Orientador: Antonio Carlos Boschero / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Bibliografia: f. [79]-110 / Made available in DSpace on 2018-07-24T12:25:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Reis_LuisCarlos_M.pdf: 5758930 bytes, checksum: e1df9ef455ed05e6d86b81c90ee8b4c7 (MD5) Previous issue date: 1984 / Resumo: A proposição central do presente estudo, foi a análise dos efeitos da 4-AP, sobre a permeabilidade das células beta, ao 'K POT. +' e, conseqüentemente, avaliar a secreção de insulina por ilhotas de Langerhans isoladas. Por outro lado, o objetivo terminal, foi uma contribuição proliminar, para um melhor entendimento das múltiplas etapas do mecanismo de secreção de insulina. A execução da parte experimental, foi primeiramente constituída pela incubação ou perfusão de grupos de ilhotas pancreáticas de rato, submetido a diferentes protocolos. A incubação de ilhotas por períodos de 90 a 120 minutos, prestou-se para a avaliação da incorporação de 'ANTPOT. 45 Ca' ou da oxidação da glicose. Com a perfusão de ilhotas durante 70 a 90 minutos, efetuou-se a análise de efluxo fracionário do 'ANTPOT 86 Rb', e da dinâmica da secreção de insulina e do efluxo do 'ANTPOT 45 Ca'. Os resultados obtidos são resumidos a seguir: 1- Sob a análise da dinâmica da secreção da insulina, observaou-se que, em meio contendo concentrado limiar de glicose(6,0 mM), a taxa secretória média atingiu, repectivamente, 0,169 '+ OU -' 0,008 , 0,245 '+ OU -' 0,031 e 0,115 '+ OU -' 0,009 'mu"U/ilkhota/minuto, antes durante e após a introdução de 10,0 mM de 4-AP, ao sistema perfusor. O pico estimulatório de secreção foi rápido e passageiro, para a seguir retomar os níveis basais. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Fisiologia e Biofisica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Antonio Carlos Boschero / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-25T05:18:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bosqueiro_JoseRoberto_D.pdf: 3058404 bytes, checksum: 8c3a8b84e90f4ed4b5bce3915db95301 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Foi realizado estudo do efeito da tetracaína sobre o efluxo de 45Ca, a concentração de Ca2+ citoplasmático, [Ca2+]i, e a secreção de insulina em ilhotas pancreáticas e células B isoladas. Na ausência de Ca2+ externo, tetracaína (0,12,0 mM) aumentou, de maneira dose-dependente, o efluxo de 45Ca de ilhotas isoladas. Tetracaína não afetou o aumento do efluxo de 45.ca causado por 50 mM de K+ ou pela associação de carbacol (Cch - 0,2 mM) e 50 mM de K+. Tetracaína aumentou permanentemente a [Ca2+]i em células B isoladas em meio livre de Ca2+ e acrescido de 2,8 mM de glicose e 25 µM D-600 (metoxiveparamil). Este efeito também foi observado na presença de 10 mM de cafeína ou 1 µM de tapsigargina. Em presença de 16,7 mM de glicose, tetracaína aumentou de maneira transitória a secreção de insulina das ilhotas perfundidas, tanto na ausência quanto na presença de Ca2+ externo. Estes dados indicam que tetracaína mobiliza Ca2+ de um estoque insensível à tapsigargina e estimula a secreção de insulina na ausência de Ca2+ extracelular. O aumento do efluxo de 45Ca causado pelas altas concentrações de K+ e pelo Cch indica que tetracaína não interfere nos estoques sensíveis a cátions ou ao IP3 / Abstract: The effect of tetracaine on 45Ca efflux, cytoplasmic Ca2+ concentration [Ca2+]i and insulin secretion in isolated pancreatic islets and B-cells was studied. In the absence of external Ca2+, tetracaine (0.1-2.0 mM) dose-dependently increased the 45Ca efflux from isolated islets. Tetracaine did not affect the increase in 45Ca efflux caused by 50 mM K+ or by the association of carbachol (Cch - 0.2 mM) and 50 mM K+. Tetracaine permanently increased the [Ca2+]i in isolated B-cells in Ca2+ -free medium enriched with 2.8 mM glucose and 25 µM D-600 (methoxiverapamil). This effect was also observed in the presence of 10 mM caffeine or 1 µM thapsigargin. In the presence of 16.7 mM glucose, tetracaine transiently increased the insulin secretion from islets perifused in the absence and presence of external Ca2+. These data indicate that tetracaine mobilises Ca2+ from a thapsigargin-insensitive store and stimulates insulin secretion in the absence of extracellular Ca2+. The increase in 45Ca efflux caused by high concentrations of K+ and by Cch indicates that tetracaine did not interfere with a cation or IP3-sensitive Ca2+ pool in B-cells / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Ciências

