maiores em relaÃÃo aos grupos controle (P <0,05). Por outro lado, nÃo foram detectadas diferenÃas significativas em relaÃÃo a AC estruturais e numÃricas nas comunidades avaliadas. AlÃm disso, os nÃveis observados de quebras da fita de DNA e freqÃÃncias de AC, estratificadas por tempo de exposiÃÃo, nÃo foram estatisticamente diferentes nos agricultores de ambas comunidades rurais. Os resultados sugerem que os danos causados por pesticidas na Ãrea de estudo nÃo foram significativos o suficiente para induzir mutaÃÃes permanentes ou interferir na formaÃÃo do aparelho mitÃtico. Danos mÃnimos causados pelos pesticidas podem ter sido submetidos a reparo celular, explicando a ausÃncia de AC estruturais e numÃricas. As anÃlises da Ãgua do reservatÃrio que serve de fonte para irrigaÃÃo das plantaÃÃes e abastece os municÃpios da regiÃo nÃo detectou contaminaÃÃo por resÃduos de pesticidas. / In recent years, the use of pesticides in agriculture has been steadily increasing, and associations between exposure to agricultural chemicals and DNA damage and cancer have been reported. Brazil is one of the world leaders in pesticide use; however, studies that evaluate the impact of pesticide exposure on cancer incidence and mortality are very scarce in the Brazilian population. The alkaline comet assay and the chromosome aberration (CA) test were used to evaluate primary DNA damage in the peripheral blood lymphocytes of workers exposed to a complex mixture of pesticides in two small rural communities in the municipalities of Tianguà and Ubajara, located in the western part of Cearà State (Northeast Brazil), which are among the largest agricultural areas of the state. The comet assay showed that the damage index and damage frequency observed in the exposed groups were significantly higher in relation to the controls (P < 0.05). On the other hand, no differences were detected regarding structural and numerical CAs in the communities evaluated. Additionally, the observed levels of DNA strand breaks and frequencies of CAs, stratified for exposure time, were not statistically different for individuals of either rural community. Our results suggest that the damages caused by pesticides in our study area were not great enough to induce permanent mutations or to interfere with mitotic apparatus formation; minimal pesticide damages could have undergone cellular repair, explaining the absence of structural and numerical CAs. Analyses of water from the reservoir that serves as a source for irrigation of crops and supplies the cities of the region did not detect contamination by pesticides.

O consumo de frutas e verduras está relacionado com a promoção da saúde porque tem sido associado com a redução do risco de desenvolvimento de doenças crônicas como, por exemplo, câncer e doenças degenerativas e cardiovasculares. Dessa forma, o estudo dos efeitos biológicos desses alimentos tem ganhado atenção nos últimos anos. O piquiá (Caryocar villosum) é um fruto nativo da Amazônia e é rico em compostos antioxidantes como os compostos fenólicos. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos genotóxicos e antigenotóxicos in vivo da polpa liofilizada do piquiá e também de seu extrato etanólico. Além disso, os compostos fitoquímicos presentes na polpa e no seu extrato foram quimicamente determinados. Ratos Wistar foram tratados por gavagem, durante 14 dias consecutivos, com três diferentes doses da polpa do piquiá (75, 150 ou 300 mg/kg p.c.) ou com seu extrato etanólico (75 mg/kg p.c.). No 14° dia, os animais receberam solução salina (NaCl 0,9%, i.p.) ou doxorrubicina (DXR, 15 mg/kg p.c., i.p.) e após 24 horas foram eutanasiados. A medula óssea e o sangue periférico foram usados no teste do micronúcleo (MN), e o fígado, rins e coração foram utilizados nos ensaios do cometa, nas análises bioquímicas das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e glutationa reduzida (GSH) e na avaliação da expressão de mRNA dos genes epóxido hidrolase (Ephx2) e proteína tumoral p53 (Tp53). A polpa do piquiá não apresentou efeito genotóxico nem mutagênico em