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Preparação e caracterização das subunidades alfa e beta dos hormônios glicoproteicos humanos recombinantes: foliculotrofina, luteotrofina, tereotrofina e sua comparação com os produtos hipofisários / Preparation and characterization of alpha and beta subunits of recombinant human glycoprotein hormones: follicle-stimulating hormone, luteotropin, thyrotrophin and comparation with pituitary glycoprotein hormones

Cristiane Moreira de Carvalho Mageika 23 October 2008 (has links)
Neste trabalho é descrito um método prático e eficiente para dissociar, em subunidades &alpha; e &beta;, quantidades pequenas (da ordem de microgramas) dos hormônios foliculotrofina (hFSH), luteotrofina (hLH) e tireotrofina (hTSH) humana, nativos e recombinantes. A dissociação destes hormônios foi conseguida incubando-os, durante 16 horas, a 37ºC, com diferentes concentrações de ácido acético: 3M, 5M e 0,4M respectivamente para o hFSH, hLH e hTSH. Nestas condições, uma eficiência de dissociação acima de 98% foi obtida. Esta eficiência foi calculada com base nas determinações de massa dos heterodímeros e das subunidades, realizadas por MALDI-TOF-MS. Uma separação rápida e quantitativa das subunidades, com rendimentos da ordem de 80-90%, foi conseguida por cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa (RP-HPLC) em uma coluna C4. As subunidades foram caracterizadas quanto à pureza, hidrofobicidade, massa molecular e distribuição de carga por HPLC de exclusão molecular e fase reversa, SDS-PAGE e focalização isoelétrica. Quando analisadas quanto à hidrofobicidade, as subunidades mostraram-se aproximadamente iguais, enquanto as subunidades &beta; dos três heterodímeros apresentaram a seguinte escala de hidrofobicidade: &beta;-hFSH < &beta;-hTSH < &beta;-hLH. Com relação à massa molecular relativa (Mr), as subunidades &alpha; e &beta; do hFSH apresentaram as maiores Mr enquanto as subunidades do hLH as menores. A distribuição dos isômeros de carga das subunidades dos três hormônios ocorreu em uma região ácida, para o hFSH, em uma região básica, para o hLH e em uma região intermediária, para o hTSH. As subunidades &alpha; dos três hormônios, quando analisadas via SDS-PAGE, apresentaram praticamente a mesma mobilidade eletroforética, enquanto as subunidades &beta; apresentaram diferentes taxas de migração (mR), sendo mR &beta;-hFSH < mR &beta;-hTSH < mR &beta;-hLH. Diferenças relativas à massa molecular, hidrofobicidade, migração eletroforética e distribuição de carga foram encontradas entre as preparações recombinantes e hipofisárias dos três hormônios. O método descrito é suave, prático e flexível e pode ser adaptado à dissociação de outras glicoproteínas heterodiméricas recombinantes ou nativas. Permite não só estudos e caracterização direta de cada subunidade, como também detectar a presença de subunidades livres em preparações farmacêuticas, que são contaminantes indesejáveis, sendo, portanto, uma ferramenta extremamente útil para o controle de qualidade de produtos farmacêuticos. / In this work a practical and efficient method for the dissociation into &alpha;-and &beta;-subunits of small amounts (microgram range) of pituitaryderived and recombinant human follicle-stimulating hormone (hFSH), human luteotropin (hLH) and human thyrotropin (hTSH) is described. Dissociation was achieved by overnight treatment of the glycoproteins, at 37ºC, with acetic acid in different concentrations: 3M, 5M and 0,4M for hFSH, hLH and hTSH respectively. In these conditions, a dissociation efficiency of > 98% was attained. This efficiency was calculated on the basis of relative mass determinations of the heterodimers and subunits carried out via mass spectrometry (MALDI-TOF-MS). The &alpha;-and &beta;-subunits were rapidly and quantitatively separated by reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) on a C4 column with yields of the order of 80-90%. The isolated subunits were characterized concerning their purity, hidrophobicity, molecular mass and charge distribution, via size exclusion and RP-HPLC, SDS-PAGE and isoelectric focusing. When analyzed with relation to the hydrophobicity, the &alpha;-subunits presented approximately the same hydrophobicity, while &beta;-subunits showed the following scale: &beta-hFSH < &beta;-hTSH < &beta;-hLH. Concerning molecular mass, &alpha;- and &beta;-subunits of hFSH were shown to have the highest while hLH subunits the lowest. Charge isomers of the subunits of the three glycohormones were predominantly distributed in an acidic region for hFSH, in a basic region for hLH, and in a wider pH range (acidic and basic) for