Orientador: Jose Antonio Rocha Gontijo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-14T02:06:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souza_MiltonLopesde_M.pdf: 997927 bytes, checksum: 66fb62b1ec71c26c781acfcc3aa85840 (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: Indivíduos clinicamente sadios (N = 1 5), normotensos, brancos, com idade compreendida entre 20 - 40 anos e dentro da faixa de peso corporal ideal, foram submetidos à 10G e observados quanto à curva glicêmica, insulinêmica, pulso, pressão arterial e a parâmetros hemodinâmicos ecocardiográficos. Os dados foram obtidos em intervalos de 30 em 30 minutos do GTTO, de TO a T120. A análise dos resultados demonstrou: 1. As curvas. glicêmica e insulinêmica apresentaram distribuição dentro da normalidade. 2. Aumento precoce, nos primeiros 30 min do GTTO, do Débito Cardíaco, Fração de Ejeção e Fração de Encurtamento do VE acompanhando o pico de elevação inicial da insulinemia. 3. Queda nos primeiros 30-60 min da GTTO, da Resistência Vascular Periférica, da Pressão Arterial Diastólica e da Pressão Arterial Média, acompanhado freqüentemente do sintoma sonolência e letargia. Estes achados sugerem, conforme a literatura, ação vasodilatadora periférica e inotrópica positiva da insulina. 4. A partir dos 60 min do GTTO ocorrem fenômenos contra-reguladores ou seja, aumento da Freqüência Cardíaca, do Duplo Produto, normalização da Resistência Vascular Periférica e da Pressão Arterial Média. Esta "segunda fase" hemodinâmica, podemos chamar compensatória, provavelmente esteja relacionada à ativação do Sistema Nervoso Simpático, quer por reflexos baroceptores, quer pela própria estimulação da insulina sobre o sistema nervoso central e sistema nervoso simpático. 5. Todas estas variações hemodinâmicas ocorreram dentro dos limites fisiológicos e homeostáticos. Os achados desta pesquisa confirmam as ações cardiovasculares da insulina demonstradas pelos diversos autores, através do método ecocardiográfico, sua interação com o SNS e acrescenta a sequência dos fenômenos no tempo, através do GTTO. As implicações clínicas estão na dependência da maior ou menor capacidade do SNS 'contra-regular os efeitos vasodilatadores da insulina, principalmente em diabéticos que recebem insulina exógena e freqüentemente apresentam neuropatia autonômica, com falência dos reflexos baroceptores. Por outro lado, pacientes com hiperinsulinemia e hiperativação do SNS podem desenvolver estados hipertensivos e cardiopatia isquêmica / Abstract: Clinically sound individuals (N = 15), normotensives, white, with ages varying between 20 to 40 years old, with body weights within the ideal range, were submitted to a "IOG" and observed as to their glucemic and insulinemic curves, pulse, blood pressure, and as to echocardiographic hemodynamic parameters. Data was obtained in intervals of 30 minutes of the GTTO, from TO to T120. The analysis of the results showed: 1. The glucemic and insulinemic curves presented a normal distribution. 2. During the first 30 minutes of the GTTO, an early increase of the Cardiac Output and the Fractional Shortening of the left ventricle, accompanying the inicial elevation of the insulinemia. 3. During the first 30 - 60 minutes of the GTTO, a decline df the Systemic Vascular Resistance, the Diastolic Blood Pression and Mean Blood Pressure, frequently accompanied by symptoms of sleepiness and lethargy. This evidence suggests, in accordance to literature, a vasodilating and positive inotropic effect of insulin. 4. After the first 60 minutes of the GTTO, counter regulating phenomenons occurred, that is, increase of Heart Rate, Double Cross Index, normalization of the Systemic Vascular Resistance and the Mean Blood Pressiono This second hemodynamic phase, which can be called .compensatory", is probably related to the activation of the Sympathetic nervous system, due to baroreceptor-reflexes, or due to the characteristic stimulation of insulin on the Central Nervous System and Sympathetic Nervous System. 5. Ali these hemodynamic variations occurred within physiologic and homeostatic limits. The results of this research confirm the cardiovascular effects of insulin demonstrated by various authors through the echocardiographic method, its interaction with the Sympathetic Nervous System and adds the sequence of the phenomenons with time through the GTTO. Clinical implications depend on the greater or smaller capacity of the SNS in counter regulating the vasodilating effects of insulin, principally in diabetics that receive exogenous insulin and frequently present autonomic neuropathy with failure of baroreceptor reflexes. On the other hand, patients with hiperinsulinemia and hiperactivation of the SNS can develop hipertensives status and isquemic cardiopathy / Mestrado / Mestre em Medicina

