Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / El propósito de nuestro estudio fue conocer si los aloinjertos óseos presentaban un comportamiento similar, tanto en densidad como en altura de la cresta ósea alveolar residual, al hueso del hospedero en el proceso de cicatrización. Para comprobar esto fue evaluado este proceso mediante el uso de la tomografía computarizada cuantitativa debido a su disponibilidad y a sus ventajas por sobre las técnicas radiográficas convencionales La muestra estuvo constituida por 10 pacientes que fueron operados para la exodoncia de ambos terceros molares mandibulares, entre octubre del 2007 y enero del 2008 a los cuales se les colocó en uno de los alvéolos un aloinjerto óseo tomado de cabeza de fémur desproteinizado, liofilizado e irradiado como material de relleno, dejando el otro, sin injertar, constituyendo el lado injertado el grupo experimental y el lado sin injertar el grupo control. Se trato de un estudio retrospectivo observacional en el que se determino la efectividad de un aloinjerto alveolar en la reparación ósea, siendo además ciego pues, tanto el radiólogo como el tesista no sabían a que lado de la mandíbula fueron colocados los aloinjertos. Los resultados cuantitativos se analizaron usando los test de la suma de rangos de dos muestras de Wilcoxon Mann-Whitney, el test de rangos signados de Wilcoxon y el test de Kappa. La densidad ósea medida mediante la utilización de tomografía computarizada fue similar en la cicatrización de los alvéolos que presentaban aloinjerto y en los que no lo presentaban; exceptuando en las zonas mas profundas del alvéolo injertado en las que las mediciones de la densidad ósea fueron significativamente mayores a las del lado no injertado. La altura ósea medida mediante tomografía computarizada fue similar en la cicatrización de los alvéolos que presentaban aloinjerto y en los que no lo presentaban.

Orientadores: Francesco Langone, Jose Francisco Figueiredo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-24T03:18:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carone_AntonioLuiz_M.pdf: 4209839 bytes, checksum: ac2812f726b8c72d34dcd65a44645cb7 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: As lesões traumáticas incidem com grande freqüência sobre o sistema nervoso periférico, apresentando prognóstico reservado principalmente quando ocorre transecção completa do nervo. Todavia, com o melhor conhecimento dos fenômenos celulares e moleculares envolvidos na regeneração axonal e das técnicas microcirúrgicas, tem-se buscado melhorar esse quadro. Neste sentido, tem sido objeto de investigação nos últimos anos a criação de um banco de nervos que viria facilitar o reparo de lesões nervosas com extensa perda de substância. Assim, diversos métodos vem sendo testados para a conservação dos segmentos de nervos para posterior transplante. Neste estudo foram analisados os aspectos morfológicos e quantitativos de enxertos autólogos previamente mantidos em dois tipos de solução conservadora. Foram utilizados quarenta ratos machos da linhagem Wistar, sendo que 16 deles foram subdivididos em grupos de 4 animais, que tiveram os nervos tibial esquerdo e direito removidos e mantidos em solução conservadora de Wisconsin/Belzer (4°C), por 24 ou 72 horas, ou em solução conservadora de Collins (4°C), por 24 ou 72 horas, respectivamente. Após os períodos de conservação previstos, estes nervos foram processados para análise histológica, conforme descrito a seguir. Outros 4 animais, controles, tiveram os nervos tibial direito e esquerdo removidos e imediatamente processados para histologia. Por sua vez, um grupo de 15 animais teve o nervo tibial esquerdo removido e conservado por 24 horas ou 72 horas em solução de Wisconsin/Belzer (4°C) ou solução de Collins (4°C), e posteriormente transplantado no mesmo animal para o lado direito. Outros' 5 animais, tiveram o nervo tibial esquerdo retirado e imediatamente transplantado para o lado direito. A conduta cirúrgica foi precedida sempre de anestesia profunda com pentobarbital sódico (50mg/Kg/peso) para todos os animais. Após 50 dias do transplante, os animais que receberam os enxertos nervosos foram anestesiados para exposição do respectivo enxerto e para sua fixação "in situ" com uma solução de glutaraldeído 2% e formaldeído 1 %, em tampão fosfato de sódio 0,1 M. Após serem mantidos por 24 horas nesta solução, os segmentos do enxerto foram pós-fixados em OS04 e incluídos em resina. A seguir, de cada' espécime foram obtidos cortes semi-finos da porção média