TEIXEIRA, A. B. Óleo essencial das folhas do Quimiotipo II de Lippia alba (MILL.) N. E. Brown: mecanismo de ação antimicrobiano em Staphylococcus aureus e atividade cicatrizante. 2015. 151 f. Tese (Doutorado em Ciências Farmacêuticas) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-07-27T16:00:43Z No. of bitstreams: 1 2015_tese_abteixeira.pdf: 3579372 bytes, checksum: 856343ff104c5d17357510534982510d (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-07-27T16:00:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_tese_abteixeira.pdf: 3579372 bytes, checksum: 856343ff104c5d17357510534982510d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-27T16:00:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_tese_abteixeira.pdf: 3579372 bytes, checksum: 856343ff104c5d17357510534982510d (MD5) Previous issue date: 2015-04-27 / The Lippia alba is a medicinal plant widely used by the population for the treatment of various diseases. The chemical composition of essential oil presents qualitative and quantitative variation, ranking chemotypes. In Ceará, the chemotype II is recognized by the essential oil of L. alba (OELaII) contain high levels of limonene and citral. Wound healing involves cellular and molecular events that interact to occur reconstitution of the tissue. Bacterial contamination, mainly by S. aureus is one of the main factors that affect healing. The aim of this study was to investigate the OELaII mechanism of action of S. aureus and its healing activity. The mechanism of action was evaluated through the membrane changes in bacterial morphology and inhibition of virulence factors. The healing action was determined in vivo in experimental skin wounds through the area of ​​wound contraction, the clinical, histopathological and microbiological. The OELaII mechanism of action of S. aureus occurred by direct action on the cellular shell proven by irreversible changes in the permeability of the cytoplasmic membrane, as the results showed increased crystal violet uptake, release of nucleic acids and potassium efflux and damage the bacterial wall visualized by Atomic Force Microscopy. Along with this, inhibition of virulence factors highlighted in this study, may be associated with changes in gene expression, and to promote the hypothesis that OELaII modify the pattern of enzyme secretion, by altering the cell membrane. The results of the healing process, the groups treated with the formulations and OELaII OELaII base accelerated the healing process by promoting a significant increase in the percentage of wound contraction and epithelialization. The results showed that these groups during the treatment, a significant decrease in microbial population provide local favorable conditions by topical therapy aimed at the best results and the lowest possible time of the healing process. Therefore, the data of this study showed that OELaII is a healing agent of skin wounds, with high antimicrobial activity and that these biological activities reinforce the great potential of OELaII as a candidate for the development of a topical drug effective in the treatment of wounds in various clinical situations. / A Lippia alba é uma planta medicinal muito utilizada pela população brasileira para o tratamento de diversas doenças. A composição química de seu óleo essencial apresenta variação quantitativa e qualitativa, classificando em quimiotipos. No Ceará, o quimiotipo II é reconhecido pelo óleo essencial de L. alba (OELaII) conter elevados teores de limoneno e citral. A cicatrização de feridas envolve eventos celulares e moleculares que interagem para que ocorra a reconstituição do tecido. A contaminação bacteriana, principalmente por S. aureus, é um dos principais fatores que afeta a cicatrização. O objetivo desse estudo foi investigar o mecanismo de ação do OELaII sobre S. aureus e sua atividade cicatrizante. O mecanismo de ação foi avaliado através de alterações da membrana, na morfologia bacteriana e na inibição de fatores de virulência. A ação cicatrizante foi determinada in vivo em modelo experimental de feridas cutâneas através da área da ferida, da contração, da análise clínica, histopatológica e microbiológica. O mecanismo de ação do OELaII sobre S. aureus ocorreu por ação direta no envoltório celular comprovada pela alteração irreversível na permeabilidade da membrana citoplasmática, pois os resultados mostraram aumento da captação de cristal violeta, liberação de ácidos nucleicos e efluxo de potássio, bem como danos na parede bacteriana visualizado por Microscopia de Força Atômica. Junto a isso, a inibição dos fatores de virulência evidenciada nesse estudo, pode estar associada a alterações na expressão gênica, bem como favorecer a hipótese que o OELaII modifique o padrão de secreção enzimática, por alteração da membrana celular. Nos resultados da cicatrização, os grupos tratados com OELaII e formulações a base de OELaII, aceleraram o processo de cicatrização, promovendo um significativo aumento na porcentagem de contração das feridas e reepitelização. Os resultados nesses grupos mostraram que ao longo do tratamento, ocorreu uma diminuição significativa da população microbiana, fornecendo condições locais favoráveis por meio da terapia tópica com vistas aos melhores resultados e o menor tempo possível do processo de cicatrização. Por conseguinte, os dados encontrados neste estudo mostraram que o OELaII é um agente cicatrizante de feridas cutâneas, com elevada atividade antimicrobiana e que essas atividades biológicas reforçam o grande potencial do OELaII como candidato ao desenvolvimento de um fármaco de uso tópico, eficaz no tratamento de feridas cutâneas, em diversas situações clínicas.

