Orientador: Antonio Fernando Pestana de Castro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T07:46:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sousa_Adrianade_M.pdf: 8565896 bytes, checksum: 90d1693edefb33884de5361360364d81 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Foram estudadas 190 amostras não-toxigênicas (L T-I, L T-II, STa, STb, SL T-I, SL T-II, CNF1, CNF2) de Escherichia colí isoladas de diarréia em suínos. Pelo teste de aderência em células HeLa, 47 amostras foram identificadas com diferentes perfis de adesão, a saber: agregativa (EaggEC) 18/47 (38,3%),"cover slip"(CS) 7/47 (14,9%); difusa (DA) 2/47 (4,2%) e não característica (NC) 20/47 (42,5%). Não foram encontradas amostras com adesão localizada (AL). Ao contrário do que ocorre em amostras de origem humana, quando o mesmo teste foi realizado em células HEp-2, houve correspondência de apenas 17% dos resultados, principalmente entre as amostras com perfil NC. O teste de Microhemaglutinação Manose-Resistente (MHMR) não revelou títulos significantes com nenhuma das hemácias testadas ( ovina, bovina, equina, humana, de cobaio e galinha ). A sorologia para detecção de fatores de colonização já descritos identificou a presença das adesinas K99, K88, F41, F42, F165, 987P, F107, 8199 e 2134P entre as amostras estudadas, as quais não estão entre as que apresentaram resultados relevantes em testes posteriores. O teste de FAS para avaliar a polimerização da actina, foi positivo (++) com apenas 07 (14,8%), das amostras aderentes em HeLa, a saber: 817, E3, 2a2, 2d2, 2374c, 2386a, 2387 a, o que poderia indicar presença do gene eaeA. Testes realizados com sonda específica e PC R, contudo, foram negativos, o que foi confirmado pelo teste de Western blot usando-se soro anti-intimina específico. O exame de cultivos de HEp-2 infectados com algumas amostras FAS+, ( E3, 2d2 e 2374c ) e FAS - ( C9), por microscopia eletrônica, revelou lesões "attaching and effacing"{AlE), típicas de amostras eaeA+. Duas destas amostras ( E3 e 2d2 ) testadas em alça-ligada de leitões recém-nascidos, não produziram lesões semelhantes, ou pelo menos, com a mesma intensidade que a amostra E2348/69, padrão EPEC. A descrição da presença do gene eaeA em amostras do sorogrupo 045"K65" isoladas de diarréia em suínos encaminhou-nos na realização de sorotipagem das nossas amostras, sendo encontradas 4 amostras pertencentes a este sorogrupo, as quais não apresentaram resultados relevantes nos demais testes realizados. Conclusivamente, os resultados obtidos permitem supor a existência nos colibacilos não toxigênicos isolados de suíno com diarréia estudados, de alguma estrutura, eventualmente também responsável pelos padrões de adesão encontrados, que à semelhança da intimina de EPEC e/ou EHEC, causariam o fenômeno de AlE na célula hospedeira / Abstract: Not informed. / Mestrado / Microbiologia / Mestre em Ciências Biológicas

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Enfermagem, Florianópolis, 2009. / Made available in DSpace on 2012-10-24T08:44:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 266555.pdf: 847132 bytes, checksum: 668c2283ac43e70852ead733b20db2d1 (MD5) / Trata-se de um estudo de abordagem qualitativa na modalidade de etnoenfermagem que teve por objetivo geral identificar o itinerário terapêutico seguido pelas famílias com crianças menores de cinco anos com diarreia. O referencial teórico adotado foi o modelo de Arthur Kleinman e conceitos da Teoria de Madeleine Leininger. Os participantes do estudo foram oito famílias com crianças menores de cinco anos que procuraram a emergência de um hospital pediátrico do município de Florianópolis quando suas crianças apresentaram diarreia. A coleta de dados se deu inicialmente com a observação participante para escolher os participantes, na emergencia e no domicílio foram realizadas entrevistas com mães, avós e pais com um roteiro-guia. Mediante permissão, todas as entrevistas foram gravadas e transcritas, um diário de campo auxiliou a complementar os registros. A análise ocorreu concomitante à coleta dos dados buscando-se os domínios culturais. A discussão dos dados ocorreu à luz do referencial teórico e aproximação com outros estudos emergindo como resultado os domínios. Os informantes perceberam o problema, caracterizam-no, desenvolveram uma ação e depois avaliaram os seus resultados. Questões de ordem econômica e fatores socioculturais estiveram presentes em todos os momentos juntamente com as redes de apoio social. As razões para a escolha da emergência se justificaram por diferentes motivos, seja pelo marketing do hospital, falta de profissionais nas Unidades Locais de Saúde, capacidade dos hospitais em realizar exames ou a própria qualidade do atendimento prestada pelos profissionais do Setor Profissional. Estas razões apontam para a diferença de modelos explicativos sobre a gravidade do quadro de diarreia entre os setores familiar e profissional de cuidado, havendo necessidade de mais estudos. / This is a study of qualitative approach in form of ethnonursing which aimed to identify the general therapeutic route followed by families with children under five with diarrhea. The theoretical reference was the model of Arthur Kleinman and concepts of the Theory of Madeleine Leininger. The participants were eight families with children under five who sought the emergence of a pediatric hospital of the city of Florianopolis where their children had diarrhea. The data collection initially took place with the observation participant in order to select the families. The interviews in the emergency room as well at the families home were conducted with mothers, grandparents and parents following list of topics. By permission, all interviews were recorded and transcribed, a fied diary helped to supplement the records. The analysis occurred concurrently with data collection seeking the cultural fields. The discussion of the data occurred in the light of the theoretical framework and approach to other studies. The discussion of the data occurred in the light of the theoretical framework and approach to other studies emerged as a result the fields. The informants perceived the problem, characterize it, developed an action and then evaluate their results. Matters of economic and sociocultural factors were present at all times along with the social#s network support. the choice of emergency room is justified by different reasons such as the marketing at the hospital, the lack of professionals in the Local Health Units, the hospitals' structure to conduct tests and the quality of care provided by professionals in the Professional Sector. These reasons point to the difference in explanatory models on the severity of diarrhea among the family and professional care, and need more studies.