hTSH. Similar migration rates (mR), analyzed via SDS-PAGE, were observed for the &alpha;-subunits of the three hormones. A greater variation was found for the &beta;-subunits: mR &beta;-hFSH < mR &beta;-hTSH < mR &beta;-hLH. Differences between recombinant and pituitary preparations of three hormones were observed with relation to molecular mass, hydrophobicity, electrophoretic migration and charge distribution. The described method is mild, practical and flexible and can be adapted to dissociate any recombinant or native heterodimeric glycoprotein, allowing studies and direct characterization of each subunit as well as the detection of free subunits that are undesired contaminants in pharmaceutical preparations, being also an extremely useful tool for the quality control of pharmaceutical products.
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O microcrédito e a população de baixa renda: a experiência do banco do cidadão / Microcredit and the low-income population: the experience of the citizen's Bank

Santos, Fabrício Rios Nascimento 07 December 2012 (has links)
The Brazil is a country with many poor and the solution to this phenomenon is based on a more equitable distribution of income, thus, one of the efficient ways of alleviating the situation of those who are at the bottom of the pyramid is to give them access to credit and enable them in the use of the resource, stimulating their entrepreneurial skills in order to make them emerge from poverty. It is therefore inherent in microcredit the democratization of credit to deleted, in order to enable the generation of work and income for low-income families. Based on this context, the dissertation investigated the actions of the Bank of the citizen against the poor families of the State of Alagoas in the period from 2006 to 2009 to verify that your biggest credit was really aimed at regions with socio-economic conditions. To this end, we used the Log-linear model, which was estimated by the method of Weighted least squares (MQP). It became evident that the Bank had a more incisive action in regions with greater momentum. However, despite their greater lending have been in areas with better conditions, the same has contributed greatly to mitigate socio-economic disparities in the State, through the generation of jobs and income. Yes, in the analyzed period granted more than 10,000 loans to poor people, totaling a volume of resources released approximately 13,400,000. Its activities could be extended to other cities and in turn to a greater number of poor families from the moment that Governments understand that the Citizen should be treated as a State policy and not Government. And finally, it is worth noting that poverty is a multidimensional phenomenon and as such must be fought not only with micro-credit. / O Brasil é um país com muitos pobres e a solução para tal fenômeno encontra-se alicerçado numa distribuição de renda mais equitativa, sendo assim, uma das maneiras eficientes de aliviar a situação daqueles que se encontram na base da pirâmide é dar-lhes condições de acesso ao crédito e capacitá-los no uso do recurso, estimulando sua capacidade empreendedora de forma a fazê-los emergir da situação de pobreza. Portanto, é inerente ao microcrédito a democratização do crédito aos excluídos, de maneira a possibilitar a geração de trabalho e renda para as famílias de baixa renda. Com base nesse contexto, a dissertação investigou a atuação do Banco do Cidadão frente às famílias pobres do estado de Alagoas no período de 2006 a 2009 para verificar se sua maior concessão de crédito estava realmente voltada às regiões com piores condições socioeconômicas. Para tanto, utilizou-se do modelo Log-linear, o qual foi estimado pelo método dos Mínimos Quadrados Ponderados (MQP). Ficou evidenciado que o Banco teve uma atuação mais incisiva nas regiões com maior dinâmica. Entretanto, apesar da sua maior concessão de crédito ter sido em regiões com melhores condições, o mesmo tem contribuído sobremaneira para a mitigação das disparidades socioeconômicas do estado, através da geração de trabalho e renda. Pois, no período analisado concedeu mais de 10.000 empréstimos a pessoas pobres, perfazendo um volume de recursos liberado de aproximadamente 13,4 milhões. Sua atuação poderá ser estendida a outros municípios e por sua vez a um maior número de famílias pobres a partir do momento que os governantes compreenderem que o Banco do Cidadão deve ser tratado como uma política de estado e não de governo. E por fim, cabe ressaltar que a pobreza é um fenômeno multidimensional e como tal deve ser combatida e não apenas com o microcrédito.