Orientador: Maria de Lourdes Ribeiro de Souza da Cunha / Banca: Elisa Yoko Hirooka / Banca: Tereza Cristina Moreira de Oliveira / Banca: Carlos Magno Castelo Branco Fortaleza / Resumo: Os estafilococos coagulase-negativos (ECN) são integrantes da microbiota normal da pele humana e os microrganismos mais frequentemente isolados de materiais clínicos. No ambiente hospitalar são a maior causa de bacteremias, na maioria dos casos em pacientes mantidos em unidades de tratamento intensivo. A patogenia das infecções causadas por estas bactérias é complexa e multifatorial, sendo vários os fatores de virulência envolvidos nas infecções. O biofilme é o principal fator de virulência dos ECN, conferindo proteção contra o sistema imune do hospedeiro e a ação dos antimicrobianos. As toxinas estafilocócicas denominadas superantígenos são classificadas antigenicamente em toxina 1 da síndrome do choque tóxico (TSST-1) e em enterotoxinas. Desencadeiam uma série de efeitos tóxicos, pois funcionam como potentes toxinas gastrointestinais e estimulam de forma inespecífica a proliferação de células T. Os sistemas regulatórios estafilocócicos, tais como o sistema agr, podem afetar a produção das toxinas e do biofilme agindo como indutores ou repressores de genes específicos para a produção de fatores de virulência. Além dos fatores de virulência, o aumento da resistência antimicrobiana nos últimos anos tem fundamental significância nas infecções hospitalares. As amostras resistentes à oxacilina deixam poucas alternativas para o tratamento das infecções causadas por estes patógenos. Uma das drogas de escolha tem sido a vancomicina, porém já são relatados casos de susceptibilidade reduzida e de resistência a esta. Assim, este estudo objetivou caracterizar as espécies de ECN provenientes de hemoculturas de pacientes do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu quanto à detecção e expressão dos fatores de virulência, ao sistema agr envolvido na regulação da virulência e à susceptibilidade aos antimicrobianos / Abstract: Coagulase-negative staphylococci (CNS) are normal resident microbes of human skin, often isolated from clinical specimens. They are the major cause of bacteremia in inpatients, especially intensive care patients. Pathogenesis of infection caused by these organisms is complex and multifactorial, with several virulence factors involved in infection processes. Biofilm is key for CNS virulence, since it provides protection against the host's immune system and the action of antimicrobial agents. Staphylococcal toxins known as superantigens are antigenically classified as toxic shock syndrome toxin 1 (TSST-1) and enterotoxins. They trigger a chain of toxic effects by acting as potent gastrointestinal toxins and nonspecifically stimulating T cell proliferation. Staphylococcal regulatory systems, such as agr, may affect toxin and biofilm production through induction or repression of genes coding for virulence factor production specifically. In addition to virulence factors, increasing resistance rates to antimicrobial agents is also highly significant in nosocomial infections. Oxacillin-resistant strains leave few treatment alternatives for infection caused by these pathogens. Vancomycin has shown to be one drug of choice, although decreased susceptibility, as well as resistance, to vancomycin have been reported lately. Therefore, the aim of this study has been to categorize CNS species in blood culture specimens from inpatients at the UNESP Hospital das Clínicas in Botucatu, Brazil, as per detection and expression of virulence factors, agr system involved in virulence regulation, and susceptibility to antimicrobial agents / Doutor

Orientador: Luciane Dias de Oliveira. / Banca: Luana Marotta Reis de Vasconcellos / Banca: Fernanda Malagutti Tome / Banca: Naira Correia Cusma Pelógia / Banca: Simey Thury Vieira Fisch / Resumo: A baixa citotoxicidade e ação anti-inflamatória são características interessantes para enxaguatórios bucais, dentifrícios e medicamentos de uso odontológico. Sendo assim, é necessário avaliar estas propriedades nos extratos glicólicos vegetais que podem ser ingredientes das formulações desses produtos. O presente estudo avaliou as seguintes atividades biológicas para cada um dos extratos glicólicos de Cynara cardunculus var. scolymus (L.) Fiori (alcachofra), Myracrodruon urundeuva Allemão (aroeira-do-sertão) e Camellia sinensis (L.) Kuntze (chá verde) em culturas de macrófagos de camundongo (RAW 264.7) pelo tempo de exposição de 5 min e 24 h: a) atividade citotóxica pelo método do MTT em 11 diluições seriadas, sendo que a concentração inicial dos extratos foi de 200mg/mL. b) atividade anti-inflamatória, após estímulo com lipopolissacarídeo (LPS) de Escherichia coli pelo método ELISA quantificou IL-1β, TNF-α e IL-10. Os resultados foram analisados estatisticamente por ANOVA e teste de Tukey, com p ≤ 5%. A citotoxicidade dos extratos foi dose e tempo dependentes. No tempo de exposição de 5 min, o extrato de alcachofra apresentou citotoxicidade na concentração de 200 mg/mL. No tempo de exposição de 24 h, o chá verde apresentou citotoxicidade nas concentrações ≥ 50 mg/mL, aroeirado-sertão estimulou a proliferação de macrófagos na concentração de 0,39 mg/mL a 12,5 mg/mL e a alcachofra apresentou citotoxicidade nas concentrações ≥ 12,5 mg/mL. O extrato de chá verde apresentou potencial anti-inflamatório na concentração de 12,5 