Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCV08MA029.pdf: 1036408 bytes, checksum: d90c1227485e2180d47bf0c5aad5a4d1 (MD5) Previous issue date: 2008-12-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A singular feature during mammalian development is the provision of nutrients from the maternal system to the conceptus through the placenta. To the fetus, the placenta consists of a multi-functional organ with an intense metabolism, characterized in an adult as separated functions in multiple organs. This study aimed to verify the presence of key enzymes in the bovine placenta responsible for glyconeogenesis, which is a metabolic pathway used for Dglucose synthesis from non-carbohydrate compounds. Such pathway is common to the liver metabolism used to maintain glucose homeostasis in plasma, especially during fasting or postprandial absorption. No studies on the occurrence of glyconeogenesis in the bovine placenta have been reported thus far. In this study, a qualitative gene expression analysis was carried out for three key glyconeogenic enzymes: fructose-1,6-bisphosphatase (F1,6B), glucose-6- phosphatase (G6-P) e phosphoenolpyruvate carboxikinase (PEP-CK) in the bovine placental tissue at three distinct gestation periods. For that, placentome fragments from 5 pregnant females from each period were used for the detection of transcripts for the three enzymes above by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Amplified PCR products obtained for each enzyme from the placenta and adult liver (positive control) were analyzed in 1% agarose gel, followed by purification, DNA cloning e sequencing for confirmation of amplification specificity. The RT-PCR analysis followed by DNA sequencing revealed the presence of all three glyconeogenic enzymes in the bovine placenta from all three gestational periods. Based on our results, the glyconeogenic pathway may occur in the placental tissue in cattle during pregnancy. However, more studies are still needed for the confirmation of the occurrence and temporal importance of the glyconeogenesis in the bovine placenta / Uma característica singular do desenvolvimento dos mamíferos é a provisão de nutrientes do organismo materno por intermédio da placenta. Para o feto, a placenta consiste na combinação, em apenas um órgão, de muitas atividades funcionais, que no adulto são separadas e, além disso, possui um intenso metabolismo. Este trabalho teve como objetivo verificar a expressão de enzimas chave na placenta bovina para a gliconeogênese, que consiste em uma via metabólica capaz de sintetizar D-glicose, utilizando-se compostos que não são carboidratos. Essa via se processa no fígado e é utilizada pelo organismo para manter os níveis glicêmicos normais em condições de jejum e de pós-absorsão. Atualmente não existem estudos sobre a gliconeogênese na placenta bovina. Neste estudo foi avaliada a expressão gênica na placenta bovina de três enzimas gliconeogênicas: frutose-1,6-bisfosfatase (F1,6B), glicose-6-fosfatase (G6-P) e fosfoenolpiruvato carboxiquinase (PEP-CK) nos três trimestres gestacionais. Para tanto, foram utilizados fragmentos de placentônios de 5 fêmeas bovinas para cada terço de gestação para a avaliação da expressão gênica das três enzimas gliconeogênicas após a transcripção reversa e reação em cadeia da polimerase (RT-PCR). Os produtos de PCR amplificados obtidos para cada enzima na placenta bem como para o fígado de animal adulto, que foi utilizado como controle positivo, foram analisados em gel de agarose a 1%, purificados, clonados e seqüenciados para a confirmação da especificidade de amplificação. A análise da expressão gênica através do RT-PCR e o sequenciamento demonstrou a presença de mRNA para as três enzimas gliconeogênicas na placenta bovina nos três períodos gestacionais. Baseado em nossos resultados, é possível que a rota gliconeogênica ocorra no tecido placentário de bovinos durante a gestação. Porém, ainda são necessários mais estudos para a confirmação da ocorrência e importância temporal da gliconeogênese na placenta bovina