do enxerto, os quais foram corados com azul de Toluidina e analisados em microscópio de luz convencional. Para a análise quantitativa dos axônios regenerados no enxerto, foram amostrados cinco campos diferentes e fotografados sob objetiva de imersão (100x). Os negativos foram copiados em papel fotográfico com o aumento final de 1625 vezes e procedeu-se a contagem dos axônios mielínicos com o auxílio de contador eletrônico. A análise histológica mostrou que a regeneração axonal, após 50 dias do transplante, estava mais avançada nos enxertos previamente mantidos nas solução de Wisconsin/Belzer, em relação aos enxertos mantidos na solução de Collins, e era semelhante à observada nos enxertos frescos. A análise da densidade de axônios mielínicos regenerados nas diferentes condições experimentais confirmou os resultados histológicos. Assim, o número de axônios mielínicos regenerados em 104µm2 de área nos enxertos previamente mantidos em solução Wisconsin/Belzer, por 24 ou 72 horas, foram, respectivamente, 433±12 e 430±32. Sendo estes resultados significamente superiores aos observados nos enxertos mantidos em solução de Collins por 24 horas (344±20b) e 72 horas (327±29 b) e semelhante aos computados nos enxertos frescos (407±1±13a). Estes resultados mostraram que a composição da solução conservadora de Wisconsin/Belzer é capaz de manter a viabilidade dos enxertos de nervos, nos períodos de tempo estudados, de maneira superior à da solução de Collins, podendo ser proposta como um meio adequado para a preservação dos nervos até o seu transplante / Abstract: Traumatic lesions are very often on peripheral nervous system, and have reserved prognostic when a loss important nerve segment occurs. However, the knowledge about the cellular and the molecular events promoting the nerve regeneration, besides the use of microsurgical techniques, gives a better perceptive to improve the peripheral nerve repair nowadays. In this scenario, several assays were done to develop a nerve bank that would be used for surgery when a graft is necessary to repair a nerve gap. In this study we investigate the morphological and quantitative aspects of the nerve regeneration across autologous nerve grafts previously stored in two types of preserve solutions. Forty Wistar male rats were used and 16 of them had the left and right tibial nerves removed and stored during 24 or 72 hours in Wisconsin/Belzer solution or in Collins solution (4°C). Following previous stórage period those nerves are processed for histology. Other 4 animals had the left and the right tibial nerve removed and immediately processed for histology. A group of 15 animals had the left tibial nerve removed and stored during 24 and 72 hours in Wisconsin/Belzer solution or in Collins solution and subsequently transplanted in the right side. Other 5 animals had the left tibial nerve removed and immediately transplanted to the right side. After 50 days of the transplant, the animals were reoperated to remove the nerve graft. It was exposed, dissected, fixed "in situ" using a fixative solution (2% paraformaldehyde, 1 % glutaraldehyde, in PBS 0,1 M, pH 7,4) and removed. Following, the nerve graft was postfixed in OS04 and embedded in resin. Semi-thin (1,0 µm) cross sections of the middle region of the nerve graft were obtained, stained in toluidine blue and observed in light microscopy. To perform the quantitative analysis the cross section of the graft was sampled in 5 different fields and the density of mielinated nerve fibers on 1 0 / Mestrado / Neurologia / Mestre em Ciências Médicas

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Neste estudo, avaliamos quantitativamente, pela técnica de PCR em tempo real, a transcrição do mRNA dos genes CTGF, TGF-β e KIM-1, em biópsias de pacientes transplantados renais com disfunção do enxerto. Testamos a hipótese de que, em pacientes com doença crônica do transplante renal, essas moléculas estão envolvidas no desenvolvimento de fibrose desses enxertos, apresentando aumento da sua expressão gênica, e que essa expressão aumenta na medida em que o grau de fibrose tecidual é mais intenso. Setenta e sete pacientes transplantados renais que foram submetidos a biópsia renal por disfunção do enxerto entre janeiro de 2008 e dezembro de 2009 foram incluídos no estudo. Pacientes e biópsias foram classificados em quatro grandes grupos de diagnóstico, de acordo com a classificação Banff-2007: necrose tubular aguda (NTA; n = 9), rejeição aguda (RA, n = 49), nefrotoxicidade aguda por inibidor da calcineurina (NIC; n = 10) e fibrose intersticial e atrofia tubular (IF/TA; n = 29). Para os genes CTGF e TGF-β, os níveis de mRNA foram significativamente maiores em IF/TA em comparação com NIC e RA. Para o gene KIM-1, os níveis de mRNA no grupo IF/TA foram maiores do que no grupo NIC. Além disso, verificamos que a expressão dos genes CTGF, TGF-β e KIM-1 aumenta com a intensidade da fibrose observada nos exames patológicos. A avaliação molecular do tecido do enxerto renal pode ser usada para aprimorar o diagnóstico patológico e para o possível desenvolvimento de biomarcadores.