mg/mL e foi dose dependente, promovendo diminuição da produção de citocinas pró- inflamatória, como IL-1β e TNF-α. A aroeira-do-sertão apresentou ação imunopotenciadora na concentração de 12,5 mg/mL no tempo de exposição de 24 h. Com relação a alcachofra há necessidade de novos estudos para identificar sua ação imunomoduladora / Abstract: The low cytotoxicity and anti-inflammatory action are interesting features for mouthwashes, toothpastes and dental medication. Therefore, it is necessary to evaluate these properties in plant glycolic extracts which can be ingredients of the formulation of these products. This study evaluated the following biological activities for each of the glycolic extracts of Cynara cardunculus var. scolymus (L.) Fiori (artichoke), Myracrodruon urundeuva Allemão (pepper tree) and Camellia sinensis (L.) Kuntze (green tea) in mouse macrophage cultures (RAW 264.7) by the exposure time of 5 min and 24 h. a) cytotoxicity by MTT method in 11 serial dilutions, the initial concentration of the extracts was 200 mg/mL. b) Anti-inflammatory activity after stimulation with lipopolysaccharide (LPS) of Escherichia coli was performed by immunoenzymatic test (ELISA) using specific antibodies to quantify IL-1β, TNF-α and IL-10. The results were subordinated to statistical analyses (ANOVA and Turkey test), with p ≤ 0,05. The cytotoxicity of the extracts was dependent on dose and time. At 5 min exposure time, artichoke extract showed cytotoxicity at a concentration of 200 mg/mL. At 24 h exposure time, green tea showed cytotoxicity at the concentrations ≥ 50 mg/mL, pepper tree stimulated the proliferation of macrophages in the concentrations of 0,39mg/mL to 12.5 mg/mL and artichoke showed cytotoxicity at the concentrations ≥ 12.5 mg/mL. Green tea extract showed anti- inflammatory potential at a concentration of 12.5 mg/mL and was dependent on dose, promoting a decrease production of pro-inflammatory cytokines as IL-1β and TNF-α. Pepper tree presented immunopotentiating action at a concentration of 12.5 mg/mL at 24 h of exposure time. Regarding artichoke, there is a need for further studies to identify their immunomodulatory action / Doutor

Introducción: Un gran número de personas son afectadas por hepatitis, una enfermedad que causa una gran morbilidad y mortalidad. El riesgo principal de esta enfermedad es su falta de sintomatología, por lo que se estima que cientos de millones de personas están infectadas crónicamente sin saberlo y, por lo tanto, en riesgo de desarrollar cirrosis, descompensación hepática y carcinoma hepatocelular. La real prevalencia a nivel nacional no se conoce con exactitud, haciendo necesario estudios que contribuyan a la estimación de esta. Objetivo: Determinar la seroprevalencia de los marcadores infecciosos de VHB (HBsAg y Anticore VHB) y VHC (Anti VHC) así como la seroprevalencia según las características de los predonantes que acudieron al Banco de Sangre del Hospital Nacional Dos de Mayo durante el periodo 2011-2014. Diseño: Se trata de un estudio transversal, descriptivo y retrospectivo. Lugar: Banco de Sangre del Hospital Nacional Dos de Mayo. Materiales y métodos: Se usaron las fichas de selección del postulante realizadas a los predonantes que acudieron al banco de sangre del Hospital Nacional Dos de Mayo en el periodo 2011- 2014, para la obtención de los casos reactivos. Se incluyeron en el presente estudio 604 casos que resultaron reactivos al antígeno de superficie (HBsAg) para el virus de la hepatitis B y anticuerpos para el virus de la hepatitis C (Anti VHC) y B (Anti core VHB). Los datos recolectados fueron procesados y analizados en el paquete estadístico SPSS versión 20 para Windows: Prueba de Chi cuadrado y estimación de riesgo (OR). Resultados: Se encontró una una seroprevalencia global entre los predonantes de 1.94% (551/28276) para los marcadores de VHB y 0.19% (53/28276) para el de VHC. La seroprevalencia por marcador fue de 0.17% para HBsAg, 1.78% para Anti core VHB, y Anti VHC con 0.19%. Las seroprevalencias según las características de los predonantes fueron más altas en el caso del marcador Anti core VHB, obteniéndose 1.78% en donación por reposición, 1.75% en el género masculino, 1.26% en el grupo etario de 31 a 60 años, 1.55% en el grupo sanguíneo O, 1.74% para el Rh positivo, 0.67% en los solteros (38.7 %), y un 1.55% en aquellos con una sola pareja sexual. Se halló un riesgo significativo (OR=1.6, IC95%=1.03-2.50) entre el género masculino y la reactividad al Anti core VHB además de la asociación significativa entre el grupo sanguíneo B y los marcadores de hepatitis B (Anti core VHB y HBsAg), mostrándose como factor protector (OR=0.4, IC95%=0.14-0.92) y factor de riesgo (OR=5.5, IC95%=2.02-15.13) en dichos marcadores respectivamente. Conclusiones y recomendaciones: Los resultados de este estudio sugieren una baja seroprevalencia en general en el caso de hepatitis C pero más alta para los marcadores de hepatitis B de acuerdo a los reportes nacionales e internacionales. La relación entre el grupo sanguíneo y la predisposición a adquirir infecciones como hepatitis requiere de más estudios. Es necesaria la realización de estudios epidemiológicos adecuadamente planteados y organizados en una mayor población, para tener un mejor conocimiento de las características epidemiológicas de la infección de hepatitis B y C a nivel nacional y consecuentemente establecer mejores políticas de salud.

