Orientadores: Pedro Luiz Rosalen, Severino M. Alencar / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-10T01:20:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bueno-Silva_Bruno_M.pdf: 1697425 bytes, checksum: 055f2dd91e407acf734bcc51d0a438bd (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Entre as própolis brasileiras, urna nova própolis ainda não classificada de acordo com Park et al., 2002 e denominada de própolis vermelha originária do estado de Alagoas (Nordeste do Brasil), tem mostrado resultados interessantes em relação a sua composição química e atividade biológica em estudos preliminares. Assim, o objetivo principal deste trabalho é identificar a origem botânica da própolis vermelha, a composição química e atividade biológica do extrato etanólico da própolis (EEP) e do extrato etanólico da resina da planta (EER), avaliar o efeito sazonal sobre a composição química e atividade biológica do EEP e do EER. Esses objetivos foram atingidos através das seguintes metodologias: 1- observação do comportamento de visita das abelhas à . vegetação próxima à colméia; 2- comparação dos perfis químicos dos vegeÜlis visitados pelas abelhas coletoras de resina e da própolis vermelha, obtidos por cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa e análises complementares, estabelecendo-se assim, as características entre ambos os materiais, visando à identificação do marcador biológico botânico e 3- avaliação da influência do efeito sazonal anual sobre a própolis vermelha e sua vegetação fonte por meio da atividade antimicrobiana e perfil químico, com coletas bimensais das amostras durante o período de 1 ano. A atividade antimicrobiana foi avaliada por meio da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) e os microrganismos usados foram: O Streptococcus mutans UA159, Streptococcus sobrinus 6715, Staphylococcus aureus ATCC25923 e Actinomyces naeslundii ATCC 12104. Os resultados demonstraram o mesmo perfil quimico entre o EEP e o EER da planta Dalbergia ecastophyllum (L.) Taub., cuja característica foi a alta concentração relativa das isoflavonas 3-hidroxi-8,9-dimetoxipterocarpin e medicarpina. Os perfis químicos do EEP e do EER, obtidos ao longo do ano, através do testes químicos, apresentaram-se distintos dos perfis dos demais 12 tipos de própolis brasileiras já classificadas e variaram quantitativamente de acordo com a sazonalidade. A CIM variou entre 15,6-125 'mu'g/rnL e a CBM de 31,2 - 500 'mu'g/mL considerando os 4 microrganismos àvaliados. Conclui-se que esta própolis, cuja origem botânica é a Dalbergia ecastophyllum, pode ser classificada corno o 13° tipo de própolis, de acordo Park et al., 2002, e tanto o EEP quanto o EER apresentaram alta atividade antimicrobiana, os quais poderão ser utilizados para pesquisas futuras de novas moléculas no controle da cárie dental / Abstract: Among the Brazilian propolis, new propolis not yet classified, according to Park et al., 2002 and called of red propolis, originary from Alagoas state (Northeast of Brazil), have showed interesting results in preliminary studies in our laboratories. Thus, the main objective of this work is to identify the botanical marker of red propolis, the chemical composition and biological activity of extract ethanolic of propolis (EEP) and the extract ethanolic of resin of plant (EER), verifying the effect of seasonal period on chemical composition and antimicrobial activity of EEP and EER. This objective was reached through the following methodologies: 1- observation of bee behavior in visiting vegetation next beehive; 2- comparison of chemical profile of vegetables visited by bees for collecting resin with red propolis, gotten for liquid chromatography of high efficiency in phase reverse and complementary analyses, for establishing the common characteristics between both materiaIs, aiming to identification of botanical biological marker; 3- evaluation of influence seasonal annual effect on the red propolis and its vegetation source by means of the antimicrobial activity and chemical profile, with bymonthly collections of the samples during the period of 1 year. The antimicrobial activity was evaluated by Minimal Inhibitory Concentration (MIC) and Minimal Bactericidal Concentration (MBC) and microorganism used were Streptococcus mutans UA159, Streptococcus sobrinus 6715, Staphylococcus aureus ATCC25923 e Actinomyces naeslundii ATCC 12104. The results had the same demonstrated to chemical profile between the EEP and the EER of the plant Dalbergia ecastophyllum (L.) Taub. Whose characteristic was the high relative concentration of isoflavonas 3-hidroxi-8,9 dimetoxipterocarpin and medicarpina. The chemical profiles of EEP and EER varied quantitatively according to seasonal effect The CIM varied between 15.6-125 'mu'g/rnL and the CBM of 31.2 - 500 'mu'g/rnL. One concludes that these propolis, whose botanical origin is the Dalbergia ecastophyllum, can be classified as 13° type of propolis, according to Park et al., 2002 and the EEP and EER showed high antibacterial activity which can be used for future molecule research in the control of caries dental / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestre em Odontologia

