Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-04-28Bitstream added on 2014-06-13T19:54:57Z : No. of bitstreams: 1 pereira_ac_me_botfm.pdf: 434651 bytes, checksum: 3c30a9ed577db22f98db92a5a9549e4d (MD5) / A Rotura Prematura de Membranas Pré-Termo (RPM-PT) é um dos principais problemas da Clínica Obstétrica, com etiologia relacionada à ascensão bacteriana do trato genital inferior para a decídua e membranas corioamnióticas. Objetivo: Quantificar a expressão de interleucina (IL)-4 e IL- 10 pelas membranas corioamnióticas de gestantes com RPM-PT e avaliar a relação dessa expressão com presença de corioamnionite. Material e Foram incluídas no estudo 30 gestantes com RPM-PT em trabalho de parto (RPM-PT em TP) e 20 gestantes com RPM-PT fora do trabalho de parto (RPM-PT fora de TP). Como grupo controle foram avaliadas 30 gestantes em trabalho de parto prematuro (TPP) e bolsa das águas íntegra. No momento da resolução da gestação, após a dequitação, foram retirados fragmentos das membranas corioamnióticas e acondicionados em RNA later para posterior quantificação do RNAm das citocinas pela técnica de PCR em tempo real. Fragmentos das membranas foram submetidos à análise histopatológica para avaliação da presença de corioamnionite. No período do estudo, a incidência de RPM-PT foi de 6,2% e de TPP foi de 5,5%. Para a IL-10, a concentração relativa de RNAm foi estatisticamente superior nas membranas corioamnióticas de gestantes do grupo RPM-PT fora de TP em relação ao grupoTPP. Em relação à IL-4 não houve diferença significativa entre os grupos estudados. A presença de corioamnionite foi de 44,0% no grupo RPM-PT e de 66,7% no grupo TPP. A análise estatística não apontou diferença significativa entre a expressão de IL-4 e IL-10, na presença ou ausência de corioamnionite, nos grupos estudados. A concentração relativa de RNAm de IL-10 é superior nas membranas corioamnióticas do grupo RPM-PT fora de TP em relação ao grupo TPP e entre os grupos RPM-PT e TPP a expressão de IL-4 é similar. Não existe relação entre a expressão de IL-4 e IL-10 e corioamnionite. / The preterm premature rupture of membranes (PPROM) is one of the major problems of Clinical Obstetrics. Its etiology is related to the ascending pathway of bacteria from the lower genital tract to the decidua and chorioamniotic membranes. Objective: To quantify the expression of the interleukin (IL)-4 and IL-10 in the chorioamniotic membranes of pregnant women with PPROM and evaluate the relation of this expression with the presence of chorioamnionitis. Material and Methods: Thirty PPROM women in labor and 20 PPROM without labor women were studied. As a control group 30 pregnant women in premature labor (PTL) were studied. After delivery, samples of the chorioamniotic membranes were collected for histopathological analyses and others fragments were conditioned in RNA later for posterior quantification of cytokine mRNA expression by real time PCR. Results: In the study period, the incidence of PPROM was 6,2% and 5,5% for PTL. For IL-10, the expression of mRNA was statistically higher in the PPROM without labor group in relation to the groups with PTL. mRNA expression of IL-4 was not statistically different in the groups studied. In 44,0% of samples in PPROM group the presence of chorioamnionitis was observed and for PTL group the incidence was 66,7%. No difference occurred in the expression of cytokine mRNA in relation to the presence of chorioamnionitis in the groups studied. Conclusion: The expression of mRNA was statistically higher in the PPROM without labor group in relation to the group with PTL and among the PPROM and PTL groups mRNA expression of IL-4 was not statistically different. No difference occur in the expression of IL-4 and IL-10 mRNA in relation to the presence of chorioamnionitis.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-08-24Bitstream added on 2014-06-13T18:41:59Z : No. of bitstreams: 1 silva_hf_dr_fmvz.pdf: 909995 bytes, checksum: 5454378909693619c7d4f23b8ab3dacb (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Avaliou-se o efeito de níveis nutricionais adequados ou insuficientes em cobre (Cu) ou zinco (Zn) sobre a resposta imune humoral e hemograma de bezerros Nelore, submetidos à vacinação contra C/ostridium chauvoei. O grupo Controle (n=10) foi composto por bezerros cujas mães receberam nutrição mineral adequada. O grupo -Zn (n=10), e o -Cu (n=10) foram formados por bezerros nascidos de vacas mantidas em dieta insuficiente em Zn e Cu respectivamente. Estes bezerros foram acompanhados até os seis meses de idade, recebendo a mesma suplementação mineral de suas mães. Nestes primeiros seis meses de vida foram medidos os títulos de anticorpos anti-Clostridium chauvoei recebidos via colostro e os niveis de superóxido dismutase eritrocitária. Aos 150 dias de vida estes bezerros tiveram fragmentos de tecido hepático colhidos para análise de Cu e Zn. Aos 180 dias de vida os bezerros receberam vacina contra Clostridium chauvoei, e 36 dias após, receberam reforço vacinal. Foram então medidos os níveis séricos de Cu e Zn (três momentos), títulos