nenhuma das doses avaliadas, demonstrou atividade antigenotóxica e ainda reduziu os níveis de TBARS induzidos pela DXR no coração. Efeitos opostos foram encontrados para o extrato etanólico da polpa do piquiá, por apresentar genotoxicidade, mas não mutagenicidade, e indução de TBARS no coração. Os níveis de mRNA do gene Ephx2 no rim e coração foram aumentados após o tratamento com a maior dose da polpa do piquiá, entretanto, no rim a menor dose diminuiu a transcrição desse gene induzida pela DXR. No fígado as doses de 75 e 300 mg/kg p.c. diminuíram os níveis de mRNA do gene Ephx2 induzidos pela DXR. A dose de 300 mg/kg p.c. da polpa diminuiu a expressão de mRNA do gene Tp53 nos grupos da associação piquiá + DXR no fígado, rim e coração. O extrato etanólico da polpa do piquiá modulou a expressão de mRNA do gene Ephx2 apenas no fígado, aumentando os níveis desse transcrito, enquanto que no coração houve diminuição da transcrição do gene Tp53. Foi encontrada uma diferença de composição fitoquímica entre a polpa liofilizada e seu extrato etanólico. O extrato apresentou 1,4x mais compostos fenólicos e 3x menos carotenoides quando comparado com a polpa. Além disso, o ácido gálico foi o composto fenólico predominante na polpa, enquanto que no extrato o fenol mais abundante foi o ácido elágico. A diferença dos efeitos biológicos entre a polpa liofilizada do piquiá e seu extrato etanólico pode ser devido à alteração da composição fitoquímica. / Fruit and vegetables intake has been related to the promotion of health because it has been associated to reduced risk of chronic diseases development such as cancer, and cardiovascular and degenerative diseases. Thus, the study of the biological effects of these foods has increased in recent years. Piquiá (Caryocar villosum) is a fruit native of the Amazon and it is rich in antioxidant compounds such as phenolic compounds. Therefore, the aim of this study was to evaluate the in vivo genotoxicity and antigenotoxicity effects of the piquiá lyophilized pulp fruit and its ethanolic extract. Moreover, the phytochemical characterization of pulp and extract was determined. Wistar rats were treated by gavage, for 14 days, with three doses of piquiá pulp (75, 150 or 300 mg/kg b.w.) or with its ethanolic extract (75 mg/kg b.w.). On 14th day, the animals received saline (0.9% i.p.) or doxorubicin (DXR, 15 mg/kg b.w.) and after 24 hours they were euthanized. Bone marrow and peripheral blood were used in micronucleus (MN) test, and the liver, kidney and heart were used in comet assay, thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), reduced gluthatione (GSH), and in the evaluation of mRNA expression of epoxide hydrolase (Ephx2) and tumor protein p53 (Tp53) genes. The piquiá pulp was not genotoxic nor mutagenic, demonstrated antigenotoxic effects and reduced the TBARS levels induced by DXR in heart. The ethanolic extract had opposite effects, whereas it was genotoxic, but not mutagenic, and increased the TBARS levels in heart. Ephx2 mRNA levels in kidney and heart were increased after treatment with the higher dose of piquiá pulp, however, in kidney the lowest dose decreased the transcription of this gene induced by DXR. In liver, the 75 and 300 mg/kg b.w. doses of piquiá pulp decreased the Ephx2 mRNA levels induced by DXR. The piquiá pulp 300 mg/kg + DXR group, presented lower levels of Tp53 mRNA in liver, kidney and heart. The ethanolic extract of piquiá pulp modulated the mRNA Ephx2 expression only in the liver, increasing the levels of this transcript, while in the heart decreased the transcription of Tp53 gene. There was a difference on phytochemical composition between the pulp and its ethanolic extract. The extract presented 1.4-fold more phenolic compounds and 3-fold less carotenoids than piquiá pulp. Furthermore, gallic acid was the predominant phenol in the pulp, whereas in the ethanolic extract the most abundant phenol was the ellagic acid. The difference in the biological effects between piquiá pulp and is ethanolic extract may be due the change of the phytochemical composition.