A procura por novos agentes com acao antimicrobiana esta se intensificando nos ultimos anos, principalmente devido ao crescente aparecimento de linhagens de micro-organismos patogenicos resistentes aos farmacos disponiveis. Substancias naturais, como o eugenol, presente nos oleos essenciais de varias plantas, e alguns compostos heterociclicos, como os derivados benzoxazolicos, sao conhecidos por apresentarem diversas propriedades biologicas, incluindo acao antimicrobiana. Buscando a obtencao de novos produtos ativos contra micro-organismos, em especial fungos, empregou-se a estrategia de hibridizacao molecular para preparar moleculas mistas contendo residuos estruturais de eugenol e de nucleo benzoxazolico. As oito substancias finais propostas foram obtidas com sucesso a partir da ciclo-oxidacao de iminas ou ciclo-condensacao de amidas, ambas derivadas de o-aminofenois originados do eugenol ou de seu analogo, diidroeugenol. O metodo baseado na ciclo-condensacao de amidas mostrou-se mais simples e eficiente. Os produtos tiveram sua identidade confirmada por meio de espectroscopia no infravermelho e de ressonancia magnetica nuclear. Esses produtos foram avaliados como antimicrobianos contra especies patogenicas ou oportunistas de Candida (C. albicans, C. krusei, C. glabrata, C. parapsilosis e C. tropicalis) e contra bacterias Gram positiva (Staphylococcus aureus) e Gram negativa (Escherichia coli). Nenhum derivado benzoxazolico apresentou atividade antibacteriana ate 100 µg.mL-¹. Por outro lado, quatro benzoxazois, 9c, 9d, 10a e 10b, apresentaram acao contra pelo menos uma especie de Candida. O produto 10a foi o mais ativo contra C. albicans e C. krusei (CI_50 = 321 µM) e o benzoxazol 10b exibiu maior potencia contra C. glabrata (CI_50 = 332 µM). As quatro substancias ativas apresentaram valores de CI_50 melhores que os descritos para o eugenol, o qual foi ativo apenas contra C. krusei (CI_50 = 610 µM). Alem desse perfil antifungico, destaca-se que esses benzoxazois foram menos citotoxicos que o eugenol frente as celulas sanguineas mononucleares humanas. Mesmo esses benzoxazois nao tendo potencia superior ao farmaco de referencia empregado no ensaio biologico (fluconazol, CI_50 = 1,6 a 104,3 µM), representam moleculas ineditas passiveis de alteracao estrutural para otimizacao de atividade. / The search for new agents with antimicrobial activity is intensifying in recent years, mainly due to the increasing appearance of pathogenic micro-organisms strains resistant to available drugs. Natural substances such as eugenol, present in the essential oils of many plants, and some heterocyclic compounds such as benzoxazoles are known for their various biological properties, including antimicrobial activity. In order to obtain new active compounds against microorganisms, especially fungi, we applied the molecular hybridization strategy to prepare mixed molecules containing structural eugenol and benzoxazole cores. The final eight substances proposed have been successfully obtained from the oxidative cyclization of imines or cyclo-condensation of amides, both derived from o-aminophenols originated from eugenol or its analogue, diidroeugenol. The benzoxazoles obtained by amide intermediates was simpler and efficient. The products had their identities confirmed by infrared spectroscopy and nuclear magnetic resonance. These products were evaluated as antimicrobial agents against pathogenic or opportunistic species of Candida (C. albicans, C. krusei, C. glabrata, C. parapsilosis and C. tropicalis) and against Gram positive bacteria (Staphylococcus aureus) and gram negative (Escherichia coli). None of the benzoxazoles showed antibacterial activity up to 100 μg.mL-1. Moreover, four benzoxazoles, 9c, 9d, 10a and 10b, presented activity against at least one species of Candida sp. The product 10a was the most active against C. albicans and C. krusei (IC_50 = 321 μM) and benzoxazole 10b exhibited higher potency against C. glabrata (IC_50 = 332 μM). These four active substances showed better IC_50 values than those for eugenol, which was only active against C. krusei (IC_50 = 610 μM). In addition to this antifungal profile, it is noteworthy that these benzoxazoles were less cytotoxic than eugenol in human blood mononuclear cells assay. Although these derivatives have not shown greater potencies than that of the reference drug used in the test (fluconazole, IC_50 = 1.6 to 104.3 μM), they represent novel chemical entities capable of structural change for activity optimization. / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq

Orientador: Mauro Pedrine Santamaria / Co-orientador: Andrea Carvalho de Marco / Banca: Renato Corrêa Viana Casarin / Banca: Antônio Olavo Cardoso Jorge / Resumo: O presente estudo clínico controlado randomizado teve como objetivo avaliar a resposta clínica periodontal e os possíveis efeitos adversos da utilização da claritromicina (CLM) associada à terapia mecânica periodontal no tratamento de pacientes com periodontite agressiva generalizada. Para tal, foram selecionados 40 pacientes apresentando periodontite agressiva generalizada que foram distribuídos aleatoriamente, dentro de dois grupos: grupo claritromicina com 20 indivíduos que receberam RAR associado à claritromicina (500 mg - 12/12 horas) durante 3 dias; grupo placebo com 20 indivíduos que receberam RAR associado ao placebo. Foram avaliados profundidade de sondagem (PS), ganho de nível de inserção clínica (NIC) e sangramento à sondagem no baseline, 3 e 6 meses após o procedimento. Quanto aos resultados, ambos os tratamentos obtiveram melhorias clínicas em relação ao baseline, com diferença estatisticamente significativa apenas para redução em PS à favor do grupo claritromicina. Concluímos que o uso da claritromicina associado à terapia mecânia mostra-se superior à terapia padrão ouro para o tratamento de periodontite agressiva generalizada / Abstract: The present randomized, clinical trial aimed to assess the periodontal clinical response and the possible adverse effects of the clarithromycin combined to periodontal mechanical therapy in the treatment of patients with generalized aggressive periodontitis. To this, 40 patients were select and randomly assigned into two groups: Group clatithromycin with 20 subjects received SRP associated with clarithromycin (500 mg - 12/12 hours) for 3 days; group placebo with 20 subjects received SRP associated with placebo. Probing depth (PD), gain in clinical attachment level (CAL) and bleeding probing were evaluated at baseline, 3 and 6 months postoperatively. As results, both treatments had clinical benefits better than baseline, just differing statistically to PD reduction for the clarithromycin group. It may be concluded that the use of clarithromycin associated with mechanical treatment is better than the gold standard for the treatment of generalized aggressive periodontitis / Mestre

