A dengue é uma doença infecciosa de transmitida pela picada de mosquitos do gênero Aedes. O vírus da dengue (DENV), pertencente ao gênero Flavivirus, família Flaviviridae, é atualmente um importante problema de saúde pública em todo o mundo. São reconhecidos quatro sorotipos antigenicamente distintos (DENV-1, -2, -3 e -4). A doença causada por qualquer um dos sorotipos cursa de forma assintomática ou com quadro clínico que varia desde uma febre indiferenciada e autolimitada, passando pela febre clássica da dengue (FD) até quadros graves de febre hemorrágica da dengue (DHF). O diagnóstico clínico é difícil de ser realizado principalmente na fase aguda da doença em que os sintomas são muito similares aos de outras infecções febris agudas, ficando a cargo do laboratório o diagnóstico definitivo. Os métodos sorológicos para detecção de anticorpos IgM/IgG são os mais amplamente utilizados, mas inadequados para diagnóstico precoce uma vez que detectam anticorpos a partir do sexto dia do início dos sintomas. Os métodos moleculares estão sendo cada vez mais utilizados para o diagnóstico precoce por serem mais rápidos e sensíveis que a sorologia e o isolamento viral. Neste estudo comparamos a sensibilidade de uma RT-PCR em tempo real gênero específica com um ELISA para detecção da proteína NS1 comercialmente disponível analisando amostras de soro de pacientes com dengue. Também foram desenvolvidos dois protocolos de RT-PCR em tempo real para identificação do sorotipo viral, uma contendo primers para extremidade 5 do genoma viral e outra contendo primers para a região codificadora da proteína NS5. A RT-PCR em tempo real gênero específica mostrou-se mais sensível que o ELISA, principalmente nas amostras que apresentavam baixa carga viral. A RT-PCR em tempo real contendo os primers para a extremidade 5 apresentou uma sensibilidade baixa quando comparada com a RT-PCR genérica, porém foi mais sensível que aquela contendo os primers para a região codificadora da proteína NS5. Considerando os resultados obtidos, sugerimos uma estratégia de triagem dos casos suspeitos de dengue utilizando a RT-PCR genérica para posteriormente identificar o sorotipo viral com o protocolo que utiliza os primers da extremidade 5. Embora este último protocolo tenha sido pouco sensível, a identificação do sorotipo infectante em algumas amostras é suficiente para definir qual o sorotipo circulante durante uma epidemia. / Dengue is an infectious disease transmitted by the biting of mosquitoes of Aedes genus. Dengue virus (DENV), belonging to the Flavivirus genus, Flaviviridae family, is an important public health problem worldwide. Four antigenically distinct viruses are recognized (DENV-1, -2, -3, e -4). Infection with any of the virus serotypes causes a spectrum of the illness ranging from inapparent or mid viral syndrome to classic dengue fever (DF) and severe hemorrhagic disease (DHF). The clinical diagnosis is difficult especially in the acute phase of the disease when the symptoms are very similar to other febrile illness, corresponding to the laboratory the definitive diagnosis. Serological methods detecting antibodies IgM/IgG are the more widely used; however, they are inappropriate for early diagnosis since these methods detect antibodies after six day of the onset of symptoms. The molecular methods are more frequently used for the early diagnosis because they are faster and more sensitive than serological methods and virus isolation. In this study, we have compared the sensitivity of a generic real time RT-PCR with a commercial ELISA for the NS1 protein analyzing serum samples from patients with dengue virus infection. We have also developed two protocols of real time RT-PCR to identify dengue serotype, one of them containing primers to the 5 end and the other, primers to the NS5 coding region. The generic real time RT-PCR showed to be more sensitive than the ELISA, principally, between the samples with low viral load. The real time RT-PCR containing primers to the 5 end showed a lower sensitivity than the generic real time RT-PCR; however, it was more sensitive than that containing primers to the NS5 coding region. Considering these results, we suggest the use of the generic real time RT-PCR to screen the dengue suspected cases and then to identify the serotype using the protocol that include the primers to the 5 end. Although the last protocol has shown a low sensitive, the identification of the infecting serotype in some of the samples is enough to define which serotype is circulating during the epidemic period.