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / El presente estudio tuvo el propósito de comparar la variación de la posición de la mucosa gingival alveolar distal del segundo molar luego de la exodoncia de los terceros molares, con y sin la utilización de aloinjerto de cabeza de fémur como material de relleno post-exodoncia. La muestra del estudio estaba formada por 24 terceros molares provenientes de 12 pacientes ambulatoriamente sanos, realizándose un estudio de tipo comparativo, prospectivo y de corte longitudinal, participando pacientes con terceros molares incluidos, semi-incluidos o en evolución ósea. Además el estudio exigió que la extracción fuese bilateral, en el mismo acto operatorio, y que ambas piezas tuviesen el mismo grado tanto de inclinación como de inclusión y/o evolución ósea, según fuese el caso, lo cual fue evaluado mediante radiografías panorámicas. La edad de los sujetos se encontraba en un rango entre 16 y 29 años, con una edad promedio de 20.4 años. Cada paciente seleccionado tuvo un alveolo en el grupo control y el contralateral en el grupo experimental, elegidos aleatóriamente. En ambos grupos fue realizada la medición de la posición gingival alveolar previo al acto quirúrgico. En el grupo de alvéolos controles apenas se formo el coágulo se procedió con el reposicionamiento de los tejidos blandos y sutura, por su parte en el grupo de alvéolos experimentales injertados, el alveolo fue rellenado con aloinjerto de cabeza de fémur desproteinizado, liofilizado e irradiado. La cantidad de aloinjerto utilizado, fue determinada por la altura de ambas crestas óseas alveolares, debiendo quedar el injerto a igual altura de ambas tablas óseas. En seguida se procedió con el reposicionamiento de tejidos y sutura de la misma forma que el alvéolo contra lateral. La hipótesis de este trabajo fue contrastada usando la prueba de rangos con signos de Wilcoxon., para la variable en estudio, así fue posible evaluar la significancia de las diferencias en las medidas encontradas con y sin la utilización de aloinjertos. Los pacientes fueron controlados a los 7, 14 y 30 días post-exodoncia En el transcurso del estudio, 2 pacientes presentaron como complicación post- operatoria supuración en el control de los 7 días, lo cual fue controlado con terapia antibiótica e irrigación con Clorhexidina. En el control de los 30 días se realizo la medición post-exodoncia, contrastando estos resultados con las mediciones preoperatorios, encontrando una ganancia en la altura de la mucosa gingival alveolar en el grupo injertado, en contraste en el grupo control se produjo en promedio una disminución de la altura mencionada siendo esta diferencia estadísticamente significativa.

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Orientador: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Banca: Marco Antonio Brandão Pontual / Banca: Martha Alayde Alcântara Salim / Resumo: Devido à oferta limitada e morbidade associadas ao uso de enxertos autógenos, substitutos ósseos têm sido desenvolvidos e estudados. Implantes homógenos de matriz óssea desmineralizada (MOD) têm sido utilizados como material clínico de enxerto devido à sua suposta capacidade de osseoindução e osseocondução. Este estudo teve por objetivo comparar os resultados histológicos da utilização da matriz óssea homógena conservada em glicerina a 98% e em glutaraldeído 4% em defeitos ósseos cirurgicamente criados em tíbias de rato. Foram selecionados 18 ratos machos, destes, seis como grupo doador de matriz óssea (MOD). Os doze animais restantes foram operados, recebendo a matriz óssea desmineralizada em defeitos cirúrgicos criados em suas tíbias, onde, na direita foi implantado MOD armazenada em glicerina a 98% e na tíbia esquerda MOD armazenada em glutaraldeído a 4%. Foram sacrificados seis animais em cada tempo pós-operatório de 30 e 60 dias. Para análise microscópica, as lâminas foram coradas pelos métodos da hematoxilina e eosina e tricrômio de