The saskatoon (Amelanchier Alnifolia Nutt.) is a woody shrub from the rose family. One of the main challenges to its culture is Entomosporium leaf and berry spot (ELBS) disease, which is caused by a hemibiothrophic fungus Entomosporium mespili (Sacc.). Due to the limited growth of the pathogen in vitro, we tested several culture media, and potato dextrose agar remained the best tested medium to grow the pathogen in vitro. E. mespili showed high variations in the morphology and sporulation of its cultures on PDA, which were not related to the geographic origin of the tested isolates. The amount of spores produced by the fungus in vitro was significantly high compared to its sporulation in nature. The use of liquid media such as potato broth was essential to produce enough mycelium for other experiments. The pathogen produced big spherical balls of mycelium where the nutrient and the aeration were sufficient. In absence of previous protocols to extract DNA from this pathogen, we tested several methods and determined a mixture of CTAB and SDS to be best for extraction of good quality DNA from E. mespili grown in vitro. Lyophilisation of E. mespili’s tissue and the addition of proteinase K to the extraction buffer reduced DNA degradation. To avoid the co-precipitation of polysaccharides with DNA, we used a high concentration of salt to precipitate polysaccharides, followed by a separation by phenol:chloroform:isoamyl (25:24:1). Molecular markers including Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) and Amplified Fragments Length Polymorphism (AFLP) revealed a high level of polymorphism in E. mespili. The artificial inoculation gave different results from natural infection, with a high level of diversity both on detached leaves and seedlings. According to our tests, growing E. mespili in vitro reduced its pathogenicity.

The saskatoon (Amelanchier Alnifolia Nutt.) is a woody shrub from the rose family. One of the main challenges to its culture is Entomosporium leaf and berry spot (ELBS) disease, which is caused by a hemibiothrophic fungus Entomosporium mespili (Sacc.). Due to the limited growth of the pathogen in vitro, we tested several culture media, and potato dextrose agar remained the best tested medium to grow the pathogen in vitro. E. mespili showed high variations in the morphology and sporulation of its cultures on PDA, which were not related to the geographic origin of the tested isolates. The amount of spores produced by the fungus in vitro was significantly high compared to its sporulation in nature. The use of liquid media such as potato broth was essential to produce enough mycelium for other experiments. The pathogen produced big spherical balls of mycelium where the nutrient and the aeration were sufficient. In absence of previous protocols to extract DNA from this pathogen, we tested several methods and determined a mixture of CTAB and SDS to be best for extraction of good quality DNA from E. mespili grown in vitro. Lyophilisation of E. mespili’s tissue and the addition of proteinase K to the extraction buffer reduced DNA degradation. To avoid the co-precipitation of polysaccharides with DNA, we used a high concentration of salt to precipitate polysaccharides, followed by a separation by phenol:chloroform:isoamyl (25:24:1). Molecular markers including Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) and Amplified Fragments Length Polymorphism (AFLP) revealed a high level of polymorphism in E. mespili. The artificial inoculation gave different results from natural infection, with a high level of diversity both on detached leaves and seedlings. According to our tests, growing E. mespili in vitro reduced its pathogenicity.

