Orientador: Altair Antoninha Del Bel Cury / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-21T03:58:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Porta_SheilaRodriguesdeSousa_D.pdf: 1066971 bytes, checksum: 162caaa354cf796e000458fc34d4abd9 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Estratégias que visem prevenir e reduzir a formação de biofilmes sobre próteses são necessárias, pois estas podem atuar como reservatório de micro-organismos. Outro aspecto importante é o estabelecimento de um protocolo de higienização que além de eficiente também seja bem aceito pelos pacientes. Assim, objetivou-se avaliar o efeito do hipoclorito de sódio (NaOCl) a 0,5% sobre o biofilme, estabilidade de cor e rugosidade de superfície (Ra) de próteses totais removíveis e a satisfação do paciente com o tratamento. Foram selecionados 15 voluntários que, após aceitar e assinar as condições do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da FOP/UNICAMP, foram orientados a complementar a higiene de suas próteses com a imersão em NaOCl 0,5%, durante 3 minutos, uma vez ao dia. O período experimental foi de 90 dias e as variáveis resposta foram mensuradas antes do início do uso do NaOCl e após 30, 60 e 90 dias. A avaliação microbiológica foi realizada no biofilme da prótese e na saliva do voluntário. Toda a superfície da prótese era percorrida por um cotonete de algodão que, em seguida, era individualmente acondicionado em tubo estéril contendo 3 mL de PBS. Amostras da saliva foram acondicionadas em tubos estéreis. Todos os tubos foram sonicados (7W, 30 s), as soluções iniciais serialmente diluídas e plaqueadas, em triplicata, em CHROMagar e ágar sangue. Após um período de incubação de 48 h a 37°C, o número de unidades formadoras de colônia foi determinado. A estabilidade de cor foi avaliada com o uso de um espectrofotômetro de refletância, mensurada no sistema CIELab e correlacionada para o ambiente clínico de acordo com as unidades da National Bureau of Standards (NBS). Para avaliação da Ra, foi realizado um delineamento in situ e espécimes (5 x 5 x 2mm) (n = 90) de resina acrílica termo-polimerizável foram confeccionados e colados na superfície vestibular das próteses inferiores. A rugosidade de superfície foi mensurada com o auxílio de um rugosímetro de contato. Para avaliar a aceitação do paciente com relação ao protocolo, foi pedido aos voluntários que traduzissem em valores o seu grau de satisfação com o tratamento em um intervalo variando de 0 (totalmente insatisfeito) a 10 (totalmente satisfeito). Uma redução significativa no número de micro-organismos totais (ANOVA; p? 0,05) e Candida spp foi observada ao longo do tratamento. Embora tenham sido observadas alterações nos valores de L*, a* e b* nas mensurações de cor, não houve diferença significativa na cor das bases das próteses (Friedman; p? 0,05). Não houve diferença significante na rugosidade de superfície (Kruskal Wallis; p ? 0,05). A satisfação do voluntário com o método de limpeza aumentou durante o período avaliado, chegando a 87% de indivíduos totalmente satisfeitos. Conclui-se que o método de higienização proposto com NaOCl teve ampla aceitação pelos voluntários; além de ser efetivo na redução de micro-organismos, a alteração de cor exibida foi clinicamente aceitável, bem como não houve alteração significativa na rugosidade de superfície / Abstract: Strategies to prevent and to reduce biofilm formation on dentures are necessary, since they may become a reservoir of microorganisms. Additionally, it is important, in establishing a protocol for denture cleaning, to evaluate the effect of the cleaning agent on the prosthetic material and the patients' acceptability. Therefore, the objective of this study was to evaluate the effect of sodium hypochlorite (NaOCl) 0.5% on biofilm, color stability and surface roughness (Ra) of removable dentures besides the patients' satisfaction with the treatment. Fifteen volunteers were recruited and, after accepting the conditions of the Term of Consent approved by the Ethics Committee of FOP / UNICAMP, were instructed to daily immerse their dentures in a 0.5% NaOCl solution for 3 minutes. The follow-up time was 90 days and outcome variables were measured on baseline and on days 30, 60 and 90. For microbiological evaluation, samples were obtained from dentures and saliva. Swabs were taken from the whole surface of the dentures and, then, individually placed in a sterile tube containing 3 ml of PBS. Next, each volunteer was asked to spit into an empty sterile tube. All tubes were sonicated (7W, 30 s), the initial solutions serially diluted and plated in triplicate on blood agar and CHROMagar and, after an incubation period of 48 h at 37°C, the number of colony forming units (cfu/mL) was determined. Color stability was measured with a reflectance spectrophotometer and evaluated using the CIELab system. It was also quantified in accordance with units of the National Bureau of Standards (NBS). To Ra assessment, an in situ design was developed. Specimens (5 x 5 x 2 mm) (n = 90) of heat-polymerized acrylic resin were fabricated and fixed in the buccal posterior surface of lower dentures. The surface roughness was measured using a profilometer. To evaluate the acceptability of the cleaning protocol, each volunteer was asked to translate in values their degree of satisfaction with the treatment at an interval ranging from 0 (totally dissatisfied) to 10 (totally satisfied). A significant reduction in the number of total micro-organisms (ANOVA; p ? 0.05) and Candida spp was observed throughout the treatment. Although changes had been observed in L *, a * b * values, there were no significant color changes (Friedman; p ? 0.05). The surface roughness did not present significant changes after the evaluation period (Kruskal Wallis; p ? 0.05). The volunteers' satisfaction increased throughout the experimental period, reaching 87% of individuals totally satisfied. Data revealed that the 0.5% NaOCl immersion protocol was effective in reducing microorganisms, color changes exhibited for all dentures can be considered clinically acceptable and the surface roughness did not show significant changes. Also, the cleaning method was well accepted by volunteers / Doutorado / Protese Dental / Doutora em Clínica Odontológica

Este estudo avaliou os efeitos de pastilhas efervescentes na superfície de liga de cobalto cromo (Co-Cr) e resina termopolimerizável, simulando um período de até 5 anos de imersão, como também analisar sua ação antimicrobiana. A partir de uma matriz metálica, padrões de cera circulares (12 x 3 mm) foram obtidos e fundidos em liga de Co-Cr (DeguDent®). As amostras foram imersas em: Polident 3 minutes® (P3M), Steradent® (St), Polident for Partials® (PP), Efferdent® (Ef), Corega Tabs® (CT), Nitradine® (Ni), Fixodent® (Fi) e Kukident® (K). Foi avaliada a resistência à corrosão (Ecorr, Ipass) (n=5) por meio do Potenciostato/Galvanostato. Foram realizadas análises qualitativas complementares com Microscópio Eletrônico de Varredura (MEV) e Espectrometria de Energia Dispersiva de Raios-X (EDS). Após o ensaio de corrosão, cada disco metálico foi incluído em mufla preparada por matrizes circulares de cera (20 x 5 mm), incorporando-o à resina acrílica termopolimerizável (Clássico Ltda®). Os grupos das 4 pastilhas que apresentaram a menor taxa de corrosão e da água destilada (controle) (n=9) foram analisados quanto à rugosidade da superfície metálica e da resina acrílica (Sa, &micro;m) por meio de microscopia confocal a laser. Foram avaliadas a alteração de cor (&Delta;E) da resina por meio de espectrocolorímetro no início e após a simulação de ½, 1, 2, 3, 4 e 5 anos e alteração de massa (g), no início e final, em balança de alta precisão. Para avaliação antimicrobiana, por meio da contagem de Unidades Formadoras de Colônia (UFC/mL), os espécimes mistos foram contaminados com biofilme misto composto por: S. mutans (Sm), S. aureus (Sa), C. albicans (Ca) e C. glabrata (Cg) e, posteriormente, imersos nas soluções higienizadoras, onde foram semeados em meios específicos para contagem das UFC. De acordo com os resultados obtidos (&alpha;=0,05), P3M causou a menor taxa de corrosão e Ni, o menor potencial de corrosão. Com o MEV, verificou-se evidenciação da microestrutura da liga metálica. Quanto à rugosidade superficial do metal, CT (p=0,009) e Ni (p=0,036) causaram aumento na rugosidade em relação ao tempo (Friedman). Na resina, houve aumento da rugosidade após 5 anos (p<0,01). Entre as soluções (Kruskal-Wallis), não houve diferença para ambos os materiais. Não houve diferença na cor da resina acrílica, tanto em relação às soluções (Kruskal Wallis) quanto aos tempos (Friedman). Não foram observadas alterações de massa (Kruskal-Wallis). Quanto à ação antimicrobiana (Kruskal-Wallis), Ni propiciou redução de UFC de Sm (p=0,001). Conclui-se que, embora todas as pastilhas efervescentes não tenham alterado a superfície do metal e da resina acrílica