Orientadores: Eliana Cotta de Faria, Lucia Nassi Castilho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T01:08:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tentor_Juliana_M.pdf: 9780971 bytes, checksum: 5a3f3077a44a16fe7944e48d507800f9 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A aterosc1erose é uma doença multifatorial da parede arterial de caráter degenerativo, imuno-inflamatórioe progressivo. Entre os diversos fatores predisponentes para o desenvolvimento da doença arterial coronariana situa-se o aumento da lipemia no período pós-alimentar. Este é um estado em que o ser humano passa a maior parte de sua vida por ter hábitos alimentares seqüenciais. São mecanismos fisiopatológicos da aterogenicidade deste período, a deposição sub-endotelial de lipoproteínas ricas em triacilglicerol derivadas de quilomicrons e de lipoproteínas de densidade muito baixa: os remanescentes. Além disso, as lipoproteínas ricas em triacilglicerol afetam o metabolismo das lipoproteínas de alta densidade, de caráter anti-aterogênico, pois a hidrólise das primeiras gera material estrutural para as segundas e o excesso de triacilglicerol em lipoproteínas ricas em triacilgliceróis é trocado por ésteres de colesterol das lipoproteínas de densidade alta. Portanto a hipertrigliceridemiaacompanha-se de redução nos níveis da lipoproteína de alta densidade, de ação antiaterogênica. Como fatores de aterogenicidade não lipídicos ocorre neste período uma tendência a um estado de maior coagulabilidade e pró-oxidante ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Atherosclerosis is a multifactorial, immuno-inflammatory and progressive disease of the arterial wall. Postalimentary lipemia is associated with an increased risk of coronary artery disease. The metabolic and pro-oxidant effects in fasting and postprandial (2, 4, 6 and 8h) periods were measured in an adult population ofboth sexes, without risk factors for coronary artery disease or established disease, afier a fat meal containing 40g fat/m2body surface. Several lipids, lipoproteins, cholesteryl ester transfer protein activity , insulinemia, lipoprotein lipase, hepatic lipase, the autoantibodies against oxidized low-density lipoprotein and the carotid intima-mediathickness were measured. In the first scientific paper we evaluated in an adult population (n=60) of both sexes the triacylglycerol response patterns afier a fat standardized meal on several lipids and metabolic parameters in the fasting and postalimentary periods. Three triacylglycerol response patterns were observed. They were c1assifiedaccording to the time to peak in the triacylglycerol response curves, the magnitude of lipemia, of a11the times and of TAG peaks, the number of peaks, the time ttom baseline values to initialresponse and the time to return to baseline values. The groups were: early, late and biphasic responders. Among late responders 50% presented a biphasicpattem...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Helena Coutinho Franco de Oliveira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:08:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Berti_JairoAugusto_D.pdf: 3695529 bytes, checksum: 1f1e5f04eab6fa0e663e6d40108caa7e (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: A proteína de transferência de colesteril éster (CETP) é uma glicoproteína que estimula a troca de colesteril éster das HDL por triglicérides das lipoproteínas que contém apolipoproteína B (apoB). Tanto a variação da expressão da CETP quanto o diabetes experimental podem alterar a aterogênese. Em trabalhos anteriores, resultados contrastantes foram obtidos em diferentes modelos animais e contextos metabólicos. Em um primeiro estudo investigamos a variação da expressão da CETP em camundongos transgênicos diabéticos por tratamento com estreptozotocina, hiperinsulinêmicos com suplementação de glicose, apenas suplementados com glicose e controles. Os resultados mostraram que: 1- na hiperglicemia e deficiência de insulina (diabetes) ocorre aumento dos níveis plasmáticos e de mRNA hepático de CETP, 2- a suplementação da dieta com glicose aumenta a expressão da CETP por mecanismos pós-transcricionais, e 3- a hiperinsulinemia reprime a expressão da CETP estimulada pela glicose por reduzir a concentração de seu rnRNA. Em um segundo estudo, avaliamos os efeitos da expressão da CETP e do diabetes experimental sobre a aterosclerose da raiz da aorta de camundongos deficientes de receptores de LDL (LDLR) alimentados com dieta aterogênica. Os resultados mostraram que: 1- a expressão da CETP não altera a formação da lesão aterosclerótica dos animais diabéticos, embora ela possa ser protetora para animais euglicêmicos, 2- a concentração de triglicérides plasmáticos é um fator de risco independente em animais deficientes de LDLR mas não para os animais que expressam a CETP, 3- a concentração de colesterol plasmático aumenta significativamente as chances de desenvolvimento de lesões com tamanho acima