O Distúrbio Específico de Linguagem (DEL) é uma alteração que acomete o desenvolvimento da linguagem que não pode ser atribuído à defasagem sensorial, motora, intelectual, transtorno globais do desenvolvimento, privação social ou lesão cerebral evidente. Estudos comprovam que o desempenho de crianças com DEL é inferior ao de seus pares normais em provas de Memória de Trabalho (MT) e relacionam essa defasagem às dificuldades linguísticas destes sujeitos. É consenso que a memória de trabalho fonológica (MTF) é fundamental para o desenvolvimento da linguagem, porém, há divergências sobre o papel da memória de trabalho visual (MTV). Assim este estudo teve como objetivo comparar o desempenho de crianças com DEL e com Desenvolvimento Típico de Linguagem (DTL) em provas de MT e vocabulário receptivo; comparar o desempenho na Prova de Memória de Trabalho Fonológica (PMTF) e Teste Pictórico de Memória (TEPIC-M) verificando se há diferença em função do material ser apresentado por via auditiva ou visual e ainda, correlacionar o desempenho das crianças com DEL nas provas de MT e de vocabulário receptivo. Participaram do estudo 42 crianças sendo 14 delas com diagnóstico de DEL e 28 com DTL, pareadas pela idade cronológica, foram aplicados dois testes que avaliam a memória de trabalho (PMTF e TEPIC-M) e um teste que avalia vocabulário receptivo (Peabody Picture Vocabulary Test- PPVT-III). Para a análise estatística foram utilizados os testes t de Student para comparação entre os grupos e Correlação de Pearson para correlacionar os resultados entre as provas. Os resultados mostraram que as crianças com DEL apresentam desempenho inferior em relação aos seus pares normais em ambas as provas de MT, sendo que, em maior proporção na prova de PMTF, havendo correlação entre todos os testes aplicados. Assim conclui-se que crianças com DEL apresentam defasagem na MTF e na MTV, nesta última em menor proporção. Quanto maior a defasagem nas habilidades de memória, maior foi a defasagem no vocabulário destas crianças. Tanto crianças com DEL, como as com DTL apresentaram pior desempenho quando o estímulo foi apresentado por via auditiva comparado àquele apresentado por via visual. / The Specific Language Impairment (SLI) is a disorder that affects the language development and cant be attributed to lag sensory, motor, intellectual and pervasive developmental disorder, social deprivation or evident brain lesion. Studies show that the performance of SLI children is lower than their normal peers in Working Memory (WM) tests and relate this discrepancy to the linguistic difficulties of these subjects. There is consensus that phonological working memory (PWM) is critical to language development, but there are disagreements about the role of visual working memory (VWM). So this study aimed to compare the performance of children with SLI and typical language development (TLD) in WM tests and receptive vocabulary, to compare the performance in Phonological Working Memory Test (PWMT) and Pictorial Memory Test (PMT) checking whether there are differences depending on the material being presented through auditory or visual, still, to correlate the performance of children with SLI on receptive vocabulary tests and WM tests. The study included 42 children, 14 of them with SLI and 28 with TLD, paired with chronological age, were applied two tests that assessed working memory (PWMT and PMT) and a receptive vocabulary test (Peabody Picture Vocabulary Test - PPVT-III). For statistical analysis were used t of Student test for comparison between groups and Pearson Correlation to correlate the results between tests. The results showed that children with SLI perform below their peers in relation to normal in both WM tests, mainly on the PWMT, there was correlation between all tests. Thus it is concluded that children with SLI present deficits in PWM and VWM, the latter in a smaller proportion. The higher is the gap in their memory skills, the higher is the gap in the vocabulary of these children. Both children with SLI, as with TLD showed a worse performance when the stimulus was presented auditory compared to that presented by visual means.

A doença Huanglongbing (HLB) associada a bactéria Candidatus Liberibacter spp., que coloniza os vasos do floema, é considerada uma das mais graves doenças de citros. Uma importante estratégia para o controle desta doença consiste na produção de plantas transgênicas, expressando genes que codificam peptídeos antibacterianos especificamente no local de colonização do patógeno. O objetivo deste trabalho foi obter plantas transgênicas de laranja doce, expressando o gene que codifica o peptídeo antibacteriano atacina A (attA) dirigido por promotores específicos para a expressão gênica no floema. O trabalho foi iniciado com a elaboração de construções gênicas contendo o gene attA (associado ou não ao peptídeo sinal), sob o controle dos promotores AtSuc2 (transportador de sacarose), AtPP2 (proteína de floema 2), clonados de Arabidopsis thaliana, ou CsPP2 (proteína de floema 2), clonado de Citrus sinensis. Os experimentos de transformação genética foram realizados com C. sinensis cv. \'Hamlin\', \'Valência\', \'Pêra\' e \'Natal\', via Agrobacterium tumefaciens, utilizando-se segmento de epicótilo como explante. A identificação de plantas transgênicas foi realizada por meio da análise de PCR. Plantas PCR+ foram aclimatizadas e transferidas para casa-de-vegetação específica para o cultivo de plantas transgênicas. Análises de Southern e Northern blot foram realizadas em plantas aclimatizadas, confirmando-se a integração e transcrição do gene attA, respectivamente. A expressão do gene attA também foi confirmada pela análise de RT-qPCR. Plantas de laranja \'Hamlin\' contendo o gene attA (associado ou não ao