de anticorpos em resposta à vacinação (cinco momentos) e hemograma (14 momentos). Apesar de não terem sido obtidos níveis hepáticos de Cu indicativos de deficiência, foram observadas diferenças significativas destes níveis de Cu entre os três grupos (-Zn>Controle>-Cu). Tais diferenças se refletiram em diferenças significativas entre os títulos de anticorpos (Controle>- Zn>-Cu aos 21 dias após a vacinação e 15 dias após o reforço ) e algumas variáveis do hemograma dos diferentes grupos, durante os momentos relacionados ao reforço vacinal (volume globular, leucócitos, neutrófilos, monócitos e eosinófilos). / This research aims to assess the effects of copper and zinc insufficient nutritional levels on the humoral immune response of Nelore calves, submitted to Clostridium chauvoei vaccination. The Control Group (n=10) was composed of calves whose mothers received adequate mineral nutrition. The calves of Group -Zn (n=10) and Group -Cu (n=10) were born, respectivelly, from cows under insufficient Zn or Cu nutrition. These calves were accompanied until six months of life, having access to the same mineral supplementation of their mothers. In these calves' first six months of life the titers of anti-Clostridium chauvoei antibodies, received via colostrums, were measured by ELISA assay. At 150 days old, these calves had fragments of their hepatic tissue collected for Cu and Zn levels analysis. At 180 days old, the calves received the first dose of C'ostridium chauvoei vaccine. A second dose of this vaccine was given 36 days later. Then, the antibodies titers in response to both vaccination (five sampling times), the serum Cu and Zn levels (three sampling times) and hemogram were also measured (14 sampling times). Although Cu hepatic levels compatible with deficiency were not obtained, significant differences among these Cu levels of the three groups of calves were observed (-Zn>Control>-Cu), as well as significant differences among the antibodies titers (Control>-Zn and -Cu at 21 days after the first vaccine dose and Control>-Zn>-Cu at 15 days after the booster vaccination) and hemogram of the different groups at the sampling times related to the booster vaccination (corpuscular volume, leucocytes, neutrophils, monocytes and eosynophils).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-10-10Bitstream added on 2014-06-13T18:42:10Z : No. of bitstreams: 1 haanwinckel_mcs_dr_botfm.pdf: 802672 bytes, checksum: a4afa50479234eb44a86f031c75134e1 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O presente estudo teve por objetivo principal avaliar a atividade de macrófagos e produção de anticorpos frente à infecção experimental pela Leptospira pomona em camundongos selecionados geneticamente para boa (H) ou má (L) resposta imune humoral. Para avaliar a atividade macrofágica foram utilizados ensaios para determinação de produtos intermediários do oxigênio e nitrogênio. Também foram investigados a produção de fator de necrose tumoral (TNF- ), anticorpos específicos, recuperação da leptospira nos rins e fígado, lesões histológicas através da técnica de hematoxilina-eosina e determinação de antígenos leptospiricos nos tecidos através da técnica de imunoistoquímica. Os resultados mostram que a linhagem LIV-A apresentou menor recuperação do microrganismo nos compartimentos analisados. Entretanto, a linhagem HIV-A a partir do 14 dia de infecção apresentou total contenção , embora a LIV-A ainda tenha recuperado bactérias no fígado no 21 dia. A resposta imune contra o sorovar pomona nessas linhagens se caracterizou com produção elevada de anticorpos principalmente em períodos mais tardios do processo infeccioso. A produção de intermediários reativos do oxigênio e nitrogênio também auxiliou na eliminação da L. pomona nas duas linhagens, sendo a produção de H2O2 importante fator nas linhagens HIV-A e NO nas linhagens LIV-A, principalmente nos períodos mais tardios pós-inoculação, o mesmo ocorrendo em relação ao TNF- . Lesões renais mais intensas ocorreram em períodos em que houve maior numero de leptospiras isoladas em meio de cultivo. Entretanto, na linhagem LIV-A houve persistência de alterações teciduais mesmo em períodos em que não houve recuperação de leptospiras. A técnica de imunoistoquímica apresentou-se um pouco mais sensível em relação ao cultivo na detecção das leptospiras. Entretanto, ambas... / The aim of the present study was to evaluate the role of the macrophage activity and antibody production on experimental infection of Leptospira pomona in mice, selected genetically for high (H) or low (L) humoral immune response. To evaluate the macrophage activity, assays were used to determine oxygen and nitrogen intermediate reactives. Also was investigated the production of tumor necrosis factor (TNF- .), specific antibodies, recovery of leptospires in the kidneys and liver, histological lesions by hematoxilin-eosin technique and determination of leptospires antigens in tissues by immunohistochemistry. The results showed a smaller recovery of microorganism from the analyzed compartments to the LIV-A lineage. However, the