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Amar, verbo intransitivo: conjugações / Fräulein: conjugations

Carla Moreira Kinzo 16 October 2014 (has links)
Este projeto de pesquisa tem como objetivo realizar um estudo comparado entre o livro Amar, verbo intransitivo, de Mário de Andrade e os roteiros jamais filmados ou publicados que o professor, roteirista e crítico de cinema Paulo Emilio Salles Gomes fez a partir do livro. A proposta da dissertação é comparar roteiros e livro, tendo como base um estudo da problemática da focalização, de modo que se busque um sentido para o conjunto de diferenças verificadas na passagem do livro aos roteiros. É central, neste projeto, tentar entender a que tipo de leitura do romance as modificações promovidas pelos roteiros servem, sobretudo no que diz respeito à construção da voz narrativa. Com isso, esperamos contribuir para os estudos da obra de Paulo Emilio Salles Gomes, bem como esmiuçar a específica leitura que os roteiros fazem do texto (e do contexto) de Mário de Andrade. / The aim of this work is to analyze the screenplays written by film critic Paulo Emilio Salles Gomes which were based on the book Fräulein, by Mário de Andrade (New York: The Macaulay Company, 1933). These screenplays were never published nor made into film. This thesis compares both the screenplays and the book, and it is based on the The Theory of Point of View in fiction. In addition, the objective is to find meaning in the differences between the book and screenplays. This will enable us to understand how these changes can offer an alternate interpretation of Andrade\'s book.
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Efeito da fluência na análise de pastilhas de materiais vegetais por espectrometria de emissão óptica com plasma induzido por laser / Effect of fluence on laser induced breakdown spectrometry analysis of pellets of plant materials

Gabriel Gustinelli Arantes de Carvalho 10 February 2011 (has links)
A espectrometria de emissão óptica com plasma induzido por laser (LIBS) constitui um método alternativo para a determinação simultânea de macro e micronutrientes em pastilhas de materiais vegetais. No entanto, pouca informação com relação às condições de fluência e de focalização do laser mais apropriadas para a análise de pastilhas de materiais vegetais são disponíveis na literatura. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da fluência, do diâmetro de focalização do laser e do tamanho das partículas das amostras nas análises de pastilhas de tecidos vegetais por LIBS. O arranjo experimental foi composto por um laser pulsado de Nd:YAG a 1064 nm (pulsos de 5 n\'delta\', 360 mJ, 10 Hz) e os sinais de emissão foram coletados por um telescópio acoplado por fibra óptica ao espectrômetro Echelle com detector ICCD. Os parâmetros instrumentais foram ajustados em 20 pulsos acumulados, 2,0 \'mü\'s de atraso e 5,0 \'mü\'s de integração. Amostras laboratoriais consistiram de pastilhas preparadas com folhas moídas criogenicamente (90 % das partículas < 50 \'mü\'m). Maiores intensidades das linhas Ca I 442,554, Mg I 277,983, P I 213,618, Al I 309,271, B I 249,773, Cu I 324,755, Fe II 261,187, Mn II 257,610 e Zn II 206,200 nm foram obtidas com fluências entre 35 e 60 J cm-2 e diâmetros de focalização entre 600 e 1050 \'mü\'m. O uso de fluências e diâmetros de focalização maiores concorreu para melhorar os coeficientes de variação (CV) das medidas. Fixando-se o diâmetro de focalização em 750 \'mü\'m, observou-se que, para a maioria dos analíticos, o CV das medidas foi reduzido 2 vezes quando a fluência foi alterada de 20 para 50 J cm-2. Nestas condições, estes resultados foram atribuídos à maior massa removida e, conseqüentemente, à amostragem mais representativa. Os coeficientes angulares das curvas de calibração também aumentaram quando a fluência foi acrescida. No entanto, não foram verificadas diferenças significativas nos coeficientes de correlação das curvas de calibração e nos limites de detecção empregando-se 25 e 50 J cm-2. Embora as intensidades dos sinais de emissão aumentem com a fluência, a emissão de fundo também aumenta. Por outro lado, o tamanho das partículas das amostras afeta as eficiências de atomização e excitação no plasma induzido por laser. Quando partículas maiores são parcialmente vaporizadas, os sinais de emissão resultantes dos processos de atomização e excitação das espécies