peptídeo sinal), sob o controle dos promotores AtSuc2 ou AtPP2 foram propagadas por enxertia, para futura avaliação da resistência a Candidatus Liberibacter asiaticus / Huanglongbing (HLB) associated to Candidatus Liberibacter spp., which colonizes the phloem, is considered one of the most serious diseases of citrus. One important strategy to control this disease consists of producing transgenic plants expressing, in the bacteria colonization tissue, genes encoding antibacterial peptides. The objective of this work was to produce transgenic sweet orange plants expressing genes encoding the antibacterial peptide attacin A (attA) driven by phoem-specific promoters. The work started with the development of the gene constructs, containing the attacin A gene (with or without signal peptide) controlled by either sucrose transporter gene (AtSuc2) or phloem protein 2 gene promoters (AtPP2) from Arabidopsis thaliana, or phloem protein 2 gene promotor (CsPP2) from Citrus sinensis. The genetic transformation of C. sinensis \'Hamlin\', \'Valencia\', \'Pera\' and \'Natal\' cultivars was done via Agrobacterium tumefaciens. Epicotyls segments collected from in vitro germinated seedlings were used as explants. Transgenic plants were identified by PCR analyses. PCR positive plants were acclimatized and transferred to specific greenhouse. Integration and transcription of the attA gene was confirmed in acclimatized transgenic plants by Southern and Northern blot analysis, respectively. The attA gene expression was validated by RT-qPCR analysis. \'Hamlin\' transgenic cultivars containing the AtSuc2 or AtPP2 promoters controlling the expression of attA (with or without signal peptide) were propagated by grafting, for future evaluation of Candidatus Liberibacter asiaticus resistance

Os objetivos deste estudo foram correlacionar o desempenho de crianças com Distúrbio Específico de Linguagem (DEL) nas provas de memória de trabalho e de compreensão de sentenças e verificar, entre as duas provas de memória de trabalho utilizadas, qual a mais eficaz para discriminar crianças com DEL, quando comparadas a crianças com desenvolvimento típico de linguagem (DTL). Foram selecionadas 66 crianças, com idades variando de 37 meses (3:1 anos) a 131 meses (10:11 anos), divididas em três grupos de 22 crianças: um grupo experimental, de crianças com diagnóstico de DEL, e dois grupos controle, de crianças com desenvolvimento típico de linguagem e aprendizagem (DTLA). O primeiro grupo controle (n=22) foi pareado pela idade psicolinguística (GCIPL) e, o segundo (n=22), pareado pela idade cronológica (GCIC). A memória de trabalho foi obtida por meio das provas de repetição de pseudopalavras (PP) e de memória seqüencial para dígitos (ITPA DG), e a compreensão de sentenças por meio do \"Token Test\". A comparação entre o desempenho dos grupos foi realizada pelo teste \"t\" de Student, a correlação entre as provas de memória de trabalho e compreensão de sentenças foi realizada pela correlação de Pearson e, para verificar qual a melhor prova para discriminar as crianças com DEL, utilizou-se a curva ROC. As análises demonstraram que os sujeitos do grupo experimental apresentaram menor número de acertos nas três provas aplicadas (p<0,05). Foi encontrada correlação positiva entre as provas de memória de trabalho e a prova de compreensão de sentenças (PP --> r=0,42, p=0,049; ITPA DG --> r=0,74, p<0,001). Entre as duas provas relacionadas à memória de trabalho, a que demonstrou ter o melhor índice discriminatório de crianças com DEL foi a de pseudopalavras, com acurácia de 95%. Concluiu-se que houve correlação positiva entre a memória de trabalho e o aspecto da linguagem, compreensão, e que a melhor forma de discriminar crianças com DEL e crianças com DTL, entre as duas analisadas é a prova de pseudopalavras. / The objectives of this study was to correlate the children\'s performance with Specific Language Impairment (SLI) in the working memory and sentences comprehension tasks and to verify among the two working memory tasks used, which one is more effective to discriminate children with SLI, when compared to children with typical language development (TLD). It was selected 66 children with ages varying of 37 months (3:1 years) to 131 months (10:11 years), divided in 3 groups of 22 children, being one a experimental group of children with diagnosis of SLI and two control groups of children with typical development of language and learning (TDLA), being the first control group (n=22) matched by the psycholinguistic age (CGPLA) and the second (n=22) matched by the chronological age (CGCA). The working memory was obtained through the nonwords repetition (NW) and digit span (ITPA DG) tasks, and the sentences comprehension through \"Token Test\". The comparison among the groups performance was accomplished by the Student\'s t-test, the correlation between the working memory and sentences comprehension tasks was accomplished by the Pearson correlation, and to verify which one is the best task to discriminate the children with SLI, the ROC curve analyses was used. The analyses demonstrated that the experimental group subject presented smaller number of successes in the three applied tasks (p <0,05). It was found positive correlation between the working memory and sentences comprehension tasks (NW-->r=0,42, p=0,049; ITPA DG-->r=0,74, p <0,001). Among the two tasks regarding the working memory, the one that demonstrated to be the best discriminatory index of children with SLI was the NW, with accuracy of 95%. Therefore it is ended that there was positive correlation among the working memory and the aspect of the language, comprehension. And the best form of discriminating children with SLI and children with TLD, among the analyzed two, is the NW task.