HIV-A lineage showed total contention from the 14th day post-infection, although LIV-A had still bacteria in the liver at 21th day post-infection. The immune response against pomona serovar in those lineages, was characterized as high production of antibodies, mainly in later periods of infectious process. The production of oxygen and nitrogen intermediate reactives, also contributed to L. pomona elimination for two lineages, being the H2O2 production an important factor in the HIV-A lineage and NO in the LIV-A lineage, mainly at the latest post-inoculation periods, the same occurring in relation to TNF- . Intense renal lesions occurred at periods that were larger number of isolated leptospires by culture technique. Meantime, it had persistence of tissue alterations in the LIV-A lineage, even at no leptospires recovery periods. The imunohistochemistry technique showed more sensitive in relation to the cultivation technique. However, both were good techniques to agent identification on those lineages. The results suggest those lineages could represent an important model to investigation of animal pathogenesis and immune response against the varied serovares of leptospires.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2001Bitstream added on 2014-06-13T21:06:10Z : No. of bitstreams: 1 ripari_vr_me_botfm.pdf: 630015 bytes, checksum: a0b3099a4a3f8f782d7e68393790552a (MD5) / A progressão da doença na criança infectada pelo HIV associou-se à elevação do nível sérico de IgE total em alguns estudos. O mecanismo responsável por esta elevação ainda não foi claramente elucidado. O desbalanço na produção e liberação de citocinas de perfil Th1 e Th2, que ocorre após a infecção pelo HIV, tem sido proposto como um possível mecanismo para a elevação da IgE. Foram avaliadas neste estudo, 29 crianças de ambos os sexos, infectadas pelo HIV, acompanhadas no Ambulatório de Imunologia Pediátrica da Faculdade de Medicina de Botucatu-UNESP, com idade variando de 3 a 182 meses, com o objetivo de analisar os níveis séricos de IgE nessas crianças e sua correlação com presença de categorias clínicas e imunológicas mais graves, carga viral elevada e aumento da prevalência de alergia. A classificação clínica destes pacientes mostrou duas crianças (6,9%) na categoria N, sete (24,14%) na A, 12 (41,38%) na B e oito (27,58%) na C. Já a classificação imunológica mostrou três crianças (10,3%) na categoria 1, 16(55,2%) na 2 e 10 (34,5%) na 3. Após a aplicação do questionário alergológico, 11 crianças (37,93%) apresentaram história positiva de sintomas alérgicos, e quatro destes pacientes (13,79%) apresentaram teste cutâneo de hipersensibilidade imediata positivo a um ou mais dos aeroalérgenos testados. Os resultados mostraram níveis elevados de IgE em 17 crianças (58,62%), e estes foram numericamente maiores nos pacientes pertencentes à categoria clínica mais grave (C) em relação àqueles das outras categorias clínicas, mas sem diferença estatisticamente significante. Não foi encontrada diferença entre a freqüência de crianças com IgE elevada pertencentes às categorias clínicas e imunológicas mais graves e aquelas mais leves... / The progression of the disease in the infected child by HIV toke part in the elevation of the serum level of total IgE in some studies. The mechanism responsible for this elevation was still not clearly elucidated. The oscillation in the production and liquidation of Th1 and Th2 cytokines, that occur after the infection by HIV, have been proposed as a possible mechanism to the IgE elevation. In this study was evaluated 29 children of both sex, infected by HIV, accompanied in the Clinic of Pediatric Immunology of Botucatu Medical School - UNESP, with ages from 3 to 182 months, with the objective of analyze the serum levels of IgE in these children and the co-relation with the presence of the categories clinic and immunological more severe, high load viral and increase of the allergic diseases prevalence. The clinic classification of these patients showed two children (6,9%) in N category, seven (24,14%) in B and eight (27,58%) in C. While the immunologic classification showed three children (10,3%) in the category 1, sixteen (55,2%) in the 2 and ten (34,5%) in the 3. After the application of the allergologic questionnaire, eleven children (37,93%) presented positive history of allergic symptoms, and four of these patients (13,79%) presented positive immediate cutaneous hypersensitive test to one or more of the inhalant allergens tested. The outcomes showed high levels of IgE in 17 children (58,62%), and these were numerically greater in the patients in the more severe clinic category (C) in relation to those of the others clinic categories, but without significant statically difference. The difference between the frequency of children with high IgE in the clinic and immunologic categories more severe and that more soft was not founded. The load viral values were significantly lower in the group... (Complete abstract, click electronic access below)