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV15MA163.pdf: 1590700 bytes, checksum: d023cd9a7880063819cd33b9dc5657af (MD5) Previous issue date: 2015-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The pear crop production is an alternative for diversification of temperate fruit production in southern Brazil. The fabraea leaf spot, caused by the fungus Entomosporium mespili, is a major disease of pear. This disease causes lesions on leaves, fruits and and sometimes cankers are formed. The objective of this study was to determine the influence of environmental factors temperature and wetness duration on germination of conidial, infection and colonization of E. mespili. Four experiments were carried out as follows: (1) assessment of conidial germination of E. mespili in vitro at temperatures of 5, 10, 15, 20, 25 and 30 °C and incubation times of 0, 2, 4, 6, 8, 12, 24 and 48 hours; (2) effect of temperatures of 5, 10, 15, 20, 25 and 30 °C in the development of fabraea leaf spot in detached leaves of pear in humid chambers; (3) effect of temperature of 20° C by exposure for 24 h, in infection of E. mespili conidia on detached leaves of pear, and colonization after at temperatures of 5, 10, 15, 20, 25 and 30 °C in a humid chamber; and (4) effect of wetness period of 0, 6, 12, 24 and 48 hours after inoculation in severity of fabraea leaf spot on young pear trees in phytotron at 20 °C and 65% relative humidity. Germination was assessed by counting the spores germinated and non-germinated to obtainment of surface response. In experiments 2, 3 and 4 were used leaves and young trees of Rocha pear variety. The temperature effect on the infection and colonization in each treatment was evaluated by determining the latent period, the number of lesions and sporulation at 14 days after inoculation. The severity on leaves was measured at 4, 7, 11, 14, 17 and 21 days after inoculation. The germination conidial data allowed fitting to Beta-generalized (temperature) and Monomolecular (incubation) models. The conditions for germination were 12, 6, and 8 hours wetness in 10, 20 and 25ºC, respectively. Incubation period was 5 days in temperatures of 15, 20 and 25°C and increased to 7 days in 10°C. The sporulation began 9 days after inoculation at temperatures of 20 to 25°C. The latent period was 10 days at 20°C. There were no disease symptoms at temperatures of 5 to 30°C. The temperature during infection interfered on the final numbers of lesions. The temperature of from 20°C provides a greater number of lesions/leaf then temperatures of 25 and 15°C. The disease did not occur in the absence of leaf wetness. The increase of leaf wetness duration was proportional to severity increase. The duration of leaf wetness period did not influence the incubation period. The beginning of symptoms was 4-5 days in all treatments. Maximum observed severity was around 4% for the periods of 24 and 48 hours of leaf wetness. The disease growth in monocycle was fitted to the linear model. The coefficients of determination were above 0.90 for all treatments / A cultura da pereira é uma alternativa para a diversificação da fruticultura temperada na região Sul do Brasil. Dentre os problemas que afetam a expansão da cultura destaca-se a entomosporiose, doença causada pelo fungo Entomosporium mespili. Essa doença provoca lesões em folhas, frutos e eventualmente pode formar cancros. O objetivo deste trabalho foi determinar a influência dos fatores ambientais temperatura e período de molhamento na germinação de conídios, infecção e colonização de E. mespili. Quatro experimentos foram realizados, sendo: (1) avaliação da germinação de conídios de E. mespili em meio de cultura ágar-água, nas temperaturas de 5, 10, 15, 20, 25 e 30°C e 0, 2, 4, 6, 8, 12, 24 e 48 horas de incubação; (2) efeito das temperaturas de 5, 10, 15, 20, 25 e 30°C no desenvolvimento da entomosporiose em folhas destacadas de pereira em câmaras úmidas; (3) efeito da temperatura de 20°C por 24 horas, na infecção de conídios de E. mespili em folhas destacadas de pereira e posterior colonização nas temperaturas de 5, 10, 15, 20, 25 e 30°C, em câmara úmida; e (4) efeito dos períodos de molhamento foliar de 0, 6, 12, 24 e 48 horas na severidade da entomosporiose em mudas de pereira mantidas em fitotron à 20°C. As avaliações de germinação foram realizadas contando-se o número de conídios germinados e não germinados para obtenção da superfície resposta. Nos experimentos 2, 3 e 4 foram utilizadas folhas e mudas de pereira Rocha . O efeito da temperatura na infecção e colonização foi avaliado