O objetivo deste estudo foi comparar o desempenho psicolingüístico de crianças com Distúrbio Específico de Linguagem (DEL) com o de crianças que apresentam desenvolvimento típico de linguagem (DTL), apontando os marcadores psicolingüísticos mais significativos do distúrbio e também comparar a eficácia de dois métodos de intervenção - Modelo de Intervenção no Meio e Modelo Neuropsicolingüístico - no desempenho psicolingüístico das crianças com DEL. Participaram desta investigação 12 pré-escolares de ambos os gêneros, com idade entre 4:0 - 6:11 anos, sendo metade deles pertencentes ao grupo experimental - crianças com DEL, submetidos à intervenção - e os demais ao grupo controle - crianças com DTL, não submetidos à intervenção. A quantificação do rendimento dos sujeitos nas distintas dimensões psicolingüísticas foi obtida mediante a utilização de diversos instrumentos, com o propósito de avaliar o nível primário, secundário e terciário da recepção e produção lingüística. Posteriormente às avaliações préintervenção, o grupo experimental foi distribuído aleatoriamente em dois grupos e submetido a dois diferentes modelos terapêuticos (primeiro ciclo), com duração de quatro meses. Ao fim deste ciclo foi reavaliado, submetido a quatro meses de terapia em que os Modelos foram alternados e os grupos novamente reavaliados. A análise estatística revelou a existência de diferença estatisticamente significante entre o desempenho do grupo experimental e controle em vários níveis de análise e produção lingüística, sendo os marcadores mais significativos encontrados os que envolvem a discriminação auditiva, análise fonológica, recepção e organização morfossintática, memória de curto prazo e habilidades pragmáticas quanto ao uso de turnos expansivos. Já a comparação da eficácia dos dois Modelos de intervenção propostos revelou que as distintas habilidades psicolingüísticas responderam de forma diferente aos mesmos, sugerindo que a combinação das estratégias dos Modelos investigados possa ser o melhor caminho quando se deseja intervir nos quadros de crianças cujas dificuldades encontram-se situadas nos níveis de análise e produção lingüística investigados neste trabalho. / This study aimed to compare the psycholinguistic performance of children with Specific Language Impairment (SLI) to children with Typical Language Development (TLD), pointing out the most significant psycholinguistic markers, and to compare the effectiveness of two intervention methods, Milieu Teaching Approach and Neuropsycholinguistic Model, in the psycholinguistic performance of children with SLI. The subjects were 12 pre-school boys and girls, 4:00 to 6:11 years old; half of them took part in the experimental group - children with SLI submitted to intervention - and the others in the control group - children with TLD not submitted to intervention. The subject performance quantification in distinct psycholinguistic dimensions was obtained through several tools in order to evaluate the primary, secondary and tertiary levels of linguistic reception and production. After pre-intervention evaluations, the experimental group was randomly distributed into two study groups and submitted to two different therapeutic models (first cycle) during four months. At the end of this cycle, it was evaluated again, submitted to four-month therapy with alternating Models and re-evaluated. Statistical analysis showed the existence of statistically significant difference in the performance between the experimental group and the control one in several levels of linguistic analysis and production. The most significant markers involve auditory discrimination, phonological analysis, morphosyntactic reception and production, short-term memory and pragmatic abilities in relation to the use of expansive turns. The comparison of the effectiveness between the two proposed Models showed that distinct psycholinguistic abilities responded differently to themselves, which suggests that the combination of strategies of the studied Models be the best way to intervene in the performance of children whose difficulties lie in the investigated analysis and linguistic production levels of this study.