Orientador: Juliana Campos Junqueira / Banca: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: José Chibebe Junior / Resumo: Enterococcus faecium se tornou um dos mais temidos micro-organismos em infecções hospitalares, por apresentar maior facilidade em adquirir resistência aos antibióticos do que E. faecalis. Entretanto, faltam estudos voltados para o isolamento e identificação de E. faecium na cavidade bucal. Os objetivos deste trabalho foram isolar e identificar E. faecalis e E. faecium em canais radiculares com infecções endodônticas e comparar as cepas de E. faecalis e E. faecium em relação à sensibilidade aos antibióticos convencionais e à terapia fotodinâmica antimicrobiana (PDT). Além disso, essas espécies foram comparadas quanto à virulência in vivo, utilizando o modelo de infecção experimental de Galleria mellonella. As cepas de E. faecalis e E. faecium isoladas de canais radiculares foram identificadas pelo sistema Rapid ID 32 Strep e PCR multiplex. Todos os isolados identificados como E. faecalis e E. faecium, foram testadas quanto à sensibilidade aos antibióticos pelo método E-test para determinação da concentração inibitória mínima (MIC). A seguir, foram selecionadas algumas cepas de E. faecalis e E. faecium sensíveis e resistentes aos antibióticos de uso clínico na odontologia para testes de sensibilidade in vitro à terapia fotodinâmica antimicrobiana. A virulência das cepas de E. faecalis e E. faecium foram testadas in vivo no modelo de infecção experimental de G. mellonella por meio da análise da curva de sobrevivência das larvas e quantificação de UFC/mL de células bacterianas presentes na hemolinfa desses animais. Os dados de UFC/mL obtidos na terapia fotodinâmica e na infecção em G. mellonella foram submetidos à análise de variância e teste de Tukey. Os dados obtidos na curva de sobrevivência de G. mellonella foram analisados pelo método de Log-rank. Foram realizadas coletas de 38 canais radiculares de diferentes pacientes, sendo que 22 apresentaram culturas positivas para enterococcus spp.(58%).... / Abstract: Enterococcus faecium has become one of the most dreaded micro-organisms in nosocomial infections, due to its greater ease in acquiring resistance to antibiotics than E. faecalis. However, lack of studies focused on the isolation and identification of E. faecium in the oral cavity. The objectives of this study was to isolate and identify E. faecalis and E. faecium in root canals with endodontic infections and to compare strains of E. faecalis and E. faecium in sensitivity to conventional antibiotics and antimicrobial photodynamic therapy (PDT). Furthermore, these species were compared for virulence in vivo, using the model of experimental infection of Galleria mellonella. The strains of E. faecalis and E. faecium isolated from root canals were identified by the Rapid ID 32 Strep system and multiplex PCR. All isolates identified as E. faecalis and E. faecium were tested for antibiotic susceptibility E-test method for determination of minimal inhibitory concentration (MIC). Next, we selected some strains of E. faecalis and E. faecium sensitive and antibiotic-resistant clinical use in dentistry for in vitro susceptibility testing to antimicrobial photodynamic therapy. The virulence of strains of E. faecalis and E. faecium were tested in in vivo experimental model of infection of G. mellonella by analysis of larval survival curve and quantitation of CFU/mL bacterial cells present in the hemolymph of these animals. Data from CFU/mL obtained in photodynamic therapy and infection in G. mellonella were subjected to analysis of variance and Tukey test. The data on the survival of G. mellonella curves were analyzed by log-rank method. Samples of 38 root canals from different patients were performed and 22 had cultures positive for Enterococcus spp. (58%). Of these patients, all showed E. faecalis and only 2 had mixed infections with E. faecalis and E. faecium 6 isolates (27%) E. faecalis resistant to .... / Mestre

Orientador: Juliana Campos Junqueira / Banca: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Fernanda Malagutti Tomé / Banca: Renato Araújo Prates / Banca: Raduan Hage / Resumo: Devido ao rápido aumento dos micro-organismos resistentes aos antibióticos e ao desenvolvimento limitado de novos agentes antimicrobianos, as infecções por bactérias Gram-negativas estão se tornando um desafio para os profissionais da saúde e uma ameaça para a saúde pública internacional. O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito sinérgico dos antibióticos convencionais associados a terapia fotodinâmica antimicrobiana (PDT) no controle de Acinetobacter baumannii. Para realização desse trabalho, foram obtidos isolados clínicos de A. baumannii do Laboratório de Análises Clínicas Valeclin da cidade de São José dos Campos/SP, identificados pelo método de bioquimismo e submetidos ao teste de difusão em disco para verificar a sensibilidade antimicrobiana. Os isolados selecionados foram transferidos para o ICT/UNESP, onde foi realizado testes para determinação da Concentração Inibitória Mínima aos antibióticos Imipenem e Meropenem seguindo as normas da CLSI. Cepas sensíveis e resistentes aos antibióticos foram avaliadas quanto a sensibilidade in vitro à terapia fotodinâmica antimicrobiana. Além disso, foram testados os efeitos dos antibióticos convencionais, da PDT e da terapia combinada de antibióticos e PDT nas infecções experimentais induzidas em G. mellonella por isolados clínicos de A. baumannii resistentes aos antibióticos. Os resultados das terapias na infecção experimental foram avaliados por meio da curva de sobrevivência das lagartas de G. mellonella. Os dados dos testes in vitro foram submetidos à Análise de Variância e teste de Tukey. Os dados obtidos na curva de sobrevivência de G. mellonella foram analisados pelo método de Log-rank. Em todos os testes, foi considerado nível de significância de 5%. Nos resultados desse estudo, observou-se que o Laboratório Valeclin identificou 1,54% de amostras positivas para A. baumannii entre as 13.715 amostras clínicas analisadas em um período de... / Abstract: Due to the rapid growth of microorganisms resistant to antibiotics and the limited