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Incorporação de colágeno de rã-touro em membranas de nanocelulose visando aplicação em medicina regenerativa

Souza, Drielle Justiniano de January 2015 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-11-17T03:10:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 336046.pdf: 2171162 bytes, checksum: 3d321276a4678c89b18491a4aa1a2fa5 (MD5) Previous issue date: 2015 / A engenharia tecidual é uma área de pesquisa que objetiva tratar, manter ou reparar tecidos animais. A cicatrização de feridas, em particular, é um assunto de grande interesse. Há uma grande necessidade de se desenvolver materiais curativos, para que se obtenha melhores resultados, comparados aos existentes. Novos biomateriais com capacidade de funcionalização são promissores, como é o caso da combinação de nanocelulose e de colágeno. O objetivo deste trabalho foi extrair, caracterizar e incorporar colágeno extraído de pele de Rana catesbeiana (rã-touro) em membranas de nanocelulose, com a finalidade de desenvolver biopolímeros com propriedades aplicáveis à cicatrização de feridas. Foi possível extrair colágeno da pele de rã-touro e quantificar as proteínas totais (214 µg) e a fração de colágeno (172 µg) por grama de pele, ressaltando a quantificação como o diferencial deste trabalho comparado à literatura. O material extraído da pele de rã-touro foi caracterizado quanto ao perfil eletroforético e à temperatura de desnaturação, revelando que o colágeno extraído é do tipo I, com massa molar de 253 kDa e temperatura de desnaturação de 30,08 °C. O biomaterial foi produzido pela incorporação do colágeno em membranas de nanocelulose. As propriedades pretendidas do biopolímero foram caracterizadas quanto à morfologia 2D e 3D, temperatura de transição vítrea e de fusão, estabilidade térmica e quanto aos grupamentos funcionais. As análises 2D e 3D de microestrutura mostraram o entrelaçamento do colágeno nas fibras de nanocelulose quando na forma biopolimérica, enquanto as análises térmicas indicaram que os biopolímeros apresentam estabilidade necessária à aplicação como cobertura de feridas. O colágeno extraído apresentou bandas características de colágeno e as mesmas puderam ser identificadas após a incorporação do mesmo à nanocelulose. A ação do colágeno e do biopolímero na cicatrização in vitro foi avaliada. O ensaio de ferida permitiu concluir que o colágeno de rã-touro atua expressivamente, de modo a acelerar o processo de fechamento da ferida, este processo ocorrendo mesmo em baixas concentrações de colágeno . Este trabalho demonstrou que é possível extrair, quantificar e incorporar colágeno de rã-touro em membranas de nanocelulose e que o biopolímero desenvolvido possui as propriedades necessárias à utilização em processos de cicatrização de feridas.<br> / Abstract : Tissue engineering is a research area that aims to treat, maintain or repair animal tissues. Wound healing, in particular, is a subject of great interest, and there is an increasing need to develop curative materials displaying better healing properties compared to existing ones. New biomaterials showing capacity for functionalization, such as the combination of nanocellulose and collagen, area promising field of research in this area. The objective of this study was to extract, characterize and incorporate collagen from the skin of Rana catesbeiana (bullfrog) in nanocellulose membranes, in order to develop biopolymers with properties suitable for wound healing. The material extracted from bullfrog skin was quantified as the total protein content (214 µg) and collagen (172 µg) per grams of skin, highlighting the quantification as the differential of this work compared to literature. The obtained collagen was characterized for the electrophoretic profile and denaturation temperature, results indicating that the extracted collagen is type I, with molecular weight of 253 kDa and denaturation temperature of 30.08 °C. The biopolymer was produced by the incorporation of collagen in nanocelulose membranes. The desired properties of the biocomposite were characterized for 2D and 3D morphology, glass transition and melting temperature, thermal stability and for functional groups. The 2D and 3D analysis of microstructure showed interlacing collagen fibers amongst nanocelulose, when in the biopolymeric form. The showed collagen characteristic bands and the same was observed when it was incorporated in the nanocelulose. The wound healing assay showed that the bullfrog collagen shows significantly effect in accelerating the process of wound closure, and that this process occurs even at low collagen concentrations. This work showed that it is possible to extract, quantify and incorporate bullfrog collagen in nanocelulose membranes and that the biopolymer obtained has the properties/functions required for use in wound healing.
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A influência do azul de metileno na cicatrização de anastomoses intestinais submetidas à isquemia e reperfusão / Eron Fábio Miranda ; orientador, Fernando Hintz Greca