GVB é um patógeno agrícola composto por RNA de fita simples de senso positivo, com extremidades 3’ poliadeniladas e tem seu diagnóstico feito por testes biológicos, imunológicos e moleculares. Juntamente com outros vírus, causa a síndrome do “complexo rugoso”, que impede a pega da enxertia, destruindo o floema e matando a planta precocemente. A produção de anticorpos contra uma proteína do capsídeo e o desenvolvimento de teste imunológico são os objetivos deste trabalho. A clonagem da região codificante da proteína do capsídeo do Grapevine Virus B foi obtida por PCR, utilizando primers específicos para região codificante e com sítios de restrição para endonucleases BamHI e NdeI, obtendo-se um amplicon de 594 pb. Este fragmento foi clonado no vetor de expressão pET19b e transformado em Escherichia coli BL21 Codon Plus (DE3) RP (Stratagene). Para a expressão da proteína rGVB1a (24 kDa com cauda de histidina), estabeleceu-se uma indução de 1 mM de IPTG (isopropyl-beta-Dthiogalactopyranoside), mantida sob agitação a 250C por 18 horas. A expressão foi analisada por SDS-PAGE 13% e a presença da rGVB1a foi confirmada por Western blot, usando anticorpo monoclonal anti-histidina. A rGVB1a expressada foi purificada por cromatografia de afinidade a cauda de histidina em resina sepharose-Ni2+. A proteína purificada foi utilizada para imunizar um coelho e sete lotes de três camundongos para obtenção de soro policlonal e monoclonal contra a proteína recombinante. A fusão de células de linfócitos B com mielomas SP2/0 foi realizada, obtendo-se um hibridoma produtor de anticorpo IgG2a que em testes de ELISA e Western blot reconhecem a proteína recombinante. Adicionalmente, testes de Western blot utilizando extrato total de plantas sintomáticas e assintomáticas foram realizados para verificar se estes soros reconheciam a proteína nativa. / GVB is an agricultural pathogen composed by a single-stranded positive sense RNA with poliadenilated 3’ end and its diagnosis is based on biological, immunological and molecular tests. Together with another virus, it causes the rugose wood complex disease which prevents grafting, destroying the phloem and killing the plant early. The objectives of this work are the production of antibodies against the coat protein and the development of an immunological test. Cloning of a coat protein coding gene from Grapevine Virus B was performed by PCR, using specific primers for the coding region with restriction sites for BamHl and Ndel endonucleases, obtaining an amplicon of 594 bp. This fragment was cloned into the pET19b expression vector and transformed with Escherichia coli BL21 Codon Plus (DE3) RP (Stratagene). For expression of rGVB1a protein (24 kDa with histidine tail) a protocol with 1 mM IPTG (isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside), and shaking for 18 hours at 25ºC was established. The expression was analyzed by SDS-PAGE 13% and the presence of rGVB1a was confirmed by Western-blot, using an anti-histidine monoclonal antibody.rGVB1a expressed was purified by histidine tail Ni2+ Sepharose affinity chromatography. Purified protein was used to immunize a rabbit and seven lots of mice to obtain policlonal serum and monoclonal antibody against the recombinant protein. Cell fusions of lymphocyte B and SP2/0 were performed and a hybridoma producer of IgG2a antibody was obtained. This hybridoma recognized the recombinant protein in ELISA and Western blot tests. Additionally, Western blot using the extract of symptomatic and assymptomatic plants were developed to investigate if these serum recognize the native protein.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Pós-graduação em Medicina Tropical, 2016. / Texto parcialmente liberado pelo autor. Foram disponibilizados Resumo e Abstract. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-09-13T20:02:32Z No. of bitstreams: 1 2016_WanessaPimentaRosas_Parcial.pdf: 372114 bytes, checksum: 9b00f0cc7da92d7412e1cb3c217c4b55 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-11-07T18:00:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_WanessaPimentaRosas_Parcial.pdf: 372114 bytes, checksum: 9b00f0cc7da92d7412e1cb3c217c4b55 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-07T18:00:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_WanessaPimentaRosas_Parcial.pdf: 372114 bytes, checksum: 9b00f0cc7da92d7412e1cb3c217c4b55 (MD5) / Introdução: Segundo estimativas da OMS, em 2014, ocorreram 9,6 milhões de casos novos de tuberculose em todo o mundo, causando a morte de 1,5 milhões de indivíduos. No Brasil estima-se que mais de 50 milhões de pessoas estejam infectadas pelo Mycobacterium tuberculosis. Apesar dos esforços contínuos, a tuberculose continua sendo um grave problema de saúde pública, sendo a terceira causa de morte por doença infecciosa no país. Como uma estratégia de controle, em dezembro de 2010, a OMS endossou o uso do Xpert MTB/RIF em países com alta carga da doença, considerando-o uma tecnologia capaz de revolucionar o diagnóstico e o tratamento da doença. O DF começou a utilizar essa tecnologia em agosto de 2014, depois de receber do MS quatro equipamentos que foram instalados