de maneira significativa, nenhuma apresentou ação antimicrobiana contra os microrganismos avaliados do biofilme misto; somente Ni reduziu a quantidade de S. mutans / The aim of this study were: to evaluate the effects of denture cleansers on the surface of cobalt chromium (Co-Cr) and heat-polymerized acrylic resin, simulating a period until 5 years of immersion, as well as to analyze its antimicrobial action. From a metal matrix, disc-shaped wax patterns (12 x 3 mm) were made and later were casting in Co-Cr alloy (DeguDent&trade;). The specimes were immersed in: Polident 3 minutes&trade; (P3M), Steradent&trade; (St), Polident for Partials&trade; (PP), Efferdent&trade; (Ef), Corega Tabs&trade; (CT), Nitradine&trade; (Ni), Fixodent&trade; (Fi) and Kukident&trade; (K). The corrosion resistance (Ecorr, Ipass) (n = 5) was evaluated by Potentiostat / Galvanostat. Further qualitative analyzes were performed with scanning electronic microscopy (SEM) and energy dispersive x-ray spectrometry (EDS). After the corrosion test, each metal disk was included in heat-cured acrylic resin (Clássico Ltda&trade;) using moulds previously prepared from circular wax matrices (20 x 5 mm). The four dentures cleansers with the lowest corrosive potential were analyzed for surface roughness of the metal and acrylic resin (Sa, &micro;m) by laser confocal microscopy. The color change (&Delta;E) of the resin was evaluated by means of a spectrocolorimeter at the beginning and after the simulation of ½, 1, 2, 3, 4 and 5 years and mass change (g), at the beginning and end, in high-precision balance. For antimicrobial evaluation, the mixed specimens (n = 9) were contaminated with multispecies biofilm [S. mutans (Sm), S. aureus (Sa), C. albicans (Ca) and C. glabrata (Cg)] and subsquently immersed in denture cleansers, where they were seeded in specific CFU / mL media. According to the results obtained (&alpha;=0.05), there was a significant difference: P3M presented the lowest corrosion rate and Ni, the lowest corrosion potential. According to SEM, the tablets effervescent provided evidence of the microstructure of the alloy. As for the surface roughness in the metal surface, CT (p = 0.009) and Ni (p = 0.036) showed increase in roughness in relation to time (Friedman). At the resin surface, the roughness growed after 5 years. Among the solutions (Kruskal-Wallis), there was no difference for both materials. There was no difference in the color of the acrylic resin (&delta;E), both for solution (Kruskal-Wallis), and for time (Friedman). Differences in weight weren\'t observed (Kruskal-Wallis). In antimicrobial action (Kruskal-Wallis), Ni group showed significant reduction for Sm (p=0.001). It\'s concluded that, although all the denture cleansers didn\'t significantly changed the surface of the metal and acrylic resin, none showed antimicrobial action against the evaluated microorganisms of the mixed biofilm; only Ni reduced the amount of S. mutans

O objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de estudo in vitro, o efeito de soluções químicas de higienização quanto à ação antimicrobiana e os efeitos sobre as propriedades da resina acrílica termicamente ativada. Para a ação antimicrobiana, corpos de prova circulares (15mm x 3mm) foram esterilizados por radiação em forno micro-ondas e contaminados com suspensão de 106 UFC/mL dos microrganismos: Candida albicans, Candida glabrata e Streptococcus mutans e incubados a 37ºC por 48hs. Em seguida, os espécimes foram imersos nas seguintes soluções: Grupo I - PBS (controle); Grupo II - Solução à base de Ricinus communis a 6,25%; Grupo III - Hipoclorito de sódio 0,20%; durante 20 minutos, e, Grupo IV - Peróxido Alcalino Efferdent® Power Clean Crystals, durante 3 minutos, e lavadas (PBS) e imersas em meio Letheen. A suspensão resultante foi diluída (100 e 10-3) em solução salina estéril e alíquotas foram semeadas em meio específico. Após incubação (37ºC por 24hs), as colônias foram contadas para o cálculo de UFC/mL. Para análise das propriedades da resina acrílica, corpos de prova circulares (15mm x 3 mm) e retangulares (65mm x 10mm x 3,3 mm) foram imersos nas soluções, simulando 05 anos de imersões curtas. Antes e após as imersões, foram submetidos a análise de cor (Colorímetro Color Guide 45/0) e NBS (NBS=&Delta;E* x 0,92); de dureza Knoop (microdurômetro Microhardness Tester Shimadzu); de rugosidade de superfície (rugosímetro Surftest SJ - 201P, Mitutoyo Corporation; microscópio confocal a laser 3D Olympus LEXT OLS4000®, Japão); de morfologia de superfície (microscópio eletrônico de varredura EVO 10 - MEV, Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Alemanha); e de resistência à flexão (Máquina Universal de Ensaios DL 2000, EMIC). Os dados com distribuição normal foram analisados por ANOVA, seguido pelo teste de Tukey; os dados com distribuição não-normal, foram analisados pelos testes de Kruskal-Wallis e Dunn (&alpha;=0,05). Os resultados mostraram que o hipoclorito reduziu a zero a contagem de UFC dos três micro-organismos, os grupos do Ricinus communis e do peróxido Efferdent tiveram ação moderada frente Candida glabrata (p<0,001) e S. mutans (p=0,001), respectivamente. Quanto as propriedades da resina, a solução de Ricinus communis causou leve alteração de cor (p=0,030), segundo NBS; maiores alterações de dureza (p<0,001), rugosidade superficial em rugosímetro (p=0,006) e microscópio 3D (p=0,040) e da resistência à flexão (p<0,001). A maior alteração da morfologia de superfície (MEV) foi observada no grupo do peróxido Efferdent. Pode-se concluir que a solução de hipoclorito de sódio a 0,20% foi a mais efetiva, uma vez que apresentou ação antimicrobiana frente aos três micro-organismos avaliados; as soluções de Candida glabrata e Streptococcus mutans, respectivamente. Quanto à análise das propriedades da resina acrílica, nenhuma das soluções causou alteração clinicamente significante nas propriedades avaliadas / The purpose of this in vitro study was to evaluate the antimicrobial action and adverse effects of denture cleansers on a heat-polymerized acrylic resin. The antimicrobial action was evaluated by samples fabricated on a metallic circular matrix (15mm x 3mm), which were sterilized by microwave (650W, for 6 minutes) and inoculated with a 106 CFU/ml of microorganisms´suspension: Candida albicans, Candida glabrata, and Streptococcus mutans. After contamination, the specimens were incubated at 37ºC for 48hs and then immersed on the following solutions: Group I - Saline (control); Group II - Ricinus communis 6.25% solution based; Group III - Sodium hypochlorite 0.2%; Group IV - Alkaline Peroxide Efferdent® Power Clean Crystals. The samples were then washed (PBS) and immersed in the Letheen medium. The resulting solution was diluted (100 and 10-3) in sterile saline, and aliquots were cultured in the specific medium. After incubation (37ºC for 24hs), according to with characteristic morphology, the number of colonies was measured and the number of CFU / mL calculated. For the adverse effects, circular (15 x 3 mm) and rectangular (65 x 10 x 3.3 mm) test specimens of heat-polymerized acrylic resin were immersed in the solutions, simulating 05 years of short immersions per sanitation period. Before and after the immersions, the samples were evaluated for color alteration (Color Guide Color Guide 45/0) and correlation of the data according to NBS units (NBS = &Delta;E * x 0,92); Knoop hardness (Microhardness Microhardness Tester Shimadzu). Analysis of surface roughness (Surftest SJ-201P rugosimeter, Mitutoyo Corporation; Olympus LEXT OLS4000® 3D laser confocal microscope, Japan), surface morphology (scanning electron microscope EVO 10 - MEV, Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany); and flexural strength (Universal Testing Machine DL 2000, EMIC) was done. The data that presented normal distribution were analyzed by ANOVA and post-hoc Tukey test; Data that presented non-normal distribution were analyzed by the Kruskal-Wallis and Dunn test (&alpha;= 0.05). The results showed that hypochlorite reduced the CFU of the three microorganisms to zero, the solution of Ricinus communis and Efferdent peroxide had an average action against Candida glabrata (p <0.001) and Streptococcus mutans (p = 0.001), respectively. The solution of Ricinus communis showed color changes (p = 0.030), classified as &ldquo;light&rdquo; according to NBS; (p <0.001), and higher values of surface roughness, when analyzed by the rugosimeter (p = 0.006) and 3D microscope (p = 0.040), and flexural strength (p <0.001). The major change in surface morphology (SEM) was found in the Efferdent peroxide group. It can be concluded that the 0.20% sodium hypochlorite solution was the most effective denture cleanser since it presented antimicrobial action against the three micro-organisms evaluated Candida albicans, Candida glabrata, and Streptococcus mutans, and did not cause clinically significant changes on the heat-polymerized acrylic resin