da mediana, independentemente do genótipo e da presença de diabetes, e 4- a hiperglicemia contribui para o aumento do risco de aterosclerose. Em um terceiro estudo investigamos o efeito da super-expressão, isolada ou combinada, da CETP, da apolipoproteína (apo) AI e da lecitina-colesterol-acil-transferase (LCA T), sobre o desenvolvimento de aterosclerose induzida por dieta em camundongos transgênicos envelhecidos. Os resultados mostraram que: 1- as expressões de LCA T e LCA T /apoAI resultam em aumento de risco de desenvolvimento de lesão aterosclerótica, 2- a co-expressão da CETP com LCA T e LCA T/apoAI neutraliza o efeito aterogênico e 3- a expressão isolada de apo AI reduz as chances de desenvolvimento de lesões com tamanho acima do percentil 75 / Abstract: Cholesteryl ester transfer protein (CETP) mediates cholesteryl ester and triglyceride redistribution among plasma lipoproteins. Contrasting effects of variations in CETP expression and presence of diabetes on the extension of atherosclerosis have been reported in distinct animal models and metabolic contexts. The CETP expression was studied in streptozotocin induced diabetic, in glucose fed, in glucose fed plus hyperinsulinemic and in control transgenic mice. The results showed that: 1- insulin deficiency and hyperglycemia increase CETP plasma levels and liver mRNA expression; 2- glucose supplementation increases CETP expression by post-transcriptional mechanisms; and 3- hyperinsulinemia downregulates the glucose-stimulated CETP expression by reducing its mRNA levels. In a second study, the effects of diabetes and CETP expression on the diet induced atherosclerosis in LDL receptor deficent mice were evaluated. The results showed that: 1CETP expression does not alter the responsiveness of lesion formation to diabetes, although it may be protective in euglycemic state, 2- triglyceride concentration is an independent risk factor in LDL receptor deficient mice but not in CETP expressing mice, 3- plasma cholesterollevels significantly increase the chances of developing large size atherosclerotic lesions, independently of genotype and presence of diabetes, and 4hyperglycemia contributes to the risk of atherosclerosis. In a third study, we investigated the effects of over-expressing three genes involved in the reverse cholesterol transport: apolipoprotein AI, lecithin-cholesterol acyl transferase (LCA T) and CETP on the development of diet induced atherosclerosis in aged mice. The results showed that: 1- LCA T and LCA T / AI expression impose a higher risk of developing atherosclerosis, 2- CETP expression on these backgrounds neutralizes this atherogenic scenario, and 3- isolated, apoAI overexpression reduces the chances of developing large size atherosclerotic lesions / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Mario Jose Abdalla Saad / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-31T17:04:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nunes_AndreLuizBaptiston_D.pdf: 14991593 bytes, checksum: e435333c497d8a7607f393c8ee3b7825 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A insulina estimula a atividade quinase do seu receptor, resultando na fosforilação de substratos citosólicos, entre eles o IRS-l, que se associam à fosfatidilinusitol 3-quinase, ativando-a. A resistência à insulina é uma condição fisiopatológica asssociada à sepse. Entretanto, o mecanismo molecular envolvido nesta situação de resistência não é conhecido. Neste estudo, examinamos a regulação das proteínas envolvidas nas etapas iniciais da ação insulínica em fígado, músculo, coração e gordura de ratos sépticos. Não foram observadas alterações na concentração do receptor de insulina dos ratos sépticos, em quaisquer dos tecidos estudados, determinado por "immunoblotting" com anticorpo anti-receptor de insulina após imunoprecipitação com anticorpo anti-IRS-l. O grau de fosforilação em tirosina da subunidade ß do receptor de insulina, que reflete sua autofosforilação, também não sofreu variações significativas, sugerindo a preservação da função do receptor de insulina nesta condição. Os níveis protéicos do IRS-l estavam preservados em três dos tecidos estudados: fígado, coração e gordura, e reduzido a 61±12% (p<0,05)no tecido muscular dos ratos sépticos. A incubação de amostras de tecido muscular previamente imunoprecipitadas com anticorpo anti-IRS-l com anticorpo anti-fosfotirosina, documentou uma consistente redução da fosforilação do IRS-l a 59±9% (p<0,05) dos valores observados no grupo controle, fato não observado nos demais tecidos. A exposição do "blotting" utilizado para determinação da fosforilação do IRS-l ao anticorpo anti PI3-quinase, após "stripping" da membrana de nitrocelulose, permite o estudo da associação IRS-l com a subunidade