nos hospitais regionais do Gama, de Taguatinga, da Asa Norte e do Paranoá. Objetivos: Avaliar o efeito da implantação de uma nova ferramenta diagnóstica (GeneXpert) em indicadores selecionados da tuberculose pulmonar do Distrito Federal. Métodos: Trata-se de um estudo epidemiológico observacional descritivo, quasi-experimental, com utilização de dados secundários. A população do estudo é composta por todos os pacientes notificados como casos novos de TB pulmonar, de agosto de 2013 a julho de 2015. Foram utilizados os dados secundários extraídos do SINAN-TB, sem identificação dos pacientes; de planilhas de produção consolidadas pelo Laboratório Central de Saúde Pública do Distrito Federal - LACEN-DF. Resultados: Foram notificados 233 casos novos de tuberculose pulmonar nos quatro hospitais estudados, sendo 119 casos no período pré-implantação do novo teste e 114 casos após a implantação. Não foi observado aumento significativo no total de notificações de tuberculose pulmonar entre os dois períodos. A incidência de tuberculose pulmonar considerando apenas indivíduos residentes no DF (274 casos) no período pré-implantação do GeneXpert foi de 9,71 para cada grupo de 100.000 habitantes. Já no período pós-implantação a incidência (baseada apenas nos residentes do DF, ou seja, 287 casos) foi de 9,95/100.000 habitantes. Após a implantação do GeneXpert foram realizados 2519 testes por esses quatro hospitais onde os equipamentos estão instalados. Entre os principais achados, constatamos que o GeneXpert apresentou maior percentual de positividade para o Mtb, comparado à baciloscopia, em todos os hospitais regionais estudados. O percentual calculado de positividade geral do Mtb pelo GeneXpert foi de 8,6% versus 3,27% da baciloscopia antes da implantação do novo teste e 5,5% de positividade geral da baciloscopia após a implantação. Além disso, o percentual de casos confirmados bacteriologicamente aumentou 22% em relação ao período anterior à sua implantação, sendo que o novo teste incrementou em 8,8% essas notificações. Conclusão: Acreditamos que a principal contribuição desse estudo foi mostrar as vantagens da substituição da baciloscopia pelo GeneXpert, no contexto de saúde local, além de apontar os desafios que devem ser superados para que sua implantação produza os benefícios que dele se espera. No entanto, entendemos que para que haja êxito no controle da tuberculose não basta apenas que o teste diagnóstico seja rápido, é necessário ainda que o acesso ao resultado seja célere e que o início ao tratamento seja oportuno. ________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: According to WHO estimates, in 2014, there were 9.6 million new cases of TB worldwide, killing 1.5 million people. In Brazil it is estimated that over 50 million people are infected with Mycobacterium tuberculosis. Despite continued efforts, tuberculosis remains a serious public health problem, being the third leading cause of death from infectious disease in the country. As a control strategy in December 2010, the WHO endorsed the use of Xpert MTB / RIF in countries with high disease burden, considering it a technology to revolutionize the diagnosis and treatment of disease. The DF started using this technology in August 2014, after receiving MS four fixtures that were installed in regional hospitals Gama, Taguatinga, Asa Norte and Paranoá. Objectives: To evaluate the effect of implementation of a new diagnostic tool (GeneXpert) on selected indicators of pulmonary tuberculosis in the Federal District. Methods: This is a descriptive observational epidemiological study, quasi-experimental, using secondary data. The study population consists of all patients reported as new cases of pulmonary TB, August 2013 to July 2015 the secondary data extracted from the SINAN-TB were used without identification of patients; consolidated production of sheets by the Central Public Health Laboratory of the Federal District - LACEN-DF. Results: We reported 233 new cases of pulmonary tuberculosis in the four hospitals studied, with 119 cases in the pre-deployment of the new test period and 114 cases after deployment. There was no significant increase in total pulmonary tuberculosis notifications between the two periods. The incidence of pulmonary tuberculosis considering only individuals residing in the Federal District (274 cases) in the pre-implantation GeneXpert period was 9.71 for each group of 100,000 inhabitants. In the post-implantation period incidence (DF based only on the residents, or 287 cases) was 9.95 / 100,000. After the implementation of GeneXpert tests were conducted in 2519 for these four hospitals where the equipment is installed. Among the main findings, we found that the GeneXpert had a higher percentage of positive for Mtb, compared to smear microscopy in all regional hospitals studied. The percentage calculated overall positive Mtb by GeneXpert was 8.6% versus 3.27% of smear before the implementation of the new test and 5.5% of general positivity of sputum smear after implantation. In addition, the percentage of microbiologically confirmed cases increased by 22% compared to the period prior to its implementation, and the new test increased by 8.8% these notifications. Conclusion: We believe that the main contribution of this study was to show the advantages of replacing the smear by GeneXpert, the local health context, and point out the challenges that must be overcome for its implementation produces the benefits expected of it. However, we understand that to be successful in tuberculosis control not enough that the diagnostic test is fast, it is still necessary to access the result is rapid and early treatment is appropriate.