A manutenção das próteses implantossuportadas e da saúde dos tecidos peri-implantares está diretamente relacionada ao sucesso do tratamento reabilitador. O objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de estudo clínico randomizado, a eficácia de um método experimental (escovação associada à irrigação oral), na manutenção dos tecidos peri-implantares e overdentures. Foram analisadas capacidade de remoção de biofilme e manutenção da saúde dos tecidos orais, ação antimicrobiana e satisfação do paciente. Foram selecionados 38 pacientes usuários de prótese total superior convencional e overdenture inferior, retida por implantes ou mini-implantes e sistema de encaixe tipo o\'ring. Os pacientes utilizaram os seguintes métodos: ES (Controle): método mecânico da escovação - escova específica para próteses totais, escova dental de cerdas macias e dentifrício e WP (Experimental): associação da escovação com a irrigação oral (Waterpik). Os pacientes foram orientados a higienizar suas próteses e tecidos peri-implantares, por meio do método da escovação, por 2 minutos, 3 vezes ao dia, sendo que no método experimental, os pacientes utilizaram a irrigação oral, uma vez ao dia, após a escovação, direcionando o jato de água à margem gengival e região dos componentes protéticos das overdentures. Todos os pacientes utilizaram os dois métodos de higiene, em uma sequência aleatória, por um período de 14 dias, com um período intercalado de 7 dias de wash out. As avaliações foram realizadas antes (baseline) e após a utilização de cada método. A capacidade de remoção de biofilme e a manutenção da saúde oral dos tecidos foram avaliadas por meio do Índice de Placa Modificado (IP), Índice Gengival (IG), Profundidade de Sondagem (PS) e Índice de Sangramento à Sondagem (SS). Para a análise da ação antimicrobiana, o biofilme subgengival foi coletado por meio de cones de papel e biofilme presente nos componentes das overdentures por meio de microbrush, e as amostras coletadas foram processadas pela técnica de hibridização DNA Checkerboard (39 espécies microbianas avaliadas). Os pacientes responderam a um questionário específico por meio de Escala Visual Analógica (EVA) de 100,0 mm, após o uso de cada método. Os dados relacionados aos parâmetros clínicos e à ação antimicrobiana foram analisados por meio do teste de Friedman (&alpha;=0,05), seguido de comparações realizadas por meio do teste de Wilcoxon; as comparações entre implantes convencionais e mini-implantes foram realizadas por meio do teste de Mann-Whitney (&alpha;=0,05). A análise das respostas ao questionário de satisfação foi realizada por meio do teste de Wilcoxon (&alpha;=0,05). Os resultados mostraram que, quanto aos parâmetros clínicos, houve diferença estatisticamente significante entre os valores obtidos no baseline e os valores após os métodos avaliados (p<0,001); entre os métodos ES e WP, não houve diferença significante (IP, IG e PS: p=1,000; SS: p=0,828); houve diferença estatisticamente significante entre os diferentes tipos de implantes apenas do IP após ES (p<0,05). Houve diferença estatisticamente significante entre os métodos (p<0,05), quando comparados os valores da quantidade total de células microbianas presentes no biofilme subgengival, sendo WP mais efetivo que ES (p<0,05), porém não houve diferença entre baseline e WP (p>0,05); considerando os micro-organismos avaliados, WP promoveu redução mais efetiva que ES apenas da espécie C. rectus (p=0,001). A quantidade total de células microbianas presentes nos componentes das overdentures nas avaliações foi semelhante (p=0,607) e a microbiota identificada apresentou-se qualitativamente semelhante após cada um dos métodos. Não houve diferença estatisticamente significante entre os diferentes tipos de implantes quanto ao total de células microbianas presentes no sulco peri-implantar e nos componentes das overdentures, identificadas em cada uma das avaliações (p>0,05). As médias das respostas ao questionário de satisfação após ambos os métodos foram altas (acima de 80,0 mm) para todas as questões, porém não houve diferença estatisticamente significante entre as respostas dadas após o uso de ES e WP (p>0,05). Concluiu-se que o método experimental foi eficaz na redução dos parâmetros clínicos avaliados; apresentou ação antimicrobiana mais efetiva na redução da quantidade total de micro-organismos presentes no biofilme subgengival; porém, não apresentou ação antimicrobiana frente aos micro-organismos presentes nos componentes protéticos das overdentures; e proporcionou alto nível de satisfação do paciente. / The maintenance of implant-supported prostheses and peri-implant health is directly related to the success of rehabilitation treatment. The aim of this study was to evaluate, through randomized clinical trial, the efficacy of an experimental method (brushing associated with oral irrigation) in the maintenance of the peri-implant tissues and overdentures. Biofilm removal capacity and oral tissues health maintenance, antimicrobial action and patient satisfaction were analyzed. Thirty-eight patients, users of conventional maxillary complete denture and mandibular overdenture retained by implants or mini-implants and o\'ring-retained system, were selected. The patients utilized the following methods: MB (Control): mechanical brushing method specific brush for dentures, soft bristle toothbrush and dentifrice, and WP (Experimental): association of mechanical brushing with oral irrigation (Waterpik). Patients were instructed to clean their dentures and peri-implant tissues, by means of brushing method for 2 minutes, 3 times a day, and in the experimental group, patients used the oral irrigation, once a day, after brushing, directing the water jet to the gingival margin and the region of the prosthetic components of the overdentures. All patients used both hygiene methods in a random sequence for a period of 14 days, with a 7-day wash-out interposed period. The evaluations were performed before (baseline) and after using each method. Biofilm removal capacity and oral tissues health maintenance were evaluated through Modified Plaque Index (PI), Gingival Index (GI), Probing Depth (PD), and Bleeding on Probing Index (BP). For the antimicrobial action analysis, the subgingival biofilm was collected by means of sterile paper cones and the biofilm present on the overdentures components by microbrush, and the collected samples were processed by the Checkerboard DNA hybridization technique (39 microbial species evaluated). Patients answered to a specific questionnaire using the Visual Analogue Scale (VAS) of 100.0 mm, after application of each method. The data related to clinical parameters and antimicrobial activity were analyzed using the Friedman test (&alpha;=0.05), followed by comparisons using the Wilcoxon test; comparisons between conventional implants and mini-implants were performed using the Mann-Whitney test (&alpha;=0.05). The analysis of the satisfaction questionnaire responses was performed using the Wilcoxon test (&alpha;=0.05). The results showed that, regarding clinical parameters, there was a statistically significant difference between the values obtained at baseline and the values after the evaluated methods (p<0.001); between the MB and WP methods there was no significant difference (PI, GI and PD: p=1.000; BP: p=0.828); there was a statistically significant difference between the different types of implants only of PI after MB (p<0.05). There was a statistically significant difference between the methods (p<0.05) when comparing the values of the total amount of microbial cells in the subgingival biofilm, WP being more effective than MB (p<0.05), but there was no difference between baseline and WP (p>0.05); considering the evaluated microorganisms, WP promoted a more effective reduction than MB only of the C. rectus species (p=0.001). The total amount of microbial cells present in the components of overdentures in the evaluations was similar (p=0.607) and the identified microbiota appeared qualitatively similar after each method. There was no statistically significant difference between the different types of implants for the total microbial cells in the peri-implant sulcus and in the overdentures components identified in each of the evaluations (p>0.05). The means of the satisfaction questionnaire responses after both methods were high (above 80.0 mm) for all the questions, but there was no statistically significant difference between the answers given after the use of ES and WP (p>0.05). It was concluded that the experimental method was effective in reducing the clinical parameters evaluated; presented more effective antimicrobial action in reducing the total amount of microorganisms present in the subgingival biofilm; however, showed no antimicrobial action against microorganisms present in the prosthetic components of the overdentures; and provided high level of patient satisfaction.