constituintes são menores do que os provenientes de partículas menores. Nesta dissertação, melhorias significativas da intensidade dos sinais de emissão e dos CVs das medidas foram observados quando pastilhas preparadas com partículas < 75 \'mü\'m foram analisadas. Não foram observadas diferenças significativas nas intensidades dos sinais de emissão e no CV das medidas nas análises de pastilhas preparadas com partículas entre 20 e 75 \'mü\'m. Pastilhas preparadas com partículas > 75 \'mü\'m apresentaram problemas de coesão e, após ablação, apresentaram crateras não uniformes. A análise destas pastilhas resultou em CV das medidas geralmente > 15 %. Os resultados obtidos neste trabalho confirmaram que é recomendável utilizar amostras de calibração e amostras-teste com distribuição do tamanho das partículas semelhante para evitar efeitos físicos de matriz, que alteram as interações laser-amostra / Most recently, it was demonstrated that laser induced breakdown spectrometry (LIBS) constitutes an alternative for the simultaneous determination of macro- and micronutrients in pellets of plant materials. However, there is no information regarding the most appropriate fluence and laser focusing for analysis of pellets of plant materials. The aim of this work was to evaluate the effect of laser focusing and fluence on LIBS analysis of plants. The effect of particle size on LIBS analysis of pellets of plant materials as well as sample preparation approaches were also discussed. The experimental setup was designed by using a Q-switch Nd:YAG laser (5 n\'delta\', 360 mJ, 10 Hz, _ \'lâmbda\' = 1064 nm) and the emission signals were collected by lenses into an optical fiber coupled to an echelle spectrometer equipped with a high-resolution ICCD. Instrumental parameters consisted of 20 accumulated laser pulses, 2.0 \'mü\'s delay time and 5.0 \'mü\'s integration time gate. Pellets prepared from cryogenically ground plant leaves (90 % particles < 50 \'mü\'m; median = 10 \'mü\'m) were used as laboratory samples and 6 laser spot diameters (from 180 to 1050 \'mü\'m) at different laser fluences were evaluated. Results indicate that elements emission intensities increased with both laser fluence and spot diameter. Higher intensities for Ca I 442.554, Mg I 277.983, P I 213.618, Al I 309.271, B I 249.773, Cu I 324.755, Fe II 261.187, Mn II 257.610, and Zn II 206.200 nm emission lines were observed with fluences in the 35 - 60 J cm-2 range and spot diameters between 600 and 1050 \'mü\'m. Higher spot diameters improved mass removal and minimized repeatability drawbacks. It was observed that the coefficients of variation (CV) of site-to-site measurements decreased by using higher laser focusing diameters. By fixing the laser spot diameter at 750 \'mü\'m, the CV of measurements improved at least 2-fold for all analytes when 50 J cm-2 was applied in comparison to 20 J cm-2. These results can be attributed to a larger mass removal obtained at higher laser fluences and better laser sampling representativeness. Sensitivity did also increase with laser fluence but no significant differences were observed in the detection limits using 25 and 50 J cm-2. Although emission intensities increased with laser fluence the background emission and noise increased as well. On the other hand, particle size distribution of powdered samples affects the atomization and excitation efficiencies by laser induced plasmas. When larger particles are incompletely vaporized the resulting emission signals were lower than those obtained from smaller particles. In this work, significant improvements on emission intensities and CV of measurements were observed when pellets made with particles < 75 \'mü\'m were analyzed. No significant differences were observed (emission intensities and CV of measurements) in the analysis of pellets prepared with particles in the 20-75 \'mü\'m range. Pellets prepared with particles > 75 \'mü\'m presented cohesion drawbacks and resulted non uniform craters after laser ablation. The CV of measurements for most analytes in these materials was > 15 %. Therefore, similar particle size distribution between calibration and test samples is recommended to avoid physical matrix effects on laser-sample interaction
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Programa Bolsa Família: uma avaliação da focalização e dos impactos sobre a pobreza e a desigualdade de renda entre os anos de 2005 e 2015