Miranda, Eron Fábio January 2006 (has links)
Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2006 / Inclui bibliografia / A isquemia intestinal é uma das mais sérias alterações intra-abdominais, com morbidade e mortalidade extremamente elevadas. A reoxigenação dos tecidos isquêmicos, fundamental para o reparo tecidual, produz eventos inflamatórios deletérios, com conseqüênci
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Efeito dos extratos de folhas da Schinus terebinthifolius Raddi (aroeira) sobre lesões transfixantes induzidas na língua de ratos / Thaís de Almeida Lanzoni ; orientadora, Marina de Oliveira Ribas

Lanzoni, Thaís de Almeida January 2007 (has links)
Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2007 / Bibliografia: f. 42-45 / A Schinus terebinthifolius Raddi (STR) é utilizada pela população do litoral paranaense no tratamento de afecções bucais, porém são pouco conhecidos seus efeitos antiinflamatório e cicatrizante. Sendo assim, esta pesquisa teve como objetivo verificar a aç / Schinus terebinthifolius Raddi (STR) is used by the Paraná coast people in the healing of oral lesions, however its antiinflamatory and healing effects are not well established. Therefore the aim of this research was to verify the action of leaves extract
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Efeito do ultrassom terapêutico na cicatrização das feridas induzidas em ratos hiperglicêmicos / Jacques Fereira ; orientador, Josuê Bruginski de Paula ; co-orientador, João Antonio Palma Setti

Ferreira, Jacques de Lima January 2010 (has links)
Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2010 / Bibliografia: f. 81-92 / A cicatrização de feridas é um evento complexo que envolve a interação de diversos componentes celulares e bioquímicos. Vários fatores podem afetar a cicatrização, entre eles a diabetes, doença sistêmica que compromete a cicatrização quando não controlada / Wound healing is a complex event that involves the interaction of several biochemical and cellular components. Many factors can affect the healing process, among them, diabetes, a systemic disease that when uncontrolled compromises healing by decreasing c
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Cicatrização de anastomoses colônicas em ratos com hipotireoidismo / Ana Claudia Thá Nassif ; orientador, Fernando Hintz Greca ; co-orientadores, João Carlos Repka, Han Graf

Nassif, Ana Cláudia Thá January 2006 (has links)
Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2006 / Bibliografia: f. 72-83 / Com o objetivo de se avaliar a cicatrização do cólon na vigência de hipotireoidismo, centra-se esta pesquisa em estudo experimental utilizando vinte ratos Wistar subdivididos em dois grupos: submeteu-se o grupo de estudo (n=10), a uma tireoparatireoidecto / In order to evaluate the colon wound healing process in the hypothyroidism condition, it was performed an experimental study in 20 Wistar rats subdivided in two groups: the study group (n=10) was submitted to total thyroparathyroidectomy, for hypothyroidi
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Efeitos do laser de baixa intensidade em cultura bacteriana in vitro e ferida infectada in vivo / Pâmela Rosa Pereira ; orientador, Luiz Carlos Von Bahten ; co-orientador, Josuê Bruginski de Paula

Pereira, Pâmela Rosa January 2011 (has links)
Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2011 / Bibliografia: f. 70-84 / INTRODUÇÃO: a terapia a laser de baixa intensidade (LILT) tem auxiliado a cicatrização de feridas por meio dos seus efeitos biomoduladores. O uso do LILT no manejo extensas lesões de tecidos moles com imputada contaminação bacteriana não foi, ainda, objet / BACKGROUND: low-level laser therapy (LLLT) has been shown to accelerate the wound healing process because of its biostimulatory effects. Use of LLLT in the management of soft tissue injuries with imputed bacterial contamination has not been adequately inv
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Influência da hipertensão arterial na cicatrização colônica em ratos / Gilberto Luiz Ortolan ; orientadora, Maria de Lourdes Pessole Biondo-Simões ; coordenador, Luíz Carlos Von Bahten