em cada tratamento através da determinação do período latente, do número de lesões e da esporulação, 14 dias após a inoculação. A severidade das folhas foi avaliada aos 4, 7, 11, 14, 17 e 21 dias após a inoculação. Os dados de germinação de conídios permitiram a obtenção de uma superfície resposta com base na multiplicação dos modelos Beta-generalizado (temperatura) e Monomolecular (incubação). As condições ótimas para germinação dos conídios foram de 12, 6 e 8h de incubação nas temperaturas de 10, 20 e 25ºC, respectivamente. O período de incubação foi de 5 dias para as temperaturas de 15, 20 e 25°C e na temperatura de 10°C aumentou para 7 dias. A esporulação teve início 9 dias após a inoculação nas temperaturas de 20 e 25°C. O período latente foi de 10 dias na temperatura de 20°C. Nas temperaturas de 5 e 30°C não houve desenvolvimento de sintomas da doença. A temperatura durante a infecção teve efeito sobre o número máximo de lesões. A temperatura de 20°C proporcionou maior número de lesões/folha, seguida das temperaturas de 25 e 15°C. O aumento da duração do período de molhamento foliar resultou em aumento proporcional da severidade. A doença não ocorreu na ausência de molhamento foliar. A duração do período de molhamento foliar não influenciou o período de incubação, sendo que o início do aparecimento de sintomas foi de 4-5 dias em todos os tratamentos avaliados. A severidade máxima observada foi em torno de 4% para os períodos de molhamento foliar de 24 e 48h. O crescimento da doença no monociclo foi ajustado ao modelo linear. Os coeficientes de determinação da regressão linear da severidade apresentaram valores acima de 0,90

Made available in DSpace on 2016-12-06T17:42:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCS15DA024.pdf: 1709565 bytes, checksum: 102e8c7963b170e39ba16b5decf01861 (MD5) Previous issue date: 2015-03-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The Entomosporium leaf spot is the most importante leaf spot and fruit spot in the culture of pear and cultivats which data are available, are all susceptible. In these cultivars, occurs defoliation in late sumer, resulting in weak trees with significant reduction in flowering buds. Whereas in Brazil there are no reports on the anticipation of leaf drop caused by Entomosporium leaf spot and the influence on the physiology of the plant. The objective of this study was to evaluate the physiology and production according to chemical defoliation and Entomosporium leaf spot. Two experiments were conducted; 1) the experiments were conducted during the 2011/12, 2012/13 and 2013/14 season, i a comercial pear orchard Mussato Company, in Vacaria city, Rio Grande do Sul state. The European pear cultivars Packham s Triumph, Abate Fetel and William s grafted on quince Adam were subjected to the treatments (dose of active ingrediente): T1 AVG aminoethoxyvinylglycine (Retain®, 15%), at 0.06 g/L¯¹; T2: ethephon (Ethrel®, 24%) at 1 g/L¯¹; T3: calcium chloride (calcium chloride, 24%) at 24 g/L¯¹; T$: control withoutapplication. The treatments were sprayed in 03/19/2012, 03/14/2013 and 03/18/2014, on average 45 days after the harvest. The variables analyzed were: percentage of leaf fall, bud quality (mass, diametr, flower/vegetative, presence of necrosis, presence of dry buds), budding return (phenology, number of flower clusters, number of flowers, fruit set) and production (number of fruits, average fruit weight, fruit diameter, number of seeds/fruit). The experimental design used was randomized block withfour replicates per treatment, each replicate consisting og three plants. 2) The experiments were conducted in the field, in a comercial orchard during the 2013/13 and 2013/14 seasons, in the Vacaria city, Rio Grande do Sul stte. The Entomosporium leaf spot severity and natural leaf dall (occurred in the autumm) datawere recorded in March and april , every two weeks, totaling five evaluations. Te disease severity was evaluated with the aid of diagrammatic scale and the values obtained integrated in ttime, processed in the área below the entomosporium leaf spot progress curve (AACPE). The data were adjusted to mono-molecular models, logistic and Gompertz. The vegetative parameters were evaluated during the dormant period: trunk diameter, plant height, canopy volume, branches fertility, and from the two years of evaluation data was obtained the incremente of each variable. The results of the dirst experimente demonstrated in the pear trees treated with ethephon the leaf fall occurred earlier compared to other treatments and the control trees. As