O guajiru (Chrysobalanus icaco L.) é um fruto rico em antocianinas, as quais exercem vários efeitos benéficos à saúde. Embora as folhas do guajiru sejam utilizadas na medicina popular como hipoglicemiante e antioxidante, os efeitos do fruto na saúde permanecem inexplorados. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do fruto do guajiruzeiro sobre danos ao DNA e estresse oxidativo in vivo e inflamação in vitro e in vivo. Ratos machos Wistar (4-5 semanas, 110 g) foram divididos em oito grupos e tratados por 14 dias com água ou fruto do guajiruzeiro liofilizado (100, 200 ou 400 mg/kg p.c.) por gavagem. No 14º dia, os animais receberam solução fisiológica ou DXR (15 mg/kg p.c. i.p.) e foram eutanasiados após 24 horas. A genotoxicidade e antigenotoxicidade foram avaliadas pelo ensaio do cometa em sangue periférico, fígado, rins e coração. A mutagenicidade e antimutagenicidade foram investigadas pelo teste do micronúcleo em medula óssea e sangue periférico. O burst oxidativo foi avaliado em neutrófilos do sangue periférico. Parâmetros de estresse oxidativo envolveram: concentração de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico, razão glutationa reduzida e oxidada e atividade da catalase em fígado, rins e coração. As expressões de genes de dano/reparo de DNA Gadd45a (growth arrest and DNA damage-inducible alpha), Parp1 (Poly(ADP-ribose) polymerase 1) e Xrcc2 (X-Ray Repair complementing defective repair in Chinese hamster cells 2) e dos marcadores pró-inflamatórios Il-1? (interleukin 1 beta), Il-6 (interleukin 6), Nf-kb (nuclear factor kappa B) e Tnf-? (tumor necrosis factor alpha) foram realizadas por PCR quantitativo em tempo real. Células de cólon humano CCD-18Co (fibroblastos) e HT-29 (adenocarcinoma) foram tratadas com antocianinas do guajiru (1,0 a 20,0 mg/L equivalentes de ácido gálico - GAE) e as expressões de IL-1?, IL-6, NF-kB e TNF-? analizadas a nível de RNA mensageiro e proteína. TNF-? foi utilizado para induzir inflamação em células CCD- 18Co. Os polifenois do fruto do guajiruzeiro foram quantificados/caracterizados por métodos cromatográficos e espectrométricos. As concentrações de 19 elementos químicos foram determinadas por plasma indutivamente acoplado a espectrometria de massas. Delfinidina, cianidina, petunidina e peonidina foram as antocianinas majoritárias encontradas no fruto. Concentrações significantes de polifenois, magnésio e selênio foram encontradas nesse fruto. O fruto do guajiruzeiro exibiu atividade antioxidante in vivo em neutrófilos, antigenotoxicidade em sangue periférico e antimutagenicidade em sangue periférico e medula óssea. O guajiru diminuiu os danos ao DNA no fígado, rins e coração. O fruto também diminuiu as expressões de Gadd45a, Il-1?, e Tnf-? nos tecidos. A proliferação celular foi suprimida em células HT-29, acompanhado por aumento na produção de ROS e diminuição nas expressões de TNF-?, IL-1?, IL-6 e NF-kB. Não foi observado efeito citotóxico das antocianinas em células CCD-18Co. As expressões das proteínas IL- 1?, IL-6 e TNF-? foram reduzidas em células CCD-18Co tratadas com TNF-? e com as antocianinas. Os resultados deste trabalho demonstram que os fitoquímicos e elementos químicos no fruto do guajiruzeiro possuem efeitos antigenotóxico, antimutagênico, antioxidante e anti-inflamatório e encorajam a realização de outros ensaios in vivo e estudos clínicos com esse fruto subutilizado. / Guajiru (Chrysobalanus icaco L.) is a fruit rich in anthocyanins, which exert several beneficial effects on health. Although guajiru leaves are used in folk medicine as hypoglycemic and antioxidant, the fruit effects on health remain unknown. The aim of this study was to evaluate the effects of guajiru fruit against in vivo DNA damage and oxidative stress and in vivo/in vitro inflammation. Male Wistar rats (4-5 weeks old, 110 g) were divided into eight groups and treated for 14 days with water or lyophilized guajiru fruit (100, 200 or 400 mg/kg b.w.) by gavage. On the 14th day, animals received physiologic solution or DXR (15 mg/kg b.w. i.p.) and were euthanized after 24 hours. Genotoxicity and antigenotoxicity were evaluated by comet assay in peripheral blood, liver, kidney, and