reguladora da PI3-quinase. Utilizando esse método, observamos uma redução tecido-específica da associação entre essas proteínas, reduzida a 56±7% (p<0,05)em músculo de ratos sépticos, consistente com a redução da fosforilação do IRS-l previamente observada. Estes dados sugerem que alterações nas etapas iniciais da transmissão do sinal insulínico estão presente em tecido muscular de ratos sépticos e podem contribuir para a resistência à insulina observada nesses animais / Abstract: Sepsis is known to induce insulin resistance, but the exact molecular mechanism involved is unknown. In the present study we have examined the levels and phosphorylation state of the insulin receptor and insulin receptor substrate 1 (IRS-l), as well as the association between IRS-l and phosphatidylinositol 3-kinase (pI 3-kinase) in the liver, muscle,heart and fat of septic rats by immunoprecipitation and immunoblotting with anti-insulin receptor, anti-IRS-l, anti-PI 3-kinase and anti-phosphotyrosine antibodies. There were no changes in the insulin receptor concentration and phosphorylation levels in any tissue of septic rats. IRS-l protein levels were decreased to 61 ±12%(p < 0.05) in musclebut not in other tissues of septicrats. In samples previously immunoprecipitated with anti-IRS-l antibody and blotted with antiphosphotyrosine antibody, the insulin-stimulated IRS-l phosphorylation levels in the muscle of septic rats decreased to 59±9% (p < 0.05) and insulin-stimulated IRS-l association with PI 3-kinase decreased to 56±7% in muscle(p < 0.05), but no changes were seen in liver, heart or fato These data suggest that there is a tissue-specific regulation of early steps of insulin signal transduction in septic rats, and the changes observed in muscle may have a role in the insulin resistance of these animaIs / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Antonio Carlos Boschero / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-13T22:56:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_CarlosAlbertoda_M.pdf: 1075017 bytes, checksum: 4d6994468f70b6a0b07661d1e5585482 (MD5) Previous issue date: 1990 / Resumo: Neste trabalho estudou-se discriminativamente o efeito do tiopental sobre a permeabilidade ao K+ em ilhotas de Langerhans isoladas de rato. As ilhotas foram isoladas pelo método da colagenese, marcadas durante 90 minutos com 86RbCl (substituto de K+) e perfundidas em solução de Krebs-bicarbonato em diferentes condições experimentais. Os resultados indicam que: Tiopental (0.2 e 2.0 mM) reduziu o efluxo de a 86Rb de ilhotas perfundidas na presença ou ausência de glicose, com o meio contendo, ainda, 20 ou 100 µg/ml de um bloqueador especifico dos canais de K+ modulados pelo ATP, ou seja a tolbutamida. O efeito inibidor de tiopental sobre o efluxo do 86Rb foi mais marcante quando a perfusão das ilhotas foi processada em solução contendo diazoxida , substância que promove a abertura dos canais de K + modulados pelo ATP. Tiopental não inibiu o aumento do e f l u x o de 86Rb induzido pela teofilina, a qual mobiliza Ca2 + de compartimentos intracelulares. Contudo, tiopental inibiu significativamente o efluxo de 86Rb em presença do TEA que bloqueia as permeabilidades de K+/Ca2+ e Vm dependentes, esse efeito inibidor foi detectado também quando na presença de tolbutamida . Seu efeito inibidor sobre o e fluxo do 86Rb em presença de uma concentração despolarizar te de K+ (50 mM) foi sublimiar em comparação aos outros procedimentos estimulantes as células B. Com base nos resultados obtidos em experimentos com sulfuniluréias hipoglicemiantes e hiperglicemiantes, constatamos que o tiopental atua bloqueando preferencialmente de maneira dose-dependente e reversível os canais de K+ modulados pelo ATP. / Abstract: We investigated here the effects of tiopental on the K+-permeability in isolated islets of Langerhans. Islets-obtained from adult rats by collagenase digestion were prelabeled with 86RbCl during 90 min (86Rb was used as a substitute for k +) and perifused in a Krebs-bicarbonate solution. The results indicate that: Tiopental (0.2 and 2.0 mM) significantly reduced the 86Rb efflux from islets perfused in a medium containing or not 2.8 mM glucose. In the presence of 20 or 100 µg/ml of tolbutamide, a blocker of the ATP-modulated K+ channels, the effect of tiopental in reducing the 86Rb efflux is still present. On the presence of the hiperglicemiant sulfonilureia Diazoxide the effects of tiopental were much more marked. On the other hand, tiopental did not affect the increase in the 86Rb efflux provoked by teophylline that mobilises Ca2+ from internal stores and hence stimulates the Ca2+-dependent K+ permeability. Tiopental reduced the 86Rb efflux from islets perifused in the presence of TEA that blocks the Ca2+-dependent