Lucena, Camila Queiroz de Aquino 21 August 2017 (has links)
Submitted by Camila Lucena (camila.lucena@glempreendimentos.com.br) on 2017-09-19T23:33:00Z No. of bitstreams: 1 Camila Lucena_FINAL.pdf: 803884 bytes, checksum: 2e5cb8fac278d2d4e3e864c0e0b1a12b (MD5) / Approved for entry into archive by Thais Oliveira (thais.oliveira@fgv.br) on 2017-09-19T23:58:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Camila Lucena_FINAL.pdf: 803884 bytes, checksum: 2e5cb8fac278d2d4e3e864c0e0b1a12b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-20T14:35:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Camila Lucena_FINAL.pdf: 803884 bytes, checksum: 2e5cb8fac278d2d4e3e864c0e0b1a12b (MD5) Previous issue date: 2017-08-21 / The Bolsa Família Program (PBF) was institutionalized in 2004, through the unification of the management and execution of income transfer actions of other pre-existing programs in Brazil, constituting the largest care policy in the country. The objective of this study was to evaluate the targeting indicator on the target audience and the impact of the Bolsa Família Program on poverty and income inequality, for the regions of Brazil between the years 2005 and 2015, based on data from the National Household Sample Survey (PNAD). The results suggest over the period studied in Brazil, the focus of PBF was not severely affected. However, in the North and Northeast regions, a large part of the target public of the program is no longer beneficiary therefor affected the targeting indicator, leading it to a small drop. In the other regions, the targeting indicator improved, mainly in the Center-West, which obtained better percentage variation. In addition, the program could obtain better targeting results if the government were able to improve the efficiency of local selection, that is, to include a larger number of households that belong to the target audience of the program, as in the Central-West region. This improvement reflected in the poverty and inequality indicators, with it made it to be the only region making the program increase its impact in the year 2015. For Brazil in general, the impacts on the poverty indicators are minimal, especially in 2015, but reductions are noticed in both years of this study. Although PBF is a useful tool for reducing poverty and inequality, it needs to be improved, either by improving the targeting indicator or by applying sustainable incentives so that families may in future cease receiving the benefit, breaking the perpetuity of the poverty cycle in which they live. / O Programa Bolsa Família (PBF) foi institucionalizado em 2004, a partir da unificação da gestão e da execução das ações de transferência de renda de outros programas pré-existentes no Brasil, constituindo-se na maior política assistencial em nível nacional. Este trabalho teve como objetivo avaliar a focalização sobre o público- alvo e o impacto do Programa Bolsa Família sobre a pobreza e a desigualdade de renda para as regiões do Brasil no período de 2005 e 2015, a partir dos dados da Pesquisa Nacional por Amostra de Domicílios (PNAD). Os resultados sugerem que ao longo do período estudado no Brasil, a focalização do PBF não foi severamente afetada. Entretanto, nas regiões Norte e Nordeste, grande parte do publico alvo do programa deixou de ser beneficiário o que afetou a focalização, ocasionando uma pequena queda. Nas demais regiões, a focalização melhorou, principalmente no Centro-Oeste, que obteve melhor variação percentual. Adicionalmente, programa poderia obter melhores resultados de focalização caso o governo conseguisse melhorar a eficiência da seleção local, ou seja, incluir maior número de domicílios pertencentes ao público alvo do programa como na região Centro-Oeste. Esta melhora refletiu nos indicadores de pobreza e desigualdade, sendo a única região a fazer com que o programa aumentasse seu impacto no ano de 2015. Para o Brasil de maneira geral, os impactos sobre os indicadores de pobreza são mínimos, principalmente em 2015, mas apresenta reduções em ambos os anos estudados. Apesar da existência do PBF ser um instrumento útil para a redução da pobreza e desigualdade, é necessário aperfeiçoá-lo, seja melhorando a focalização ou aplicando incentivos sustentáveis para que as famílias possam futuramente deixar de receber o benefício, quebrando a perpetuidade do ciclo de pobreza em que vivem.