Ortolan, Gilberto Luiz January 2011 (has links)
Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2011 / Bibliografia: f. [83-93] / Introdução: a deiscência da anastomose é importante fator de morbidade e mortalidade na cirurgia colorretal. Considerando as projeções de aumento na expectativa de vida, que a hipertensão arterial apresenta prevalência maior na população idosa, que a neop / Introduction: anastomosis dehiscence is an important risk factor for morbidity and mortality after colorectal surgery. Although the potential life span increase expected in the years to come and the high prevalence of both systemic arterial hypertension
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Efeitos do uso tópico do metronidazol em feridas com cicatrização por segunda intenção em ratos / Cláudia Paraguaçu Pupo Sampaio ; orientadora, Maria de Lourdes Pessole Biondo-Simões ; coordenador, Luiz Carlos Von Bahten

Sampaio, Cláudia Paraguaçu Pupo January 2009 (has links)
Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2009 / Bibliografia: f. 48-52 / INTRODUÇÃO: os prejuízos decorrentes da presença de úlceras crônicas, na população, indicam a necessidade de um recurso que promova a cicatrização precoce das feridas, evitando sua cronificação. O metronidazol, segundo a literatura, promove a precocidade / Introduction: the decurrent damages of the presence of chronic ulcers, in the population, indicate a need of a resource that promoves the earliness cicatrization, prevening that chronicles become. The metronidazole, according to literature, promotes a pre
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Polissacarídeos sulfatados de algas marinhas: formulação de géis e análise dos seus efeitos na cicatrização em experimentos in vivo e in vitro. / Sulphate polystacarides of seaweeds: formulation of gels and analysis of their effects on wound healing in in vivo and in vitro experiments.