expected the AVG showed a similar effect the control trees, because of the inhibitory action of ethylene syntheses, where the primary function is to delay senescence of tissue. Calcium chloride caused burns in the plant rissue and all tested seasons. No significant diferences were found in the bud quality, budding and production return. There were no ndesirable effects on the physiological parameters with the leaf fall induced by chemical products as a management technique. Among the tested products ethephon showed potential to induce leaf fall, no presenting undesirable effect on teh physiology of cultivars, however, further experiments must be carried out a diferente times to better evaluate the product. For the second experimente it was found that all cultivars are susceptible to entomosporiose. About the resistance of the studied cultivars, it was determined that all are susceptible to Entomosporium leaf spot leaf spot. Based on AACPE, the first crop showed significant diferences among cultivars, but in the second season did not show statistical difference. In 2012/13 sdeason, Gompertz was the model that best has adapted to the progress curve of the trhee cultivars. In the 2013/14 season the cv. Packam s Triumoph had its best adjustment to the Gompertz model, Abate Fetel to logistical model and William s ti the mono-molecular model. In the linear regression analyzes, the coefficients of tetermination (R2) obtained for yhr Entomosporium leaf spot severity versus premature leaf fall were sigificant for all cultivars and growth seasons, attesting the interference of the athogen in the leaffall in both seasons. There is a negative correlaton between the leaf, the fertility rate and plant height, indicating that the larger leaf fall, the lower will be the development of reproductive structures and smaller will be the height of these plants. It was concluded that the severity of Entomosporium leaf spot contributes to oncreased levels of prwmature leaf fall with egative correlation with the vegetative variables, indicating that the larger leaf fall, the lower will be the developement of reproductives structures and smaller will be the height of these plants / A entomosporiose é a mancha foliar e de frutos mais importante na cultura da pereira e para as cultivares que existem dados disponíveis, são todas suscetíveis. Nestas cultivares, ocorre o desfolhamento no final do verão, resultando em árvores fracas com significativa redução nas gemas floríferas. Considerando que no Brasil não existem relatos sobre a antecipação da queda de folhas provocada pela entomosporiose e a influencia sobre a fisiologia da planta, o objetivo deste trabalho foi avaliar a fisiologia e a produção de pereira europeia em função da desfolha química e entomosporiose. Foram realizados dois experimentos; 1) Os experimentos foram conduzidos a campo nas safras agrícolas de 2011/12, 2012/13 e 2013/14, em pomar comercial da Empresa Mussato, localizado no município de Vacaria, estado do Rio Grande do Sul. Plantas de pereira europeia das cultivares Packham s Triumph Abate Fetel e William s enxertadas sobre marmeleiro Adams foram submetidas a tratamentos com diferentes desfolhantes (dose do ingrediente ativo) sendo, T1: AVG - aminoethoxyvinylglycine, (Retain®, 15%), na dose 0,06 g/L-1; T2: etefon (Ethrel®, 24%), na dose 1 g/L-1; T3: cloreto de cálcio (cloreto de cálcio, 24%) na dose de 24 g/L-1; T4: testemunha sem nenhuma aplicação. Os tratamentos foram aplicados em 19/03/2012, 14/03/2013 e 18/03/2014, em média 45 dias após a colheita. As variáveis analisadas foram: percentual de desfolha, qualidade de gemas (massa, diâmetro, florífera/vegetativa, presença de necrose, presença de gema seca), retorno de brotação (fenologia, número de cachopas, número de flores, percentual de fixação), e produção (número de frutos, peso médio, diâmetro, número de sementes). O delineamento experimental utilizado foi em blocos casualizados, com quatro repetições por tratamento, sendo cada repetição constituída por três plantas. 