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Contextos de formação de estruturas de tópico e foco no português clássico / Contexts of structure formation of Topic and Focus in Classical Portuguese

Gibrail, Alba 16 August 2018 (has links)
Orientador: Charlotte Marie Chambelland Galves / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Estudos da Linguagem / Made available in DSpace on 2018-08-16T23:55:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gibrail_Alba_D.pdf: 1754412 bytes, checksum: eabaf3c4452eb02a82325d642f09139f (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Esta dissertação descreve os contextos de formação de estruturas de tópico e foco do português clássico. Investigamos o comportamento linguístico de autores portugueses nascidos entre os séculos 16 e 19. O resultado de nossa investigação define uma gramática de natureza-V2 no licenciamento dessas construções. O resultado obtido também revela que a posição de realização dos clíticos é fortemente correlacionada com a posição ocupada pelo sintagma topicalizado em CP. Considerando os efeitos-V2 que emergem na formação dessas construções, assumimos o português clássico como uma gramática de natureza V2, com propriedades similares ao português antigo. Como hipótese de trabalho, propomos que o verbo finito se move para o núcleo Fin nas sentenças principais e subordinadas dessa gramática. Por outro lado, esta pesquisa mostra que ocorrem mudanças na frequência de uso e nas configurações estruturais dessas construções a partir do século 18. Assumimos que as mudanças estruturais são desencadeadas por uma nova gramática em uso na língua nesse período histórico. O resultado alcançado em nossa investigação permite-nos apresentar os fatores sintáticos e prosódicos que motivam a mudança gramatical. Apresentamos, nesta dissertação, análises para justificar a ausência de efeitos de localidade na formação de estruturas de tópico e foco em contextos de sentenças de ordens V2/V3/V4. As análises propostas estão ancoradas no Projeto Cartográfico de Rizzi (1997; 2004a) / Abstract: This research describes the contexts of structure formation of Topic and Focus in Classical Portuguese. We investigated the linguistic behavior of Portuguese authors born between 16th century and 19th century. The result of our research defines a V2 grammar which produces different forms of these structures. The result obtained also shows that the clitic placement is strongly correlated with the position occupied by topicalized phrase in CP. Considering the V2 effects on the formation of these structures, we assume Classical Portuguese as a V2 grammar, with similar syntactic proprieties to the Old Portuguese. As a working hypothesis, we propose that the finite verbs moves to Fin head in the main and subordinate sentences. Moreover, this research shows some changes related to the frequency and to the structural configurations of these V2 sentences in this language from 18th century. We assume that these structural changes are triggered by a new grammar in use in this language in this historical period. The result achieved in this research allows us to present the factors which motivated the grammatical change. We present some analyses to justify the absence of locality effects in the formation of Topic and Focus structures in sentences that project V2/V3/V4 orders. The proposed analyses are anchored in Rizzi's Cartography Project (1997, 2004a) / Doutorado / Linguistica / Doutor em Linguística

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