development of new antimicrobial agents, infections by Gramnegative bacteria are becoming a challenge for health professionals and a threat to international public health. The aim of this study was to evaluate the synergistic effect of conventional antibiotics associated with antimicrobial photodynamic therapy (PDT) in control of Acinetobacter baumannii. In order to conduct this project were obtained clinical isolates of A. baumannii at the Clinical Laboratory Valeclin situated in the city of São José dos Campos / SP, identified by bioquimismo method and submitted to disk diffusion test to verify the antimicrobial sensitivity. The selected isolates were transferred to the ICT / UNESP, which were conducted tests to determine the Minimum Inhibitory Concentration to Imipenem and Meropenem antibiotics following the rules of the CLSI. Sensitive and resistant strains to antibiotics were evaluated in vitro sensitivity to antimicrobial photodynamic therapy. Besides, the effects of conventional antibiotics, and combined PDT, and PDT of antibiotics in experimental infections induced in G. mellonella by clinical isolates of A. baumannii resistant to antibiotic therapy were tested. The results of therapies in experimental infection were evaluated by survival curve of worms G. mellonella. Data from in vitro tests were submitted to ANOVA and Tukey test. The data obtained in G. mellonella survival curve were analyzed by log-rank method. In all tests it was considered 5% significance level. The results of this study, it was observed that the Valeclin Laboratory identified 1.54% of positive samples for A. baumannii between the 13,715 clinical specimens analyzed in a period of 8 months. Among the isolates of A. baumannii, 58% were resistant to antibiotic imipenem and meropenem by disk diffusion test. Next, 3 isolates clinical sensitive and 18 isolates resistant to those ... / Doutor

SILVA, Janice Oliveira. Sensibilidade a antimicribianos de bacteroidales de microbiota intestinal de cães e o efeito de concentracöes subinibitórias de antimicrobianos na formação de biofilme in vitro. 2015. 71 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-12-21T14:02:09Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_josilva.pdf: 3676948 bytes, checksum: 203813cb8b6b1cfde06f219baa3a05cb (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-12-21T14:03:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_josilva.pdf: 3676948 bytes, checksum: 203813cb8b6b1cfde06f219baa3a05cb (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-21T14:03:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_josilva.pdf: 3676948 bytes, checksum: 203813cb8b6b1cfde06f219baa3a05cb (MD5) Previous issue date: 2015 / The Bacteroides and Parabacteroides spp are involved in serious diseases like abscesses and bacteremia in humans and animals. These bacteria are characterized by antimicrobial resistance and B. fragilis is the main anaerobic bacteria isolated from the intestine which can form biofilm. The aim of this study was to isolate Bacteroides and Parabacteroides strains from dogs intestinal tract, to investigate the antimicrobial susceptibility and to evaluate the action of antimicrobials subinhibitory concentrations on biofilm formation. A total of 30 strains were evaluated in this study. The assays were performed in accordance with the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) guidelines and other established methods. Antimicrobial susceptibility was observed against penicillin, amoxicillin-clavulanic acid, cefoxitin, imipenem, clindamycin, ciprofloxacin, enrofloxacin, tetracycline, chloramphenicol and metronidazole. Fifteen B. fragilis strains were tested for biofilm formation and the stronger four biofilm producer strains were chosen to evaluate the effect of subinhibitory concentrations (1/2 and 1/4MIC) of six antimicrobials on biofilm formation. B. fragilis was the most frequently isolated anaerobic bacteria followed by P. distasonis and B. vulgatus. The isolates were uniformly susceptible to metronidazole, imipenem and chloramphenicol and were penicillin resistant. Tetracycline and clindamycin were active against 50% and 33% of the strains respectively. The biofilm production of all four strains was uniformly and significantly lower (P<0.05) after growth with ½ MIC and ¼ MIC of imipenem and metronidazole. The induction of biofilm formation was observed in two isolates at ½ MIC and ¼ MIC of enrofloxacin. / Os gêneros Bacteroides e Parabacteroides estão envolvidos em doenças graves como abscessos e bacteremia em humanos e animais. Estas bactérias são caracterizadas pela resistência antimicrobiana e B. fragilis é a principal bactéria anaeróbica isolada do intestino que pode formar biofilme. O objetivo deste trabalho foi isolar Bacteroides e Parabacteroides do trato intestinal de cães, para avaliar a sensibilidade antimicrobiana e a ação de concentrações subinibitórias de antimicrobianos sobre a formação de biofilme. Um total de 30 amostras foram avaliadas neste estudo. Os ensaios foram realizados de acordo com os métodos e as diretrizes de Clínicals Laboratory Standards Institute (CLSI) e outras metodologias estabelecidas. Os antimicrobianos testados contra Bacteroides e Parabacteroides foram: penicilina, amoxicilina-ácido clavulânico, cefoxitina, imipenem, clindamicina, ciprofloxacina, enrofloxacina, tetraciclina, cloranfenicol e metronidazol. Quinze cepas de B. fragilis foram testadas para a formação de biofilme e as quatro cepas mais produtoras de biofilmes foram escolhidas para avaliar o efeito de concentrações subinibitórias (1/2 e 1/4CIM) de seis antimicrobianos sobre a formação de biofilme. B. fragilis foi a bactéria mais frequentemente isolada seguida por P. distasonis e B. vulgatus. Os isolados foram uniformemente sensíveis ao metronidazol, imipenem e cloranfenicol e foram resistentes à penicilina. Tetraciclina e clindamicina foram ativas contra 50% e 33% das cepas, respectivamente. A produção de biofilme de todas as quatro cepas foi uniforme e significativamente menor (P <0,05) após crescimento com ½ e ¼CIM de imipenem e metronidazol. A indução da formação de biofilme foi observada em duas cepas com ½ e ¼ CIM de enrofloxacina.