Ribeiro, Natássia Albuquerque January 2016 (has links)
RIBEIRO, Natássia Albuquerque. Polissacarídeos sulfatados de algas marinhas: formulação de géis e análise dos seus efeitos na cicatrização em experimentos in vivo e in vitro. 2016. 132 f. Tese (Doutorado em Bioquímica)-Universidade Federal Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Anderson Silva Pereira (anderson.pereiraaa@gmail.com) on 2017-01-24T18:50:21Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_naribeiro.pdf: 3772754 bytes, checksum: 9edbe5008049af2b56383b60c8cd7b59 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-01-26T18:44:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_naribeiro.pdf: 3772754 bytes, checksum: 9edbe5008049af2b56383b60c8cd7b59 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-26T18:44:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_naribeiro.pdf: 3772754 bytes, checksum: 9edbe5008049af2b56383b60c8cd7b59 (MD5) Previous issue date: 2016 / The use of marine algae as potential tools for obtaining pharmaceuticals has shown a worldwide trend and has grown substantially over the last two decades. Bioactive Molecules obtained from seaweeds such as proteins, carbohydrates, phenolics, polyunsaturated fatty acids, terpenoids, etc. they showed numerous biological activities. Among these molecules, it highlights the sulfated polysaccharides from seaweed. This work aimed to evaluate the effect of the healing potential gels developed from sulfated polysaccharide of seaweed: Caulerpa racemosa (CrII), Cryptonemia crenulata (CcII) e Gracilaria birdiae (GbI), native of Ceará in healing in vivo and in vitro models. The sulfated polysaccharides were obtained by chromatographic procedure of ion exchange. The macromolecules obtained were evaluated in toxicological testing and analyzed for their potential to interfere in the central nervous system (CNS). Later, it was used in procoagulant in vitro/ex vivo and antibacterial activity experiments. Then the sulfated polysaccharides were used in the formulation of gels that were evaluated for their dermal irritant for 7 days, which was analyzed macroscopic skin reactions, skin thickness and the amount of exudate present in the tissue. The gels were applied to wounds in healthy mice induced by mechanical trauma and evaluated for their potential healing for 15 days. A histopathological evaluation was performed to prove the efficiency of the gels in the treatment of injuries. CcII was used in in vitro experiments where it was observed its potential adhesion, proliferation and cytotoxicity using HaCaT cells. Finally, CcII was evaluated in a 3D model of human skin equivalent (3D EPHS) for 7 days, which was analyzed parameters such as re-epithelialization area and lateral migration of keratinocytes. The results obtained showed that CrII, CcII and GbI present income 20.5%; 21.3% and 23.6%, respectively, and shown to be non-toxic and without CNS effects. In the coagulant test, CrII shown to be pro-coagulant and CcII showed anticoagulant activity in APTT assay in vitro. However, these activities have not been confirmed in the ex vivo assay. The GbI polysaccharide showed no anticoagulant and procoagulant activities in any of the assays tested. CrII, CcII and GbI showed no antibacterial activity against gram-negative and gram-positive bacteria. The gels formulated with CrII, CcII and GbI were not irritating in a skin irritation model in mice. And, when tested in wounds, only the gel formulated with CcII presented healing effect. Considering this fact, CcII was evaluated in experiments in vitro where it was not able to cause adherence, proliferation and cytotoxicity in HaCaT cells. CcII when analysed in the 3D EPHs model has a healing effect, accelerating the process of re-epithelization, and keratinocytes migrating. In view of the results obtained, CcII has a promising potential for formulating bioproduct with a healing activity. / A utilização de algas marinhas como ferramentas potenciais para a obtenção de produtos farmacêuticos tem se mostrado uma tendência mundial e cresceu substancialmente nas duas últimas décadas. Moléculas bioativas obtidas a partir de algas marinhas tais como proteínas, carboidratos, compostos fenólicos, ácidos graxos poliinsaturados, terpenóides etc. possuem inúmeras atividades biológicas. Dentre essas moléculas, destacam-se os polissacarídeos sulfatados de algas marinhas. Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficácia do potencial cicatrizante de géis desenvolvidos à base de polissacarídeos sulfatados das algas marinhas: Caulerpa racemosa (CrII), Cryptonemia crenulata (CcII) e Gracilaria birdiae (GbI), nativas do litoral cearense em modelos de cicatrização in vivo e in vitro. Os polissacarídeos sulfatados foram obtidos por procedimento cromatográfico de troca iônica. As macromoléculas obtidas foram avaliadas em ensaio toxicológico e analisadas quanto ao seu potencial de interferir no sistema nervoso central (SNC). Posteriormente foram utilizadas em experimentos de atividades pró-coagulante in vitro/ex vivo e antibacteriana. Em seguida os polissacarídeos sulfatados foram utilizados na formulação de géis que foram avaliados quanto à sua irritabilidade dermal durante 7 dias, onde foi analisado as reações dermatológicas macroscópicas, espessura da pele e o valor de exsudato presente no tecido. Os géis foram aplicados em feridas induzidas em camundongos sadios por trauma mecânico e avaliados quanto ao seu potencial cicatrizante durante 15 dias. Uma avaliação histopatológica foi realizada para comprovação da eficiência dos géis no tratamento das lesões. CcII foi utilizado em experimentos in vitro onde foi observado o seu potencial de aderência, proliferação e citotoxicidade utilizando células HaCaT. E por fim, CcII foi avaliado em um modelo 3D de equivalentes de pele humana (3D EPHs) durante 7 dias, onde foi analisado parâmetros como área de re-epitelização e migração lateral dos queratinócitos. Os resultados observados demonstraram que CrII, CcII e GbI apresentaram rendimentos de 20,5%; 21,3% e 23,6%, respectivamente, e mostraram-se atóxicos e sem efeitos sobre o SNC. No ensaio de atividade pró-coagulante CrII demonstrou ser pró-coagulante e CcII apresentou atividade anticoagulante no ensaio do APTT in vitro. Entretanto, estas atividades não foram confirmadas no ensaio ex vivo. O polissacarídeo de GbI não apresentou atividades anticoagulante e pró-coagulante em nenhum dos ensaios testados. CrII, CcII e GbI não apresentaram atividade antibacteriana frente às bactérias gram-negativa e gram-positiva. Os géis formulados com CrII, CcII e GbI não se mostraram irritantes em um modelo de irritação cutânea em camundongos. E quando testados em feridas, apenas o gel formulado com CcII apresentou efeito cicatrizante. Diante deste fato, CcII foi avaliada em experimentos in vitro, em que, não foi capaz de provocar a aderência, proliferação e citotoxidade em células HaCaT. CcII quando analisada no modelo 3D EPHs apresentou um efeito cicatrizante, acelerando o processo de re-epitelização e migração dos queratinócitos. Tendo em vista os resultados obtidos, CcII apresenta um potencial para formulação de um bioproduto promissor com uma função de cicatrização.
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Estimulação elétrica pré-incisional na cicatrização em pele de rato / Preincisional eletric stimulation on healing in rat’s skin