heart. Mutagenicity and antimutagenicity of guajiru fruit were investigated by micronucleus test in peripheral blood and bone marrow. The oxidative burst was measured in peripheral blood neutrophils. Oxidative stress parameters involved the concentration of thiobarbituric acid reactive substances, reduced/oxidized glutathione ratio, and catalase activity in liver, kidney and heart. The expressions of DNA damage/repair genes Gadd45a (growth arrest and DNA damage-inducible alpha), Parp1 (Poly(ADP-ribose) polymerase 1), and Xrcc2 (X-Ray Repair complementing defective repair in Chinese hamster cells 2) and pro-inflammatory markers Il-1 ? (interleukin 1 beta), Il-6 (interleukin 6), Nf-kb (nuclear factor kappa B), and Tnf-? (tumor necrosis factor alpha) were evaluated by real-time quantitative PCR. Human colon cell lines CCD- 18Co (fibroblasts), and HT-29 (adenocarcinoma) were treated with guajiru anthocyanins (1.0 - 20.0 mg/L gallic acid equivalents - GAE) and the expressions of IL-1 ?, IL-6, NF-kB and TNF-? were analyzed at mRNA and protein levels. TNF-? was used to induce inflammation in CCD-18Co cells. Guajiru fruit phytochemicals were quantified and characterized by chromatographic and spectrometric methods. The concentrations of 19 chemical elements were determined by inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS). Delphinidin, cyanidin, petunidin and peonidin were the major anthocyanins in this fruit. Significant amounts of phytochemicals, magnesium, and selenium were found in this fruit. Guajiru fruit displayed in vivo antioxidant activity in neutrophils, antigenotoxicity in peripheral blood and antimutagenicity in bone marrow and peripheral blood. Guajiru fruit decreased DNA damage in liver, kidney, and heart. This fruit decreased the expression of Gadd45a, Il-1 ?, and Tnf-?, in tissues. Cell proliferation was suppressed in HT-29 cells, and this was accompanied by increased intracellular ROS production as well as decreased TNF-?, IL-1 ?, IL-6, and NF-kB expressions. There was no cytotoxic effect of guajiru fruit anthocyanins in CCD-18Co cells. IL-1 ?, IL-6, and TNF-? protein expressions were reduced in TNF-?-treated CCD-18Co cells by guajiru fruit anthocyanins. The findings from this investigation demonstrated that phytochemicals and chemical elements in guajiru fruit possess antigenotoxic, antimutagenic, antioxidant and antiinflammatory effects and encourage other in vivo and clinical studies with this underutilized fruit.

A doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC) é uma doença inflamatória com participação de macrófagos, neutrófilos e linfócitos CD8, associada a estímulos oxidantes diretamente nas estruturas pulmonares, causada mais comumente pelo tabagismo. Recentemente foi demonstrado que o teste de caminhada dos seis minutos (TC6) é capaz de aumentar a inflamação e gerar o aumento de espécies reativas de oxigênio. O presente estudo teve como objetivo avaliar os níveis de dano e reparo de DNA em portadores de DPOC, quando submetidos ao TC6. Para avaliar o dano de DNA, amostras de sangue periférico foram coletadas antes e imediatamente após o TC6. Para avaliar a capacidade de reparo, foi analisada uma amostra coletada 48 horas após o TC6. Todas as amostras foram processadas pela técnica do cometa. Vinte e sete pacientes portadores de DPOC foram avaliados, sendo 59% homens. A média de idade foi de 64,7 ± 8,4 anos. A média do VEF1 foi de 40,3% ± 18,4% do previsto, com relação média de VEF1/CVF de 52,5% ± 11,9%. Todos fumaram em média 36,7 ± 17,0 anos, uma média de 48,1 ± 37,5 maços/ano. As médias das variáveis obtidas no início e no final do TC6 foram: SpO2 (92,0 ± 4,5 vs. 91,4 ± 4,6), percepção da dispnéia pela escala de BORG (1,2 ± 1,0 vs. 2,4 ± 1,7) e a distância percorrida foi em média de 380,1± 84,4 m. As taxas médias de dano de DNA antes do TC6 (27,9 ± 19,2) e imediatamente após (29,6±29,6) não apresentaram diferenças significativas (p=0,904). A análise realizada 48 horas após o TC6 demonstrou uma redução não significativa deste dano (18,3 ± 13,0, p=0,099). Conclui-se neste estudo que o esforço físico realizado durante o TC6 não provoca aumento imediato nas taxas de dano de DNA, nem estimula os