2) Os experimentos foram conduzidos a campo, em pomar comercial, nas safras de 2012/13 e 2013/14, no município de Vacaria, RS. Os dados da severidade da entomosporiose e desfolha natural ocorrente no início do outono foram registrados no mês de março e abril, quinzenalmente, totalizando cinco avaliações. A severidade foi avaliada com o auxílio de escala diagramática e os valores obtidos integralizados no tempo, transformados em área abaixo da curva de progresso da entomosporiose (AACPE). Os dados foram ajustados aos modelos monomolecular, logístico e de Gompertz. Como parâmetros vegeto-produtivos foram avaliados durante o período de repouso vegetativo: diâmetro do tronco, altura de planta, volume de copa, fertilidade de ramos e a partir dos dados de dois anos de avaliação, obteve-se incremento de cada variável. O resultado do primeiro experimento demostraram que plantas tratadas com etefon desfolharam mais rapidamente em relação aos demais tratamentos e a testemunha. Como esperado o AVG apresentou efeito análogo à testemunha, pois apresentação ação inibidora da síntese de etileno, onde a principal função é atrasar a senescência do tecido. O cloreto de cálcio causou queima no tecido vegetal e em todas as safras avaliadas. Não foram verificadas diferenças significativas na qualidade de gema, retorno de brotação e produção. Não foram observados efeitos indesejáveis sobre os parâmetros fisiológicos da planta quanto à utilização da desfolha como técnica de manejo. Dentre os produtos testados, o etefon foi o que apresentou potencial para utilização na desfolha química, pois não apresentou efeito indesejável sobre a fisiologia das cultivares avaliadas, no entanto, novos experimentos devem ser realizados em diferentes épocas para melhor avaliação do produto. Para o segundo experimento foi possível constatar que todas as cultivares apresentam suscetibilidade à entomosporiose. Com base na AACPE, na primeira safra houve diferença significativa entre as cultivares, na segunda safra esta diferença estatística não ocorre. Na safra 2012/13, Gompertz, foi o modelo que melhor se adequou a curva de progresso das três cultivares avaliadas. Na safra 2013/14 a cv. Packham s Triumph teve seu melhor ajuste ao modelo Gompertz, Abate Fetel ao logístico e William´s ao monomolecular. Nas análises de regressão linear os coeficientes de determinação (R2) obtidos para a severidade da entomosporiose versus desfolha outonal foram significativos para todas as cultivares e safras avaliadas, confirmando a interferência do patógeno na queda das folhas nas duas safras avaliadas. Há correlação negativa entre a desfolha, o índice de fertilidade e a altura de planta, indicando que quanto maior a desfolha, menor será o desenvolvimento de estruturas reprodutivas e menor será o porte destas plantas. Conclui-se que a severidade da entomosporiose contribui para o aumento dos níveis de desfolha outonal com correlação negativa com as variáveis vegeto-produtiva, indicando que quanto maior a desfolha, menor será o desenvolvimento de estruturas reprodutivas e menor será o porte destas plantas

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV13MA143.pdf: 1086033 bytes, checksum: 10abf46cb5297d5bc9563adb60e9d49b (MD5) Previous issue date: 2013-09-09 / The Fabraea Leaf Spot (ELS) is caused by the fungus Fabraea maculata (anamorph: Entomosporium mespili) and it is the main disease present in pear orchards in Brazil. The pathogen E. mespili infect more than 50 species of plants most from Rosaceae family like pear, quince and apple. The ELS lesions can be observed one week after beginning of infection and visible on both sides of the leaves as small reddish purple lesions. Later, the lesions becomes dark brown, and may have chlorotic halo. Leaves severely infected can show necrotic and yellow aspect and may drop prematurely causing early plant defoliation. The aim of the study was to evaluate the ELS behavior on European pear cultivars (Rocha and Santa Maria) under quince rootstocks (EMA and Adams) in response of fungicides application under edaclimatic conditions of Santa Catarina upland, during the 2011/2012 and 2012/2013 crop seasons. The combinations cultivars/rootstocks were Methyl tiophanate, Pyraclostrobin+Metiram, Tebuconazole, Trifloxystrobin, Mancozeb, Propineb and Chlorothalonil fungicides according to fungicide residual effect. The incidence and severity were quantified weekly from the first symptoms appearance in 100 randomly leaves distributed in four medium-height branches per plant on each eight replications per treatment. The incidence of the ELS was defined as the number of leaves with ELS symptoms divided by the total number of leaves evaluated. The ELS severity was assigned to an infection class based on the following scale: class 0: without lesions; Class 1: 1-5 lesions; class 2: 6 - 25 lesions; class 3: 26-50 lesions, Class 4: 51-75 lesions and class 5: more than 75 lesions. The disease progress curves were constructed and the epidemics were compared in both growing seasons evaluated, using four epidemiological measures: the beginning of symptom appearance (BSA), the time to reach the