O presente estudo in vitro objetivou avaliar a longo prazo o potencial antimicrobiano residual e a citotoxicidade de soluções químicas de limpeza de prótese quando incorporadas à resina acrílica termopolimerizável após sucessivos ciclos de imersão noturna diária. Discos (10mm x 1mm) de resina acrílica termopolimerizável para base de prótese (Lucitone 550) foram submetidos a três ciclos diários de desinfecção (8h/cada) em hipoclorito de sódio a 1% (NaClO), digluconato de clorexidina a 2% (CLX) ou água destilada (controle) durante 91 (T91) ou 183 dias (T183), simulando o período de 9 meses ou 1,5 ano de imersão noturna diária realizada pelo paciente. Inicialmente, foi utilizado o método de concentração inibitória mínima em caldo para determinar o possível efeito residual (incorporação) das soluções à resina acrílica. Metade dos discos imersos em cada agente de limpeza em um dos tempos de imersão (n=5) foi inoculada (1x107cels/mL) com um dos patógenos associados à estomatite protética: Candida albicans (Ca) e Staphylococcus aureus (Sa). Os discos foram incubados a 37oC para análise em espectrofotômetro após 24h, 7 e 14 dias. Os valores de absorbância foram convertidos em porcentagens de inibição microbiana. Confirmada a ação antimicrobiana residual dos agentes de limpeza incorporados à resina acrílica, foi então analisada sua citotoxicidade in vitro sobre fibroblastos gengivais humanos (L929). Os efeitos citotóxicos foram avaliados por meio do ensaio colorimétrico MTT [brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazólio] para a determinação da viabilidade celular, após as células serem expostas por 24h às amostras de cada condição experimentais (n=18) previamente imersas em uma das soluções por um dos períodos avaliados (T91 ou T183). A citotoxicidade foi determinada com base na atividade mitocondrial em relação a corpos de prova não submetidos à imersão nas soluções testadas. Os resultados do ensaio do MTT foram analisados estatisticamente por ANOVA-1 fator seguida pelo teste post-hoc de Tukey HSD (a=0,05). Para os períodos T91 e T183, não houve inibição microbiana com a imersão em água (controle) em até 14 dias de incubação. A CLX inibiu progressivamente o crescimento microbiano ao longo dos 14 dias para ambos os períodos de imersão (Ca: 19 a 73,58%; Sa: 0 a 87,08%), sendo observada maior ação antimicrobiana em T183. O NaClO apresentou discreta inibição microbiana apenas no período de 14 dias tanto em T91 (Ca: 0%; Sa: 2,70%) quanto em T183 (Ca: 8,50%; Sa: 15,08%). De acordo com os resultados do teste de MTT, as soluções químicas de limpeza testadas apresentaram uma redução significativa da viabilidade celular quando comparado às células controles propagadas apenas em meio de cultura (p<0,002). A CLX resultou na menor viabilidade celular em ambos os períodos de imersão (p<0,018). As amostras de resina acrílica imersas em água ou NaClO em T91 e T183 apresentaram viabilidade celular estatisticamente similar às amostras não imersas (p>0,05). Pode-se concluir que a CLX incorporada à resina acrílica para base de prótese apresentou um efeito antimicrobiano residual em ambos os períodos de imersão noturna, o que não foi observado com o NaClO. Por outro lado, a CLX residual resultou em efeito intensamente citotóxico aos fibroblastos gengivais humanos quando comparada ao NaClO e à agua destilada, que se apresentaram discretamente citotóxicos. Esses resultados sugerem precaução na seleção de agentes de limpeza para prótese como meio de prevenção e tratamento adjunto da estomatite protética, pois mesmo em concentrações baixas, recomendadas para imersão noturna, podem apresentar algum grau de toxicidade às mucosas de suporte protético. / This in vitro study aimed to evaluate the long-term residual antimicrobial activity and cytotoxicity of chemical denture cleansers incorporated into a heat-polymerized acrylic resin after successive cycles of daily overnight soaking. Discs (10mm x 1mm) were prepared from heat-polymerized acrylic resin (Lucitone 550) and submitted to three daily immersion (8h/each) in 1% sodium hypochlorite (NaClO), chlorhexidine digluconate 2% (CHX) or distilled water (control) for 91 days (T91) or 183 days (T183), simulating the period of 9 months or 1.5 year of nocturnal immersion performed by the patient. Initially, the method of minimum inhibitory concentration in broth was used to determine the possible residual effect (incorporation) of the acrylic resin solution. Half of the disks immersed in each cleaning agent for one of the period immersion (n=5) was inoculated (1x107cells/mL) with pathogens associated with denture stomatitis: Candida albicans (Ca) or Staphylococcys aureus (Sa). The disks were incubated at 37oC for analysis in a spectrophotometer after 24h, 7 and 14 days. The absorbance values were expressed as percentages of microbial inhibition. Confirmed the residual antimicrobial action of cleaning agents incorporated into the acrylic resin, its cytotoxicity was analyzed in vitro on human gingival fibroblasts (L929). Cytotoxic effects were evaluated by the colorimetric assay MTT [3- (4,5- dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazolium bromide] to determine cellular viability after the cells were exposed for 24h to the samples of each experimental condition (n=18) previously immersed in one of the solutions for the evaluation periods (T91 or T183). Cytotoxicity was determined based on mitochondrial activity compared to the specimens not subjected to immersion in the solutions. The MTT assay results were 1-way ANOVA followed by Tukey\'s HSD post-hoc test (a=0.05). For the periods T91 and T183, no microbial inhibition was observed with immersion in water (control) for up to 14 days of incubation. The CHX progressively inhibited microbial growth over the 14 days for both immersion times (Ca: 19 to 73.58%, Sa: 0 to 87.08%); with greater antimicrobial activity in T183. The NaClO showed a slight microbial inhibition only in the 14-day period in both T91 (Ca: 0%; Sa: 2.70%) and T183 (Ca: 8.50%; Sa: 15.08%). According to the results of the MTT assay, the chemical cleaning solutions tested showed a significant reduction in cell viability when compared to the control cells propagated in normal culture medium (p<0.002). The CHX resulted in the lowest cell viability in both immersion periods (p<0.018). The acrylic samples immersed in water or NaClO in T91 and T183 showed cell viability statistically similar to nonimmersed samples (p>0.05). CHX incorporated into the acrylic resin denture base had a residual antimicrobial effect on both immersion periods, which was not observed with NaClO. On the other hand, the residual CHX were severely cytotoxic to human gingival fibroblasts compared to NaClO and distilled water which were slightly cytotoxic. These results suggest caution in selecting denture cleaning agents as a method of prevention and adjunct treatment of denture stomatitis because even at low concentrations recommended for overnight immersion, they may exhibit some degree of toxicity to the denture bearing mucosa.