mecanismos de reparo do DNA em portadores de DPOC. / Chronic obstructive pulmonary disease is an inflammatory disease in which macrophages, neutrophils and CD8 T lymphocytes play an important role. It is associated with direct oxidant stimuli of lung structures, which are most frequently triggered by smoking. A recent study showed that the 6-minute walk test (6MWT) increases inflammation and reactive oxygen species. This study evaluated DNA damage and repair in patients with COPD that took the 6MWT. To evaluate DNA damage, peripheral blood samples were collected before and immediately after 6MWT. To evaluate repair, a sample was collected 48 hours after the 6MWT. All samples were prepared for the comet assay. Twenty-seven patients with COPD were evaluated; 59% were men and mean age was 64.7 ± 8.4. Mean FEV1 was 40.3% ± 18.4% of predicted value, and mean FEV1/FVC was 52.5% ± 11.9%. Mean values before and after 6MWT were: SpO2 = 92.0 ± 4.5 vs. 91.4 ± 4.6; Borg score for dyspnea = 1.2 ± 1.0 vs. 2.4 ± 1.7; and mean distance walked – 380.1 ± 84.4 m. Mean DNA damage values before (27.9 ± 19.2) and immediately after (29.6 ± 29.6) 6MWT were not significantly different (p = 0.904). The analysis performed 48 hours after 6MWT showed a nonsignificant reduction of damage (18.3 ± 13.0; p = 0.099). Conclusions The physical effort during 6MWT did not cause an immediate increase in DNA damage, and did not stimulate DNA repair mechanisms in patients with COPD.

PAIVA, Jean Carlos Gomes. Biomonitoring genetic of farmers exposed to pesticides in the municipalities of Tiangua and Ubajara (Ceará, Brazil). 2011. 111 f. : Tese (doutorado) - Universidade Federal do Ceará, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Renorbio - Rede Nordeste de Biotecnologia. 2011. / Submitted by demia Maia (demiamlm@gmail.com) on 2016-05-23T17:19:06Z No. of bitstreams: 1 2011_tese_jcgpaiva.pdf: 2591728 bytes, checksum: 4776344bdee5aac282c66c0a37608507 (MD5) / Approved for entry into archive by demia Maia (demiamlm@gmail.com) on 2016-05-23T17:19:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_tese_jcgpaiva.pdf: 2591728 bytes, checksum: 4776344bdee5aac282c66c0a37608507 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-23T17:19:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_tese_jcgpaiva.pdf: 2591728 bytes, checksum: 4776344bdee5aac282c66c0a37608507 (MD5) Previous issue date: 2011

A doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC) é uma doença inflamatória com participação de macrófagos, neutrófilos e linfócitos CD8, associada a estímulos oxidantes diretamente nas estruturas pulmonares, causada mais comumente pelo tabagismo. Recentemente foi demonstrado que o teste de caminhada dos seis minutos (TC6) é capaz de aumentar a inflamação e gerar o aumento de espécies reativas de oxigênio. O presente estudo teve como objetivo avaliar os níveis de dano e reparo de DNA em portadores de DPOC, quando submetidos ao TC6. Para avaliar o dano de DNA, amostras de sangue periférico foram coletadas antes e imediatamente após o TC6. Para avaliar a capacidade de reparo, foi analisada uma amostra coletada 48 horas após o TC6. Todas as amostras foram processadas pela técnica do cometa. Vinte e sete pacientes portadores de DPOC foram avaliados, sendo 59% homens. A média de idade foi de 64,7 ± 8,4 anos. A média do VEF1 foi de 40,3% ± 18,4% do previsto, com relação média de VEF1/CVF de 52,5% ± 11,9%. Todos fumaram em média 36,7 ± 17,0 anos, uma média de 48,1 ± 37,5 maços/ano. As médias das variáveis obtidas no início e no final do TC6 foram: SpO2 (92,0 ± 4,5 vs. 91,4 ± 4,6), percepção da dispnéia pela escala de BORG (1,2 ± 1,0 vs. 2,4 ± 1,7) e a distância percorrida foi em média de 380,1± 84,4 m. As taxas médias de dano de DNA antes do TC6 (27,9 ± 19,2) e imediatamente após (29,6±29,6) não apresentaram diferenças significativas (p=0,904). A análise realizada 48 horas após o TC6 demonstrou uma redução não significativa deste dano (18,3 ± 13,0, p=0,099). Conclui-se neste estudo que o esforço físico realizado durante o TC6 não provoca aumento imediato nas taxas de dano de DNA, nem estimula os mecanismos de reparo do DNA em portadores de DPOC. / Chronic obstructive