K+ permeability. This effect was noticeable even in the presence of tolbutamide. The reduction in the 86Rb efflux provoked by tiopental was only Marginal when the islets were perifused in the presence of high K+ concentration (50 mM). These results suggest that tiopental reduces the K+ permeability from pancreatic islets (in a dose-dependent manner) on the ATP-modulated K+ channels. As a provocative idea, we suggest that the delay in the response may be due to the low lipossolubility of the barbiturate in the plasma Membrane. / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Elza Olga A. Muscelli Berardi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-18T12:20:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souza_MiltonLopesde_D.pdf: 2032350 bytes, checksum: 09977c8b29b7f64c4fb7d78ec16e8e4a (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: Vários autores têm demonstrado que a fisiopatogenia da Hipertensão Arterial Essencial envolve relações com Resistência à Insulina e Hiperinsulinemia. Vários efeitos deste hormônio são notados no sistema cardiovascular, estando implicados nos diversos setores do organismo onde a morbidade da HAS se faz presente. Neste estudo, 45 indivíduos, (10 normotensos brancos, 10 normotensos negros, 14 hipertensos brancos e 11 hipertensos negros), de ambos os sexos, pareados por idade e dentro do peso ideal, foram submetidos a um Teste de Tolerância Oral à Glicose (TTOG) com 75 g de glicose, a um Teste de Tolerância à Insulina (TTI) e observados quanto às curvas glicêmica e insulinêmica, quanto à resposta pressórica e hemodinâmica, avaliadas por ecocardiograma, em intervalos de 30 min durante 120 min (TO a T120) do TTOG. A observação das curvas insulinêmicas, do TTI, bem como das medidas dos diâmetros internos e espessura do Ventrículo Esquerdo, permitiu subdividir os hipertensos em: hipertensos com hipertrofia cardíaca (n = 12), hipertensos sem hipertrofia cardíaca (n = 13), hipertensos resistentes à insulina (n = 7), hipertensos não resistentes à insulina, (n = 17), hipertensos hiperinsulinêmicos (n = 6) e hipertensos não hiperinsulinêmicos (n = 17) . A análise dos resultados demonstrou: 1- Os hipertensos apresentaram insulinemia média de JeJum mals elevada que os normotensos, e nos normotensos negros a curva insulinêmica foi mais alta que a dos brancos. 2- Cerca de 30% dos hipertensos apresentaram resistência à insulina pelo TTI e 26% hiperinsulinemia pelo cálculo da área sob a curva insulinêmica. 3- Mesmo sem intolerância à glicose, os hipertensos hiperinsulinêmicos apresentaram curva glicêmica significativamente mais elevada aos 60 min pós SOG que os normoinsulinêmicos. 4- Entre os hipertensos com hipertrofia cardíaca, 45% apresentaram resistência à insulina, porém apenas 10% mostraram-se hiperinsulinêmicos pelo método empregado e apenas 15% dos hipertensos sem hipertrofia cardíaca eram resistentes à insulina. 5- Todos os indivíduos estudados obtiveram aumento do débito e do inotropismo cardíaco após a. SOG, sendo que os hipertensos responderam mais prontamente, aos 30 min, que os normotensos. A pressão diastólica, a pressão arterial média e a resistência vascular periférica apresentaram um decréscimo de seus valores, evidenciando um efeito vasodilatador, atribuído à insulina. Nos normotensos negros a resistência vascular periférica basal foi maior que nos normotensos brancos, aproximando-se dos níveis dos hipertensos brancos. 6- A presença ou não de hipertrofia cardíaca não influiu nas respostas hemodinâmicas encontradas após SOG. 7- Não houve variação significativa da freqüência cardíaca nos diversos grupos durante o experimento.Os achados desta pesquisa sugerem a presença de resistência à insulina em uma porcentagem de pacientes hipertensos essenciais e evidenciam diferenças raciais nas respostas metabólicas e hemodinâmicas. Outro ponto relevante é a elevada associação entre resistência à insulina e hipertrofia cardíaca / Abstract: To determine the possible relationship between insulin resistance, essencial hypertension and rriyocardium hipertrophy we studied 25 hypertensive patients (14 whites and 11 blacks), and 20 nOl:motensi ve (10 blacks and 10 whites). Secondary forms of hypertension were excluded as well other intercurrent illnesses, like DMNID and obesity. The voluntaries were submitted to an insulin tolerance test (0,1 U/kg of human insulin - TTI), and to an oral glucose tolerance test (OGTT) , concomitantly with a repeated echocardiographic evaluation (30 min intervals) . It was observed: - Seven hypertensives (about 30%) are insulin resistant (TTI) - Six hypertensive are hyperinsulinemicby the criterion of Total area under the insulin curve. These patients, alI with normal glucose tolerance, had higher glucose levels at 60 