Orientador: Graziella Nuernberg Back Brito / Banca: Luciane Vieira Garcia / Banca: Fernanda Malagutti Tomé / Resumo: O objetivo do trabalho foi investigar se os extratos de Pfaffia paniculata K. e Juglans regia L. possuem ação antifúngica, antibacteriana e toxicidade celular, com testes in vitro. Para os testes antifúngicos foram utilizadas cepas ATCC de Candida spp., e para os testes antibacterianos foram utilizadas cepas ATCC de Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus mutans e Pseudomonas aeruginosa. Para a atividade antimicrobiana primeiramente foram determinados os valores da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e da Concentração Microbicida Mínima (CMM) dos extratos pelo método de microdiluição em caldo, segundo Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Os micro-organismos que apresentaram CMM foram selecionados para os testes em biofilme, no qual foi preparado em fundo de placa com 96 poços, por 48 h. Após os biofilmes foram tratados por 5 min. utilizando as concentrações de 200, 100 e 50 mg dos extratos. Para mensuração da biomassa foi utilizado o teste de Cristal violeta (CV), e para avaliar a atividade metabólica foi utilizado o teste de MTT. A citotoxicidade foi avaliada sobre fibroblastos gengivais humanos (FMM-1) utilizando os mesmos parâmetros de tratamento utilizados para os testes em biofilmes. Foram avaliadas a viabilidade celular pelos testes de MTT, vermelho neutro e cristal violeta. Os dados obtiveram distribuição normal e foram analisados por ANOVA e teste de Tukey, com significância de 5% (p<0.05%). O extrato ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to investigate whether extracts of Pfaffia paniculata K. and Juglans regia L. have antifungal, antibacterial and cellular toxicity, with in vitro tests. ATCC strains of Candida spp. Were used for antifungal tests, and ATCC strains of Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus mutans and Pseudomonas aeruginosa were used for the antibacterial tests. For the antimicrobial activity, the values of the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and the Minimal Microbicidal Concentration (CMM) of the extracts were determined by the microdilution method in broth, according to Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). The microorganisms that presented CMM were selected for the biofilm tests, in which it was prepared on a 96-well plate bottom for 48 h. After the biofilms were treated for 5 min. Using the concentrations of 200, 100 and 50 mg of the extracts. To measure the biomass, the Violet Crystal test (CV) was used, and the MTT test was used to evaluate the metabolic activity. Cytotoxicity was assessed on human gingival fibroblasts (FMM-1) using the same treatment parameters used for biofilm tests. Cell viability was evaluated by the MTT, neutral red and violet crystal tests. The data obtained normal distribution and were analyzed by ANOVA and Tukey test, with significance of 5%. The extract of P. paniculata showed antifungal action in biofilms, with average reductions of 29.4 and 42.7% in CV and MTT tests; The antibacterial action was restricted to S. mutans and P. aeruginosa with mean reductions of 15.7 and 28.6% in the respective tests. The extract of J. regia also demonstrated antifungal action with an average reduction of 22.2% in biomass and 31.4% in metabolic activity. The antimicrobial action was restricted to P. aeruginosa with mean reductions of 17.7 and 15.6%,....(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

DODOU, H. V. Atividade antimicrobiana da violaceína sobre Staphylococcus epidermidis. 2017. 95 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-04-06T16:04:54Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_hvdodou.pdf: 1913254 bytes, checksum: c2a123515261efe9f3fff2287481db0d (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-04-06T16:05:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_hvdodou.pdf: 1913254 bytes, checksum: c2a123515261efe9f3fff2287481db0d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-06T16:05:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_hvdodou.pdf: 1913254 bytes, checksum: c2a123515261efe9f3fff2287481db0d (MD5) Previous issue date: 2017-02-15 / Staphylococcus epidermidis is part of the human’s natural microbiota, but has pathogenic potential when it comes to infections related to medical devices. The emergence of strains resistant to several antimicrobials has created challenges in the choice of therapy. Given this scenario, it is very important to investigate new substances with antimicrobial potential. Violacein is a metabolite produced by bacteria of different species, especially Chromobacterium violaceum, which has potential antimicrobial activity on Gram-positive microorganisms. The aim of the study was to evaluate the antimicrobial activity of violacein on strains of S. epidermidis forming and non-forming biofilm, as well as to evaluate its ability to act synergistically with antimicrobial drugs already marketed. VIO demonstrated excellent antimicrobial action on S. epidermidis ATCC 12228 and ATCC 35984, presenting