pulmonary disease is an inflammatory disease in which macrophages, neutrophils and CD8 T lymphocytes play an important role. It is associated with direct oxidant stimuli of lung structures, which are most frequently triggered by smoking. A recent study showed that the 6-minute walk test (6MWT) increases inflammation and reactive oxygen species. This study evaluated DNA damage and repair in patients with COPD that took the 6MWT. To evaluate DNA damage, peripheral blood samples were collected before and immediately after 6MWT. To evaluate repair, a sample was collected 48 hours after the 6MWT. All samples were prepared for the comet assay. Twenty-seven patients with COPD were evaluated; 59% were men and mean age was 64.7 ± 8.4. Mean FEV1 was 40.3% ± 18.4% of predicted value, and mean FEV1/FVC was 52.5% ± 11.9%. Mean values before and after 6MWT were: SpO2 = 92.0 ± 4.5 vs. 91.4 ± 4.6; Borg score for dyspnea = 1.2 ± 1.0 vs. 2.4 ± 1.7; and mean distance walked – 380.1 ± 84.4 m. Mean DNA damage values before (27.9 ± 19.2) and immediately after (29.6 ± 29.6) 6MWT were not significantly different (p = 0.904). The analysis performed 48 hours after 6MWT showed a nonsignificant reduction of damage (18.3 ± 13.0; p = 0.099). Conclusions The physical effort during 6MWT did not cause an immediate increase in DNA damage, and did not stimulate DNA repair mechanisms in patients with COPD.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-04-30Bitstream added on 2014-06-13T18:09:01Z : No. of bitstreams: 1 mazzeo_dec_me_rcla.pdf: 466729 bytes, checksum: 3469c8aa04564a66b2f72475c7602465 (MD5) / Derivados de petróleo como benzeno, tolueno, etilbenzeno e xileno (BTEX) são hidrocarbonetos monoaromáticos muito utilizados como solventes e matéria-prima em diversos processos industriais, além de estarem presentes, em grandes quantidades, nos combustíveis fósseis. Pelo seu amplo uso e alta solubilidade em água, o BTEX vem caracterizando um poluente freqüente das águas, em especial, as subterrâneas. A aplicação do processo de biorremediação parece constituir uma metodologia promissora para o tratamento de águas contaminadas por essa mistura. Testes citogenéticos são adequados e eficientes para identificar e avaliar efeitos danosos de substâncias sobre os organismos, em suas diversas concentrações e tempos de exposição. Neste trabalho foi avaliado o efeito de cinco concentrações do BTEX, antes e após o processo de biodegradação por microrganismos selecionados de efluente bruto de refinaria de petróleo, sobre os sistemas testes de Allium cepa e cultura de células HTC. A comparação do total de aberrações cromossômicas e nucleares (alterações genotóxicas) realizada entre as concentrações de BTEX não biodegradadas e biodegradadas revelou uma diminuição significativa destas anormalidades para as concentrações BTEX 1, 2 e 4. As alterações mutagênicas, avaliadas pelo teste do micronúcleo (MN) em células meristemáticas, foram significativas para as concentrações BTEX 1, 2, 4 e 5 não biodegradadas. Ao se comparar as freqüências de MN entre a concentração preparada de BTEX com a sua respectiva concentração biodegradada, observouse uma redução significativa para as biodegradadas 1 e 4. Não houve indução significativa de MN para as células F1 para nenhuma das concentrações testadas. O BTEX não provocou nenhum efeito citotóxico significativo para este organismo. O teste do MN realizado com células HTC revelou que o BTEX foi mutagênico... / Oil products as benzene, toluene, ethylbenzene and xylene (BTEX) are monoaromatics hydrocarbons widely used as solvents and raw materials in several industrial processes, and are present in large quantities in fossil fuels. By its widespread use and high solubility in water, the BTEX is featuring a common pollutant of water, particularly groundwater. Implementation of the bioremediation seems to be a promising method for treatment of contaminated water with this mixture. Cytogenetic tests are appropriate and efficient to identify and assess the harmful effects of substances on the organisms in their several concentrations and time of exposure. This study evaluated the effect of five BTEX concentrations, before and after the biodegradation