VERAS, H. N. Diagnóstico molecular e detecção de genes de virulência de Campylobacter jejuni em crianças com diarreia moderada a severa na cidade de Fortaleza – CE, Brasil. 2016 .129 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Carolinda Oliveira (ppgmm@ufc.br) on 2017-06-29T13:12:19Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_hnveras.pdf: 3228642 bytes, checksum: f6abd0d718a4279964069ed09e6aeaa8 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-06-29T13:30:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_hnveras.pdf: 3228642 bytes, checksum: f6abd0d718a4279964069ed09e6aeaa8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-29T13:30:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_hnveras.pdf: 3228642 bytes, checksum: f6abd0d718a4279964069ed09e6aeaa8 (MD5) Previous issue date: 2016-07-22 / Campylobacter spp. infections are considered one of the most common causes of bacterial gastroenteritis caused by contamination of water and food. Campylobacter jejuni is the most characterized specie, and the investigation of the epidemiology and virulence genes can elucidate some aspects of the microorganism pathogenicity. The aim of this study was to diagnose and identify the presence of virulence genes related to Campylobacter jejuni in children with moderate to severe diarrhea in the city of Fortaleza – CE, Brazil. This work is part of a project entitled “Diarrhea Enteric Card (DEC)”, which goal is to develop PCR-based multiplex diagnostic assays for bacterial enteric pathogens. That project was approved by the local and national ethical committees in Brazil (HIAS 80/06 and CONEPE 13523/2007, respectively). DNA was extracted directly from fecal samples isolated from 436 childrenwith moderate to severe diarrhea from May 2008 to April 2009, in Fortaleza, Ceará, Brazil. The diagnosis of C. jejuni was performed by conventional PCR using hipO gene. The detection of genes that encode proteins associated with virulence of C.jejuni was performed by uniplex and multiplex PCR techniques. C. jejuni was diagnosed in 14% (61/436) of the samples, presenting significant association among children aged 0-12 months (P = 0.0001) and children aged 12, 1-24 months. 51 positive samples for C. jejuniwere used for the detection of the virulence genes. The prevalence of theC. jejuni’s virulence-associated genes were detected in the following proportions of C. jejuni-positive DNA samples: flgE, (92.2%, 47/51) and flaA, (76.5%, 39/51), related to motility;cheW, (90.2%, 46/51); (cheA, 82.4%, 42/51) andcheR, (66.6%, 34/51), related to bacterial chemiotaxis; cadF, (100%, 51/51) andjlpA, (43.1%, 22/51), related to bacterial adhesion; ciaB, (96.1%, 49/51); iamA, (90.2%, 46/51); pldA, (45.1%, 23/51) and pVir(0%, 0/51), related to invasion; cdtABC, (94.1%, 48/51), related to cytolethal distending toxin (CDT); fur, (66.6%, 34/51); cfrA, (31.4%, 16/51) and ceuE, (21.7%, 11/51), related to bacterial iron transport and regulation; racR, (100%, 51/51); sodB, (96.1%, 49/51); dnaJ, (88.2%, 45/51) andkatA, (66.6%, 34/51), related to oxidative stress. The distribution profiles of C. jejuni’s virulence did not correspond to the patient’s clinical presentation of abdominal pain. But the presence of cfrA and dnaJ genes was correlated with fever (P=0,0214)and the presence of jlpA e katA gene were correlated with vomiting (P=0,0211) and pldA and ceuE genes was correlated with the presence of blood in stool (P=0,0013), this data suggests that relationships might be related to the severity of infection by this microorganism. New studies about the expression of proteins associated with the virulence genes must be carried out to better understand the pathobiology mechanisms of Campylobacter jejuni infections. / Infecções porCampylobacter spp. são consideradasuma das causas mais comuns de gastroenterite ocasionada porcontaminação de água e alimentos. Campylobacter jejuni é a espécie mais bem caracterizada, e a investigação da epidemiologia, e dos genes de virulência, podem elucidar algum aspecto da patogenicidade deste micro-organismo. O objetivo desse estudo foi diagnosticar e identificar a presença de genes de virulência relacionados à Campylobacter jejuni em crianças com diarreia moderada a severa na cidade de Fortaleza – CE, Brasil. Este estudo faz parte de um projeto intitulado “Diarrhea Enteric Card (DEC)”, que teve como objetivo desenvolver um ensaio de PCR multiplex para o diagnóstico de bactérias patogênicas. O projeto teve aprovação nos comitês de ética local e nacional no Brasil (HIAS 80/06 e CONEPE 13523/2007, respectivamente). A extração de DNA foi realizada diretamente das amostras fecais oriundas de 436 criançascom diarreia moderada a severa, durantes os meses de maio de 2008 a abril de 2009, na cidade de Fortaleza, Ceará, Brasil. O diagnóstico de C. jejuni foi realizado através de PCR convencional, utilizando o gene hipO. A detecção dos genes de virulência de C. jejuni foi realizada através das técnicas de PCR uniplex e multiplex. C. jejuni