MESQUITA, Ana Maria Ribeiro Cardoso. Diarreia nosocomial e doença associada ao clostridium difficile em pacientes imunossuprimidos de hospital universitário em Fortaleza-CE. 2014. 84 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-08-27T16:21:17Z No. of bitstreams: 1 2014_tese_amrcmesquita.pdf: 2666784 bytes, checksum: fb31c21ded00b7d822d2e31e8dc09359 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-08-27T16:24:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_tese_amrcmesquita.pdf: 2666784 bytes, checksum: fb31c21ded00b7d822d2e31e8dc09359 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-08-27T16:24:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_tese_amrcmesquita.pdf: 2666784 bytes, checksum: fb31c21ded00b7d822d2e31e8dc09359 (MD5) Previous issue date: 2014 / Nosocomial diarrhea (ND) is a healthcare - associated infections (HAI) with increasing incidence and severity. It is proposed to determine the incidence of ND, the associated risk factors and the incidence of disease associated to Clostridium difficile (C. difficile). For this, a case - control study, pairing patients by age, sex, length of admission, and clinical diagnosis was conducted 06 / Feb/12 to 05/Fev/13 in the University Hospital of the UFC. Cases: patients with DN and controls: patients without ND. Nosocomial diarrhea is defined as watery stools, three or more times within 24 hours, over 12 hours without further diagnostic procedures or inflammatory causes. ND was detected by active surveillance, visiting the patients of Hematology, Liver and Renal Transplant. DN was defined as loose stools, 3 or more times in 24 hours, with duration longer than 12 hours, without other inflammatory causes or diagnostic procedures. The ELISA TOX A / B II test was used to detect toxin A and/or B and to diagnose C. difficile associated disease. Others HAI were investigated by the notification records of nosocomial infection (NI). The overall rate of Nosocomial infection was 7.17 %. The incidence of DN in the wards of Hematology, Liver and Renal Transplant was 4.80% (44/925) and C. difficile associated with DN was 0.12 % (01/925). Toxins A/B were detected in the case of C. difficile [1/43 (2.32%)] and controls [3/72 (4.17%)]. DN was significantly associated with previous use > 6 antimicrobials per patient, beyond the prior use of ciprofloxacin, metronidazole, polymyxin B and enteral feeding (p ≤ 0.05). Patients with ND remained in hospital longer, had more vomiting, cramps and fever, verifying high statistical significance (p ≤ 0.05). Other identified HAI were mainly urinary infection 54% (15/28), followed by bacterial bloodstream infection 32% (8/28), surgical site infection 11% (3/28) and soft tissue infection 4% (1/28). ND entails risks to the already debilitated patients. The data demonstrate the presence of endemic C. difficile. The updated of the local epidemiology guide control measures NI, such as judicious use of antibiotics, enteral feeding precautions and contact precautions for patients with nosocomial diarrhea. / Diarreia nosocomial (DN) é uma infecção relacionada à assistência à saúde (IRAS) com incidência e severidade crescentes. Propõe-se determinar a incidência da DN, os fatores de risco e a incidência da doença associada a Clostridium difficile (C. difficile). Para isso, um estudo caso – controle, pareando pacientes por idade, sexo, período de admissão, clínica e diagnóstico, foi conduzido, de 06/ fev/12 a 05/fev/13, no Hospital Universitário da UFC. Casos ̶ pacientes com DN e Controles ̶ pacientes sem DN. Definiu-se DN como fezes líquidas, três ou mais vezes em 24 horas, com duração superior a 12 horas, sem outras causas inflamatórias ou procedimentos diagnósticos. DN foi detectada mediante busca ativa, visitando-se os pacientes das Unidades de Hematologia, Transplante Hepático e Renal. O teste ELISA TOX A/B II foi utilizado para detectar as toxinas A e/ou B e diagnosticar doença associada ao C. difficile. Demais IRAS foram investigadas por intermédio de fichas de notificação de infecção hospitalar (IH). O índice geral de IH foi de 7,17%. A incidência da DN nas enfermarias de Hematologia, Transplante Hepático e Renal foi 4,80% (44/925) e da DN associada ao C. difficile 0,12% (01/925). Detectaram-se toxinas A/B de C. difficile em caso [1/43 (2,32%)] e controles [3/72 (4,17%)]. DN foi significantemente associada ao uso prévio > 6 antimicrobianos por paciente, além do uso prévio de ciprofloxacina, metronidazol, polimixina B e dieta enteral (p≤ 0,05). Pacientes com DN permaneceram mais tempo internados, tiveram mais vômitos, cólicas e febre, verificando-se alta significância estatística (p≤ 0,05). Outras IRAS identificadas, nos casos e controles, foi infeção do trato urinário 54% (15/28), seguida da corrente sanguínea 32% (8/28), do sítio cirúrgico 11% (3/28) e de infecção de partes moles 4% (1/28). DN impõe riscos aos pacientes já debilitados. Os dados demonstram a presença endêmica do C. difficile. A atualização da epidemiologia local orienta medidas de controle da IH, como uso judicioso de antibióticos, cautelas com a dieta enteral e precauções de contato, para os pacientes com diarreia nosocomial.