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de soluções químicas de higienização hipoclorito alcalino e solução experimental à base de mamona (Ricinus communis) frente ao controle do biofilme de próteses totais (Análise Clínica) e aos efeitos adversos sobre a resina acrílica termicamente ativada (Análise Laboratorial). Foram testadas as soluções: Grupo I- Solução salina (controle); Grupo II- Hipoclorito de sódio 0,10%; Grupo III- Hipoclorito de sódio 0,20%; Grupo IV- Solução de mamona 8%. Para a Análise Clínica (propriedade de remoção de biofilme e ação antimicrobiana) foram recrutados 50 pacientes com Estomatite Protética e 47 com mucosa palatina saudável, os quais foram orientados a escovar suas próteses (escova específica para prótese e sabonete neutro) três vezes ao dia e imergí-las (20 minutos), uma vez ao dia, nas soluções citadas. De acordo com uma sequência aleatorizada, cada solução foi utilizada por 14 dias, com um período de 7 dias de wash out entre elas, durante o qual os pacientes realizaram sua higienização habitual. As avaliações foram realizadas antes (Baseline) e após os 14 dias de uso de cada solução. Para a propriedade de remoção de biofilme, a superfície das próteses superiores foram evidenciadas (vermelho neutro 1%) e fotografadas (Canon EOS Digital Rebel). As fotografias foram processadas (Adobe Photoshop 5.5) e a área recoberta por biofilme foi mensurada por meio de software (Image Tool 3.00). A ação antimicrobiana foi avaliada por meio da contagem de unidades formadoras de colônia (UFC) de cepas do gênero Candida spp.. Para coleta do biofilme, as próteses superiores foram escovadas (escova Tek e solução salina) por 2 minutos, sendo a suspensão transferida para tubos de ensaio. Após diluições decimais (100 até 10-3), alíquotas (50 &mu;L) de cada diluição foram cultivadas em placas de Petri contendo ágar Chromagar (Difco Laboratories Inc., Detroit, Michigan, EUA), para posterior incubação (aerobiose) por 48hs e contagem do número de colônias e cálculo dos valores de UFC/mL. Para a Análise Laboratorial, corpos de prova circulares (n=80) (16 x 4 mm) e retangulares (n=80) (65 x 10 x 3,3 mm) de resina acrílica termopolimerizável (Lucitone 550) foram imersos (20 minutos) nas soluções citadas. Antes e após as imersões, foram avaliados quanto à alteração de cor (Espectrocolorímetro Color Guide 45/0) e correlação dos dados de acordo com unidades NBS (NBS=&Delta;E* x 0,92), quanto à rugosidade de superfície - \"&mu;m\" (rugosímetro Surftest SJ-201P) e à resistência à flexão \"MPa\" (Máquina Universal de Ensaios DL 2000, EMIC). Os testes estatísticos empregados para remoção de biofilme e ação antimicrobiana foram o de Friedman, seguido pelo teste de Wilcoxon, corrigido de acordo com o método de Bonferroni (&alpha;=0,05) e Mann-Whitney (&alpha;=0,05) para comparar os grupos (com e sem Estomatite). Para a análise laboratorial foi feito o teste de Kruskal-Wallis, seguido pelo teste de Dunn (&alpha;=0,05). Os resultados mostraram que, para a propriedade de remoção de biofilme, em ambos os grupos (com e sem Estomatite Protética), o grupo IV apresentou resultados intermediários e os grupos II e III foram os mais eficazes. A comparação dos grupos (pacientes com e sem Estomatite Protética) mostrou haver diferença significante apenas no baseline (p=0,025) com menores valores para os pacientes com mucosa palatina saudável. Foi verificada ação antimicrobiana frente Candida spp. dos grupos II e III em ambos os grupos de pacientes e o grupo IV no grupo de pacientes com mucosa palatina saudável, sendo que a comparação dos grupos (com e sem Estomatite Protética) mostrou diferença significante no baseline (p=0,002), grupo I (p<0,001) e grupo IV (p<0,001), com menores valores de posto médio para o grupo com mucosa palatina saudável. Para o estudo laboratorial, os resultados mostraram diferença significante entre as soluções para a alteração de cor (<0,001), com maiores valores para o grupo IV. Todas as alterações foram classificadas como leves segundo a NBS. Não houve diferença estatística entre as soluções para as propriedades de rugosidade de superfície (p=0,760) e resistência à flexão (p=0,547). Concluiu-se que as soluções de hipoclorito de sódio a 0,20% e 0,10% foram eftivas quanto à propriedade de remoção de biofilme e ação antimicrobiana, bem como não causaram efeitos adversos à resina acrílica, podendo ser empregados no controle do biofilme de próteses totais / This study evaluated denture cleansers efficacy in biofilm removal and antimicrobial action by a randomized crossover trial (\"in vivo\") and the adverse effects of heat-polymerized acrylic resin (\"in vitro\"). The employed solutions were: Group I- Saline (control); Group II- 0.10% Sodium Hypochlorite; Group III- 0.20% Sodium Hypochlorite; Group IV- 8% Castor oil solution (Ricinus comunnis). Ninety-seven complete denture wearers - fifty with Denture Stomatitis and forty-seven with oral healthy - were instructed to brush their dentures (specific brush and liquid soap) three times a day and to soak them (twenty minutes), once a day, for fourteen days. The dentures were soaked in solutions according a randomized sequence with a washout period (7 days), which patients were instructed to use their habitual hygiene. The data were collected at Baseline and after each solution usage. To evaluate the biofilm removal property, the internal surfaces of maxillary dentures were disclosed (1% neutral red) and photographed (Canon EOS Digital Rebel), the biofilm areas (total and stained) were quantified (Image Tool 3.0) and its percentage was calculated using the relation between biofilm area multiplied by 100, and total surface area of the denture\'s internal base. Antimicrobial action was evaluated by counting CFU/mL of characteristic Candida spp. colonies by a stereoscopic magnifier. To collected biofilm, the maxillary dentures internal surfaces were brushed (Tek brush and saline solution) for two minutes. The diluted resultant solutions (100 to 10-3) were cultured (50 &mu;L aliquots) inside Petri plaques containing Chromagar agar (Difco Laboratories Inc., Detroit, Michigan, EUA) for Candida spp.. For \"in vitro\" analyses, eighty disc-shaped (16 mm x 4 mm) and eighty rectangular specimens (65 mm x 10 mm x 3.3 mm) were prepared from heat-polymerized acrylic resin (Lucitone 550) and immersed into solutions for 20 minutes. Color data (&Delta;E) were determined by a colorimeter and also quantified according the National Bureau of Standards. A rugosimeter was used to measure roughness (&mu;m) and the flexural strength (MPa) was measured using a universal testing machine. For biofilm removal and antimicrobial action, data were analyzed by Wilcoxon test, corrected by Bonferroni method (&alpha;=0.05) and Mann-Whitney (&alpha;=0.05) was used to compare patients groups. For \"in vitro\" data were used Kruskal-Wallis, followed by Dunn test (&alpha;=0.05). The results for biofilm removal showed for both patients groups, intermediated values for group IV and groups II and III were the most effectives. Comparing patients groups, just baseline showed significant difference (p=0.025) and the lower values were for patients with oral healthy. Groups II and III showed antimicrobial action for Candida spp. and group IV was effective for oral healthy group. Comparing groups, baseline (p=0.002), group I (p<0.001) and group IV (p<0.001), showed significant difference and patients with oral healthy showed the lower values. The \"in vitro\" data showed significant differences to color alteration (<0.001). Group IV showed higher values, however, color changes caused by solutions were classified as \"slight\" by NBS. The statistical analysis showed no significant difference to surface roughness (p=0.760) and flexural strength (p=0.547) after the simulated period of immersion. It was concluded that 0.10% and 0.20% sodium hypochlorite solutions were effective not only to biofilm removal and antimicrobial action, but also did not cause adverse effects of acrylic resin, and could be used to control denture biofilm