bacteriostatic action (MIC = 10 μg / mL and 20 μg / mL for S. epidermidis ATCC 12228 and 35984, respectively) and bactericidal action (MBC = 20μg / mL for both strains). In addition, the bactericidal action was observed with short exposure times (2-3 hours). Violacein was also capable of synergistically modulating the action of several antimicrobial agents, like amikacin, gentamicin, ciprofloxacin, cefepime, ceftazidime, vancomycin, meropenem, ceftriaxone, cephalothin e oxacilin, on S. epidermidis, reducing MIC values for these microorganisms by up to 16 times. VIO was able to inhibit the formation of microbial biofilms at the same concentration that inhibited growth in planktonic cells and eradicated already-formed biofilm at 8-fold higher concentration (MBEC = 160 μg / mL). Its action on biofilm already formed was potentiated when associated with antimicrobial drugs already marketed, being able to completely eradicate the biofilm when associated with ciprofloxacin, in concentrations equivalent to ½ MBEC. These results show that VIO is a promising substance for the development of a new antimicrobial drug with action on this pathogen, including its biofilm, or even to be associated with already commercialized antibiotics. / Staphylococcus epidermidis faz parte da microbiota natural do homem, mas apresenta potencial patogênico quando se trata de infecções relacionadas a dispositivos médicos. O surgimento de cepas resistente a diversos antimicrobianos vem criando desafios na escolha da terapêutica. Diante desse cenário, tornam-se muito importantes estudos que investiguem novas substâncias com potencial antimicrobiano. A violaceína (VIO) é um metabólito produzido por bactérias de diferentes espécies, com destaque para Chromobacterium violaceum, que apresenta potencial atividade antimicrobiana sobre microrganismos Gram-positivo. O estudo visou avaliar a atividade antimicrobiana da VIO sobre cepas de S. epidermidis formadoras e não formadoras de biofilme, assim como avaliar sua capacidade de agir sinergicamente com fármacos antimicrobianos já comercializados. A VIO demonstrou excelente ação antimicrobiana sobre S. epidermidis ATCC 12228 e ATCC 35984, apresentando, em baixas concentrações, ação bacteriostática (CIM = 10µg/mL e 20µg/mL para S. epidermidis ATCC 12228 e 35984, respectivamente) e bactericida (CLM = 20µg/mL para ambas as cepas). Além disso, a ação bactericida foi observada com curtos tempos de exposição (2-3horas). A VIO também foi capaz de modular sinergicamente a ação de diversos antimicrobianos, como amicacina, gentamicina, ciprofloxacino, cefepime, ceftazidima, vancomicina, meropenem, ceftriaxona, cefalotina e oxacilina sobre S. epidermidis, reduzindo os valores de CIM em até 16 vezes. A VIO foi capaz de inibir a formação de biofilme microbiano na mesma concentração que inibiu o crescimento em células planctônicas (CIMB=20µg/mL) e erradicou biofilme já formado em concentração 8 vezes maior (CMEB=160µg/mL). Sua ação sobre biofilme já formado foi potencializada quando associada aos fármacos cefepime, ciprofloxacino, vancomicina e meropenem, sendo capaz de erradicar completamente o biofilme na associação com ciprofloxacino, em concentrações equivalents a ½ CMEB. Estes resultados mostram que a VIO é uma substância promissora para o desenvolvimento de um novo fármaco antimicrobiano com ação sobre este patógeno, inclusive sobre seu biofilme, ou mesmo para ser associada a antibióticos já comercializados.

ALVES, K. S. S. Efeito do plasma de baixa temperatura e pressão no biofilme oral formado sobre esmalte em um modelo in situ. 2016. 58 f. Tese (Doutorado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2016. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-10-13T11:56:46Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_kssalves.pdf: 1772314 bytes, checksum: 268cf8202a9a7e5f2e7c43d7ceff3d5e (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-10-13T11:56:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_kssalves.pdf: 1772314 bytes, checksum: 268cf8202a9a7e5f2e7c43d7ceff3d5e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-13T11:56:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_kssalves.pdf: 1772314 bytes, checksum: 268cf8202a9a7e5f2e7c43d7ceff3d5e (MD5) Previous issue date: 2016-05-30 / The Low temperature plasma is a promising technology that has being studied in dentistry for its various properties, among them, for their ability to destroy bacteria present in mature biofilm and also destroying the polymeric matrix of oral biofilms. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial effect of argon plasma on oral biofilms formed in situ and also verify if this treatment damages the structure of the treated enamel. For that, twenty-two volunteers used palatine intraoral devices containing 6 to bovine enamel slabs that were dripped sucrose 10 times a day with 10% sucrose. The intraoral period was 7 days. At the 7th day, enamel slabs were treated for 5 minutes with plasma, argon flow, 0.12% chlorhexidine, or 0.89% NaCl solution. Thus, biofilms samples were collected, weighed, serial diluted and plated in culture medium for the growth of total microorganisms, total streptococci, mutans streptococci and lactobacilli. In order to analyze whether the treatments damaged the enamel structure, the slabs were analyzed by scanning electron microscopy (SEM) and Raman spectroscopy. Low temperature plasma treatment showed a significant reduction in the viability of the total microorganisms (p <0.001), total streptococcus (p = 0.037) and mutans streptococci (p = 0.004). Argon flow also significantly reduced the mutans streptococci counts. The plasma treatment did not influence on the viability of the lactobacilli under