min after glucose ingestion. - Twel ve (12) hypertensives had rriyocardium hipertrophy, 45% of them were insulin resistant and only 10% were hyperinsulinemic. - A cardiac inotropic response was seen in alI, normotensive and hypertensive subjects, earlier. and stronger in the hypertensives. The blood pressure and periferic vascular resistance decreased in all groups, but it was higher in hypertensives and in nornlotensive blacks then in whites, even in basal period. There lS no difference on hemodinamics effects between patients with or without myocardium hipertrophy. - The double cross index decreased only in hypertensives till 30 or 60 minutes after glucose ingestion. There is no change of cardiac rate during all the experiments. The data obtained suggest that insulin resistance does develop in a subset of hypertensive patients, that the normotensive blacks are more" insulin resistant" than the whi tes . And also that hypertrophic patients there is no significant differences on their hemodinamic response. Also there is 45% of insulin resistant subjects in thes subgroup. there is a significant difference between whites and blacks concerning on their hemodinamic changes related to a glucose ingestion. An important point is that between hypertensive hypertrophic patients there is no significant differences on their hemodinamic response. Also there is 45% of insulin resistant subjects in these subgroup / Doutorado / Medicina Interna / Doutor em Medicina

Orientadores: Marta H. Krieger-Azollini, Antonio Carlos Boschero / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-20T01:40:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Crepaldi_SilviaCristina_M.pdf: 5590505 bytes, checksum: b013d47cf01e064c820efc4b70d7cbef (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: o presente trabalho teve como objetivo analisar o efeito da PRL no processo de maturacão da resposta secretória à glicose em células B pancreáticas. Enfase foi dada, ao estudo de possíveis alteracões nas permeabilidades dos íons potássio e cálcio e sobre a secrecão de insulina.Para isto, ilhotas de ratos Wistar recém-nascidos, foram cultivadas por 7 a 9 dias, em Meio Essencial Mínimo, acrescido de 11% de soro fetal bovino (v/v), 2% da mistura penicilina (100 U/ml)-estreptomicina (0,1 mg/ml), com concentracão final de glicose de 10 mM. As ilhotas foram mantidas a 37°C; pH 7,4; em uma atmosfera com 5% de C02. O meio de cultura foi renovado a cada 48 horas. Parte do material em cultura serviu como controle e parte recebeu tratamento diário com PRL (2 ~g/ml).Após o período de cultura, foram executados os seguintes protocolos:a) Perfusão de ilhotas para a análise da dinâmica do efluxo do aSRb+, do 45Ca2+ e da secrecão de insulina. b) Medidas do influxo de 45Ca2+. c) Extracão e dosagem do (conteúdo total de insulina por ilhota.Os resultados mostraram que: 1. A capacidade da glicose em alterar o efluxo do 8sRb+, foi maior em ilhotas tratadas com PRL do que em relacão às controle. 2. O efeito da tolbutamida, diminuindo e da diazoxida,aumentando o efluxo do 8SRb+, foi mais acentuado em ilhotas tratadas com PRL do que nas controle. 3. O aumento na incorporação de 45Ca que ocorreu frente ao aumento da concentração de glicose ou de K+, foi semelhante em ambos os grupos experimentais.4. Na ausência do Ca2+ extracelular, glicose não provocou redução no. efluxo do 45Ca2+, em ambos os grupos de ilhotas.5. O tratamento hormonal melhorou a resposta secretória das ilhotas, quando estimuladas por 16,7 mM de glicose. 6. O conteúdo total de insulina foi maior em ilhotas tratadas com PRL do que em ilhotas controle. Concluindo, os resultados indicam que em ilhotas neonatais de rato, o tratamento crônico com PRL, aumentou o conteúdo de insulina, potencializou a capacidade da glicose em reduzir o efluxo do K+ e em aumentar a secreção de insulina. Contudo, o tratamento com PRL não influiu de maneira significativa sobre o efeito da glicose a nível dos fluxos de Ca2+ / Abstract: The present study aimed to compare the effect of PRL on the maturation of the mechanisms of insulin secretion induced by glucose in neonatal pancreatic islets. Our attention were centralized mainly on possible alterations in Ca2+ and K+ fluxes and insulin release.For this purpose islets from neonatal Wistar rats were cultured for 7 to 9 days in Minimal Essential Medium,supplemented with 11% fetal calf serum (v/v), 2% penicilin (100 Ujml)-streptomicin (0,1 mg/ml) and glucose (final concentration 10 mM). The islets were maintened at 37°C; pH 7,4; in a 5% CO2 atmosphere. Culture medium was renewed every 48 hours. Part of the islets was used as control and part was treated daily with PRL (2 j.lg/ml). After culture, the following protocols were executed: a) Measurement of 86Rb+ and 45Ca2+ efflux rate and insulin release by perifused islets.b) Measurement of 45Ca influx in incubated islets. c) Measurement of total insulin content in the islets. The results showed that: 1. The capacity of glucose in changing the 8BRb+ effl~, was higher in PRL-treated islets than in control islets. 