process by microorganisms selected from raw sewage from oil refinery using the test systems of Allium cepa and HTC cells. The comparison of total chromosomal and nuclear aberrations (genotoxic alterations) performed between BTEX concentrations bioremedied and not bioremedied showed a significant decrease of these abnormalities for BTEX concentrations 1, 2 and 4. Mutagenic alterations, evaluated by the micronucleus test (MN) in meristematic cells, were significant to the BTEX concentrations 1, 2, 4 and 5 not bioremedied. When comparing the frequencies of MN between the prepared concentration of BTEX with its concentration bioremedied, there was a significant reduction for the bioremedied 1 and 4. There was no significant induction of MN to cells F1 to any of the concentrations tested. The BTEX did not cause any significant cytotoxic effect to those organisms. The test performed with micronucleus of the HTC cells revealed that the BTEX was mutagenic, but only to the highest concentration, both before and after the biodegradation. Genotoxic damage as measured by the comet assay showed that BTEX was genotoxic for all concentrations not bioremedied, tested... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-24Bitstream added on 2014-06-13T18:09:02Z : No. of bitstreams: 1 roberto_mm_me_rcla.pdf: 1290163 bytes, checksum: 2bf481282d3a32eaf836c30a66b3c353 (MD5) / O consumo de produtos apícolas tem atraído o interesse da população devido à prática de medicinas naturais. As abelhas coletam substâncias e fragmentos de origem vegetal para produzirem a própolis, que é utilizada para selar e proteger a colméia contra invasões de microrganismos patogênicos. O homem utiliza a própolis desde a antiguidade e para fins diversos. Por meio de extensivos estudos, hoje se sabe que existem tipos específicos de própolis, que variam entre as regiões geográficas e a fonte botânica e, portanto, apresentam composições químicas também específicas. A própolis do tipo verde, que ganhou, recentemente, destaque internacional pela sua alta e variada constituição de flavonóides, tem como fonte botânica a planta Baccharis dracunculifolia (Asteraceae), popularmente conhecida como alecrim-do-campo. Atualmente, extratos etanólicos de produtos naturais, como da própolis verde, vêm se destacando pelas suas propriedades terapêuticas. Neste trabalho foi avaliado o potencial citotóxico, genotóxico e mutagênico, mas, principalmente, foi verificada a possível atividade anticitotóxica, antigenotóxica e antimutagênica destes extratos etanólicos, sobre sistemas-teste de Allium cepa (cebola) e células de hepatoma de rato (HTC), mantidas em cultura. A verificação do índice mitótico, de células meristemáticas de A. cepa, não serviu de parâmetro para avaliar citotoxicidade e anticitotoxicidade. As análises da freqüência de aberrações cromossômicas e da freqüência de micronúcleos (MN) revelaram que, ambos os extratos, não foram genotóxicos e nem mutagênicos para as células meristemáticas de A. cepa. Também não houve indução significativa de MN para as células F1 de cebola e para as células HTC mantidas em cultura. O ensaio do cometa, realizado com as células HTC, indicou a ausência de ação genotóxica para os extratos testados... / Consumption of apicultural products has attracted the interest of the population due to the practice of natural medicine. Bees collect substances and fragments of vegetal origin to produce propolis, which is used to seal and protect the beehive against pathogenic microorganisms. Human beings use the propolis since the antiquity and for several purposes. By extensive studies, nowadays it is known that there are specific types of propolis, which vary between geographic regions and botanical sources and, therefore, present specific chemical compositions. The Brazilian green propolis, which has recently received international prominence, has as botanical source the plant Braccharis dracunculifolia (Asteraceae), popularly known as alecrim-do-campo. Currently, ethanolic extracts of natural products, eg made with green propolis, have been highlighted for their therapeutical properties. In the present work, the cytotoxic, genotoxic and mutagenic potentials