A manutenção das próteses implantossuportadas e da saúde dos tecidos peri-implantares está diretamente relacionada ao sucesso do tratamento reabilitador. O objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de estudo clínico randomizado, a eficácia de um método experimental (escovação associada à irrigação oral), na manutenção dos tecidos peri-implantares e overdentures. Foram analisadas capacidade de remoção de biofilme e manutenção da saúde dos tecidos orais, ação antimicrobiana e satisfação do paciente. Foram selecionados 38 pacientes usuários de prótese total superior convencional e overdenture inferior, retida por implantes ou mini-implantes e sistema de encaixe tipo o\'ring. Os pacientes utilizaram os seguintes métodos: ES (Controle): método mecânico da escovação - escova específica para próteses totais, escova dental de cerdas macias e dentifrício e WP (Experimental): associação da escovação com a irrigação oral (Waterpik). Os pacientes foram orientados a higienizar suas próteses e tecidos peri-implantares, por meio do método da escovação, por 2 minutos, 3 vezes ao dia, sendo que no método experimental, os pacientes utilizaram a irrigação oral, uma vez ao dia, após a escovação, direcionando o jato de água à margem gengival e região dos componentes protéticos das overdentures. Todos os pacientes utilizaram os dois métodos de higiene, em uma sequência aleatória, por um período de 14 dias, com um período intercalado de 7 dias de wash out. As avaliações foram realizadas antes (baseline) e após a utilização de cada método. A capacidade de remoção de biofilme e a manutenção da saúde oral dos tecidos foram avaliadas por meio do Índice de Placa Modificado (IP), Índice Gengival (IG), Profundidade de Sondagem (PS) e Índice de Sangramento à Sondagem (SS). Para a análise da ação antimicrobiana, o biofilme subgengival foi coletado por meio de cones de papel e biofilme presente nos componentes das overdentures por meio de microbrush, e as amostras coletadas foram processadas pela técnica de hibridização DNA Checkerboard (39 espécies microbianas avaliadas). Os pacientes responderam a um questionário específico por meio de Escala Visual Analógica (EVA) de 100,0 mm, após o uso de cada método. Os dados relacionados aos parâmetros clínicos e à ação antimicrobiana foram analisados por meio do teste de Friedman (&alpha;=0,05), seguido de comparações realizadas por meio do teste de Wilcoxon; as comparações entre implantes convencionais e mini-implantes foram realizadas por meio do teste de Mann-Whitney (&alpha;=0,05). A análise das respostas ao questionário de satisfação foi realizada por meio do teste de Wilcoxon (&alpha;=0,05). Os resultados mostraram que, quanto aos parâmetros clínicos, houve diferença estatisticamente significante entre os valores obtidos no baseline e os valores após os métodos avaliados (p<0,001); entre os métodos ES e WP, não houve diferença significante (IP, IG e PS: p=1,000; SS: p=0,828); houve diferença estatisticamente significante entre os diferentes tipos de implantes apenas do IP após ES (p<0,05). Houve diferença estatisticamente significante entre os métodos (p<0,05), quando comparados os valores da quantidade total de células microbianas presentes no biofilme subgengival, sendo WP mais efetivo que ES (p<0,05), porém não houve diferença entre baseline e WP (p>0,05); considerando os micro-organismos avaliados, WP promoveu redução mais efetiva que ES apenas da espécie C. rectus (p=0,001). A quantidade total de células microbianas presentes nos componentes das overdentures nas avaliações foi semelhante (p=0,607) e a microbiota identificada apresentou-se qualitativamente semelhante após cada um dos métodos. Não houve diferença estatisticamente significante entre os diferentes tipos de implantes quanto ao total de células microbianas presentes no sulco peri-implantar e nos componentes das overdentures, identificadas em cada uma das avaliações (p>0,05). As médias das respostas ao questionário de satisfação após ambos os métodos foram altas (acima de 80,0 mm) para todas as questões, porém não houve diferença estatisticamente significante entre as respostas dadas após o uso de ES e WP (p>0,05). Concluiu-se que o método experimental foi eficaz na redução dos parâmetros clínicos avaliados; apresentou ação antimicrobiana mais efetiva na redução da quantidade total de micro-organismos presentes no biofilme subgengival; porém, não apresentou ação antimicrobiana frente aos micro-organismos presentes nos componentes protéticos das overdentures; e proporcionou alto nível de satisfação do paciente. / The maintenance of implant-supported prostheses and peri-implant health is directly related to the success of rehabilitation treatment. The aim of this study was to evaluate, through randomized clinical trial, the efficacy of an experimental method (brushing associated with oral irrigation) in the maintenance of the peri-implant tissues and overdentures. Biofilm removal capacity and oral tissues health maintenance, antimicrobial action and patient satisfaction were analyzed. Thirty-eight patients, users of conventional maxillary complete denture and mandibular overdenture retained by implants or mini-implants and o\'ring-retained system, were selected. The patients utilized the following methods: MB (Control): mechanical brushing method specific brush for dentures, soft bristle toothbrush and dentifrice, and WP (Experimental): association of mechanical brushing with oral irrigation (Waterpik). Patients were instructed to clean their dentures and peri-implant tissues, by means of brushing method for 2 minutes, 3 times a day, and in the experimental group, patients used the oral irrigation, once a day, after brushing, directing the water jet to the gingival margin and the region of the prosthetic components of the overdentures. All patients used both hygiene methods in a random sequence for a period of 14 days, with a 7-day wash-out interposed period. The evaluations were performed before (baseline) and after using each method. Biofilm removal capacity and oral tissues health maintenance were evaluated through Modified Plaque Index (PI), Gingival Index (GI), Probing Depth (PD), and Bleeding on Probing Index (BP). For the antimicrobial action analysis, the subgingival biofilm was collected by means of sterile paper cones and the biofilm present on the overdentures components by microbrush, and the collected samples were processed by the Checkerboard DNA hybridization technique (39 microbial species evaluated). Patients answered to a specific questionnaire using the Visual Analogue Scale (VAS) of 100.0 mm, after application of each method. The data related to clinical parameters and antimicrobial activity were analyzed using the Friedman test (&alpha;=0.05), followed by comparisons using the Wilcoxon test; comparisons between conventional implants and mini-implants were performed using the Mann-Whitney test (&alpha;=0.05). The analysis of the satisfaction questionnaire responses was performed using the Wilcoxon test (&alpha;=0.05). The results showed that, regarding clinical parameters, there was a statistically significant difference between the values obtained at baseline and the values after the evaluated methods (p<0.001); between the MB and WP methods there was no significant difference (PI, GI and PD: p=1.000; BP: p=0.828); there was a statistically significant difference between the different types of implants only of PI after MB (p<0.05). There was a statistically significant difference between the methods (p<0.05) when comparing the values of the total amount of microbial cells in the subgingival biofilm, WP being more effective than MB (p<0.05), but there was no difference between baseline and WP (p>0.05); considering the evaluated microorganisms, WP promoted a more effective reduction than MB only of the C. rectus species (p=0.001). The total amount of microbial cells present in the components of overdentures in the evaluations was similar (p=0.607) and the identified microbiota appeared qualitatively similar after each method. There was no statistically significant difference between the different types of implants for the total microbial cells in the peri-implant sulcus and in the overdentures components identified in each of the evaluations (p>0.05). The means of the satisfaction questionnaire responses after both methods were high (above 80.0 mm) for all the questions, but there was no statistically significant difference between the answers given after the use of ES and WP (p>0.05). It was concluded that the experimental method was effective in reducing the clinical parameters evaluated; presented more effective antimicrobial action in reducing the total amount of microorganisms present in the subgingival biofilm; however, showed no antimicrobial action against microorganisms present in the prosthetic components of the overdentures; and provided high level of patient satisfaction.