LIMA, Danya Bandeira. Potencial antimicrobiano e antiparasitário do veneno da Dinoponera quadriceps. 2014. 88 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-06-03T14:04:15Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_dblima.pdf: 6205009 bytes, checksum: 58fbe277dbbb51e29a321732d2be5d2a (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-06-03T14:04:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_dblima.pdf: 6205009 bytes, checksum: 58fbe277dbbb51e29a321732d2be5d2a (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-03T14:04:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_dblima.pdf: 6205009 bytes, checksum: 58fbe277dbbb51e29a321732d2be5d2a (MD5) Previous issue date: 2014 / Animal toxins can be a source of molecular models for the design of new drugs. This study investigated the antimicrobial and trypanocidal potential from Dinoponera quadriceps ant venom (DqV) aiming to discover therapeutic value substances. We conducted the microdilution test, where it was determined the minimum inhibitory concentration (MIC) and Minimum Lethal Concentration (MLC) over Staphylococcus aureus ATCC 6538P , Escherichia coli ATCC 10536 , Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 , Salmonella subsp cholearaesuis choleraesuis serotype choleraesuis ATCC 10708 and Candida albicans ATCC 10231 strains and two microbial strains of Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA), S. aureus ATCC 33591 and S. aureus CCBH 5330. MIC and MLC of DqV were respectively 6.25 µg/mL and 12.5 µg/mL for S. aureus ATCC 6538P, 3.12 µg/mL and 3.12 µg/mL for E. coli, 12.5 µg/mL and 12.5 µg/mL for P. aeruginosa, 12.5 µg/mL and 25 µg/mL for S. choleraesuis, 25 µg/mL and 50 µg/mL for C. albicans, 12.5 µg/mL and 50 µg/mL for S. aureus CCBH 5330 and 100 µg/mL and 100 µg/mL for S. aureus ATCC 33591. Mechanism of action experiments were performed for the strain of S. aureus ATCC 6538P methicillin-susceptible (MSSA), that changes in the permeability of the bacterial membrane of S. aureus treated with bacteriostatic and bactericidal concentrations of DqV was observed by the crystal violet assay and release of genetic material assay. A lowest MIC was observed when alkaline pH broth was used (7,5-9,0). Complete bacterial growth inhibition was observed after 4 h of incubation with the MLC of DqV. Bacterial morphology was analyzed by atomic force microscopy after exposure of bacteria to the CIM and CIM /2 of DqV for 4 hours, showing membrane damage. In antiparasitic assays, we determined the cytotoxic effects of the venom on epimastigote and trypomastigote forms of the Y strain of Trypanosoma cruzi. In epimastigotes, cytotoxicity was evaluated at 24 and 48 h, finding IC50 of 28.32 µg/mL and 20.67 µg/mL, respectively. The mechanism of cell death was assessed by flow cytometry and revealed the presence of necrotic and apoptotic involvement in the cytotoxic effect of DqV over epimastigote form, in addition, the appearance of double labeled cells with PI and Annexin V-FITC, indicating the occurrence of late apoptosis. Cytotoxicity was evaluated over trypomastigote finding an IC50 of 1.978 µg/mL and over RAW 264.7 cells finding an IC50 of 32.44 µg/mL. The venom showed antibacterial activity against S. aureus MSSA and MRSA, P. aeruginosa, S. choleraesuis, E. coli and C. albicans, suggesting membrane damage in S. aureus ATCC 6538P. Additionally, showed cytotoxic potential on epimastigote and tripomastigote forms of Y strain of T. cruzi. / As toxinas animais podem ser fonte de modelos moleculares para o desenho de novos fármacos. Este trabalho objetivou estudar o potencial antimicrobiano e tripanocida do veneno da formiga Dinoponera quadriceps (VDq) visando à descoberta de substância de valor terapêutico. Foi realizado o ensaio de microdiluição em caldo, onde foi determinado a Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Letal Mínima (CLM) das cepas Staphylococcus aureus ATCC 6538P, Escherichia coli ATCC 10536, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella cholearaesuis subsp. choleraesuis sorotipo choleraesuis ATCC 10708 e Candida albicans ATCC 10231 e duas cepas Staphylococcus aureus Meticilina Resistente (MRSA), S. aureus ATCC 33591 e S. aureus CCBH 5330. CIM e CLM de VDq foram respectivamente 6,25 µg/mL e 12,5 µg/mL para S. aureus ATCC 6538P, 3,12 µg/mL e 3,12 µg/mL para E. coli, 12,5 µg/mL e 12,5 µg/mL para P. aeruginosa, 12,5 µg/mL e 25 µg/mL para S. choleraesuis, 25 µg/mL e 50 µg/mL para C. albicans, 12,5 µg/mL e 50 µg/mL para S. aureus CCBH 5330 e 100 µg/mL e 100 µg/mL para S. aureus ATCC 33591. Em seguida foram realizados experimentos de mecanismo de ação para a cepa de S. aureus ATCC 6538P Sensível à Meticilina (MSSA), onde se verificou alteração na permeabilidade da membrana bacteriana de S. aureus tratado com concentrações bacteriostáticas e bactericidas de VDq através do ensaio do cristal violeta e do ensaio de liberação de material genético. Uma menor CIM foi encontrada quando pHs alcalinos foram utilizados no teste (7,5-9,0). Uma completa inibição de crescimento foi observada após 4 h de incubação com CLM de VDq. A morfologia bacteriana foi avaliada por microscopia de força atômica após exposição da bactéria à CIM e CIM/2 de VDq durante 4 h, mostrando o dano de membrana. Nos ensaios antiparasitários, foram observados os efeitos citotóxicos do veneno sobre formas epimastigotas e tripomastigotas da cepa Y de Trypanosoma cruzi. Nas formas epimastigotas, a citotoxicidade foi avaliada em 24 e 48 h, com IC50 de 28,32 µg/mL e IC50= 20,67 µg/mL, respectivamente. O mecanismo de morte celular foi avaliado por citometria de fluxo e revelou envolvimento necrótico e apoptótico no efeito do VDq sobre formas epimastigotas, além do aparecimento de células marcadas duplamente com PI e anexina V-FITC, indicando a ocorrência de apoptose tardia. A citotoxicidade foi avaliada sobre formas tripomastigotas encontrando uma IC50 de 1,978 µg/mL e sobre células RAW 264.7 uma IC50 de 32,44 µg/mL. O veneno apresentou atividade antimicrobiana sobre S. aureus MSSA e MRSA, P. aeruginosa, S. choleraesuis, E. coli e C. albicans, sugerindo lise de membrana em S. aureus ATCC 6538P. Adicionalmente, apresentou potencial citotóxico sobre as formas epimastigota e tripomastigorta de cepa Y de T. cruzi.