maximum disease incidence and severity (TRMDI and TRMDS), the maximum value of disease incidence and severity (Imax and Smax) and the area under the incidence and severity disease progress curve (AUDIPC and AUDSPC). All combinations of cultivars and rootstocks were susceptible to E. mespili.The fungicides Methyl tiophanate and Mancozeb showed high and significant efficiency of disease control in all combinations evaluated when BSA, Imax and AUDSPC was taken into account as differentiated variable in the edafoclimat conditions of Southern Brazil during the 2011/2012 and 2012/2013 crop season / A entomosporiose causada pelo fungo Fabraea maculata (anamorfo: Entomosporium mespili) é a principal doença foliar na cultura da pereira presente no Brasil. O patógeno E. mespili causa infecções em mais de 50 espécies de plantas, sendo a maioria da família Rosaceae, como a pereira, o marmeleiro e a macieira. As lesões causadas pela entomosporiose podem ser observadas uma semana após o início da infecção. Inicialmente, as lesões são visíveis em ambas às faces das folhas, através de lesões pequenas, avermelhadas à púrpuras, que posteriormente tornam-se marrom-escuras, podendo apresentar halo clorótico. Nas folhas severamente infectadas apresentam aspecto necrótico, amarelecem e caem, causando a desfolha precoce em planta. O objetivo deste trabalho foi avaliar a intensidade da entomosporiose em combinações de cultivares copa de pereira europeia (Rocha e Santa Maria) sobre diferentes portaenxertos de marmeleiro (EMA e Adams) em resposta a aplicação de fungicidas durante os ciclos de crescimento 2011/2012 e 2012/2013 no Planalto Catarinense. As diferentes combinações cultivar/portaenxertos foram submetidas aos tratamentos 1: Controle; 2: Tiofanato metílico; 3: Piraclostrobina+Metiram; 4: Tebuconazole; 5: Trifloxistrobina; 6: Mancozeb; 7: Propineb e 8: Clorotalonil. As pulverizações foram iniciadas em 30/09 de cada ciclo agrícola. A incidência e a severidade foram avaliadas semanalmente após o início do aparecimento dos sintomas em 100 folhas aleatórias distribuídas em 4 ramos medianos por planta. A incidência foi calculada pela percentagem das folhas com pelo menos uma lesão em relação ao número total de folhas avaliadas e a severidade através de classes de infecção, sendo: classe 0: sem lesões; classe 1: 1-5 lesões; classe 2: 6-25 lesões; classe 3: 26-50 lesões; classe 4: 51-75 lesões e classe 5: mais de 75 lesões. Com os dados obtidos foram confeccionadas as curvas de progresso da doença e as epidemias comparadas em relação a: a) início do aparecimento dos sintomas (IAS); b) tempo para atingir a máxima incidência e severidade da doença (TAMID e TAMSD); c) valor máximo de incidência e severidade (Imax e Smax) e d) área abaixo da curva do progresso da incidência e da severidade da doença (AACPID e AACPSD). Todas as combinações de cultivares e portaenxertos foram suscetíveis a E. mespili. Em todas as combinações avaliadas, os fungicidas Tiofanato metílico e Mancozeb demonstraram maior eficiência de controle da doença sobre as variáveis IAS, Imax e AACPSD nas condições edafoclimáticas do Planalto Catarinense durante os ciclos de crescimento 2011/2012 e 2012/2013

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV12MA066.pdf: 926088 bytes, checksum: b36dd2d4d5cb4340b3553bb5206c6bb6 (MD5) Previous issue date: 2012-02-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study aimed to evaluate the temporal dynamics of Entomosporiose leaf spot in diferente combinatos of European pear cultivars (Rocha, Abate fetel and Santa Maria) on diferente rootstocks (Quince A and Quince Adams) and evaluate the etiology and development of necrosis in flower bud in diferente combinations European pear (Clapp s Favorite, Packham s Triumph, Conference, William s, Rocha, Abate, Fetel, Santa Maria, Decana) European pear cultivars on diferente rootstocks (Quince A, Quince C and Quince Adams) at conditions of the Santa atarina state. In Entomosporiose the incidence and severity were assessed weekly to onset of symptoms in 100 random leaves, distributed in 4 medium branches per plant. The incidence was calculated by the percentage of leaves with at least one lesion relative to the total number of leaves evaluated and severity of infection classes. The experiments were consucted in comercial orchards in the municipalities of Fraiburgo and Urupema/Santa Catarine State, during the growing seasons 2009/10 and 2010/11. During the period from June to September of each growing season, 10 buds of each pear combination with rootstock at the phenological stages of