were evaluated, but, mainly, it was verified the possible anticytotoxic, antigenotoxic and antimutagenic activities of these ethanolic extracts in the Allium cepa (onion) test system and in HTC (hepatoma tissue culture) cells maintained in culture. The verification of the mitotic index, of meristematics cells of A. cepa, did not serve as parameter to evaluate cytotoxicity and anticytotoxicity. The analyses of chromosomal aberrations (AC) and micronuclei (MN) frequencies revealed that, both extracts, were not genotoxic nor mutagenic for meristematics cells of A. cepa. Also, there was no significant induction of MN in onion F1 cells and HTC cells. The comet assay, carried out with HTC cells, indicated absence of genotoxic action for the extracts tested in this work. The pre-treatment carried out with cells of A. cepa showed that the extracts were capable to reduce the induction of cytogenetics damages promoted by Methyl Methane Sulfonate (MMS)... (Complete abstract click electronic access below)

A doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC) é uma doença inflamatória com participação de macrófagos, neutrófilos e linfócitos CD8, associada a estímulos oxidantes diretamente nas estruturas pulmonares, causada mais comumente pelo tabagismo. Recentemente foi demonstrado que o teste de caminhada dos seis minutos (TC6) é capaz de aumentar a inflamação e gerar o aumento de espécies reativas de oxigênio. O presente estudo teve como objetivo avaliar os níveis de dano e reparo de DNA em portadores de DPOC, quando submetidos ao TC6. Para avaliar o dano de DNA, amostras de sangue periférico foram coletadas antes e imediatamente após o TC6. Para avaliar a capacidade de reparo, foi analisada uma amostra coletada 48 horas após o TC6. Todas as amostras foram processadas pela técnica do cometa. Vinte e sete pacientes portadores de DPOC foram avaliados, sendo 59% homens. A média de idade foi de 64,7 ± 8,4 anos. A média do VEF1 foi de 40,3% ± 18,4% do previsto, com relação média de VEF1/CVF de 52,5% ± 11,9%. Todos fumaram em média 36,7 ± 17,0 anos, uma média de 48,1 ± 37,5 maços/ano. As médias das variáveis obtidas no início e no final do TC6 foram: SpO2 (92,0 ± 4,5 vs. 91,4 ± 4,6), percepção da dispnéia pela escala de BORG (1,2 ± 1,0 vs. 2,4 ± 1,7) e a distância percorrida foi em média de 380,1± 84,4 m. As taxas médias de dano de DNA antes do TC6 (27,9 ± 19,2) e imediatamente após (29,6±29,6) não apresentaram diferenças significativas (p=0,904). A análise realizada 48 horas após o TC6 demonstrou uma redução não significativa deste dano (18,3 ± 13,0, p=0,099). Conclui-se neste estudo que o esforço físico realizado durante o TC6 não provoca aumento imediato nas taxas de dano de DNA, nem estimula os mecanismos de reparo do DNA em portadores de DPOC. / Chronic obstructive pulmonary disease is an inflammatory disease in which macrophages, neutrophils and CD8 T lymphocytes play an important role. It is associated with direct oxidant stimuli of lung structures, which are most frequently triggered by smoking. A recent study showed that the 6-minute walk test (6MWT) increases inflammation and reactive oxygen species. This study evaluated DNA damage and repair in patients with COPD that took the 6MWT. To evaluate DNA damage, peripheral blood samples were collected before and immediately after 6MWT. To evaluate repair, a sample was collected 48 hours after the 6MWT. All samples were prepared for the comet assay. Twenty-seven patients with COPD were evaluated; 59% were men and mean age was 64.7 ± 8.4. Mean FEV1 was 40.3% ± 18.4% of predicted value, and mean FEV1/FVC was 52.5% ± 11.9%. Mean values before and after 6MWT were: SpO2 = 92.0 ± 4.5 vs. 91.4 ± 4.6; Borg score for dyspnea = 1.2 ± 1.0 vs. 2.4 ± 1.7; and mean distance walked – 380.1 ± 84.4 m. Mean DNA damage values before (27.9 ± 19.2) and immediately after (29.6 ± 29.6) 6MWT were not significantly different (p = 0.904). The analysis performed 48 hours after 6MWT showed a nonsignificant reduction of damage (18.3 ± 13.0; p = 0.099). Conclusions The physical effort during 6MWT did not cause an immediate increase in DNA damage, and did not stimulate DNA repair mechanisms in patients with COPD.