the conditions tested (p = 0.497). SEM revealed smooth and homogeneous regions on the enamel surface, unobserved topographical differences between the glazes in biofilms subjected to different treatments. In Raman spectroscopy, we identified four major bands present in the inorganic phase: 324 (V1), 582 (V2), 960 (V3) e 1045 (V4) cm-1 and other 4 identified in the organic layer 1448 (V5), 1465 (V6), 1653 (V7) 2943(V8) cm-1. No statistical differences in the Raman spectra were observed for enamel of different treatments. In conclusion, the plasma was effective in reducing viable bacteria present in mature oral biofilms produced in situ and not alter in the enamel surface treated biofilms. / O plasma de baixa temperatura é uma tecnologia promissora que vem sendo estudada na odontologia por suas várias propriedades, dentre elas, por sua capacidade de destruir bactérias presentes em biofilme maduro destruindo a matriz do biofilme oral. O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial antimicrobiano do plasma de argônio de baixa temperatura em biofilmes orais formados in situ e verificar se o tratamento proposto danifica a estrutura do esmalte tratado. Para tanto, vinte e dois voluntários utilizaram dispositivos intraorais palatinos contendo 6 blocos de esmalte bovino que foram gotejados sacarose 10 vezes ao dia uma solução de sacarose a 10%, durante 7 dias. Ao final do período intraoral, os biofilmes formados sobre os blocos de esmalte receberam tratamento durante 5 minutos com plasma de argônio, gás argônio, clorexidina a 0,12%, ou solução salina de NaCl a 0,89%. As amostras dos biofilmes foram coletadas, pesadas, diluídas de forma seriada e plaqueadas em meio de cultivo para o crescimento de microrganismos totais, estreptococos totais, estreptococos do grupo mutans e lactobacilos. A fim de analisar se os tratamentos danificaram a estrutura do esmalte, os blocos foram analisados por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e por espectroscopia Raman. O tratamento do plasma mostrou uma redução significativa na viabilidade dos microrganismos totais (p <0,001), estreptococos totais (p = 0,037) e estreptococos do grupo mutans (p = 0,004). O gás de argônio também reduziu significativamente as contagens de estreptococos do grupo mutans. O tratamento com plasma não demonstrou influência sobre a viabilidade dos lactobacilos nas condições testadas (p = 0,497). A MEV revelou regiões lisas e homogêneas na superfície do esmalte, não sendo observadas diferenças topográficas entre os esmaltes sob biofilmes submetidos aos diferentes tratamentos. No Raman, foram identificadas quatro bandas principais presentes na fase inorgânica: 324 (V1), 582 (V2), 960 (V3) e 1045 (V4)cm-1 e outras 4 identificadas na fase orgânica 1448 (V5), 1465 (V6), 1653 (V7) 2943(V8) cm-1, não ocorrendo diferenças estatísticas entre os espectros do Raman nos blocos de esmaltes dos diferentes tratamentos. Em conclusão, o plasma foi eficaz na redução de bactérias viáveis presentes em biofilmes orais maduros produzidas in situ e não alterou a superfície do esmalte sob biofilme tratado.

Orientadores: Pedro Luiz Rosalen, Severino M. Alencar / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-10T12:18:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Castro_MyrellaLessio_M.pdf: 932879 bytes, checksum: 9b33cb640aecd0800d81a5e9de186361 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Própolis é um produto natural mundialmente reconhecido por suas propriedades biológicas, com atividades antimicrobiana e anticariogênica. A própolis brasileira do tipo 6 da região de mata atlântica (BA), Nordeste, apresenta na composição química uma grande quantidade de compostos apolares, na maioria não identificada, e ausência de flavonóides, aos quais são atribuídos a atividade biológica. Entretanto, esta própolis apresenta alta atividades antimicrobiana e anticariogênica in vitro e in vivo. Assim, os objetivos deste estudo foram: (a) avaliar a atividade antimicrobiana e a composição química da própolis tipo 6, do seu extrato etanólico, frações e ácidos graxos encontrados em sua composição, identificando o(s) responsável(is) pela sua atividade biológica; e (b) isolar e identificar o(s) composto(s) bioativo(s) da própolis tipo 6, responsável pela atividade antimicrobiana. O extrato etanólico (EEP), as frações hexânica (H-Fr) e polar (P-Fr) obtidos pela técnica de fracionamento líquido-líquido foram analisados por Cromatografia Gasosa de Espectofometria de Massa (CG-EM), Cromatografia Gasosa de Ionização de Chama (CGFID), Cromatografia Liquida de Alta Eficiência (CLAE) e foram testados contra Streptococcus mutans Ingbritt 1600 e Staphylococcus aureus ATCC 25923 determinandose as Concentrações Inibitória (CIM) e Bactericida (CBM) Mínima. A H-Fr foi cromatografada em coluna LH-20, gerando 9 sub-frações, as quais foram avaliadas quanto à atividade antimicrobiana em difusão em ágar com S. aureus, para seleção da fração bioativa, e destinada ao isolamento dos compostos por CLAE preparativa. Somente um composto isolado demonstrou atividade antimicrobiana, o qual foi identificado por Ressonância magnética nuclear (RMN) de 1H, 13C e Infravermelho (IR) como sendo uma benzofenona prenilada demonimada de Plukenetiona H. Este composto foi testado contra Streptococcus mutans UA159, treptococcus sobrinus 6715, Streptococcus gordonii ATCC10558, Streptococcus oralis PB182, Actinomyces naeslundii ATCC 12104 e Staphylococcus aureus ATCC 25923 para determinação da CIM, CBM e para a inibição da aderência celular ao biofilme de S. mutans UA159 e S. sobrinus 6715. Os ácidos graxos testados não apresentaram atividade antimicrobiana, entretanto a Plukenetiona H apresentou forte atividade antimicrobiana para os