foi diagnóstico em 14% (61/436) das amostras, apresentando associação significante da presença do patógeno em crianças com idade entre 0-12 meses (P=0,0001) e com idade entre 12,1-24 meses (P=0,0427). A detecção dos genes de virulência foi realizada em 51 amostras positivas para a C. jejuni.A prevalência dos genes associados à virulência de C. jejuni foram detectados seguindo a proporção de amostras positivas:flgE, (92,2%, 47/51) eflaA, (76.5%, 39/51), relacionados à motilidade;cheW (90,2%, 46/51); cheA, (82,4%, 42/51) echeR,(66,6%, 34/51), relacionados à quimiotaxia bacteriana; cadF, (100%, 51/51) ejlpA, (43,1%, 22/51), relacionados à adesão; ciaB, (96,1%, 49/51); iamA, (90,2%, 46/51); pldA, (45,1, 23/51) epVir (0%, 0/51), relacionados a invasão; cdtABC, (94,1%, 48/51), relacionados à toxina citoletal distensora (CDT); fur, (66,6%, 34/51); cfrA, (31,4%, 16/51) eceuE, (21,7%, 11/51), relacionados ao transporte e regulação de ferro; racR, (100%, 51/51),sodB, (96,1%, 49/51),dnaJ, (88,2%, 45/51) ekatA, (66,6%, 34/51), relacionado à sobrevivência da bactéria e ao estresse oxidativo. A distribuição dos perfis de genes de virulência de C. jejuni não correspondeu com o parâmetro clínico de dor abdominal, mas houve a associação dos genescfrA e dnaJ com a presença de febre (P=0,0214), dos genes jlpA e katA com a presença de vômito (P=0,0211), e dos genespldA e ceuE com a presença de sangue nas fezes(P= 0,0013), sugerindo que essas relações poderiam estar associadas a severidade da infecção causada pelo micro-organismo. Novos estudos sobre a expressão de proteínas relacionadas aos genes de virulência devem ser realizados, para que assim haja uma melhor compreensão sobre os mecanismos da patobiologia das infecções causadas porC. jejuni.

SILVA, Antonio Vinicios Alves da. Avaliação dos eeitos da infecção pela Escherichia coli enteroagregativa (CEPA 239-1) na evolução clonal e resposta pró-inflamatória de células intestinais in vitro e sua modulação com alanil-glutamina. 2012. 112 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-06-03T11:39:14Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_avasilva.pdf: 2080618 bytes, checksum: 4ffbece9d97e80544378a0794f5d2971 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-06-03T11:39:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_avasilva.pdf: 2080618 bytes, checksum: 4ffbece9d97e80544378a0794f5d2971 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-03T11:39:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_avasilva.pdf: 2080618 bytes, checksum: 4ffbece9d97e80544378a0794f5d2971 (MD5) Previous issue date: 2012 / Death from acute diarrhea has been reduced since 80´s. However diarrhoeal diseases account for nearly 1.34 million deaths a year among children under-five years of age, making them the second most common cause of child deaths worldwide. As mortality acute diarrhea was reduced, persistent diarrhea (PD) has become a major enteric diseases infant collaborating to morbidity of affected populations. Small intestinal mucosa injury that becomes prolonged has been named as a central mechanism in the pathophysiology of PD. The protein malnutrition and infection by Escherichia coli enteroaggregative (EAEC) are strongly associated with development PD. The present study investigated the effect of supplementation of Alanyl-Glutamine on monolayer of intestinal cells in the absence of infection, evaluated some parameters of the injury caused by EAEC (strain 239-1) on the intestinal mucosa in vitro and modulation of such injury by Alanyl-Glutamine 10mM. The result show that effects of supplementation of Alanyl-Glutamine 10mM is no different from effects free glutamine 4mM. Compared to E. coli HS, EAEC infection reduced the number of migrating cells, increased the percentage of necrosis, decreased the proliferation and transcription-reverse from small GTPases (RhoA, Rac1 and Cdc42), within 6 hours of contact. The contact EAEC reduced transcription of IL-8 (6h and 0h), NF-κB (6h) and TLR5 (6h and 12h) and increased TNF-α expression. The treatment of infection with Ala-Gln 10mM altered the following parameters: reduced the percentage of necrosis, increase of cell migration, although it has not caused changes in the transcription of Rho GTPases genes, increased transcription IL-8, NF-κB (6h) e TLR5 (6h and 12h). Treatment with dipeptidio significantly reduced the secretion of TNF-α (12h) while increased protein expression of IL-6 (6 e 12h). In conclusion, found that glutamine deprivation decreases cellular response against the infectious stimulus. The EAEC appears to minimize the innate host immune defenses by reducing the transcription of NF-kB and TLR5 and limit the increased transcription of IL-8. The Ala-Gln seems to make the cell more reactive against injurious stimuli, increasing their responsiveness through increased transcriptional IL-8, NF-kB and TLR5. Moreover increased protein expression of IL-6 appears to be one of the mechanisms by which promotes Ala-Gln protective effect on the