As proteínas MDM2, P53, P21 e pAKT estão entre as muitas já identificadas que visam, por meio do equilíbrio direto e indireto entre si, manter o balanço entre morte e proliferação celular. Existe um leque aberto de hipóteses sobre a via de atuação dessas proteínas na tumorigênese de glândulas salivares, porém não há dados conclusivos. O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão das proteínas MDM2, P53, P21 e pAkt em carcinoma adenóide cístico e adenocarcinoma não-específico de glândula salivar, através das técnicas de imunoistoquímica, em casos fixados em parafina; e imunofluorescência e western-blotting, em linhagens celulares provenientes dessas lesões. Os estudos imunoistoquímicos mostraram expressão de MDM2 e pAKT na maioria dos carcinomas adenóides císticos (CAC) avaliados e nos 3 casos de adenocarcinoma não-específicos (ANE). As linhagens Cac2 (proveniente de carcinoma adenóide cístico) e HSG (derivada de adenocarcinoma não-específico) também exibiram expressão das proteínas MDM2 e pAKT tanto no núcleo quanto no citoplasma celular. A proteína P53 mostrou expressão variável entre os diferentes CAC analisados e os 3 casos de ANE estudados mostraram marcação positiva para a proteína P53. Com relação às linhagens celulares, a Cac2 não expressou a proteína P53, enquanto a HSG apresentou expressão nuclear e citoplasmática dessa proteína. As glândulas salivares normais não exibiram marcação imunoistoquímica para as proteínas MDM2, P53, P21 e pAKT. Os resultados deste estudo sugerem que as proteínas pAKT e MDM2 estão envolvidas na tumorigênese e/ou progressão tumoral de carcinoma adenóide cístico e adenocarcinoma não especifico. / MDM2, P53, P21 and pAKT are proteins co-related to the balance between cell death and survival. There are many hypothesis on the role of these proteins in salivary gland tumorigenesis, however, no conclusive data have been published. Theaim of this study was to evaluate the expression of MDM2, P53, P21 and pAKT proteins on adenoid cystic carcinomas (ACC) and adenocarcinoma not otherwise specified (ANOS) through immunohistochemistry, immunofluorescence and westernblotting techniques. The immunostaining studies showed MDM2 and pAKT expression in most cases of adenoid cystic carcinoma and in all adenocarcinoma not-otherwise specified. The cell lines CAC2 (derived from adenoid cystic carcinoma) and HSG (derived from adenocarcinoma not otherwise specified) also showed nuclear and cytoplasmic expression of MDM2 and pAKT. The expression of P53 was variable in the different ACCs analyzed and was absent on CAC2 cells. However, P53 was strongly positive in all ANOS, and HSG cells also showed nuclear and cytoplasmic staining. No MDM2, P53, P21 and pAKT expression was found in normal salivary glands. Therefore, MDM2 and pAKT may participate in the tumorigenesis and/or progression of adenoid cystic carcinoma and adenocarcinoma not otherwise specified.

O crescimento populacional e a consequente demanda adicional de alimentos exigem uma agricultura cada vez mais intensa e tecnificada. Essa conjuntura tem contribuído para se buscar a maximização do rendimento das culturas, além da otimização do uso de recursos, em especial, fertilizantes e água. Nos sistemas que aplicam a fertirrigação, como é o caso do cultivo hidropônico, realizam-se o manejo químico da solução nutritiva mediante monitoramento da concentração salina com condutivímetro portátil. Essa prática comum entre os produtores pode ocasionar desequilíbrios nutricionais, tendo em vista que a leitura fornecida por esse aparelho não distingue os nutrientes especificamente. Contudo, o desenvolvimento e a disponibilização de novos sensores, como os eletrodos de íon específico, permite explorar novas estratégias de monitoramento e controle de nutrientes em soluções. Diante do exposto, o objetivo desse trabalho foi desenvolver e avaliar um sistema eletrônico de controle automático da concentração de nitrato em solução nutritiva por meio de um sensor de íon seletivo. O sistema desenvolvido constou, basicamente, de um Sistema de Aquisição, Processamento e Acionamento (SIAPEA), o qual realizava o processamento do sinal de sensores e o acionamento de atuadores (válvulas solenoides); um sensor seletivo a íons de nitrato; um sensor de pH; e, um sistema de injeção de solução concentrada comandada por pulsos elétricos enviados pelo SIAPEA. Além da comunicação com computador, via serial RS-232, o SIAPEA possuía uma interface amigável com o usuário, por meio de LCD, para exibição dos resultados, e botões de navegação. Assim, possibilitava-se ao usuário alterar a concentração de ajuste desejada para a solução nutritiva. Construiu-se uma bancada hidropônica para os testes do sistema, com quatro perfis, um reservatório de 120 L e bombas para circulação da solução, sendo que, para a inserção do sensor de nitrato na bancada, montou-se uma unidade de leitura. O ajuste automático da concentração da solução foi baseado em uma lógica de controle proporcional, a qual é fundamentada na diferença entre as entradas e saídas do controlador, sendo que cada ciclo de ação do controlador (medição da concentração da solução nutritiva e injeção de solução concentrada) tinha uma duração de 20 s. O valor inicial de concentração de nitrato na solução nutritiva era cerca de 524 mg L-1, sob vazão constante de 0,1 L s-1, injetando-se solução concentrada de nitrato de potássio de 30000 mg L-1 na tubulação de retorno, próximo ao reservatório, e realizando a medição à jusante do bombeamento. Realizaram-se ensaios para valores finais da concentração de 780, 1002 e 1445 mg L-1, sendo coletadas amostras de 15 mL em tempos definidos, para se determinar a concentração de nitrato no espectrofotômetro. Os resultados obtidos comprovaram a eficiência da lógica de