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de soluções químicas de higienização hipoclorito alcalino e solução experimental à base de mamona (Ricinus communis) frente ao controle do biofilme de próteses totais (Análise Clínica) e aos efeitos adversos sobre a resina acrílica termicamente ativada (Análise Laboratorial). Foram testadas as soluções: Grupo I- Solução salina (controle); Grupo II- Hipoclorito de sódio 0,10%; Grupo III- Hipoclorito de sódio 0,20%; Grupo IV- Solução de mamona 8%. Para a Análise Clínica (propriedade de remoção de biofilme e ação antimicrobiana) foram recrutados 50 pacientes com Estomatite Protética e 47 com mucosa palatina saudável, os quais foram orientados a escovar suas próteses (escova específica para prótese e sabonete neutro) três vezes ao dia e imergí-las (20 minutos), uma vez ao dia, nas soluções citadas. De acordo com uma sequência aleatorizada, cada solução foi utilizada por 14 dias, com um período de 7 dias de wash out entre elas, durante o qual os pacientes realizaram sua higienização habitual. As avaliações foram realizadas antes (Baseline) e após os 14 dias de uso de cada solução. Para a propriedade de remoção de biofilme, a superfície das próteses superiores foram evidenciadas (vermelho neutro 1%) e fotografadas (Canon EOS Digital Rebel). As fotografias foram processadas (Adobe Photoshop 5.5) e a área recoberta por biofilme foi mensurada por meio de software (Image Tool 3.00). A ação antimicrobiana foi avaliada por meio da contagem de unidades formadoras de colônia (UFC) de cepas do gênero Candida spp.. Para coleta do biofilme, as próteses superiores foram escovadas (escova Tek e solução salina) por 2 minutos, sendo a suspensão transferida para tubos de ensaio. Após diluições decimais (100 até 10-3), alíquotas (50 &mu;L) de cada diluição foram cultivadas em placas de Petri contendo ágar Chromagar (Difco Laboratories Inc., Detroit, Michigan, EUA), para posterior incubação (aerobiose) por 48hs e contagem do número de colônias e cálculo dos valores de UFC/mL. Para a Análise Laboratorial, corpos de prova circulares (n=80) (16 x 4 mm) e retangulares (n=80) (65 x 10 x 3,3 mm) de resina acrílica termopolimerizável (Lucitone 550) foram imersos (20 minutos) nas soluções citadas. Antes e após as imersões, foram avaliados quanto à alteração de cor (Espectrocolorímetro Color Guide 45/0) e correlação dos dados de acordo com unidades NBS (NBS=&Delta;E* x 0,92), quanto à rugosidade de superfície - \"&mu;m\" (rugosímetro Surftest SJ-201P) e à resistência à flexão \"MPa\" (Máquina Universal de Ensaios DL 2000, EMIC). Os testes estatísticos empregados para remoção de biofilme e ação antimicrobiana foram o de Friedman, seguido pelo teste de Wilcoxon, corrigido de acordo com o método de Bonferroni (&alpha;=0,05) e Mann-Whitney (&alpha;=0,05) para comparar os grupos (com e sem Estomatite). Para a análise laboratorial foi feito o teste de Kruskal-Wallis, seguido pelo teste de Dunn (&alpha;=0,05). Os resultados mostraram que, para a propriedade de remoção de biofilme, em ambos os grupos (com e sem Estomatite Protética), o grupo IV apresentou resultados intermediários e os grupos II e III foram os mais eficazes. A comparação dos grupos (pacientes com e sem Estomatite Protética) mostrou haver diferença significante apenas no baseline (p=0,025) com menores valores para os pacientes com mucosa palatina saudável. Foi verificada ação antimicrobiana frente Candida spp. dos grupos II e III em ambos os grupos de pacientes e o grupo IV no grupo de pacientes com mucosa palatina saudável, sendo que a comparação dos grupos (com e sem Estomatite Protética) mostrou diferença significante no baseline (p=0,002), grupo I (p<0,001) e grupo IV (p<0,001), com menores valores de posto médio para o grupo com mucosa palatina saudável. Para o estudo laboratorial, os resultados mostraram diferença significante entre as soluções para a alteração de cor (<0,001), com maiores valores para o grupo IV. Todas as alterações foram classificadas como leves segundo a NBS. Não houve diferença estatística entre as soluções para as propriedades de rugosidade de superfície (p=0,760) e resistência à flexão (p=0,547). Concluiu-se que as soluções de hipoclorito de sódio a 0,20% e 0,10% foram eftivas quanto à propriedade de remoção de biofilme e ação antimicrobiana, bem como não causaram efeitos adversos à resina acrílica, podendo ser empregados no controle do biofilme de próteses totais / This study evaluated denture cleansers efficacy in biofilm removal and antimicrobial action by a randomized crossover trial (\"in vivo\") and the adverse effects of heat-polymerized acrylic resin (\"in vitro\"). The employed solutions were: Group I- Saline (control); Group II- 0.10% Sodium Hypochlorite; Group III- 0.20% Sodium Hypochlorite; Group IV- 8% Castor oil solution (Ricinus comunnis). Ninety-seven complete denture wearers - fifty with Denture Stomatitis and forty-seven with oral healthy - were instructed to brush their dentures (specific brush and liquid soap) three times a day and to soak them (twenty minutes), once a day, for fourteen days. The dentures were soaked in solutions according a randomized sequence with a washout period (7 days), which patients were instructed to use their habitual hygiene. The data were collected at Baseline and after each solution usage. To evaluate the biofilm removal property, the internal surfaces of maxillary dentures were disclosed (1% neutral red) and photographed (Canon EOS Digital Rebel), the biofilm areas (total and stained) were quantified (Image Tool 3.0) and its percentage was calculated using the relation between biofilm area multiplied by 100, and total surface area of the denture\'s internal base. Antimicrobial action was evaluated by counting CFU/mL of characteristic Candida spp. colonies by a stereoscopic magnifier. To collected biofilm, the maxillary dentures internal surfaces were brushed (Tek brush and saline solution) for two minutes. The diluted resultant solutions (100 to 10-3) were cultured (50 &mu;L aliquots) inside Petri plaques containing Chromagar agar (Difco Laboratories Inc., Detroit, Michigan, EUA) for Candida spp.. For \"in vitro\" analyses, eighty disc-shaped (16 mm x 4 mm) and eighty rectangular specimens (65 mm x 10 mm x 3.3 mm) were prepared from heat-polymerized acrylic resin (Lucitone 550) and immersed into solutions for 20 minutes. Color data (&Delta;E) were determined by a colorimeter and also quantified according the National Bureau of Standards. A rugosimeter was used to measure roughness (&mu;m) and the flexural strength (MPa) was measured using a universal testing machine. For biofilm removal and antimicrobial action, data were analyzed by Wilcoxon test, corrected by Bonferroni method (&alpha;=0.05) and Mann-Whitney (&alpha;=0.05) was used to compare patients groups. For \"in vitro\" data were used Kruskal-Wallis, followed by Dunn test (&alpha;=0.05). The results for biofilm removal showed for both patients groups, intermediated values for group IV and groups II and III were the most effectives. Comparing patients groups, just baseline showed significant difference (p=0.025) and the lower values were for patients with oral healthy. Groups II and III showed antimicrobial action for Candida spp. and group IV was effective for oral healthy group. Comparing groups, baseline (p=0.002), group I (p<0.001) and group IV (p<0.001), showed significant difference and patients with oral healthy showed the lower values. The \"in vitro\" data showed significant differences to color alteration (<0.001). Group IV showed higher values, however, color changes caused by solutions were classified as \"slight\" by NBS. The statistical analysis showed no significant difference to surface roughness (p=0.760) and flexural strength (p=0.547) after the simulated period of immersion. It was concluded that 0.10% and 0.20% sodium hypochlorite solutions were effective not only to biofilm removal and antimicrobial action, but also did not cause adverse effects of acrylic resin, and could be used to control denture biofilm