microrganismos testados, com CIM variando de 1,5 - 6.2 µg/mL e CBM: 26 - 106 µg/mL. Pelo fato da molécula bioativa ser uma nova substância nunca relatada na literatura e possuir alta atividade antimicrobiana contra vários microrganismos patogênicos, este composto apresenta-se como um pormissor agente antimicrobiano. Palavras-chave: Própolis tipo 6, Benzofenona prenilada, Atividade antimicrobiana / Abstract: Propolis is a natural product globally known for its biological properties, with antimicrobial and anticariogenic activity. The chemical composition of the propolis type 6, from northeastern Brazil, Atlantic forest, Bahia state, consists of non-polar compounds, most of which are not identified, and absence of flavonoids, which are attributed to its biological activity; however, propolis presents good anticariogenic and antimicrobial activity in vitro and in vivo. Thus, the aim of this study was (a) to evaluate the antimicrobial activity and chemical composition of propolis type 6, its ethanolic extract, fractions and fatty acids found in its composition, and (b) to isolate and identify its bioactive compound. Its ethanolic extract (EEP) and hexane (H-Fr) and polar (P-Fr) fractions obtained with the liquid-liquid technique were analyzed through gas chromatography-mass spectrometer (GC-MS), gas chromatography flame ionization (GC-FID), high-performance liquid chromatography (HPLC) and then tested against Streptococcus mutans Igbritt 1600 and Staphylococcus aureus ATCC 25923. Minimal inhibitory (MIC) and bactericidal (MBC) concentrations were determined. The H-Fr was rechromatographed in LH-20 column, generating 9 sub-fractions, which were tested for antimicrobial activity against S. aureus in agar diffusion to determine its bioactive fraction. Preparative HPLC was used to isolate its bioactive compounds. Only one compound isolated demonstrated antimicrobial activity and was identified by Nuclear Magnetic Resonance (NMR), 1H, 13C and Infrared (IR) as a prenylated benzodenone and denominated Plukenetione H. This compound was tested against Streptococcus mutans UA159, Streptococcus sobrinus 6715, Streptococcus gordonii ATCC10558, Streptococcus oralis PB182, Actinomyces naeslundii ATCC 12104 and Staphylococcus aureus ATCC 25923 to determine the MIC and MBC and to determine cell adhesion inhibition in biofilm of S. mutans UA159 and S. sobrinus 6715. Propolis fatty acids tested showed no antimicrobial activity; however, its compound Plukenetione H showed good antimicrobial activity against the microorganisms tested, with MIC ranging from 1.5 to 6.2 µg/mL and MBC from 26 to 106 µg/mL. Further studies are needed to investigate this new compound, a promising antimicrobial agent. Key words: Brazilian propolis, prenylated benzophenone, antimicrobial activity / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestre em Odontologia

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2017-12-04T19:04:35Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) 1-Tese Pablo Q.L..pdf: 7890066 bytes, checksum: 0b8532554686944db6ca87e027a7b54a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-04T19:04:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) 1-Tese Pablo Q.L..pdf: 7890066 bytes, checksum: 0b8532554686944db6ca87e027a7b54a (MD5) Previous issue date: 2016-10-21 / Nos últimos anos, as indústrias farmacêuticas tem despertado um grande interesse por óleos essenciais como agentes antimicrobianos, isso se deve à grande incidência de infecções e a crescente resistência de bactérias e fungos aos antimicrobianos clássicos. Considerando que os óleos essenciais possuem características lipofílicas, sendo insolúveis em água e prontamente rancificados e oxidados, quando expostos à luz. O objetivo deste trabalho foi obter e caracterizar sistemas emulsionados contendo os óleos essenciais de Eucalyptus globulus, Schinus terebinthifolius e Plectranthus amboinicus, avaliar a atividade antifúngica e antibacteriana in vitro e ex vivo, como também, avaliar a toxicidade aguda. As emulsões possibilitam veicular numa mesma formulação substâncias hidrofílicas e lipofílicas permitindo obter um sistema estável e proporcionando uma melhor absorção dos óleos essenciais. As propriedades químicas dos óleos essenciais foram determinadas por Cromatografia em fase gasosa acoplada a espectrometria de massas. As emulsões contendo óleos essenciais foram preparadas pelo método de inversão de fases variando as proporções de EHL de 4,7 a 16,7. O estudo de estabilidade foi determinada utilizando índice de cremagem, pH, condutividade e quantificação dos marcadores. A atividade antifúngica foi avaliada frente à cepas de Candida albicans (ATCC-90028, LM-108 e LM-86), Candida tropicalis ATCC-13803, LM-6 e LM-14), Candida krusei (LM-13 e LM-08); e a atividade antibacteriana frente a Staphylococcus aureus (ATCC-25923, M-117 e LM-197) e Pseudomonas aeruginosa (ATCC-25853, A-03 e LM-260). Para o estudo de toxicidade aguda, os animais foram tratados por via oral com as emulsões durante 14 dias com dose única (1000 mg/kg). Os efeitos toxicológicos foram investigados sobre parâmetros comportamentais, bioquímicos e hematológicos. A caracterização química do Eucalyptus globulus, Schinus terebinthifolius (fruto e folha) e Plectranthus amboinicus, resultou na identificação dos constituintes majoritários 1,8-cineol, α-pineno, limoneno e carvacrol, respectivamente. As emulsões contendo Eucalyptus globulus, Schinus terebinthifolius (fruto e folha) e Plectranthus amboinicus, apresentaram no estudo a curto prazo uma variação de índie de cremagem de 3,4 a 5,9%. O estudo a longo prazo apresentou índice de cremagem à temperatura ambiente e 5ºC entre 0,0 e 15,46%, repectivamente e uma faixa de pH entre 2,5 a 