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-10-17Bitstream added on 2014-06-13T20:49:49Z : No. of bitstreams: 1 martins_dr_me_botfm.pdf: 1423175 bytes, checksum: c2ecf3527dbbca2e6ab24a1b745d5696 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Gap / A eficacia da vacina BCG (Mycobacterium bovis atenuado) contra tuberculose pulmonar apresenta grande variabilidade em diferentes populacoes. Dentre as hipoteses sugeridas, prevalece a que atribui esta variacao as interacoes entre a vacina e micobacterias presentes no meio ambiente. Estudos tem demonstrado que antigenos expressos pelo BCG estao conservados no M. avium, corroborando com a hipotese de que a exposicao as micobacterias ambientais gera resposta imune cruzada que interfere com a eficacia do BCG. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da exposicao previa de camundongos ao M. avium inativado na resposta imune e eficacia protetora induzidas pela vacina DNAhsp65 (pVAXhsp65) na tuberculose experimental murina. Na primeira etapa, grupos de camundongos BALB/c femeas foram injetados com diferentes doses (0,08x106, 4x106 e 200x106) de M. avium inativado termicamente, pela via subcutanea. Apos tres semanas, os animais foram imunizados com DNAhsp65 por via intramuscular. Os animais receberam tres doses de DNA (100ug/intervalos de 15 dias). Grupos controle receberam somente M. avium, vacina (pVAXhs65), vetor (pVAX) ou solucao salina esteril. A producao de citocinas e os niveis de anticorpos foram determinados por ELISA. Na segunda etapa, os animais foram inicialmente sensibilizados por via subcutanea com 200x106 Unidades Formadoras de Colonias (UFC) de M. avium inativado e depois imunizados com tres doses de pVAXhsp65 (100ug/intervalos de 15 dias) por via intramuscular. Os grupos controle foram injetados com salina, pVAX (4 doses), pVAXhsp65 (4 doses), M. avium, M. avium mais pVAX (3 doses) ou M. avium mais pVAXhsp65 (3 doses). Quinze dias apos a ultima dose de DNA os animais foram infectados com 1x104 UFC de M. tuberculosis, H37Rv, pela via intratraqueal. Trinta dias apos o desafio os animais foram sacrificados e a carga bacteriana determinada pelo numero de UFC nos pulmoes. Cortes histopatologicos dos pulmoes tambem foram analisados. / The efficacy of BCG vaccine (attenuated Mycobacterium bovis) against pulmonary tuberculosis varies enormously in different populations. The prevailing hypothesis attributes this variation to interactions between the vaccine and mycobacteria common in the environment. Studies have revealed that most protective antigens expressed by the antituberculous vaccine are conserved in M. avium, supporting the hypothesis that exposure to environmental mycobacteria generates a crossreactive immune response that interferes with BCG efficacy.The objective of this investigation was to evaluate the effect of a prior exposure to heat killed M. avium on both, the immune response and the protective efficacy induced by a DNAhsp65 vaccine (pVAXhsp65) in experimental murine tuberculosis. To evaluate the effect on the immune response, BALB/c female mice were, initially, injected with distinct doses (0,08x104, 4x106 and 200x106) of heat killed M. avium by subcutaneous route. Three weeks later the animals were immunized with 3 doses of DNAhsp65 by intramuscular route (100æg / 15 days apart). Control groups received only M. avium, vaccine (pVaxhsp65), vector (pVax) or saline solution. Cytokine production and antibody levels were determined by ELISA. To evaluate the effect on the protective efficacy, animals were initially, sensitized with 2x108 heat killed CFU of M. avium by subcutaneous route and then immunized with 3 doses of pVAXhsp65 (100æg/15 days apart) by intramuscular route. Control groups were injected with saline, pVAX (4 doses), pVAXhsp65 (4 doses), M. avium, M. avium plus pVAX (3 doses) or M. avium plus pVAXhsp65 (3 doses). Fifteen days after last DNA dose the animals were infected with 1x104 viable CFU of H37Rv M. tuberculosis by intratracheal route. Thirty days after challenge the animals were sacrificed and the bacterial burden was determined by the number of CFU in the lungs. Lung histological sections were also analysed.