intestinal epithelial barrier. / A morte por diarreia aguda tem apresentado grande declínio desde a década de 80 em todas as regiões do mundo. Entretanto as doenças diarreicas ainda são responsáveis por 1,34 milhões de mortes infantis a cada ano e representam a segunda maior causa de mortalidade no grupo etário com idade inferior a 5 anos. Com o declínio de mortalidade por casos de diarreia aguda a diarreia persistente (DP) se tornou uma das principais doenças entéricas infantis contribuindo para morbidade das populações afetadas. Uma lesão no intestino delgado que se torna prolongada tem sido colocada como elemento central da patofisiologia da DP. A desnutrição proteica e a infecção por Escherichia coli enteroagregativa (EAEC) estão fortemente associados ao desenvolvimento da DP. O presente estudo investigou o efeito da suplementação de Alanil-Glutamina sobre monocamada de células da mucosa intestinal na ausência de infecções. Avaliou alguns parâmetros da lesão promovida por EAEC (cepa 239-1) sobre a mucosa intestinal in vitro e a modulação de tal dano pela Alanil-Glutamina 10Mm. Os resultados obtidos mostram que os efeitos da suplementação de Ala-Gln 10mM não diferem dos efeitos exibidos pela glutamina livre 4mM. Em relação a cepa comensal E. coli HS, a infecção com EAEC reduziu de forma significativa a quantidade de células em migração, aumentou o percentil de necrose, diminuiu a proliferação celular e reduziu significativamente a transcrição dos genes das pequenas GTPases (RhoA, Cdc42 e Rac1) após 6h de contato com enterócitos. O contato com EAEC reduziu a transcrição de IL-8 (0h e 6h), NF-κB (6h) e TLR5 (6h e 12h) e aumentou a expressão proteica de TNF- α (12h). O tratamento da infecção com Ala-Gln 10mM alterou significativamente os seguintes parâmetros: aumento da quantidade de células em migração embora não tenha causado alteração na transcrição dos genes da pequenas GTPases, redução do percentual de necrose, aumento da proliferação celular, aumento da transcrição IL-8, NF-κB (6h) e TLR5 (6h e 12h). O tratamento com o dipeptidio reduziu significativamente a secreção de TNF-α (12h) enquanto aumentou a expressão proteica de IL-6 (6 e 12h). Em conclusão, verificamos que a privação de glutamina diminui a resposta celular frente ao estímulo infeccioso. A EAEC, por sua vez, parece minimizar as defesas imunes inatas hospedeiro ao reduzir a transcrição de NF-kB e TLR5 e limitar o aumento da transcrição de IL-8. A Ala-Gln parece tornar a célula mais reativa frente aos estímulos lesivos, aumentando sua capacidade de resposta através do aumento transcricional de IL-8, NF-kB e TLR5. Por outro lado o aumento da expressão proteica de IL-6 parece ser um dos mecanismos pelas quais Ala-Gln promove efeito protetor sobre a barreira epitelial intestinal.

COSTA, Cecília Leite. Clostridium difficile : incidência da infecção e caracterização das cepas isoladas de pacientes com diarreia internados em um hospital oncológico de Fortaleza, Ceará. 2014. 80 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-12-15T11:58:42Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_clcosta.pdf: 3047245 bytes, checksum: d675626e561cad2c2c02c02fa7253a65 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-12-15T11:59:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_clcosta.pdf: 3047245 bytes, checksum: d675626e561cad2c2c02c02fa7253a65 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-15T11:59:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_clcosta.pdf: 3047245 bytes, checksum: d675626e561cad2c2c02c02fa7253a65 (MD5) Previous issue date: 2014 / Clostridium difficile is a strictly anaerobic, spore-forming, toxin-producing Gram positive bacillus. Currently, it is the main cause of nosocomial diarrhea associated with antibiotic use. Cancer patients are a major risk group for C. difficile infection (CDI), since the use of chemotherapeutic agents can alter the intestinal mucosa. Furthermore, these patients are often immunosuppressed and often use broad spectrum antibiotics. Considering the pathogenicity of C. difficile and the importance of this infection in hospitalized patients, this study aimed to determine the incidence and the phenotypical and genotypical characterization of strains of C. difficile isolated from cancer patients at Haroldo Juaçaba Hospital, Fortaleza, Ceará. During the 12 month period (May/2013 to May/2014) 41 diarrheic fecal samples were collected. Toxins A/B were detected from feces through a commercial ELISA detection kit. Then, the samples were cultivated on cefoxitine-cycloserine-frutose agar (CCFA) and incubated anaerobically. Isolates were submitted to several analyses, including phenotypical identification, detection of toxin genes and of a fragment of the tpi gene (definitive identification) by conventional PCR. The susceptibility of the strains to 12 antimicrobial agents was determined by E-test. Genotyping of the strains was also performed through molecular PFGE analysis. Out of 41 samples, 46.3% (19/41) were positive