13; condutividade entre 50 a 1600 μS; e os teores dos marcadores variando entre 0,0 e 95%. A avaliação da atividade antimicrobiana demonstrou que os óleos essenciais e as emulsões apresentaram atividade antifúngica e antibacteriana mostrando faixa de inibição 33 a 88%, respectivamente. O estudo toxicológico agudo das emulsões contendo Eucalyptus globulus, Schinus terebinthifolius-folha e Plectranthus amboinicus revelou pequenas alterações nos parâmetros hematológicos e bioquímicos. Tais alterações não comprometeram a saúde geral dos animais tratados, nem foram observadas mortes durante o período experimental, sugerindo baixa toxicidade das emulsões utilizadas nesse estudo. Dessa forma, os resultados obtidos permitiram alcançar os objetivos propostos de obtenção e caracterização de sistemas emulsionados, sinalizando perspectivas promissoras para o desenvolvimento de novos agentes fitoterápicos para tratamento das micoses. / In recent years, the pharmaceutical industry has aroused great interest in essential oils as antimicobianos agents due to high incidence of infections and the increasing resistance of bacteria and fungi to antimicrobials classics. Whereas the essential oil have lipophilic characteristics, being insoluble in water and readily rancidity and oxidized when exposed to light, the aim of this study was to obtain and characterize emulsion systems containing essential oils of Eucalyptus globulus, Schinus terebinthifolius and Plectranthus amboinicus beyond to evaluate the antifungal and antibacterial activity in vitro and ex vivo, as well as to assess the acute toxicity. The emulsions enables vehicular hydrophilic and lipophilic substances same formulation allowing to obtain a stable system, providing a better absorption of the essential oils. The chemical properties of essential oils were determined by gas chromatography coupled to mass spectrometry. Emulsions containing essential oils were prepared by the phase inversion method HLB varying proportions of 4.7 to 16.7. The stability was determined using creaming index, pH, conductivity, quantitation of markers. The antifungal activity was evaluated from the strains of Candida albicans (ATCC-90028, LM-108 and LM-86), Candida tropicalis ATCC-13803, LM-6 and LM-14), Candida krusei (LM-13 and LM-08); and the antibacterial activity from the strains of Staphylococcus aureus (ATCC-25923, M-117 and LM-197) and Pseudomonas aeruginosa (ATCC-25853, A-03 and LM-260). For the acute study, the animals were orally treated with the emulsions for 14 days with a single dose (1000 mg/kg). The toxicological effects were investigated on behavioral, biochemical and hematological parameters. The chemical characterization of Eucalyptus globulus, Schinus terebinthifolius (fruit and leaf) and Plectranthus amboinicus, resulted in the identification of the major constituents 1,8-cineole, α-pinene, limonene and carvacrol, respectively. The emulsions containing Eucalyptus globulus, Schinus terebinthifolius (fruit and leaf) and Plectranthus amboinicus, presented in the short-term study a variation of CI 3.4% to 5.9% and long-term study showed creaming index at room temperature and 5 °C between 0.0 and 15.46%, respectively and a pH range between 2.5 to 13; conductivity between 50 to 1600 μS; and the content of the markers varying between 0.0 and 95%. The evaluation of antifungal activity showed that the essential oil and the emulsions showed antifungal and antibacterial activity showing a range of inhibition 33% to 88%. The acute toxicological study of emulsions containing Eucalyptus globulus, Schinus terebinthifolius-leaf and Plectranthus amboinicus revealed minor changes in hematological and biochemical parameters. These changes did not affect the overall health of the animals treated nor deaths were observed during the trial period, suggesting low toxicity of emulsions in the study. Thus, the results obtained allowed to reach the objectives of obtaining and characterization of emulsion systems, signaling promising prospects for the development of new herbal agents for the treatment of mycosis.

Orientador: Vera Lucia Garcia Rehder / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-11T04:41:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Begnami_AndrezaFabiana_M.pdf: 1069115 bytes, checksum: 6ccff8914d460d714a8f267c7192ecef (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O Coriandrum sativum L. conhecido popularmente como coentro é citado como antidiabético, antiinflamatório, hipoglicemiante e antibacteriano. O gênero Candida faz parte da microbiota da cavidade oral e sob circunstâncias especiais produzem candidíase e infecções sistêmicas. O objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade do óleo essencial (OE), extratos hexânico (EHE) e hidroalcoólico (EHA) de folhas de C. sativum frente as diferentes espécies de Candida e identificar seus principais constituintes. Para obtenção dos EHE e EHA foram utilizadas 10g das folhas secas e moídas, originando-se 0,43 g do EHE e 2,34 g do EHA, com rendimentos de 4,3% e 24,3%, respectivamente. O OE (2,06 g - rendimento 0,03%) foi obtido por hidrodestilação em sistema do tipo Clevenger a partir de 7500 g de folhas frescas, sendo fracionado em coluna seca e originando sete frações (FOE) com diferentes polaridades, as quais foram analisadas por CCD e CG-EM. Os constituintes majoritários identificados do OE foram álcoois e aldeídos de cadeia linear: 1- decanol (24,17%), 2E-decenol (18,05%) e 2Z-dodecenol (17,55%). Os OE, EHE e EHA foram testados frente as diferentes espécies de Candida: C. albicans CBS 562; C.krusei CBS 573; C. parapsilosis CBS 604; C. dubliniensis CBS 7987 e C. tropicalis CBS 94. As amostras do OE e extratos foram solubilizadas em água destilada