Borba, Graziela Maria Chacon [UNIFESP] 24 September 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-09-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / INTRODUÇÃO: Pesquisas in vitro evidenciam que a diferença de potencial bioelétrico de uma corrente elétrica pode influenciar a proliferação de fibroblastos e a síntese de fibras colágenas de uma incisão. OBJETIVO: Investigar o efeito da corrente elétrica pré-operatória na cicatrização, em pele de ratos. MÉTODOS: Quarenta ratos foram distribuídos em: Grupo Controle, 20 ratos foram anestesiados e submetidos a uma incisão no dorso, sem a aplicação da corrente. O Grupo Estimulado, 20 ratos foram estimulados eletricamente (corrente elétrica pulsada retangular, com frequência de 7,7Hz e intensidade de 8mA) no dorso durante 30 minutos, no pré-operatório, cuja incisão foi realizada dois minutos após o término da estimulação. O eletrodo com polaridade positiva foi colocado no dorso do rato, e o eletrodo negativo na parede abdominal. Nos 7º e 14º dias foram coletadas a pele do rato e o tecido cicatricial, sendo os animais submetidos à eutanásia. Foi realizada histomorfometria para infiltrado inflamatório, vasos neoformados, fibroblastos, para colágeno tipos I e III. RESULTADOS: O Grupo Estimulado, no 7º dia, apresentou maior quantidade de vasos sanguíneos e fibroblastos, assim como diferença estatística com menor densidade do colágeno tipo III, mas não revelou diferença estatística, quanto aos mastócitos e às fibras de colágeno tipo I. CONCLUSÃO: A estimulação elétrica com polaridade positiva, no pré-operatório, aumentou a quantidade de fibroblastos e de vasos sanguíneos e diminuiu a densidade do colágeno tipo III na cicatriz no 7º dia pós-operatório. / BACKGRAUND: In vitro studies have demonstrated that electrical current may affect the proliferation of fibroblast, and synthesis of collagen fibers. OBJECTIVE: To evaluate the effects of preoperative electrical stimulation on cutaneous wound healing in rats. METHODS: Forty rats were divided into two groups of 20 animals each. In the control group, an incision was made on back of the animals. In the stimulation group, a preoperative electrical stimulation was applied using a rectangular pulse current at a frequency of 7.7Hz, and intensity of 8mA, for 30 minutes, with the positive electrode placed on the back of the animal, and the negative electrode placed on the abdominal wall. Following, an incision was made on their back. Biopsy on the postoperative days 7 and 14, and histological analysis was performed. RESULTS: The stimulated group, at day 7, showed a greater number of newly formed vessels and fibroblasts, and a statistical difference with lower density of collagen type III, bud no statistical difference were observed for mast cells and fibers of collagen type I. CONCLUSION: Preoperative electrical stimulation with positive polarity increased the amount of fibroblasts and blood vessels and decreased the density of collagen type III in the scar at the postoperative day 7. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

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