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-08-07Bitstream added on 2014-06-13T20:49:53Z : No. of bitstreams: 1 orsatti_cl_me_botib.pdf: 325043 bytes, checksum: 59d94b66f5ac476afaa842ccd0fa808e (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A própolis tem sido motivo de intensa investigação científica e sua ação imunomoduladora vem sendo mencionada. A recente descoberta e caracterização da família dos receptores semelhantes a Toll (TLR) tem desencadeado grande interesse no campo da imunidade inata. Tal interesse deve-se ao fato de estes receptores proporcionarem um papel vital no reconhecimento microbiano e no desenvolvimento da resposta imune adaptativa. Tendo em vista que há muito a ser investigado no tocante à relação imunomodulação-TLR, o objetivo deste projeto foi avaliar o efeito da própolis na expressão dos mesmos, bem como determinar a produção de citocinas próinflamatórias (IL-1b e IL-6) por macrófagos e esplenócitos de camundongos BALB/c. A expressão e a produção de citocinas do perfil Th1 (IL-2 e IFN-g) e Th2 (IL-4 e IL-10) por esplenócitos também foram avaliadas. A própolis induziu aumento na produção basal de IL-1b e na expressão de TLR-2 e TLR-4 em macrófagos peritoneais. A expressão de TLR-2 e TLR-4 e a produção de IL-1b e IL-6 também apresentaram valores aumentados em esplenócitos de camundongos tratados com própolis. Estes dados sugerem que a administração de própolis a curto prazo a camundongos pode estimular os eventos iniciais da resposta imune. A própolis não afetou a expressão e produção de IL-2, IL-4 e IL-10; contudo, a produção basal e estimulada de IFN-g foi inibida após a administração deste produto apícola, o que sugere seu efeito antiinflamatório in vivo / Propolis has been the subject of intense scientific research and its immunomodulatory action has been mentioned. The recent discovery and characterization of Toll like receptors (TLR) has triggered a great interest in the field of innate immunity. This interest is due to the fact that these receptors provide a vital role in microbial recognition and development of the adaptive immune response. Considering that there is much to be investigated regarding the relationship TLRimmunomodulation, the goal of this project was to evaluate propolis effect on TLR-2 and TLR-4 expression, and to determine the production of proinflammatory cytokines (IL-1b and IL-6), in macrophages and spleen cells from BALB/c mice. Th1 (IL-2 and IFN-g) and Th2 (IL-4 and IL-10) cytokines’ expression and production were also assessed in spleen cells. IL-1b basal production and TLR-2 and TLR-4 expression were increased in peritoneal macrophages of mice treated with propolis. TLR-2 and TLR-4 expression and IL-1b and IL-6 production were also increased in spleen cells of propolis-treated mice. These data suggest that propolis administration over a short-term to mice stimulates the initial steps of the immune response. Propolis did not affect IL-2, IL-4 and IL-10 expression and production, but both basal and Con A-stimulated IFN-g production were inhibited after propolis administration, what suggests its antiinflammatory action in vivo

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-02-23Bitstream added on 2014-06-13T20:30:00Z : No. of bitstreams: 1 sibut_rer_me_botfm.pdf: 718335 bytes, checksum: 3fed66d59981f5b2fd0fb7c6e6c0caa0 (MD5) / Universidade Estadual de Maringa / Com o objetivo de analisar a prevalência da imunização contra a hepatite B entre os servidores municipais que atuam em ambiente de risco de transmissão ocupacional na Secretaria Municipal de Saúde (SMS) de Maringá, foi utilizado um questionário semi-estruturado autoexplicativo, com questões pertinentes à situação do esquema de vacinação e ao conhecimento e aplicação das condutas de biossegurança pelos servidores da área da saúde, em seu ambiente de trabalho. Participaram desta pesquisa 152 servidores das equipes de enfermagem, odontologia, análises clínicas e médica. O software SPSS (Statistical Package for the Social Sciences versão 12.0) foi utilizado para análise estatística. Quanto aos resultados obtidos, verificou-se que 99,3% dos servidores da amostra receberam a vacina contra a hepatite B, o que é considerado um resultado significativo, visto que o profissional de saúde faz parte do grupo de risco e o PNI Programa Nacional de Imunização do Ministério da Saúde recomenda a vacinação de todos que compõem esse grupo. Verificamos que 63,2% dos servidores desenvolvem suas atividades profissionais somente na Secretaria Municipal de Saúde (SMS) de Maringá. Dentre os profissionais com atividades de risco de transmissão ocupacional desenvolvidas fora da SMS de Maringá observamos que 15,1% desses servidores pertencem à equipe médica, 13,8% à equipe de enfermagem, 7,2% à equipe de odontologia e somente um profissional (0,7%) à equipe de análises clínicas. Em relação à orientação recebida para se vacinar contra a hepatite B, 93,4% dos servidores referiram tê-la recebido. A maioria dos servidores (98,7%) relataram ter conhecimento das medidas de prevenção contra risco de transmissão ocupacional e 92,8% dos servidores identificam risco de contato com sangue durante o desenvolvimento de suas atividades profissionais... / This study aimed to analyzing the prevalence of hepatitis B immunization of among the city workers that work in environments with risk for occupational transmission in the City