controle aplicada na automação, além do desempenho satisfatório do sistema em manter a concentração do nitrato no intervalo desejado. Para aquelas concentrações finais desejadas os tempos requeridos pelo sistema para os respectivos ajustes foram cerca de 12, 22 e 35 min, após o início dos testes. / The population growth and the consequent demand for food require an increasingly intensive and technified agriculture. This scenario has contributed to find the maximization of crop yield, besides the optimization of the use of the resources, as water and fertilizers. In the systems which apply fertigation, as in the case of hydroponic, the chemical management of the nutrient solution is done by monitoring the salinity with portable conductivity meters. Although it is a common practice among farmers, it can cause nutritional imbalances, considering that the reading provided by this device does not distinguish specific nutrients. Nevertheless, the development and availability of new sensors, such as specific ion electrodes, allows exploring new strategies for monitoring and control nutrient solutions. Given the above, the objective of this study was to develop and evaluate an electronic automatic control of nitrate concentration in nutrient solution by means of an ion-selective sensor. The developed system consisted basically of a System for Acquisition, Processing and Actuation (SIAPEA), which performed the signal processing sensors and drive actuators (solenoid valves); ion-selective nitrate sensor; pH sensor; and a system to inject concentrated solution commanded by electrical pulses sent by SIAPEA. Besides communication with computer via serial RS-232, the SIAPEA had a user-friendly interface through LCD to display the results, and navigation buttons. Thus, the user was enabled to change the concentration of desired adjustment to the nutrient solution. A hydroponic bench was constructed to test the system, with four flat bottomed gently sloped channels, a 120 L reservoir and pumps to circulate solution, and, for the insertion of the nitrate sensor on the bench, a reading unit was mounted. The automatic adjustment of the concentration of the solution was based on a proportional control logic, which is based on the difference between the inputs and outputs of the controller, with each cycle controller action (measurement of nutrient solution concentration and injection of concentrated solution) had 20 s of duration. The initial concentration of nitrate in the nutrient solution was about 524 mg L-1 under a constant flow of 0.1 L s-1, injecting concentrated solution of potassium nitrate to 30,000 mg L-1 in the return pipe, near the reservoir, and performing the measurement downstream of the pumping. Assays were performed for different final values of concentration of 780, 1002 and 1445 mg L-1, collecting samples of 15 mL at defined times to determine the concentration of nitrate in a spectrophotometer. The results proved the efficiency of the logic of control applied in automation, beyond the proper performance of the system to maintain the concentration of nitrate in the desired range. For those desired final concentrations, the times required by the system for the respective adjustments were approximately 12, 22 and 35 min after the start of the tests.

This dissertation addresses an important empirical regularity that is still not very well understood: the same firm, in a given institutional context, simultaneously relies on different organizational arrangements to govern similar (or identical) transactions. I will follow Bradach & Eccles (1989) and Menard (2013) and treat this phenomenon as \'plural forms\'. The dissertation is composed of four chapters, each of which, providing different but complementary approaches to plural forms and serving as input for the next: the first half of this dissertation remains theoretical, while the second presents distinct qualitative empirical contributions on the theme. In the first chapter, I intend to verify what has been theorized about plural forms and how this field has evolved over time. I am especially concerned with the multiple theoretical explanations about the reasons why firms adopt plural forms, mainly because, to date, there is no consensus on the subject. To this end, I both perform some bibliometric analyses by surveying the ISI Web of Science platform and qualitatively review some significant papers on the subject. I find that the combination of asset specificity and multiple types of uncertainty underlies most of the explanations used over time and highlight that these could be interesting variables for a model predicting plural forms. In the second chapter, I am concerned with explaining the variety of plural form manifestations. However, in order to understand such variety, I build a theoretical model integrating asset specificity and uncertainty to predict plural and non-plural forms. Next, I emphasize that these arrangements are heterogeneous and, to keep my argumentation tractable, I define three categories of plural forms: \'between\' (or the combination of different modalities of organizational arrangements), \'within\' (or the combination oh hybrid arrangements) and \'combo\' ( or the combination of \'between\' and \'within\'). My hypotheses relate each of these three types of plural forms to the different typologies of uncertainty (market, technological and performance assessment) that capture the essential dimensions of the concept. In the next two chapters, I empirically confornt my theretical model and hypotheses with qualitative empirical data concerning the Brazilian Agribusiness sector. In the third chapter, I seek to verify whether the combination of uncertainty and asset specificity predicts the emergence of plural