O presente estudo in vitro objetivou avaliar a longo prazo o potencial antimicrobiano residual e a citotoxicidade de soluções químicas de limpeza de prótese quando incorporadas à resina acrílica termopolimerizável após sucessivos ciclos de imersão noturna diária. Discos (10mm x 1mm) de resina acrílica termopolimerizável para base de prótese (Lucitone 550) foram submetidos a três ciclos diários de desinfecção (8h/cada) em hipoclorito de sódio a 1% (NaClO), digluconato de clorexidina a 2% (CLX) ou água destilada (controle) durante 91 (T91) ou 183 dias (T183), simulando o período de 9 meses ou 1,5 ano de imersão noturna diária realizada pelo paciente. Inicialmente, foi utilizado o método de concentração inibitória mínima em caldo para determinar o possível efeito residual (incorporação) das soluções à resina acrílica. Metade dos discos imersos em cada agente de limpeza em um dos tempos de imersão (n=5) foi inoculada (1x107cels/mL) com um dos patógenos associados à estomatite protética: Candida albicans (Ca) e Staphylococcus aureus (Sa). Os discos foram incubados a 37oC para análise em espectrofotômetro após 24h, 7 e 14 dias. Os valores de absorbância foram convertidos em porcentagens de inibição microbiana. Confirmada a ação antimicrobiana residual dos agentes de limpeza incorporados à resina acrílica, foi então analisada sua citotoxicidade in vitro sobre fibroblastos gengivais humanos (L929). Os efeitos citotóxicos foram avaliados por meio do ensaio colorimétrico MTT [brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazólio] para a determinação da viabilidade celular, após as células serem expostas por 24h às amostras de cada condição experimentais (n=18) previamente imersas em uma das soluções por um dos períodos avaliados (T91 ou T183). A citotoxicidade foi determinada com base na atividade mitocondrial em relação a corpos de prova não submetidos à imersão nas soluções testadas. Os resultados do ensaio do MTT foram analisados estatisticamente por ANOVA-1 fator seguida pelo teste post-hoc de Tukey HSD (a=0,05). Para os períodos T91 e T183, não houve inibição microbiana com a imersão em água (controle) em até 14 dias de incubação. A CLX inibiu progressivamente o crescimento microbiano ao longo dos 14 dias para ambos os períodos de imersão (Ca: 19 a 73,58%; Sa: 0 a 87,08%), sendo observada maior ação antimicrobiana em T183. O NaClO apresentou discreta inibição microbiana apenas no período de 14 dias tanto em T91 (Ca: 0%; Sa: 2,70%) quanto em T183 (Ca: 8,50%; Sa: 15,08%). De acordo com os resultados do teste de MTT, as soluções químicas de limpeza testadas apresentaram uma redução significativa da viabilidade celular quando comparado às células controles propagadas apenas em meio de cultura (p<0,002). A CLX resultou na menor viabilidade celular em ambos os períodos de imersão (p<0,018). As amostras de resina acrílica imersas em água ou NaClO em T91 e T183 apresentaram viabilidade celular estatisticamente similar às amostras não imersas (p>0,05). Pode-se concluir que a CLX incorporada à resina acrílica para base de prótese apresentou um efeito antimicrobiano residual em ambos os períodos de imersão noturna, o que não foi observado com o NaClO. Por outro lado, a CLX residual resultou em efeito intensamente citotóxico aos fibroblastos gengivais humanos quando comparada ao NaClO e à agua destilada, que se apresentaram discretamente citotóxicos. Esses resultados sugerem precaução na seleção de agentes de limpeza para prótese como meio de prevenção e tratamento adjunto da estomatite protética, pois mesmo em concentrações baixas, recomendadas para imersão noturna, podem apresentar algum grau de toxicidade às mucosas de suporte protético. / This in vitro study aimed to evaluate the long-term residual antimicrobial activity and cytotoxicity of chemical denture cleansers incorporated into a heat-polymerized acrylic resin after successive cycles of daily overnight soaking. Discs (10mm x 1mm) were prepared from heat-polymerized acrylic resin (Lucitone 550) and submitted to three daily immersion (8h/each) in 1% sodium hypochlorite (NaClO), chlorhexidine digluconate 2% (CHX) or distilled water (control) for 91 days (T91) or 183 days (T183), simulating the period of 9 months or 1.5 year of nocturnal immersion performed by the patient. Initially, the method of minimum inhibitory concentration in broth was used to determine the possible residual effect (incorporation) of the acrylic resin solution. Half of the disks immersed in each cleaning agent for one of the period immersion (n=5) was inoculated (1x107cells/mL) with pathogens associated with denture stomatitis: Candida albicans (Ca) or Staphylococcys aureus (Sa). The disks were incubated at 37oC for analysis in a spectrophotometer after 24h, 7 and 14 days. The absorbance values were expressed as percentages of microbial inhibition. Confirmed the residual antimicrobial action of cleaning agents incorporated into the acrylic resin, its cytotoxicity was analyzed in vitro on human gingival fibroblasts (L929). Cytotoxic effects were evaluated by the colorimetric assay MTT [3- (4,5- dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazolium bromide] to determine cellular viability after the cells were exposed for 24h to the samples of each experimental condition (n=18) previously immersed in one of the solutions for the evaluation periods (T91 or T183). Cytotoxicity was determined based on mitochondrial activity compared to the specimens not subjected to immersion in the solutions. The MTT assay results were 1-way ANOVA followed by Tukey\'s HSD post-hoc test (a=0.05). For the periods T91 and T183, no microbial inhibition was observed with immersion in water (control) for up to 14 days of incubation. The CHX progressively inhibited microbial growth over the 14 days for both immersion times (Ca: 19 to 73.58%, Sa: 0 to 87.08%); with greater antimicrobial activity in T183. The NaClO showed a slight microbial inhibition only in the 14-day period in both T91 (Ca: 0%; Sa: 2.70%) and T183 (Ca: 8.50%; Sa: 15.08%). According to the results of the MTT assay, the chemical cleaning solutions tested showed a significant reduction in cell viability when compared to the control cells propagated in normal culture medium (p<0.002). The CHX resulted in the lowest cell viability in both immersion periods (p<0.018). The acrylic samples immersed in water or NaClO in T91 and T183 showed cell viability statistically similar to nonimmersed samples (p>0.05). CHX incorporated into the acrylic resin denture base had a residual antimicrobial effect on both immersion periods, which was not observed with NaClO. On the other hand, the residual CHX were severely cytotoxic to human gingival fibroblasts compared to NaClO and distilled water which were slightly cytotoxic. These results suggest caution in selecting denture cleaning agents as a method of prevention and adjunct treatment of denture stomatitis because even at low concentrations recommended for overnight immersion, they may exhibit some degree of toxicity to the denture bearing mucosa.