Masson. Após análise microscópica das peças, foi constatado áreas da implantação da MOD claramente visíveis e constituídas em ambas as amostras, contudo os implantes conservados em glutaraldeído induziram um tecido conjuntivo de uma forma mais desorganizada e fragmentada, quando comparados com os tratados com glicerina, que mostraram maior quantidade de áreas de neoformação óssea em sua periferia. Este estudo mostrou que a glicerina a 98% foi um meio de conservação mais favorável à neoformação óssea da MOD, quando comparado ao glutaraldeído a 4% / Abstract: This study compared the histological results of allogeneic demineralized bone matrix (DBM) preserved in 98% glycerin and 4% glutaraldehyde in experimental bone defects. We selected 18 male rats, of these, six were used as donor of DBM. The remaining twelve animals received in the right tibia DBM stored in 98% glycerin and DBM in 4% glutaraldehyde in the left tibia. Six animals were sacrificed at each postoperative time of 30 and 60 days. For microscopic analysis, slides were stained by the methods of hematoxylin and eosin and Masson Tricomium. Microscopic analysis found areas of deployment of MOD in both samples, but the implants preserved by glutaraldehyde presented themselves in a more disorganized and fragmented compared to those treated with glycerin, which showed a larger amount of bone formation. This study showed that 98% glycerin was a more favorable medium of preservation for bone formation when compared to 4% glutaraldehyde / Mestre

Neste estudo, avaliamos quantitativamente, pela técnica de PCR em tempo real, a transcrição do mRNA dos genes CTGF, TGF-β e KIM-1, em biópsias de pacientes transplantados renais com disfunção do enxerto. Testamos a hipótese de que, em pacientes com doença crônica do transplante renal, essas moléculas estão envolvidas no desenvolvimento de fibrose desses enxertos, apresentando aumento da sua expressão gênica, e que essa expressão aumenta na medida em que o grau de fibrose tecidual é mais intenso. Setenta e sete pacientes transplantados renais que foram submetidos a biópsia renal por disfunção do enxerto entre janeiro de 2008 e dezembro de 2009 foram incluídos no estudo. Pacientes e biópsias foram classificados em quatro grandes grupos de diagnóstico, de acordo com a classificação Banff-2007: necrose tubular aguda (NTA; n = 9), rejeição aguda (RA, n = 49), nefrotoxicidade aguda por inibidor da calcineurina (NIC; n = 10) e fibrose intersticial e atrofia tubular (IF/TA; n = 29). Para os genes CTGF e TGF-β, os níveis de mRNA foram significativamente maiores em IF/TA em comparação com NIC e RA. Para o gene KIM-1, os níveis de mRNA no grupo IF/TA foram maiores do que no grupo NIC. Além disso, verificamos que a expressão dos genes CTGF, TGF-β e KIM-1 aumenta com a intensidade da fibrose observada nos exames patológicos. A avaliação molecular do tecido do enxerto renal pode ser usada para aprimorar o diagnóstico patológico e para o possível desenvolvimento de biomarcadores.

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Neste estudo, avaliamos quantitativamente, pela técnica de PCR em tempo real, a transcrição do mRNA dos genes CTGF, TGF-β e KIM-1, em biópsias de pacientes transplantados renais com disfunção do enxerto. Testamos a hipótese de que, em pacientes com doença crônica do transplante renal, essas moléculas estão envolvidas no desenvolvimento de fibrose desses enxertos, apresentando aumento da sua expressão gênica, e que essa expressão aumenta na medida em que o grau de fibrose tecidual é mais intenso. Setenta e sete pacientes transplantados renais que foram submetidos a biópsia renal por disfunção do enxerto entre janeiro de 2008 e dezembro de 2009 foram incluídos no estudo. Pacientes e biópsias foram classificados em quatro grandes grupos de diagnóstico, de acordo com a classificação Banff-2007: necrose tubular aguda (NTA; n = 9), rejeição aguda (RA, n = 49), nefrotoxicidade aguda por inibidor da calcineurina (NIC; n = 10) e fibrose intersticial e atrofia tubular (IF/TA; n = 29). Para os genes CTGF e TGF-β, os níveis de mRNA foram significativamente maiores em IF/TA em comparação com NIC e RA. Para o gene KIM-1, os níveis de mRNA no grupo IF/TA foram maiores do que no grupo NIC. Além disso, verificamos que a expressão dos genes CTGF, TGF-β e KIM-1 aumenta com a intensidade da fibrose observada nos exames patológicos. A avaliação molecular do tecido do enxerto renal pode ser usada para aprimorar o diagnóstico patológico e para o possível desenvolvimento de biomarcadores.