forms. Moreover, I assess whether different levels of uncertainty and of asset specificity (combined) determine the selection of distinct organizational arrangements. To this end, I perform an embedded clinical case study at the Korin company, which produces and commercializes multiple organic products. I am concerned with the procurement of distinct inputs (regular and organic corn, regular soybeans, poultry and antibiotic-free eggs), both with plural and with non-plural forms. I find support for my model and for the idea that different levels of asset specificity and uncertainty push towards the adoption of distinct organizational arrangements. In the final chapter, I intend to empirically confront both my theoretical model (i.e., if asset specificity and uncertainty predict plural or non-plural forms) and my hypotheses (i.e., whether different types of high uncertainty, subject to a certain degree of asset specificity, push towards different types of plural forms). To this end, I survey the procurement of inputs by 24 companies operating in the Brazilian Agribusiness sector and procuring 11 different inputs by means of both plural and non-plural forms. I make use of a 4-point likert scale questionnaire capturing my theoretical variables and perform some qualitative analyses. I find empirical support for my theoretical model and for some of my hypotheses concerning the diversity of plural forms, indicating a path for further empirical analyses. / Esta tese aborda uma importante regularidade empírica que ainda não é muito bem compreendida: uma mesma empresa, em um determinado contexto institucional, simultaneamente se baseia em diferentes arranjos organizacionais para governar transações similares (ou idênticas). Seguindo os trabalhos de Bradach & Eccles (1989) e Menard (2013), trata-se este fenômeno como \"formas plurais\". A tese é composta por quatro capítulos, cada qual proporcionando abordagens diferentes, porém complementares, sobre a temática das formas plurais, e cada qual servindo como insumo para o próximo capítulo: a primeira metade desta tese permanece teórica, enquanto a segunda apresenta contribuições empíricas qualitativas distintas sobre o tema. No primeiro capítulo, pretende-se verificar o que foi teorizado sobre formas plurais e como este campo tem evoluído ao longo do tempo. Em especial, busca-se conhecer as múltiplas explicações teóricas sobre as razões por que as firmas adotam formas plurais, principalmente porque ainda não há um consenso sobre o assunto. Para tanto, realizam-se algumas análises bibliométricas por meio de um levantamento de dados na plataforma ISI Web of Science e qualitativamente revisam-se alguns artigos significativos sobre o assunto. Como resultado, tem-se que a combinação de especificidade de ativos e vários tipos de incerteza se encontra subjacente à maior parte das explicações utilizadas ao longo do tempo e destaca-se a ideia de que estas poderiam ser variáveis interessantes para um modelo de previsão de formas plurais. No segundo capítulo, busca-se compreender o que explica a variedade de formas plurais. No entanto, a fim de compreender tal variedade, constrói-se um modelo teórico integrando especificidade de ativos e incerteza para prever formas plurais e não plurais. Em seguida, enfatiza-se que estes arranjos são heterogêneos e, para manter a argumentação tratável, definem-se três categorias de formas plurais: \"entre\" (ou a combinação de diferentes modalidades de arranjos organizacionais), \"dentro\" (ou a combinação de arranjos híbridos ) e \"combo\" (ou a combinação de \"entre\" e \"dentro\"). As hipóteses relacionam cada um destes três tipos de formas plurais com as diferentes tipologias de incerteza (mercado, tecnológica e de avaliação de desempenho) que capturaram as dimensões essenciais deste conceito. Nos próximos dois capítulos, o modelo teórico e as hipóteses são confrontados com dados empíricos qualitativos relativos ao setor agroindustrial brasileiro. No terceiro capítulo, procura-se verificar se a combinação de incerteza e especificidade de ativos prevê o surgimento de formas plurais. Além disso, avalia-se se diferentes níveis de incerteza e de especificidade de ativos (combinados) determinam a seleção de arranjos organizacionais distintos. Para tanto, realiza-se um estudo de caso clínico \"embedded\" na empresa Korin, que produz e comercializa diversos produtos orgânicos. Analisa-se a aquisição de insumos distintos (milho comum e orgânico, soja comum, frango e ovos livres de antibióticos), tanto com formas plurais quanto com formas não plurais. Encontra-se suporte para o modelo e para a ideia de que diferentes níveis de especificidade de ativos e de incerteza levam à adoção de arranjos organizacionais distintos. No capítulo final, confronta-se empiricamente tanto o modelo teórico (ou seja, se a especificidade dos ativos e a incerteza preveem formas plurais ou não-plurais) quanto as hipóteses (ou seja, se os diferentes tipos de elevada incerteza, sujeitas a um determinado grau de especificidade de ativos, leva à diferentes tipos de formas plurais). Para tanto, examina-se a aquisição de insumos por 24 empresas que operam no agronegócio brasileiro e adquirem 11 insumos diferentes, tanto por meio de formas plurais como de formas não-plurais. Utiliza-se de um questionário escala de Likert de 4 pontos, capturando as variáveis teóricas e realizam-se algumas análises qualitativas. Encontra-se suporte empírico para o modelo teórico, e para algumas das hipóteses que explicam a diversidade, apontando um caminho para maiores investigações empíricas