e tween 1% para concentração em solução de 4 mg/mL, testando-se concentrações de 1000 Yg/mL a 15,6Yg/mL. O OE apresentou forte inibição frente as diferentes espécies de Candida com MICs de 125 a 500 Yg/mL, enquanto os EHE e EHA inibiram apenas C. parapsilosis com MIC de 250 Yg/mL. As frações 4, 5 e 6 do OE enriquecidas em álcoois apresentaram forte inibição e amplo espectro antimicrobiano, com MICs de 7 a 250 Yg/mL, evidenciando que esses compostos são responsáveis pela atividade antimicrobiana frente as diferentes espécies de Candida , enquanto as frações FOE 1 a 3 ricas em aldeídos, com MICs de 31 a 1000 Yg/mL, apresentaram atividade antimicrobiana moderada. Esses resultados demonstram o potencial uso de Coriandrum sativum no combate a leveduras do gênero Candida / Abstract: Coriandrum sativum L. (Umbelliferae / Apiaceae), known as coriander, is a popular cooking condiment in Brazil; it has been reported as an anti-inflammatory, anti-diabetic and anti-bacterial agent. Different Candida spp., which might lead to complications such as skin candidosis or even systemic infections, are commonly found in the oral microbiota. The aim of this study was to evaluate the activity of the essential oil (EO) and hexanic and hydroalcoholic extracts of C. sativum against different species of Candida, as well as to identify their main constituents. To obtain the hexanic (HEE) and hydroalcoholic extracts (HAE), 10 g of dried leaves of C. sativum was used to attain 0.43 g of HEE and 2.34 g of HAE, with yields of 4.3% and 24.3%, respectively. Its essential oil (2.06 g ¿ yield 0.03 %) was obtained by hydrodistillation using the Clevenger system where 7500 g of its fresh leaves and dry-column chromatography was used to fraction the oil into seven fractions with different polarities. These fractions were then analyzed by TLC and GC-MS. The main constituents identified in the essential oil were long-chain alcohols: 1-decanol (24.17 %); 2E-decenol (18.05 %); and 2Z-dodecenol (17,55 %) and aldehydes. The HEE, HAE, and EO were tested against C. albicans CBS 562, C. krusei CBS 573, C. parapsilosis CBS 604, C. dubliniensis CBS 7987, and C. Tropicalis CBS 94. Samples of EO, HEE and HAE were dissolved in distilled water with 1% tween to obtain a solution concentration of 4 mg/mL and 1000 µg/mL to 15.6 µg/mL of which was tested against Candida spp. The EO showed antibacterial activity against most species of Candida, with MICs ranging from 125 µg/mL to 500 µg/mL, while the extracts inhibited only C. parapsilosis with a MIC of 250 µg/mL. Alcohol-enriched fractions 4, 5 and 6 of EO showed strong inhibition and broad antimicrobial spectrum, with MICs ranging from 7 to 250 µg/mL, suggesting that alcohol might be responsible for the antimicrobial activity against the various species of Candida tested. While the fractions 1 to 3 rich in aldehydes, with MICs ranging from 31 to 1000 µg/mL, showed moderate antimicrobial activity against the species of Candida tested. Results showed potential antimicrobial activity of Coriandrum sativum against Candida spp (yeast infections) / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestre em Odontologia

Las plantas son útiles para la producción de proteínas heterólogas y otros productos de aplicación en medicina o industria, así como los virus de vegetales. El virus del grabado del tabaco (TEV), es un virus de RNA de cadena positiva ampliamente empleado en estudios sobre biología molecular de virus de plantas. Con base en un clon infeccioso de este virus, se ha desarrollado un vector viral desarmado que permite la expresión simultánea de múltiples proteínas heterólogas en plantas. Como primera etapa se construyeron 3 nuevos plásmidos con el mismo clon infeccioso del TEV que permitieran infectar plantas con RNA transcrito in vitro (pMTEV), con DNA (p35TEV) o por agroinoculación (pGTEV). El vector de expresión se construyó sobre el plásmido pGTEV, reemplazando el cistrón que codifica la proteína NIb por un casete que contenía los cDNAs de las proteínas heterólogas flanqueados por sitios de corte naturales y artificiales de la proteasa viral NIaPro. Se construyeron dos versiones del vector, uno que expresa tres proteínas fluorescentes, roja, amarilla y azul, y otro que expresa dos factores de transcripción de A. majus (Delila y Rosea1) de la ruta de biosíntesis de las antocianinas. Al inocular plantas de tabaco transgénicas, que suplementan la función NIb, se detectó la expresión colocalizada de las 3 proteínas fluorescentes tanto a nivel de tejido como subcelular, se comprobó el eficiente procesamiento de cada proteína heteróloga y se probó que el vector es incapaz de infectar plantas en las que la función NIb no se suplementa. En la expresión de Delila y Rosea1, la inoculación de plantas provocó una alta acumulación de antocianinas en los tejidos infectados por el virus adquiriendo una coloración rojiza. A continuación, se analizó el efecto de insertar un segundo supresor viral del silenciamiento, y los resultados sobre un vector que expresa la proteína fluorescente roja mostraron que la coexpresión de la proteína P19 del virus del enanismo arbustivo del tomate (TBSV) aumenta la expresión en aproximadamente un 50%, y la proteína 2b del virus del mosaico del pepino (CMV) la aumenta un 20%. En contraste, la proteína 16K del virus del cascabeleo del tabaco (TRV) no tiene ningún efecto, mientras que la proteína HC-Pro de otro potyvirus, el virus de la sharka de los frutales de hueso, tiene un efecto negativo. / Bedoya Rojas, LC. (2011). DESARROLLO DE UN VECTOR PARA LA EXPRESIÓN SIMULTÁNEA DE MÚLTIPLES PROTEÍNAS EN PLANTAS BASADO EN EL POTYVIRUS DEL GRABADO DEL TABACO [Tesis doctoral]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/13833