2. The effects of tolbutamide (lowering) and diazoxide (increasing) the B6Rb+ efflux, were higher in PRL-treated than in control islets. 3. PRL-treatment did not affect the ability of glucose and high K+ to increase the 45Ca uptake by incubated islets. 4. Glucose failed to affect the 45Ca2+ efflux from islets perifused in the apsence of Ca2+, either in PRL-treated or control islets. 5. Total insulin content was higher in PRL-treated than in contraI islets. 6. Finally, glucose induced higher increase in insulin secretion in PRL-treated islets than in contraI islets. The results indicate that in neonatal rat islets, the cronic treatment wi th PRL increased the insulin content of islets and significantly changed the ability of glucose in reducing the K+ efflux and to increasing the insulin secretion. However, PRL treatment did not influence the effect of glucose on Ca2+ fluxes / Mestrado / Fisiologia e Biofisica / Mestre em Ciências Biológicas

Several studies have demonstrated through the activation of its central nervous system (CNS) receptor, that insulin has a key role in important functions related to neuronal plasticity, thus modulat ing the cascade activat ion of intracellular signaling. In addit ion, research f rom our laboratory demonstrates that insulin regulates lipid signal transduction pathways in the SNC, which are altered in the process of normal aging. The purpose of the present research is to study a lipid signaling pathway associated to the CNS insulin signaling transduct ion mechanism and its role in normal aging. Particular emphasis is put on the action of insulin as activator of the diacylglycerol kinase (DAGK), a key enzyme in the regulation of two important lipid messengers, namely phosphat idic acid (PA) and diacylglycerol (DAG), both of which are essential molecules in the regulation of cellular responses. The f irst stage of this research focused on the character izat ion of DAGK activity in cerebral cortex synaptosomes of adult rats in order to evaluate its activity in endogenous and exogenous DAGs by means of the use of detergents such as the carrier of lipid substrate DAG. The kinetic parameters of DAGK activity f rom endogenous DAG and exogenous DAG with dif ferent acyl composition were also studied. We analyzed dipalmitoylglycerol (DPG), 1-stearoyl, 2-arachidonoylglycerol (SAG) and dioleoylglycerol (DOG) as exogenous lipid substrates. Results show that the enzymatic activity preferentially uses DAG containing arachydonic acid in position 2 of the chain of glycerol (SAG) as substrate, thus indicating the presence of épsilon type of DAGK (DAGKe) in CC synaptosomes, which is the only type with substrate preferences. The analysis of DAGK act ivat ion by insulin revealed that hormonal action stimulates DAGK act ivity by means of two mechanisms: 1) by increasing the levels of DAG in the plasmatic membrane f rom the stimulus of PI-PLC and PC-PLD/PAP2 pathways, thus producing an increase of DAGK action; and 2) by stimulat ing DAGK act ivity in a direct and independent form of DAG generation in the membrane. It was also found that the stimulus that exerts insulin independently of DAG generation is associated to an epsilon DAGK act ivity which is possibly regulated by a decrease in phosphoinosit ide levels and which could be associated to polyphosphoinositides resynthesis. In CC synaptosomal membranes of senile animals, an increase in DAG content was observed without a signif icant modif ication in acyl composition. This can be correlated with the simultaneous f inding of a decreased DAGK activity in endogenous DAGs. Whereas the use of saturated exogenous DAG (DPG) showed no modif icat ions by aging, an important decrease in DAGK ability to transform SAG into PA was observed. A similar result was observed in synaptosomes f rom hippocampus. It was also observed that insulin act ing in CC synapt ic terminals exerted a minor st imulatory ef fect with respect to adult animals in DPG transformation, whereas it showed the same ef fectiveness to increase SAG transformation. Interestingly, insulin strongly st imulated DAGK activity in SAG in hippocampus synaptosomes of senile rats with respect to adults. As to the recovery of a PA with the potential ability to be phosphoinositide precursor, our f indings suggest that this hormonal action is a compensatory mechanism in the regulation of the synthesis of these phospholipids. This partly explains the hormone role as neuroprotector agent.