for either one or both of the performed tests: detection of toxin A/B and/or culture of C. difficile. C. difficile was recovered from three samples (15.8% - 3/19). The tpi, tcdA and tcdB genes were detected in all of the isolates. The binding domain of the binary toxin (cdtB) was not detected as well as no deletions were observed in the tcdC gene of the analysed isolates. All strains belonged to the same genotype, NAP4. Regarding the antimicrobial susceptibility of the strains, resistance to two or more antibiotics (azithromycin, tetracycline, ciprofloxacin, levofloxacin, ceftriaxone and cefotaxime) was observed. Out of the 19 positive patients, 57.9% (11/19) were using antibiotics and under chemotherapy. This paper describes the incidence of CDI in patients with cancer, and shows for the first time the detection of community-associated Clostridium difficile infection (CA-CDI) in those patients in Brazil, highlighting the importance of studying this bacterium for understanding the epidemiological situation of this infection and its spread among Brazilian hospitals. / Clostridium difficile é um bacilo Gram positivo, anaeróbio estrito, formador de esporos e produtor de toxinas. Atualmente, representa a principal causa de diarreia hospitalar associada ao uso de antibióticos. Pacientes oncológicos são um dos principais grupos de risco para infecção por C. difficile (CDI), visto que o uso de agentes quimioterápicos pode alterar a mucosa intestinal. Além disso, estes pacientes normalmente são imunodeprimidos e frequentemente utilizam antibióticos de largo espectro. Tendo em vista a patogenicidade do C. difficile e a importância da doença induzida por essa bactéria em ambiente hospitalar este estudo visou determinar a incidência e caracterização fenotípica e genotípica de cepas de C. difficile isoladas de pacientes oncológicos internados do Hospital Haroldo Juaçaba, Fortaleza, Ceará. Durante o período de 12 meses (maio/2013 a maio/2014) foram coletadas 41 amostras de fezes diarreicas. Toxinas A e/ou B foram detectadas a partir das fezes por meio de um kit de detecção comercial ELISA. Em seguida, as amostras foram cultivadas em Agar Cicloserina, Cefoxitina, Frutose (CCFA) e incubadas em anaerobiose. As cepas isoladas foram processadas e realizadas identificação fenotípica e análise de detecção dos genes das toxinas e do fragmento do gene tpi (identificação definitiva) por PCR convencional. A sensibilidade das cepas isoladas a 12 antimicrobianos foi determinada por meio de E-test. Também foi realizado a genotipagem das cepas por meio da análise molecular PFGE. 46,3% (19/41) das amostras foram positivas para presença das toxinas A/B por ELISA e/ou cultura do C. difficile. Dessas amostras, foram isolados C. difficile de três amostras (15,8% - 3/19). Em todos os isolados foram detectados os genes tpi, tcdA e tcdB. O domínio de ligação da toxina binária (cdtB) não foi detectado assim como também não foram observadas deleções no gene tcdC nos isolados. Todas as cepas apresentaram o mesmo genótipo, NAP4. Com relação à sensibilidade das cepas aos antimicrobianos foi verificado resistência a dois ou mais antimicrobianos (azitromicina, tetraciclina, ciprofloxacina, levofloxacina, ceftriaxona e cefotaxima). 57,9% (11/19) faziam uso de antibióticos e quimioterápicos. Este trabalho descreveu a incidência de CDI em pacientes oncológicos, e evidenciou pela primeira vez a presença de C.difficile em casos associados a comunidade (CA-CDI) nesses pacientes no Brasil, ressaltando a importância do estudo dessa bactéria para a compreensão da situação epidemiológica dessa infecção e de sua dispersão entre unidades hospitalares brasileiras.

SILVA, Alessandra Costa da. Soluções de reidratação oral no modelo de desnutrição e diarreia induzida pela toxina do cólera em camundongos : corregulação gênica e expressão das proteínas transportadoras SGTL-1, PEPT-1, CAT-1 e SN2. 2013. 118 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-02-19T13:50:41Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_acsilva.pdf: 19018976 bytes, checksum: 8b9e2aa026fba9646db79cba2435b533 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-02-19T13:53:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_acsilva.pdf: 19018976 bytes, checksum: 8b9e2aa026fba9646db79cba2435b533 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-19T13:53:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_acsilva.pdf: 19018976 bytes, checksum: 8b9e2aa026fba9646db79cba2435b533 (MD5) Previous issue date: 2013 / The morbidity and mortality rates rise when diarrhea is associated with malnutrition. However, the mechanisms by which nutritional deficiencies affect the gut are largely unknown. The aim of this study was to evaluate morphological changes in transport proteins and substrates in intestinal transport of electrolytes and water in malnutrition model in mice. We aim to further analyze the effect of cholera toxin (CT) with or without malnutrition on the carrier proteins substrates on electrolyte