Health Care Secretary (CHCS) of Maringá. So, It was used a self-explaining and semi-structured questionnaire, with questions related to the situation of vaccination system and to the knowledge and application of biosecurity attitudes by health field professionals, in their workplace. Workers, in an amount of 152 individuals, took part in this survey and they were from nursing, odontology, clinic and medical analysis teams. The SPSS (Statistical Package for the Social Sciences) 12.0- version software was used for the statistical analysis. Concerning the obtained results, it was possible to verify that 99.3% of the sample workers received the hepatitis B vaccine, what is considered a meaningful result, since the health professional is part of the risk group and the NIP- National Immunization Program of the Health Ministry recommends the vaccination of every member from such group. We could verify that 63.2% of the workers perform their professional activities only in the City Health Care Secretary (CHCS) of Maringá. We could also observe that among the professionals with activities of risk for occupational transmission accomplished out of the CHCS of Maringá, 15.1% of these employees belong to the medical team, 13.8% are from the nursing one, 7.2% from the odontology group and only one professional (0.7%) is from the clinic analysis team. Concerning the received orientation to be vaccinated against hepatitis B, 93.4% of the employees said they had received it. Most of them (98.7%) said they knew the prevention measures against risk for occupational transmission and 92.8% of the workers identified contact risk with blood during the performance of their professional activities... ( Complete abstract, click eletronic address below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-13Bitstream added on 2014-06-13T20:12:17Z : No. of bitstreams: 1 balderramas_ha_me_botfm.pdf: 358097 bytes, checksum: c417b922a0a5cb167dc7ed65911f38d6 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Leucotrienos são mediadores clássicos da resposta inflamatória, descritos como agentes quimiotáticos e reguladores da atividade microbicida de células do sistema imune inato, tendo papel protetor contra diferentes agentes infecciosos. Neste estudo, nós investigamos o envolvimento de leucotrienos no curso da paracoccidioidomicose murina a partir dos seguintes parâmetros imunológicos: influxo celular, atividade da mieloperoxidase, produção de NO, produção de citocinas e recuperação fúngica em pulmões de camundongos selecionados de acordo com a intensidade da sua resposta inflamatória aguda máxima (AIRmax) e mínima (AIRmin). Observamos que a infecção por P. brasiliensis induz considerável produção de citocinas IL-6, IL-10, IFN- e TNF-, promove o recrutamento celular e produção de NO nos pulmões em diferentes períodos de estudo. Nos animais tratados com um inibidor as síntese de leucotrienos (MK886) observamos uma menor produção das citocinas IFN-, IL-6 e TNF- concomitante com a queda do influxo de neutrófilos, e também diminuição na produção de NO, esses resultados podem explicar uma maior carga fungica nos pulmões de animais que tiveram a síntese de leucotrienos inibida, sugerindo aos leucotrienos um possível papel protetor na paracoccidioidomicose experimental. Animais da linhagem AIRmax apresentaram menor carga fungica quando comparado com animais AIRmin, este resultado pode ser relacionado ao fenótipo da AIR quanto à migração de neutrófilos, além de uma menor produção de NO e citocinas pró-inflamatórias, conferindo aos camundongos com background AIRmax maior resistência a infecção por P.brasiliensis. / Leukotrienes are classic inflammatory response mediators considered chemotactic agents and microbicide activity regulators in cells of the innate immune system, playing a protective role against different infectious agents. In this study, we investigated the involvement of leukotrienes in the course of murine paracoccidioidomycosis based on the following immunologic parameters: cell influx, mieloperoxydase activity, NO production, cytokine production, and fungal recovery in lungs of mice selected according to the intensity of their low (AIRmin) and high (AIRmax) acute inflammatory response. Infection by P. brasiliensis induced considerable production of the cytokines IL-6, IL-10, IFN-, and TNF-, and led to cell recruitment, as well as NO production, in lungs at different study periods. In animals treated with MK886, a leukotriene biosynthesis inhibitor, IFN-, IL-6 and TNF- production was lower, while neutrophil influx and NO production decreased. These results may explain the higher fungal load in lungs of animals in which leukotriene synthesis was inhibited, suggesting that leukotrienes have a possible protective role in experimental paracoccidioidomycosis. AIRmax animals had lower fungal load relative to AIRmin ones, which can be related to the AIR phenotype regarding neutrophil migration, besides lower production of NO and pro-inflammatory cytokines; thus, mice presenting AIRmax background are more resistant to infection by P.brasiliensis.