vegetative rest and opening the scales, were evaluated for the presence of necrosis. The buds were incubated in BDA and King B culture media for fungi and bactéria identification, respectively. The fungal identification was performed by visualization of reproductive structures and identification Keys. For bacterial identification, purê cultures have been featured by LOPAT as described by Shaad (2001). The necrosis presence or not were correlated with pears combinations phenological stage and causal agente of necrosis. The Entomosporiose incidence and severity date were used to plotted the progress curves of the disease and the epidemix compared with respect to: a) the beginning of symptoms appearance (BSA); b) time to reach maximum incidence and severity of disease (TRMDI and TRMDS), c) masimum incidence and severity (Smax and Imax) and d) área under teh cuirve of progress in the incidence and severity of disease (AUCPID and AUCPSD). The necrotic buds showed the presence of Pseunomonas syringae and Xanthomonas spp bactéria and there is no significant difference of the correlation of buds necorsis occurrences with cultivars, rootstock and phonological stage evaluated. The identified bactéria were involved, in necrosis of flowers buds of the European pear as a factor inducing seconfary. All combinations of cultivars with rootstocks were susceptible to E. mespili, and the higher intensity of disease occurred in the Santa Maria cultivar, regardless of the rootstock used. There were significant diferences in the Entomosporiose incidence and severity progress curves of the cultivars Rocha, Abate Fetel and Santa Maria / Este trabalho objetivou avaliar a dinâmica temporal da Entomosporiose em diferentes combinações de cultivares copa pereira europeia (Rocha, Abate Fetel e Santa Maria) sobre diferentes portaenxertos (Marmelo A e Marmelo Adams) e avaliar a etiologia e a evolução da necrose de gemas florais em combinações de cultivares copa (Clapp´sFavorite, Packham´sTriumph, Conference, William s, Rocha, Abate Fetel, Santa Maria, Decana) de pereira europeia sobre diferentes portaenxertos (Marmelo A, Marmelo C e Marmelo Adams) nas condições edafoclimáticas do estado de Santa Catarina. Na Entomosporiose a incidência e a severidade foram avaliadas semanalmente ao surgimento dos primeiros sintomas em 100 folhas aleatórias, distribuídas em 4 ramos medianos por planta. A incidência foi calculada pela percentagem das folhas com pelo menos uma lesão em relação ao número total de folhas avaliadas e a severidade através de classes de infecção. Os experimentos de necrose foram conduzidos em pomares comerciais nos municípios de Fraiburgo e Urupema durante as safras 2009/10 e 2010/11. No período de junho a setembro foram coletas 10 gemas de cada combinação e área experimental, nos estádios fenológicos de repouso vegetativo e abertura das escamas, e avaliadas quanto a presença de necrose. As gemas foram incubadas em meios de cultura específico para fungos (BDA) e para bactérias (B de King). A identificação fúngica foi realizada através da visualização das estruturas reprodutivas e chaves de identificação. Para identificação bacteriana, culturas puras foram caraterizadas através do LOPAT segundo a descrição de Shaad (2001). A presença ou não de necrose de gemas foram correlacionadas com as combinações de cultivares e portaenxertos, estádio fenológicos e agente causal. Com os dados de incidência e severidade da Entomosporiose foram plotadas curvas de progresso da doença e as epidemias comparadas em relação a: a) início do aparecimento dos sintomas (IAS); b) tempo para atingir a máxima incidência e severidade da doença (TAMID e TAMSD); c) valor máximo de incidência e severidade (Imax e Smax) e d) área abaixo da curva do progresso da incidência e da severidade da doença (AACPID e AACPSD). Nas gemas necrosadas, verificou-se a presença das bactérias Pseudomonas syringae do gênero e Xanthomonas e não houve diferenças significativas na ocorrência de necrose das gemas tanto nas combinações de cultivares e portaenxerto quanto nos estádios fenológicos avaliados. As bactérias identificadas estão envolvidas na necrose de gemas florais de pereira europeia como um fator indutor secundário. Todas as combinações de cultivares e portaenxertos foram suscetíveis a Entomosporium mespili e a maior intensidade de doença ocorreu na cultivar Santa Maria, independente do portaenxerto utilizado. Houve diferença significativa nas curvas de progresso da doença tanto da incidência quanto da severidade da Entomosporiose nas cultivares Rocha, Abate Fetel e Santa Maria