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:24:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-12-11. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:47:23Z : No. of bitstreams: 1 000843125.pdf: 3415915 bytes, checksum: 3c3dc53c547494a401c76c5c860f02ab (MD5) / Enterococcus faecium se tornou um dos mais temidos micro-organismos em infecções hospitalares, por apresentar maior facilidade em adquirir resistência aos antibióticos do que E. faecalis. Entretanto, faltam estudos voltados para o isolamento e identificação de E. faecium na cavidade bucal. Os objetivos deste trabalho foram isolar e identificar E. faecalis e E. faecium em canais radiculares com infecções endodônticas e comparar as cepas de E. faecalis e E. faecium em relação à sensibilidade aos antibióticos convencionais e à terapia fotodinâmica antimicrobiana (PDT). Além disso, essas espécies foram comparadas quanto à virulência in vivo, utilizando o modelo de infecção experimental de Galleria mellonella. As cepas de E. faecalis e E. faecium isoladas de canais radiculares foram identificadas pelo sistema Rapid ID 32 Strep e PCR multiplex. Todos os isolados identificados como E. faecalis e E. faecium, foram testadas quanto à sensibilidade aos antibióticos pelo método E-test para determinação da concentração inibitória mínima (MIC). A seguir, foram selecionadas algumas cepas de E. faecalis e E. faecium sensíveis e resistentes aos antibióticos de uso clínico na odontologia para testes de sensibilidade in vitro à terapia fotodinâmica antimicrobiana. A virulência das cepas de E. faecalis e E. faecium foram testadas in vivo no modelo de infecção experimental de G. mellonella por meio da análise da curva de sobrevivência das larvas e quantificação de UFC/mL de células bacterianas presentes na hemolinfa desses animais. Os dados de UFC/mL obtidos na terapia fotodinâmica e na infecção em G. mellonella foram submetidos à análise de variância e teste de Tukey. Os dados obtidos na curva de sobrevivência de G. mellonella foram analisados pelo método de Log-rank. Foram realizadas coletas de 38 canais radiculares de diferentes pacientes, sendo que 22 apresentaram culturas positivas para enterococcus spp.(58%).... / Enterococcus faecium has become one of the most dreaded micro-organisms in nosocomial infections, due to its greater ease in acquiring resistance to antibiotics than E. faecalis. However, lack of studies focused on the isolation and identification of E. faecium in the oral cavity. The objectives of this study was to isolate and identify E. faecalis and E. faecium in root canals with endodontic infections and to compare strains of E. faecalis and E. faecium in sensitivity to conventional antibiotics and antimicrobial photodynamic therapy (PDT). Furthermore, these species were compared for virulence in vivo, using the model of experimental infection of Galleria mellonella. The strains of E. faecalis and E. faecium isolated from root canals were identified by the Rapid ID 32 Strep system and multiplex PCR. All isolates identified as E. faecalis and E. faecium were tested for antibiotic susceptibility E-test method for determination of minimal inhibitory concentration (MIC). Next, we selected some strains of E. faecalis and E. faecium sensitive and antibiotic-resistant clinical use in dentistry for in vitro susceptibility testing to antimicrobial photodynamic therapy. The virulence of strains of E. faecalis and E. faecium were tested in in vivo experimental model of infection of G. mellonella by analysis of larval survival curve and quantitation of CFU/mL bacterial cells present in the hemolymph of these animals. Data from CFU/mL obtained in photodynamic therapy and infection in G. mellonella were subjected to analysis of variance and Tukey test. The data on the survival of G. mellonella curves were analyzed by log-rank method. Samples of 38 root canals from different patients were performed and 22 had cultures positive for Enterococcus spp. (58%). Of these patients, all showed E. faecalis and only 2 had mixed infections with E. faecalis and E. faecium 6 isolates (27%) E. faecalis resistant to ....