transport in mice and finally, we evaluate the effects of oral rehydration solutions (ORS) of OMS (SGli) e modified with glutamine (SGln), alanyl-glutamine (SAla-Gln) and arginine (SArg) in this transport. Mice (n=20) received for 7 days a diet deficient in protein, fat and minerals (DBR). Segments of ileum were obtained before and on day 7 of the diet, for studies of morphology, immunohistochemistry for proteins: SGTL-1, PEPT-1, CAT-1 and SN-2 and evaluated by RT-qPCR of mRNA expression of these transport proteins. The model of intestinal perfusion for 75 min in mice (n=6) was used to evaluate the intestinal transport of water and electrolytes and to evaluate the role of oral rehydration solutions in mice exposed nourished and malnourished or without cholera toxin (1µg/ml). Malnourished animals showed weight loss, atrophy of the villi and reduced expression by immunofluorescence of SGTL-1. Malnutrition also caused a reduction in mRNA expression SGTL-1 and PEPT-1 and increased mRNA expression for SN-2 in mice ileum. In the model of intestinal perfusion, acute malnutrition increased intestinal secretion of electrolytes and water. CT increased the secretion of electrolytes and water into the intestinal perfusion model mice. SGli, SGln, SAla-Gln and SArg decreased secretion of electrolytes induced by CT. Just SGln failed to significantly decrease water secretion induced by CT. CT increased mRNA transcription for intestinal transporters SGTL-1, PEPT-1 and CAT-1 but not to increased transcription SN -2. Only SGli reduced water secretion induced by CT. SGli, SAla-Gln and SArg, but not SGln , decreased secretion of sodium and chloride induced by CT. The malnutrition associated with diarrhea caused by TC reduction in the transcription of mRNA for intestinal transporters SGT -1, PEPT-1, CAT-1 and SN-2. Malnutrition associated with CT increased the secretion of water when compared to the group fed exposed to TC. SGli , SAla-Gln and SArg, but not SGln, decreased water secretion induced by malnutrition associated with TC. All solutions decreased secretion of sodium and chlorid induced malnutrition associated with TC. / As taxas de morbimortalidade se elevam quando a diarreia está associada à desnutrição. Entretanto, os mecanismos pelos quais as deficiências nutricionais afetam o intestino são em grande parte desconhecidos. O objetivo desse trabalho foi avaliar alterações morfométricas, nas proteínas transportadoras de substratos e no transporte intestinal de eletrólitos e água em modelo de desnutrição em camundongos. Objetivamos ainda, analisar o efeito da toxina do cólera (TC) associada ou não à desnutrição, sobre as proteínas transportadoras de substratos, sobre o transporte hidroeletrolítico em camundongos e por fim, avaliamos os efeitos de soluções de reidratação oral (SRO) da OMS (SGli) e modificadas com glutamina (SGln), alanil-glutamina(SAla-Gln) e arginina (SArg) nesse transporte. Camundongos (n=20) receberam por 7 dias uma ração deficiente em proteínas, gorduras e minerais (DBR). Segmentos de íleo foram obtidos antes e no 7º dia da dieta, para estudos de morfometria, imunohistoquímica para as proteínas: SGTL-1, PepT-1, CAT-1 e SN-2 e avaliação por RT-qPCR da expressão RNAm dessas proteínas transportadoras. O modelo de perfusão intestinal por 75 min em camundongos (n=6) foi utilizado para avaliar o transporte intestinal de água e eletrólitos e para avaliar o papel de soluções de reidratação oral em camundongos nutridos e desnutridos expostos ou não à toxina do cólera (1µg/ml). Animais desnutridos apresentaram perda ponderal, atrofia dos vilos e redução na expressão por imunofluorescência da SGTL-1. A desnutrição causou ainda redução na expressão do RNAm da SGTL-1 e PEPT-1 e aumento na expressão do RNAm para o SN-2 no ileo de camundongos. No modelo de perfusão intestinal, a desnutrição aguda aumentou a secreção intestinal de eletrólitos e água. A TC aumentou a secreção de eletrólitos e água em modelo de perfusão intestinal de camundongos. A TC aumentou a transcrição para o RNAm dos transportadores intestinais SGTL-1, PEPT-1 e CAT-1, mas não aumentou a transcrição para o SN-2. As soluções de reidratação com glicose (SGli), glutamina (SGln), alanil-glutamina (SAla-Gln) e arginina (SArg) diminuíram a secreção de eletrólitos induzida pela TC. Apenas a SGln não conseguiu diminuir significativamente a secreção de água induzida pela TC. Apenas a SGli reduziu a secreção de água induzida pela TC. SGli, SAla-Gln e SArg, mas não SGln, diminuíram a secreção de sódio e cloreto induzida pela TC. A desnutrição associada à diarreia pela TC causou redução na transcrição para o RNAm dos transportadores intestinais SGTL-1, PEPT-1, CAT-1 e SN-2. A desnutrição associada à TC aumentou a secreção de água quando comparado ao grupo nutrido exposto à TC. SGli, SAla-Gln e SArg, mas não SGln, diminuíram a secreção de água induzida pela desnutrição associada à TC. Todas as soluções diminuíram a secreção de sódio e cloreto induzida pela desnutrição associada à TC.