O neuroblastoma é o tumor sólido mais comum e com maior índice de letalidade em crianças. Diversas famílias de retrovírus endógenos humanos (HERV) estão presentes no genoma humano, em diferentes níveis de integridade, e são reativadas sob diferentes circunstâncias. A atividade de HERV tem sido cada vez mais sido associada a doenças como câncer, doenças autoimunes e ainda com a infecção por vírus exógenos. O principal objetivo deste projeto foi avaliar a expressão de retrovírus endógenos das famílias H (HH), W (HW) e K (HK) em pacientes diagnosticados com neuroblastoma. Amostras tumorais e amostras controle foram submetidas a extração de RNA total, síntese de cDNA e PCR em fase única. Os produtos de HERV foram submetidos ao sequenciamento em larga escala. No total, 43 loci de HH e 14 loci de HW foram diferencialmente expressos entre os grupos e 202 loci de HK foram detectados. As análises de expressão somadas ao contexto genético e epigenético de neuroblastoma, permitiram com que várias hipóteses fossem levantadas acerca da regulação da expressão de HERV neste tumor. A hipometilação geral do tecido tumoral pode ter um papel importante na expressão gênica e na reativação de retrotransposons, podendo ser a principal razão para a expressão de HERV neste contexto. / Neuroblastoma represents the most common solid tumor as well as the most lethal form of tumor in children. Several families of human endogenous retroviruses (HERV) are present in human genome in different integrity levels, and they are reactivated under different circumstances. HERV activity has been linked to diseases such as cancer, autoimmune diseases and even with the infection by exogenous viruses. The main goal of this project was to evaluate the expression of endogenous retroviruses families H (HH), W (HW) and K (HK) in patients diagnosed with neuroblastoma. Tumor samples and control samples were subjected to RNA extraction and a single round in-house RT-PCR. HERVs amplicons were next generation sequenced to access the specific origin of transcripts. Overall, 43 HH loci and 14 HW loci were differentially expressed between groups and, 202 HK loci was detected. Taken together, HERV expression analysis and genetic and epigenetic context of neuroblastoma provided several hypotheses about regulation of HERV expression in this type of tumor. The global hypomethylation of tumoral tissue may have a role in genes expression and retrotransposons reactivation, which may be the main reason for HERV expression in this context.

Em zonas ripárias o nível freático encontra-se próximo à superfície do solo e tem contato com as raízes da vegetação. Como resultado, as taxas de evapotranspiração (ET) são elevadas, gerando flutuações diárias do nível de água subterrânea. Apesar da riqueza hídrica que a América Latina possui, estudos sobre a evapotranspiração nas suas zonas ripárias são raros. Os prováveis motivos da pouca investigação na área podem ser atribuídos ao difícil acesso econômico para adquirir equipamentos necessários para a sua medição. Além disso, a aplicação de técnicas como sensoriamento remoto, eddy covariance ou a razão de Bowen é limitada, devido à bordadura das zonas ripárias, que geralmente é estreita. O objetivo deste trabalho foi determinar a ET em zona ripária e áreas vizinhas através de métodos baseados na flutuação diária do nível de água subterrânea. No desenvolvimento deste estudo foram instalados poços de monitoramento na bacia hidrográfica do Ribeirão da Onça. A profundidade do nível freático foi registrada em dataloggers em intervalos de 15 minutos, no período de 09/2015 a 10/2016. O rendimento específico transiente (S*y) foi estimado através da modernização do funil de Haines acoplado a uma balança de precisão.Em função do regime de flutuação diária do nível freático, foi adotado o S*y correspondente a 6 horas de drenagem. Os resultados mostram que na zona ripária a evapotranspiração oscila entre 2,74 e 14,90 mm/d. Para o Cerrado stricto sensu e o eucalipto, a variação da ET é de 1,23 a 2,02 mm/d e 1,96 a 5,45 mm/d, respectivamente, sendo coerentes com resultados prévios obtidos no Brasil. A aplicação de métodos da flutuação diária mostra ser economicamente viável e ter potencial para estimar a evapotranspiração em áreas estreitas. / In riparian zones the groundwater is close to the soil surface and the roots of its vegetation have contact with it. As a result, evapotranspiration (ET) rates are high, generating diurnal groundwater level fluctuations. Despite Latin America\'s water resources wealth, reports of evapotranspiration in its riparian zones are scarce. The probable reasons of little investigation in the area can be attributed to the economical difficulties to access the equipments necessary for this kind of measurement. Furthermore, the application of techniques as remote sensing, eddy covariance or Bowen ratio is limited, due to the usual narrow fetch that are found in the riparian zones. The aim of this study was to determine the ET in the riparian zone and its surroudings areas, using methods based on the diurnal groundwater level fluctuations. To develop this study, monitoring wells were installed in the Ribeirão da Onça basin. The water table depth was recorded in dataloggers using a 15-minute interval, from 09/2015 to 10/2016. The transient specific yield was estimated by improving the Haines funnel coupled to a precision balance. In function of the daily fluctuation regime of the groundwater table, it was adopted the S*y corresponding to 6 hours of drainage. The results show that, in the riparian zone, evapotranspiration ranges from 2,74 to 14,90 mm/d. For Cerrado stricto sensu and eucalyptus, the ET variations are 1,23 to 2,02 mm/d and 1,96 to 5,45 mm/d, respectively, being consistent with previous studies performed in Brazil. The application of diurnal groundwater level fluctuations methods shows to have the potential to estimate evapotranspiration in narrow areas, with low economic investment.