QUETZ, Josiane da Silva. Diagnóstico microbiológico, imunoenzimático e molecular e perfil de genes associados à virulência de Campylobacter. 2013. 166 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2016-03-23T13:04:24Z No. of bitstreams: 1 2013_tese_jsquetz.pdf: 3530958 bytes, checksum: e95cebb86634d9fd6d6bd11bdbfcb145 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2016-03-23T13:17:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_tese_jsquetz.pdf: 3530958 bytes, checksum: e95cebb86634d9fd6d6bd11bdbfcb145 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-23T13:17:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_tese_jsquetz.pdf: 3530958 bytes, checksum: e95cebb86634d9fd6d6bd11bdbfcb145 (MD5) Previous issue date: 2013 / Campylobacter sp. is an important cause of food-borne gastroenteritis with high incidence in children living in developing countries. However, the specific diagnosis of its etiology remains as a challenge, since conventional diagnosis by culture is now challenged by molecular and immunoenzymatic methods, which have greater sensitivity. We postulate that the knowledge of its virulence and specific diagnosis may assist in identifying and potentially controling campylobacteriosis in childhood. We determined the etiology of Campylobacter sp. associated diarrhea, in a cross-sectional study of diarrhea in children aged 0-36 months from the urban area of Fortaleza, Ceará, Brazil, who required emergency medical care because of diarrheal disease. After ethical approval of the study, a questionnaire was applied to describe the clinical conditions presented by each child at the time of admission. DNA was extracted directly from fecal samples collected from 226 children. For the determination of the etiologic agent we used molecular diagnostics (PCR and RT-PCR) and diagnostic immunoassay (ELISA), besides the detection of virulence associated genes of C. jejuni (PCR). Campylobacter sp. was found in 8.9% (20/225) of the samples by conventional microbiological diagnosis. C. jejuni and C. coli were detected in 19.5% (44/226) and 1.3% (3/226) of the diarrheic samples, respectively. The diagnostic RT-PCR and ELISA reached 26.7% (60/225) and 37.9% (58/153) of positivity, respectively. When considering the combination of diagnostic (positive in microbiological diagnosis or immunoassay and at least one of the molecular tests) the prevalence was 16.4% (37/226). The agreement between the tests used for diagnosis was moderate to regular, according to Kappa index. The presence of C. jejuni´s virulence-associated genes that encode proteins related to the pathogenesis of micro-organism were detected in the following proportions of C. jejuni-positive DNA samples: flaA, 79.5% (35/44); racR, 97.7% (43/44) and dnaJ, 88.6% (39/44) – related to bacterial adhesion and colonization; ciaB, 97.7 % (43/44); pldA, 45.4% (20/44) and pVir 0% (0/44) – related to invasion, and cdtABC in 95.4% (42/44) of samples related to citoletal distending toxin (CDT). Specific signs and symptoms such as blood in the stool, vomiting, fever and/or abdominal pain, although quite frequent, were not associated with the detection of C. jejuni. The distribution profile of C. jejuni´s virulence genes was not correlated with the clinical presentation of the disease, even when this profile was categorized according to the function of the proteins encoded by the genes, which leads us to believe that other factors, perhaps related to host susceptibility, may be more important than genetic variability of the microorganism. We conclude that Campylobacter sp. was detected in a significant percentage of the children 0-36 months with diarrhea, especially when the diagnostic methods were used in combination. In general, the virulence genes were detected in a high proportion of C. jejuni-positive samples, although the invasion-related genes have been found less frequently. Our data corroborates findings from other groups on the need to revise the diagnostic for Campylobacter sp. towards the inclusion of more sensitive and species-specific methods, as well as search for extra markers for intestinal inflammation and predictors of negative culture. / Campylobacter sp. é uma importante causa de enterite de origem alimentar com alta incidência na população infantil de países em desenvolvimento. No entanto, o diagnóstico específico de sua etiologia segue como um desafio, visto que métodos moleculares e imunoenzimáticos têm se mostrado mais sensíveis. Postulamos que o conhecimento de sua virulência e o diagnóstico específico possam ajudar na identificação e potencial controle da campilobacteriose na infância. Foi determinada a etiologia de diarreia por Campylobacter sp., em um estudo transversal sobre diarreia em crianças de 0-36 meses residentes da área urbana de Fortaleza, Ceará, Brasil, que necessitaram de atendimento médico de urgência por causa de doença diarreica. Após a aprovação ética do estudo, um questionário foi aplicado para qualificar as condições clínicas apresentadas por cada criança no momento da admissão. O DNA foi extraído diretamente de amostras fecais coletadas de 226 crianças. Para a detecção do agente etiológico, utilizamos diagnóstico molecular (PCR e RT-PCR) e diagnóstico imunoenzimático (ELISA), além da detecção de genes associados à virulência de C. jejuni (PCR). Campylobacter sp. foi encontrado em 8,9% (20/225) das amostras, por diagnóstico microbiológico convencional. C. jejuni e C. coli foram detectados em 19,5% (44/226) e 1,3% (3/226) das amostras diarreicas, respectivamente, por PCR. Os diagnósticos por RT-PCR e ELISA alcançaram 26,7% (60/225) e 37,9% (58/153), respectivamente. Quando considerada a combinação de diagnósticos (positividade no diagnóstico microbiológico ou no imunoenzimático e ao menos em um dos testes moleculares) a prevalência encontrada foi de 16,4% (37/226). A concordância entre os testes para diagnóstico utilizados foi de moderada a regular, de acordo com o índice de Kappa. Genes associados à virulência foram detectados nas seguintes proporções de amostras positivas para C. jejuni: flaA, 79,5% (35/44); racR, 97,7% (43/44) e dnaJ, 88,6% (39/44) – relacionados à adesão bacteriana e colonização; ciaB, 97,7% (43/44); pldA, 45,4% (20/44) e pVir 0% (0/44) – relacionados à invasão; e cdtABC em 95,4% (42/44) das amostras, operon relacionado à produção da toxina citoletal distensora (CDT). Sinais e sintomas específicos, tais como sangue nas fezes, vômito, febre e/ou dor abdominal, apesar de bastante frequentes, não foram associados com a detecção de C. jejuni. O perfil de distribuição dos genes de virulência de C. jejuni não apresentou correlação com a apresentação clínica da doença, mesmo quando tal perfil foi categorizado de acordo com a função das proteínas codificadas pelos genes, o que nos leva a crer que outros fatores, talvez relacionados à susceptibilidade do hospedeiro, possam ser mais importantes do que a variabilidade genética do micro-organismo. Concluímos que Campylobacter sp. foi detectado em percentual relevante da população estudada, principalmente quando os métodos diagnósticos foram utilizados de forma combinada. Em geral, os genes de virulência foram detectados em uma alta proporção das amostras positivas para C. jejuni, embora os genes relacionados à invasão tenham sido menos frequentemente encontrados. Corroboramos dados de outros grupos sobre a necessidade de revisão do diagnóstico para Campylobacter sp. em prol da inclusão de metodologias mais sensíveis e espécie-específicas, além da busca por marcadores para inflamação intestinal e fatores preditivos de cultura negativa.

Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-10T14:12:01Z No. of bitstreams: 2 Dissertaçao Carla Dias.pdf: 1839272 bytes, checksum: 399f17831b707cd42df96bdba92a34a8 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-10T14:12:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertaçao Carla Dias.pdf: 1839272 bytes, checksum: 399f17831b707cd42df96bdba92a34a8 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-03-25 / A causa mais comum de diarreia grave em menores de cinco anos é o rotavírus. A principal estratégia de controle da rotavirose no mundo é a vacinação sistemática infantil contra o rotavírus. No Brasil, a vacina foi introduzida no calendário de imunização em 2006. Faltam estudos em Pernambuco que avaliem a morbimortalidade por diarreia antes e após a vacina do rotavírus. A presente pesquisa tem como objetivo avaliar as admissões hospitalares e mortalidade por diarreia em menores de cinco anos, antes e após a introdução da vacina contra o rotavírus em Pernambuco e suas mesorregiões no período entre 2002 e 2010, analisando a tendência temporal de internações e óbitos. Dados do Sistema de Informação Hospitalar do Sistema Único de Saúde (SIH-SUS) e Sistema de Informação sobre Mortalidade do Ministério da Saúde (SIM-MS), disponíveis no endereço eletrônico do Departamento de Informática do SUS (DATASUS) foram analisados em uma série temporal interrompida. Taxas de admissão hospitalar e mortalidade observadas nos anos após implementação da vacina (2007-2010) foram comparadas com taxas estimadas calculadas a partir de anos pré-vacinação (2002- 2005), ajustadas para sazonalidade. Foi evidenciado declínio significativo nas taxas de internação e de óbito por diarreia em todas as mesorregiões do Estado e faixas etárias estudadas, especialmente nos menores de um ano, quando o declínio foi sempre igual ou superior a 50%. Vinte e seis mil e seiscentas internações e 873 óbitos deixaram de ocorrer em menores de cinco anos no Estado de Pernambuco após utilização da referida vacina.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2015-05-28T14:19:03Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE Lívia Christina Alves da Silva.pdf: 1170035 bytes, checksum: 96b18862f19b9793a3fc764d10ee4638 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-28T14:19:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE Lívia Christina Alves da Silva.pdf: 1170035 bytes, checksum: 96b18862f19b9793a3fc764d10ee4638 (MD5) Previous issue date: 2015-03-04 / Aeromonas são habitantes nativos de ambientes aquáticos e, recentemente, têm sido considerados patógenos humanos emergentes. As gastroenterites são as infecções mais comumente relacionadas a esse gênero. Nesse estudo, 119 isolados clínicos e ambientais de Aeromonas, obtidos durante um surto de diarreia ocorrido em São Bento do Una, Pernambuco, foram avaliados quanto à prevalência das espécies, estrutura genética da população e potencial de virulência. A análise das sequências dos genes 16S rRNA e gyrB revelou a predominância de A. caviae (66,4%), seguida por A. veronii (14,2%); A. aquariorum (9,2%); A. hydrophila e A. trota (3,4%) e A. jandaei (1,7%). Dois isolados não foram identificados entre as espécies conhecidas de Aeromonas, sugerindo pertencerem a novas espécies. A rede filogenética construída com base no gene 16S rRNA revelou uma estrutura populacional epidêmica, envolvendo quase todos os isolados de A. caviae, sendo possível identificar um genótipo fundador e seus descendentes. Os genes de virulência alt, ast e hlyA foram detectados entre os isolados com frequências de 81,5%; 13,4% e 11,8%, respectivamente. Este estudo revelou que a análise filogenética de sequências concatenadas dos genes 16S rRNA e gyrB é um eficiente marcador taxonômico para o gênero Aeromonas. Foi detectado elevado potencial de virulência entre as espécies de Aeromonas identificadas, principalmente entre A. hydrophila, A. aquariorum e A. caviae. As características marcantes observadas sugerem que a espécie A. caviae teve importante participação nos casos de diarreia relatados em São Bento do Una, Pernambuco.

Orientador : Domingos da Silva Leite / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T21:10:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Penatti_MarioPauloAmante_M.pdf: 2606360 bytes, checksum: d5aff3af7c7d005e94ec179b684a471b (MD5) Previous issue date: 2001 / Mestrado